專利名稱：d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種核苷氫亞磷酸酯，尤其是涉及一種如式I所示結(jié)構(gòu)的具有潛在抗艾滋 病病毒活性的2', 3，-雙脫氫-2，， 3，-雙脫氧胸苷(2，， 3，-didehydro-2，， 3，-dideoxythymidine，簡(jiǎn)稱 為d4T) -5'-氫亞磷酸異丙酯(簡(jiǎn)稱為d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯)的合成方法。
自1987年第一個(gè)在臨床上使用的治療HIV感染藥物齊多夫定(Zidovudine,AZT,又稱疊氮 胸苷)問(wèn)世以來(lái)，核苷類藥物在治療艾滋病引起的相關(guān)疾病中一直占據(jù)著重要的地位。到2007 年，美國(guó)FDA批準(zhǔn)在美國(guó)上市的29種治療艾滋病感染藥物中有13種屬于核苷類藥物，占總 數(shù)的45%。但在臨床上長(zhǎng)期單獨(dú)使用核苷類藥物都會(huì)有不同程度的耐藥性出現(xiàn)，如使用AZT 半年就會(huì)導(dǎo)致病毒變異株的出現(xiàn)(AntonelIi G Turriziani 0, et al. AIDS Res. Hum. Retroviruses 1996，12:223~228.)。另外，有些核苷類藥物在使用中也會(huì)產(chǎn)生其它毒副作用。比如，AZT對(duì) 造血系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生毒性，由它引起的骨髓抑制效應(yīng)，比如白血病和貧血癥等已有報(bào)道(1、 Inoue T, Tsushita K, Itoh T, et al. Antimicrob. Agents Chemother. 1989, 33: 576~579 ; 2、 Dornsife R E, Averett D R. Antimicrob. Agents Chemother. 1996， 40: 514~519)。因此通過(guò)對(duì)這類藥物進(jìn)行改性 修飾從而降低藥物毒性和病毒耐藥性是目前抗艾滋病藥物設(shè)計(jì)的一個(gè)研究熱點(diǎn)。
一些核苷氫亞磷酸酯，如AZT-5'-氫亞磷酸環(huán)己酯(結(jié)構(gòu)如下式II所示)，d4T-5'-氫亞磷 酸異丙酯等，由于它們的結(jié)構(gòu)中具有親酯性的基團(tuán)，使其比相應(yīng)的核苷具有更強(qiáng)的對(duì)細(xì)胞膜 的穿透能力，從而擁有更高的抗艾滋病病毒的活性，更低的細(xì)胞毒性；親酯性基團(tuán)的引入也 使得它們更不易引起艾滋病病毒的變異。臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,在幾種核苷氫亞磷酸酯中，d4T-5'
背景技術(shù)：
-氫亞磷酸異丙酯具有很強(qiáng)的抗艾滋病病毒活性(Prokrovsky A G， Pronayeva T R， KrayevskyA A， et al. 7Vwc/eas7'fife& iVwc/eo//^ M/c/e/c Jc/成2001， 20(4—7), 767.)。
O
d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法與其它核苷氫亞磷酸酯的合成方法類似；核苷氫亞磷
酸酯的合成方法通常有以下4種
(a)通過(guò)核苷氫亞磷酸單酯在耦合試劑的存在下和另外一分子羥基化合物進(jìn)行耦合(文
獻(xiàn)Stawinski， J.o/Og朋0/7/w印/20rwj CTze/w^^y, Marcel Dekker Inc., New York, 1992:
377-434)。該方法步驟少，操作簡(jiǎn)單，但需首先制備出較難分離得到的核苷氫亞磷酸單酯。
(b) 通過(guò)二苯基氫亞磷酸酯的在堿的作用下進(jìn)行連續(xù)酯交換合成((a)KersA， Kers, I， Kraszewski A， Sobkowski M， Szabo T， Thelin M， Zain， R.; Stawinski, J. iVwc/e柳'^ M/c/W/fifes 1996, 75, 361. (b) Xiao， Q.; Sun, J.; Ju， Y.; Zhao， Y. F.; Cui, Y. X. r"ra/2e^0"2002, ￥3(30), 5281.);該方法無(wú)須使反應(yīng)體系嚴(yán)格無(wú)水，給操作帶來(lái)一定方便，但產(chǎn)物較難分離純化；
(c) 通過(guò)核苷磷酰胺二酯在1//-四氮唑的水溶液中水解制備得到(PadiyaKJ， SalunkheM M.歷oorg. MM. Ozem. 2000, & 337.)。該方法步驟少，操作簡(jiǎn)單，但需要首先制備出較難分 離得到的核苷磷酰胺二酯。
(d) 從三氯化磷和核苷出發(fā)，用類Abuzov反應(yīng)合成這類化合物(文獻(xiàn)SunXB， KangJX， ZhaoYF， C/ e肌Co柳w. 2002,20: 2414.)。該方法原料易得，但所需步驟相對(duì)較多，反應(yīng)時(shí) 間長(zhǎng)，反應(yīng)產(chǎn)物較復(fù)雜，往往需要多次用硅膠柱層析才能得到純化的產(chǎn)物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是用氯化一2 —氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉DMC(2-chloro-l， 3-dimethylimidazolinium Chloride,結(jié)構(gòu)如下式VH所示)為縮合劑，使d4T (結(jié)構(gòu)如式IV 所示)和異丙醇在堿性溶劑里，先后與亞磷酸(結(jié)構(gòu)如下式V所示)的兩個(gè)羥基縮合，用一 鍋法合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
<formula>formula see original document page 6</formula>本發(fā)明所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的結(jié)構(gòu)式為式I :
<formula>formula see original document page 6</formula>本發(fā)明所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法可以通過(guò)下式來(lái)表示:
<formula>formula see original document page 6</formula>式中，Base:指有機(jī)堿。
由亞磷酸出發(fā)，在堿性條件下用縮合劑氯化一2—氯一1，3 — 二甲基咪唑啉(2-chloro-1, 3-dimethylimidazolinium Chloride, DMC)使其與2，， 3'-雙脫氫-2，， 3，-雙脫氧胸苷(d4T)縮合 生成式VI所示結(jié)構(gòu)的d4T-5'-氫亞磷酸單酯，然后在堿性條件下用縮合劑DMC使d4T-5'-氫亞 磷酸單酯與異丙醇縮合，生成如式I所示的目標(biāo)產(chǎn)物d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
本發(fā)明包括以下步驟
1)在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1. 0eq的2', 3'-雙脫氫-2', 3，-雙脫氧胸苷(d4T)溶解在液態(tài)有
6
機(jī)堿中，再加入1.0 1.2eq的亞磷酸，攪拌使其溶解，得溶液A;
2) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1.0 1.5eq的氯化一2 —氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶 解在第l有機(jī)溶劑中，得溶液B，然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液B加到溶液A中反 應(yīng)，得反應(yīng)液，直到點(diǎn)板發(fā)現(xiàn)2'，3'-雙脫氫-2',3'-雙脫氧胸苷(d4T)消失；
3) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把0.8 1.0eq的異丙醇溶解在第2有機(jī)溶劑中，得溶液C， 然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液C加至反應(yīng)液中，得溶液D;
4) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶解 在第3有機(jī)溶劑中，得溶液E，然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液E加到溶液D中反應(yīng)， 直到點(diǎn)板發(fā)現(xiàn)式d4T-5'-氫亞磷酸單酯消失；
5) 反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后用第4有機(jī)溶劑溶解，并用硅膠柱 層析純化，即分離出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
所述的液態(tài)有機(jī)堿最好選自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2，3-二甲基 吡啶，2，4-二甲基吡啶，2，5-二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2， 4,6_三 甲基吡啶，六氫吡啶，四氫吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺等中的至少一種。
在步驟2)中，所述的反應(yīng)的溫度最好為一10 60"C，反應(yīng)的時(shí)間最好為2 30min。第 l有機(jī)溶劑選自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)， 乙腈等中的至少一種。
第2有機(jī)溶劑選自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二 氧六環(huán)，乙腈等中的至少一種。
在步驟4)中，所述的反應(yīng)的溫度最好為一10 60。C，反應(yīng)的時(shí)間最好為2 30min。第 3有機(jī)溶劑選自二氯甲烷，三氯甲垸，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)， 乙腈等中的至少一種。
第4有機(jī)溶劑選自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二 氧六環(huán)，乙腈等中的至少一種。
與現(xiàn)有的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法相比，本發(fā)明具有以下突出優(yōu)點(diǎn) (l)原料易得，反應(yīng)所需的d4T是一種上市多年的抗艾滋病藥物，在國(guó)內(nèi)有多家企業(yè)大 量生產(chǎn)，可方便的購(gòu)得；亞磷酸，二氯甲烷，乙酸乙酯，吡啶等都是常規(guī)試劑，也可方便購(gòu) 得；DMC需要自己制備，但制備方法成熟，且制備所需時(shí)間短，整個(gè)制備DMC的過(guò)程只需 10h;所合成的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的純度一般可達(dá)到98%以上。 (2) 反應(yīng)時(shí)間短，本發(fā)明所述的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)在15 40min之內(nèi)就 可以完成，比其它合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法要短許多，提高了效率；且產(chǎn)率可以達(dá) 到66%，與其它合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法的產(chǎn)率相近；
(3) 反應(yīng)條件溫和，本發(fā)明所述的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)，無(wú)需加熱，無(wú)需 冷卻，在室溫下就可以進(jìn)行，節(jié)約能耗；
(4) 反應(yīng)步驟少，本發(fā)明所述的4成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)只需兩步就可以合成 出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯；節(jié)省了溶劑和試劑；
(5) 產(chǎn)物易于分離純化，反應(yīng)結(jié)束后，用硅膠柱層析就可以得到純度98X以上的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。 實(shí)施例1
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL吡啶中，然后加入1. leq亞磷酸，25 t:攪拌使其溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用2mL.的二氯甲烷把l.leq DMC溶解；25°C，攪拌及氮?dú)獗?護(hù)下把DMC的二氯甲烷溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的吡啶溶液中，滴加完畢后，25。C攪拌 5minc
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把0.9eq的異丙醇溶解lmL在的二氯甲烷中，然后在攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下 把該異丙醇的二氯甲烷溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把l. leq DMC溶解在2mL二氯甲垸中，25'C，攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把DMC 的二氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，25。C攪拌10min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用二氯甲烷甲醇=30: 1 。
得白色固體218mg，產(chǎn)率66%。 .'H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 84(br, 1H， H-3)， 6.86'6.85*(d， JP—H= 700Hz, 1H，P-H), 7. 32 (d, J = 20Hz， 1H， H-6) ， 7. 05-7. 03 (m, 1H, H—1')， 6. 35-6. 33(m, 1H,H-2， ), 5. 93_5. 92(m, 1H, H-3， )' 5. 02 (br， 1H'H-4， ) ， 4. 85-4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)2)， 4.34-4.20(m, 2H,H-5， )， 1. 93(s, 3H， CHa-5), 1. 37(d'J = 8Hz'6H, O-CH (CH3) 2)卯m; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.64， 150.77, 135.79， 133.00， 127.72, 111.25, 89.58， 84.55, 71.92, 65.25， 24.04， 23.77， 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.35, 7.89 卯m; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
實(shí)施例2
在氬氣保護(hù)下，把224mg (l醒ol) d4T溶解在5mL 2-甲基吡啶中，然后加入1.0eq亞磷 酸，0'C攪拌使其溶解；在氬氣保護(hù)下用2mL三氯甲烷把1.0eq DMC溶解；0°C，攪拌及氬氣 保護(hù)下把DMC的三氯甲垸溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的2-甲基吡啶溶液中，滴加完畢后， O'C攪拌10min。
在氬氣保護(hù)下，把0.9eq的異丙醇溶解在lmL三氯甲垸中，然后在攪拌及氬氣保護(hù)下把 該異丙醇的三氯甲垸溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護(hù)下，把1.0eqDMC溶解在2mL三氯甲垸中，0'C，攪拌及氬氣保護(hù)下把DMC的 三氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，0'C攪拌15min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用三氯甲垸乙醇=40: 1 。
得白色固體204mg，產(chǎn)率62%。 !H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 83(br, 1H， H-3)， 6. 86， 6. 85*(d, JP—H = 700Hz， 1H， P-H)， 7. 31 (d， J = 20Hz， 1H' H-6)， 7. 04-7. 02(m， 1H， H_l，)， 6. 35-6.33(m， 1H,H-2' ) ， 5. 93-5. 92 (m, 1H， H-3， )' 5. 02(br, 1H, H-4' ) ， 4, 85—4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)》，4. 34-4. 20(m，2H,H-5' )， 1. 93(s， 3H， CHj-5) ， 1. 37 (d, J = 8Hz， 6H， O-CH (CH3) 2) ppm; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.62， 150.75, 135.79, 133.01， 127.72， 111.25' 89.58' 84.55， 71.92, 65.22, 24.04, 23.77, 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.34' 7.88 ppm; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
本實(shí)施例2所用的2-甲基吡啶可用3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，或2-甲基吡啶，3-甲基 吡啶，4-甲基吡啶的任意配比混合液代替。
實(shí)施例3
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL 2,3-二甲基吡啶中，然后加入1. 2eq 的亞磷酸，25'C攪拌使其溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用2mL四氫呋喃把1.2eq的DMC溶解；一10'C， 攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把DMC的四氫呋喃溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的2， 3-二甲基吡啶溶液中， 滴加完畢后，在一l(TC下攪拌15min。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把1.0eq的乙醇溶解lmL在四氫呋喃中，然后在攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把該 乙醇的四氫呋喃溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把1.2eq DMC溶解在2mL四氫呋喃中，在一10'C下，攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下 把DMC的四氫呋喃溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，在一10'C下攪拌15min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯甲醇=30: 1 。
得白色固體177mg,產(chǎn)率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 9. 03(br， 1H， H-3)， 6.86，6.85*(d， Jp— = 700Hz， 1H, P-H), 7. 30(d, J = 16Hz， 1H， H-6), 7. 06-7. 04(m， 1H， H-1，)， 6. 36-6.32(m, 1H，H-2， ) ， 5. 96-5. 92 (m, 1H， H-3， ), 5. 02(br， 1H, H_4， ), 4. 35-4. 26 (m， 2H, 0-C H2CH3) ， 4. 23-4. 13 (m， 2H, H-5， ) ， 1. 92 (s， 3H' CHa-5) ， 1. 37 (t' J = 7. 2Hz, 3H, 0-CH2CH3)卯m; 13C NMR(100MHz， CDC13): S= 163.71， 150.82, 135.75, 132.90， 127.77, 111.24, 89.59, 84.53， 65.38， 62.36, 16.32, 12. 32ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13，) S =9.75， 9. 36ppm; ESI-MS: 339.1 (M+Na)+。
本實(shí)施例3所用的2，3-二甲基吡啶可用2,4-二甲基吡啶，2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基 吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2,4,6-三甲基吡啶或2，3-二甲基吡啶，2,4-二甲基吡啶，2， 5-二 甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4,6-三甲基吡啶的任意配比混合液代替。
實(shí)施例4
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5raL六氫吡啶中，然后加入1. leq的亞磷 酸，4(TC攪拌使其溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用2mL 1， 2-二氯乙烷把1. leq的DMC溶解；40°C，攪 拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把DMC的1， 2-二氯乙烷溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的六氫吡啶溶液中，滴 加完畢后，4(TC攪拌10min。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把1.0eq的正丁醇溶解lmL在l，2-二氯乙垸中，然后在攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù) 下把該正丁醇的1,2-二氯乙垸溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把l.leq DMC溶解在2mL 1,2-二氯乙烷中，4CTC，攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把 DMC的1，2-二氯乙烷溶液滴加到上述礙液中，滴加完畢后，4(TC攪拌10min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用二氯甲烷乙醇=20: 1 。
得白色固體200mg，產(chǎn)率58%。 ^ NMR (400MHz， CDC13): S= 8. 96(br， 1H， H-3)， 6. 87,6. 84*(d, JP—H=704Hz， 1H, P-H), 7. 30(d， J = 16Hz， 1H, H-6)， 7. 05(s， 1H'H-l， )， 6.34(d, J =8Hz'lH，H-2' )，5.95-5.91(m, lH，H-3， )， 5. 02(br, 1H'H_4， ), 4. 37-4. 23(m， 2H， 0-CH2(CH2)2 CH3), 4. 18—4. 04 (m， 2H' H—5' )' 1. 92 (s， 3H, CHs—5), 1. 68-1. 64 (m, 2H， 0—CH2CH2CH2CH3) ， 1. 45_1. 3 5 (m, 2H, 0-CH2CH2CH2CH3) ， 0. 94 (t, J=7. 4Hz, 3H, 0-CH2CH2CH2CH3) ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.67, 150.78, 135.73， 132.90, 127.77， 111.27, 89.60, 84.52, 66.04， 65.39, 32.31， 18.63, 13.46， 12. 33ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S =9.92， 9. 57 ppm; ESI-MS:
367.1 (M+Na)十。 實(shí)施例5
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL四氫吡咯中，然后加入1. leq的亞磷 酸，60。C攪拌使其溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用2tnL 1，4-二氧六環(huán)把1.5eq的DMC溶解；6CTC，攪 拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把DMC的1， 4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的四氫吡咯溶液中，滴 加完畢后，6(TC攪拌2min。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把1.0eq的異丁li溶解lmL在1,4-二氧六環(huán)中，然后在攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù) 下把該異丁醇的1， 4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，把1.5eq DMC溶解在2mL 1,4-二氧六環(huán)中，60°C，攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù)下把 DMC的1，4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，6(TC攪拌5min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用三氯甲垸甲醇=50: 1 。
得白色固體210mg，產(chǎn)率61%。 & NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 94(br， 1H， H_3)， 6.86，6.85*(d, JP—H= 700Hz, 1H， P—H), 7.30(d，J= 16Hz, 1H， H—6)， 7. 06—7. 03(m, 1H， H-l，)， 6. 34(d， J=8Hz， 1H，H-2， )， 5. 95—5. 92(m, 1H， H_3， )， 5. 02(br， 1H， H_4， )， 4. 37—4. 22(m， 2H， 0_ CH2CH(CH3)2), 3.94-3.87(m，2H，H-5, )'， 1. 99-1. 93(m， 1H， 0-CH2CH(CH3)2)， 1. 92(s， 3H， CH3_5), 0.96-0.94(m'6H，0-CH2CH(CH3)2)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.65， 150.79, 135.71, 132.90, 127.77, 111.26, 89.62, 84.52, 72.07, 65.40， 29.10， 18. 59—18. 55 (2C), 12. 35ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 9.93, 9. 65 ppm; ESI-MS: 367.1 (M+Na)+。
實(shí)施例6
在氬氣保護(hù)下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL三乙胺中，然后加入1. leq的亞磷酸， 25。C攪拌使其溶解；在氬氣保護(hù)下用2mL乙酸乙酯把l.leq的DMC溶解；一5。C，攪拌及氮?dú)?保護(hù)下把DMC的乙酸乙酯溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的三乙胺溶液中，滴加完畢后，一5 "C攪袢12min。
在氬氣保護(hù)下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙酸乙酯中，然后在攪拌及氬氣保護(hù)下把 該叔丁醇的乙酸乙酯溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護(hù)下，把l. leq DMC溶解在2mL乙酸乙酯中，—5°C，攪拌及氬氣保護(hù)下把DMC 的乙酸乙酯溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，一5'C攪拌20min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固體193mg，產(chǎn)率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82 (br, 1H, H-3)， 6. 89， 6. 86*(d, JP—H=700Hz, 1H, P_H)， 7. 34(d， J=20Hz, 1H， H-6)， 7. 04(s, 1H, H-l， )， 6. 35-6. 32( m'lH,H-2， )' 5.93-5.91(m, 1H,H-3， )' 5. 01 (br, 1H， H_4， )' 4. 33-4. 18(m, 2H'm， 2H, H-5') 1.92(s， 3H,CHa-5)， 1. 54(s, 9H， -C(CH3):,)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.68， 150.79， 135.90, 133.13, 127.61， 111,24, 89.56' 84.82， 84.62， 65,16, 30. 45-30. 33 (3C)， 12. 41ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 4.70, 3.97 ppm; ESI陽(yáng)MS: 367. 1 (M+Na)+。
本實(shí)施例6所用的三乙胺可用三甲胺代替。
實(shí)施例7
在氬氣保護(hù)下，把224mg (lmraol).d4T溶解在5mL三丁胺中，然后加入1. leq的亞磷酸， 25。C攪拌使其溶解；在氬氣保護(hù)下用2mL乙腈把l.leq的DMC溶解；一5'C，攪拌及氮?dú)獗Ｗo(hù) 下把DMC的乙腈溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的三丁胺溶液中，滴加完畢后，一5。C攪拌12min。
在氬氣保護(hù)下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙腈中，然后在攪拌及氬氣保護(hù)下把該叔 丁醇的乙腈溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護(hù)下，把l. leqDMC溶解在2mL乙腈中，一5。C，攪拌及氬氣保護(hù)下把DMC的乙 腈溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，一5。C攪拌20min。
反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固體182mg，產(chǎn)率53%?！紿 NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82(br， 1H， H-3)， 6. 89, 6. 86* (d， JP—H=700Hz， 1H, P-H) ， 7. 33 (d' J=20Hz， 1H, H_6), 7. 04 (s, 1H， H-1， ) ， 6. 34-6. 31 ( m，lH,H-2， )，5. 93-5. 91(m, 1H,H—3, ), 5. 01 (br， 1H, H-4， )， 4. 32_4. 17(m， 2H， m， 2H, H—5，)， 1. 92 (s, 3H， CH3-5), 1. 54 (s， 9H, -C (Cft)》ppm; 13C NMR (100MHz ， CDC13): S = 163. 64， 150.78, 135.90, 133.13， 127.61， 111.24， 89.56, 84.81， 84.62， 65.16， 30. 46-30. 33 (3C)， 12. 40ppm; 31PNMR(160MHz， CDC13): S = 4. 70， 3. 97 ppm; ESI-MS: 367. 1 (M+Na)+。
*上述所有磷譜均用85%的磷酸作外標(biāo)。
權(quán)利要求
1、d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于其合成路線為式中，Base指有機(jī)堿。
2、 如權(quán)利要求l所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于包括如下步驟:1) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1.0eq的2'，3'-雙脫氫-2'，3'-雙脫氧胸苷溶解在液態(tài)有機(jī)堿 中，再加入1.0 1.2eq的亞磷酸，攪拌使其溶解，得溶液A;2) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1.0 1.5eq的氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第 l有機(jī)溶劑中，得溶液B，然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液B加到溶液A中反應(yīng)，得反 應(yīng)液，直到點(diǎn)板發(fā)現(xiàn)2'， 3'-雙脫氫-2'， 3，-雙脫氧胸苷消失；3) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把0.8 1.0eq的異丙醇溶解在第2有機(jī)溶劑中，得溶液C， 然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液C加至反應(yīng)液中，得溶液D;4) 在氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第3 有機(jī)溶劑中，得溶液E，然后在攪拌及氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)下將溶液E加到溶液D中反應(yīng)，直到 點(diǎn)板發(fā)現(xiàn)式d4T-5'-氫亞磷酸單酯消失；5) 反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后用第4有機(jī)溶劑溶解，并用硅膠柱 層析純化，即分離出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
3. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于所述的液態(tài)有 機(jī)堿選自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2,3-二甲基吡啶,2,4-二甲基吡啶， 2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4，6-三甲基吡啶，六氫吡啶，四 氫吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺中的至少一種。
4. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于在步驟2)中， 所述的反應(yīng)的溫度為一10 60'C，反應(yīng)的時(shí)間為2 30min。
5. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第l有機(jī)溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。 '
6. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第2有機(jī)溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
7. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于在步驟4)中， 所述的反應(yīng)的溫度為一10 6(TC,反應(yīng)的時(shí)間為2 30min。
8. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第3有機(jī)溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲垸，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
9. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-i亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第4有機(jī)溶劑 選自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
全文摘要
d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，涉及一種核苷氫亞磷酸酯。提供一種d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法。將2’，3’-雙脫氫-2’，3’-雙脫氧胸苷溶解在有機(jī)堿中，加入亞磷酸溶解得溶液A；將氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第1有機(jī)溶劑中得溶液B，將溶液B加到溶液A中反應(yīng)得反應(yīng)液，將異丙醇溶解在第2有機(jī)溶劑中得溶液C，將溶液C加至反應(yīng)液中得溶液D；將氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第3有機(jī)溶劑中得溶液E，將溶液E加到溶液D中反應(yīng)，直到點(diǎn)板發(fā)現(xiàn)式d4T-5′-氫亞磷酸單酯消失；過(guò)濾除去固體，濾液除去溶劑后用第4有機(jī)溶劑溶解，用硅膠柱層析純化即得。
文檔編號(hào)C07H19/00GK101100478SQ20071000926
公開(kāi)日2008年1月9日 申請(qǐng)日期2007年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月24日
發(fā)明者吳劍彬, 果 唐, 趙玉芬, 祥 高 申請(qǐng)人:廈門(mén)大學(xué)