專利名稱：苯并噻吩異羥肟酸衍生物的制作方法
專利說明苯并噻吩異羥肟酸衍生物 發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一類新的異羥肟酸衍生物。該異羥肟酸化合物可以用于治療癌癥。所述的異羥肟酸化合物還可以抑制組蛋白脫乙?；覆⑶疫m合于選擇性地誘導(dǎo)終末分化以及阻止贅生性細胞的細胞生長和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞的增殖。因此，本發(fā)明的化合物用于治療所患腫瘤的特征在于贅生性細胞增殖的患者。本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防和治療TRX-介導(dǎo)的疾病，例如自身免疫性疾病、變應(yīng)性疾病和炎性疾病，以及用于預(yù)防和/或治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，例如神經(jīng)變性疾病。

背景技術(shù)：
具有異羥肟酸部分的化合物已顯示出具有有用的生物活性。例如，已知含有異羥肟酸部分的許多肽基化合物抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)，后者為含鋅內(nèi)肽酶家族。MMP在生理學(xué)上和病理學(xué)上的組織老化中起重要作用。因此，能抑制MMP活性的肽基化合物可用于治療或預(yù)防涉及組織衰變和炎癥的病癥。此外，至少部分基于異羥肟酸基團與鋅結(jié)合的特性，含有異羥肟酸部分的化合物已顯示能抑制組蛋白脫乙酰酶(HDAC)。
抑制HDAC可阻抑基因表達，包括與腫瘤抑制有關(guān)的基因表達。抑制組蛋白脫乙酰基酶可導(dǎo)致腫瘤抑制基因?qū)M蛋白脫乙?；?介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄阻抑。例如，抑制組蛋白脫乙?；缚商峁┮环N治療癌癥、血液疾病(例如造血疾病)和與遺傳有關(guān)的代謝疾病的方法。更具體地說，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是細胞分化、增殖和凋亡中的重要事件。有多個證據(jù)表明通過組蛋白乙?；兔撘阴；瘷C理來完成細胞的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)(Grunstein，M.，Nature，389349-52(1997))。人們認(rèn)為這些作用通過染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化來發(fā)生，這種變化通過轉(zhuǎn)變組蛋白對核小體中卷曲螺旋型DNA的親和力來實現(xiàn)。已鑒定出5種組蛋白。在核小體中發(fā)現(xiàn)了組蛋白H2A、H2B、H3和H4，并且H1是位于核小體之間的連接體。除單獨存在于核小體結(jié)構(gòu)外部的H1之外，每個核小體在其核中含有其中的兩種組蛋白。認(rèn)為當(dāng)組蛋白低乙酰化時，組蛋白與磷酸DNA骨架的親和力更大。該親和力導(dǎo)致DNA與組蛋白緊密結(jié)合，致使DNA難以轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件和器件。
乙?；癄顟B(tài)的調(diào)節(jié)通過組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙?；?HDAC)兩種酶復(fù)合物之間的活性平衡來發(fā)生。
認(rèn)為低乙?；癄顟B(tài)抑制締合的DNA轉(zhuǎn)錄。該低乙?；癄顟B(tài)通過包括HDAC酶在內(nèi)的大多蛋白(large multiprotein)復(fù)合物催化。特別地，已證實HDAC催化除去染色質(zhì)核組蛋白上的乙?；?br> 幾個實例表明，HAT或HDAC的活性的擾亂被牽涉在惡性表型發(fā)育中。例如，在急性早幼粒細胞白血病中，PML和αRAR融合產(chǎn)生的癌蛋白質(zhì)似乎通過募集HDAC而抑制特異性基因轉(zhuǎn)錄(Lin，R.J.等，Nature391811-14(1998))。按照這樣的方式，贅生性細胞不能完成分化，導(dǎo)致白血病細胞系的過度增殖。
美國專利5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990公開了可用于選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化、細胞生長停滯或細胞程序死亡的異羥肟酸衍生物，這些文獻的內(nèi)容在此引入作為參考。除了其作為抗腫瘤劑的生物活性外，最近鑒定了這些異羥肟酸衍生物還可用于治療或預(yù)防各式各樣的硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病和病癥，例如炎性疾病、變應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病、與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病或特征為細胞過度增殖的疾病(美國專利申請?zhí)柕?0/369,094號，2003年2月15日提交，該專利文獻在此整個引入作為參考)。此外，認(rèn)為這些異羥肟酸衍生物可用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病如神經(jīng)變性疾病以及用于治療腦癌(參見美國專利申請?zhí)?0/273,401號，2002年10月16日提交，該專利文獻在此整個引入作為參考)。
認(rèn)為經(jīng)X-射線晶體分析法研究證實，用含異羥肟酸的化合物N-辛二?；桨樊惲u肟酸(SAHA)(在上述引用的美國專利中公開)抑制HDAC通過與酶的催化部位直接相互作用進行(Finnin，MS.等，Nature 401188-193(1999))。認(rèn)為抑制HDAC的結(jié)果對基因組沒有普遍性作用，而是僅影響基因組的小子集(Van Lint，C.等，Gene Expression 5245-53(1996))。用與HDAC抑制劑一起培養(yǎng)的惡性腫瘤細胞系的DNA微陣列(microarrays)提供的證據(jù)表明有有限數(shù)量(1-2％)的其產(chǎn)物被改變的基因。例如，在培養(yǎng)基中用HDAC抑制劑處理細胞出現(xiàn)連續(xù)誘導(dǎo)細胞周期蛋白依賴性的激酶抑制劑p21(Archer，S.Shufen，M.Shei，A.，Hodin，R.PNAS 956791-96(1998))。此蛋白在細胞周期停滯中起重要作用。認(rèn)為HDAC抑制劑通過使在p21基因區(qū)域中組蛋白的高乙?；癄顟B(tài)擴增而增加p21轉(zhuǎn)錄率，因而使基因可以到達轉(zhuǎn)錄機構(gòu)。那些表達不受HDAC抑制劑影響的基因在區(qū)域性的締合的組蛋白的乙?；袥]有變化(Dressel，U.等，AnticancerResearch 20(2A)1017-22(2000))。
此外，異羥肟酸衍生物如SAHA能誘導(dǎo)腫瘤細胞生長停滯、分化和/或細胞程序死亡(Richon等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，935705-5708(1996))。這些化合物被靶向?qū)τ谫樕约毎優(yōu)閻盒缘哪芰碚f是內(nèi)在的機制，因為它們在有效抑制動物腫瘤生長的劑量下未出現(xiàn)毒性(Cohen，L.A.等.，Anticancer Research 194999-5006(1999))。
考慮到含有異羥肟酸部分的化合物具有廣泛的應(yīng)用，因此非常需要開發(fā)新的具有改進性能的異羥肟酸衍生物，例如，提高的效力或增加的生物利用度。
發(fā)明概述 本發(fā)明涉及一類新的異羥肟酸衍生物。該異羥肟酸化合物可以被用于治療癌癥。所述的異羥肟酸化合物還可以抑制組蛋白脫乙?；覆⑶疫m合于選擇性地誘導(dǎo)終末分化以及阻止贅生性細胞的細胞生長和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞的增殖。因此，本發(fā)明的化合物用于治療所患腫瘤的特征在于贅生性細胞增殖的患者。本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防和治療TRX-介導(dǎo)的疾病，例如自身免疫性疾病、變應(yīng)性疾病和炎性疾病，并且用于預(yù)防和/或治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，例如神經(jīng)變性疾病。此外，本發(fā)明提供藥物組合物，其包含所述的異羥肟酸異羥肟酸衍生物，以及這些藥物組合物的安全的劑量給藥方案，其可以容易地遵照，并且其在體內(nèi)產(chǎn)生該異羥肟酸衍生物的治療有效量。
現(xiàn)已出乎意料地發(fā)現(xiàn)，某些異羥肟酸衍生物作為組蛋白脫乙?；?HDAC)抑制劑顯示出改進的活性。
因此，本發(fā)明涉及在本文中詳細描述的式I表示的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物和水合物水合物。

本發(fā)明的上述目的以及其它目的、特征和優(yōu)點將通過下列本發(fā)明優(yōu)選實施方案的更具體描述而變得明白。
發(fā)明的詳細說明 本發(fā)明涉及一類新的具有苯并噻吩或噻吩骨架的異羥肟酸衍生物。在一種實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物可以抑制組蛋白脫乙酰基酶并且適合于選擇性地誘導(dǎo)終末分化以及阻止贅生性細胞的細胞生長和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞的增殖。因此，本發(fā)明的化合物用于在患者中治療癌癥。本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防和治療TRX-介導(dǎo)的疾病，例如自身免疫性疾病、變應(yīng)性疾病和炎性疾病，并且用于預(yù)防和/或治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，例如神經(jīng)變性疾病。
現(xiàn)已出乎意料地和令人吃驚地發(fā)現(xiàn)，某些異羥肟酸衍生物作為組蛋白脫乙?；?HDAC)抑制劑顯示出改進的活性。
化合物 本發(fā)明涉及式I表示的化合物，即，異羥肟酸衍生物，和/或其立體異構(gòu)體(包括對映異構(gòu)體)、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物
其中A選自
其中R1-R16和R27相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C2-C10鏈烯基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19； R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、-C(＝O)R25、-C(＝O)OR25、-C(＝O)N(R26)2、-SO2R25，或者R1和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； R21和R26獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； R22是未取代的或取代的雜環(huán)基； R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫，R23和R24不能都是-NR18R19，或R23和R24不能都是羥基； R25獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； m、p和q相互獨立地是1或2； n和r相互獨立地是0、1或2； 或其立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物。
在一種實施方案中，R22選自未取代的或取代的咪唑基、二唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、吡咯基和三唑基。在一種實施方案中，R22選自未取代的或取代的三唑基或二唑基。
在一種實施方案中，R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19。
在一種實施方案中，R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基。
在一種實施方案中，R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫或-NR18R19。
在一種實施方案中，R25是芳基或C1-C10烷基。
本發(fā)明還涉及式I的化合物，其中A是選自下面的基團
其中R1、R2和R6-R16相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19； R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、未取代的或取代的-C(＝O)芳基、未取代的或取代的-C(＝O)C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的-C(＝O)C1-C10烷基，或者R1和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫或-NR18R19。
m、p和q相互獨立地是1； n和r相互獨立地是0或1。
在一種實施方案中，n＝0和/或r＝0。在另一種實施方案中，R27是氫。
在一種具體實施方案中，R1、R2和R5-R16中的一個或多個是取代或未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
本發(fā)明還涉及式I表示的化合物，其中A選自
以及所有的其它取代基如上文式I所述。在一種實施方案中，n＝0和/或r＝0。在另一種實施方案中，R27是氫。在一種實施方案中，m、p和q相互獨立地是1。在一種具體實施方案中，R1、R2、R5、R6、R7、R8和R11-R16中的一個或多個是取代或未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
本發(fā)明還涉及式I表示的化合物，其中A選自
以及所有的其它取代基如上文式I中所述。在一種實施方案中，n＝0。在另一種實施方案中，R27是氫。在一種實施方案中，m是1。在一種具體實施方案中，R1、R2、R5、R11和R12中的一個或多個是取代和未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
在式I的另一種實施方案中，A是
其中R5和R20如上式I中所述。在一種具體實施方案中，R5是未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或者是未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；以及R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基和未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基。在一種實施方案中，R5是未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基。
在式I的另一種實施方案中，A是
其中R11、R12、R23和R24如上式I中所述。在一種具體實施方案中，m是1，R11和R12中的至少一個是取代或未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基；以及R23和R24獨立地選自氫、C1-C6烷基和-NR18R19；以及R23和R24不能都是氫或-NR18R19。在一種實施方案中，R11是氫，以及R12是取代的苯基。在一種具體實施方案中，所述的苯基被甲氧基取代。在一種實施方案中，R23是氫以及R24是-NR18R19。在一種實施方案中，R18是氫，以及R19是取代或未取代的C1-C10烷基芳基。在一種實施方案中，R18是氫，以及R19是取代或未取代的C3-C8環(huán)烷基。
在式I的另一種實施方案中，A是
其中R1、R2和R20如上式I所述。在一種具體實施方案中，R1和R2中的至少一個是取代或未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-吡啶基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、-CH2CH2-吲哚基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。在一種具體實施方案中，R20是C1-C6烷基。
在式I的一種實施方案中，R1和R2、R6和R7以及R11和R12與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)。所述的雜環(huán)可以是單環(huán)的或者可以是稠合的雙環(huán)或三環(huán)。此外，所述的雜環(huán)除了氮之外還可以包含一個或多個雜原子，例如，O、S、N和P。
本發(fā)明還涉及式II表示的化合物，即，異羥肟酸衍生物，和/或其立體異構(gòu)體(包括對映異構(gòu)體)、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物
其中A1和A2之一是氫以及另一個是選自下面的基團

其中R1-R16和R27相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C2-C10鏈烯基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19； R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、-C(＝O)R25、-C(＝O)OR25、-C(＝O)N(R26)2、-SO2R25，或者R18和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代； R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； R21和R26獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； R22是未取代的或取代的雜環(huán)基； R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫，R23和R24不能都是-NR18R19，或R23和R24不能都是羥基； R25獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基； m、p和q相互獨立地是1或2； n和r相互獨立地是0、1或2； 或其立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物。
本發(fā)明還包括式II的化合物，其中A1和A2中的一個具有式I中A所述的實施方案。在一種實施方案中，A1是氫。
在下文的實驗部分的表格中提供具體實施方案所述的式I的異羥肟酸衍生物的非限制性例子。
本發(fā)明化合物的具體實例包括 N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； 6-{1-(芐基氨基)-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-{2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代-1-[(2-苯基乙基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； 6-{1-(環(huán)己基氨基)-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-{(1R或S)-1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-(2-氨基苯基)-6-(1-{[2-(4-溴苯基)乙基]氨基}乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-[1-(異丁基氨基)乙基]-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； 6-(1-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}乙基)-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]丙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]丁基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺； 或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
化學(xué)定義 在此所使用的″烷基″是指包括具有指定碳原子數(shù)的分枝的和直鏈的飽和脂肪族烴基。例如，在″C1-C10烷基″中的C1-C10被定義為包括在線性或分枝的排列中具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個碳的基團。例如，具體地說，″C1-C10烷基″包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。術(shù)語″環(huán)烷基″是指具有指定碳原子數(shù)的單環(huán)飽和脂肪族烴基。例如，″環(huán)烷基″包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基等。在本發(fā)明的一種實施方案中，術(shù)語″環(huán)烷基″包括上面剛剛描述的基團，此外，還包括單環(huán)不飽和脂肪烴基。例如，在此實施方案中所定義的″環(huán)烷基″包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊烯基、環(huán)丁烯基等。在一種實施方案中，如果碳原子的數(shù)目不是指定的，″烷基″是指C1-C12烷基，以及在另一種實施方案中，″烷基″是指C1-C6烷基。在一種實施方案中，如果碳原子的數(shù)目不是指定的，″環(huán)烷基″是指C3-C10環(huán)烷基，以及在另一種實施方案中，″環(huán)烷基″是指C3-C7環(huán)烷基。在一種實施方案中，″烷基″的實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基和異丁基。
術(shù)語″亞烷基″是指具有指定碳原子數(shù)的烴雙基基團。例如，″亞烷基″包括-CH2-、-CH2CH2-等。在一種實施方案中，如果碳原子的數(shù)目不是指定的，″亞烷基″是指C1-C12亞烷基，以及在另一種實施方案中，″亞烷基″是指C1-C6亞烷基。
當(dāng)在術(shù)語″烷基芳基″、″烷基環(huán)烷基″和″烷基雜環(huán)基″中使用時，所述的術(shù)語″烷基″是指所述部分的烷基部分并且在所述部分的芳基和雜芳基部分中沒有描述原子的數(shù)目。在一種實施方案中，如果碳原子的數(shù)目不是指定的，那么″烷基芳基″、″烷基環(huán)烷基″和″烷基雜環(huán)基″的″烷基″是指C1-C12烷基，以及在另一種實施方案中，″芳烷基″是指C1-C6烷基。
如果沒有指定碳原子的數(shù)目，則所述的術(shù)語″鏈烯基″是指直鏈的、分枝的或環(huán)狀的、含有2-10個碳原子以及至少一個碳-碳雙鍵的非芳香烴基。優(yōu)選地，存在一個碳-碳雙鍵，并且可以存在至多四個非芳香族的碳-碳雙鍵。因此，″C2-C6鏈烯基″是指具有2-6個碳原子的鏈烯基。鏈烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和環(huán)己烯基。所述的鏈烯基的直鏈的、分枝的或環(huán)狀的部分可以含有雙鍵并且如果表明是取代鏈烯基的話，其可以被取代。
術(shù)語″炔基″是指直鏈的、分枝的或環(huán)狀的、含有2-10個碳原子并且至少一個碳-碳三鍵的烴基?？梢源嬖谥炼嗳齻€碳-碳三鍵。因此，″C2-C6炔基″是指具有2-6個碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。所述炔基的直鏈的、分枝的或環(huán)狀的部分可以含有三鍵并且如果表明是取代炔基的話，其可以被取代。
在某些情況中，取代基可以用包括0在內(nèi)的碳的范圍限定，例如(C0-C6)亞烷基-芳基。如果芳基是苯基，此定義將包括苯基本身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
在一種實施方案中，在此所使用的″芳基″是指任何穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)，其在每個環(huán)中至多有7個原子，其中至少一個環(huán)是芳香族的。這些芳基的實例包括苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基和聯(lián)苯基。如果芳基取代基是雙環(huán)的并且一個環(huán)是非芳香族的，那么可以理解，連接是通過該芳環(huán)的。
在另一種實施方案中，″芳基″是5-14個碳原子的芳環(huán)，并且包括與5-或6-元環(huán)烷基稠合的碳環(huán)芳香族基團，例如茚滿。碳環(huán)芳族基的實例包括，但不局限于，苯基、萘基，例如，1-萘基和2-萘基；蒽基，例如，1-蒽基，2-蒽基；菲基；芴基，例如，9-芴基，茚滿基等。碳環(huán)的芳香族基團是任選地被如下所述的指定數(shù)目的取代基取代的。
在此所使用的術(shù)語雜芳基表示在每個環(huán)中有至多7個原子的穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)，其中至少一個環(huán)是芳香族的并且含有1-4個選自O(shè)、N和S的雜原子。在另一種實施方案中，術(shù)語雜芳基是指單環(huán)的、雙環(huán)的或三環(huán)的由碳原子和1-4個選自O(shè)、N或S的雜原子組成的5-至14-個環(huán)原子的芳環(huán)。在此定義范圍內(nèi)的雜芳基包括但不局限于吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、唑基、異唑基、吲哚基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉。如在下面雜環(huán)的定義中所述，″雜芳基″也被理解為包括任何含氮的雜芳基的N-氧化物衍生物。當(dāng)所述的雜芳基取代基是雙環(huán)的并且一個環(huán)是非芳香族的或不含有雜原子時，可以理解，連接是分別通過芳環(huán)或通過含雜原子的環(huán)的。
在另一種實施方案中，″雜芳基″是單環(huán)的、雙環(huán)的或三環(huán)的由碳原子和1-4個選自O(shè)、N或S的雜原子組成的5-至14-個環(huán)原子的芳環(huán)。雜芳基的代表性例子包括，但不局限于，環(huán)己基磺?；铜h(huán)丁基磺?；?-吡啶基(也稱為α-吡啶基)、3-吡啶基(也稱為β-吡啶基)和4-吡啶基(也稱為γ-吡啶基)；噻吩基，例如，2-噻吩基和3-噻吩基；呋喃基，例如，2-呋喃基和3-呋喃基；嘧啶基，例如，2-嘧啶基和4-嘧啶基；咪唑基，例如，2-咪唑基；吡喃基，例如，2-吡喃基和3-吡喃基；吡唑基，例如，4-吡唑基和5-吡唑基；噻唑基，例如，2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基；噻二唑基；異噻唑基；唑基，例如，2-唑基、4-唑基和5-唑基；異唑基；吡咯基；噠嗪基；吡嗪基等。如上所定義的雜環(huán)芳香族(或雜芳基)可以任選地被指定數(shù)目的取代基取代，該取代基如下面芳族基所述。
在一種實施方案中，″雜芳基″還可以包括″稠合的多環(huán)的芳香族″，其是與一個或多個其它雜芳基或非芳香族雜環(huán)稠合的雜芳基。實例包括，喹啉基和異喹啉基，例如，2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉基、6-喹啉基、7-喹啉基和8-喹啉基、1-異喹啉基、3-喹啉基、4-異喹啉基、5-異喹啉基、6-異喹啉基、7-異喹啉基和8-異喹啉基；苯并呋喃基，例如，2-苯并呋喃基和3-苯并呋喃基；二苯并呋喃基，例如，2，3-二氫苯并呋喃基；硫芴基；苯并噻吩基，例如，2-苯并噻吩基和3-苯并噻吩基；吲哚基，例如，2-吲哚基和3-吲哚基；苯并噻唑基，例如，2-苯并噻唑基；苯并唑基，例如，2-苯并唑基；苯并咪唑基，例如，2-苯并咪唑基；異吲哚基，例如，1-異吲哚基和3-異吲哚基；苯并三唑基；嘌呤基；硫茚基，吡嗪基等。稠合多環(huán)芳香族環(huán)系可任選地被如在此所述的指定數(shù)目的取代基取代。
在此所使用的術(shù)語″雜環(huán)″或″雜環(huán)基″是指含有1-4個選自O(shè)、N和S的雜原子的3-至10-元芳香族或非芳香族雜環(huán)，并且包括雙環(huán)基團。因此，″雜環(huán)基″包括上述雜芳基及其二氫和四氫類似物。″雜環(huán)基″的其它例子包括，但不局限于下列氮雜環(huán)丁烷基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲哚嗪基、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘并吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基、六氫氮雜?；?、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲基二氧基苯甲?；?、四氫呋喃基和四氫噻吩基，以及它們的N-氧化物。雜環(huán)基取代基的連接可以通過碳原子或通過雜原子發(fā)生。
在一種實施方案中，″雜環(huán)″(在此也被稱為″雜環(huán)基″)是一種單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)的由碳原子和1-4個選自O(shè)、N、S或P的雜原子組成的5-至14個環(huán)原子的飽和或不飽和環(huán)。雜環(huán)的實例包括，但不局限于吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫嗎啉基、哌嗪基、二氫呋喃基、四氫呋喃基、二氫吡喃基、四氫吡喃基、二氫喹啉基、四氫喹啉基、二氫異喹啉基、四氫異喹啉基、二氫吡嗪基、四氫吡嗪基、二氫吡啶基、四氫吡啶基等。
″烷基芳基基團″(芳烷基)是被芳香族基團取代，優(yōu)選被苯基取代的烷基。優(yōu)選的烷基芳基是芐基。合適的芳族基是在此所述的以及合適的烷基是在此所述的。烷基芳基的合適的取代基是在此所述的。
″烷基雜環(huán)基″是被雜環(huán)基取代的烷基。合適的雜環(huán)基是在此所述的以及合適的烷基是在此所述的。烷基雜環(huán)基的合適的取代基是在此所述的。
″烷基環(huán)烷基″是被環(huán)烷基取代的烷基。合適的環(huán)烷基是在此所述的以及合適的烷基是在此所述的。烷基環(huán)烷基的合適的取代基是在此所述的。
″芳氧基″是一種通過氧附著于化合物的芳基(例如，苯氧基)。
在此所使用的″烷氧基″(烷基氧基)是通過氧原子連接到化合物的直鏈的或分枝的C1-C12或環(huán)狀的C3-C12烷基。烷氧基的例子包括，但不局限于甲氧基、乙氧基和丙氧基。
″芳烷氧基″(芳基烷氧基)是通過芳烷基的烷基部分上的氧附著于化合物的芳烷基(例如，苯基甲氧基)。
在此所使用的″芳基氨基″是通過氮附著于化合物的芳基。
在此所使用的″芳烷基氨基″是通過芳烷基的烷基部分上的氮附著于化合物的芳烷基。
在此所使用，許多部分或基團被稱為是″取代或未取代的″。當(dāng)部分被稱為被取代時，它表示對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說成為有效取代的部分中的任意部分可被取代。在一種實施方案中，術(shù)語″任選地被一個或多個取代基取代的″是指″0-5個取代基″，以及在其它實施方案中，一個取代基、兩個取代基、三個取代基、四個取代基或五個取代基。例如，可取代的基團可以是氫原子，其被非氫原子(即，取代基團)取代?？梢源嬖诙鄠€取代基。當(dāng)存在多個取代基時，所述的取代基可以相同或不同，并且取代可以在任何可取代的位置。取代的這些方式在本領(lǐng)域中是公知的。作為例證，其不應(yīng)該被解釋為限制本發(fā)明的范圍，取代基的某些實例為烷基(其還可以是被取代的，被一個或多個取代基取代)、烷氧基(其可以是被取代的)、鹵素或鹵代基團(F、Cl、Br、I)、羥基、硝基、氧代、-CN、-COH、-COOH、氨基、疊氮基、N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中所述的烷基還可以是被取代的)、N-芳氨基或N，N-二芳基氨基(其中所述的芳基還可以是被取代的)、酯(-C(O)-OR，其中R可以是基團例如烷基、芳基等，其可以是被取代的)、脲(-NHC(O)-NHR，其中R可以是基團例如烷基、芳基等，其可以是被取代的)、氨基甲酸酯(-NHC(O)-OR，其中R可以是基團例如烷基、芳基等，其可以是被取代的)、磺酰胺(-NHS(O)2R，其中R可以是基團例如烷基、芳基等，其可以是被取代的)、芳基(其可以是被取代的)、環(huán)烷基(其可以是被取代的)、烷基芳基(其可以是被取代的)、烷基雜環(huán)基(其可以是被取代的)、烷基環(huán)烷基(其可以是被取代的)和芳氧基。
立體化學(xué) 許多有機化合物以具有使平面偏振光的平面旋轉(zhuǎn)能力的旋光形式存在。在描述旋光性化合物時，用前綴D和L或R和S表示關(guān)于其手性中心的分子絕對構(gòu)型。用前綴d和1或(+)和(-)代表化合物使平面偏振光旋轉(zhuǎn)的符號，用(-)或表示該化合物是左旋的。具有前綴(+)或d的化合物是右旋的。對于給定的化學(xué)結(jié)構(gòu)，除它們是彼此不能重疊的鏡像以外，被稱為立體異構(gòu)體的這些化合物是相同的。一種特定的立體異構(gòu)體還可以被稱為對映異構(gòu)體，這些異構(gòu)體的混合物通常被稱為對映異構(gòu)體混合物。50∶50的對映異構(gòu)體混合物被稱為外消旋體混合物。在此所述的許多化合物可具有一個或多個手性中心，因此可以以不同的對映異構(gòu)體形式存在。如果需要的話，可用星號(*)表示手性碳。當(dāng)在本發(fā)明式中，連接手性碳的鍵被畫成直線時，應(yīng)理解為手性碳的(R)和(S)兩種構(gòu)型，因此該式包括對映體及其混合物兩者。與本領(lǐng)域用法相同，當(dāng)需要指定手性碳的絕對構(gòu)型時，可將手性碳的一個鍵畫成楔形(與平面以上的原子連接)，且可將另一個畫成虛線或短平行線的楔形(與平面以下的原子連接)?？捎肅ahn-Inglod-Prelog系統(tǒng)表示手性碳的(R)或(S)構(gòu)型。
當(dāng)本發(fā)明的HDAC抑制劑含有一個手性中心時，這些化合物以兩種對映體形式存在，并且本發(fā)明包括對映體和對映體的混合物兩者，例如稱為外消旋體混合物的特定的50∶50混合物。可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如通過形成可分離的非對映體鹽例如通過結(jié)晶(參見CRCHandbook of Optical Resolutions via Diastereomeric Salt Formation byDavid Kozma(CRC Press，2001))；形成可分離的非對映體衍生物或絡(luò)合物，例如通過結(jié)晶、氣相-液相或液相色譜；使一種對映體與對映體特異性試劑選擇性反應(yīng)例如酶促酯化；或在手性環(huán)境中進行氣相-液相或液相色譜，例如在手性載體例如鍵合手性配體的硅膠上，或在手性溶劑存在下，拆分這些對映體。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，當(dāng)通過上述分離方法之一將需要的對映體轉(zhuǎn)化為另一種化學(xué)實體時，需要進一步釋出需要的對映體的步驟?；蛘?，可用旋光性試劑、底物、催化劑或溶劑，通過不對稱合成或通過不對稱轉(zhuǎn)化，將一種對映體轉(zhuǎn)化為另一種對映體，合成具體的對映體。
應(yīng)當(dāng)理解指定本發(fā)明化合物在手性碳上的具體的絕對構(gòu)型是指所指定化合物的對映異構(gòu)體形式為對映體過量(ee)或換言之為基本上不含其它的對映異構(gòu)體。例如化合物的″R″構(gòu)型是基本上不含化合物″S″構(gòu)型的，并因此為″S″構(gòu)型的對映體過量。反之，例如化合物的″S″構(gòu)型是基本上不含化合物″R″構(gòu)型的，并因此為″R″構(gòu)型的對映體過量。對映體過量，當(dāng)此處使用時，為特定對映異構(gòu)體的存在量在50％以上。在一種具體實施方案中，當(dāng)指定一種具體的絕對構(gòu)型時，所述化合物的對映異構(gòu)體過量至少約為90％。
當(dāng)本發(fā)明的化合物具有兩個或多個手性碳時，它可以具有兩種以上旋光異構(gòu)體并可以以非對映異構(gòu)體形式存在。例如，當(dāng)存在兩個手性碳時，該化合物可以具有至多4個旋光異構(gòu)體和2對對映異構(gòu)體((S，S)/(R，R)和(R，S)/(S，R))。成對的對映異構(gòu)體(例如，(S，S)/(R，R))彼此為鏡像立體異構(gòu)體。非鏡像立體異構(gòu)體(例如，(S，S)和(R，S))為非對映異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體對可以通過本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的方法分離，例如色譜或結(jié)晶，以及每對內(nèi)的個體對映異構(gòu)體可以如上所述分離。本發(fā)明包括這些化合物及其混合物的每個非對映異構(gòu)體。
除本文另有明確規(guī)定外，在此所使用的″一個″、″一種″和″所述″包括單數(shù)和復(fù)數(shù)指示物。因此，例如，″活性劑″或″藥理學(xué)活性劑″包括單一活性劑以及兩種或多種不同的活性劑的組合，″載體″包括兩種或多種載體的混合物以及單一載體等。
本發(fā)明還包括在此公開的異羥肟酸衍生物的前藥。任何該化合物的前藥可以使用公知的藥理學(xué)技術(shù)進行制備。
本發(fā)明，除上述所列的化合物外，是指包括這些化合物的同系物和類似物的使用。在本文中，同系物為具有與上述化合物基本上結(jié)構(gòu)相似的分子，類似物為具有基本上生物學(xué)相似性的分子，而不管結(jié)構(gòu)是否相似。
藥學(xué)上可接受的鹽 如上所述，在此所述的異羥肟酸衍生物可以被制備成其藥學(xué)上可接受的鹽的形式。藥學(xué)上可接受的鹽是保持了母體化合物所需的生物活性并且沒有有害的毒性作用的鹽。這些鹽的實例是有機和無機酸的酸加成鹽，例如，所述的酸為鹽酸、硫酸、甲磺酸、富馬酸、馬來酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、草酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸等。藥學(xué)上可接受的鹽還可以通過用無機堿和有機堿處理得到，無機堿例如是氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵，有機堿例如是異丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、組氨酸、普魯卡因等。藥學(xué)上可接受的鹽還可以是由元素陰離子如氯、溴和碘形成的鹽。
如上所述，所公開的活性化合物還可以制備成其水合物的形式。術(shù)語″水合物″包括但不局限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物等。
如上所述，所公開的活性化合物還可以制備成與任何有機或無機溶劑，例如醇如甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇，酮如丙酮，芳香族溶劑等的溶劑合物。
所公開的活性化合物還可以被制備成任何固體或液體外形。例如，所述化合物可以為結(jié)晶形態(tài)、無定形形態(tài)，并且具有任何粒徑。此外，所述化合物顆粒可被微粉化或可以形成凝聚、顆粒、粉末、油、油狀懸浮液或固體或液體外形的任何其它形式。
本發(fā)明的化合物還可以表現(xiàn)出多晶型現(xiàn)象。本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的各種多晶型物。術(shù)語″多晶型物″是指物質(zhì)的特定的結(jié)晶狀態(tài)，其具有特定的物理性質(zhì)如X-射線衍射、IR光譜、熔點等。
除本文另有明確規(guī)定外，在此所使用的″一個″、″一種″和″所述的″包括單數(shù)和復(fù)數(shù)指示物。因此，例如，″活性劑″或″藥理學(xué)活性劑″包括單一活性劑以及兩種或多種不同的活性劑組合，″載體″包括兩種或多種載體的混合物以及單一載體等。
治療方法 本發(fā)明還涉及使用在此所述的異羥肟酸衍生物的方法。如在此所證實，本發(fā)明的異羥肟酸衍生物可用于治療癌癥。此外，發(fā)現(xiàn)異羥肟酸衍生物還可以用于多種其它疾病。非限制性例子是如在此所述的硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病，以及如在此所述的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病。
1.治療癌癥 如在此所證實，本發(fā)明的異羥肟酸衍生物可用于治療癌癥。因此，在一種實施方案中，本發(fā)明本發(fā)明涉及在需要治療的患者中治療癌癥的方法，包括給予所述患者治療有效量的在此所述的異羥肟酸衍生物。
術(shù)語″癌癥″是指由贅生性細胞增殖所引起的任何癌癥，例如實體瘤、贅生物、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等。特別地，可以用本發(fā)明的化合物、組合物和方法治療的癌癥包括，但不局限于心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)，粘液瘤，橫紋肌瘤，纖維瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺支氣管癌(鱗狀上皮細胞、未分化的小細胞、未分化的大細胞、腺癌腺癌)，肺泡(細支氣管)癌，支氣管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，軟骨錯構(gòu)瘤，間皮瘤；胃腸食道(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌，淋巴瘤，平滑肌肉瘤)，胰腺(導(dǎo)管腺癌、胰島素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、血管活性腸肽腫瘤)，小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)，大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道腎(腺癌、韋母氏瘤[腎母細胞瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質(zhì)細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；肝肝癌(肝細胞癌)，肝膽管型肝癌，肝胚細胞瘤，血管肉瘤，肝細胞性腺瘤，血管瘤；骨骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纖維肉瘤，惡性纖維組織細胞瘤，軟骨肉瘤，尤因氏肉瘤，惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細胞肉瘤)，多發(fā)性骨髓瘤，惡性巨細胞瘤，脊索瘤，骨軟骨瘤(骨軟骨性外生骨疣)，良性軟骨瘤，成軟骨細胞瘤，軟骨粘液纖維瘤，骨樣骨瘤和巨細胞瘤；神經(jīng)系統(tǒng)顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃色瘤、畸形性骨炎)，腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)，腦(星形細胞瘤、成神經(jīng)管細胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、生殖細胞瘤[松果體瘤]、多形成惡性膠質(zhì)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、神經(jīng)鞘瘤、視網(wǎng)膜母細胞瘤、先天性腫瘤)，脊髓神經(jīng)纖維瘤，腦膜瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)，子宮頸(宮頸癌、腫瘤前期子宮頸非典型增生)，卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分類的癌癥]、粒層-鞘細胞瘤、卵巢塞-萊二氏細胞瘤、無性細胞瘤、卵巢未成熟畸胎瘤)，外陰(鱗狀細胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)，陰道(明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)，輸卵管(癌癥)；血液血液(骨髓性白血病[急性和慢性]、急性淋巴母細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、骨髓增殖性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓發(fā)育異常綜合征)，何杰金病，非何杰金淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；皮膚惡性黑色素瘤，基底細胞癌，鱗狀細胞癌，卡波西肉瘤，發(fā)育不良痣，脂肪瘤，血管瘤，皮膚纖維瘤，瘢痕瘤，牛皮癬和腎上腺成神經(jīng)細胞瘤。因此，在此提供的術(shù)語″癌細胞″包括患有上文所列的疾病中任意一種的細胞。
在一種實施方案中，本發(fā)明的化合物可用于治療癌癥，所述的癌癥包括，但不局限于白血病，包括急性白血病和慢性白血病例如急性淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性粒性白血病(CML)和毛細胞白血病；淋巴瘤例如皮膚T-細胞淋巴瘤(CTCL)、非皮膚外周T-細胞淋巴瘤、與人T-細胞淋巴病毒(HTLV)有關(guān)的淋巴瘤例如成人T細胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、淋巴肉芽腫病和非霍奇金淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、彌散性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)；Burkitt’s淋巴瘤；間皮瘤、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)淋巴瘤；多發(fā)性骨髓瘤；童年實體瘤例如腦腫瘤、成神經(jīng)細胞瘤、成視網(wǎng)膜細胞瘤、Wilm’s腫瘤、骨腫瘤和軟組織肉瘤，成人常見的實體瘤例如頭頸癌(例如，口腔、喉和食道的)、生殖泌尿癌癥(例如，前列腺、膀胱、腎、子宮、卵巢、睪丸、直腸和結(jié)腸)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤以及其它皮膚癌、胃癌、腦腫瘤、肝癌和甲狀腺癌。
2.治療硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病 在另一種實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物用于在需要的患者中治療硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病的方法中，所述方法包括給予該患者治療有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸化合物。
TRX-介導(dǎo)的疾病的實例包括，但不局限于，急性和慢性炎性疾病、自身免疫性疾病、變應(yīng)性疾病、與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病、以及特征在于細胞過度增殖的疾病。
非限制性例子是關(guān)節(jié)的炎性病癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和牛皮癬關(guān)節(jié)炎；炎性腸病例如克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎；脊椎關(guān)節(jié)??；硬皮??；牛皮癬(包括T-細胞介導(dǎo)的牛皮癬)以及炎性皮膚病例如皮炎、濕疹、特應(yīng)性皮炎、過敏性接觸性皮炎、蕁麻疹；脈管炎(例如，壞死性、皮膚和過敏性脈管炎)；嗜酸性肌炎、嗜酸性筋膜炎；伴有皮膚或器官白細胞浸潤的癌癥、局部缺血性損傷，包括腦局部缺血(例如，由于創(chuàng)傷引起的腦損傷、癲癇癥、出血或中風(fēng)、其中每種情形都可導(dǎo)致神經(jīng)變性)；HIV、心力衰竭；慢性、急性或惡性肝病，自身免疫性甲狀腺炎；系統(tǒng)性紅斑狼瘡，斯耶格倫綜合癥，肺病(例如，ARDS)；急性胰炎；肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)；阿爾茨海默氏??；惡病質(zhì)/厭食癥；哮喘；動脈粥樣硬化；慢性疲勞綜合癥，發(fā)燒；糖尿病(例如，胰島素糖尿病或青少年糖尿病)；腎小球腎炎；移植物抗宿主排異反應(yīng)(例如，在移植手術(shù)中)；出血性休克；痛覺過敏；炎性腸??；多發(fā)性硬化；肌病(例如，肌肉蛋白代謝，尤其在膿毒癥中)；骨質(zhì)疏松癥；帕金森氏??；疼痛；早產(chǎn)；牛皮癬；再灌注損傷；細胞因子誘導(dǎo)的毒性(例如，膿毒性休克，內(nèi)毒素性休克)；放射治療的副作用，顳下頜關(guān)節(jié)疾病，腫瘤轉(zhuǎn)移；或源于勞損、扭傷、軟骨損傷、創(chuàng)傷如燒傷、矯形外科、感染或其它疾病過程導(dǎo)致的炎癥。變應(yīng)性疾病和病癥，包括但不局限于呼吸性變應(yīng)性疾病如哮喘，過敏性鼻炎，過敏性肺病，過敏性肺炎，嗜酸細胞性肺炎(例如，Loeffler綜合癥，慢性嗜酸細胞性肺炎)，遲發(fā)型超敏反應(yīng)，間質(zhì)性肺病(ILD)(例如，特發(fā)性肺纖維化，或與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有關(guān)的ILD，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，強直性脊柱炎，系統(tǒng)性硬化，斯耶格倫綜合癥，多發(fā)性肌炎或皮肌炎)；全身過敏或過敏性反應(yīng)，藥物過敏(例如，對青霉素、頭孢菌素類)，昆蟲叮咬過敏等。
3.治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(CNS) 在另一種實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物被用于在需要的患者中治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法中，所述方法包括給予該患者治療有效量的任何一種或多種在此所述的異羥肟酸化合物。
在一種具體實施方案中，所述的CNS疾病是神經(jīng)變性疾病。在另一種實施方案中，所述的神經(jīng)變性疾病是遺傳性神經(jīng)變性疾病，例如是多谷氨酰胺擴展疾病。通常，神經(jīng)變性疾病可以按如下分組 I.特征在于無其它顯著神經(jīng)病學(xué)病征的進行性癡呆，例如阿爾茨海默氏病；阿爾茨海默型老年性癡呆；以及皮克病(腦葉萎縮癥)。
II.合并進行性癡呆與其它明顯神經(jīng)異常的綜合癥，例如A)主要在成人中出現(xiàn)的綜合癥(例如，亨廷頓舞蹈病、合并癡呆與運動失調(diào)和/或帕金森病跡象、進行性核上麻痹(Steel-Richardson-Olszewski)、彌漫性Lewy體病和皮質(zhì)齒狀核變性的多系統(tǒng)萎縮癥)；和B)主要出現(xiàn)在兒童或青年成年人中的綜合癥(例如，Hallervorden-Spatz病和進行性家族性肌肉陣攣性癲癇)。
III.體態(tài)和運動逐漸發(fā)展異常的綜合癥，例如震顫性麻痹(帕金森病)、紋狀體黑質(zhì)變性、進行性核上麻痹、扭轉(zhuǎn)張力障礙(扭轉(zhuǎn)痙攣；變形性肌張力障礙)、痙攣性斜頸以及其它運動障礙、家族性震顫和圖雷特綜合癥。
IV.進行性運動失調(diào)的綜合癥例如小腦退化(例如，小腦皮質(zhì)退化和橄欖體腦橋小腦萎縮(OPCA))；和脊髓小腦退化(Friedreich共濟失調(diào)及有關(guān)疾病)。
V.中樞性自主神經(jīng)系統(tǒng)衰竭綜合癥(夏-德綜合征)。
VI.無感覺變化的肌無力或萎縮綜合癥(運動神經(jīng)元疾病例如肌萎縮性側(cè)索硬化、脊髓性肌萎縮(例如，嬰兒脊髓性肌萎縮(Werdnig-Hoffman)、少年脊髓性肌萎縮(Wohlfart-Kugelberg-Welander)以及其它形式的家族性脊髓性肌萎縮)、原生性脊髓側(cè)索硬化和遺傳性痙孿性截癱。
VII.合并有感覺變化的肌無力和萎縮綜合癥(進行性神經(jīng)性肌萎縮癥；慢性家族性多神經(jīng)病)，例如腓肌型肌肉萎縮(Charcot-Marie-Tooth)、肥大間質(zhì)性多神經(jīng)病(Dej erme-Sottas)和各種形式的慢性進行性神經(jīng)病。
VIII.進行性視覺缺失綜合癥，例如視網(wǎng)膜色素變性(色素性視網(wǎng)膜炎)和遺傳性視神經(jīng)萎縮(利伯病)。
定義 與本發(fā)明有關(guān)的術(shù)語″治療″的各種語法形式是指預(yù)防(即，化學(xué)預(yù)防)、治愈、逆轉(zhuǎn)、減輕、緩解、最小化、抑制或停止疾病狀態(tài)、疾病發(fā)展、疾病病原體(例如，細菌或病毒)或其它異常病癥的有害作用。例如，治療可涉及緩解疾病癥狀(即，不一定是全部癥狀)或減緩疾病發(fā)展。因為某些本發(fā)明方法涉及物理去除病原體，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員會認(rèn)識到，在暴露于病原體前或同時給予本發(fā)明化合物(預(yù)防性治療)和暴露于病原體后(甚至康復(fù)后)給予本發(fā)明化合物的情況中，它們同等有效。
在此所使用的癌癥治療是指在哺乳動物中，例如人中部分或完全抑制、延遲或預(yù)防癌癥包括癌癥轉(zhuǎn)移的進程；抑制、延遲或預(yù)防癌癥的復(fù)發(fā)包括癌癥轉(zhuǎn)移；或預(yù)防(化學(xué)預(yù)防)癌癥的發(fā)作或發(fā)展。
在此所使用的術(shù)語″治療有效量″是指包括能夠獲得所需的治療或生物效應(yīng)的任何數(shù)量。療效取決于待治療的疾病或病癥或所需的生物效應(yīng)。因此，療效可為減輕所述疾病或病癥的相關(guān)癥狀和/或抑制(部分或完全)疾病的發(fā)展。引起治療反應(yīng)所需的量取決于患者的年齡、健康、個頭和性別。還可以基于監(jiān)測患者的治療反應(yīng)來確定最佳的用量。
在本發(fā)明中，當(dāng)所述的化合物被用來治療或預(yù)防癌癥時，所需的生物反應(yīng)為部分或完全抑制、延遲或預(yù)防哺乳動物例如人的癌癥發(fā)展包括癌癥轉(zhuǎn)移；抑制、延遲或預(yù)防哺乳動物例如人的癌癥復(fù)發(fā)包括癌癥轉(zhuǎn)移；或預(yù)防哺乳動物例如人癌癥的發(fā)作或發(fā)展。
此外，在本發(fā)明中，當(dāng)所述的化合物被用來治療和/或預(yù)防硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病和病癥時，治療有效量是將需要治療的患者體內(nèi)的TRX水平調(diào)節(jié)(例如增加、減少或保持)在生理學(xué)上適當(dāng)?shù)乃揭援a(chǎn)生所需的治療效果所需的數(shù)量。療效取決于待治療的具體的TRX-介導(dǎo)的疾病或病癥。因此，療效可為減輕所述疾病或病癥的相關(guān)癥狀和/或抑制(部分或完全)疾病的發(fā)展。
此外，在本發(fā)明中，當(dāng)所述的化合物被用來治療和/或預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病或病癥時，治療有效量將取決于待治療的具體的疾病或病癥。因此，療效可為減輕所述病癥或病癥的相關(guān)癥狀和/或抑制(部分或完全)病癥的發(fā)展。
此外，治療有效量可以是抑制組蛋白脫乙?；傅臄?shù)量。
此外，治療有效量可以是選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞終末分化、細胞生長停滯和/或編程性細胞死亡的數(shù)量，或誘導(dǎo)腫瘤細胞終末分化的數(shù)量。
本發(fā)明的方法用于治療或化學(xué)預(yù)防患有癌癥的人患者。然而，它也可以有效地用于治療其它受試者的癌癥。在此所使用的″患者″是指動物如哺乳動物，包括，但不限于，靈長目動物(例如，人)，牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、豚鼠、大鼠或其它牛、綿羊、馬、犬、貓科、嚙齒動物或鼠科物種。
組蛋白脫乙酰酶和組蛋白脫乙酰酶抑制劑 如在此所證實，本發(fā)明的異羥肟酸衍生物作為組蛋白脫乙酰基酶(HDAC)抑制劑顯示出改進的活性。因此，在一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種抑制組蛋白脫乙酰基酶活性的方法，包括將組蛋白脫乙酰基酶與有效量的一種或多種在此所述的異羥肟酸化合物接觸。
在一種實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物是第I組組蛋白脫乙酰酶(類型I HDACs)的有效抑制劑。類型I HDACs包括組蛋白脫乙酰基酶1(HDAC-1)、組蛋白脫乙?；?(HDAC-2)、組蛋白脫乙?；?(HDAC-3)和組蛋白脫乙酰基酶8(HDAC-8)。在一種具體實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物是組蛋白脫乙酰酶I(HDAC-1)。在另一種實施方案中，所述的異羥肟酸衍生物是類型II組蛋白脫乙酰酶(類型II HDAC)的有效抑制劑。類型II HDAC包括組蛋白脫乙?；?(HDAC-4)、組蛋白脫乙酰基酶5(HDAC-8)、組蛋白脫乙?；?(HDAC-6)、組蛋白脫乙酰基酶7(HDAC-7)和組蛋白脫乙?；?(HDAC-9)。
在此使用的術(shù)語組蛋白脫乙酰酶(HDAC)是催化除去核小體核組蛋白氨基末尾上的賴氨酸殘基中的乙酰基的酶。因此，HDAC與組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶(HAT)一起調(diào)節(jié)組蛋白的乙?；癄顟B(tài)。組蛋白乙?；绊懟虮磉_，并且HDAC抑制劑，例如基于異羥肟酸的雜化的極性化合物N-辛二?；桨樊惲u肟酸(SAHA)體外誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的細胞的生長停滯、分化和/或細胞程序死亡，體內(nèi)抑制腫瘤生長?；诮Y(jié)構(gòu)同源性，HDAC可以被分成三類。類型I HDAC(HDAC 1、2、3和8)帶有酵母RPD3蛋白相似性，位于細胞核內(nèi)，在與轉(zhuǎn)錄輔助阻遏物有關(guān)的復(fù)合物中發(fā)現(xiàn)。類型IIHDAC(HDAC 4、5、6、7和9)類似于酵母HDA1蛋白，并且具有核和胞質(zhì)亞細胞定位。類型I和II HDAC都被基于異羥肟酸的HDAC抑制劑，例如SAHA所抑制。類型III HDAC形成結(jié)構(gòu)上遠的NAD依賴性酶，它們與酵母SIR2蛋白有關(guān)并且不被基于異羥肟酸的HDAC抑制劑所抑制。
在此使用的組蛋白脫乙?；敢种苿┗騂DAC抑制劑在體內(nèi)、在體外或在兩者情況下能夠抑制組蛋白的脫乙?；Ｒ虼?，HDAC抑制劑抑制至少一種組蛋白脫乙?；傅幕钚?。由于抑制至少一種組蛋白的脫乙酰化，出現(xiàn)乙酰化組蛋白增加并且乙?；M蛋白累積是評價HDAC抑制劑活性的合適生物標(biāo)記。因此，可測定乙?；M蛋白累積的方法可用于測定目的化合物的HDAC抑制活性。應(yīng)理解，可抑制組蛋白脫乙?；富钚缘幕衔镆部膳c其它底物結(jié)合，并因此可抑制其它生物活性分子例如酶。還應(yīng)理解，本發(fā)明的化合物能夠抑制上述的任何組蛋白脫乙酰酶或任何其它組蛋白脫乙酰酶。
例如，在接受了HDAC抑制劑的患者中，可相對于適當(dāng)對照測定在用HDAC抑制劑處理的外周單核細胞和組織中的乙?；M蛋白累積。
例如，可以用顯示抑制至少一種組蛋白脫乙?；傅拿冈囼烍w外測定具體化合物的HDAC抑制活性。此外，測定在用具體組合物處理的細胞中乙?；M蛋白的累積可確定化合物的HDAC抑制活性。
測定乙?；M蛋白累積的方法在文獻中是公知的。參見，例如，Marks，P.A.等，J.Natl.Cancer Inst.，921210-1215，2000，Butler，L.M.等，Cancer Res.605165-5170(2000)，Richon，V.M.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，953003-3007，1998，和Yoshida，M.等，J.Biol.Chem.，26517174-17179，1990。
例如，用來測定HDAC抑制劑化合物活性的酶試驗可如下進行。簡要地說，可以通過在冰上，無底物存在下，將酶制劑與設(shè)定量的抑制劑化合物培養(yǎng)約20分鐘，測定HDAC抑制劑化合物對親和力純化的人已附加表位標(biāo)記的(Flag)HDACl的影響。可加入底物([3H]乙?；?標(biāo)記的源自鼠紅白血病細胞的組蛋白)，可將樣品在37℃下在總體積30μL中培養(yǎng)20分鐘。然后，可以停止反應(yīng)，并且可以萃取釋放出的乙酸酯，通過閃爍計數(shù)測定釋放的放射量。另一種用于測定HDAC抑制劑化合物活性的測定方法是BIOMOL Research Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA提供的“HDAC熒光活性測定；藥物發(fā)現(xiàn)試劑盒-AK-500。
體內(nèi)試驗可以如下進行?？梢越o動物(例如，小鼠)腹膜內(nèi)注射HDAC抑制劑化合物。給藥后，可以在預(yù)定時間分離選擇的組織，例如，腦、脾、肝等?？梢曰旧先鏨oshida等人，J.Biol.Chem.26517174-17179，1990所述，從組織中分離組蛋白?？梢栽?5％SDS-聚丙烯酰胺凝膠進行等量組蛋白(約1μg)電泳，然后可轉(zhuǎn)移至Hybond-P過濾器(得自Amersham)。過濾器可以用3％奶阻塞，可用兔純化的多克隆抗乙酰化組蛋白H4抗體(αAc-H4)和抗乙?；M蛋白H3抗體(αAc-H3)(UpstateBiotechnology，Inc.)探測。使用辣根過氧化物酶-軛合的山羊抗兔抗體(1∶5000)和SuperSignal化學(xué)發(fā)光底物(Pierce)目測檢查乙?；M蛋白的水平。作為組蛋白的加載對照，可以進行平行的凝膠電泳，然后用考馬斯藍(CB)染色。
此外，基于異羥肟酸的HDAC抑制劑已經(jīng)顯示出上調(diào)p21WAF1基因的表達。用標(biāo)準(zhǔn)方法使多種變異細胞與HDAC抑制劑一起培養(yǎng)，2小時內(nèi)誘導(dǎo)出p21WAF1蛋白。p21WAF1基因誘導(dǎo)與此基因的染色質(zhì)區(qū)域中乙?；M蛋白累積有關(guān)。因此，可以認(rèn)為p21WAF1的誘導(dǎo)與由HDAC抑制劑導(dǎo)致的變異細胞中G1細胞周期停滯有牽連。
聯(lián)合治療 本發(fā)明的異羥肟酸化合物可以單獨給藥或與適合于所治療疾病或病癥的其它藥物聯(lián)合給予。當(dāng)采用獨立的劑型時，所述的異羥肟酸化合物和其它藥物可基本同時(一并)或分別錯開時間給藥(順次)。應(yīng)當(dāng)理解的是聯(lián)合用藥包括所有這些情形。這些不同的給藥方法均適合于本發(fā)明，只要在基本同時在患者體內(nèi)實現(xiàn)所述的異羥肟酸化合物和其它藥物的游離的治療作用。在一種實施方案中，當(dāng)基本同時保持各活性藥物的目標(biāo)血液濃度時，達到了所述的有利效果。
本發(fā)明的化合物還與已知的治療劑和抗癌劑聯(lián)合用藥。例如，本發(fā)明的化合物與已知的抗癌劑連用。目前披露的化合物與其它抗癌藥或化療劑的聯(lián)合用藥在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。這些藥劑的實例可以在CancerPrinciples and Practice of Oncology由V.T.Devita和S.Hellman(editors)，6thedition(February 15，2001)，Lippincott Williams&Wilkins Publishers中找到。本領(lǐng)域常規(guī)熟練技術(shù)人員將能夠基于涉及的藥物和癌癥的特定特征來確定哪些藥劑的組合將是有用的。
這些抗癌藥包括，但不局限于下列雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、細胞毒性/細胞抑制劑、抗增殖藥劑、異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑以及其它血管生成抑制劑、細胞增殖和存活信號抑制劑、編程性細胞死亡誘導(dǎo)劑、干擾細胞周期關(guān)卡的藥劑、干擾受體酪氨酸激酶(RTK)的試劑和癌癥疫苗。當(dāng)與放射治療共同用藥時，本發(fā)明的化合物是特別有用的。
在一種實施方案中，本發(fā)明的化合物還與已知的抗癌藥聯(lián)合使用，這些抗癌藥包括下列雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、細胞毒性劑、抗增殖藥劑、異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑以及其它血管生成抑制劑。
″雌激素受體調(diào)節(jié)劑″是指干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，而與機理無關(guān)。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括，但不局限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、碘昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟維司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸鹽、4，4′-二羥基二苯酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。
其它激素試劑包括芳香酶抑制劑(例如，氨魯米特、阿那曲唑和四唑)、促黃體生成激素釋放因子(LHRH)類似物、酮康唑、醋酸性瑞林、醋酸亮丙瑞林、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
″雄激素受體調(diào)節(jié)劑″其指干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物，而與機理無關(guān)。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括非那司提以及其它5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他米特、比卡魯胺、利阿唑和醋酸阿比特龍。
″類視色素受體調(diào)節(jié)劑″其指干擾或抑制類視色素與受體結(jié)合的化合物，而與機理無關(guān)。這些類視色素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括貝沙羅汀、維甲酸、13-順-維甲酸、9-順-維甲酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反-N-(4′-羥基苯基)維胺和N-4-羧基苯基維胺。
″細胞毒性/細胞抑制劑″是指主要通過直接干擾細胞的功能作用而導(dǎo)致細胞死亡或抑制細胞增殖或抑制或干涉細胞有絲分裂的化合物，包括烷基化試劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、低氧可活化化合物、微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑、有絲分裂驅(qū)動蛋白抑制劑、組蛋白脫乙?；敢种苿?、涉及有絲分裂進程的激酶抑制劑、抗代謝物；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物；激素/抗激素治療劑、造血生長因子、單克隆抗體靶標(biāo)的治療劑、拓撲異構(gòu)酶抑制劑、蛋白酶體抑制劑和泛激素連接酶抑制劑。
細胞毒性劑的的實例包括，但不局限于，sertenef、惡病質(zhì)素、異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達明、卡鉑、六甲蜜胺、潑尼莫司汀、二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈達鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、七鉑、雌氮芥、甲苯磺酸英丙舒凡、氯乙環(huán)磷酰胺、尼莫司丁、二溴螺氯銨、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、甲基絲裂霉素、順鉑、伊羅夫文、dexifosfamide、順-胺二氯(2-甲基-吡啶)鉑、芐基鳥嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式反式反式)-二-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-鉑(II)]二[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、二氮丙啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3′-脫氨基-3′-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基去甲柔紅霉素、annamycin、加柔比星、伊利奈法德、MEN10755MEN10755和4-脫甲氧基-3-脫氨基-3-氮丙啶基氮丙啶基-4-甲磺酰基-柔紅霉素(參見WO00/50032)。
低氧可活化化合物的一個實例是替拉扎明。
蛋白酶體抑制劑的實例包括，但不局限于，乳胞素和保特佐米。
微管抑制劑/微管-穩(wěn)定劑的實例包括紫杉醇、硫酸長春地辛、3′，4′-雙脫氫-4′-脫氧-8′-去甲長春堿、多西他賽、根霉素、多拉司他汀、羥乙基磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、RPR109881、BMS184476、長春氟寧、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長春堿、N，N-二甲基-L-纈氨?；?L-纈氨?；?N-甲基-L-纈氨?；?L-脯氨酰基-L-脯氨酸-丁酰胺、TDX258、埃博霉素(例如參見美國專利號6,284,781和6,288,237)和BMS188797。
拓撲異構(gòu)酶抑制劑的某些實例是托泊替康、hycaptamine、伊立替康、盧比替康、6-乙氧基丙?；?3′，4′-O-外-亞芐基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-k1]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-異丙氨基)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2′-二甲氨基-2′-脫氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-羧酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3′，4′6，7)萘并(2，3-d)-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-6-酮、2，3-(亞甲基二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]isoguinoline-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-羧酰胺，6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司鈉。
有絲分裂驅(qū)動蛋白且特別是人有絲分裂驅(qū)動蛋白KSP的抑制劑的實例，描述在PCT公開號WO 01/30768、WO 01/98278、WO 03/050,064、WO 03/050,122、WO 03/049,527、WO 03/049,679、WO 03/049,678和WO 03/39460和待審PCT申請?zhí)朥S 03/06403(2003年3月4日提交)、US03/15861(2003年5月19日提交)、US03/15810(2003年5月19日提交)、US03/18482(2003年6月12日提交)和US03/18694(2003年6月12日提交)中。在一個實施方案中，有絲分裂驅(qū)動蛋白的抑制劑包括，但不限于，KSP抑制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑、Kifl4抑制劑、Mphosph1抑制劑和Rab6-KIFL抑制劑。
″組蛋白脫乙酰基酶抑制劑″的實例包括，但不局限于，SAHA、TSA、oxamflatin、PXD101、MG98和scriptaid。其它的組蛋白脫乙酰基酶抑制劑可以在下面文稿中找到Miller，T.A.等 J.Med.Chem.46(24)5097-5116(2003)。
″涉及有絲分裂進程的激酶的抑制劑″包括，但不限于aurora激酶抑制劑、Polo-類激酶(PLK)抑制劑(特別是PLK-1抑制劑)、bub-1抑制劑和bub-R1抑制劑?！癮urora激酶抑制劑”的實例是VX-680。
″抗增殖劑″包括反義RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001；和抗代謝物，例如依諾他濱、卡莫氟、替加氟、噴司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達拉濱、卡培他濱、加洛他濱、cytarabine ocfosfate、fosteabine sodium hydrate、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2′-脫氧-2′-亞甲基胞苷、2′-氟亞甲基-2′-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫-苯并呋喃基)磺?；鵠-N′-(3，4-二氯苯基)脲，N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四烯?；鵠甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-吡喃糖基]腺嘌呤、aplidme、海鞘素、曲沙他濱、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩?；?L-谷氨酸、氨基蝶呤、5-氟脲嘧啶、阿拉諾新、11-乙酰基-8-(氨基甲?；趸谆?-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)-十四-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、苦馬豆堿、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶、2′-氰基-2′-脫氧-N4-棕櫚?；?1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛縮氨基硫脲。
單克隆抗體靶向的治療劑的實例包括那些具有與癌細胞特異性或靶細胞特異性單克隆抗體結(jié)合的細胞毒性劑或放射性同位素的治療劑。實例包括Bexxar。
″HMG-CoA還原酶抑制劑″是指3-羥基-3-甲基戊二酰-CoA還原酶的抑制劑。可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實例包括，但不局限于洛伐他汀(MEVACOR；參見美國專利號4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR；參見美國專利號4,444,784、4,820,850和4,916,239)、帕伐他汀(PRAVACHOL；參見美國專利號4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐地汀(LESCOL；參見美國專利號5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)和阿伐他汀(LIPITOR；參見美國專利號5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)?？梢杂糜诒景l(fā)明方法的這些和其它HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式描述在M.Yalpani，″Cholesterol Lowering Drugs″，Chemistry&Industry，pp.85-89的87頁(1996年2月5日)和美國專利號4,782,084和4,885,314中。在此所使用的術(shù)語HMG-CoA還原酶抑制劑包括所有藥學(xué)上可接受的內(nèi)酯和開環(huán)的酸形式(即，其中內(nèi)酯開環(huán)而形成游離酸)以及鹽和酯形式，且由此這類鹽、酯類、開環(huán)的酸和內(nèi)酯形式的應(yīng)用包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
″異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑″是指抑制異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶中任意一種或任意組合的化合物，所述的異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶包括法尼基-蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPTase)、牻牛兒基牻牛兒基-蛋白轉(zhuǎn)移酶I型(GGPTase-I)和牻牛兒基牻牛兒基-蛋白轉(zhuǎn)移酶II型(GGPTase-II，也稱為Rab GGPTase)。
可以在下面出版物和專利中找到異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的實例WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美國專利號5,420,245、美國專利號5,523,430、美國專利號5,532,359、美國專利號5,510,510、美國專利號5,5 89,485、美國專利號5,602,098、歐洲專利公開號0618221、歐洲專利公開號0675112、歐洲專利公開號0604181、歐洲專利公開號0696593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美國專利號5,661,152、WO 95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美國專利號5,571,792、WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO WO 97/30053、WO97/44350、WO 98/WO 98/02436和美國專利號5,532,359。就異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑對血管生成的作用的實例而言，參見European J.ofCancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。
″血管生成抑制劑″是指抑制新血管形成的化合物而與機理無關(guān)。血管生成抑制劑的實例包括，但不局限于，酪氨酸激酶抑制劑，例如酪氨酸激酶受體Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)的抑制劑，表皮-衍生的、成纖維細胞-衍生的或血小板源性生長因子的抑制劑，MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑，整聯(lián)蛋白阻滯劑，干擾素-α，白細胞介素-12，多硫酸戊聚糖，環(huán)加氧酶抑制劑，包括非甾體抗炎藥(NSAIDs)如阿斯匹林和和布洛芬以及選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑如塞來考昔和羅非考昔(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))，甾體抗炎藥(例如皮質(zhì)類固醇、鹽皮質(zhì)激素、地塞米松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼龍、倍他米松)，羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-煙曲霉醇、沙利度胺、血管緊張素II拮抗劑(參見Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))，和針對VEGF的抗體(參見，NatureBiotechnology，Vol.17，pp.963-968(October 1999)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777和WO 00/61186)。
調(diào)節(jié)或抑制血管生成并且還可以用于與本發(fā)明化合物聯(lián)用的其它治療劑包括調(diào)節(jié)或抑制凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的活性劑(參見Clin.Chem.LaMed.38679-692(2000)中的評述)。調(diào)節(jié)或抑制凝血和纖維蛋白溶解途徑的這些活性劑的實例包括，但不局限于，肝素(參見Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制劑(亦稱為活性凝血酶可活化的纖維蛋白溶解抑制劑[TAFIa])(參見Thrombosis Res.101329-354(2001))。PCT公開號WO 03/013,526和美國專利序列號60/349,925(2002年1月18日提交)中已經(jīng)描述了TAFIa抑制劑。
″干擾細胞周期關(guān)卡的活性劑″是指抑制轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞周期關(guān)卡信號的蛋白激酶，由此使癌細胞對DNA損傷劑敏感的化合物。這些活性劑包括ATR、ATM、Chk1和Chk2激酶的抑制劑以及cdk和cdc激酶抑制劑并且特別以7-羥基星型孢菌素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032為典型。
″擾受體酪氨酸激酶(RTK)″是指抑制RTK并因此涉及腫瘤生成和腫瘤發(fā)展的機理的化合物。這些試劑包括c-Kit、Eph、PDGF、Flt3和c-Met的抑制劑。其它試劑包括RTK的抑制劑，由Bume-Jensen和Hunter，Nature，411355-365，2001所述。
″細胞增殖和存活信號途徑的抑制劑″是指抑制細胞表面受體和那些表面受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)下游的藥物活性劑。這些活性劑包括EGFR的抑制劑(例如吉非替尼和erlotinib)、ERB-2的抑制劑(例如曲妥單抗)、IGFR的抑制劑、細胞因子受體的抑制劑、MET的抑制劑、PI3K的抑制劑(例如LY294002)、絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑(包括，但不局限于，例如在(WO 03/086404、WO 03/086403、WO 03/086394、WO 03/086279、WO 02/083675、WO 02/083139、WO 02/083140和WO 02/083138)中所述的Akt的抑制劑，Raf激酶的抑制劑(例如BAY-43-9006)、MEK的抑制劑(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制劑(例如Wyeth CCI-779)。這些活性劑包括小分子抑制劑化合物和抗體拮抗劑。
″細胞程序死亡誘導(dǎo)劑″包括TNF受體家族成員的激活劑(包括TRAIL受體)。
本發(fā)明還包括與作為選擇性COX-2抑制劑的NSAID′s的聯(lián)合用藥。就本說明書的目的而言，將是選擇性COX-2抑制劑的NSAID′s定義為那些具有對COX-2的抑制超過對COX-1的抑制至少100倍的特異性活性劑，正如根據(jù)通過細胞或微粒體試驗評估的COX-2的IC50與COX-1的IC50之比所確定的。這些化合物包括，但不局限于在如下中公開的那些美國專利5,474,995、美國專利5,861,419、美國專利6,001,843、美國專利6,020,343、美國專利5,409,944、美國專利5,436,265、美國專利5,536,752、美國專利5,550,142、美國專利5,604,260、美國專利5,698,5 84、美國專利5,710,140、WO 94/15932、美國專利5,344,991、美國專利5,134,142、美國專利5,380,738、美國專利5,393,790、美國專利5,466,823、美國專利5,633,272和美國專利5,932,598、所有的在此整個引入作為參考。
特別用于本發(fā)明治療方法的COX-2抑制劑是3-苯基-4-(4-(甲基磺?；?苯基)-2-(5H)-呋喃酮和5-氯-3-(4-甲基磺?；?苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
已經(jīng)描述為COX-2抑制劑且由此用于本發(fā)明的化合物包括，但不局限于帕瑞考昔、CELEBREX和BEXTRA或其藥學(xué)上可接受的鹽。
血管生成抑制劑的其它實例包括，但不局限于，內(nèi)皮他丁、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)氧雜環(huán)丙烷基]-1-氧雜螺[2，5]辛-6-基(氯乙?；?氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鯊胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羰基-二[亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基[N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基]-二-(1，3-萘萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]-2-吲哚滿酮(SU5416)。
在此所述的″整聯(lián)蛋白阻斷劑″是指選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ3整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ3整聯(lián)蛋白和αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；和拮抗、抑制或阻礙在毛細血管內(nèi)皮細胞上表達的特定整聯(lián)蛋白活性的化合物。該術(shù)語還指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語還指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任意組合的拮抗劑。
一些酪氨酸激酶抑制劑的具體實例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基異唑-4-羧酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基)二氫吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-脫甲氧基格爾德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氫-10-(羥基甲基)-10-羥基-9-甲基-9，12-環(huán)氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3′，2′，1′-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮芳辛-1-酮、SH268、染料木黃酮、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯、4-(3-溴-4-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4′-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。
與非抗癌化合物的化合物聯(lián)合用藥也包括在本發(fā)明的方法中。例如，本發(fā)明權(quán)利要求保護的化合物與RRAR-γ(即，RRAR-gamma)激動劑和RRAR-δ(即，RRAR-delta)激動劑的聯(lián)合用藥用于治療某些惡性腫瘤。RRAR-γ和RRAR-δ是核過氧化物酶體增殖物激活的受體γ和δ。在文獻中已經(jīng)報導(dǎo)了RRAR-γ在內(nèi)皮細胞的表達及其涉及血管生成(參見J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；412309-2317)。新近，已經(jīng)證實RRAR-γ激動劑在體外抑制對VEGF的生成血管反應(yīng)；曲格列酮和馬來酸羅格列酮抑制小鼠的視網(wǎng)膜新血管形成的發(fā)展(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。RRAR-γ激動劑和RRAR RRAR-激動劑的實例包括，但不局限于，噻唑烷二酮類(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、羅格列酮和匹格列酮)，非諾貝特，吉非貝劑，氯貝丁酯，GW2570，SB219994，AR-H039242，JTT-501，MCC-555，GW2331，GW409544，NN2344，KRP297，NP0110，DRF4158，NN622，GI262570，PNU182716，DRF552926，2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(在USSN 09/782,856中公開)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色滿-2-甲酸(在USSN 60/235,708和60/244,697中公開)。
本發(fā)明的另一個實施方案是目前披露的化合物與基因療法的組合在治療癌癥中的應(yīng)用。就治療癌癥的基因策略綜述而言，參見Hall等(Am J Hum Genet 61785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，5th Ed，pp 876-889，BC Decker，Hamilton 2000)?；虔煼梢杂糜谶f送任意腫瘤抑制基因。這類基因的實例包括，但不限于可以通過重組病毒-介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移遞送的p53(參見，例如美國專利號6,069,134)；uPA/uPAR拮抗劑(″小鼠中uPA/uPAR拮抗劑的腺病毒-介導(dǎo)的遞送抑制血管發(fā)生-依賴性腫瘤生長和傳播″-Gene Therapy，August 1998；5(8)1105-13)；和干擾素γ(J.Immunol.2000；164217-222)。
還可以將本發(fā)明的化合物與內(nèi)在多藥物耐受性(MDR)，特別是與高水平轉(zhuǎn)運蛋白表達相關(guān)的MDR的抑制劑聯(lián)合給藥。這類MDR抑制劑包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制劑，例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(伐司樸達)。
可以將本發(fā)明的化合物與止吐藥聯(lián)用以便治療惡心或嘔吐，包括急性、延遲、晚期和可能因單獨或與放療聯(lián)用本發(fā)明的化合物產(chǎn)生的預(yù)想中的嘔吐。為了預(yù)防或治療嘔吐，可以將本發(fā)明的化合物與其它止吐藥聯(lián)用，尤其是神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑；5HT3受體拮抗劑，例如昂丹司瓊、格拉司瓊、托烷司瓊和扎托司瓊；GABAB受體激動劑，例如巴氯芬；皮質(zhì)類固醇，例如地卡特隆(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten或其它藥物，例如披露在美國專利號2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中；抗多巴胺能藥，例如吩噻嗪類(例如丙氯拉嗪、氟奮乃靜、硫利達嗪和美索達嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚。在一種實施方案中，將選自神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑和皮質(zhì)類固醇的止吐藥作為佐劑給予以便治療或預(yù)防可能在本發(fā)明化合物給藥時產(chǎn)生的嘔吐。
與本發(fā)明化合物聯(lián)用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑完整地描述在如下文獻中，例如在美國專利號5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147中；歐洲專利公開號EP 0360390、0394989、0428434、0429366、0430771、0436334、0443132、0482539、0498069、0499313、0512901、0512902、0514273、0514274、0514275、0514276、0515681、0517589、0520555、0522808、0528495、0532456、0533280、0536817、0545478、0558156、0577394、0585913、0590152、0599538、0610793、0634402、0686629、0693489、0694535、0699655、0699674、0707006、0708101、0709375、0709376、0714891、0723959、0733632和0776893；PCT國際專利公開號WO 90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170、94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；以及英國專利公開號2266529、2268931、2269170、2269590、2 271 774、2 292 144、2 293 168、2 293 169和2 302 689中。這些化合物的制備完整地描述在上述專利和公開文獻中，其在此引入作為參考。
在一種實施方案中，與本發(fā)明化合物聯(lián)用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑選自2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1 H，4H-1，2，4-三唑基)甲基)嗎啉，或其藥學(xué)上可接受的鹽，其描述在美國專利號5,719,147中。
還可以將本發(fā)明的化合物與用于治療貧血的活性劑一起給藥。這類貧血治療劑例如是連續(xù)的紅細胞生成受體激活劑(例如阿法依伯汀)。
還可以將本發(fā)明的化合物與用于治療中性白細胞減少的活性劑一起給藥。這類中性白細胞減少治療劑例如是調(diào)節(jié)嗜中性白細胞產(chǎn)生和功能的造血生長因子，例如人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的實例包括非格司亭。
還可以將本發(fā)明的化合物與免疫-增強藥物一起給藥，例如左旋咪唑、異丙肌苷和日達仙。
本發(fā)明的化合物還可與雙膦酸鹽(例如包括雙膦酸鹽、二膦酸鹽、二膦酸和雙膦酸)組合用于治療或預(yù)防癌癥，包括骨癌。雙膦酸鹽的實例包括，但不局限于依替膦酸鹽(Didronel)、帕米膦酸鹽(Aredia)、阿侖膦酸鹽(Fosamax)、利塞膦酸鹽(Actonel)、唑來膦酸鹽(Zometa)、伊班膦酸鹽(Boniva)、伊卡膦酸鹽或cimadronate、氯膦酸鹽、EB-1053、米諾膦酸鹽、奈立膦酸鹽、吡膦酸鹽和替魯膦酸鹽，包括其任意和所有的藥學(xué)上可接受的鹽、衍生物、水合物及混合物。
本發(fā)明的化合物還可與芳香酶抑制劑組合用于治療或預(yù)防乳腺癌。芳香酶抑制劑的實例包括，但不局限于阿那曲唑、來曲唑和依西美坦。
本發(fā)明的化合物還可與siRNA療法組合用于治療或預(yù)防癌癥。
本發(fā)明的化合物還可與誘導(dǎo)贅生性細胞終末分化的化合物結(jié)合用于治療或預(yù)防癌癥。合適的分化試劑包括在以下任何一篇或多篇參考文獻中公開的化合物，這些文獻的內(nèi)容在此引入作為參考。
a)極性化合物(Marks等(1987)；，F(xiàn)riend，C.，Scher，W.，Holland，J.W.和Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，和Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)721003-1006；Reuben，R.C.，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73862-866)； b)維生素D和維甲酸的衍生物(Abe，E.，Mlyaura，C.，Sakagami，H，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.和Suda，T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)784990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.和Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.2418；Tanenaga，K.，Hozumi，M.和Sakagami，Y.(1980)Cancer Res.40914-919)； c)類固醇激素(Lotem，J.和Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15731-740)； d)生長因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535，Metcalf，D.(1985)Science，22916-22)； e)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1983)Exp.Hematol.11490-498；Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1982)Biochem.&Biophys.Res.Comm.109348-354)； f)腫瘤啟動子(Huberman，E.和Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)761293-1297；Lottem，J.和Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)765158-5162)；和 g)DNA或RNA合成抑制劑(Schwartz，E.L.和Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，F(xiàn)ibach，E.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)752795-2799；Morin，M.J.和Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.442807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C.和Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.432725-2730；Sugano，H，F(xiàn)urusawa，M.，Kawaguchi，T.，and Ikawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39943-954；Ebert，P.S.，Wars，I.和Buell，D.N.(1976)Cancer Res.361809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.和Hozumi，M.(1979)Gann 70235-238)。
本發(fā)明的化合物還可與γ-分泌酶抑制劑組合用于治療或預(yù)防癌癥。
權(quán)利要求的范圍還包括治療癌癥的方法，其包括給予治療有效量的式I的化合物與放射治療的組合和/或與選自如下的第二種化合物的組合雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、細胞毒性/細胞抑制劑、抗增殖劑、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、RRAR-激動劑、RRAR-激動劑、內(nèi)在多藥物耐受性抑制劑、止吐藥、用于治療貧血的活性劑、用于治療中性白細胞減少的活性劑、免疫-增強藥物、細胞增殖和存活信號抑制劑、二膦酸鹽、芳香酶抑制劑、siRNA治療劑和γ-分泌酶抑制劑、干擾受體酪氨酸激酶(RTK)的活性劑和干擾細胞周期關(guān)卡的活性劑。
所有這些方法與在此所述的異羥肟酸化合物聯(lián)合使用的用途在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
劑量和劑量方案 使用本發(fā)明的異羥肟酸衍生物的劑量方案可以按照多種因素進行選自，包括種類、物種、年齡、體重、性別和所治療癌癥類型；所治療疾病的嚴(yán)重程度(即，階段)；給藥途徑；患者的腎和肝功能；以及所使用的具體化合物或其鹽。普通醫(yī)生或獸醫(yī)可以容易地確定和處方治療例如預(yù)防、抑制(完全或部分)或使該疾病發(fā)展停止所需有效量的藥物。
對于口服給藥，合適的日劑量例如在約5-4000mg/m2之間，日口服一次、兩次或三次，連續(xù)(每天)或間歇(例如，每周3-5天)地進行。例如，當(dāng)用于治療目標(biāo)疾病時，所述異羥肟酸的日劑量可以在約2mg-約2000mg之間。
可以每日一次(QD)給予所述的異羥肟酸衍生物，或分為多個日劑量，例如每日兩次(BID)和每日三次(TID)。因此對于一天一次給藥來說，合適的成品藥物將含有全部所需的日劑量。因此對于每天兩次給藥來說，合適的成品藥物將含有一半所需的日劑量。因此對于每天三次給藥來說，合適的成品藥物將含有三分之一所需的日劑量。
此外，給藥可以連續(xù)，即，每天，或間歇地進行。在此所使用的術(shù)語″間歇″是指以固定間隔或不固定間隔停止和開始給藥。例如，間歇地給予HDAC抑制劑可以是每周給藥1-6天，或者可以以周期形式給藥(例如，每日給藥，連續(xù)進行2-8周，然后停止給藥最至多一周)或者可表示隔日給藥。
典型地，可制備的靜脈制劑含有濃度在約1.0mg/ml-約10mg/ml之間的異羥肟酸衍生物。在一種實例中，可在一天內(nèi)給予患者足量的靜脈內(nèi)制劑，使得總?cè)談┝吭诩s10-約1500mg/m2之間。
皮下制劑，優(yōu)選根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備，pH為約5-約12，還包括合適的緩沖劑和等滲劑，這點如下所述。可配制這樣的制劑以便通過每日一次或多次皮下給藥來輸送日劑量的HDAC抑制劑，例如每日一次、兩次或三次。
所述化合物還可以鼻內(nèi)形式通過局部使用適當(dāng)?shù)谋莾?nèi)賦形劑和使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的經(jīng)皮貼片形式通過經(jīng)皮途徑給藥。為了以經(jīng)皮釋放體系給藥，在整個劑量方式，當(dāng)然以連續(xù)而不是間斷給藥。
本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員顯而易見的是這里所描述的不同給藥方式、劑量和劑量方案僅給出了具體的實施方案，不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是對本發(fā)明的范圍的限制。任何劑量和劑量方案的變動、變化和組合均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在涉及本發(fā)明化合物中的術(shù)語″給藥″及其變化形式(例如，″給予″化合物)是指將化合物或化合物的前體藥物導(dǎo)入需要治療的動物系統(tǒng)。當(dāng)將本發(fā)明的化合物或其前體藥物與一種或多種其它活性劑(例如，細胞毒性劑等)聯(lián)合提供時，將″給藥″及其變化形式各自理解為包括化合物或其前體藥物和其它活性劑的同時和依次導(dǎo)入。
在此所使用的術(shù)語″組合物″是指包括含有指定數(shù)量的特定成分的產(chǎn)品以及任何直接或間接來自指定數(shù)量的特定成分的組合產(chǎn)品。
在此所使用的術(shù)語″治療有效量″是指在組織、系統(tǒng)、動物或人體內(nèi)引起研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)務(wù)人員或其它臨床醫(yī)生尋找的生物或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的活性化合物或藥物活性劑的量。
藥物組合物 本發(fā)明的化合物及其衍生物、片段、類似物、同系物、藥學(xué)上可接受的鹽或水合物可以與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑一起加入到適合于口服給藥的藥物組合物中。這些組合物典型地包含治療有效量的任何上述化合物和藥學(xué)上可接受的載體。優(yōu)選地，所述的有效量是有效的選擇性誘發(fā)合適的贅生性細胞的終末分化的數(shù)量并且小于在患者中引起中毒的數(shù)量。
通常用作載體或稀釋劑的任何惰性賦形劑可以在本發(fā)明的制劑中使用，例如，膠、淀粉、糖、纖維素材料、丙烯酸鹽或其混合物。優(yōu)選的稀釋劑是微晶纖維素。所述的組合物還可以包含崩解劑(例如，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)和潤滑劑(例如，硬脂酸鎂)，并且此外還可以包含一種或多種選自下面的添加劑粘合劑、緩沖液、蛋白酶抑制劑、表面活性劑、增溶劑、增塑劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、增粘劑、甜味劑、成膜劑或其任何組合。此外，本發(fā)明的組合物可以是控制釋放制劑或立即釋放制劑。
在一種實施方案中，所述的藥物組合物口服給藥，并由此配制在一種適合于口服給藥的形式中，即，作為固體或液體制劑。合適的固體口服制劑包括片劑、膠囊、丸劑、顆粒、粒劑等。合適的液體口服制劑包括溶液、懸浮液、分散液、乳液、油劑等。在本發(fā)明的一種實施方案中，所述的組合物被配制在膠囊中。按照這種實施方案，除異羥肟酸衍生物活性化合物和惰性載體或稀釋劑外，本發(fā)明的組合物包含硬膠囊。
在此所使用的″藥學(xué)上可接受的載體″包括適合于藥物給藥的任何和所有的溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑等，例如無菌無熱原水。合適的載體描述在最新版的Remington’sPharmaceutical Sciences中，其是本領(lǐng)域一本標(biāo)準(zhǔn)的參考書，在此引入作為參考。這些載體或稀釋劑的優(yōu)選例子包括，但不局限于，水、鹽水、finger’s溶液、葡萄糖溶液和5％人血清白蛋白。還可以使用脂質(zhì)體和無水的賦形劑例如不揮發(fā)油。這些介質(zhì)和試劑在藥學(xué)活性物質(zhì)上的用途是本領(lǐng)域公知的。除與該活性化合物不相容外，在組合物中考慮使用任何常規(guī)的介質(zhì)或試劑。輔助的活性化合物還可以被加入到該組合物中。
固體載體/稀釋劑包括，但不局限于，膠、淀粉(例如，玉米淀粉、預(yù)膠凝淀粉)、糖(例如，乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖)、纖維素物質(zhì)(例如，微晶纖維素)、丙烯酸鹽(例如，聚甲基丙烯酸鹽)、碳酸鈣、氧化鎂、滑石粉或其混合物或其混合物。
對于液體制劑，藥學(xué)上可接受的載體可以是水溶液或非水溶液、懸浮液、乳液或油。非水溶劑的例子是丙二醇、聚乙二醇和注射有機酯例如油酸乙酯。含水載體包括水、醇/水溶液、乳液或懸浮液，包括鹽水和緩沖介質(zhì)。油的實例是石油、動物、植物或合成來源的那些油，例如花生油、大豆油、礦物油、橄欖油、葵花油和魚肝油。溶液或懸浮液還可以包括下列組分無菌稀釋劑例如注射用水、鹽水溶液、不揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑例如芐醇或尼泊金甲酯；抗氧化劑例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩沖劑例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽以及調(diào)節(jié)張度的試劑例如氯化鈉或葡萄糖?？梢杂盟峄驂A例如鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
此外，該組合物可以進一步包含粘合劑(例如，阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠、卡波姆、乙基纖維素、瓜爾膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮)、崩解劑(例如，玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、褐藻酸、二氧化硅、交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉、聚乙烯聚吡咯烷酮、瓜爾膠、淀粉羥基乙酸鈉、羧甲基淀粉鈉(Primogel))、各種pH和離子強度的緩沖劑(例如，tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽)、阻止表面吸收的添加劑例如白蛋白或明膠、洗滌劑(例如，吐溫20、吐溫80、Pluronic F68、膽酸鹽)、蛋白酶抑制劑、表面活性劑(例如，十二烷基硫酸鈉)、滲透促進劑、增溶劑(例如，甘油、聚乙二醇)、助流劑(例如，膠體二氧化硅)、抗氧化劑(例如，抗壞血酸、焦亞硫酸鈉、丁基羥基苯甲醚)、穩(wěn)定劑(例如，羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素)、增粘劑(例如，卡波姆、膠體二氧化硅、乙基纖維素、瓜爾膠)、甜味劑(例如，蔗糖、阿司帕坦、檸檬酸)、調(diào)味劑(例如，薄荷、水楊酸甲酯或橘子香精)、防腐劑(例如，硫柳汞、苯甲醇、對羥苯甲酸酯)、潤滑劑(例如，硬脂酸、硬脂酸鎂、聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉)、助流劑(例如，膠體二氧化硅)、增塑劑(例如，鄰苯二甲酸二乙酯、檸檬酸三乙酯)、乳化劑(例如，卡波姆、羥丙基纖維素、十二烷基硫酸鈉)、聚合物包衣劑(例如，泊洛沙姆或poloxamines)、包衣劑和成膜劑(例如，乙基纖維素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)和/或助劑。
在一種實施方案中，使活性化合物和防止化合物在體內(nèi)快速消除的載體一起制備，例如控釋制劑包括植入物和微囊密封的釋放系統(tǒng)。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯-乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。制備這些制劑的方法對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員而言是顯而易見的。所述物質(zhì)還可以從Alza公司和NovaPharmaceuticals，Inc.購買。還可以使用脂質(zhì)體懸浮液(包括用病毒抗原的單克隆抗體靶向受感染細胞的脂質(zhì)體)作為藥學(xué)上可接受的載體。這些可以根據(jù)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的方法制備，例如，如美國專利號4,522,811中所述。
配制便于給藥和劑量均勻的劑量單位形式的口服組合物尤其最好。在此所使用的劑量單位形式是指適用于受治療者治療的單位劑量的物理分隔單位；每單位含有預(yù)定量的活性化合物和組合應(yīng)用的所需藥用載體。本發(fā)明劑量單位形式的規(guī)格由活性化合物的獨特特征、欲達到的具體療效和用于治療個體的組合此類活性化合物技術(shù)的內(nèi)在限定所決定并直接取決于這些因素。
可以將藥物組合物和給藥說明書一起包括在容器、包裝或分配器中。
在治療的第一天，可靜脈內(nèi)給予本發(fā)明的化合物，第二天和隨后的日子連續(xù)口服給藥。
可以給予本發(fā)明的化合物以便防病疾病發(fā)展或穩(wěn)定腫瘤生長。
在本領(lǐng)域中容易理解含有活性組分的藥物組合物的制備，例如，通過混合、造?；蚱瑒┬纬煞椒ā；钚灾委熃M分經(jīng)常與藥學(xué)上可接受的和與活性組分配伍的賦形劑混合。對于口服給藥，活性劑與通常用于此目的的添加劑混合，例如賦形劑、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑，通過常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為合適的給藥形式，例如上述的片劑、包衣片劑、硬膠囊或軟膠囊、水溶液、醇溶液或油溶液等。
給予患者的化合物的數(shù)量小于患者引起中毒的數(shù)量。在某些實施方案中，給予患者的化合物的數(shù)量小于引起患者血漿中化合物濃度等于或超過該化合物毒性水平的數(shù)量。優(yōu)選地，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約10nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約25nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約50nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約100nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約500nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約1000nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約2500nM。在另一種實施方案中，所述化合物在患者血漿中的濃度維持在約5000nM。在本發(fā)明的實踐中，應(yīng)給予患者的最佳化合物的數(shù)量將取決于所使用的具體化合物和所治療的癌癥的類型。
本發(fā)明還包括用于治療或預(yù)防癌癥的藥物組合物，其包含治療有效量的式I化合物和第二種化合物，所述的第二種化合物選自雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、細胞毒性/細胞抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、RRAR-激動劑、RRAR-激動劑、細胞增殖和存活信號抑制劑、二膦酸鹽、芳香酶抑制劑、siRNA治療劑、γ-分泌酶抑制劑、干擾受體酪氨酸激酶(RTK)的活性劑和干擾細胞周期關(guān)卡的活性劑。
體外方法 本發(fā)明還提供了使用本發(fā)明的異羥肟酸衍生物誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化、細胞生長停滯和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞的增殖的方法。所述的方法可以在體內(nèi)或體外進行。
在一種實施方案中，本發(fā)明提供了用于選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化、細胞生長停滯和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞增殖的體外方法，所述方法通過將所述細胞與有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸衍生物接觸。
在一種具體實施方案中，本發(fā)明涉及一種選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化并由此抑制這些細胞增殖的體外方法。所述的方法包括在適宜條件下將所述細胞與有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸化合物接觸。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的細胞生長停滯并由此抑制這些細胞增殖的體外方法。所述的方法包括在適宜條件下將所述細胞與有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸化合物接觸。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的細胞程序死亡并由此抑制這些細胞增殖的體外方法。所述的方法包括在適宜條件下將所述細胞與有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸化合物接觸。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種在腫瘤中誘導(dǎo)腫瘤細胞的終末分化的體外方法，包括將所述細胞細胞與有效量的在此所述的任何一種或多種異羥肟酸化合物接觸。
雖然本發(fā)明的方法可以體外進行，但還是認(rèn)為對于選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化、細胞生長停滯和/或細胞程序死亡的方法以及抑制HDAC的方法優(yōu)選實施方案包括在體內(nèi)與細胞接觸，即通過將所述化合物給予需要治療的帶有贅生性細胞或腫瘤細胞的患者。
因此，本發(fā)明提供了用于在患者中選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化、細胞生長停滯和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞增殖的體內(nèi)方法，所述方法通過將所述患者與有效量的在此所述的任何一種或多種異羥肟酸衍生物接觸。
在一種具體實施方案中，本發(fā)明涉及一種在患者中選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的終末分化并由此抑制這些細胞增殖的方法。所述方法包括給予該患者有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸衍生物。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的細胞生長停滯并由此在患者中抑制這些細胞增殖的方法。所述方法包括給予該患者有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸衍生物。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種選擇性地誘導(dǎo)贅生性細胞的細胞程序死亡并由此在患者中抑制這些細胞增殖的方法。所述方法包括給予該患者有效量的在此所述的一種或多種異羥肟酸衍生物。
在另一種實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療所患腫瘤的特征在于贅生性細胞增殖的患者的方法。所述方法包括給予該患者在此所述的一種或多種異羥肟酸衍生物。化合物的數(shù)量能有效地選擇性地誘導(dǎo)這些贅生性細胞的終末分化，誘導(dǎo)細胞生長停滯和/或誘導(dǎo)細胞程序死亡并由此抑制它們的增殖。
本發(fā)明將通過下述實驗細節(jié)部分進行說明。該部分的作用有助于理解本發(fā)明，而不是并且不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是以任何方式限制如下面的權(quán)利要求中所提出的本發(fā)明。
實驗詳述部分 實施例1-合成 本發(fā)明的化合物通過下面合成方案中所列的一般方法制備，如下面所舉例說明。
A1.由5&6-氧代乙基苯并噻吩制得的化合物。
方案1說明了5&6-氧代乙基苯并噻吩的使用 方案1
由6-氧代乙基苯并噻吩制備A1.化合物的步驟。

6-溴-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。將氫化鈉(60％分散體在礦物油中，0.73g，18.3mmol)懸浮在DMSO(10mL)中，接著滴加巰基乙酸乙酯(1.11mL，10.1mmol)，使用水浴緩和溫升。加畢后，除去水浴，接著繼續(xù)攪拌15分鐘。一次性加入4-溴-2-氟苯甲醛(1.86g，9.16mmol)在DMSO(2mL)中的溶液。將所述的暗色溶液攪拌15分鐘，接著傾倒到冷水(300mL)中。將產(chǎn)物萃取到Et2O(2×200mL)中。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。殘余物通過MPLC提純，得到1.15g所需產(chǎn)物(淺黃色固體，44％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.37(d，J＝1.8Hz，1H)，8.17(s，1H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，1.30(t，J＝7.2Hz，3H).
[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]丙二酸二-叔丁基酯。將二-叔丁基丙二酸酯(1.5g，6.93mmol)溶于THF(6mL)中，接著加入氫化鈉(60％分散在礦物油中，0.28g，7.00mmol)。將混合物攪拌1 0分鐘，接著加入Pd(PtBu3)2(0.1g，0.196mmol)和6-溴-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(1.8g，6.31mmol)在THF(12mL)中的溶液。將所得混合物在N2中加熱回流18小時。達到室溫，加入飽和NH4Cl(150mL)，接著將產(chǎn)物萃取到EtOAc(2×125mL)中。將合并的有機萃取液在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。通過MPLC提純殘余物，得到1.27g所需產(chǎn)物(淺黃色固體，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.17(s，1H)，8.01(s，1H)，7.99(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.83(s，1H)，4.33(q，J＝7.2Hz，2H)，1.40(s，18H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H).
[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]丙二酸。將[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]丙二酸二-叔丁基酯(0.873g，2.08mmol)溶于DCM(5ml)中，接著加入TFA(5ml)。在室溫下攪拌溶液2小時。在真空中除去溶劑，使殘余物在飽和NaHCO3和EtOAc之間進行分配。將水相用2N HCl酸化并用EtOAc萃取。在MgSO4中干燥合并的有機萃取液，在真空中進行濃縮，得到0.60g產(chǎn)物(白色固體，94％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.10(brs，2H)，8.17(s，1H)，8.03(s，1H)，7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.83(s，1H)，4.33(q，J＝7.2Hz，2H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H).
[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]乙酸。[將2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]丙二酸(0.60g，1.95mmol)懸浮在H2O(4ml)中，接著在200℃下在微波反應(yīng)器中加熱60秒。將所述的懸浮液用H2O(50mL)稀釋，接著將產(chǎn)物萃取到EtOAc(3×75mL)中。合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，在真空中進行濃縮，得到0.51g產(chǎn)物(白色固體，99％)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.42(brs，1H)，8.15(s，1H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.35(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，3.71(s，2H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H).
2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-二氧雜環(huán)戊烷。將4-溴-2-氟苯甲醛(9.4g，46.3mmol)、乙二醇(13.2mL)、原甲酸三乙酯(6.6mL)和對甲苯磺酸(0.09g，0.473mmol)在DCE(50mL)中在80℃攪拌2.5小時。達到室溫，將溶液依次用飽和NaHCO3、H2O H2O和鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，在真空中進行濃縮，得到11.4g產(chǎn)物(淺黃色油，100％)。1H NMR(CDCl3)δ7.41(t，J＝8.1Hz，1H)，7.30(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，7.25(dd，J＝9.6，1.8Hz，1H)，6.02(s，1H)，4.13(m，2H)，4.04(m，2H).
[4-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)-3-氟苯基]丙二酸二-叔丁基酯。將丙二酸二-叔丁基酯(1.95g，9.02mmol)溶于THF(8ml)中，接著加入氫化鈉(60％分散體在礦物油中，0.36g，9.00mmol)。將混合物攪拌10分鐘，接著加入Pd(PtBu3)2(0.17g，0.333mmol)和2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-二氧雜環(huán)戊烷(2.03g，8.22mmol)在THF(16mL)中的溶液。將所得混合物在N2中加熱回流18小時。達到室溫，加入飽和NH4Cl(150mL)，接著將產(chǎn)物萃取到EtOAc(125mL)中。將有機萃取液在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。通過MPLC提純殘余物，得到2.47g所需產(chǎn)物(淺黃色油，79％)。1H NMR(CDCl3)δ7.50(t，J＝8.1Hz，1H)，7.16(m，2H)，6.07(s，1H)，4.40(s，1H)，4.13(m，2H)，4.03(m，2H)，1.45(s，18H).
[4-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)-3-氟苯基](甲基)丙二酸二-叔丁基酯。將[4-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)-3-氟苯基]丙二酸二-叔丁基酯(2.45g，6.41mmol)、碘甲烷(0.80ml，12.85mmol)和碳酸鉀(1.78g，12.9mmol)懸浮在DMF(10ml)中，接著在70℃在密封管中加熱3小時。加入另外部分的碘甲烷(0.60mL，9.64mmol)，接著繼續(xù)在75℃加熱3小時。達到室溫，加入H2O(150mL)，接著將產(chǎn)物萃取到Et2O(2×100mL)中。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。通過MPLC提純殘余物，得到0.91g干凈的產(chǎn)物(橙色油，36％)。1HNMR(CDCl3)δ7.47(t，J＝8.1Hz，1H)，7.19(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝12.0，1.8Hz，1H)，6.07(s，1H)，4.13(m，2H)，4.03(m，2H)，1.74(s，3H)，1.45(s，18H).
(3-氟-4-甲?；交?(甲基)丙二酸二-叔丁基酯。[4-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)-3-氟苯基](甲基)丙二酸二-叔丁基酯(0.91g，2.30mmol)和硫脲(0.87g，11.4mmol)在回流的EtOH/H2O(6.7ml/6.7ml)中攪拌7小時。達到室溫，接著在真空中除去溶劑。將H2O(100mL)加入到殘余物中，接著將所述的產(chǎn)物萃取到EtOAc(2×100mL)中。合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，在真空中進行濃縮，得到0.81g干凈的產(chǎn)物(淺黃色膠，100％)。1H NMR(CDCl3)δ10.33(s，1H)，7.82(t，J＝8.1Hz，1H)，7.31(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，7.27(dd，J＝12.0，1.8Hz，1H)，1.77(s，3H)，1.46(s，18H).
[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基](甲基)丙二酸二-叔丁基酯。將氫化鈉(60％分散體在礦物油中，0.19g，4.75mmol)懸浮在DMSO(2.5mL)中，接著分批加入巰基乙酸乙酯(0.28mL，2.54mmol)，使用水浴緩和溫升。加畢后，除去水浴，接著繼續(xù)攪拌15分鐘。一次性加入(3-氟-4-甲酰基苯基)(甲基)丙二酸二-叔丁基酯(0.81g，2.30mmol)在DMSO(0.5ml)中的溶液。用加熱槍將該橙色溶液溫?zé)?，得到一種暗褐色溶液。加入H2O(150mL)，接著將所述的產(chǎn)物萃取到EtOAc(2×100mL)中。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。通過MPLC提純殘余物，得到0.22g所需產(chǎn)物(淺黃色固體，22％)。1HNMR(CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.88(d，J＝1.8Hz，1H)，7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.39(q，J＝7.2Hz，2H)，1.84(s，3H)，1.47(s，18H)，1.40(t，J＝7.2Hz，3H).
[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基](甲基)丙二酸。將[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基](甲基)丙二酸二-叔丁基酯(0.26g，0.598mmol)溶于DCM(1.5ml)中，接著加入TFA(1.5ml)。溶液在室溫下攪拌2小時。在真空中除去溶劑，使殘余物在飽和NaHCO3和EtOAc之間進行分配。將水相用2N HCl酸化并用EtOAc萃取。將合并的有機萃取液在MgSO4中干燥，在真空中進行濃縮，得到0.193g產(chǎn)物(淺黃色固體，100％)。1HNMR(DMSO-d6)δ13.12(brs，2H)，8.14(s，1H)，8.03(d，J＝1.8Hz，1H)，7.95(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，1.77(s，3H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H).
2-[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]丙酸。[將2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基](甲基)丙二酸(0.19g，0.590mmol)懸浮在H2O(5ml)中，接著在210℃在微波反應(yīng)器中加熱40秒。所述的懸浮液用H2O(50mL)稀釋，接著將產(chǎn)物萃取到EtOAc(2×75mL)中。合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，在真空中進行濃縮，得到0.15g產(chǎn)物(白色固體，91％)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.41(brs，1H)，8.14(s，1H)，7.95(brs，1H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.37(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，3.81(q，J＝7.2Hz，1H)，1.40(d，J＝7.2Hz，3H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H).
6-(2-苯胺基-2-氧代乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。[將2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]乙酸(0.2g，0.757mmol)、EDCI(0.22g，1.15mmol)和HOBt(0.16g，1.18mmol)在DMF(6ml)中攪拌10分鐘，接著加入苯胺(85mg，0.913mmol)。在室溫下攪拌溶液3天。在真空中除去溶劑，使殘余物在H2O和EtOAc之間進行分配。將水相用另外部分的EtOAc萃取。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4中干燥，然后在真空中進行濃縮。加入Et2O，過濾收集所得米黃色固體，得到0.17g產(chǎn)物(66％)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.21(s，1H)，8.15(s，1H)，7.96(s，1H)，7.95(d，J＝8.4Hz，1H)，7.57(d，J＝7.8Hz，2H)，7.42(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.27(t，J＝7.2Hz，2H)，7.0 1(t，J＝7.2Hz，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，3.78(s，2H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H).
6-(2-苯胺基-2-氧代乙基)-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺。使用與轉(zhuǎn)化N-羥基-6-{2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代-1-[(2-苯基乙基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺的酯類似的步驟。1H NMR(DMSO-d6)δ11.45(s，1H)，10.19(s，1H)，9.24(s，1H)，7.92(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，7.85(d，J＝7.8Hz，1H)，7.57(d，J＝7.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，7.27(t，J＝7.8Hz，2H)，7.01(t，J＝7.8Hz，1H)，3.76(s，2H).MS計算值327(MH+)，試驗值327(MH+). 類似于制備6-(2-苯胺基-2-氧代乙基)-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺所述的步驟，制得上述化合物的其它類似物。
二唑類
6-{2-[2-(4-甲氧基苯甲酰基)肼基]-2-氧代乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。向[2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-基]乙酸(100mg，0.38mmol)和4-甲氧基苯甲酰肼(63mg，0.38mmol)在2mL DMF中的溶液中加入3-{[(乙基亞氨基)亞甲基]氨基}-N，N-二甲基丙烷-1-銨氯化物(91mg，0.47mmol)。將該反應(yīng)在環(huán)境溫度下攪拌12小時。將反應(yīng)混合物直接負載到反相C18柱上進行提純，得到78mg(49％)白色固體形式的標(biāo)題化合物。LC/MS(EI)計算值413.1(MH+)，試驗值413.1(MH+).
6-{[5-(4-甲氧基苯基)-1，3，4-二唑-2-基]甲基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。將6-{2-[2-(4-甲氧基苯甲酰基)肼基]-2-氧代乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(78mg，0.19mmol)和(甲氧羰基氨磺酰)-三乙基銨氫氧化物，內(nèi)鹽(113mg，0.47mmol)在THF中的溶液在微波中加熱到100℃加熱10分鐘。通過二氧化硅墊過濾反應(yīng)，并用乙酸乙酯洗滌。將有機物蒸發(fā)至干，得到70mg(94％)澄清油形式的標(biāo)題化合物。LC/MS(EI)計算值395.1(MH+)，試驗值395.1(MH+). 類似于制備6-(2-苯胺基-2-氧代乙基)-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺所述的步驟，制得上述二唑系列的異羥肟酸類似物。
A2.來自5&6-氧代苯并噻吩類的化合物。
方案2說明了使用5&6-氧代苯并噻吩類制備氨基酸樣類似物。
方案2
從5&6-氧代苯并噻吩類制備A2化合物的步驟。

苯并[b]噻吩-2，6-二甲酸2-乙酯6-甲酯。將4-甲?；?3-硝基-苯甲酸甲酯(15.22g，72.78mmol)、巰基乙酸乙酯(8.70mL，79.3mmol)和K2CO3(12.87g，93.12mmol)在140mL無水DMF中的混合物在50℃加熱過夜。冷卻至室溫后，將混合物倒入到1L冰-水中，接著將所得混合物攪拌40min。過濾形成的固體，然后用4×70mL水洗滌。干燥后，獲得淺色固體形式的苯并[b]噻吩-2，6-二甲酸2-乙酯6-甲酯。1HNMR(CDCl3，200MHz)δ 8.56(s，1H)，8.09-7.97(m，2H)，7.88(d，J＝8.0Hz，1H)，4.40(q，J＝7.2Hz，2H)，3.95(s，3H)，1.40(t，J＝6.8Hz，3H).MS(EI)計算值265.0(MH+)，試驗值265.0(MH+).
苯并[b]噻吩-2，6-二羧酸2-乙酯。將苯并[b]噻吩-2，6-二甲酸2-乙酯6-甲酯(14.90g，56.38mmol)和LiI(37.96g，283.6mmol)在120mL無水吡啶的混合物回流3h。冷卻至室溫后，將混合物倒入到冰冷的2N HCl(800mL)中。過濾形成的固體，接著用3×100mL水洗滌。干燥后，用MeOH將固體結(jié)晶，得到淺色固體形式的苯并[b]噻吩-2，6-甲羧酸2-乙酯。1HNMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.66(s，1H)，8.21(s，1H)，8.08(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(dd，J＝8.4，1.0Hz，1H)，4.34(q，J＝7.2Hz，2H)，1.40(t，J＝6.8Hz，3H).MS(EI)計算值251.0(MH+)，試驗值251.1(MH+).
6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在0℃下，向苯并[b]噻吩-2，6-甲羧酸2-乙酯(6.40g，25.57mmol)在250mL無水THF中的溶液中緩慢加入BH3(1.5M在THF中，80.0mL，120mmol)。將所得混合物在0℃攪拌30min，然后在室溫下攪拌過夜。冷卻至0℃后，反應(yīng)混合物用1NHCl(30mL)淬滅。加入額外的120mL水，接著在真空中除去THF。過濾形成的固體，然后用2×20mL水洗滌。干燥后，獲得淺色固體形式的6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.00(s，1H)，7.88-7.76(m，2H)，7.36(d，J＝9.4Hz，1H)，4.80(s，2H)，4.38(q，J＝7.0Hz，2H)，2.00(brs，1H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H). MS(EI)計算值237.0(MH+)，試驗值237.1(MH+).
6-甲?；?苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。向6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(2.651g，11.22mmol)在110mL CH2Cl2中的溶液中加入MnO2(13.50g)。將混合物在室溫下攪拌30min，然后通過硅藻土墊過濾。濾液濃縮，干燥，得到淺色固體形式的6-甲?；?苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。1HNMR(CDCl3，200MHz)δ10.09(s，1H)，8.34(s，1H)，8.07(s，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，2H)，7.88(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，4.40(q，J＝7.0Hz，2H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H).MS(EI)計算值235.0(MH+)，試驗值235.1(MH+).
6-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。向2，4-二硝基苯甲醛(6.45g，32.9mmol)和K2CO3(5.45g，39.4mmol)在DMF(60mL)中的混合物中緩慢加入巰基乙酸甲酯(3.0mL，32.9mmol)。在室溫下攪拌混合物1h，然后在50℃下攪拌2h。所得混合物倒入到H2O/冰中，攪拌，直到形成沉淀為止。將固體過濾，接著用熱MeOH研制。過濾淺褐色固體。1HNMR(DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，8.33(s，1H)，8.30-8.17(m，2H)，3.89(s，3H).MS(EI)計算值(MH+)238.01，試驗值(MH+)238.10.
6-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。向攪拌下的6-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(3.9g，15.8mmol)在DMF(120mL)中的溶液中加入10％Pd/C(700mg，10wt％)。將反應(yīng)充滿H2，脫氣，接著再填充H2三次。所述的淤漿在氫氣球壓下(balloon pressure)在室溫下攪拌4天，然后通過硅藻土塞過濾，接著在減壓下除去溶劑。用EtOAc洗滌固體，過濾，得到所需的胺。1H NMR(CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，7.08(s，1H)，6.78(d，J＝8.4Hz，1H)，3.92(s，3H).MS(EI)計算值(MH+)208.04，試驗值(MH+)208.1.
5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在0℃下，向2-氯-5-硝基-苯甲醛(31.01g，167.1mmol)在330mL無水DMF中的溶液中加入K2CO3(27.80g，201.1mmol)，接著緩慢加入巰基乙酸乙酯(18.5mL，168.7mmol)。在0℃下攪拌20min后，將所得混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒃谑覝叵聰嚢柽^夜。然后，將反應(yīng)混合物倒入到1.5L水中。過濾形成的固體，接著用600mL水洗滌。干燥后，獲得淺色固體形式的5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)計算值252.0(MH+)，試驗值252.1(MH+).
5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。將5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(10.52g，41.89mmol)和10％Pd/C(1.1g)在450mL EtOH中的懸浮液在1大氣壓H2中在室溫下氫化4d。反應(yīng)混合物過濾，濾液濃縮，干燥，得到綠色固體形式的5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。以相同方式平行反應(yīng)預(yù)先形成10.61g 5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。獲得總共18.37g的5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)計算值222.0(MH+)，試驗值222.2(MH+).
5-碘-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。向5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(18.37g，83.02mmol)中加入HCl水溶液(21mL濃HCl在200mL H2O中，252mmol)，接著將所得混合物冷卻至0℃。加入NaNO2(6.02g在60mL H2O中，87.25mmol)的溶液，將混合物在0℃下攪拌10min。緩慢地加入NaI(13.07 g在60mL H2O中，87.20mmol)的溶液。在加入NaI期間，反應(yīng)混合物將變得難以攪拌。分幾批加入總共300mL的水。加畢后，將其溫?zé)嶂潦覝夭⑵湓谑覝叵聰嚢?h。然后，用CH2Cl2(800mL)和水(100mL)稀釋混合物。分離有機層，用200mL飽和NaHCO3洗滌，接著在Na2SO4中干燥。過濾后，將濾液濃縮，殘余物通過硅膠墊過濾，用EtOAc/己烷(0％-10％)洗滌。然后，濾液濃縮，用MeOH重結(jié)晶殘余物，得到淡橙色固體形式的5-碘-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)計算值332.9(MH+)，試驗值333.1(MH+).
5-甲?；?苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在-40℃下，向5-碘-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(14.09g，g，42.42mmol)的溶液中緩慢加入異丙基溴化鎂(0.7M在THF中，85mL，59.5mmol)的溶液。將混合物在-40℃下攪拌2h，然后緩慢地加入N-甲基-N-吡啶-2-基-甲酰胺(7.65mL，63.9mmol)。溫?zé)嶂潦覝睾螅瑢⒒旌衔镌贁嚢?.5h。向該混合物中小心地加入250mL 1NHCl。攪拌10min后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2(800mL)稀釋。有機層分離，用200mL飽和NaHCO3洗滌，接著在Na2SO4中干燥。過濾后，濾液濃縮，殘余物用MeOH重結(jié)晶，得到黃色固體形式的5-甲?；?苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ10.12(s，1H)，8.37(s，1H)，8.18(s，1H)，8.08-7.90(m，2H)，4.44(q，J＝7.2Hz，2H)，1.44(t，J＝7.4Hz，3H).MS(EI)計算值235.0(MH+)，試驗值235.1(MH+).
6-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。將2-(乙氧羰基)-1-苯并噻吩-6-甲酸(2.5g，10.0mmol)溶于DMF(20ml)中并冷卻至0℃。將EDCI(1.92g，10.0mmol)加入到該反應(yīng)中，接著加入(MeO)NHMe·HCl(1.5g，15.0mmol)，然后加入Et3N(1.4mL，10.0mmol)。將反應(yīng)在0℃下攪拌1h。將水加入到反應(yīng)混合物中，然后用Et2O(3x 3x)萃取。將合并的有機層在Na2SO4中干燥，過濾，濃縮，得到粗酰胺。通過快速色譜提純，得到所需的酰胺。1H NMR(CDCl3，600MHz)δ8.20(s，1H)，8.04(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，7.69(dd，J＝8.4，1.0Hz，1H)，4.39(d，J＝7.2Hz，2H)，3.54(s，3H)，3.38(s，3H)，1.4(t，J＝7.2Hz，3H).MS計算值(MH+)294，試驗值(MH+)294.
6-乙?；?1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。在-78℃下，向6-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(0.07g，0.22mmol)在THF(3mL)中的溶液中加入MeLi(0.15mL，1.6M在Et2O中，0.24mmol)。將反應(yīng)在-78℃下攪拌1h，接著加入飽和氯化銨溶液以猝滅反應(yīng)。此時，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后用己烷∶乙酸乙酯溶液的混合?3∶1)(3x)萃取。將合并的有機層在Na2SO4中干燥，過濾，然后在真空中進行濃縮。粗混合物色譜分離，得到所述的酮。1H NMR(CDCl3，600MHz)δ8.46(s，1H)，8.07(s，1H)，7.98(dd，J＝8.2，1.2Hz，1H)，7.92(m，1H)，4.42(q，J＝7.1Hz，2H)，2.69(s，3H)，1.42(t，J＝7.2Hz，3H).MS計算值(MH+)249，試驗值(MH+)249.
N-羥基-6-{2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代-1-[(2-苯基乙基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺。將6-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(40mg，0.182mmol)、異氰化物(24.4mg，0.182mmol)、TFA(14.0mL，.182mmol)和苯乙胺(27mL，0.218mmol)和MeOH(50mL)在小瓶中混合并在100℃下加熱1h。用快速色譜法提純褐色液體，用10-80％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到粗縮合產(chǎn)物。將此固體溶于2mL MeOH和1mL DMF中，接著加入2mL 50％的羥胺水溶液，然后將該溶液攪拌24h。將所述的溶液用反相HPLC提純，得到21mg((24％)的異羥肟酸2。1H NMR(600MHz)δ2.99-3.02(m，1)，3.05-3.06(m，1)，3.11-3.14(m，1)，3.24-3.27(m，1)，3.74(s，3)，5.18(s，1)，6.85(d，2，J＝9.2)，7.21-7.25(m，3)，7.30(t，1，J＝7.7)，7.43(d，1，J＝9.1)，7.64(d，1，J＝8.5)，7.86(s，1)，8.02(d，1，J＝8.2)，8.18(s，1).MS計算值476(MH+)，試驗值476(MH+). A3.來自5&6-氨基甲基苯并噻吩類的化合物。
方案3說明使用5&6-氨基甲基苯并噻吩類以制備1和2胺類，醚類、?；陌被谆衔?。
方案3
A3.來自5&6氨基烷基苯并噻吩類的化合物
6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯，鹽酸鹽。在0℃下，向6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(2.52g，10.7mmol)和三乙胺(3.00mL，21.5mmol)在無水THF(80mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(1.24mL，16.0mmol)。將所得混合物在0℃下攪拌30min，用EtOAc(400mL)稀釋，用飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌。將有機層在Na2SO4中干燥。過濾后，濃縮濾液，將殘余物溶于無水DMF(60mL)中。加入疊氮化鈉(1.41g，21.6mmol)后，將混合物在50℃下加熱30min。冷卻至室溫后，將混合物用EtOAc(300mL)和水(60mL)稀釋。將有機層再用水和鹽水洗滌，然后在Na2SO4中干燥。過濾后，濃縮濾液，將殘余物溶于THF(60mL)和水(6mL)中。加入三苯基膦(3.64g，13.9mmol)，接著將混合物在室溫下攪拌過夜，然后濃縮。將殘余物溶于乙醚(400mL)中，然后滴加4M HCl在二烷(6mL)中。用乙醚(5×30mL)洗滌形成的固體，干燥，得到淺色固體形式的6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯，鹽酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.66(brs，2H)，8.24-8.10(m，2H)，8.06(d，J＝8.6Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，4.34(q，J＝7.4Hz，2H)，4.13(s，2H)，1.32(t，J＝7.0Hz，3H).MS(EI)計算值236.1(MH+)，試驗值236.1(MH+).
6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。將6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(9.45 g，40.0mmol)和DBU(6.00mL，40.1mmol)在無水MeOH中的溶液攪拌2天。濃縮后，將殘余物溶于EtOAc(800mL)中并用1N HCl、水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。干燥有機層，過濾，濃縮濾液，干燥，得到灰白色固體形式的6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。1HNMR(CDCl3，200MHz)δ8.03(d，J＝0.6Hz，1H)，7.90-7.80(m，2H)，7.39(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，4.83(s，2H)，3.94(s，3H)，1.98(brs，1H).MS(EI)計算值223.0(MH+)，試驗值223.1(MH+).
6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯，鹽酸鹽。由6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯出發(fā)，按照制備6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯鹽酸鹽所述的類似步驟，制得標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.70(brs，2H)，8.24-8.12(m，2H)，8.05(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，4.20-4.14(m，2H)，3.88(s，3H).MS(EI)計算值222.0(MH+)，試驗值222.1(MH+).
6-(1-羥基乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。向冷卻(0℃)的6-乙?；?1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(2.0g，8.06mmol)在THF/EtOH(20/20mL)中的溶液中分批加入硼氫化鈉(308mg，8.14mmol)2小時后，將反應(yīng)用飽和NH4Cl淬滅。用EtOAc(40mL)稀釋所得混合物，用水和鹽水洗滌。將有機層在Na2SO4中干燥，過濾，濃縮。所得殘余物(2.1g)在沒有進一步提純的情況下就可使用。MS(EI)計算值251(MH+)，試驗值251(MH+).
6-(1-疊氮基乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。向6-(1-羥基乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(2.0g，8.06mmol)在甲苯(30mL)中的溶液中滴加二苯基磷?；B氮化物(2.64g，9.58mmol)，然后滴加DBU(1.31mL，8.79mmol)。24h后，向該稠的溶液中加入更多的疊氮化物(0.5mL)和DBU(0.3mL)。再過24h后，濃縮反應(yīng)混合物，通過柱色譜提純，得到所需產(chǎn)物(1.77g，經(jīng)過兩步后80.4％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)δ8.03(d，J＝0.9Hz，1H)，7.87(d，J＝8.2Hz，1H)，7.81(m，1H)，7.36(dd，J＝8.2，0.9Hz，1H)，4.75(q，J＝6.8Hz，1H)，4.40(q，J＝7.3Hz，2H)，1.58(d，J＝6.8Hz，3H)，1.41(t，J＝7.3Hz，3H).MS計算值276(MH+)，試驗值276(MH+).
6-(1-氨基乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。向6-(1-疊氮基乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(1.7g，6.17mmol)在EtOAc(50mL)中的溶液中加入10％Pd/C(170mg)，接著將所得淤漿在1大氣壓H2中在室溫下氫化4h。反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，濾液濃縮，干燥，得到所需產(chǎn)物(1.51g，98.6％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)δ8.01(d，J＝0.9Hz，1H)，7.84(m，1H)，7.81(d，J＝8.2Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.2，0.9Hz，1H)，4.39(q，J＝7.3Hz，2H)，4.25(q，J＝6.8Hz，1H)，1.44(d，J＝6.8Hz，3H)，1.40(t，J＝7.3Hz，3H).MS計算值250(MH+)，試驗值250(MH+).
6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯。將6-乙?；?1-苯并噻吩-2-甲酸乙酯(0.3g，1.21mmol)溶于DCE(3.0mL)中。然后，將4-甲氧基芐基胺加入到反應(yīng)中，接著加入乙酸(O.1mL，1.69mmol)和NaBH(OAc)3(0.41g，1.93mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌5天，接著用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅。然后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，合并的有機層在Na2SO4中干燥。在真空中濃縮后，用快速柱色譜提純粗反應(yīng)混合物，得到所述的胺。1H(600MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.84(s，1H)，7.82(s，1H)，7.41(d，J＝8.9Hz，1H)，7.18(d，J＝8.5Hz，2H)，6.85(d，J＝8.5Hz，2H)，4.40(q，J＝7.1Hz，2H)，3.93(q，J＝6.5Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.57(dd，J＝21.0，12.9 Hz，2H)，1.42-1.26(m，6H).MS計算值(MH+)370，試驗值(MH+)370.
N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺。使用與轉(zhuǎn)化N-羥基-6-{2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代-1-[(2-苯基乙基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺的酯類似的步驟。MS計算值357(MH+)，試驗值357(MH+). 類似于制備N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺所述的步驟，制得上述化合物的其它類似物。
通過與如上所述合成方法類似的方法制備下表中所述的化合物，但是使用合適的起始試劑。下面所列的化合物在濃度小于1μM時表現(xiàn)出組蛋白脫乙酰基酶抑制活性。

表1


表2


表3
實施例2-新化合物的HDAC抑制作用 HDAC1-旗(Flag)試驗 使用體外脫乙酰試驗測定新化合物抑制組蛋白脫乙?；竵喰?(HDAC1)的能力。用于此試驗的酶源是來自穩(wěn)定表達哺乳動物細胞的免疫純化的表位標(biāo)記的人HDAC1復(fù)合物。底物由含有乙酰化賴氨酸側(cè)鏈的商品組成(BIOMOL Research Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA)。通過與純化的HDAC1復(fù)合體一起培育從而將底物脫乙?；?，產(chǎn)生與脫乙酰水平相稱的熒光團。使用用于酶制備的Km下的底物濃度，在日益增加的濃度的新化合物的存在下進行脫乙?；囼?，以半定量地確定抑制50％的脫乙酰化反應(yīng)所需的化合物濃度。
實施例3-細胞系中的HDAC抑制 ATP試驗 測試本發(fā)明的新化合物抑制人子宮頸癌(HeLa)和結(jié)腸癌(HCT116)細胞增殖的能力。
在本試驗中，本試驗也稱為Vialight試驗，將細胞ATP水平測定為定量化的細胞增殖的平均值。本試驗使用來自Cambrex的生物發(fā)光法(ViaLight PLUS，目錄號LT07-121)。在ATP存在下，熒光素酶將熒光素轉(zhuǎn)化為氧化螢光素和光。測定產(chǎn)生的光的數(shù)量(在565nM處發(fā)射)并且該數(shù)量與增殖的相對量相關(guān)。將人子宮頸癌(HeLa)或結(jié)腸癌(HCT116)細胞與賦形劑或增加濃度的化合物一起培養(yǎng)48小時。通過直接加入細胞溶解試劑(在Vialight分析試劑盒中提供)到培養(yǎng)孔中，接著加入ATP-監(jiān)測試劑(含熒光素酶/熒光素)，來確定細胞增殖的數(shù)目。然后，測定產(chǎn)生的光的數(shù)量(在565nM處發(fā)射)。產(chǎn)生光的數(shù)量，如通過565nM吸光度測定，與培養(yǎng)液中活細胞的數(shù)目成正比。
雖然本發(fā)明已經(jīng)根據(jù)其實施方案已經(jīng)進行了描述，但是可以理解，在不脫離本發(fā)明所述含義的情況下，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可以在形式上和具體細節(jié)上進行各種改變。本發(fā)明的范圍通過下面所述的權(quán)利要求進行限定。
權(quán)利要求
1.下面結(jié)構(gòu)式表示的化合物
其中A選自
其中R1-R16和R27相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C2-C10鏈烯基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；
R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、-C(＝O)R25、-C(＝O)OR25、-C(＝O)N(R26)2、-SO2R25，或者R1和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
R21和R26獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
R22是未取代的或取代的雜環(huán)基；
R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫，R23和R24不能都是-NR18R19，或R23和R24不能都是羥基；
R25獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
m、p和q相互獨立地是1或2；
n和r相互獨立地是0、1或2；
或其立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R22選自取代或未取代的咪唑基、二唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、吡咯基和三唑基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中A選自下面的基團
其中R1、R2和R6-R16相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19；
R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、未取代的或取代的-C(＝O)芳基、未取代的或取代的-C(＝O)C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的-C(＝O)C1-C10烷基，或者R1和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫或-NR18R19；
m、p和q相互獨立地是1；
n和r相互獨立地是0或1。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中A選自
以及所有其它的取代基如權(quán)利要求3中所述。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中n＝0或r＝0，以及R27是氫。
6.權(quán)利要求3的化合物，其中A選自
以及所有其它的取代基如權(quán)利要求3中所述。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中n是0。
8.權(quán)利要求6的化合物，其中R1、R2、R5、R11或R12中的一個或多個是未取代的或取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
9.權(quán)利要求3的化合物，其中A是
其中R20如權(quán)利要求3中所述，R5是未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基。
10.權(quán)利要求3的化合物，其中A是
其中m是1，R11和R12中的至少一個是取代或未取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基；和
R23和R24獨立地選自氫、C1-C6烷基和
-NR18R19；以及R23和R24不能都是氫或-NR18R19。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R18是氫，以及R19是
取代或未取代的C1-C10烷基芳基或取代或未取代的C3-C8環(huán)烷基。
12.權(quán)利要求3的化合物，其中A是
其中R1和R2中的至少一個是未取代的或取代的并且選自苯基、萘基、聯(lián)苯基、芐基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、環(huán)己基、喹啉基、異喹啉基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-吡啶基、-CH2-喹啉基、-CH2-異喹啉基、-CH2CH2-吲哚基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基；和
R20是C1-C6烷基。
13.由下列結(jié)構(gòu)式表示的化合物
其中A1和A2中的一個是氫以及另一個是選自下面的基團
其中R1-R16和R27相互獨立地是氫或未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C2-C10鏈烯基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；或者R1和R2、R6和R7以及R11和R12中的一組或多組與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R17獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；
R18和R19獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、-C(＝O)R25、-C(＝O)OR25、-C(＝O)N(R26)2、-SO2R25，或者R18和R19與跟它們相連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)，其中所述的含氮雜環(huán)可以任選地被取代；
R20獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
R21和R26獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
R22是未取代的或取代的雜環(huán)基；
R23和R24獨立地選自氫、未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基、未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基、羥基或-NR18R19；其中R23和R24不能都是氫，R23和R24不能都是-NR18R19，或R23和R24不能都是羥基；
R25獨立地選自未取代的或取代的C1-C10烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的或取代的雜環(huán)基、未取代的或取代的C1-C10烷基芳基、未取代的或取代的C1-C10烷基環(huán)烷基或未取代的或取代的C1-C10烷基雜環(huán)基；
m、p和q相互獨立地是1或2；
n和r相互獨立地是0、1或2；
或其立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物。
14.化合物，選自
N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
6-{1-(芐基氨基)-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-{2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代-1-[(2-苯基乙基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
6-{1-(環(huán)己基氨基)-2-[(4-甲氧基苯基)氨基]-2-氧代乙基}-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-{(1R或S)-1-[(4-甲氧基芐基)氨基]乙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-6-(1-{[2-(4-溴苯基)乙基]氨基}乙基)-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-[1-(異丁基氨基)乙基]-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
6-(1-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}乙基)-N-羥基-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]丙基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
N-羥基-6-{1-[(4-甲氧基芐基)氨基]丁基}-1-苯并噻吩-2-甲酰胺；
或其立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、外消旋體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或多晶型物。
15.抑制組蛋白脫乙?；?(HDAC-1)活性的方法，包括使HDAC-1與有效量的權(quán)利要求1-14中任一項的化合物接觸，以便抑制HDAC-1的活性。
16.治療患者中的癌癥的方法，包括給予所述的患者治療有效量的權(quán)利要求1-14中任一項的化合物。
17.治療患者中的硫氧還蛋白(TRX)-介導(dǎo)的疾病的方法，包括給予所述患者治療有效量的權(quán)利要求1-14中任一項的化合物的步驟，其中所述化合物的數(shù)量能在所述患者中有效地治療TRX-介導(dǎo)的疾病。
18.治療患者中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，包括給予所述的患者治療有效量的權(quán)利要求1-14中任一項的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一類新的異羥肟酸衍生物。該異羥肟酸化合物可以用于治療癌癥。所述的異羥肟酸化合物還可以抑制組蛋白脫乙?；覆⑶疫m合于選擇性地誘導(dǎo)終末分化，以及阻止贅生性細胞的細胞生長和/或細胞程序死亡，由此抑制這些細胞的增殖。因此，本發(fā)明的化合物用于治療所患腫瘤的特征在于贅生性細胞增殖的患者。本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防和治療TRX-介導(dǎo)的疾病，例如自身免疫性疾病、變應(yīng)性疾病和炎性疾病，并且用于預(yù)防和/或治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，例如神經(jīng)變性疾病。此外，本發(fā)明提供了藥物組合物，其包含所述的異羥肟酸異羥肟酸衍生物，本發(fā)明還提供了這些藥物組合物的安全的劑量給藥方案，其可以容易地遵照，并且其在體內(nèi)產(chǎn)生該異羥肟酸衍生物的治療有效量。
文檔編號C07D333/00GK101163690SQ200680013082
公開日2008年4月16日 申請日期2006年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月20日
發(fā)明者J·L·哈布斯, S·卡塔, J·梅索特, T·米勒, P·西利費文, M·斯坦頓, K·威爾遜, D·J·維特 申請人:默克公司