專利名稱：取代的聯(lián)芳雜環(huán)衍生物作為蛋白激酶抑制劑治療癌癥及其他疾病的制作方法
取代的聯(lián)芳雜環(huán)衍生物作為蛋白激酶 抑制劑治療癌癥及其他疾病發(fā)明背景c-Abl酪氨酸'激酶抑制劑，ST1571 (Gleevec or Imanitib， Novartis Pharma)用于治療慢性粒細(xì)胞白血病(CML)的臨床成功促 進(jìn)了以蛋白激酶抑制劑(PKIs)作為對于其他類型白血病以及實體腫 瘤的靶向療法的發(fā)展。CML是一種罕見的、惡性的骨髓增生障礙，其 特點是造血干細(xì)胞中發(fā)生了 (9:22) (q34;ql l)染色體(Ph染色體) 易位，以及蛋白酪氨酸激酶Bcr-Abl組成上的激活(Heisterkamp N， Stam K， Groffen J， de Klein A and Grosveld G 1985 Structural organization of the bcr gene and its role in the Ph ， translocation. Nature 315:758—61; Barila D and Superti-Furga G 1998.這種染色體缺陷在所有慢性粒細(xì)胞白血病患者中出現(xiàn)頻率為 95%，在成年急性淋巴細(xì)胞白血病患者中出現(xiàn)頻率為30%_50%。 An intramolecular SH3-domain interaction regulates c-Abl activity. Nature Genetics 18:280-2 ) 。 CML占所有惡性腫瘤的0.4%，流行病 學(xué)為每10, OOO人中有3-5例 (Baker DE 2002 Imatinib Mesylate. New Drug Review.Reviewsin Gastroenterological disorders. 2:75-86)。用Gleevec來抑制Abl酪氨酸激酶對于治療'tt性粒細(xì)胞白血病 雖然是有效的，但卻沒有用于治療更為普遍的急性粒細(xì)胞白血病(AML ) 的靶向療法。另外，Gleevec對于治療惡化以及白血病急性發(fā)作雖然 是有效的，但出現(xiàn)的耐藥性是一個問題。作為一種更加普遍的疾病， AML占所有成人白血病病例的很大比例，在美國每年有大約7M0名受 害者，并且全世界范圍內(nèi)的數(shù)目更大(Seppa N 2002 Smart drugs:Leukemia treatments nearing prime time. Science 161: 2-4)。在美國，每年有大約10， 000名新增AML病例，全世界則有 200,000例。百分之四十的AML患者具有一種突變的Flt-3酶，這 樣該酶具有構(gòu)成性的活性，導(dǎo)致酪氨酸激酶的活化和不可控制的骨髓 干細(xì)胞增生(Abu-Duhier FM， Goodeve AC, Wilson GA et al. 2000)。 在成人AML患者中的Flt-3內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)突變形成了一種高危度人 群組(Br. J Haematol 111:190-195)。這種致命的血液癌癥預(yù)后非 常差，患者五年存活率只有14%。因此，需要對AML的早期和晚期階 段均能治療的有效藥劑。Fit-3激酶是疾病發(fā)展所必需的，因此也就 成了發(fā)展新療法的 一個理想靶向。Flt-3 (FMS樣酪氨酸激酶3)是一種受體酪氨酸激酶，它催化蛋 白質(zhì)酪氨酸殘基的羥基基團(tuán)的磷酸化。受體酪氨酸激酶包括一大族的 具有不同生物學(xué)功能的跨膜受體。目前，至少有19種不同的亞族的受 體酪氨酸激酶已被鑒定出來。Flt-3是血小板衍生的生長因子(PDGFR ) 受體酪氨酸激酶亞族的成員之一，并且與KIT、 FMS、以及PDGFR具有 相同的結(jié)構(gòu)特征。在結(jié)構(gòu)上，F(xiàn)lt-3在胞外區(qū)具有五個免疫球蛋白樣 結(jié)構(gòu)域， 一個單次跨膜序列，以及細(xì)胞內(nèi)的一個短的近膜蛋白，其下 緊接著一個胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域(Levis M， Allebach J, Tse K-F， Zheng R， Baldwin BR， Douglas Smith B， Jones-Bolin S， Ruggeri B, Dionne C and Small D (2002))。Flt-3耙向的酪氨酸激酶抑制劑對白血病細(xì)胞在體內(nèi)和體外均具 有細(xì)胞毒性(Blood 99(11): 3885-3891)。其活性信號通過自身磷酸 化和胞內(nèi)生物化學(xué)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的蛋白磷酸化來轉(zhuǎn)導(dǎo)，這促進(jìn)了不 可控制的細(xì)胞增殖并抑制凋亡。當(dāng)與Fit-3配體結(jié)合以后，野生型受 體發(fā)生二聚化，通過所產(chǎn)生的磷酸化來激活其酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。 RAS-GAP、 PLC、 PI3-激酶、STAT5、以及ERK1/2是與Flt-3的活化相關(guān)聯(lián)的重要信號蛋白。其他受體酪氨酸激酶家族的亞家族成員，包括EGF受體酪氨酸激 酶，胰島素受體酪氨酸激酶和FGF受體酪氨酸。例如，EGF受體酪氨 酸激酶在許多癌癥如肺癌和乳腺癌中都是過表達(dá)的。Astrazeneca公 司生產(chǎn)的Iressa、 Genentech公司生產(chǎn)的Hercept in (對HER2-陽性 轉(zhuǎn)移的乳腺癌)和OSI-Genentech公司生產(chǎn)的Tarceva (對于非小細(xì)胞 肺癌)等都是針對EGFR受體的特異性靶向藥。另外幾種正在臨床研發(fā) 的小分子受體酪氨酸激酶抑制劑包括SU5416, SU6668和SU1 1248 (Sugen—Pfizer 乂>司)，ZD-6474 (Astrazeneca /〉司)和PTK787/ZK 222584 (Novartis公司)，并且能抑制VEGFR、 FGFR、 PDGFR和c-kit 等多種激酶。另外，也進(jìn)行了一些鑒定小分子作為蛋白激酶抑制劑的 其他嘗試。例如，雙單環(huán)，雙環(huán)和雜環(huán)芳香族化合物 (PCT W0 92/20642),乙烯基氮雜p引咮衍生物(PCTWO 94/14808)和l-環(huán)丙基-4-砒啶基-喹啉酮(美國專利號No. 5， 330， 992和苯乙烯基化合物I (美 國專利號No. 5, 217, 999),苯乙烯基取代的砒啶化合物(美國專利號 No. 5, 302,606)，會唑啉4汙生物(西班牙專利號No. 0566 266 Al)，竭 化吲哚及硒化物(PCT W0 94/03427)， 三環(huán)多聚水化羥甲唑啉化合物 (PCT W0 92/21660)，苯甲基膦酸化合物(PCT WO 91/15495)都已報道作為蛋白酪氨酸激酶抑制劑潛在地用于癌癥的治療。另外，苯喁唑， 苯并喁唑和苯并咪唑衍生物(PCT W0 02/072543 A2)也已經(jīng)報道有 助于癌癥及其他疾病的治療，但是卻不適合于作為特定激酶的靶抑制 劑，這也是許多其他雜環(huán)化合物在專利中說明的情況。本發(fā)明是關(guān)于 一 類可獲專利的帶有特定取代苯喁唑衍生物的激酶 抑制劑，對Flt-3具有高效的抑制作用，能在體內(nèi)和體外特異性地殺 傷攜帶Flt-3突變的白血病細(xì)胞。另外，這些化合物在體外實驗中也 能有效地抑制c-Kit (包括Gleevec耐受的突變型)，和/或RET,和/ 或PDGFRp (血小板衍生生長因子受體P )，因為這些激酶在一些癌癥中對其增殖發(fā)揮著重要作用，所以此類抑制劑可預(yù)期用于對這些癌癥的治療。這些化合物在結(jié)構(gòu)上不同于PCT W0 02/072543 A2所指的廣 泛的苯p惡唑衍生物。那些化合物被報道因具有顯著的細(xì)胞毒性而具有 廣泛的抗癌活性。在此所述化合物具有很好的選擇性抗癌活性，因此 在實驗中它們能殺傷攜帶有Flt-3突變型的白血病細(xì)胞系而不殺傷其 他的細(xì)胞系。因此，在此所述化合物在結(jié)構(gòu)上，以及因為具有選擇性 抗癌的活性，不同于W0 02/072543 A2所報告的化合物。只有靼向抗 癌活性而不是廣泛的抗癌活性是其一個主要優(yōu)點，因為這種化合物有 希望具有最小的副作用和毒性。特別說明的是，這種體外抑制Flt-3 的化合物，在體內(nèi)則是攜帶Flt-3突變體的人類AML腫瘤生長和惡化 的抑制劑。此外，這些雜環(huán)化合物中的一些還顯示出具有其他類型激 酶抑制劑的作用，這些激酶包括c-Abl， PDGFR， c-Kit和/或RET，它 們都是已知參與了CML、胃腸間質(zhì)性腫瘤，和/或曱狀腺癌的發(fā)生。已 發(fā)現(xiàn)的其他在體外被高親和力抑制的激酶有AURKA、 FGFR3、 JAK2、 PDGFRp、 RET和VEGFR。這樣，本申請中一般的結(jié)構(gòu)和特異的例子涵 蓋了一種新類型的激酶抑制劑各項細(xì)節(jié)，可做為"靶向抗癌"藥劑， 并通過限定的機(jī)制起作用，抑制特定的激酶，并因此顯著的區(qū)別于現(xiàn) 有的用于治療粒細(xì)胞白血病和其他癌癥的藥物。因此，在此所述雜環(huán) 化合物有助于治療一些因不可控制的增殖引起的疾病，包括AML、 CML、 胃腸間質(zhì)性癌、甲狀腺癌和其他癌癥以及其他如炎癥、動脈粥樣硬化 等疾病。此外，因為在此所分析的化合物是具有良好的口服生物利用 率的選擇性的激酶抑制劑，因此可期望這些化合物具有有限的副作用， 適用于治療多種癌癥，單獨或者與其他的藥物聯(lián)合用于其他癌癥的治 療。因此，本發(fā)明也涉及該化合物用于治療實體瘤及其他疾病的用法。 還描述了包含這些化合物的藥物組合物，治療疾病的方法以及它們的 制備方法。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明是針對特定的可獲專利的取代的苯并喁唑衍生物，這些衍生物具有蛋白激酶(PK)抑制活性或者調(diào)節(jié)能力，因此有助于治療PK 活性異常所導(dǎo)致的障礙。本發(fā)明的一方面涉及以下化學(xué)式的化合物、或者其同分異構(gòu)體、 代謝產(chǎn)物、多型變體、藥物前體、或它們的鹽<formula>formula see original document page 12</formula>其中"——"存在或不存在; W為(a)或(b) (a)<formula>formula see original document page 12</formula>A為-CR21R22-、 -NR23-、 -0-或-S-； B為 -OR24、 -SR25、 -NR28R295 D和E共同或獨立地為-CR3。-或-N-; Ar為(c)或(d)<formula>formula see original document page 12</formula>(c)<formula>formula see original document page 12</formula>(d)<formula>formula see original document page 13</formula>并且R1 ， R2 ， R3 ， Rn ， R12 ， R21 ， R22 ， R23 ， R24 ， R25, R28 ， R29和Ro。獨立 地或共同為氫、烷基、取代的烷基、卣代烷基、烯基、取代的烯基、 炔基、取代的炔基、卣基、氰基、硝基、羥基、?；⑷〈孽；?酰氧基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、 烷基脲、芳基脲、氨基曱酸烷基酯、氨基甲酸芳基酯、雜芳基、烷氧 基、取代的烷氧基、面代烷氧基、硫代烷基、硫代g代烷基、羧基、 烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、或者取 代的二垸基羧酰胺。本發(fā)明的另 一方面提供這些化合物的合成方法,另 一方面，本發(fā)明涉及用在此所述化合物來抑制不可控制的細(xì)胞 增殖，例如各種類型的癌癥和白血病，也包括對炎性疾病或動脈粥樣 硬化的治療。本發(fā)明還涉及抑制不可控制的細(xì)胞增殖的一些方法，例 如， 一種癌癥或白血病，經(jīng)診斷需要此類抑制劑，對一個哺乳動物， 優(yōu)選一個人服用藥物。本發(fā)明還提出了治療不可控制的細(xì)胞增殖的一 些方法，例如癌癥和白血病，包括對確診患有此類疾病的一個哺乳動 物服用本發(fā)明的一種化合物的一種有效劑量進(jìn)行治療，也包括治療炎 性疾病的一些方法，以及對確診患有某種炎性疾病的一種哺乳動物使 用本發(fā)明的 一種化合物的 一種有效劑量進(jìn)行治療。另一方面，本發(fā)明涉及藥物組合物，包括用一種或多種制藥上允 許的載體、輔料等與在此所述的一種化合物構(gòu)成的混合物。 一個相關(guān) 的方面涉及藥盒，這包括，例如， 一種關(guān)于本發(fā)明的藥物組合物的一個單位劑量包裝到一種適當(dāng)?shù)娜萜髦?例如玻璃瓶)，這種包裝可能 任選包裝成盒或其他類似的包裝，用于使用前的貨運或者儲存。在本 發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，這些藥盒通常還包括一份包裝插頁，提供該 特定化合物、它的用法以及用途的細(xì)節(jié)。附圖簡要說明

圖1示出化合物1的激酶抑制特性輪廓。圖-2示出化合物2、 3、 4和5對MV4;11人AML細(xì)胞系的殺傷。 圖3示出選擇性細(xì)胞殺傷。化合物1特異地殺傷AML細(xì)胞(MV4; 11 )而不是前列腺(PC-3 )和胰腺細(xì)胞(Bx-PC-3)。 圖4示出化合物2、 5和8的激酶抑制特性輪廓。 圖5示出化合物2在大鼠體內(nèi)口服生物利用度和藥物代謝動力學(xué)。 圖6示出化合物2在摘除胸腺的棵小鼠模型中抑制AML腫瘤進(jìn)展情況。圖7示出化合物2在棵鼠模型中抑制已建立的的巨大AML腫瘤情況。圖8示出化合物5的選擇性細(xì)胞殺傷。圖9示出化合物5在大鼠體內(nèi)的口服生物藥效率和藥物代謝動力學(xué)。圖IO示出化合物5在棵鼠模型中的有效性研究。圖11示出化合物2和化合物5在棵鼠模型中減少腫瘤生長的比較。圖12示出化合物5在棵鼠模型中對已建立的巨大腫瘤的抑制作用。圖13示出在此披露的具有化學(xué)式1 (其中m是0， n是1)的一 些化合物的合成途徑的一種代表性方案。
具體實施方式
本發(fā)明提供了一種有助于預(yù)防、減輕或在其他方面治療癌癥的化合物，尤其是對人類和其他哺乳動物的急性粒細(xì)胞白血病、胃腸癌癥(包括對Gleevec耐受的突變型)、特定的甲狀腺癌。另外，已經(jīng) 證明本發(fā)明中的這些化合物有口服生物利用度，因為無論是單獨或者 與一種賦形劑一起口服服藥后，在血漿中都具有很高的水平?？诜?物利用度使其能口服治療慢性疾病，因為口服具有可自我服藥和減少 其他方式給藥產(chǎn)生的費用的優(yōu)點。定義在在此描述的說明書和化學(xué)式中，對下列術(shù)語定義如下。除了這 些術(shù)語之外，如有必要，將在說明書的其他地方定義了其他術(shù)語。除 非在此另有特別說明，本說明書中出現(xiàn)的行業(yè)術(shù)語仍然具有它們公認(rèn) 的在本行業(yè)中的意義。"藥劑"是指一種用來達(dá)到預(yù)期治療目的而給予的一種活性成份。術(shù)語"烷基"是指一種包含1到12個碳的直鏈或支鏈基團(tuán)，例如 甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔 戊基、正戊基等。術(shù)語"烯基"表示一種包含l到12個碳和碳-碳雙 鍵的直鏈或支鏈碳?xì)浠衔锘鶊F(tuán)，例如乙烯基、烯丙基、2-丁烯基、3- 丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4- 己烯基、5-己烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、5-庚烯基、 6-庚烯基等。術(shù)語"烯基"包括直鏈和支鏈的二烯基和三烯基。術(shù)語"炔基"表示一種包含1到12個碳和一個碳-碳叁鍵的直鏈或支鏈碳 水化合物基團(tuán)，例如乙炔基、l-丙炔基、2-丙炔基、l-丁炔基、2-丁 炔基、3-丁炔基、l-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-己 炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基、5-己炔基等。術(shù)語"炔基" 包括二炔或者三炔。術(shù)語"取代的烷基"表示一種上述定義的包含1到12個碳的基團(tuán)被一個或多個基團(tuán)，但是優(yōu)選一個、兩個或者三個選自以下的基團(tuán)所取代，包括羥基、卣基、環(huán)烷基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、 酰氧基、硝基、氰基、羧基、環(huán)氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧 酰胺、二烷基羧酰胺、取代的二烷基羧酰胺、烷基磺?；?、烷基亞磺 酰基、硫代烷基、疏代卣烷基、烷氧基、取代的烷氧基、或者卣烷氧 基。當(dāng)出現(xiàn)多于一個基團(tuán)時它們可以相同或不同。術(shù)語"取代的烯基"表示一種上述定義的包含1到12個碳的基團(tuán) 被一個或多個，但是優(yōu)選一個、兩個或者三個選自以下的基團(tuán)所取代， 包括卣基、羥基、環(huán)烷基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、酰氧 基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、 二烷基羧酰胺、取代的二烷基羧酰胺、烷基磺?；⑼榛鶃喕酋；?、 硫代烷基、硫代g烷基、烷氧基、取代的烷氧基或者面代烷氧基。當(dāng) 出現(xiàn)多于一個基團(tuán)被取代的時候，它們可以相同或不同。術(shù)語"取代的炔基"表示一種包含1到8個上述定義的基團(tuán)被一 個或者多個，但是優(yōu)選一個或者兩個選自以下的基團(tuán)所取代鹵基、 羥基、環(huán)烷基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、酰氧基、硝基、氰 基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰 胺、取代的二烷基羧酰胺、烷基磺酰、烷基亞磺酰、硫代烷基、硫代 卣烷基、烷氧基、取代的烷氧基或者卣代烷氧基。術(shù)語"環(huán)烷基"表示一個含有3到8個碳的環(huán)狀烷基的部份 (moiety)，在此的烷基是上述定義的，包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊 基、cyclopenyl、環(huán)己基、環(huán)庚基等基團(tuán)。術(shù)語"取代的環(huán)烷基"表 示一種上述定義的環(huán)烷基進(jìn)一步被一個或者多個下述基團(tuán)取代，選自 卣基、烷基、羥基、烷氧基、取代的烷氧基、羧基、烷氧羰基、烷基 羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、取代的二烷基羧酰胺、 氨基、單取代氨基、或者二取代氨基。當(dāng)環(huán)烷基被多于一個基團(tuán)取代時，它們可以相同或不同。術(shù)語"聯(lián)合治療"是指使用至少兩種不同的治療方法來達(dá)到既定 治療效果的一種治療方案。例如， 一種聯(lián)合治療方案可以包括服用兩 種或以上不同化學(xué)性質(zhì)的藥物，如使用本發(fā)明中的 一種化合物和另一 種化療藥物。作為替代， 一種聯(lián)合治療方案可以包括服用一種或多種 本發(fā)明的藥物，單獨或者聯(lián)合其他藥物以及治療方法，如手術(shù)、放射 等。在服用兩種或以上不同化學(xué)藥物的情況下，眾所周知其活性成分 可以作為同一種或不同種化合物的部分來服用。當(dāng)作為不同的化合物 服用時，化合物中包括的不同活性成分可以同時或者不同時、經(jīng)過相 同或不同的途徑、使用相同或者不同的給藥方案服用，這些都取決于 不同的情況和主管醫(yī)師決定。同樣，當(dāng)一種或多種藥物和諸如精神分 析等一起實施時，這種(這些)藥物可以在受治療者治療期間的之前、 之中以及之后服用。相反，"單一療法，，是指一種基于服用一種有確 切療效的化合物的治療方案，無論是作為單次劑量還是長時間多次劑 量服用。術(shù)語"環(huán)烯基"表示一個包含3到8個碳的基團(tuán)，例如環(huán)丙烯基、 l-環(huán)丁烯基、2-環(huán)丁烯基、l-環(huán)戊烯基、2-環(huán)戊烯基、3-環(huán)戊烯基、 1-環(huán)己烯基、2-環(huán)己烯基、3-環(huán)己烯基等。術(shù)語"取代的環(huán)烯基"表 示一個上述定義的環(huán)烯基進(jìn)一步被一個或多個選自以下的基團(tuán)所取 代卣基、烷基、羥基、烷氧基、取代的烷氧基、卣代烷氧基、羧基、 烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷羧酰胺、取代的二 烷羧酰胺、氨基、單取代氨基或者二取代氨基。當(dāng)環(huán)烯基被多于一個 基團(tuán)取代時，它們可以相同或不同。在此所用的術(shù)語"烷氧基"表示上述定義的一個烷基基團(tuán)直接與 一個氧結(jié)合，如曱氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、 仲丁氧基、異丁氧基等。術(shù)語"取代的烷氧基，，表示一個上述定義的烷氧基團(tuán)被一個或多個基團(tuán)，優(yōu)選一個或兩個下列基團(tuán)取代，選自 羥基、環(huán)烷基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、酰氧基、硝基、氰 基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰 胺、取代的二烷基羧酰胺、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硫代烷基、 硫代卣烷基、烷氧基、取代的烷氧基或者卣代烷氧基。當(dāng)出現(xiàn)多于一 個基團(tuán)被取代時，它們可以相同或不同。術(shù)語"單取代氨基"表示一 個氨基被選自以下的基團(tuán)所取代烷基、取代的烷基或者芳烷基，其 中的這些術(shù)語和通篇中的術(shù)語意義相同。術(shù)語"二取代氨基"表示一個氨基被兩個相同或不同的下列基團(tuán) 取代，選自芳香基、取代的芳香基、烷基、取代的烷基或者芳烷基， 其中的這些術(shù)語和通篇定義的術(shù)語意思相同。 一些實例包括二甲氨 基、甲基乙基氨基、二乙氨基等。術(shù)語"卣烷基"表示一個上述定義的烷基基團(tuán)被一個或者多個鹵 基優(yōu)選氟取代，例如三氟甲基、五氟乙基等。術(shù)語"卣代烷氧基"表示一個上述定義的烷氧基直接與一個氧結(jié) 合形成的三氟甲氧基、五氟加氧基等。術(shù)語"酰基"表示一個包含1到 8個碳的基團(tuán)，如曱?；⒁阴；?、丙?；?、丁?；惗□；⑽??；?、己酰基、庚酰基、苯曱酰基等。術(shù)語"酰氧基"表示上述定義 的一個包含l到8個碳的?；鶊F(tuán)直接和一個氧結(jié)合，如乙酰氧基、 丙酰氧基、丁酰氧基、異丁酰氧基、苯甲酰氧基。術(shù)語"芳香基"表 示一個包含6到IO個碳的芳香基團(tuán)，包括苯基和萘基。術(shù)語"取代 的芳香基"表示一個上述定義的芳香基團(tuán)被一個或者多個基團(tuán)取代， 選自羥基、環(huán)烷基、芳香基、取代的芳香基、雜芳基、雜環(huán)、取代 的雜環(huán)、氨基、1-單取代氨基、二取代氨基、酰氧基、硝基、氰基、 羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、 取代的二烷基羧酰胺、烷基磺酰、烷基亞磺酰、硫代烷基、烷氧基、取代的烷氧基或者卣代烷氧基，其中這些術(shù)語在這里定義。術(shù)語"卣 化"或"鹵基"是指氟、氯、溴或者碘基團(tuán)。術(shù)語"硫代烷基"表示一個包含l到8個碳、直鏈或支鏈的硫代 物基團(tuán)。實例包括硫代曱基、乙硫醚、硫代異丙基等。術(shù)語"硫代卣 烷基"表示一個硫代烷基基團(tuán)被一個或多個囟基取代。實例包括三氟 甲硫基、1， 1-二氟硫代乙基、2, 2， 2-三氟硫代乙基等。術(shù)語"烷氧羰基"是指一個羧酸的烷基酯，其中烷基與上文中的 定義相同。實例包括曱酯基、乙氧羰基、異丙氧羰基等。術(shù)語"烷基 氨基酰，，表示一個單獨的烷基基團(tuán)直接與酰胺的胺結(jié)合，其中烷基與 上文中的定義相同。實例包括N-曱基羧酰胺、N-乙基羧酰胺、N-異丙 基羧酰胺等。術(shù)語"取代的烷基羧酰胺"表示一個單獨的"取代的烷 基"基團(tuán)，如上文所定義的，連接到酰胺的胺上。術(shù)語"二烷基羧酰胺"表示兩個相同或者不同的烷基或者芳烷基 團(tuán)連接到酰胺的胺上，其中的烷基與上文中的定義相同。實例包括 N，N-二曱基羧酰胺，N-甲基-N-乙基羧酰胺等。術(shù)語取代的"二烷基羧酰胺"表示兩個烷基基團(tuán)連接到酰胺的胺 上，這里的一個或者兩個基團(tuán)都是以上定義的一個"取代的烷基"。 眾所周知，這些基團(tuán)可以相同或不同。實例有N，N-二芐基羧酰胺、N-千基-N-甲基羧酰胺等。術(shù)語"烷基酰胺"表示一個酰基基團(tuán)連接到一個胺或者單烷基胺 上，其中?；c上文中的定義相同。"烷基胺"的實例包括一酰胺基、 丙酰胺基等。術(shù)語"芳烷基"是指一個烯基，如-CHf ，被上文中定義的一個有取代或無取代的芳基基團(tuán)取代，"芳烷基"的實例包括千基和苯乙烯等。在說明書和結(jié)尾處的權(quán)利要求中用到的一種化學(xué)物質(zhì)的一個殘 基，是指在特定的化學(xué)反應(yīng)中或后繼的合成中或者化學(xué)產(chǎn)物中的合成產(chǎn)物的部份(moiety),無論這種部份是否真正的從化學(xué)物質(zhì)中得到。 這樣，在聚酯中的一個乙二醇?xì)埢硎揪埘ブ械囊粋€或多個 -OCH2CH20-重復(fù)單位，無論乙二醇是否參與了聚酯的合成。同樣，在 一種化學(xué)化合物中的-2， 4-噻唑烷二酮類殘基指一個或多個-2， 4-多唑 烷二酮部份(moiety )，無論這個殘基是否是從-2， 4-遙唑烷二酮類反 應(yīng)生成這種化合物中獲得的。根據(jù)本發(fā)明的一種"可獲專利的"組合物、方法、機(jī)器或制造物 體是指在進(jìn)行分析之時，該主題滿足對于專利性的所有法定要求。例 如，針對新穎性、非顯而易見性、等，如果后來的調(diào)查發(fā)現(xiàn)包含一個 或多個實施方案的一個或多個權(quán)利要求不支持新穎性、非顯而易見性 等，該(這些)權(quán)利要求受"可獲專利的"實施方案定義的限制，明 確地排除不可獲專利的該(那些)實施方案。而且，在此所附的這些 權(quán)利要求應(yīng)解釋為既能提供最寬的合理范圍，又要確保其有效性。此 外，如果有一個或多個專利性所需的法定要求被修改，或者從本申請時，評估一個具體的法定要求是否滿足專利性的標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生變化，那么 該(這些)權(quán)利要求必須用以下方式作出解釋U)保持其有效性和 (2)在此情況下能提供最寬的合理范圍。"受試者"或者"患者"是指一個確實需要治療，能受本發(fā)明中 的分子影響的一個動物。能據(jù)本發(fā)明進(jìn)行治療的動物包括脊推動物， 比如牛、犬、馬、貓、羊、豬，并且靈長類動物(包括人類和非人類 的靈長類動物)是特別優(yōu)選的例子。這里必須要指出，在說明書和所附權(quán)利要求中用到的單數(shù)形式的 "一"、"一個"和"某個"也包括其復(fù)數(shù)指示物，除非上下文另有 明確的說明。因此，如當(dāng)提及"一種芳香族化合物"時包括多種芳香 族化合物的混合物。組合物本發(fā)明所披露的一些實施方案涉及方程式(1):<formula>formula see original document page 21</formula>A為-CR21R22-、 -NR23-、 -0-、或-S-; B為-01124、 -SR25、 _NR28R29; D和E共同或獨立地為-CR3。-，或-N-; L為-CH廣;Ar為化學(xué)式(c)或(d)(c)<formula>formula see original document page 22</formula>m為0到1; n為1到2;Ri ， R2 ， R3， Rii， R丄2， R21， R22， R23， R〗"R25， R2" R29和R30獨立地或者共同為氫，烷基、取代的烷基、卣烷基、烯基、取代的烯基、 炔基、取代的炔基、卣基、氰基、硝基、羥基、酰基、取代的?；?酰氧基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、 烷基脲、芳基脲、烷基氨基甲酸酯、芳基氨基甲酸酯、雜芳基、烷氧 基、取代的烷氧基、g代烷氧基、硫代烷氧基、疏代g基烷氧基、羧 基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺或者 取代的二烷基羧酰胺，或者其一個同分異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物、多型變體、 藥物前體，或者鹽。本發(fā)明還包括發(fā)明中化合物的其他形式，包括藥 物前體形式。在在此，"藥物前體"是指包含一個或者多個功能性基 團(tuán)的化合物，在體內(nèi)能被去除或者被修飾從而在體內(nèi)形成一種具有治 療作用的分子。"多型變體"是指一種具有化合物與另一種化合物相 比，具有相同的化學(xué)組成(也就是說，屬于同一種化學(xué)種類)只是具 有不同的晶體結(jié)構(gòu)。在一些實施方案中，當(dāng)W為2，4-噻唑烷二酮并且"——，，存在時， 化合物為一種具有以下結(jié)構(gòu)分子式的亞千基(benzilidine)化合物(E)<formula>formula see original document page 23</formula>在一些實施方案中，當(dāng)W為2，4-噻唑烷二酮并且"——"不存在 時，化合物為一種具有以下結(jié)構(gòu)分子式的節(jié)基類化合物<formula>formula see original document page 23</formula>在本發(fā)明的另一個實施方案中，當(dāng)W為(b)時，化合物為一種具有以下結(jié)構(gòu)分子式的烷基乙縮醛<formula>formula see original document page 23</formula>其中Ru和R12獨立地或共同為氬，烷基、取代的烷基、卣烷基、 烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、卣基、氰基、硝基、羥基、 ?；?、取代的?；?、酰氧基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、烷基 磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、芳基脲、烷基氨基曱酸酯、芳基氨基 甲酸酯、雜芳基、烷氧基、取代的烷氧基、卣代烷氧基、硫代烷氧基、 硫代面基烷氧基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、 二烷基羧酰胺或者取代的二烷基羧酰胺。在另一實施方案中，A是-CR21R22-， -NR23-， -0-，或者是-S-; B為 -OR24， -SR25， -NR2SR29， D和E獨立地或共同為-CR3。-，或-N-。優(yōu)選的雜二環(huán)殘基可選自<formula>formula see original document page 24</formula><formula>formula see original document page 25</formula>本發(fā)明的一些實施方案中，在此披露的具有化學(xué)式U)的化合物 可能存在(1)和(2)的互變異構(gòu)體，這也屬本發(fā)明范圍之內(nèi)。R2(2)在本發(fā)明的一些實施方案中，在此披露的包含2，4-噻唑烷二酮的 化合物可能存在(XI)， ((XII)和(XIII)的互變異構(gòu)體，這也屬本發(fā)明 范圍之內(nèi)。<formula>formula see original document page 26</formula>當(dāng)"——"存在時，在此所示的包含的2，4-瘞唑烷二酮化合物 的Z和E構(gòu)型都屬本發(fā)明范圍之內(nèi)。Z和E構(gòu)型化學(xué)式都可能分別具 有下列結(jié)構(gòu)在在此披露的化合物可能包括這些化合物的鹽類，例如正離子鹽。 可能與本發(fā)明化合物結(jié)合形成藥用鹽的陽離子包括堿金屬，例如鈉和 鉀；堿土金屬類，例如鈣；三價金屬類，例如鋁。對于選擇陽離子的 唯一限制條件是不能增加毒性。因為化合物具有上述互變異構(gòu)現(xiàn)象， 單價、二價或三價鹽可能依賴于相應(yīng)的堿金屬。而且，在此所示的一 種或多種化合物可能包括在該化合物內(nèi)與氮以及鹽酸、羧酸等酸反應(yīng) 生成的鹽，例如胺、苯胺、取代的苯胺、氮苯基等。因此，所有可能 的與互變異構(gòu)體相關(guān)的鹽類以及與氮和酸反應(yīng)生成的一種鹽類都屬于 本發(fā)明范圍之內(nèi)。本發(fā)明提供了，但不是限于，在各個實例中以及以下提到的這些特定的化合物，以及它們在藥學(xué)上能允許的一種鹽: 這里"-----"可有可無，m為o, n為i
<formula>formula see original document page 27</formula>
5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-苯并p惡唑-5-基)-嘧啶-3-基亞曱 基]-噻p惡唑-2，4-二酮5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基]-賽唑烷-2，4-二酮05- [6- (2-氨基-7-異丙氧基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲基〗-瘞唑烷-2,4-二酮[5-(5-Diethoxymethy卜pyridin-2-基)-7-異丙氧基-苯并"惡哇 -2-基]-乙基-胺o5- [6- (2-二乙胺基-7-異丙氧基-苯并喁唑-5-基)-嘧咬-3-基亞甲 基]-塞唑烷-2，4-二酮5- [6- (7-異丙氧基-2-丙胺基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基]-瘞唑烷-2，4-二酮5- [6- (7-異丙氧基-2-丙胺基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基]-噻p惡唑-2， 4-二酮5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基]-嗜噍唑-2,4-二酮<formula>formula see original document page 29</formula> 5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基〗-塞噶嗤-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 29</formula>5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-1氫-苯并喁唑-5-基)-嗜啶-3-基 亞甲基]_瘞哺唑-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 29</formula>5- [6- (2-乙胺基-7-異丙氧基-1氫-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基 亞曱基]-噢喁唑-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 29</formula>5- [6- (7-異丙氧基-2-異丙胺基-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲 基]-噻喁唑-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 30</formula>
5-[6-(7-異丙氧基-2-異丙胺基-苯并喁唑-5-基)-嘧咬-3-基亞甲 基]-噢喁唑-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 30</formula>
5- [6- (7-異丙氧基-2-異丙胺基-1氫-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞甲基]-漆嚙唑-2， 4-二酮<formula>formula see original document page 30</formula>
5- [6- (7-異丙氧基-2-異丙胺基-1氫-苯并喁唑-5-基)-嘧啶-3-基亞曱基]-噻噶唑-2， 4-二酮制作組合物圖13示出生產(chǎn)在此披露的這些化合物的合成路徑的一種代表性 方案。在合成中， 一種化學(xué)式為(XX)的硼酸，R15-H，可以和包含一個 羰基的芳基閨化物耦合產(chǎn)生聯(lián)芳(XXIV)。諸如上述聯(lián)芳(XXIV)生成的 耦合反應(yīng)可能用硼酯類誘導(dǎo)，例如R15位與硼結(jié)合形成一種2， 3-二甲 -2， 3-定二醇硼酯(硼酯的結(jié)構(gòu):IshiyamaT. ， et al. ， J. Org. Chem. 1995， 60， 7508—7510， IshiyamaT. ， et al. ， Tetrahedron Utters1997， 38， 3447-3450; coupling pinacol esters: Firooznia， F. et al.， Tetrahedron Letters 1999， 40， 213-216， Manickam， G. etal.， Synthesis 2000， 442-446;在此四篇引文通過引證結(jié)合在此)。聯(lián) 芳(XXI)可以再經(jīng)2，4蓬唑烷二酮類凝縮形成節(jié)川(XXII)。本發(fā)明的一些實施方案中提供了一種化學(xué)式為(XXII)的化合物的 制備過程其中A為-CR21R22-， -NR23-，-O-,或者是-S-; B為-OR2" -SR25， -NR28R295 D和E分別或者一起為-CR3fl-，或者是-N-; Ar是化學(xué)式(c)或者(d)R!， R2， R3， R21， R23， R24， R25， R28， R29和R"獨立地或者共同 為氫、烷基、取代的烷基、卣烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代 的炔基、卣基、氰基、硝基、羥基、?；?、取代的?；?、酰氧基、氨 基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、 芳基脲、烷基氨基甲酸酯、芳基氨基曱酸酯、雜芳基、烷氧基、取代 的烷氧基、卣代烷氧基、硫代烷氧基、硫代卣基烷氧基、羧基、烷氧 羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺或者取代的二烷基羧酰胺,包括下列步驟l)用一個第二位的芳基殘基與一個第一位的芳基殘基連接生成一 個包含聯(lián)芳羰基的化合物；其中第一個芳基殘基包含取代的或非取代 的具有下列結(jié)構(gòu)的殘基A一并且其中第二個芳基殘基具有一個具有下列結(jié)構(gòu)的羰基基團(tuán)oHalide并且其中包含聯(lián)芳羰基的化合物具有下述(XXIV)結(jié)構(gòu)Ar一2)基于(XXIV)的硝化作用，縮合產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式為(XXV)<formula>formula see original document page 32</formula>A,、,3)在乙二醇對羰基基團(tuán)的保護(hù)作用下，被保護(hù)的產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式為 (XXVI ):02NAr 〇4)在活性炭上的鈀存在的保護(hù)作用下，硝基基團(tuán)被甲酸銨還原成 氨基，生成(XXVII)結(jié)構(gòu)H N、A H)在溴化氰的環(huán)化作用下，產(chǎn)物具有(XXVIII)的結(jié)構(gòu)式:Ar O一[其中的R!和l是氬。如果R:為一個烷基基團(tuán)，上述產(chǎn)物(XXVIII) 可在NaH存在時被卣代烷進(jìn)行烷化。)水解作用后，產(chǎn)物具有(XXI)的化學(xué)式:r,iR26 )在2， 4-噻唑烷二酮存在時縮合包含化合物(XXI)的聯(lián)芳，產(chǎn)物具 有(XXII)的結(jié)構(gòu)式B在本發(fā)明的另一實施方案中提供了進(jìn)一步的步驟還原具有化學(xué)式(XXII)的苯亞曱基來生成具有化學(xué)式(XXIII)的千基化合物<formula>formula see original document page 34</formula>一些適用于還原苯亞甲基化合物來生成千基化合物的方法(包括 氳化作用、用金屬氬化物反應(yīng)物或者溶解金屬作用)都是本領(lǐng)域普通 技術(shù)人員所知的，這些方法可以應(yīng)用于本發(fā)明的方法中。在此所用到的不同有機(jī)基團(tuán)的轉(zhuǎn)換也可能用其他不同于上述的方 法來實現(xiàn)。有關(guān)其他用于合成在此所示的化合物的合成步驟，其參考 文獻(xiàn)可以在文章 March, J. Advanced Organic Chemistry, 4th Edition, Weiley-Interscience (1992) 或 Larock， R.C， Comprehensive Organic Transformations, A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, Inc. (1989)中找到，二者 均通過引用結(jié)合在此。本發(fā)明的一個實施方案涉及制作具有化學(xué)式I的化合物的過程， 其中包括耦合兩個芳香環(huán)生成一個聯(lián)芳，其中一個芳基上帶有一個羰 基的部份(moiety)，優(yōu)選一個乙醛。所生成的聯(lián)芳產(chǎn)物可以接著在 活性亞甲基化合物，如2，4-瘞唑烷二酮等作用下被縮合，生成一種存 在"——，，的化學(xué)式(l)的苯亞甲基化合物。在一任選步驟中，苯亞曱基化合物可能被還原生成一種不存在"——"的化學(xué)式(l)的節(jié)基化合 物。
用一種芳基硼酸或酯以及卣代芳基(例如碘代、溴代或氯代)、
三氟曱基黃酸或氟硼酸重氮鹽的作用下可以誘導(dǎo)耦合兩個芳基環(huán)；這
些分別在Suzuki, Pure & Applied Chem. ， 66:213-222 (1994)， Miyaura and Suzuki， Chem. Rev. 95:2457-2483 (1995)， Watanabe， Miyaura and S畫ki， Syn- lett. 207-210 (1992)， Littke and Fu. Angew. Chem. Int. Ed. ， 37:3387-3388 (1998)， Indolese， Tetrahedron Letters, 38:3513-3516 (1997)， Firooznia， et. al.， Tetrahed醒Letters 40: 21 3-216 (1999)， and Dorses, et. al. ， Butt. Soc. Chim. F7: 133: 1095-1102 (1996)有詳述，全部通過引用結(jié) 合在此。
根據(jù)此耦合反應(yīng)，可使用像(X)和(XX)這樣的前體
<formula>formula see original document page 35</formula>
其中
(X)或者為一個三氟曱基磺酸鹽、 一個卣化物(如如碘代、溴代、氯代)，或者為一個氟硼酸重氮鹽，或者為氫，并且R15為烷基或者 氫。作為替代，應(yīng)理解，這些耦合基團(tuán)可以互換。上述提到的這些前 體也可以很容易地被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員用其他的方法制備出來。例 如，硼酯可以用一種卣化芳基轉(zhuǎn)化成為相應(yīng)的芳基鋰，然后用三烴基 硼酸鹽處理來制備。優(yōu)選地，硼酯被水解為硼酸。此耦合反應(yīng)還可以 用一個卣化芳基鋅和一個閨化芳基或三氟甲基磺酸來誘導(dǎo)。或者，此 耦合反應(yīng)也可以用三烴基錫衍生物和一個卣化芳基或三氟曱基磺酸來 實現(xiàn)。這些耦合方法見Stanforth, Tetrahedron 65 54: 263-303 (1998) 一文綜述，通過引用結(jié)合在此。 一般而言，選擇使用哪種特異的耦合 反應(yīng)， 一般是根據(jù)現(xiàn)有的前體物、化學(xué)選擇性、區(qū)域選擇性和立體構(gòu) 象考慮。
使用合適的活性亞曱基化合物，例如2，4-噻唑烷二酮進(jìn)行的聯(lián)芳 羰基包括其衍生物(如，圖13，化合物(XXI))的縮合反應(yīng)，也可以 被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員用其他的方法完成。例如，耦合反應(yīng)的聯(lián)芳羰 基產(chǎn)物可以在一種活性亞曱基化合物作用下縮合產(chǎn)生一種化學(xué)式為(I) 的苯亞基化合物(也就是當(dāng)"——"存在時)，如Tietze and Beifuss， Compre-hensive Organic Synthesis (Pergamon Press) ， 2: 341-394， (1991) 一文所述，通過引用結(jié)合在此。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員都知道，
具有羥基基團(tuán)那些范圍的中間產(chǎn)物可以在包含衍生物的聯(lián)芳羰基和一 種活性亞甲基化合物的縮合反應(yīng)中產(chǎn)生，如下所示。
這些中間產(chǎn)物包含的羥基基團(tuán)在縮合過程中經(jīng)常被除掉(如水)， 生成預(yù)期的苯亞甲基化合物。然而，反應(yīng)的條件可以經(jīng)修改從而用于 分離或進(jìn)一步處理包含中間產(chǎn)物的羥基，這一類的實施方案也屬于本 發(fā)明范圍之內(nèi)。上述所示反應(yīng)描述了為化合物(XXI)和一種活性亞甲基化合物反應(yīng)的中間產(chǎn)物縮合反應(yīng)的生成?？s合反應(yīng)所需的有效的催 化劑可以選自銨，伯胺、仲胺及叔胺，無論是游離堿還是包含機(jī)酸的 胺鹽，如乙酸。催化劑的實例包括四氫化砒啶，六氬砒咬，砒咬，二 乙胺以及相關(guān)的乙酸鹽。無機(jī)催化劑也可以用于該縮合反應(yīng)。無機(jī)的
催化劑包括，但是不僅限于，四氯化鈦和一種叔堿，如砒咬；在惰性 溶劑中的氧化鎂和氧化鋅。這種類型的縮合反應(yīng)具有非常強(qiáng)的溶劑依 賴性，眾所周知需要用特定的催化劑進(jìn)行例行試驗來鑒定最適溶劑， 較好的溶劑包括乙醇、四氬呋喃、二嚙唑或甲苯，或其相關(guān)的混合物。 本發(fā)明中使用的為2，4-塞唑烷二酮。所合成的苯亞曱基(如，圖13， 化合物(XXII))，如希望，可還原為一種不含"——"化學(xué)式為(I) 的化合物。
化合物的利用
在許多生物試驗過程中，包括體內(nèi)試驗和體外試驗，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本 發(fā)明的化合物在人類相關(guān)疾病或有代表性的人類疾病試驗研究過程中 是有效的。例如，能夠抑制Fit-3激酶的化合物可以殺傷白血病癌細(xì) 胞。在被檢測的大約180種不同的激酶包括突Flt3和KIT變型激酶中， 發(fā)現(xiàn)化合物1能夠特異性的抑制激酶活性。按照AmbU激酶篩選試驗 (M丄 Fabian et al.， Nature Biotechnology, 23 pp. 329- 336， March 2005 )檢測發(fā)現(xiàn)所有的激酶中僅有六種激酶能夠被抑制，其抑 制常數(shù)(或結(jié)合常數(shù)Kd)在次微摩爾范圍(見圖1)。這些試驗結(jié)果 表明在此所述化學(xué)結(jié)構(gòu)能夠抑制一系列蛋白激酶，而且同時具有選擇 性。通過檢測化合物對MV4; 11細(xì)胞增殖效率的影響來觀察其選擇性抑 制FU3的生物學(xué)效應(yīng)。將這些人類AML細(xì)胞(表達(dá)Flt-3突變體)平 分到幾個96孔板中，每個具有不同濃度的化合物1， 2， 3或4。使 用3-4， 5-二曱基瘞唑-2， 5-二苯四唑(MTT)實驗測定細(xì)胞增殖效應(yīng)， 觀察化合物對人類白血病癌細(xì)胞系MV4;11細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)和細(xì) 胞殺傷效應(yīng)。化合物1， 2, 3和4以劑量依賴的方式能夠顯著抑制 MV4; 11細(xì)胞的增殖和殺傷MV4; 11細(xì)胞(見圖2 )。圖3展示的特異性細(xì)胞殺傷結(jié)果表明化合物1可以特異的殺傷白血病癌細(xì)胞，而對于前
列腺癌細(xì)胞(PC-3)和胰腺癌細(xì)胞(Bx-PC-3)沒有選擇性殺傷效應(yīng)。 綜合這些數(shù)據(jù)考慮，說明化合物1可以特異的抑制Fit-3，從而產(chǎn)生 對Flt-3突變的MV4; 11細(xì)胞的細(xì)胞殺傷效應(yīng)。化合物2在體外能選擇 性抑制腫瘤細(xì)胞的活性，并且和化合物1相比具有更加特異的激酶抑 制效應(yīng)。圖4所示結(jié)果表明，按照Ambit激酶篩選試驗檢測了大約180 種不同的激酶時，在濃度為微摩爾或接近微摩爾的化合物2僅能抑制 三種不同的激酶以及它們的一些突變體。為檢測化合物的生物利用度， 給予三只大鼠單口服劑量的10 mg/kg的化合物2，在不同的時間點取 血液標(biāo)本，檢測其血藥濃度。單口服劑量給予化合物2后，兩個小時 內(nèi)血藥濃度超過2|aM，并且在十小時內(nèi)可達(dá)到3|aM的最大濃度值 (Craax)，而且高峰可以持續(xù)超過24小時(見圖5 )。因為高血藥水 平能夠維持幾個小時以及很好的口服生物利用度，建議化合物2應(yīng)該 一天一次口服給藥。
利用皮下異種移植瘤模型評價化合物2在體內(nèi)的效應(yīng)。摘除胸腺 的棵鼠皮下注射表達(dá)持續(xù)激活的Fit-3的MV4;11細(xì)胞，是已經(jīng)被確 定的白血病才莫型((TFarrell A-M， Abrams TJ, Yuen HA， Ngail TJ， Louie SG， Yee KWH， Wong LM， Hong W， Lee LB, Town A, Smolich BD， Manning WC， Murray LJ， Heinrich MC and Cherrington JM (2003) SU1 1248 is a novel Fit-3 tyrosine kinase inhibitor with potent activity in vitro and in vivo. Blood 101:3597-3605 )?？檬笃?下注射MV4; 11細(xì)胞后幾周內(nèi)，這些小鼠腫大的脾臟內(nèi)充滿了白血病癌 細(xì)胞，小鼠通常生病或死亡。在指數(shù)生長期收獲MV4; 11細(xì)胞，即一種 表達(dá)Flt-3內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)突變序列的人類白血病細(xì)胞系，然后用基質(zhì) 膠(BD Biosciences, Bedford, MA)重懸。0天時給摘除胸腺的棵鼠 近后肢側(cè)翼處注射5 xl(^個MV4;11細(xì)胞。通過兩種不同的試驗來評 價化合物2每天口服給藥治療的效果。防止棵鼠急性粒白血病腫瘤的發(fā)展棵鼠皮下注射MV4;11細(xì)胞。在腫瘤起始兩周后而且動物體內(nèi)已經(jīng) 長出腫瘤時， 一組小鼠口服給予30mg/kg化合物2， 一天一次，持續(xù) 8和14天，第二組給予安慰劑處理。在治療的過程中，每周兩次用游 標(biāo)卡尺測量腫瘤的體積，并且體積計算為橢圓體的體積(Tomayko MM5 Reynolds CP (1989) Determination of subcutaneous tumor size in athyraic nude mice. Cancer Chemother Pharmacol 24(3): 148-54)， 橢圓體的體積由異種移植的皮下腫瘤的大小決定。柱狀圖代表每組五只動物。試驗發(fā)現(xiàn)一天一次口服給藥30mg/kg化合物2可以顯著抑制 人白血病癌細(xì)胞MV4; 11移植腫瘤的生長(見圖6)。再處理一周后， 藥物處理組和對照組的差異越來越明顯。圖6顯示將藥物處理8和14 天的結(jié)果繪制成圖?？傊衔?能夠顯著抑制腫瘤的生長。并且 到第24天試驗結(jié)束時仍有同樣的效應(yīng)。對已建立的巨大腫瘤的治療在另一系列的研究中，棵鼠皮下注射約500萬MV4;11細(xì)胞。三周 后在腫瘤大小約為100 mm3后，將小鼠分為兩組(每組6只)。 一組 口服給予50mg/kg化合物2，另一組給予安慰劑， 一天一次，持續(xù)兩 周。然后胂瘤可以按照腫瘤的大小分為檢測不到/消退，靜止或持續(xù) 增大幾組。安慰劑處理的一組小鼠的腫瘤在兩周之內(nèi)長大到1000 mm3， 而用化合物2 (50mg/kg)處理過的小鼠有66%其腫瘤大小有變化。這 些小鼠中有50%顯示出其腫瘤為靜止態(tài)，而剩下的50%的小鼠腫瘤完全 消除(見圖7)?；衔?可以選擇性殺傷MV4; 11白血病癌細(xì)胞，而對前列腺癌和 胰腺癌細(xì)胞沒有選擇性殺傷效應(yīng)。對于前列腺癌細(xì)胞和胰腺癌細(xì)胞來 說，它們的增殖不需要Flt-3 (見圖8)。另外，在激酶抑制篩選試驗 中，化合物5可以選擇性的抑制FU-3,而且可以有效抑制所有檢測 的Fit-3突變體?；衔?在次微摩爾濃度水平上也可以抑制RET激酶。眾所周知，RET可以促進(jìn)曱狀腺癌細(xì)胞的增殖(見圖4)。在大鼠 體內(nèi)，化合物5具有良好的藥物代謝動力學(xué)特性單劑量口服給予12 mg/Kg化合物5，兩小時內(nèi)血藥濃度超過14uM，并且高峰可以持續(xù)達(dá) 15小時(見圖9)。在棵鼠模型中， 一天兩次口服15mg/Kg化合物5， 能夠抑制人類白血病移植腫瘤的生長(見圖10)。在圖11中，通過 測量棵鼠模型個體腫瘤體積來比較化合物2和化合物5與安慰劑的治 療效率。每組5-8只動物，給予安慰劑或化合物2 (30 mg/Kg—天一 次)或化合物5 ( 15 mg/Kg —天兩次)處理，持續(xù)給藥10天。兩種化 合物和安慰劑相比較都能減弱腫瘤的生長。另外，化合物5與化合物 2相比能明顯減緩腫瘤的生長(見圖11)。對已有大型白血病肺瘤的 棵鼠給予化合物5， 50mg/Kg，處理能顯著抑制腫瘤的生長(見圖12)。本發(fā)明的另 一方面涉及在此所述化合物的使用方法。這些化合物 既可以單獨4吏用也可以幾種同時^f吏用，藥物組合物可以;故用來治療哺 乳動物疾病，尤其在人類發(fā)生的疾病?？梢酝ㄟ^多種途徑使用在此所 述化合物以及包含它們的混合物，例如，口服、腸道給藥、腸外給藥、 局部給藥、鼻吸入、陰道內(nèi)給藥、舌下或吸入給藥，用于治療白血病 和其他癌癥包括AML、慢性粒細(xì)胞白血病和實性腫瘤。全面的本領(lǐng)域 已4口的給藥途4圣和劑量可以在,，H口 medicinal chemistry, volume S， Hanscb， C. Pergamon Press, 1990中找到，通過引用將其結(jié)合在此。面是一些具有代表性，但不限于此類的腫瘤淋巴瘤，霍奇金病，粒 細(xì)胞白血病，膀胱癌，腦腫瘤，頭頸部癌，腎臟癌，肺癌，小細(xì)胞肺 癌及非小細(xì)胞肺癌，骨髓瘤，神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，卵巢癌，胰腺癌， 前列腺癌，皮膚癌，肝癌，黑色素瘤，大腸癌，子宮頸癌，乳癌，及 上皮癌。雖然在此所述化合物可以作為純化學(xué)品給藥，但是優(yōu)選以藥用混 合物的活性組分給藥。因此，本發(fā)明的另一方面應(yīng)涉及本發(fā)明的一種或多種化合物與一種或一種以上藥學(xué)上可允許的相關(guān)鹽結(jié)合，而不再 與更多地藥學(xué)上允許的相關(guān)栽體結(jié)合，以及任選地與其他治療的和/ 或預(yù)防性的成分的使用。該(這些)載體在一定意義上必須和其他組 成物兼容并對相關(guān)服用者沒有太大危害。藥物混合物包括那些適合口服、腸道給藥、腸外給藥(包括肌注、 皮下和靜脈注射)、局部給藥、鼻吸入、陰道內(nèi)給藥、舌下或吸入給 藥的組成物。該藥物組合物在合適的情況下，可能會以更為方便的獨 立劑量單位形式或者以制藥行業(yè)內(nèi)通用的其他方法制備。這些方法包 括把有活性的化合物與液體載體、固體基質(zhì)、半固體載體、微細(xì)固體 載體或結(jié)合體結(jié)合到一起，然后如需要，可將產(chǎn)品塑為和藥物配送系 統(tǒng)相匹配的形態(tài)。適合口服給藥途徑的藥物組合物可以做成獨立的劑量單位，如硬軟膠囊，扁膠嚢或片劑，每片包含預(yù)先定量的活性成分； 也可以做成粉末或顆粒；或者做成一種溶液，懸膠液或乳液?；钚猿?分也可以做成丸藥、藥糖劑或糊劑?？诜钠瑒┖湍z嚢有常規(guī)的賦形 劑，如結(jié)合劑、填充劑、潤滑劑、崩解劑或濕劑。片劑可根據(jù)文獻(xiàn)報 道的方法加上外衣，例如，腸道包衣?？诜褐苿┛勺龀扇缢曰蛴托詰腋∫?、溶液、乳化劑、糖漿或 酏劑或者是一種干燥的產(chǎn)品，用時與水或其他合適的載體一起服用。 這種液體制劑可包含常規(guī)的添加物，如懸浮劑、乳化劑、非液體載體 (包括可食用油)，或一種或多種防腐劑。該化合物也可以配制成用于腸外給藥(例如，注射，間斷注入或 持續(xù)滴注)的劑型，也可以制備成單位劑量形式，置于安瓿、預(yù)填充 注射器、小劑量輸液容器或多劑量容器內(nèi)，并添加防腐劑。組合物可 以釆用的形式為，如油性或水性載體的懸浮液、溶液或乳劑，也可包 括成型劑如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘撸钚猿煞忠部梢苑勰?形式存在，粉末通過對無菌固體的無菌分離或溶液蒸餾干燥獲得，并與合適的載體結(jié)合，例如粉末在用之前先溶于無菌無熱源的水。如果 化合物是經(jīng)接觸皮膚使用的，應(yīng)該將化合物做成軟貪、乳骨或洗劑， 或者是做成包含活性成分的貼劑。適合的透皮給藥系統(tǒng)已經(jīng)有文獻(xiàn)報道，如Fisher等人(U.S. Pat. No. 4, 788, 603，通過引用結(jié)合在在 此)或Bawas et al. (U.S. Pat. Nos. 4, 931,279， 4， 668， 504以 及4， 713， 224，通過引用結(jié)合在在此)。軟骨和乳骨，例如可以與水性 或油性基質(zhì)一起增加或適當(dāng)增厚和/或膠凝劑成型。洗劑可以與水性或 油性基質(zhì)一起還可包括一種或一種以上的乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、 懸浮劑、增稠劑或著色劑成型?；钚猿煞忠部梢酝ㄟ^電離子透入法給 藥，文獻(xiàn)有如U. S. Pat. Nos. 4,140, 122，或4， 383， 529， 4,051,842， 通過引用結(jié)合在在此。適合口服局部治療的藥物劑型包括單位劑量形 式如包含活性成分的錠劑通常與蔗糖和阿拉伯膠或西黃芪樹膠等有香味的基質(zhì)結(jié)合一起成形；包含活性成分的錠劑一般以惰性基質(zhì)為載體， 如明膠和甘油或者是蔗糖和阿拉伯膠；包含活性成分的粘膜黏著膠和 漱口劑類可以用合適的液體栽體。如果需要的話，上面所描述的合劑 可被制備為對所用活性成分維持釋放的形式，例如，通過和具有親水 性聚合物基質(zhì)結(jié)合，又如，與天然凝膠，合成的聚合物凝膠或混合物 結(jié)合。本發(fā)明的藥物組合物也可能包含其他佐劑如調(diào)味劑，色素，抗 微生物劑或防腐劑。在發(fā)明的這個和其他方面的優(yōu)選實施例中，媒介物是其組成的一 部分，至少包括一種栽體和一定數(shù)量的這種化合物足以達(dá)到預(yù)期的治 療效果，其中化合物至少要有一個亞群的人試用過并達(dá)到預(yù)期的治療 效果(如，特定藥物或其他活性試劑的"有效劑量，，，視情況而定)。 在此，"治療有效劑量"指需要這種藥物治療的一個對象攝入能夠達(dá) 到有效治療效果時的一定的量。在癌癥治療過程中，"有效治療劑量" 指對于被評估的人而言攝入的劑量能夠產(chǎn)生可觀的效應(yīng)。鑒定一種含 有本發(fā)明的混合物的藥物有效劑量，可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員輕易完成o治療過程中所需要使用的化合物的劑量、或者活性鹽或其衍生物 的劑量，不僅和選擇的特定的鹽有關(guān)，而且與藥物攝入途徑、治療條 件、年齡和病人的狀態(tài)有關(guān)，并且最后由監(jiān)管醫(yī)師或臨床醫(yī)生決定。 一般而言，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以根據(jù)在模式生物如棵鼠上獲得的 體內(nèi)試驗數(shù)據(jù)推斷出另 一種哺乳動物如人的可能數(shù)據(jù)。這些推斷不僅 是根據(jù)兩種生物的體重來推斷也考慮到它們的代謝不同、藥物吸收和 給藥途徑的不同來做出推斷。考慮到諸多此類因素，合適的劑量通常是介于約0.5—100 mg/kg/天，1--約75 mg/kg/天，3—50mg/Kg/天 或6--90 mg/kg/天?；衔镆詥挝粍┝啃问椒奖愕亟o藥，例如，有 0.5—5000 mg， 5--750 mg,更方便的是每單位劑量形式活性成分 10—500 mg。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到這些典型范圍外的劑量和劑型可以 被檢測，在適當(dāng)?shù)臅r候，也可以用于本發(fā)明的方法。在一些具體的實 施方案中，攝入的藥物活性成分達(dá)到的血藥濃度高峰約為從0. 5--75 MM,從l--50jjM，或從2—30ijM?？梢酝ㄟ^靜脈注射0. 05—5%的活 性成分溶液，也可以用鹽水滴注，或者口服含活性成分約0.5—500 mg 的丸藥?？梢酝ㄟ^持續(xù)注射輸注藥物0. 01--5. Omg/kg/小時或間斷性 輸入約0. 4--15mg/kg的活性成分達(dá)到預(yù)期的血藥水平。預(yù)期劑量可以 通過兩種方式達(dá)到，第一種是單劑量一次給藥，另一種是分為幾個劑 量以適當(dāng)?shù)拈g隔給藥，如一天給藥兩次，三次，四次或更多次。分劑 量本身有可能進(jìn)一步被劃分，例如通過不同的途徑給藥，如從吸入器分多次吸入或者將藥水滴入眼睛。術(shù)語"治療"或"施治"是指針對一種疾病或障礙的任何一種治 療方法，包括預(yù)防或防治疾病或障礙(即使臨床癥狀不再發(fā)展)； 抑制疾病或障礙(例如抑制臨床癥狀的發(fā)展和/或減輕疾病或病癥，減 輕臨床癥狀)?？梢岳斫?，因為最終的誘因或此類因素未知或者是潛<formula>formula see original document page 44</formula>伏性的，所以不是總可能很好的區(qū)分"預(yù)防"和"抑制" 一種疾病或 障礙。相應(yīng)地，術(shù)語"防護(hù)"應(yīng)被理解為組成一種形式的"治療"來 實現(xiàn)"預(yù)防，，和"抑制"保護(hù)" 一詞因此也包括了 "預(yù)防"。實例以下的制品和實例用于使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更加清楚地認(rèn)識和 實踐本發(fā)明。它們不應(yīng)被視為限制了本發(fā)明的范圍，而只是作為它的 相關(guān)的說明和代表。實例一代表性化合物及它們的合成 化合物1o<formula>formula see original document page 45</formula><formula>formula see original document page 46</formula>
化合物8<formula>formula see original document page 46</formula>
化合物2的合成http://125.71.232.38:9088
對6-(2-乙氨基-7-異丙氧基-苯喁唑-5-基)-嘧啶-3-曱醛 (0. 385 g， 1. 183 mmol )在2 ml甲苯中的溶液中加入哌啶(23 ia 1， 0. 237 mmol )和乙酸(23 la 1， 0. 237 mmol，加入噢唑烷-2， 4-二 酮(0.139 g， 1.183 mmol)在2 ml曱苯中的溶液。反應(yīng)混合物加熱 至達(dá)到回流四小時。析出的產(chǎn)物經(jīng)過濾，干燥后產(chǎn)出0. 395 g 5-[6-(2-乙氨基-7-異丙氧基-苯喁唑-5-基)-嘧啶-3-亞曱基]-噻唑烷-2， 4-二 酮黃色固體(78. 7%產(chǎn)出率)；HPLC分析檢測純度為99.59% ( 355nm); 99.40% (225 nm); mp 280 ° C-281 ° C。力NMR (500 MHz， DMSO-(U:20t， J= 7. 26 Hz， 3H); 1. 34 ( d， J= 6. 04 Hz，6H); 3.35(m， 2H); 4.87(m， 1H); 7. 54(d， J= 1. 24 Hz， 1H); 7. 64 U J=1.17Hz， 1H); 7.86(s， 1H); 7. 97 ( dd， Jl= 2.39 Hz, J2= 8.52 Hz， 1H); 8. 03( t， J= 5.63 Hz， 1H); 8.14( d， J= 8.50 Hz， 1H); 8.88( d， J= 2.30 Hz, 1H); 12.7 (br s， 1H)。該中間產(chǎn)物6- (2-乙氨基-7-異丙氧基-苯喁唑-5-基)-嘧啶-3-甲 醛制備如下6-(2-氨基-7-異丙氧基-苯p惡唑-5-基)-嘧啶-3-甲醛(0.860 g, 2. 893 mmol )和碳酸鉀(0. 960 g， 6. 942 mmol )在20 ml DMF中的 混合物在室溫下攪拌一個半小時。然后加入碘乙烷(278 n 1， 3.472 mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌三天。用20 ml醋酸乙酯稀釋該溶液，先 后用水(2x 30ml)和鹽水(30ml)洗滌，用無水硫酸鎂干燥，然后 過濾和蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠進(jìn)行色譜分析處理(洗脫液100%醋 酸乙酯)產(chǎn)出0. 385g 6-2-乙氨基-7-異丙氧基-苯喁唑-5_基-嘧啶-3-甲醛黃色固體(41%產(chǎn)出率)。'HNMR (500 MHz; DMS0-d6): 1.98 (t， J=7. 31 Hz, 3H); 1. 35 (d， 09 Hz， 6H); 3. 36 (m， 2H); 4. 88(m， 1H); 7.57(d， J=l. 35 Hz, 1H); 7.69(d， J=l. 4 Hz, 1H); 8. 01 (t， J=5.6 Hz， 1H); 8. 21 (d， J= 8.35 Hz， 1H); 8. 26 (dd， Jl=2. 2 Hz， J2=8. 35 Hz， 1H); 9. 12( d， J=l. 65 Hz， 1H); 10. 12( s， 1H)。該中間產(chǎn)物6- (2-氨基-7-異丙氧基-苯喁唑-5-基)-嘧啶-3-甲醛 制備如下5-(5-二乙氧曱基-嘧啶-2-基)-7-異丙氧基-苯嚙唑-2-羥胺(1. 00 g， 2.69 mmol)與0.5 N鹽酸的混合物進(jìn)行攪拌并升溫到80。 C維持 30分鐘。制備的產(chǎn)物用水過濾和洗滌。濾出液用飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH 至7，并用醋酸乙酯(3 x 15 ml )提取。有機(jī)相依次用水(50 ml )和 鹽水(50ml)洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)。殘留物和過濾 后產(chǎn)物結(jié)合在一起，干燥后產(chǎn)出0. 860g 6-2-氨基-7-異丙氧基-苯喁 唑-5-基-嗜啶-3-曱醛(定量產(chǎn)量)。^NMR (50謹(jǐn)z; DMSO-d6): 1. 35 (d， J= 6. 00 Hz， 6H); 4.90(m, 1H); 7.59(d， J=l. 44 Hz， 1H); 7.66 (d， J=1.5Hz， 1H); 7.78(br s， 2H); 8.25 (m， 2H); 9.12 (m， 1H); 10.12 (s， 1H)。中間產(chǎn)物5- (5-二乙氧甲基-嘧啶-2-基)-7-異丙氧基-苯喁唑-2-羥胺的制備如下在2-氨基-4-(5-[1,3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-6-異丙氧基 -酚(1. 273 g， 4. 02 mmol )于無水乙醇(60 ml )中的混合物中逐滴 加入5M溴化氰的乙腈溶液(2.41 ml， 12. 07mmo1)。攪拌生成的混 合物并在氬氣中回流1. 5小時。完成的反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，并 用醋酸乙酯(50 ml )和水(20 ml )稀釋。水相可以用醋酸乙酯(2 x20 ml)分離和提取。用飽和碳酸氬鈉調(diào)節(jié)水相的pH值約為7,并 用醋酸乙酯(15 ml)提取。有機(jī)相依次用水(50ml)和鹽水(50ml) 洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色譜分析處理(洗脫液醋酸乙酯/己烷，4:1)得到1.118 g 5-(5-二乙氧甲 基-嘧啶-2-基)-7-異丙氧基-苯"惡唑-2-羥胺(81%產(chǎn)出率)。卞NMR (500MHz; DMS0-d6): 15 (t， J=7. 01 Hz， 6H); 1. 31 (d， J= 6. 03，Hz， 6H); 3. 50(m, 2H); 3. 57(m， 2H); 4. 82(m， 1H); 5.58(s， 1H); 7.41(m， 1H); 7.43 (s, 2H); 7.76(dd， Jl= 2. 20 Hz， J2=8. 30 Hz， 1H); 7.93 (m， 1H); 8.59 (d， J=2. 18 Hz， 1H)。中間產(chǎn)物2-氨基-4-(5-[1，3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-6-異 丙氧基-酚的制備如下對4-(5-[1，3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-2-異丙氧基-6-硝基 -酚(1. 596 g， 4. 96 mmol )于無水乙醇(80 ml )中的混合物中加入 曱酸銨(1.45g, 23. Ommol),隨后是加入在活性炭(0. 23 g )上的 10%重量的鈀。攪拌所生成的混合物并在氬氣下使之回流1. 25小時。 將反應(yīng)后混和物降溫至23° C并濾過硅粒。濾過物在減壓作用下濃縮 并依次用醋酸乙酯(150 ml)和水(50 ml)洗滌。水相可以用醋酸乙 酉旨(3x 15 ml )分離和提取。有機(jī)相依次用水(50ml )和鹽水(50ml ) 洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色譜分析 處理(洗脫液醋酸乙酯/己烷，3:2)得到1. 273 g 2-氨基-4-(5-[1， 3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-6-異丙氧基-酚(87%產(chǎn)出率)。'H NMR (500MHz; DMSO-d6): 1.47 (d， J= 6.12 Hz， 6H); 4. 80(m， 1H); 7. 91(d， J= 8. 3 Hz， 1H); 8. 09 (d， J= 2. 0 Hz， 1H); 8.25(dd， Jl-2.05 Hz， J2= 8.3 Hz， 1H); 8.40 (d， J= 2.1 Hz， 1H); 9.11(d， J= 1.90Hz， 1H); 10.08 (s， 1H); 10.86 (s， 1H)。<formula>formula see original document page 50</formula>中間產(chǎn)物4-(5-[1,3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-2-異丙氧基 -6-硝基-酚的制備如下對6-(4-羥基-3-異丙氧基-5-硝基-苯)-嘧啶-3-曱醛(l. 507 g， 4. 99 mmol)于無水曱苯(30ml )中的混合物依次加入乙二醇(5. 6 ml， 99.7 mmol)和甲苯磺酸一水合物(57 mg， 0.3 mmol )。然后攪拌所 生成的混合物并在氬氣下用迪安-斯達(dá)克分水器使之回流5小時。將完 成的反應(yīng)混合物降溫到23。 C并用10y。碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)其pH值約為7， 然后依次用醋酸乙酯(30 ml )和水(20 ral )稀釋。水相可以用醋酸 乙酯(3xl5ral)分離和提取。有機(jī)相依次用水(30 ml)和鹽水(30 ml)洗滌，用無水疏酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色譜 分析處理(洗脫液醋酸乙酯/己烷，3: 7)得到1. 596g 4-(5-[1， 3] 二氧戊烷-2-基-嘧啶-2-基)-2-異丙氧基-6-硝基-酚(9"/。產(chǎn)出率)。 ^ NMR (500MHz; DMS0-d6): 1.41 (d， J= 6.04 Hz， 6H); 4,79(m， 1H); 6.15 ( br s， 1H); 7. 02 (d， J= 8.35 Hz， 1H); 7.55(dd， Jl= 2,0 Hz， J2= 8.35 Hz， 1H); 7.79 (m， 2H); 8. 16(dd， Jl= 2.10 Hz， J2- 8.35 Hz， 1H); 9.04 ( d， J- 2.15 Hz， 1H); 10.08 (s， 1H)。<formula>formula see original document page 50</formula>
中間產(chǎn)物6- (4-幾基-3-異丙氧基-5-硝基-苯基)-嘧啶-3-曱醛的制備如下對6-(4-羥基-3-異丙氧基-苯基)-嘧啶-3-甲醛(2. 864g， 11.13 咖ol )于三氟乙酸(30 ml )中的混合物中在0° C下加入硝酸鉀(1. 18 g， 11.69mmol)。然后在氬氣環(huán)境0° C下將所生成的混合物攪拌45 分鐘。將完成的反應(yīng)混合物倒在冰上并攪拌三小時。用醋酸乙酯溶劑 (30 ml )提取溶液。將水相用固體碳酸氫鈉中和至pH值約為7，并 再次用醋酸乙酯提取。有機(jī)相依次用水(30 ml)和鹽水(30 ml)洗 滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色譜分析處 理(洗脫液醋酸乙酯/己烷，2:3)得到2.621 g 6-4-羥基-3-異丙氧 基-5-硝基-酚-嘧啶-3-甲醛(78%產(chǎn)出率)。^賜R (500MHz; DMS0-cU : 1.47 (d， J=6.12Hz， 6H); 4.80(m， 1H); 7. 91 (d， J= 8. 3 Hz， 1H); 8. 09(d， J= 2. 0 Hz， 1H); 8. 25(dd， Jl- 2. 05 Hz， J2= 8. 3 Hz， 1H); 8. 40 (d， J= 2. 1 Hz, 1H); 9. 11 (d， J= 1. 90 Hz， 1H); 10. 08 (s， 1H); 10.86 (s， 1H)。中間產(chǎn)物6-4-羥基-3-異丙氧基-苯基-嘧啶-3-甲醛的制備如下 對6- [4-(叔丁基-二甲基-曱硅烷氧基)-3-異丙氧基-苯基]-嘧啶 -3-甲醛(3. 0 g， 8. 07 mmol )溶解于無水四氫吹喃(60 ml )中的混 合物逐滴加入氟化四丁銨(1. 0M溶于無水四氫吹喃，9.69ml， 9.69 mmol)。然后在氬氣環(huán)境23。 C下將所生成的混合物攪拌1. 5小時， 然后依次用醋酸乙酯(30 ml)和水(30 ml)稀釋該溶液。水相可以 用醋酸乙酯(2 x 20 ml )分離和提取。合并的有機(jī)相依次用水(15 ml )， 0. 1 N鹽酸(22 ml )和鹽水(15 ml )洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鎂千 燥，過濾，蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色譜分析處理(洗脫液醋酸乙酯/己烷，1:4)得到1.90 g 6-4-羥基-3-異丙氧基-苯基-嘧啶-3-曱醛 (91%產(chǎn)出率)。^NMR (500MHz; DMSO-d6): 1.41 (d， J-6. 04 Hz， 6H); 4.79(m， 1H); 6.15 ( br s， 1H); 7. 02 (d， J= 8.35 Hz， 1H); 7.55(dd, Jl-2.0Hz， J2= 8. 35 Hz， 1H); 7.79 (m， 2H); 8. 16(dd， J1-2. 10Hz, J2= 8. 35 Hz, 1H); 9.04 ( d， J= 2. 15 Hz， 1H); 10.08 (s， 1H)。中間產(chǎn)物6- [4-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-3-異丙氧基-苯 基]-嘧啶-3-甲醛的制備如下將6-溴基-嘧啶-3-甲醛(4. 70 g， 25.2mmo1)、 [4-(叔丁基-二甲 基-甲硅烷氧基)-3-異丙氧基-苯基]-硼酸(11. 72 g, 37. 80 mmo1 )和 碳酸鉀(6. 97 g, 50. 4 mmol )于甲苯(100 ml )、乙醇(17 ml )和 水(15ml)中的混合物在室溫下用氬氣進(jìn)行脫氣20分鐘。加入四(三 苯基膦)4巴(0) (1.46 g， 1.26nnno1)，然后使混合物在氬氣下達(dá) 到回流并在氬氣攪拌16小時。將混合物溶液冷卻到室溫，用醋酸乙酯 (75 ml )稀釋溶液，然后依次用水(40 ml )和鹽水(40 ml)洗涂， 用無水硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。殘留物通過硅凝膠色鐠分析處理(洗 脫液醋酸乙酯/己烷，1:4)得到11.403 g的6-[4-(叔丁基-二曱基 -曱硅烷氧基)-3-異丙氧基-苯基]-嘧啶-3-曱醛(95%產(chǎn)出率)。中間產(chǎn)物[4-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-3-異丙氧基-苯基]-硼酸的制備如下將在己烷(0. 33 mol )中的80 ml的2. 5 M的正丁基鋰放入頂 部有空氣驅(qū)動攪拌器的2升三頸圓底瓶中，并將溶液置于千水丙酮浴 冷卻至-78° C。在氬氣下-78。 C的此溶液中逐滴加入包含(4-溴基 -2-異丙氧基-苯氧基)-叔丁基-二曱基-甲硅烷(76 g， 0.22 mol)的 四氫呋喃溶液(60 ml )。在0° C下將反應(yīng)混合物溶液攪拌1小時， 然后逐滴加入硼酸三異丙酯(152 ml， 0.660 mol)。 0° C下攪拌反應(yīng) 混合物溶液2小時。反應(yīng)混合物中緩慢加入飽和水溶液氯化銨(80ml )。 用醋酸乙酯溶劑(200 ml)提取淬火的混合物溶液。有機(jī)層依次用水 (150 ml)和鹽水(150 ml)洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾掉 硫酸鎂后，蒸發(fā)濾液。殘留物通過硅凝膠色譜分析處理(洗脫液醋 酸乙酯/己烷，5:95)得到38.5 g的[4-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧 基)-3-異丙氧基-苯基]-硼酸(56%產(chǎn)出率)。中間產(chǎn)物(4-溴基-2-異丙氧基-苯氧基)-叔丁基-二曱基-甲硅烷 的制備如下將叔丁基-二甲基氯化甲硅烷(21.4g, Q. l"mo1)、 4-氮-二甲胺 嘧口定(O. 461g, 0. 004 mol )和三乙胺(19. 8 ml， 0. 142 mol)力口入 到包含4-溴-2-異丙氧基-苯酴(23. 5 g, 0.102 mol )的16G ml 二曱基曱酰胺溶液中。所生產(chǎn)的混合物在室溫下攪拌n小時。然后用醋酸乙酯(200 ml)稀釋反應(yīng)混合物并依次用水(150 ml)和鹽水(l50 ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾掉硫酸鎂后，蒸發(fā)濾液。殘留物 通過硅凝膠色鐠分析處理(洗脫液己烷)得到32. 3 g的(4-溴基-2-異丙氧基-苯氧基)-叔丁基-二甲基- 甲硅烷.中間產(chǎn)物4-溴基-2-異丙氧基-苯酚的制備如下 在三溴化吡啶(116 g, 0.362 mol)于250 ml 二氯甲烷的懸浮 液中加入在150ml 二氯甲烷中的2-異丙氧基酚(50 g， 0. 329 mol)。 室溫下將混合物攪拌6小時。反應(yīng)混合物中加入鹽酸水溶液(1 N， 200 ml)使其淬火。分離后，有機(jī)相依次經(jīng)飽和硫代硫酸鈉(150 ml)和 鹽水(150 ml)洗滌，并用無水硫酸鎂干燥。過濾掉硫酸鎂后，蒸發(fā) 濾液以產(chǎn)出71 g的4-溴基-2-異丙氧基-苯酚(94%產(chǎn)率)。實例二激酶抑制特性輪廓的分析作為初步篩選，10 juM的化合物針對一組180種激酶進(jìn)行測試。 這些激酶中包括了最常見的Fit-3和cKit突變型。按照Fabian等 人 (A small molecule-kinase interaction map for clinical kinase inhibitors. Nature Biotechnology 23:329-36 (2005)文章中描述 的方法做激酶檢測試驗和結(jié)合常數(shù)檢測。簡言之，人類激酶以T7噬菌 體融合蛋白形式表達(dá)，并且一小套固定的探針配體與游離試驗化合物 結(jié)合。如果游離的試驗化合物結(jié)合并封閉三磷酸腺苷位點，那么就沒 有多少蛋白分子能結(jié)合到固定在固體支持物上的配體。結(jié)果可以通過 計算結(jié)合在固相支持物上的融合蛋白量來讀出。對于每個激酶來說， 在初步篩選過程中化合物被最初記作"擊中"或"未擊中"。標(biāo)記為 擊中的化合物有一個定量的計分，并被稱為"控制百分比"。圖l歸 納的結(jié)果表明，化合物1能夠抑制幾種激酶，而化合物2, 5和8具有 顯著的特異性，只能特異地結(jié)合極少數(shù)的激酶目標(biāo)。對化合物2， 3， 5和8進(jìn)行了二次試驗，按照Fabian等人(A small molecule-kinase interaction map for clinical kinase inhibitors. Nature Biotechnology 23: 329-36 (2005)所描述的方 法確定化合物對特定激酶的結(jié)合常數(shù)(Kd)。結(jié)果表明化合物l是Flt-3 (Kd 100-200 nM)的一種強(qiáng)有力的抑制劑，并具有寬的激酶抑制特性 輪廓，如在80nM到714nM可以抑制Abl和PDGFRD、 FGFR3、 CSF1R、 RET、 Kit、 JAK2以及Aurka激酶(圖1)。因此，化合物1有可能 做為用于一個更大系列的更高選擇性的激酶抑制劑的引入結(jié)構(gòu)。改變 化合物1結(jié)構(gòu)上特定的一些殘基可以生成很高特異性的化合物2, 5 和8，這些化合物是具有高度特異性的激酶抑制劑，僅僅可以與極少 數(shù)的激酶目標(biāo)特異性結(jié)合。圖4中展示了這些化合物抑制Flt-3、KIT、 PDGFRD和RET的能力的比較。化合物5不僅特異的抑制Fit-3和重要 的Flt-3突變體(Kd 333-975 nM)，而且也抑制RET (結(jié)合常數(shù)770 nM)，而化合物8特異抑制FU-3、 KIT和PDGFR p ( Kd在95和740 nM之間)。在此非常重要的是應(yīng)該注意到化合物8也可以有效地抑制 KIT雙突變型V559D/T670I。這種突變型對于臨床上所用的cKit抑制 劑Gleevec是耐受的，因此化合物8可用于治療Gleevec耐藥性的胃 腸道間質(zhì)腫瘤患者。實例三細(xì)胞增殖抑制試驗在人類A M L細(xì)胞系M V 4; 11中檢測了 F11 - 3抑制細(xì)胞增殖的生物學(xué) 反應(yīng)。此細(xì)胞系攜帶最經(jīng)常人類Flt-3突變。通過比較化合物對MV4; 11 細(xì)胞系的影響效應(yīng)和對前列腺癌細(xì)胞系(PC-3)和胰腺癌細(xì)胞系 (Bx-PC3 )增殖過程的影響效應(yīng)，來檢測化合物的細(xì)胞殺傷的選擇性。 用3-4， 5-二甲基噻唑-2， 5-二苯四唑(MTT)測試來確定細(xì)胞的增殖。 簡言之，細(xì)胞被平分到96孔板中。用RPMI培養(yǎng)基培養(yǎng)MVt， 11細(xì)胞， 培養(yǎng)基內(nèi)包含4500 rag/L葡萄糖；4 mM L-谷氨酰胺；10 U/ml青霉 素；10mcg/ml鏈霉素和20。/。胎牛血清(FBS) 。 PC-3和Bx-PC3用RPMI 培養(yǎng)基1640培養(yǎng)，培養(yǎng)基中包含2 raM L-谷氨酰胺；10 U/ml青霉素；10 mg/ml鏈霉素和10%胎牛血清(FBS )。細(xì)胞接種到96孔組織 培養(yǎng)板中，密度約為300-500個細(xì)胞/孔，置于6% 0)2和37。 C環(huán)境 中。細(xì)胞用激酶抑制劑處理三天。然后用比色分析法檢測細(xì)胞的存活 率。此檢測方法基于黃色四唑鹽MTT在有活性的線粒體內(nèi)脫氫酶作用 下可以裂解為紫色的曱臢晶體的這一特性。因此，這種物質(zhì)轉(zhuǎn)變僅發(fā) 生在具有完整的/有功能的線粒體的活細(xì)胞內(nèi)。形成的甲臢晶體溶解產(chǎn) 生有色溶液，這種有色溶液可以用多孔掃描分光光度計在595 nm處進(jìn) 行定量。簡言之，每孔中加入10 的5 rag/ral MTT染料，孵育4 小時，然后加入IOO ju 1/孔增溶溶液終止反應(yīng)，增溶溶液包含10%十 二烷基磺酸鈉(SDS)和10 mM鹽酸?；衔?到5能夠強(qiáng)有力的抑制細(xì)胞增殖，并且以劑量依賴的方 式殺傷MV4; 11細(xì)胞，而化合物1不能抑制PC-3和Bx-PC3癌細(xì)胞系 的增殖(圖2和3)。實例四藥物代謝動力學(xué)測量為檢測生物利用度，給三只大鼠單一口服劑量的10mg/Kg化合物 2。在不同的時間點(l小時，2小時，4小時，7小時，IO小時，12 小時，和24小時)取血液樣品分析藥物水平。化合物2顯示出很好的 生物利用度。單劑量10mg/Kg的化合物2的給藥在兩小時內(nèi)產(chǎn)生的血 藥濃度超過2 nM，并在十小時內(nèi)達(dá)到3 pM最大濃度值(Craax)而且高 峰可以持續(xù)超過24小時?？梢跃S持幾個小時的高血藥水平以及很好的 口服生物利用度提示化合物2可以一天口服一次(圖5)。單劑量給予12 rag/Kg的化合物5在一小時內(nèi)產(chǎn)生超過10 nM的 血藥濃度并在三小時內(nèi)達(dá)到14jiM最大濃度值(Cx)而且高峰可以持 續(xù)超過10小時?？傊?，在生物利用度方面，化合物5表現(xiàn)出比化合物 2高約3到4倍(圖9)。實例五治療一種動物模型中的AML腫瘤中化合物2和化合物5的口服給藥利用皮下異種移植瘤模型來評估化合物2和化合物5的體內(nèi)效應(yīng)。 摘除胸腺的棵鼠皮下注射MV4; 11細(xì)胞，表達(dá)持續(xù)激活的Flt-3，作為 白血病的模型(O'Farrell et al. SU1 1248 is a novel Fit-3 tyrosine kinase inhibitor with potent activity in vitro and in vivo. Blood 101: 3597- 3605 (2003))。在指數(shù)生長期收獲MV4; 11細(xì)胞(一 種人類白血病細(xì)胞系，它表達(dá)最常見的Flt-3-ITD突變體)，然后用 基質(zhì)膠(BD Biosciences, Bedford, MA)重懸。摘除胸腺的棵鼠0 天時皮下近后肢側(cè)翼注射500萬MV4; 11細(xì)胞。對于化合物2和化合物 5每天口服給藥的治療效果，可以通過化合物2和化合物5預(yù)防摘除 胸腺的棵鼠發(fā)生急性粒細(xì)胞白血病以及治療摘除胸腺的棵鼠預(yù)先存在 的巨大腫瘤的效果來評價。通常情況下，棵鼠皮下注射500萬MV4;11 細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞注射兩周后， 一組小鼠每天口服給予30mg/kg的化合 物2,持續(xù)8和14天(圖6)。在治療的過程中每周兩次使用游標(biāo)卡 尺測量腫瘤的體積，并且體積計算為橢圓體的體積(TomaykQ MM and Reynolds CP 1989 Determination of subcutaneous tumor size in athymic nude mice. Cancer Chemother Pharmacol 124: 148-54)。 柱代表5只/組。化合物2在濃度為30 mg/kg時可以顯著抑制Flt-3-ITD突變的異種移植物的生長。在另一個研究系列中，棵鼠皮下注射500萬MV七11細(xì)胞。在腫瘤 達(dá)到約為100 mi^的大小后，小鼠被分為兩組(6只每組)。 一組給 予50mg/kg化合物2，另一組給予安慰劑， 一天一次，持續(xù)兩周。腫 瘤可以按照安慰劑處理組中的腫瘤大小分為檢測不到/消退，靜止或持 續(xù)增大幾組(圖7)。安慰劑處理小鼠的腫瘤在兩周之內(nèi)長大到1000 mm3，而用MC-2002 ( 50 mg/kg)處理過的小鼠中有66%在腫瘤大小上 顯示出效果。在有反應(yīng)的這些小鼠中，有50%顯示其腫瘤靜止，而剩 下的50%的小鼠腫瘤完全消除(數(shù)據(jù)未提供)。注射MV4; 11細(xì)胞的棵鼠每天兩次口服給予15 mg/kg的藥化合物 5。腫瘤生成開始后第八天，根據(jù)肺瘤大小將小鼠分成兩組(每組7-9 只)，分別給予賦形劑或15 mg/kg的化合物5。在治療的開始，五天 和十天后測量腫瘤的大小。給予15mg/kg的化合物5的小鼠展現(xiàn)出很 明顯的抑制異種移植物急性粒細(xì)胞白血病的生長(圖10)。進(jìn)行了另一個試驗來比較化合物2和化合物5的效應(yīng)。腫瘤生成 開始后第十八天，根據(jù)肺瘤大小將小鼠分成三組。分別用賦形劑，30 mg/kg的化合物2 (每天一次)或15 mg/kg的化合物5 (每天兩次) 處理，口服給藥10天。測量腫瘤的體積，對每組的單個腫瘤體積繪圖 (n=5-8只每組)。給予賦形劑處理的組腫瘤長的較快?；衔?和 化合物5都能顯著抑制腫瘤生長。在減小腫瘤大小方面，化合物5明 顯強(qiáng)于化合物2 (圖11)。另一試驗中，注射腫瘤細(xì)胞三周后，形成巨大AML腫瘤的小鼠按 照腫瘤大小分為兩組。然后分別用賦形劑或50 mg/kg的化合物5 (每 天兩次)口服給藥3和6天。對每一單個腫瘤的體積繪圖?；衔? 展示出顯著的對大腫瘤生長的抑制(圖12)。在本說明書中提到的所有專利、專利申請和出版物都是表示與本 發(fā)明相關(guān)的本行業(yè)內(nèi)普通技術(shù)人員的水平。在此引用的每個專利、權(quán) 利申請和出版物特此通過引用而將其全文結(jié)合在此，無論在特定的應(yīng) 用中是否明確地指出應(yīng)引用而將其結(jié)合。盡管本發(fā)明已經(jīng)聯(lián)系其具體的實施方案進(jìn)行了說明，應(yīng)當(dāng)理解它 能夠進(jìn)行進(jìn)一步的修改，并且本申請旨在包括總體上遵循本發(fā)明原則 的本發(fā)明的任何變體、用途、或調(diào)整，并包括在本發(fā)明相關(guān)的領(lǐng)域內(nèi) 的已知或者慣用做法范圍內(nèi)的對于本說明的偏離，這些可適用于以上 給出的必要特征，并符合所附權(quán)利要求的范圍。
權(quán)利要求
1.以下化學(xué)式的化合物、或者其同分異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物、多型變體、藥物前體、或它們的鹽其中“----”存在或不存在；W為(a)或(b)(a)A為-CR21R22-、-NR23-、-O-或-S-；B為-OR24、-SR25、-NR28R29；D和E共同或獨立地為-CR30-或-N-；Ar為(c)或(d)并且R1，R2，R3，R11，R12，R21，R22，R23，R24，R25，R28，R29和R30獨立地或共同為氫、烷基、取代的烷基、鹵代烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、鹵基、氰基、硝基、羥基、?；?、取代的?；?、酰氧基、氨基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、芳基脲、氨基甲酸烷基酯、氨基甲酸芳基酯、雜芳基、烷氧基、取代的烷氧基、鹵代烷氧基、硫代烷基、硫代鹵代烷基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、或者取代的二烷基羧酰胺。
2. 權(quán)利要求l的化合物，其中R,和R2獨立地或共同為氫、烷基、 取代的烷基、卣代烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧 基、取代的烷氧基、酰基、單取代氨基、二取代氨基、羧基、烷氧羰基、 烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、取代的二烷基羧酰胺 或者卣代烷氧基。
3. 權(quán)利要求2的化合物，其中Id和R2獨立地為氫、烷基、取 代的烷基、芳烷基、取代的芳烷基、二取代氨基基團(tuán)、或者含2到10 個碳原子的支鏈烷基基團(tuán)。
4.權(quán)利要求l的化合物，其中W為
5. 權(quán)利要求4的化合物，其中R3為氫，并且"——"表示存在鍵B
6. 權(quán)利要求l的化合物，其中W為^ 〈。-R"O——R12 。
7. 權(quán)利要求6的化合物，其中Ru和W蟲立地或共同選自以下 基團(tuán)構(gòu)成的組甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁 基、戊基、；權(quán)戊基、和正戊基。
8. 權(quán)利要求1的化合物，其中R!和R2獨立地或共同為氫或烷基。
9. 權(quán)利要求1的化合物，其中Ar為化學(xué)式(c)或者(d):(c)(d)
10. 權(quán)利要求2的化合物，其中R2為氫。
11. 權(quán)利要求2的化合物，其中"——"表示存在鍵,
12. 權(quán)利要求2的化合物，其中R3為氫、甲基、或乙基。
13. 化學(xué)式(II)的化合物、或者其同分異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物、多 型變體、藥物前體、或它們的鹽<formula>formula see original document page 5</formula>其中R:為氫；并且l和R24各自獨立地或共同是烷基、取代的烷基、卣代烷基、烯 基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、?；⑷〈孽；ⅤＱ趸?、氨 基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、芳 基脲、氨基甲酸烷基酯、氨基甲酸芳基酯、雜芳基、烷氧基、取代的烷 氧基、面代烷氧基、硫代烷基、硫代g代烷基、羧基、烷氧羰基、烷基 羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、或者取代的二烷基羧酰胺。
14. 化合物，其選自化合物2、 5和8構(gòu)成的組。
15. 化學(xué)式(III)的化合物、或其同分異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物、多型 變體、藥物前體、或它們的鹽。其中l(wèi)和R"各自獨立地或共同為烷基、取代的烷基、卣代烷基、烯 基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、?；?、取代的?；ⅤＱ趸?、氨 基、單取代氨基、二取代氨基、烷基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、芳 基脲、氨基甲酸烷基酯、氨基甲酸芳基酯、雜芳基、烷氧基、取代的烷 氧基、g代烷氧基、硫代烷基、硫代S代烷基、羧基、烷氧羰基、烷基 羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、或者取代的二烷基羧酰胺； 并且Ru和R,2各自獨立地或共同為烷基，選自由以下基團(tuán)構(gòu)成的組甲 基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基、 和正戊基。
16.藥用組合物，包含權(quán)利要求1到15中任何一項的化合物以及藥 學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
17. 用于調(diào)節(jié)或抑制蛋白激酶的催化活性的方法，包括使所述蛋 白激酶與權(quán)利要求1到15中的任何一項的化合物或鹽相接觸。
18. 權(quán)利要求17的方法，其中所迷蛋白激酶選自以下物質(zhì)構(gòu)成的 組受體酪氨酸激酶、非受體酪氨酸激酶、和絲氨酸-蘇氨酸激酶。
19. 權(quán)利要求17的方法，其中所述蛋白激酶相關(guān)的障礙是逸自以 下障礙構(gòu)成的組EGFR相關(guān)的障礙、PDGFR相關(guān)的障礙、cKU相關(guān)的 障礙、RET相關(guān)的障礙、以及FLT-3相關(guān)的障礙。
20. 權(quán)利要求17的方法，其中所述蛋白激酶相關(guān)的障礙是選自 以下癌癥構(gòu)成的組鱗狀細(xì)胞癌、星形細(xì)胞瘤、卡波西肉瘤、惡性膠質(zhì) 瘤、肺癌、膀胱癌、頭頸部癌、黑色素瘤、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌、 曱狀腺癌、腎癌、小細(xì)胞肺癌、白血病、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、結(jié)腸直腸癌、泌 尿生殖器癌、和胃腸癌。
21. 權(quán)利要求17的方法，其中所迷蛋白激酶相關(guān)的障礙是選自以 下障礙構(gòu)成的組糖尿病、自身免疫性疾病、過度增殖障礙、再狹窄、 纖維化、4艮屑病、vonHeppel-Lindau病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 血管發(fā)生、炎性障礙、免疫障礙、和心血管障礙。
22. 權(quán)利要求17的方法，其中所述調(diào)節(jié)或者抑制發(fā)生在哺乳動 物，任選是人。
23. 權(quán)利要求18的方法，其中所述激酶是在患有AML和/或cKU (KIT)的患者體內(nèi)的FLT-3突變型，或者是患有胃腸癌癥或其他癌癥的患者體內(nèi)的cKit的突變型。
24. 權(quán)利要求23的方法，所述調(diào)節(jié)或者抑制發(fā)生在患有癌癥、任選 是AML或胃腸癌癥、的哺乳動物體內(nèi)，任選在人的體內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明是針對特定具可獲專利的、表現(xiàn)出蛋白激酶(PK)抑制活性或者調(diào)節(jié)能力的、取代的苯并噁唑衍生物。還描述了包含這些化合物的藥物組合物，以及制備和應(yīng)用它們的方法。例如，這些雜環(huán)化合物有助于治療蛋白激酶活性異常所致的障礙，包括涉及細(xì)胞異常增生的疾病和障礙，例如，急性粒細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、胃腸間質(zhì)性癌癥、甲狀腺癌、其他癌癥和白血病，以及其他疾病，諸如炎癥和動脈粥樣硬化。
文檔編號C07D413/04GK101233129SQ200680028185
公開日2008年7月30日 申請日期2006年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月31日
發(fā)明者布魯斯·卡特, 揚·揚, 普蘭尼·揚, 穆巴拉克·魯沙利夫, 馬丁·米蘭達(dá), 馬格努斯·普法爾, 麥克拉·普法爾 申請人:普法爾家族聯(lián)合企業(yè)(1996.7.9)