酸乙酷化水平的步驟。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中在療程中進(jìn)行一次測(cè)定蛋 白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平的步驟。
[0074] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其還包括如果在療程中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化 水平增加，則選擇該患者W進(jìn)一步治療。
[0075] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其還包括如果在第一周療程中蛋白質(zhì)賴氨酸 乙酷化水平增加，則選擇該患者W進(jìn)一步治療。另一個(gè)實(shí)施方案提供的方法還包括如果在 第一周和第二周療程中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平增加，則選擇該患者W進(jìn)一步治療。
[0076] -個(gè)實(shí)施方案提供了選擇患者進(jìn)行進(jìn)一步恩替司他-芳香酶抑制劑聯(lián)合療法的方 法，其包括將開始治療后得到的組織樣品中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平與開始治療前測(cè)定的 蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平比較。
[0077] -個(gè)實(shí)施方案提供了選擇患者進(jìn)行進(jìn)一步恩替司他-芳香酶抑制劑聯(lián)合療法的方 法，其包括將開始治療后得到的組織樣品中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平與開始治療前測(cè)定的 蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平比較，其中開始治療后蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平增加指示該患者 將會(huì)受益于進(jìn)一步治療。
[0078] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中超過(guò)一次測(cè)定開始治療后得到的組織樣 品中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中開始治療后蛋白 質(zhì)賴氨酸乙酷化水平增加持續(xù)一周。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中在第2、8和15 天測(cè)定開始治療后蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平。
[0079] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約10%到約500%。另一個(gè)實(shí)施 方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約10%到約400%。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方 法，其中增加量為約10%到約300%。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約 10%到約200%。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約10%到約100%。另一 個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約10%、約20%、約30%、約40%、約50%或約 60%。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中增加量為約25%、約50%、約75%、約100%、 約125%或約150%。
[0080] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述組織樣品選自B細(xì)胞、T細(xì)胞或單核 細(xì)胞。
[0081] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中開始治療后得到的組織樣品是在開始治 療至少2天后獲得的。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述開始治療后得到的組織 樣品是在開始治療后第2天至第28天之間獲得的。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中 所述開始治療后得到的樣品是在開始治療后第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15天 獲得的。
[0082] -個(gè)實(shí)施方案提供了選擇患者進(jìn)行進(jìn)一步恩替司他-芳香酶抑制劑聯(lián)合療法的方 法，其包括將開始治療后得到的組織樣品中蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平與開始治療前測(cè)定的 蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平的變化百分比比較，其中開始治療后蛋白質(zhì)賴氨酸乙酷化水平降 低百分比為約5%至約50%指示該患者將不會(huì)受益于進(jìn)一步治療。
[0083] -個(gè)實(shí)施方案提供了治療對(duì)之前的芳香酶抑制劑療法顯示抗性的乳腺癌的方法， 所述方法包括向患者施用包含恩替司他和芳香酶抑制劑的組合，其中所述患者在之前的芳 香酶抑制劑治療過(guò)程中未顯示完全應(yīng)答、部分應(yīng)答或大于6個(gè)月的病情穩(wěn)定。在一些情況 下，向禁食患者施用恩替司他。
[0084] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述患者在之前作為輔助療法給予的非 醬體芳香酶抑制劑治療過(guò)程中或結(jié)束的6個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)。
[0085] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述患者在之前非醬體芳香酶抑制劑治 療至少3個(gè)月后顯示疾病進(jìn)展。
[0086] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述乳腺癌為E郎日性。
[0087] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述與恩替司他聯(lián)合施用的芳香酶抑制 劑為來(lái)曲挫。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述與恩替司他聯(lián)合施用的芳香酶 抑制劑為阿那曲挫。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述與恩替司他聯(lián)合施用的 芳香酶抑制劑為依西美坦。
[0088] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中按順序依次施用或同時(shí)施用恩替司他和 所述芳香酶抑制劑。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中同時(shí)施用恩替司他和所述芳 香酶抑制劑。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中首先施用所述芳香酶抑制劑。另一個(gè) 實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中每日施用所述芳香酶抑制劑并周期性施用恩替司他。另 一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中每周施用恩替司他并每日施用所述所述芳香酶抑制 劑。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中將恩替司他引入正在進(jìn)行的芳香酶抑制劑療 程中。
[0089] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其還包括除恩替司他和選自來(lái)曲挫、阿那曲 挫或依西美坦或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物或前藥的芳香酶抑制劑的組合外還向受試者 施用一種或多種療法。
[0090] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中所述一種或多種療法包括放療、化療、高 劑量化療伴干細(xì)胞移植W及單克隆抗體療法中的一種或多種。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣 的方法，其中所述放療包括體內(nèi)和/或體外放療。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中 所述化療包括向受試者施用多柔比星、環(huán)憐酷胺、紫杉醇、拉帕替尼、卡培他濱、曲妥珠單 抗、貝伐珠單抗、吉西他濱、艾瑞布林或白蛋白結(jié)合型紫杉醇(nab-pacl itaxel)中的一種或 多種。
[0091] -個(gè)實(shí)施方案提供了治療有需要的患者的乳腺癌的方法，該方法包括口服施用依 西美坦和恩替司他，其中恩替司他施用于禁食患者。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的 方法，其中施用后恩替司他Tmax少于1小時(shí)。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其 中施用后恩替司他Tmax少于90分鐘。 另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中施用后恩替司他Tmax少于2小時(shí)。另一 個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中施用后恩替司他Tmax為30分鐘至2小時(shí)。另一個(gè) 實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中口服施用恩替司他后，恩替司他Cmax為至少 150ng/mL。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中口服施用恩替司他后，恩替司他 Cmax為至少125ng/mL。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中口服施用恩替司他 后，恩替司他Cmax為至少lOOng/mL。 另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中口服施用恩替司他后，恩替司他Cmax 為至少80ng/mL。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中口服施用恩替司他后，恩 替司他Cmax為至少50ng/mL。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中施用約5mg的 恩替司他。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中施用約IOmg的恩替司他。另一個(gè) 實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中施用約Img至約20mg的恩替司他。另一個(gè)實(shí)施方案 提供了治療乳腺癌的方法，其中每周一次施用恩替司他。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺 癌的方法，其中在28-天周期內(nèi)施用恩替司他。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法， 其中所述患者在施用恩替司他前2小時(shí)內(nèi)不進(jìn)食。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方 法，其中所述患者在施用恩替司他前1小時(shí)內(nèi)不進(jìn)食。
[0092] 另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中所述患者在施用恩替司他后2小 時(shí)內(nèi)不進(jìn)食。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中所述患者在施用恩替司他后 30分鐘內(nèi)不進(jìn)食。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中在與恩替司他施用當(dāng)日 不同的時(shí)間施用依西美坦。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中餐后施用依西 美坦。另一個(gè)實(shí)施方案提供了治療乳腺癌的方法，其中隨餐施用依西美坦。另一個(gè)實(shí)施方案 提供了治療乳腺癌的方法，其中每日一次施用約25mg的依西美坦。 肺癌的治療 表皮生長(zhǎng)因子受體
[0093] 在過(guò)去的幾年中，關(guān)于與癌癥行為相關(guān)的分子機(jī)制和細(xì)胞轉(zhuǎn)化的知識(shí)已經(jīng)得W增 加。自從針對(duì)設(shè)及許多類型癌癥的致癌作用的過(guò)程的特定祀向治療開發(fā)W來(lái)，已經(jīng)產(chǎn)生了 更多的興趣。在90年代，發(fā)現(xiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體化GFR)在腫瘤樣生物學(xué)和行為中發(fā)揮重要 作用。EGFR刺激使影響細(xì)胞增殖和活動(dòng)、血管生成和其他機(jī)制的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)和級(jí)聯(lián)活 化。正常細(xì)胞受到外部因素影響，在腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)由該受體介導(dǎo)的細(xì)胞增殖的活化將不 再需要外部刺激，而是獨(dú)立自主地起作用。在NS化C的情況下，已表明該受體的過(guò)度表達(dá)W 及特定的體細(xì)胞突變發(fā)生在它們的具有酪氨酸激酶活性的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(外顯子18與21之 間）中，其可影響預(yù)后，與階段、存活和化療反應(yīng)顯著相關(guān)。運(yùn)些數(shù)據(jù)導(dǎo)致各種物質(zhì)的開發(fā)和 研究，包括針對(duì)EGFR的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的單克隆抗體(例如，西妥昔單抗、E化i化X? >和抑制 EGFR的酪氨酸激酶細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(酪氨酸激酶抑制劑，TKI)的小分子(例如，吉非替尼和厄 洛替尼）。采用運(yùn)些TKI進(jìn)行的隨機(jī)化臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果已經(jīng)證明它們?cè)诨加型砥诩膊〉?患者中的使用是有效的，從而顯著提高了運(yùn)些患者的存活率，尤其當(dāng)他們具有更常發(fā)現(xiàn)于 具有腺癌組織學(xué)亞型(尤其是在細(xì)支氣管肺泡癌的存在下）的亞洲族群的不吸煙、女性患者 的亞群中的EGFR的突變時(shí)。運(yùn)些結(jié)果中的一些如此令人印象深刻，W致于該現(xiàn)象被稱為 Lazarus效應(yīng)，并導(dǎo)致厄洛替尼在美國(guó)和歐洲被批準(zhǔn)用于NS化C患者的第二和第S線治療； W及吉非替尼在歐洲被批準(zhǔn)用于具有EGFR突變的患者（del Mello等人，World J Clinc Oncol,Vol.2,p.367(2011))〇
[0094] EGFR也稱為化bBl或化rl，是由位于染色體7上的基因（7pl2.1-12.3)編碼的跨膜 糖蛋白。EGFR包含1186個(gè)氨基酸(a.a.)和26個(gè)外顯子。外顯子1-14編碼細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，外顯 子15編碼跨膜區(qū)，且外顯子16-26編碼細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。該糖蛋白屬于化bB受體家族，該家族 還包括:ErbB2化ER2/neu)、化bB3化ER3)和化bB4化ER4)。運(yùn)些蛋白質(zhì)中的每一種在結(jié)構(gòu)上 均由細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、疏水性跨膜結(jié)構(gòu)域和具有固有酪氨酸激酶(TK)活性的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組 成(除了化bB3)。運(yùn)些受體作為非活性的單體存在，被它們通過(guò)細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域與EGF家族的 生長(zhǎng)因子的相互作用所活化。ErbB受體分子與運(yùn)些配體中的一個(gè)結(jié)合導(dǎo)致它與同一家族的 其他單體相互作用（受體二聚）。該二聚可發(fā)生在兩個(gè)相同的受體之間（同源二聚化，例如 ErbBl-ErbBl)或兩個(gè)不同的受體之間（異源二聚化，例如化bBl-ErbB3)。由特異性配體引起 的刺激引發(fā)獨(dú)特模式的二聚，其對(duì)于發(fā)生該現(xiàn)象的組織/腫瘤也具有特異性。運(yùn)些受體的二 聚導(dǎo)致它們的自身憐酸化，W及TK的活化和調(diào)節(jié)運(yùn)樣的多種活性如增殖、分化、調(diào)亡和細(xì)胞 遷移的細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程的級(jí)聯(lián)的活化。 E巧粘蛋白
[0095] 上皮巧粘蛋白化巧粘蛋白）也稱為巧粘蛋白-UCAM 120/80或桑權(quán)粘著蛋白，是由 CDHl基因編碼的人類中的蛋白質(zhì)。E巧粘蛋白是巧粘蛋白超家族的典型成員。E巧粘蛋白是 巧依賴性細(xì)胞-細(xì)胞粘附糖蛋白，其由細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域中的五個(gè)細(xì)胞外巧粘蛋白重復(fù)化Cl-EC5)、跨膜結(jié)構(gòu)域、與pl20-連環(huán)蛋白和0-連環(huán)蛋白結(jié)合的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域W及高度保守的胞 質(zhì)尾區(qū)組成。細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域含有對(duì)e-連環(huán)蛋白結(jié)合至關(guān)重要W及因此對(duì)E巧粘蛋白功能至 關(guān)重要的高度憐酸化區(qū)。e-連環(huán)蛋白還可與O-連環(huán)蛋白結(jié)合。O-連環(huán)蛋白參與含肌動(dòng)蛋白 的細(xì)胞骨架絲的調(diào)節(jié)。在上皮細(xì)胞中，含E巧粘蛋白的細(xì)胞至細(xì)胞的連接通常與含肌動(dòng)蛋白 的細(xì)胞骨架絲相鄰。
[0096] 運(yùn)種基因中的突變與胃癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌和卵巢癌相關(guān)。功能或表 達(dá)的缺失被認(rèn)為有助于癌癥和轉(zhuǎn)移的進(jìn)展。E巧粘蛋白下調(diào)降低了組織內(nèi)的細(xì)胞粘附強(qiáng)度， 從而導(dǎo)致細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性增加。運(yùn)反過(guò)來(lái)可能允許癌細(xì)胞跨越基底膜并侵入周圍組織。 測(cè)定E巧粘蛋白水平的方法
[0097] E巧粘蛋白水平可W通過(guò)化ISA進(jìn)行定量測(cè)量。一些E巧粘蛋白化ISA試劑盒諸如由 TaKaRA提供的E觀枯蛋白EIA試劑盒是固相夾屯、EIA，其利用兩種小鼠單克隆E觀枯蛋白抗體 (其中一種涂覆在板上，而另一種用POD標(biāo)記)來(lái)使用兩步溫育法檢測(cè)人E巧粘蛋白。在第一 步中，在抗體涂覆的微量滴定板中溫育樣品。在第二步的過(guò)程中，洗涂該板并將其與POD標(biāo) 記的E巧粘蛋白抗體一起溫育。添加底物，并且POD與底物化202、TMBZ)之間的反應(yīng)導(dǎo)致顏色 形成。樣品可溶性E巧粘蛋白的量通過(guò)使用EIA平板閱讀器測(cè)量吸光度來(lái)測(cè)定。準(zhǔn)確的可溶 性E巧粘蛋白樣品濃度可通過(guò)將它們特定的吸光度與獲得的繪制在標(biāo)準(zhǔn)曲線上的標(biāo)準(zhǔn)吸光 度進(jìn)行比較來(lái)測(cè)定。在一些實(shí)施方案中，E巧粘蛋白水平通過(guò)化ISA進(jìn)行定量測(cè)量。
[0098] E巧粘蛋白水平可W通過(guò)免疫組織化學(xué)進(jìn)行檢測(cè)。為了檢測(cè)在浸沒(méi)固定細(xì)胞中的E 巧粘蛋白水平，將細(xì)胞與lOyg/mL的人E巧粘蛋白抗原親和力純化的多克隆抗體（R&D Systems⑩目錄號(hào)AF648)在室溫下一起溫育3小時(shí)。然后使用NodhernLi曲ts? 557偶聯(lián) 的抗山羊IgG二級(jí)抗體(R&DSystems⑩目錄號(hào)化001)將細(xì)胞染色并用DAPI復(fù)染?？墒褂们?光顯微鏡將E巧粘蛋白和DAPI可視化，并且濾光器設(shè)置為適合所用的標(biāo)記物。在一些實(shí)施方 案中，E巧粘蛋白水平通過(guò)免疫組織化學(xué)進(jìn)行檢測(cè)。
[0099] E巧粘蛋白水平可W通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)進(jìn)行檢測(cè)。用于免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC)的蓋玻 片可使用明膠制備。在一些實(shí)施方案中，用于制備ICC的蓋玻片的方法包括a)將已滅菌的蓋 玻片放置于24孔板的孔中，b)加入4(K)化的明膠涂覆溶液，W及C)在室溫下溫育蓋玻片10分 鐘。然后除去明膠涂覆溶液并將蓋玻片風(fēng)干15分鐘。經(jīng)干燥的蓋玻片可在室溫下儲(chǔ)存直至 使用。一旦制備好蓋玻片，則可按如下制備并固定細(xì)胞。通過(guò)向含有明膠涂覆的蓋玻片的細(xì) 胞培養(yǎng)板的孔中添加5(K)化含約5000個(gè)細(xì)胞的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到所需的密度/ 期時(shí)，從每個(gè)孔中去除培養(yǎng)基并用PBS洗涂?jī)纱?。向每個(gè)孔中添加300-4(K)化的2-4%甲醒固 定溶液，并在室溫下溫育20分鐘。將孔用PBS洗涂?jī)纱?，并?0化L的洗涂緩沖液覆蓋?？蓪?蓋玻片在2-8°C下儲(chǔ)存最長(zhǎng)3個(gè)月或可將其立即染色。一旦制備好細(xì)胞，可按如下將細(xì)胞染 色用于ICC。將含有固定的細(xì)胞的蓋玻片在40化L的洗涂緩沖液中洗涂?jī)纱?。通過(guò)添加40化L 封閉緩沖液阻斷非特異性染色，并在室溫下溫育45分鐘。去除封閉緩沖液。不必沖洗。根據(jù) 制造商的說(shuō)明在稀釋緩沖液中稀釋未偶聯(lián)的第一抗體(或巧光偶聯(lián)的第一抗體）。對(duì)于使用 R&D Systems抗體對(duì)蓋玻片上的細(xì)胞進(jìn)行巧光ICC染色，建議在室溫下溫育1小時(shí)。或者，在 2-8°C下溫育過(guò)夜。在40化L的洗涂緩沖液中洗涂?jī)纱?。如果使用具有直接巧光偶?lián)物的第 一抗體，則轉(zhuǎn)到步驟8。根據(jù)制造商的說(shuō)明在稀釋緩沖液中稀釋第二抗體。向孔中加入40化 L，并在黑暗中在室溫下溫育1小時(shí)。從該步驟開始，樣品應(yīng)當(dāng)避光。在4(K)化的洗涂緩沖液中 沖洗兩次。向每個(gè)孔中添加30化L經(jīng)稀釋的DAPI溶液，并在室溫下溫育2-5分鐘。DAPI與DNA 結(jié)合，并且是方便的核復(fù)染劑。它在358nm處具有最大吸收并且巧光藍(lán)在461nm處具有發(fā)射 最大值。用PBS沖洗一次并用水沖洗一次。從孔中小屯、地取出蓋玻片并吸干W去除任何過(guò)量 的水。向每個(gè)蓋玻片的顯微鏡載玻片上分配1滴抗巧光澤滅封片液(anti-fade mounting medium)。用面朝顯微鏡載玻片的細(xì)胞覆蓋蓋玻片。使用巧光顯微鏡和適合所用的標(biāo)記物的 濾光器組進(jìn)行可視化。還可將載玻片在<-20°C下儲(chǔ)存于載玻片盒中，W用于后續(xù)的考查。在 一些實(shí)施方案中，E巧粘蛋白水平通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)進(jìn)行檢測(cè)。
[0100] E巧粘蛋白基因表達(dá)可通過(guò)測(cè)量E巧粘蛋白甲基化進(jìn)行測(cè)定。E巧粘蛋白甲基化試 劑盒諸如由Millipot'e⑧提供的CpGWIZ?E巧粘蛋白擴(kuò)增試劑盒，通過(guò)甲基化特異性PCR (MSP)測(cè)定E巧粘蛋白啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)。該試劑盒含有祀向啟動(dòng)子區(qū)的引物，在該啟動(dòng) 子區(qū)中序列在亞硫酸氨鹽處理后呈現(xiàn)最大差異。確定PCR參數(shù)，使得試劑盒中的所有引物組 在相同的條件下擴(kuò)增。針對(duì)E巧粘蛋白的對(duì)照基因組DNA樣品（甲基化的和未甲基化的）也包 含在內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，E巧粘蛋白基因表達(dá)通過(guò)測(cè)量E巧粘蛋白甲基化進(jìn)行測(cè)定。
[0101] -個(gè)實(shí)施方案提供了治療在先前治療后進(jìn)展的未使用過(guò)EGFR抑制劑的患者的癌 癥的方法，其中所述患者表現(xiàn)出高E巧粘蛋白表達(dá)水平，該方法包括向患者施用包含恩替司 他和EGFR抑制劑的組合。另一個(gè)實(shí)施方案提供了運(yùn)樣的方法，其中高E巧粘蛋白表達(dá)水平通 過(guò)化ISA、免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)或測(cè)定E巧粘蛋白甲基化水平進(jìn)行表征。另一個(gè)實(shí)施 方案提供了其中高E巧粘蛋白表達(dá)水平通過(guò)免疫組織化學(xué)進(jìn)行測(cè)定的方法。另一個(gè)實(shí)施方 案提供了運(yùn)樣的方法，其中高E巧粘蛋白表達(dá)水平得分為+3,如通過(guò)免疫組織化學(xué)測(cè)定的。 肺癌
[0102] 在美國(guó)和全世界肺癌都是女性和男性癌癥死亡的主要原因。肺癌已超越乳腺癌成 為女性癌癥死亡的主要原因。預(yù)計(jì)2010年在美國(guó)有157,300人死于肺癌，運(yùn)高于由結(jié)腸癌和 直腸癌、乳腺癌W及前列腺癌總共導(dǎo)致的死亡數(shù)。盡管在最早的階段診斷的肺癌的存活率 較高，約49%存活五年或更長(zhǎng)時(shí)間，但被診斷為患有已經(jīng)擴(kuò)散至身體其他部位的肺癌的運(yùn) 些人中僅約2%在診斷后存活五年。
[0103] 當(dāng)正常細(xì)胞經(jīng)歷導(dǎo)致其不受控制地生長(zhǎng)和繁殖的轉(zhuǎn)變時(shí)癌癥發(fā)生。該細(xì)胞形成不 同于其所出現(xiàn)的周圍組織的腫塊或腫瘤。腫瘤是危險(xiǎn)的，因?yàn)樗鼈兒馁M(fèi)氧、營(yíng)養(yǎng)物和健康細(xì) 胞的空間并且因?yàn)樗鼈兦秩氩⑵茐幕蚪档驼＝M織起作用的能力。
[0104] 大多數(shù)肺部腫瘤是惡性的。運(yùn)意味著它們侵入并破壞其周圍的健康組織，并可擴(kuò) 散至全身。腫瘤可擴(kuò)散至附近的淋己結(jié)或通過(guò)血流擴(kuò)散至其他器官。該過(guò)程被稱為轉(zhuǎn)移。當(dāng) 肺癌轉(zhuǎn)移時(shí)，肺部的腫瘤被稱為原發(fā)性腫瘤，而身體其他部位的腫瘤被稱為繼發(fā)性腫瘤或 轉(zhuǎn)移性腫瘤。
[0105] 肺部的一些腫瘤是從身體的其他部位的癌癥轉(zhuǎn)移的。肺是轉(zhuǎn)移的常見部位。如果 是運(yùn)種情況，則該癌癥不被認(rèn)為是肺癌。例如，如果前列腺癌通過(guò)血流擴(kuò)散至肺，則它是在 肺中的轉(zhuǎn)移性前列腺癌(繼發(fā)性癌癥），而不被稱為肺癌。
[0106] 肺癌包括一組不同類型的腫瘤。肺癌通常被分為兩個(gè)主要的組，其占所有病例的 約95%。運(yùn)些組的劃分是基于組成癌癥的細(xì)胞類型。肺癌的兩種主要類型通過(guò)在顯微鏡下 觀察時(shí)腫瘤的細(xì)胞大小來(lái)表征。它們被稱為小細(xì)胞肺癌（SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)。 NSCLC包括幾種腫瘤亞型。S化C不太常見，但其生長(zhǎng)較快并且比NS化C更有可能轉(zhuǎn)移。通常， 當(dāng)診斷到癌癥時(shí)SCLC已經(jīng)擴(kuò)散至身體的其他部位。約5%的肺癌具有罕見的細(xì)胞類型，包括 類癌瘤、淋己瘤及其他。如本文所用的術(shù)語(yǔ)"肺癌"包括但不限于，S化C、NS化C、類癌瘤、淋己 瘤和它們的各種亞型。 非小細(xì)胞肺癌
[0107] NSCLC是一種肺部癌癥，它不是小細(xì)胞癌(燕麥細(xì)胞癌)類型。術(shù)語(yǔ)"非小細(xì)胞肺癌" 適用于各種類型的支氣管癌(從支氣管內(nèi)層產(chǎn)生的那些癌）。特定類型的NS化C的實(shí)例包括 但不限于，腺癌、鱗狀細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌（即，大細(xì)胞未分化癌）。
[0108] 腺癌是在器官的內(nèi)層或內(nèi)表面形成的癌癥。腺癌是肺癌的最常見類型，其占所有 肺癌病例的30%-40%。腺癌的一種亞型被稱為支氣管肺泡細(xì)胞癌，其在胸部X射線下產(chǎn)生 類似肺炎的外觀。
[0109] 鱗狀細(xì)胞癌是開始于鱗狀細(xì)胞的癌癥。鱗狀細(xì)胞是在顯微鏡下看起來(lái)像魚鱗的薄 平細(xì)胞。鱗狀細(xì)胞發(fā)現(xiàn)于形成皮膚表面、身體中空器官的內(nèi)層W及呼吸道和消化道的通道 的組織中。鱗狀細(xì)胞癌可出現(xiàn)在運(yùn)些組織中的任何組織中。鱗狀細(xì)胞癌是肺癌的第二個(gè)最 常見類型，占全部病例的約30%。
[0110] 大細(xì)胞癌不顯示鱗狀或腺成熟的跡象。因此，運(yùn)些腫瘤通常進(jìn)行默認(rèn)診斷（當(dāng)已經(jīng) 排除所有其他的可能性時(shí)）。在活檢之前運(yùn)些腫瘤缺乏表明其診斷的任何診斷特征。它們傾 向于生長(zhǎng)迅速、早期轉(zhuǎn)移，并與吸煙密切相關(guān)。大細(xì)胞腫瘤通常是具有廣泛性出血和壞死的 大的、蓬松的、邊界清楚的、粉灰色腫塊。盡管它們通常具有中屯、壞死，但它們很少空化。它 們傾向于存在于中間至外圍的肺區(qū)域。它們可局部擴(kuò)展W包括段支氣管或亞段支氣管。大 細(xì)胞癌的變體是巨細(xì)胞癌。該亞型尤其具有攻擊性，并且攜帶極差的預(yù)后。運(yùn)些腫瘤通常作 為具有局灶性壞死部分的大的周邊腫塊存在。它們不包括大的氣道，除非通過(guò)直接擴(kuò)展。大 細(xì)胞癌占所有肺癌病例的10 % -20 %。 小細(xì)胞肺癌
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