專利名稱：：噻二唑甲酰胺衍生物及其合成方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的技術(shù)方案涉及含1，2-二唑的雜環(huán)化合物，具體涉及含1,2,3-噻二唑衍生物。技術(shù)背景1，2，3-漆二唑類雜環(huán)化合物具有廣泛的生物活性(BakulevVA,DehaenW.TheChemistryof1，2，3-thiadiazole，2004，JohnWiley&Sons,Inc.),全世界商品化的農(nóng)藥產(chǎn)品中有3個化合物屬于這類結(jié)構(gòu)，BTH和噻酰菌胺(TDL)以及TDZ,BTH和TDL是典型的植物激活劑，植物激活劑可誘導(dǎo)植物的免疫系統(tǒng)而產(chǎn)生在物理、化學(xué)和生理生化防御機制上廣譜、持久和滯后的系統(tǒng)荻得抗病性，是真正意義上的"綠色農(nóng)藥"，是今后植物保護(hù)和農(nóng)藥學(xué)研究重要領(lǐng)域和方向。BTH是先正達(dá)公司的產(chǎn)品，是目前開發(fā)最成功，誘導(dǎo)活性最好的化合物，TDL即3'-氯-4，4'-二曱基-1,2，3-噻二唑-5-曱酰苯胺是日本農(nóng)藥抹式會社開發(fā)的新型稻田防治稻瘟病的殺菌劑(倪長春，抗性誘導(dǎo)型殺菌劑噻酰菌胺(tiadinil)的開發(fā)沿革.世界農(nóng)藥.2007,29(l):18-23)，2003年其7"4Y'7卜-粒劑(Tiadinil顆粒劑)、7y'7卜7°7只粒劑(Tiadinil.氟蟲腈顆粒劑)和7少'、？卜7卜'74Y-粒劑(Tiadinil'吡蟲啉顆粒劑)以及Vget-DynamanRyuzai(Tiadinil。塞酰菌胺60%+0101116^稗草胺11.6。/。+Indanofan節(jié)草酮4.6。/。+杜邦的千嘧磺隆2.5%)顆粒劑在日本已取得正式登記，誘導(dǎo)活性的研究證實該化合物能誘導(dǎo)煙草植林抗性基因的表達(dá)并產(chǎn)生對TMV抗性(YasudaM,NakashitaHandYoshidaS.Tiadinil,anovelclassofactivatorofsystemicacquiredresistance,inducesdefencegeneexpressionanddiseaseresistanceintobacco.J.Pestic.Sci.2004,29:46-49)。發(fā)明人從基礎(chǔ)研究出發(fā)，在國家自然科學(xué)基金(30270883和20672062)、"973，，計劃(2003CB114402)和天津市自然科學(xué)基金(07JCYBJC01200)以及天津市科技支撐計劃國際科技合作項目(07ZCGHHZ01400)的資助下，建立了系統(tǒng)完善的植物激活劑篩選體系，成功設(shè)計合成并發(fā)現(xiàn)N-(5-曱基-l，3-噻唑-2-基)-4-甲基-l,2，3-噻二唑-5-甲酰胺(以下簡稱甲噻酰胺)的生物活性(范志金等，新型[1,2，3]噻二唑衍生物及其合成方法和用途，中華人民共和國國家發(fā)明專利，受理日期2006年2月20日，申請?zhí)?00610013185.5);毒性試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該化合物屬低毒或微毒，目前正在進(jìn)行田間藥效驗證工作，為加快研究進(jìn)展，為新型綠色農(nóng)藥的創(chuàng)制提供更多的新化合物，本發(fā)明對擬合成甲漆酰胺的衍生物并進(jìn)行生物活性的篩選。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供新的N-(5-曱基-1,3-噻唑-2-基)-4-曱基-1，2,3-蓬二唑-5-甲酰胺(以下筒稱曱噻酰胺)的合成方法，提供這類化合物抑制病原真菌的活性和誘導(dǎo)抗病的活性及其測定方法。本發(fā)明解決該技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是具有殺菌活性和誘導(dǎo)活性的[1，2，3]-噻二唑衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下圖所示，部分具體的化學(xué)結(jié)構(gòu)式表示見表1:，3<v、o其中Rl為氫;R2為4-曱基吡啶-2-基、4-曱基-5-溴吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、3-氯-5-三氟曱基吡啶-2-基、2-氯-5-三氟曱基苯基、2-曱氧基苯基、3-氟-4-曱基苯基、環(huán)丁基、環(huán)丙基曱基等取代基；表1本發(fā)明合成的部分1，2，3-噢二唑衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征編號化學(xué)結(jié)構(gòu)編號化學(xué)結(jié)枸編號化學(xué)結(jié)構(gòu)wq-c-2wq-c-10h9CH3n、久凡丄、s^ywq-c-16，3Mhwq-c-5Clwq-c-ll《仏wq-c-17h八N、jk^Ns/"^owq-c隱9M〃\\h，30之丄^wq-c-12《3h!Lwq-c-13n:sVnyYoch3本發(fā)明的4-曱基-1，2，3--塞二唑衍生物的合成方法如下,CH3u,jCH3八、J1乂COCIR2具體分為以下步驟A.4-曱基-l，2，3-噻二唑-5-曱酰氯的制備將9.66克(0.067摩爾)合成的或購買的4-曱基-l,2,3-噻二唑-5-曱酸和29毫升二氯亞砜加入到100毫升三口圓底燒瓶中，80度下加熱回流6小時，減壓蒸除過量的二氯亞砜，減壓蒸餾得2000Pa，94-96克淡黃色餾分9.25克,收率85%，中間體4-曱基-l,2，3-噻二唑-5-曱酰氯密封保存在干燥器中備用,該化合物的用量可以按相應(yīng)比例擴大或縮小；B.4-曱基-l，2，3-嚷二唑衍生物(wq-c系列)的制備將4毫摩爾的胺類化合物R^R2NH加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氬呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，水浴下緩慢滴加入4毫摩爾的4-曱基-l,2，3-瘞二唑-5-甲酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有4兒層，無水硫酸鈉干燥，過濾，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60-90度的石油醚:乙酸乙酯)，根據(jù)產(chǎn)物的不同，體積比為2:18:1之間選擇一定的比例，根據(jù)所得純品計算收率，測定熔點、進(jìn)行元素分析或IR、MS、'HNMR及UV等理化數(shù)據(jù)的測定，合成化合物的用量可以按相應(yīng)比例擴大或縮??；C.4-甲基-1，2，3-鎵二唑衍生物對病原真菌生長活性影響的測定本發(fā)明的4-甲基-l,2，3-噻二唑衍生物殺菌活性或抑菌活性的測定方法如下采用菌體生長率測定法，具體過程是，取5毫克樣品溶解在適量二曱基曱酰胺內(nèi)，然后用含有一定量吐溫20乳化劑水溶液稀釋至500微克/毫升的藥劑，將供試藥劑在無菌條件下各吸取1毫升注入培養(yǎng)皿內(nèi)，再分別加入9毫升培養(yǎng)基，搖勻后制成50微克/毫升含藥平板，以添加1毫升滅菌水的平板做空白對照，用直徑4毫米的打孔器沿菌絲外緣切取菌盤，移至含藥平板上，呈等邊三角形擺放，每處理重復(fù)3次，將培養(yǎng)皿放在24±1度恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，待對照菌落直徑擴展到2-3厘米后調(diào)查各處理菌盤擴展直徑，求平均值，與空白對照比較計算相對抑菌率，供試菌種包括多種農(nóng)業(yè)上常見植物病原菌，如F:番茄早疫病菌04ter"an》TOtonO;D:花生褐斑病菌(Cerowporaarac/zWco/a);I:蘋果輪玟病菌(/7^ra/o，r"_pz>/coto);L:黃瓜灰霉病菌(So/rytoc/"erea);T:水稻纟丈枯病菌(/W/〖cw/fit"'a5awafo7);C:黃瓜一i萎病菌(Fiwan'w附oxj^spon/m);A:甜菜褐J趕病菌(CWrrw/7wa6e/Zco/a);G:小麥赤霉病菌(6^&^//0^(3。；AK:馬鈴薯晚疫病菌(尸/^op/^oraz'"/eWara(Mont.)deBary);U西瓜炭癥病菌(C"o〃e^^n'c/wm/agena/7'w附)等；D.本發(fā)明的4-甲基-l，2，3-噻二唑衍生物對小麥葉銹病生長活性影響的測定本發(fā)明的本發(fā)明的4-曱基-l,2，3-噻二唑衍生物對小麥葉銹病(f/7^&wjoreo/jtoc"'w'o.reco"t/"aio6.ex￡>e>y/n./5p./wcdw-flf^7Y/d"a￡>"汰力的殺菌或才中菌活性的測定方法々口下采用活體植林法(z'"Ww)，具體過程是，將精選的感病種子，用自來水浸泡4h，清洗干凈，置于28度恒溫摧芽24小時，播種，當(dāng)小麥幼苗長至1葉1心時，即可用于實驗，將備用小麥幼苗先噴水，隨即噴上孢子粉，將保濕架用塑^h布蓋嚴(yán)，控制溫度20±2度，濕度為RH90。/o以上，保濕24小時。將保濕的小麥葉片噴灑待測的化合物，當(dāng)對照充分發(fā)病時，調(diào)查所有葉片的孢子堆^t,計算出每個處理，包括空白對照的葉平均孢子堆數(shù)，按下式計算出供試化合物對小麥葉銹病的抑制效果CK其中E為相對效果，單位％CK為空白對照葉平均孢子堆數(shù)，單位堆T為處理組平均孢子堆數(shù)，單位堆；E.本發(fā)明的4-曱基-l，2，3-噻二唑衍生物誘導(dǎo)抗病活性的測定本發(fā)明的4-曱基-l,2,3-噻二唑衍生物誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒(TMV)活性的篩選方法如下I.標(biāo)準(zhǔn)植物誘導(dǎo)抗病激活劑的選擇選擇噻酰菌胺(TDL)(純度大于99.5%)為標(biāo)準(zhǔn)的植物誘導(dǎo)抗病激活劑；II.新化合物誘導(dǎo)煙草抗TMV活性的篩選方法離體直接抗病毒活性的測定采用半頁法進(jìn)行；活體誘導(dǎo)是將苗齡一致的普通煙，3盆為一組，分別于接種前7天前處理過的煙苗，處理方式包括噴施供試化合物溶液2到3次，每次10毫升，或土壤處理，每次10毫升，第7天于新長出的煙葉上摩擦接種TMV,將煙苗置于其生長適宜溫度及光照下培養(yǎng)3天后，檢查發(fā)病情況，綜合病斑數(shù)目按下式計算出供試化合物對TMV的誘導(dǎo)抗病毒效果，每一處理設(shè)3次重復(fù)，對照分空白對照和標(biāo)準(zhǔn)藥劑處理對照2種；測試化合物的相對效果分為4級A、B、C、D,具體數(shù)據(jù)為A級誘導(dǎo)效果>70%，為優(yōu)；B級誘導(dǎo)效果70~50%,為良；C級誘導(dǎo)效果30-50%,為差；D級誘導(dǎo)效果<30%視為無誘導(dǎo)效果CK其中，R為新化合物對煙草抗TMV的誘導(dǎo)效果，單位％CK為清水對照葉片的平均枯斑數(shù)，單位個I為經(jīng)化合物談導(dǎo)處理后葉片的平均枯斑數(shù)，單位個；本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明對甲噻酰胺進(jìn)行了先導(dǎo)結(jié)構(gòu)的優(yōu)化，并對新合成的新化合物進(jìn)行了抑菌活性的篩選和誘導(dǎo)活性的測定。本發(fā)明將通過特定制備和生物活性測定實施例更加具體地說明含4-曱基-l，2,3-瘞二峻類衍生物的合成和生物活性，但所迷實施例僅用于具體的說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明，尤其是其生物活性僅僅是舉例說明，而不是限制本專利，具體的實施方式如下實施例14-甲基-l，2，3-噻二唑-5-甲酰氯的制備將9.66克(0.067摩爾)合成的或購買的4-甲基-l，2，3-噻二唑-5-甲酸和29毫升二氯亞砜加入到100毫升三口圓底燒瓶中，80度下加熱回流6小時，減壓蒸除過量的二氯亞砜，減壓蒸餾得2000Pa,94-96克淡黃色餾分9.25克，收率85%,中間體4陽曱基-1,2，3-噻二唑-5-甲酰氯密封保存在干燥器中備用。實施例2化合物N-(4-曱基吡咬-2-基)-4-甲基-l，2，3-噻二唑-5-曱酰胺(試驗代號wq-c-2)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.43克(4毫摩爾)2-氨基-4-曱基吡啶加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入l.l毫升三乙胺作傅酸劑，水浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l,2,3-漆二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氳鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無7jo充酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200-300目硅膠柱層析(洗脫劑為60-90度的石油醚:乙酸乙酯體積比2:1),得到白色晶體0.44克，收率46.8%;熔點94度。元素分析結(jié)果:C:51.22/51.27,H:4.30/4.30，N:23.96/23.91;MS(m/z):233.09(M-l),235.05(M+l);'HNMR(溶劑CDC13,化學(xué)位移)2.424(3H，s，CH3),3.003(3H,s,CH3),6.951~6.968(1H,d,J=5.1Hz,pyridine-H),8.072~8.101(2H,m,pyridine-H),8.467(lH，s,N);IR(cm"):3266(NH,st),1674(C=0，st)。該化合物的元素分析結(jié)果在允許的誤差范圍內(nèi)，&NMR、IR和MS的凄丈據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例3化合物N-(2-氯-5-三氟甲基苯基)-4-甲基-l，2，3-噻二唑-5-曱酰胺(試驗代號wq-c-5)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.78克(4毫摩爾)2-氯-5-三氟曱基苯胺加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l，2，3-漆二唑-5-曱酰氯，撤去水浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~卯度的石油醚乙酸乙酯體積比8:1),得到白色晶體0.28克，收率21.7%;熔點173度；MS(m/z):320.09(M陽l);IR(cm"):3256(NH，st);1658(C=0,st);1585,1475(Ar-C=C);1333(C-F,st);UV吸收峰值266nm(max);HNMR(溶齊寸CDC13,化學(xué)位移)3.064(3H，s,CH3),7.412~7.445(lH,m,Ar-H),7.576~7,604(1H,d,聲8.4Hz，Ar陽H)，8.195(1H,s，N),8.8158.820(1H，s,Ar-H);該化合物的if!NMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例4化合物N-(5-溴-4-曱基吡啶-2-基)-4-曱基-l，2，3-瘞二唑-5-曱酰胺(試驗代號wq-c-9)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.65克(3.5毫摩爾)2-氨基-4-曱基-5-溴吡啶加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入0.97毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.57克(3.5毫摩爾)4-曱基-l,2,3-噻二唑-5-甲酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氬鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無7JC硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~90度的石油醚乙酸乙酯體積比4:1),得到純品0.50克，收率45.5%;熔點98度；MS(m/z):312.99(M-l)，315.14(M+l);IR(cm"):3371(NH，st);1684(C=0,st),2994(CH，st);762(C-Br,st);&NMR(溶劑CDC13,化學(xué)位移)2.468(3H,s，CH3),3.009(3H，s，CH3),8.205(lH,s,pyridine-H),8.343(lH,s，pyridine-H);UV吸收峰值23lnm(max),288nm。該化合物的'HNMR、IR和MS及UV數(shù)據(jù)與其化學(xué)結(jié)構(gòu)一致。實施例5化合物N-(2-曱氧基苯基)-4-甲基-l，2，3-噻二唑-5-曱酰胺(試驗代號wq-c-10)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.49克(4毫摩爾)2-曱氧基苯胺加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l,2，3-噻二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水;充酸鈉干燥，過濾，減壓脫'溶，200-300目硅膠柱層析(洗脫劑為6090度的石油瞇乙酸乙酯體積比8:1),得到純品黃色晶體0.62克，收率62.2°/0;熔點108度；UV吸收峰值279nm(max)，321nm。元素分析結(jié)果(測定值/理論值)C:52.86/53.00,H:4.35/4.45，N:17.01/16.86;MS(m/z):247.95(M-l),250.30(M+l);IR(cm"):3423(NH,st),1658(00,st);1490，1606，1454(Ar-C=C);!HNMR(溶齊'J:CDCl3，化學(xué)位移)3.938(3H，s，CH3),3.008(3H，s，CH3),6.936~7.059(2H,m,Ar-H)，7.133~7.185(1H,m,Ar-H),8.3798.405(lH,d,戶7.8Hz,Ar-H)，8.283(lH,s,N);該化合物的元素分析結(jié)果在允許的誤差范圍內(nèi)，"HNMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例6化合物N-(3-甲基吡啶-2-基)-4-曱基-l，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(試驗代號wq-c-ll)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.43克(4毫摩爾)2-氨基-3-曱基吡啶加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，水浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l,2,3-噻二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗涂有機層，無7JO克酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200~300目珪膠柱層析(洗脫劑為60-90度的石油醚:乙酸乙酯體積比2:1),得到純品黃色晶體0.31克，收率33,0%;熔點140~146度；MS(m/z):232.98(M-l),235.04(M+l);IR(cm"):3455(NH，st),1627(C=0，st);&NMR(溶劑CDC13,化學(xué)位移)2.390(3H，s,CH3)，3.027(3H，s,CH3),6.9346.978(lH,t/二6.3Hz,pyridine-H),7.7087.734(2H,m,pyridine-H);UV吸收峰值269nm(max);該化合物的！HNMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例7化合物N-(3-氯-5-三氟甲基此咬-2-基)-4-甲基-1，2，3-痿二唑-5-甲酰胺(試驗代號wq-c-12)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.50克(2.5毫摩爾)2-氨基-3-氯-5-三氟曱基吡啶加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入0.69毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.41克(2.5毫摩爾)4-曱基-l,2,3-噻二唑-5-曱酰氯后，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物；再分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水^琉酸鈉千燥，過濾，減壓脫溶，200-300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~90度的石油醚:乙酸乙酯體積比2:1),得純品0.30克，收率37.0。/o;熔點161-167度；MS(m/z):321.13(M-l),323.27(M+l);'H菌R(溶劑CDC13，化學(xué)位移)3.002(3H，s，CH3),8.059(lH,s,pyridine-H)，8.641(lH,s,pyridine-H),8.387(lH，s,N);UV吸收峰值269nm(max);IR(cm"):3214(NH,st),1663(C=0,st)，1726(C=0,st),751(C-Cl,st);該化合物的'HNMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例8化合物N-(3-氟-4-曱基苯基)-4-曱基-l，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(試驗代號wq-c-13)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.50克(4毫摩爾)3-氟4-曱基苯胺加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-甲基-1,2，3-噻二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氬鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水;克酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200-300目硅膠柱層析(洗脫劑為60-90度的石油醚:乙酸乙酯體積比4:1),得到純品白色晶體0.62克，收率62.0%;熔點105度。元素分析結(jié)果(測定值/理論值)C:52.42/52.58，H:4.19/4.01,N:16.49/16.27;MS(m/z):249.94(M-l),252.24(M+l);IR(cm-'):3298(NH,st);1648,1595(C=0,st);1538,1511(Ar-C=C);UV吸收峰值232nm(max);!HNMR(溶劑CDC13，化學(xué)位移)2.275(3H，s,CH3),2.964(3H,s,CH3),7.1(n~7.210(2H,m,Ar-H),7.441~7.477(lH,d,./=10.8Hz，Ar-H),7.601(lH,s,N);該化合物的元素分析結(jié)果在允許的誤差范圍內(nèi)，'HNMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例9化合物N-環(huán)丁基-4-甲基-l，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(試驗代號wq-c-16)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.28克(4毫摩爾)環(huán)丁胺加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l,2，3-噻二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產(chǎn)物萃取出；之后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~90度的石油醚:乙酸乙酯體積比2:1),得到純品白色晶體0.49克，收率62.0%;熔點85度。元素分析結(jié)果(測定值/理論值)C:48.74/48.70,H:5.34/5.58,N:21.22/21.30;MS(m/z):198.35(M+l);UV吸收峰值271nm(max);IR(cm"):3245(NH,st);1632,1558(00,st);2868,2994(CH，st);&NMR(溶劑CDC13,化學(xué)位移)2.906(3H,s,CH3),1.76H.852(2H,m,CH2)，L953~2.021(2H，m，CH2)，2.4322,452(2H，m,CH2),4.5034.585(lH，q,CH)，6.034(lH,s，N);該化合物的元素分析結(jié)杲在允許的誤差范圍內(nèi)，'HNMR、IR和MS以及UV的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例10化合物N-環(huán)丙基曱基-4-曱基-l，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(試驗代號wq-c-17)的合成及結(jié)構(gòu)鑒定將0.28克(4毫摩爾)環(huán)丙基曱胺加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入l.l毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入0.65克(4毫摩爾)4-曱基-l,2,3-噻二唑-5-曱酰氯，撤去冰浴，常溫攪拌反應(yīng)4小時，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗涂有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫溶，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~卯度的石油醚:乙酸乙酯體積比2:1),得到純品黃色液體0.75克，收率94.9%;IR(cm"):3265(NH，st);1635,1552，1534(C=0,st);2872,2927,3003,3083(CH,st);MS(m/z):198.23(M+l);NMR(溶劑CDC13,化學(xué)位移)2.923(3H,s,CH3),0.285~0.303(2H，m，CH2),0.5910.614(2H，q，^10.8Hz，CH2),1.0391.090(lH，m，CH2),3.2973.339(2H，t,CH2),6.006(lH，s,N);該化合物的^NMR、IR和MS的數(shù)據(jù)顯示與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相一致。實施例11本發(fā)明的4-曱基-l，2，3-噻二唑衍生物的抑菌活性本發(fā)明測試的常見植物病原真菌的名稱和代號包括F:番茄早疫病菌(Jteraw/aso/,');D:花生褐斑病菌(Cerc卿omarrac/2/(A'co/。)；I:蘋果輪纟丈病菌CP/yAra/o，ra;7!Wco/a);L:黃瓜灰霉病菌(Sofr少tod"em3);T:水稻紋枯病菌(Pe///cw/a〃'amrah7);C:黃瓜枯萎病菌CFwra〃'wmowo);A:甜菜褐斑病菌(Ce/ros/ora6e"'co/fl);G:小麥赤霉病菌(G/66ere//azeae);AK:馬鈴薯晚疫病菌(尸/^op/^zomZ"/erfara(Mont)deBary);U西瓜炭疽病菌(CW/etoWc/2Ww/age""nww)等，這些菌種具有4艮好的代表性，能夠代表農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中田間發(fā)生的大部分病原菌的種屬。菌體生長率法測定結(jié)果見表2，表2表明，本發(fā)明合成的部分化合物對測定的部分病原真菌的生長具有不同程度抑菌作用在50微克/毫升時，wq-c-2和wq-c-9對U[西瓜炭疽病菌(C0〃er0ZWc/2wm/age"an'ww)]的抑制率均大于60%,wq-c-5和wq-c-9對L[黃瓜灰霉病菌(5o^聲/sc/"erra)]的抑制率也大于60%。實施例12本發(fā)明的4-曱基-l，2，3-噻二唑衍生物對小麥葉銹病的效果生物測定試驗的結(jié)果表明，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)的大部分1,2,3-。塞二唑衍生物對小麥葉銹病的防治效果較差。實施例13本發(fā)明的4-曱基-l，2，3-噻二唑衍生物誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒的效果誘導(dǎo)活性的測定試驗的結(jié)果見表3，標(biāo)準(zhǔn)的植物誘導(dǎo)抗病激活劑BTH和p塞酰菌胺及本發(fā)明的大部分1,2,3-噻二唑衍生物均能誘導(dǎo)煙草產(chǎn)生對TMV的抗性，大部分1,2,3-噻二唑衍生物的誘導(dǎo)活性與BTH和TDL相當(dāng)。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表3本發(fā)明中的化合物誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒的活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例14本發(fā)明的1，2，3-塞二唑衍生物誘導(dǎo)煙草后煙草體內(nèi)苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性變化取經(jīng)上述化合物誘導(dǎo)后新長出的并接種MV的煙草葉片待測，加3毫升0.2摩爾/升硼砂緩沖液(pH8.8,含0.005摩爾/升的巰基乙醇，0.001摩爾/升的EDTA)及約樣品重量1/10的聚乙烯吡咯烷酮(PVP),在冰浴中勻漿。10000轉(zhuǎn)/分鐘，4度下離心20分鐘，上清液作酶活測定。測定系統(tǒng)由2毫升0.2摩爾/升pH8.8的硼^沙緩沖液。1毫升0.02摩爾/升L-苯丙氨酸和0.8毫升酶液組成。測定0D2卯后，于37度水浴反應(yīng)1小時，再測定OD290值，對照為硼砂緩沖液3毫升加酶液0.8毫升。蛋白質(zhì)含量的測定采用考斯亮藍(lán)G250法，以BSA為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。PAL測定的結(jié)果見表4,由表4可見，僅化合物wq-c-17誘導(dǎo)后煙草體內(nèi)PAL酶的活性比TDL低以外，化合物wq-c-17的活性TDL相當(dāng)，其余化合物的誘導(dǎo)活性均高與TDL,而化合物wq-c-2和wq-c-ll的請導(dǎo)活性高于BTH。表4本發(fā)明的化合物誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒后體內(nèi)的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的變化試驗代號比活力U/毫克蛋白'分鐘試驗代號比活力U/毫克蛋白-分鐘<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>實施例15本發(fā)明的4-曱基-l,2,3-噻二唑衍生物與其他抗病毒劑組合在防治煙草花葉病毒中的應(yīng)用初步的生物測定試^全的結(jié)果表明，本發(fā)明的所有4-曱基-l,2,3-噻二唑^"生物與現(xiàn)有的抗病毒藥劑BTH、TDL、4-甲基-l,2，3-噻二唑-5-曱酸(TDLA)、DL-(3-氨基丁酸(BABA)、病毒唑、寧南霉素、安托芬、病毒星1號、病毒星2號和XY-13、XY-30以及噻酰胺、曱噻酰胺和水楊酸中任意1個或2個化合物組合可以用于誘導(dǎo)煙草抗TMV或用于直接防治TMV，這些組合物之間均表現(xiàn)出相加作用或增效作用，沒有發(fā)現(xiàn)具有頡頏作用的組合物。實施例16本發(fā)明的4-曱基-l，2，3-噻二唑衍生物與其他殺菌劑組合防治農(nóng)業(yè)和園藝植物病害的應(yīng)用初步的生物測定試驗的結(jié)果表明，本發(fā)明的所有4-甲基-l，2,3-n塞二唑衍生物與現(xiàn)有的殺菌劑如霜脲氰、福美雙、福美鋅、代森錳鋅、乙磷鋁、曱基石克菌靈、百菌清、敵可松、多菌靈、腐霉利、異菌脲、克菌丹、乙霉威、酯菌脲、氟酰胺、苯菌靈、環(huán)唑醇、磺菌威、苯銹啶、惡酰胺、三唑酮、曱基托布津、曱霜靈、精曱霜靈、苯霜靈、土菌消、烯酰嗎啉、氟嗎啉、十三嗎啉、氟;圭唑、烯唑醇，戊唑醇、惡霉靈、惡醚唑、嘧菌胺、嘧菌酯、丙環(huán)唑、苯并噻二唑、水楊酸、噻酰菌胺、噻酰胺、曱噻酰胺等其它已知任何可作為殺菌劑中的任意一種或兩種組合使用可以用于農(nóng)業(yè)植物病害和園藝植物病害的防治，防治對象包括卯菌綱的綿霉屬、絲囊霉屬、腐霉屬、疫霉屬、指梗霉屬、單軸霉屬、假霜霉屬、霜霉屬等二十余個屬產(chǎn)生的病害，如稻苗綿腐病、番茄根腐病、馬鈴薯晚疫病、煙草黑脛病、谷子白粉病、葡萄霜霉病、萵苣霜霉病、黃瓜霜霉病等多種糧食作物和經(jīng)濟作物的其他病害等，使用的劑型可以是可濕性粉劑、緩釋劑、粉劑、微膠囊懸浮劑、可分散濃劑、種子處理乳劑、水乳劑、大粒劑、顆粒劑、微乳劑、油懸浮劑、油劑、用農(nóng)藥包衣的種子、濃懸浮劑、懸乳劑、水溶性粒劑、可溶性濃劑、水分散性粒劑等，本發(fā)明的4-甲基-l,2,3-蓬二唑衍生物在組合物中的比例可以是1%-90°/。，藥劑的防治效果好，組合物均具有一定的增效作用和相加作用，未發(fā)現(xiàn)具有頡頏作用的組合物。權(quán)利要求1.含氮含硫雜環(huán)化合物4-甲基-1，2，3-噻二唑衍生物，其特征在于具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式id="icf0001"file="S2008100525466C00011.gif"wi="19"he="15"top="38"left="97"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中R1為氫；R2為4-甲基吡啶-2-基、4-甲基-5-溴吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、3-氯-5-三氟甲基吡啶-2-基、2-氯-5-三氟甲基苯基、2-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、環(huán)丁基、環(huán)丙基甲基等取代基。2.其中R!為氫；R2為4-甲基吡啶-2-基、4-甲基-5-溴吡啶-2-基、3-曱基吡啶-2-基、3-氯-5-三氟曱基吡啶-2-基、2-氯-5-三氟曱基苯基、2-曱氧基苯基、3-氟-4-曱基苯基、環(huán)丁基、環(huán)丙基曱基等取代基。2.權(quán)利要求1所述的4-曱基-l,2,3-噻二唑衍生物的合成方法，其特征在于總的合成路線是其中R!為氫；R2為4-曱基吡啶-2-基、4-甲基-5-溴吡啶-2-基、3-曱基吡啶-2-基、3-氯-5-三氟甲基吡啶-2-基、2-氯-5-三氟曱基苯基、2-曱氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、環(huán)丁基、環(huán)丙基曱基等取代基；具體步驟是將4毫摩爾的胺類化合物R!R2NH加入到50毫升圓底燒瓶中，并用20毫升經(jīng)絕對無水的四氫呋喃將其溶解，加入1.1毫升三乙胺作傅酸劑，冰浴下緩慢滴加入4毫摩爾的4-曱基-1,2,3-噻二唑-5-曱酰氯，常溫攪拌反應(yīng)4小時后，向反應(yīng)體系中加入加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物；再分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水石克酸鈉干燥，過濾，200~300目硅膠柱層析(洗脫劑為60~卯度的石油醚:乙酸乙酯)，才艮據(jù)產(chǎn)物的不同，體積比為2:1-8:1之間選"^一定的比例，才艮據(jù)所得純品計算收率，測定熔點、進(jìn)行元素分析或IR、MS、^NMR及UV等理化數(shù)據(jù)的測定，合成化合物的用量可以按相應(yīng)比例擴大或縮小。3.權(quán)利要求1所述的4-曱基-l，2,3-噻二唑衍生物在制備包括抗煙草花葉病毒劑在內(nèi)的抗植物病毒藥劑中的應(yīng)用。4.權(quán)利要求1所述的4-曱基-l,2,3-噻二唑衍生物在制備包括誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒的植物激活劑誘導(dǎo)農(nóng)業(yè)和園藝植物抗植物病毒中的應(yīng)用。5.權(quán)利要求1所述的4-曱基-l,2,3-p塞二唑衍生物在制備抑制植物病原真菌生長藥劑用于植物病害防治中的應(yīng)用。6.權(quán)利要求1所述的4-曱基-l，2，3-口塞二唑衍生物與BTH、TDL、4-曱基-l,2,3-蓬二峻-5-甲酸、DL-p-氨基丁酸、病毒唑、寧南霉素、安托芬、病毒星1號、病毒星2號和XY-13、XY-30以及p塞酰胺、曱p羞酰胺和水楊酸中任意1個或2個化^物組合用于謙導(dǎo)煙草抗TMV的用途和這些組合物用于直接防治TMV的應(yīng)用。7.權(quán)利要求1所述的4-甲基-l,2，3-噻二唑衍生物與現(xiàn)有的殺菌劑如霜脲氰、福美雙、福美鋅、代森錳鋅、乙磷鋁、曱基硫菌靈、百菌清、敵可松、多菌靈、腐霉利、異菌脲、克菌丹、乙霉威、酯菌脲、氟酰胺、苯菌靈、環(huán)唑醇、磺菌威、苯銹啶、惡酰胺、三唑酮、甲基托布津、甲霜靈、精甲霜靈、苯霜靈、土菌消、烯酰嗎啉、氟嗎啉、十三嗎淋、氟硅唑、烯唑醇、戊唑醇、惡霉靈、惡瞇唑、嘧菌胺、嘧菌酯、丙環(huán)唑、苯并噻二唑、水楊酸、噻酰菌胺、遂酰胺、曱漆酰胺等中的任意一種或兩種組合用于對農(nóng)業(yè)植物病害和園藝植物病害的防治，本發(fā)明的4-曱基-l,2,3-噻二唑衍生物在組合物中的比例為1%-90%,加工的劑型包括可濕性粉劑、緩釋劑、粉劑、微膠囊懸浮劑、可分散濃劑、種子處理乳劑、水乳劑、大粒劑、顆粒劑、微乳劑、油懸浮劑、油劑、用農(nóng)藥包衣的種子、濃懸浮劑、懸乳劑、水溶性粒劑、可溶性濃劑、水分散性粒劑等。全文摘要本發(fā)明提供了制備一類含4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺的衍生物及其合成方法和農(nóng)用生物活性及其篩選方法，本發(fā)明涉及含1，2-二唑的雜環(huán)化合物，具體為4-甲基-1，2，3-噻二唑，它們具有如上的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式，其中R1為氫；R2為4-甲基吡啶-2-基、4-甲基-5-溴吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、3-氯-5-三氟甲基吡啶-2-基、2-氯-5-三氟甲基苯基、2-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、環(huán)丁基、環(huán)丙基甲基等取代基；本發(fā)明公開了這些化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)以及合成這些化合物的合成方法及其對農(nóng)業(yè)病蟲草害的防治作用和誘導(dǎo)抗病效果。同時公開了這些化合物與商品化的抗病毒藥劑以及殺菌劑組合使用在防治農(nóng)業(yè)和園藝病毒和病原菌中的應(yīng)用。文檔編號C07D285/06GK101250166SQ20081005254公開日2008年8月27日申請日期2008年3月28日優(yōu)先權(quán)日2008年3月28日發(fā)明者瓊吳,翔左,張?？?楊知昆,范志金,范志銀,鄭琴香,琳馬申請人:南開大學(xué)