專利名稱：一種規(guī)?；苽涓呒兌鹊⑺剽c的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種從丹參中制備高純度丹參素鈉的工藝方法，制備的丹參素鈉可達到醫(yī)用標準。
背景技術：
丹參取自唇形科植物Mlvia miltiorrhiza Bunge的根及根莖，具有祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心滋補之功效。丹參藥理作用包括減輕心肌腦缺血，減低再灌注損傷，抑制血小板凝聚，防止血栓形成，抑制膠原纖維產(chǎn)生和促進纖維蛋白降解，清除自由基等，主要用于治療心腦血管疾病如冠心病、高血壓、腦卒中、動脈粥樣硬化等疾病，還用于治療肝纖維化、 消化性潰瘍、白內障、癌癥、記憶缺失、愛滋病等，參考文獻如下1, Liu TG, Zhang TM, Wang BE, et al. Protective Action of Seven Natural Phenolic Compounds Against Peroxidative Damage to Biomembranes. Biochemical Pharmacology, 1992 ；43 :147 152.2、Dong CN,Wang Y,Zhu YZ. Asymmetric synthesis and biological evaluation of Danshensu derivatives as anti-myocardial ischemia drug candidates. Bioorganic&Medicinal Chemistry. 2009 ；17 :3499-3507.3、Han JY,Horie Y,Fan JY,et al. Potential of 3,4-dihydroxy-phenyl lactic acid for ameliorating ischemia-reperfusion-induced microvascular disturbance in rat mesentery. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2009 ；296 :36-44.4、Cao YG, Chai JG, Chen YC, et al. Beneficial effects of danshensu, an active component of Salvia miltiorrhiza. on homocysteine metabolism via the trans-sulphuration pathway in rats. British Journal of Pharmacology 2009 ； 157 482-490.丹參主要成分包括脂溶性成分和水溶性成分，其中脂溶性成分具有抗脂質過氧化、抗腫瘤、抗菌等活性，主要為二萜酮類；水溶性成分具有強烈的心腦血管活性，此類成分主要是指酚酸類成分，如丹酚酸(salvianolic acid)A、B、C、D、Ε、F、G、H、I、J、丹參素、迷迭香酸、紫草酸、咖啡酸、四甲基丹酚酸F、異丹酚酸C等。丹參水溶性成分以丹酚酸B含量最高，中國藥典也以此作為丹參藥材的指標性定量成分，規(guī)定藥材中含量不得低于3%，其它酚酸類成分的含量均不到丹酚酸B含量的5%。 丹酚酸B的穩(wěn)定性較差，加熱后迅速分解成丹參素和咖啡酸。丹參素也屬于酚酸類成分，藥材中含量約2%。研究提示丹參素是丹參心腦血管活性的主要成分。近年來，大量的實驗研究證明，丹參素為丹參中主要的心腦血管活性物質。丹參素容易氧化，形成鈉鹽后，穩(wěn)定性高。丹參其他酚酸類可轉化后成丹參素，提高了從丹參中提取丹參素的得率，這樣可降低制備丹參素成本，符合工業(yè)化制備原料藥的要求。丹酚酸A是1分子丹參素與2分子咖啡酸縮合而成，丹酚酸B是3分子丹參素與1分子咖啡酸縮合而成，丹酚酸C是2分子丹參素縮合而成。丹酚酸A、B、C均能轉化成丹參素。目前國內許多單位開展了從丹參中提取丹參素及其鹽的研究，如1、公開號CN101647858A中采用水提醇沉，弱堿溶液熱處理，提取丹酚酸B，再轉化成丹參素，用大孔樹脂分離。2、公開號CN101445451中采用乙酸乙酯提取，水提，用AB-8樹脂分離，甲醇結晶。3、公開號CN101434534中采用水提醇沉，大孔樹脂分離，硅膠柱精制，有機溶劑析
曰
曰曰ο4、公幵號CN101289386中釆用鹽酸提取，多次逆流萃取，堿性陰離子交換樹脂分
1 ο5、公開號CN1868994中采用多次弱極性樹脂分離。6、公開號CN101012163中采用酸提醇沉，加熱回流提取，大孔樹脂分離，硅膠柱制備。7、公開號CN101289385中采用熱水提取，大孔樹脂分離。8、公開號CN101633616中采用不同孔徑無機陶瓷膜過濾分離。9、公開號CN101342236中采用水提醇沉，2次樹脂分離。10、公開號CN101759555A中采用新鮮丹參壓榨，樹脂分離，膜分離。11、公開號CN1342638中采用水提，樹脂分離，再萃取。12、還有許多學術報道的實驗室提取少量丹參素及其鹽的方法。這幾項提取丹參素及其鹽的工藝方法，缺點在于1、沒有去除丹參脂溶性成分，其純度達不到98%。2、制備過程，沒有考慮丹參素的氧化問題。3、提取過程采用有毒試劑，制備的丹參素及其鹽，難以成為醫(yī)用原料藥。4、精制沒在潔凈車間進行，沒有滅菌，難以達到醫(yī)用標準。5、有些方法，工藝復雜，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。6、學術報道的方法，只是小試工藝，不能規(guī)?；苽?。本發(fā)明提供的制備方法操作簡便，提取得率好，產(chǎn)品純度高，便于規(guī)模化生產(chǎn)，提取的丹參素鈉原料藥符合的醫(yī)用標準。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有工藝技術中的缺點，提供一種符合藥用原料藥生產(chǎn)標準，易于工業(yè)化生產(chǎn)的制備丹參素鈉的工藝方法。1、本發(fā)明的丹參素鈉的制備方法，工藝流程如下丹參切片一無水乙醇浸泡提取2 3小時一取藥渣超微粉碎一弱酸溶液(pH3 4)熱提(60 70°C ) 5 7小時一超聲波提取3 4小時一減壓濃縮一弱酸性AB型大孔樹脂吸附一弱堿性磷酸鹽緩沖液(PH8 9)洗脫一微波干燥一0. 活性碳乙醇溶解一濾膜過濾一4°C放置12小時析晶一乙醇再溶解一4°C放置12小時重析晶一微波干燥一高溫滅菌得高純度(> 98% )的丹參素鈉。2、提取符合藥用標準的丹參素鈉原料藥，具體步驟如下①去除丹參脂溶性成分丹參切片，片厚3 5mm ；無水乙醇浸泡提取2 3小時，
4過濾，取藥渣備用。②丹參素鈉粗提藥渣超微粉碎，過50 100目的篩子；用磷酸調節(jié)蒸餾水至 pH3 4，水溶液與藥渣比例為3 5 1，加熱至60 70°C，浸泡5 7小時；超聲波提取 3 4小時，濾膜過濾，取濾液；濾液減壓濃縮，得稠膏，稠膏比重為1. 15 1. 35。③丹參素鈉分離將稠膏上弱酸性AB型大孔樹脂吸附，采用0. OlM磷酸鹽緩沖液 (PH8 9)洗脫，收集3 4倍體積洗脫液；在氮氣環(huán)境中，洗脫液用微波干燥，得丹參素鈉粗制品。④丹參素鈉精制在潔凈車間(10萬級以下)氮氣環(huán)境環(huán)境中，丹參素鈉粗制品先用0. 05%活性碳無水乙醇溶解，濾膜過濾去除活性碳，4°C放置12小時析晶；無水乙醇再溶解，超濾膜再過濾，4°C放置12小時重析晶；微波干燥，分裝，高溫滅菌即得高純度丹參素鈉。⑤丹參素鈉分析丹參素鈉含量經(jīng)高效液相、液質聯(lián)用等方法標定，純度超過 98% ；外觀、殘留檢測、菌檢、熱源檢測等指標達到藥用標準。3、本發(fā)明與現(xiàn)有制備丹參素及其鹽的方法相比，其優(yōu)點如下①采用無水乙醇對丹參進行了前處理，去除了丹參脂溶性成分。②精制丹參素鈉運用了氮氣保護，防止了丹參素鈉的氧化。③制備丹參素鈉，全部采用無毒的溶劑和原料。④潔凈車間進行精制，最后滅菌，得到的丹參素鈉符合藥用標準。⑥采用了超聲波提取，提高了丹參素鈉的得率。⑦丹參素鈉經(jīng)多次析晶，產(chǎn)品純度超98%。⑧工藝相對簡單，不適合大規(guī)模制備，工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式丹參(原產(chǎn)地四川)20公斤，切片，加入無水乙醇50升，浸泡2. 5小時，過濾去除乙醇，取藥渣；將藥渣超微粉碎，過100目藥篩，加入0.01%磷酸緩沖液(pH3 4)80升，加熱浸泡6小時；超聲波再提取3. 5小時，過濾，取濾液；濾液減壓濃縮，得稠膏3升，稠膏比重為1. 25 ；準備弱酸性AB型大孔樹脂柱，柱體積30升，將稠膏柱，采用0. OlM磷酸鹽緩沖液(pH8 9)洗脫，收集94升洗脫液；在氮氣環(huán)境中，洗脫液用微波干燥，得丹參素鈉粗制品1. 13公斤；在潔凈車間(10萬級以下)氮氣環(huán)境環(huán)境中，丹參素鈉粗制品先用0. 05%活性碳無水乙醇溶解，濾膜過濾去除活性碳，4°C放置12小時析晶，得到丹參素鈉初次精制品 0. 83公斤；無水乙醇再溶解，超濾膜再過濾，4°C放置12小時重析晶得到丹參素鈉純品0. 78 公斤；微波干燥，分裝，高溫滅菌即得高純度丹參素鈉；制備的丹參素鈉經(jīng)高效液相、液質聯(lián)用等方法標定，純度為98. 87%，外觀、殘留檢測、菌檢、熱源檢測等指標達到藥用標準。
權利要求
1 一種大規(guī)模制備高純度丹參素鈉的工藝方法，其特征包括以下步驟(1)去除丹參脂溶性成分丹參切片，無水乙醇提取，取藥渣；(2)丹參素鈉粗提藥渣超微粉碎，熱弱酸溶液提取，超聲波再提取，過濾，減壓濃縮得稠膏；(3)丹參素鈉分離弱酸性AB型大孔樹脂吸附，弱堿性磷酸鹽緩沖液洗脫，微波干燥得粗制品；(4)丹參素鈉精制活性碳乙醇溶解，濾膜過濾，低溫放置析晶，乙醇再溶解，低溫放置重析晶，微波干燥，高溫滅菌即得。
2.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，丹參中脂溶性成分為丹參酮I、IIA和隱丹參酮， 去除這些脂溶性成分的乙醇濃度98%以上，浸泡時間為2 3小時，過濾后得藥渣。
3.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，用磷酸調節(jié)蒸餾水至PH3 4，水溶液與藥渣比例為3 5 1，加熱至60 70°C，浸泡5 7小時，再用超聲波提取3 4小時，濾膜過濾， 濾液減壓濃縮，得稠膏。
4.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，采用弱堿性AB型大孔樹脂，將所得稠膏上柱，用磷酸鹽緩沖液(pH8 9)洗脫，分離出丹參素鈉，經(jīng)微波干燥得丹參素鈉粗制品。
5.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，丹參素鈉粗制品先用0.05%活性碳無水乙醇溶解，濾膜過濾去除活性碳，4°C放置12小時析晶，無水乙醇再溶解，超濾膜再過濾，4°C放置 12小時重析晶，微波干燥，高溫滅菌即得高純度的丹參素鈉。
6.根據(jù)權利要求5所述的丹參素鈉精制過程，可在潔凈車間(10萬級以下)進行，保證丹參素鈉達到醫(yī)用標準。
7.根據(jù)權利要求5所述的丹參素鈉精制過程，需充氮氣，防止丹參素鈉的氧化。
8.根據(jù)權利要求5所述的工藝方法，所得的丹參素鈉經(jīng)含量測定，純度超過98%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從丹參中規(guī)?；苽涓呒兌鹊⑺剽c的工藝方法，其工藝流程包括丹參切片—無水乙醇浸泡提取2～3小時—取藥渣超微粉碎—弱酸溶液(pH3～4)熱提(60～70℃)5～7小時—超聲波提取3～4小時—減壓濃縮—弱酸性AB型大孔樹脂吸附—弱堿性磷酸鹽緩沖液(pH8～9)洗脫—微波干燥—0.05％活性炭無水乙醇溶解—濾膜過濾—4℃放置12小時析晶—無水乙醇再溶解—4℃放置12小時重析晶—微波干燥—高溫滅菌得高純度(＞98％)的丹參素鈉。本發(fā)明的優(yōu)點在于操作簡便，提取得率好，產(chǎn)品純度高，便于規(guī)?；a(chǎn)，提取的丹參素鈉原料藥符合醫(yī)用標準。
文檔編號C07C51/42GK102336652SQ20101022855
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月16日 優(yōu)先權日2010年7月16日
發(fā)明者盧光洲, 姜宇, 張靜, 楊俊 , 閆福林 申請人:湖南康普醫(yī)藥研究院