專利名稱：1,3,4-噁二唑衍生物及其制法與在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及1，3，4_噁二唑衍生物及其制備方法與作為抗腫瘤藥物的用途。
背景技術：
。癌癥是嚴重威脅人類健康的重大疾病之一，其治療和預防引起廣泛重視。目前的 治療方法有手術切除、放射治療、化學藥物治療等，但仍主要以化學藥物治療為主。目前治 療癌癥的化學藥物有多類化合物，如氮芥類、嘧啶類、鉬類、嚇啉類等，但大多數(shù)藥物由于毒 性大、不良反應多、生物利用度低而使其應用受到了限制。因此，尋找高效、低毒的抗癌藥物 已成為當前藥物化學領域重點研究課題之一。1，3，4_噁二唑雜環(huán)化合物具有抗炎、抗菌、抗驚厥、抗腫瘤等生物活性。據(jù)文獻報 道，在具有雜環(huán)化合物的分子中引入硫原子供電原子可以顯著增加受體與配體形成復合物 的親和力，有利于提高生物活性。噁二唑硫醇環(huán)外有-SH，它可以作為活潑的親核試劑和 各種親電試劑發(fā)生反應生成硫醚，硫醚可進一步轉化為非常有用的另一種噁二唑硫酮衍生 物，由于其硫酮結構的存在，3-位活潑的NH還可以和醛、仲胺或伯胺的鹽酸鹽縮合，生成更 具廣譜生物活性的雜環(huán)Marmich堿。因此，含各種取代基的噁二唑硫醚的合成，迄今仍方興 未艾。咪唑環(huán)是結構中含有2個氮原子的五元芳氮雜環(huán)，易產(chǎn)生多種非共價鍵相互作 用，如氫鍵、與金屬離子配位和n-n相互作用等。以這種特殊結構的咪唑環(huán)構筑的咪唑類 衍生物具有較大的發(fā)展?jié)摿?。咪唑環(huán)廣泛地出現(xiàn)在不同類型的藥物中，顯示出不同的藥理 活性，尤其作為抗癌藥物在放射增敏劑、法尼基轉移酶抑制劑、細胞色素P450抑制劑、血管 生成抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、周期素依賴型蛋白激酶抑制劑及耐藥逆轉劑等方面的研 究日益活躍且發(fā)展迅速。本發(fā)明將1，3，4-噁二唑分子中引入2-甲基-5-硝基咪唑環(huán)，制備的1，3，4_噁二 唑衍生物，對人肝癌細胞0fep-G2)生長有明顯的抑制作用，因此1，3，4-噁二唑衍生物作為 很有潛力的抗癌藥物的前景十分值得關注。隨著對1，3，4_噁二唑類藥物研究的不斷深入， 在對其抗腫瘤作用機制不斷了解的基礎上進行有效的結構改造與修飾和分子設計，將會有 越來越多的高效、低毒的1，3，4_噁二唑類抗癌藥物用于臨床，造福人類。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一類1，3，4_噁二唑衍生物以及它們的制備方法與用途。本發(fā)明的技術方案如下一類1，3，4-噁二唑衍生物，其特征是它有如下通式
3 式中R為 一種制備上述的1，3，4_噁二唑衍生物的方法，其特征是它由下列步驟組成步驟1.將按通法制備的2mmol 2_巰基_5_取代-1，3，4_噁二唑，適量無水乙醇， 加入到IOOml圓底燒瓶中，加熱攪拌溶解；步驟2.在步驟1得到的溶液中，先加入稍過量的NaOEt，然后加入2mmol溴代甲硝 唑，加熱回流8-36h，用薄層色譜(TLC)跟蹤反應；步驟3.冷卻至室溫，減壓蒸除溶劑，用CH2Cl2溶解，水洗，飽和食鹽水洗；步驟4.有機相用無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除CH2Cl2，得粗產(chǎn)物；步驟5.將步驟4得到的粗產(chǎn)物用無水乙醇重結晶得到本發(fā)明的1，3，4_噁二唑衍 生物。本發(fā)明的1，3，4-噁二唑衍生物對人肝癌細胞0fep_G2)生長有明顯的抑制作用， 因此本發(fā)明的1，3，4-噁二唑衍生物可以應用于制備抗肝癌藥物。
具體實施例方式通過以下實施例進一步詳細說明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不受這些實施例的任 何限制。實施例一 2-苯基-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫基]_1，3，4_噁 二唑(化合物1)的制備
先將苯甲酸在濃硫酸催化作用下進行酯化反應，得到苯甲酸乙酯。得到的芳香酸 酯溶于適量無水乙醇，加入稍過量的85%的水合胼，攪拌下回流8-12h。減壓蒸除溶劑，然 后加水，待固體析出后，過濾并用水洗，乙醇重結晶，得到取代的酰胼。將0.02mol酰胼， 0. 02mol KOH溶于適量95%乙醇后，再慢慢滴加稍過量的CS2攪拌回流至無H2S氣體產(chǎn)生為 止，反應終止后蒸除多余乙醇，倒入冷水中，用稀鹽酸調(diào)pH值至5-6，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾， 水洗，晾干，用50%乙醇重結晶得到2-巰基-5-取代-1，3，4-噁二唑(本實施例得到2-巰 基-5-苯基-1，3，4-噁二唑)。將2mmol 2-巰基-5-取代-1，3，4-噁二唑溶于適量無水 乙醇中，加入稍過量的NaOEt，然后加入2mmol溴代甲硝唑，加熱回流8_36h，TLC跟蹤反應。 冷卻至室溫，減壓蒸除溶劑，用CH2Cl2溶解，先用水洗滌，然后用飽和食鹽水洗。有機相用 無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除CH2Cl2，無水乙醇重結晶得目標化合物。淺棕色粉末，產(chǎn)率 60. 9%, m. p. 119-120°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 66 (t，J = 6·9Ηζ，2Η)， 4. 83 (t，J = 6. 9Hz,2H)，7. 49-7. 59 (m, 3H)，7. 99-8. 03 (m, 3H) · MS (ESI) :332· 4 (C14H14N5O3S, [M+H] +) · Anal. Calcd fOrC14H13N5O3S :C，50. 75 ；H, 3. 95 ；N, 21. 14 % ；Found :C，50. 63 ；H, 3. 96 ；N,21. 17% .實施例二 2-(2-甲基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物2)的制備 制備方法同實施例一。以鄰甲基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色粉末， 產(chǎn)率65. 6%，m. ρ· 84-85"C51H NMR(500MHz, CDCl3) δ :2· 63 (s，3Η)，2· 73 (s，3Η)，3· 69 (t，J =
6.8Ηζ,2Η)，4· 87 (t，J = 6· 8Ηζ,2Η)，7. 34-7. 39 (m, 2Η)，7· 46 (t，J = 7· 5Hz, 1Η)，7· 91 (d，J =
7.5Hz, 1Η), 8. 01 (s, 1Η). MS (ESI) 346. 4 (C15H16N5O3S, [Μ+Η]+) · Anal. Calcd for C15H15N5O3S C, 52. 16 ；Η，4· 38 ；N, 20. 28% ；Found :C，52. 24 ；Η，4· 35 ；N, 20. 31% ·實施例三2-(4-甲基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物3)的制備 制備方法同實施例一。以對甲基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淺黃色晶體， 產(chǎn)率 61. l%,m. p. 182-183°C ；1H NMR(300MHz，CDCl3) δ :2· 44(s，3Η)，2· 60 (s，3Η)，3· 65 (t， J = 7. 0Hz，2H)，4· 83 (t, J = 7. 0Hz，2H)，7· 32 (d, J = 8. 0Hz，2H)，7· 90 (d, J = 8. 3Hz，2H)， 7. 98 (s，1H). MS(ESI) 346. 4 (C15H16N5O3S, [M+H]+) · Anal. Calcd for C15H15N5O3S :C，52. 16 ；H, 4. 38 ；N，20. 28% ；Found :C，52. 20 ；H，4. 34 ；N，20. 22% ·實施例四2-(2-甲氧基苯基)-5-[2-(2-甲基_5_硝基-IH-咪唑基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物4)的制備 制備方法同實施例一。以鄰甲氧基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。棕色晶 體，產(chǎn)率 57. 0 %, m. p. 155-156 "C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 60(s，3H)，3· 64(t, J = 7. 1Ηζ，2Η)，3· 98(s，3H)，4· 84 (t, J = 7. 1Ηζ，2Η)，7· 08 (t, J = 7. 4Hz，2H)，7· 52 (dt, J1 = 7. 9Hz, J2 = 1. 6Hz, 1H) ,7. 88 (dd, J1 = 8. OHz，J2 = 1. 6Hz, 1H), 7. 97 (s, 1H). MS (ESI) 362. 4 (C15H16N5O4S, [M+H]+). Anal. Calcd for C15H15N5O4S :C，49. 85 ；H, 4. 18 ；N, 19. 38 % ； Found :C,49. 76 ；H, 4. 17 ；N, 19. 43% ·實施例五2-(4-甲氧基苯基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基-1,3,4-噁二唑(化合物5)的制備 制備方法同實施例一。以對甲氧基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。棕色晶體， 產(chǎn)率 59.2%，m. p. 171-172°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 64 (t，J = 7. OHz, 2H)，3· 89(s，3H)，4· 82(t，J = 7. ΟΗζ，2Η)，7. 00-7. 02 (d，J = 9. 0Hz，2H)，7. 93-7. 98 (m， 3H).MS (ESI) :362. 4 (C15H16N5O4S, [M+H]+). Anal. Calcdfor C15H15N5O4S :C，49. 85 ；H, 4. 18 ；N, 19. 38% ；Found :C，49. 83 ；H, 4. 13 ；N, 19. 42% ·實施例六2-(2-乙氧基苯基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物6)的制備
6
制備方法同實施例一。以鄰乙氧基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。黃褐色 粉末，產(chǎn)率 66. 2 %, m. p. 100-101 "C ；1H NMR(500MHz, CDCl3) δ :1· 50 (t, J = 7. 0Hz，3H)， 2. 61(s,3H),3. 67 (t, J = 7. 0Hz,2H) ,4. 22 (q, J = 7. 0Hz,2H) ,4. 86 (t, J = 7. 0Hz,2H), 7. 06-7. 10(m，2H)，7. 52 (t, J = 7. 5Hz, 1H)，7. 91 (d, J = 8. OHz, 1H) ,8. 00 (s, lH).MS(ESI) 376. 4 (C16H18N5O4S, [M+H]+) · Anal. Calcd for C16H17N5O4S :C,51. 19 ；H, 4. 56 ；N, 18. 66 % ； Found :C,51. 10 ；H, 4. 53 ；N, 18. 69% ·實施例七2-(4-乙氧基苯基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物7)的制備 制備方法同實施例一。以對乙氧基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色 晶體，產(chǎn)率 67. 2 %, m. p. 151-152 °C ；1H NMR(500MHz, CDCl3) δ :1· 48 (t, J = 7. 0Hz，3H)， 2. 63(s，3H)，3· 66 (t, J = 7. 0Hz，2H)，4· 14 (q, J = 7. 0Hz，2H)，4· 85 (t, J = 7. 0Hz，2H)， 7. 02 (d, J = 9. 0Hz，2H)，7· 95 (d, J = 8. 5Hz，2H)，8· 01 (s, lH).MS(ESI) 376. 4 (C16H18N5O4S, [M+H]+)· Anal. Calcd for C16H17N5O4S :C, 51. 19 ；H, 4. 56 ；N, 18. 66 % ；Found :C,51. 26 ；H, 4. 51 ；N, 18. 71% .實施例八2-(2-氨基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物8)的制備 制備方法同實施例一。以2-氨基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。墨綠色晶體， 產(chǎn)率 72. 9%, m. p. 127-128°C ；1H NMR(500MHz, CDCl3) δ :2· 62(s，3H)，3· 68 (t, J = 7. OHz,2H) ,4. 85 (t, J = 7. OHz, 2H), 5. 85 (brs, 2H), 6. 78-6. 84 (m, 2H), 7. 31 (t, J = 7. 8Ηζ，1Η)， 7. 71 (d，J = 8. 0Hz, 1H), 8. Ol (s, 1H). MS (ESI) 347. 4 (C14H15N6O3S, [M+H]+) · Anal. Calcd for C14H14N6O3S :C,48. 55 ；H, 4. 07 ；N, 24. 26% ；Found :C，48. 60 ；H, 4. 01 ；N, 24. 25% ·實施例九2-(4-氨基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物9)的制備 制備方法同實施例一。以4-氨基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。亮黃色 晶體，產(chǎn)率 66.7%，m. p. 212-213 °C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 59 (s，3Η)，3· 62 (t，J =
7.0Ηζ，2Η)，4· 06(brs,2H),4. 81(t, J = 7. 0Ηζ，2Η)，6· 73 (d, J = 8. 6Ηζ，2Η)，7· 79 (d, J =
8.4Hz, 2Η), 7. 97 (s, 1Η). MS (ESI) 347. 4 (C14H15N6O3S, [Μ+Η]+) · Anal. Calcd for C14H14N6O3S C, 48. 55 ；Η，4· 07 ；N, 24. 26% ；Found :C，48. 61 ；Η，4· 02 ；N, 24. 29% ·實施例十2-(2-氯苯基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫基]_1， 3，4-噁二唑(化合物10)的制備 制備方法同實施例一。以2_氯苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。紅棕色粉末， 產(chǎn)率 56. 1%, m. p. 107-108°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 67 (t，J = 7. OHz, 2H) ,4. 84 (t, J = 7. 0Hz，2H)，7. 40-7. 45 (m, 1H)，7. 46-7. 52 (m, 1H)，7. 56-7. 58 (m, 1H)， 7. 93-7. 96 (m，1H)，7. 98 (s，1H). MS(ESI) 366. 8 (C14H13ClN5O3S, [M+H]+)· Anal. Calcd for C14H12ClN5O3S :C，45. 97 ；H，3. 31 ；N, 19. 15% ；Found :C，45. 88 ；H，3. 32 ；N, 19. 19% .實施例i^一 2-(4_氯苯基)-5-[2-(2_甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物11)的制備 制備方法同實施例一。以4-氯苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色粉 末，產(chǎn)率 62. 1 %, m. p. 205-207 "C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 66 (t，J =7. 1Hz, 2H) ,4. 83 (t, J = 7. 1Hz，2H)，7. 51 (d，J = 6. 9Hz，2H)，7. 94-7. 98 (m，3H) · MS (ESI) 366. 8 (C14H13ClN5O3S, [M+H]+) · Anal. Calcd for C14H12ClN5O3S :C，45. 97 ；H, 3. 31 ；N, 19. 15% ； Found :C，46. 02 ；H，3. 28 ；N, 19. 11% ·實施例十二 2-(2-羥基苯基)-5-[2-(2_甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物12)的制備 制備方法同實施例一。以水楊酸代替苯甲酸，得目標化合物。淺棕色晶體，產(chǎn) 率 62. 9 %，m. ρ· 159-160 "C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 60(s，3H)，3· 69 (t, J = 6. 9Hz, 2H)，4· 82 (t, J = 6. 9Hz，2H)，7· 02 (t, J = 7. 9Hz, 1H)，7· 14 (d, J = 7. 9Hz, 1Η)，7· 46 (t, J =7. 9Hz, 1Η) ,7. 70 (dd, J1 = 7. 8Hz, J2 = 1· 7Hz，1Η)，7· 98 (s，1Η)，9· 74 (s，1Η) · MS (ESI) 348. 4 (C14H14N5O4S, [Μ+Η]+). Anal. Calcd for C14H13N5O4S :C, 48. 41 ；H, 3. 77 ；N, 20. 16 % ； Found :C，48. 32 ；H，3. 75 ；N，20. 12% ·實施例十三2_ (4-異丙基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙 硫基]-1，3，4-噁二唑(化合物13)的制備 制備方法同實施例一。以4-異丙基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色 晶體，產(chǎn)率 67.8%，m. p. 130-131 °C ；1H NMR(500MHz, CDCl3) δ 1. 31 (d, J = 7·0Ηζ，6Η)， 2. 62(s，3H)，2. 99-3. 02 (m, 1Η)，3. 67 (t, J = 6. 8Ηζ，2Η)，4. 85 (t, J = 6. 8Ηζ，2Η)，7. 39 (d, J = 8. OHz, 2Η), 7. 94-7. 96 (m, 2Η), 8. 00 (s, 1Η). MS (ESI) 374. 4 (C17H20N5O3S, [Μ+Η]+) · Anal. Calcd for C17H19N5O3S :C，54. 68 ；H, 5. 13 ；N, 18. 75% ；Found :C，54. 70 ；H, 5. 12 ；N, 18. 78% ·實施例十四2_ (4-叔丁基苯基)-5-[2-(2-甲基_5_硝基-IH-咪唑基)乙 硫基]-1，3，4-噁二唑(化合物14)的制備 制備方法同實施例一。以4-叔丁基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色晶體，產(chǎn)率 58.7%, m. ρ· 167-168 0C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :1· 36(s，9H)，2· 60(s，3H)， 3. 65 (t, J = 7. 1Ηζ，2Η)，4· 83 (t, J = 7. 1Ηζ，2Η)，7· 53 (d, J = 8. 4Hz，2H)，7· 92-7. 98 (m, 3H) · MS (ESI) 388. 5 (C18H22N5O3S, [M+H] +) · Anal. Calcd fOrC18H21N5O3S :C，55. 80 ；H, 5. 46 ；N, 18. 08% ；Found :C，55. 71 ；H, 5. 48 ；N, 18. 11% · 實施例十五2-(4-二甲氨基苯基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙 硫基]-1，3，4-噁二唑(化合物15)的制備 制備方法同實施例一。以4-二甲胺基苯甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。亮黃色 晶體，產(chǎn)率 53. 36%，m. p. 184-185°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 60 (s，3Η)，3· 06 (s，6Η)， 3. 62 (t, J = 6. 9Ηζ，2Η)，4· 82 (t, J = 6. 9Ηζ，2Η)，6· 73 (d, J = 8. 6Ηζ，2Η)，7· 84 (d, J = 8. 8Hz, 2Η), 7. 98 (s, 1Η). MS (ESI) 375. 4 (C16H19N6O3S, [Μ+Η]+) · Anal. Calcd for C16H18N6O3S: C, 51. 33 ；Η，4· 85 ；N, 22. 45% ；Found :C，51. 25 ；Η，4· 86 ；N, 22. 41% ·實施例十六2-(3-吡啶基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物16)的制備 制備方法同實施例一。以煙酸代替苯甲酸，得目標化合物。紅棕色晶體，產(chǎn)率 57. 1%, m. p. 156-158°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 68 (t，J = 7·0Ηζ，2Η)， 4. 84 (t，J = 7. 0Hz，2H)，7· 46-7. 50 (m, 1H)，7· 98 (s，1Η)，8· 28-8. 32 (m, 1Η)，8· 81 (s, 1Η)， 9. 25(s,lH).MS (ESI) 333. 3 (C13H13N6O3S, [M+H]+) · Anal. Calcdfor C13H12N6O3S :C,46. 98 ；H, 3. 64 ；N, 25. 29% ；Found :C，46. 92 ；H, 3. 60 ；N, 25. 32% ·實施例十七2-(4-吡啶基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物17)的制備 制備方法同實施例一。以異煙酸代替苯甲酸，得目標化合物。淡黃色晶體，產(chǎn)率 56. 9%, m. p. 172-173°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 61 (s，3Η)，3· 70 (t，J = 7·0Ηζ，2Η)， 4. 83 (t，J = 7. 0Hz，2H)，7. 86-7. 88 (d, J = 5. 7Hz,2H)，7. 98 (s, 1H)，8. 84 (s, 2H) · MS (ESI) 333. 3 (C13H13N6O3S, [M+H]+). Anal. Calcd for C13H12N6O3S :C, 46. 98 ；H, 3. 64 ；N, 25. 29 % ； Found :C，47. 01 ；H，3. 62 ；N，25. 27% ·實施例十八2-(2-呋喃基)-5-[2_(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物18)的制備 制備方法同實施例一。以呋喃-2-甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。棕色晶體， 產(chǎn)率 68.7%，m. p. 119-120°C ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ :2· 59 (s，3Η)，3· 65 (t，J = 7. OHz, 2H)，4. 82 (t，J = 7. 0Hz，2H)，6. 60-6. 62 (m, 1H)，7. 16 (d, J = 3. 5Hz, 1H)，7. 65-7. 66 (m, 1H)， 7. 98 (s，1H). MS(ESI) 322. 3 (C12H12N5O4S, [M+H]+) · Anal. Calcd for C12H11N5O4S :C，44. 86 ；H, 3. 45 ；N,21. 80% ；Found :C，44. 79 ；Η，3· 45 ；N,21. 77% ·實施例十九2-(2-噻吩基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫 基]-1，3，4-噁二唑(化合物19)的制備 制備方法同實施例一。以噻吩-2-甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。棕色晶體，產(chǎn) 率 63. 4%,m. ρ· 123-124°0；^ NMR(300MHz,CDCl3) δ :2· 60(s，3H)，3· 64(t, J = 7. 1Ηζ，2Η)， 4. 81 (t, J = 7. 1Hz，2H)，7. 17-7. 20 (m, 1H)，7. 57-7. 59 (m, 1H)，7. 72-7. 74 (m, 1H)，7. 98 (s, 1H). MS (ESI) 338. 4 (C12H12N5O3S2, [M+H]+) · Anal. Calcd for C12H11N5O3S2 :C，42. 72 ；H, 3. 29 ； N, 20. 76% ；Found :C，42. 75 ；Η，3· 30 ；N, 20. 80% ·實施例二十2-(1-萘基)-5-[2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-1-基)乙硫基]_1， 3,4-噁二唑(化合物20)的制備 制備方法同實施例一。以1-萘甲酸代替苯甲酸，得目標化合物。棕色晶體，產(chǎn) 率 72. 9 %，m. ρ· 155-157 "C ；1H NMR(500MHz, CDCl3) δ :2· 67(s，3H)，3· 74(t, J = 7. 3Hz, 2H),4. 91 (t, J = 7. 0Hz，2H)，7. 60-7. 66(m，2H)，7. 72-7. 75(m，1H)，7. 98(d，J = 8. 5Hz, 1H)，8. 02 (s，1H)，8. 08 (d, J = 8. OHz, 1H)，8. 17 (d, J = 8. OHz, 1H)，9. 20 (d, J = 8. 5Hz, lH).MS(ESI) :382. 4 (C18H16N5O3S, [M+H]+). Anal. Calcd fOrC18H15N5O3S :C，56. 68 ；H, 3. 96 ；N, 18. 36% ；Found :C，56. 71 ；H, 3. 98 ；N, 18. 39% · 實施例二i^一 1，3，4-噁二唑衍生物體外抗人肝癌細胞0fep_G2)活性研究采用MTT [3-(4，5)-雙甲基-2-噻唑-(2，5)-苯基溴化四氮唑藍]法來測定1，3， 4-噁二唑衍生物對人肝癌細胞0fep-G2)的抑制率，計算IC5tl值(μΜ)。1.培養(yǎng)液等的配制RPMI 1640培養(yǎng)基一袋加水一升，補加2克碳酸氫鈉，10萬單位青霉素和IOOmg鏈 霉素，調(diào)節(jié)PH值至7. 4，用0. 22 μ m除菌濾膜過濾除菌。90mL培養(yǎng)基加滅活新生牛血清IOmL 即為完全培養(yǎng)液。胰蛋白酶用D-hanks緩沖液配成0. 25%溶液，過濾除菌后4°C保存?zhèn)溆谩?.藥液配制準確稱取被測樣品1. Omg,加到滅菌的1. 5mL離心管中，加入DMSO ImL,配成Img/ mL原液，-40°c冷凍保存。臨用前融化后用適量D-hanks稀釋成相應濃度應用。3.細胞培養(yǎng)及傳代細胞均貼壁培養(yǎng)于含IOmL完全培養(yǎng)液細胞培養(yǎng)瓶中，于37°C、5% C02、飽和濕度 下培養(yǎng)。細胞長滿瓶底后用滅菌D-hanks液洗兩次，加0. 25%胰蛋白酶消化細胞2min，倒 掉胰蛋白酶，待輕搖細胞能完全脫落后，加完全培養(yǎng)液30ml后，用移液管吹散細胞，分裝于 3個新的細胞培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。4.抗增殖活性測試取剛剛長成完整單層的細胞一瓶，胰蛋白酶消化后收集細胞，用移液管吹打均勻， 取兩滴細胞懸液臺盼藍(Trypan Blue)染色，于顯微鏡下計數(shù)活細胞數(shù)目(死細胞數(shù)目不 得超過5 % )，用完全培養(yǎng)液調(diào)整細胞數(shù)目至1 X IO5個細胞/mL。于96孔細胞培養(yǎng)板中每 孔加入100 μ L細胞懸液，將培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h，取出培養(yǎng)板后于每孔中加含 不同濃度梯度的被測樣品的溶液，每個濃度設3個平行孔，另設3孔細胞不加被測藥作正常 對照孔。加完藥后培養(yǎng)板于微孔板振蕩器上振蕩混勻，置于CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48h。取 出培養(yǎng)板，每孔加入25 μ L 4mg/mL的MTT液，振蕩混勻，繼續(xù)培養(yǎng)6h。加入每孔100 μ L SDS 裂解液(90mL三蒸水+IOg SDS+5mL異丙醇+2mL濃鹽酸)后培養(yǎng)12h。于酶標儀測定各孔 光吸收(0D值)，測定波長570nm，參考波長630nm。根據(jù)各孔OD值計算藥物對細胞增殖的
N
N
O2N,
N
S
/O
%y/
/yi
12抑制率抑制率的計算細胞生長的抑制率按照下列公式計算抑制率=[1-(測試樣品OD值-空白OD值)/(陰性對照OD值-空白OD值)]X 100半數(shù)抑制濃度(IC5tl)定義為當50%的腫瘤細胞存活時的藥物濃度。根據(jù)測定的 光密度(0D值)，制作細胞生長抑制率的標準曲線，在標準曲線上求得其對應的藥物濃度。測得的IC5tl見表1所示表1本發(fā)明所列1，3，4_噁二唑衍生物的對人肝癌細胞0fep_G2)的抑制IC5tl值 (μΜ) 5-Fua)，5-Fluorouracil，陽性對照。
權利要求
一類1，3，4 噁二唑衍生物，其特征是它有如下通式式中R為FSA00000210238700011.tif,FSA00000210238700012.tif
2. 一種制備權利要求1所述的1，3，4_噁二唑衍生物的方法，其特征是它由下列步驟組成 步驟1.將按通法制備的2mmol 2-巰基-5-取代-1，3，4-噁二唑，無水乙醇，加入到 IOOml圓底燒瓶中，加熱攪拌溶解；步驟2.在步驟1得到的溶液中，先加入過量的NaOEt，然后加入2mmol溴代甲硝唑，加 熱回流8-36h ；步驟3.冷卻至室溫，減壓蒸除溶劑，用CH2Cl2溶解，水洗，飽和食鹽水洗； 步驟4.有機相用無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除CH2Cl2,得粗產(chǎn)物； 步驟5.將步驟4得到的粗產(chǎn)物用無水乙醇重結晶得到1，3，4_噁二唑衍生物。
3.權利要求1所述的1，3，4_噁二唑衍生物在制備抗肝癌藥物中的應用。
全文摘要
一類1，3，4-噁二唑衍生物，它有如下通式式中R為本發(fā)明的1，3，4-噁二唑衍生物對人肝癌細胞(Hep-G2)生長有明顯的抑制作用，因此本發(fā)明的1，3，4-噁二唑衍生物可以在制備抗癌藥物中應用。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號C07D413/14GK101914094SQ20101024048
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月29日 優(yōu)先權日2010年7月29日
發(fā)明者劉凱, 朱海亮, 焦慶才, 董凱, 鄭慶忠 申請人:南京大學