in進(jìn)行抽濾，洗涂2次。
[0050] (6)將步驟妨中制得的交聯(lián)凝膠注入冷凍盒中，待其自動(dòng)流平溢出，然后用刮刀 沿冷凍盒上沿將其刮平，之后將冷凍盒進(jìn)行冷凍定型化，冷凍定型之后的交聯(lián)凝膠脫冷凍 盒后迅速放入冷凍干燥機(jī)干燥室中，冷凍干燥32h。然后壓片、切片、滅菌后得到可降解生物 復(fù)合止血膜。 陽(yáng)0川 實(shí)施例2 陽(yáng)0巧（1)稱取20g透明質(zhì)酸鋼，加入到盛有900mL純化水的容器中，在攬拌條件下使之 完全溶解，配制得到22. 22g/L的透明質(zhì)酸鋼溶液，用0.Imol/L的鹽酸溶液將配制好的透明 質(zhì)酸鋼溶液抑值調(diào)節(jié)為4. 5。 陽(yáng)化引 似稱取7. 5姐DC·肥L加入到步驟（1)中配制得到的透明質(zhì)酸鋼溶液中，攬拌使 之充分溶解，制得交聯(lián)前體溶液。
[0054] (3)稱取12g簇甲基殼聚糖，加入到盛有750mL純化水的容器中，在攬拌條件下使 之完全溶解，配制得到16g/L的簇甲基殼聚糖溶液。
[005引 （4)將步驟（3)中配置好的簇甲基殼聚糖溶液加入步驟似中制得的交聯(lián)前體溶 液中，在32°C溫度下攬拌20min，使之均勻，然后靜置lOh，使之充分交聯(lián)，得到交聯(lián)凝膠。
[0056] 妨量取150血2. 3mol/L氯化鋼溶液加入到步驟（4)中得到的交聯(lián)凝膠中進(jìn)行洗 涂，浸泡15min進(jìn)行抽濾，洗涂3次。
[0057] (6)將步驟巧）中制得的交聯(lián)凝膠注入冷凍盒中，待其自動(dòng)流平溢出，然后用刮刀 沿冷凍盒上沿將其刮平，之后將冷凍盒進(jìn)行冷凍定型化，冷凍定型之后的交聯(lián)凝膠脫冷凍 盒后迅速放入冷凍干燥機(jī)干燥室中，冷凍干燥30h。然后壓片、切片、滅菌后得到可降解生物 復(fù)合止血膜。 陽(yáng)0郎]實(shí)施例3
[0059] (1)稱取13g透明質(zhì)酸鋼，加入到盛有720mL純化水的容器中，在攬拌條件下使之 完全溶解，配制得到18g/L的透明質(zhì)酸鋼溶液，用0.Imol/L的鹽酸溶液將配制好的透明質(zhì) 酸鋼溶液抑值調(diào)節(jié)為5. 0。 W60] 0)稱取10姐DC·肥L與畑S的混合物加入到步驟（1)中配制得到的透明質(zhì)酸鋼 溶液中，攬拌使之充分溶解，制得交聯(lián)前體溶液。
[0061] (3)稱取12g簇甲基殼聚糖，加入到盛有750mL純化水的容器中，在攬拌條件下使 之完全溶解，配制得到16g/L的簇甲基殼聚糖溶液。 陽(yáng)06引（4)將步驟（3)中配置好的簇甲基殼聚糖溶液加入步驟似中制得的交聯(lián)前體溶 液中，在15°C溫度下攬拌40min，使之均勻，然后靜置16h，使之充分交聯(lián)，得到交聯(lián)凝膠。 [006引 妨量取100血純化水加入到步驟（4)中得到的交聯(lián)凝膠中進(jìn)行洗涂，浸泡15min 進(jìn)行抽濾，洗涂3次。 W64] (6)將步驟妨中制得的交聯(lián)凝膠注入冷凍盒中，待其自動(dòng)流平溢出，然后用刮刀 沿冷凍盒上沿將其刮平，之后將冷凍盒進(jìn)行冷凍定型化，冷凍定型之后的交聯(lián)凝膠脫冷凍 盒后迅速放入冷凍干燥機(jī)干燥室中，冷凍干燥24h。然后壓片、切片、滅菌后得到可降解生物 復(fù)合止血膜。 W65] 實(shí)施例4
[0066] (1)稱取8.Ig透明質(zhì)酸鋼，加入到盛有450mL純化水的容器中，在攬拌條件下使之 完全溶解，配制得到18g/L的透明質(zhì)酸鋼溶液，用0.Imol/L的鹽酸溶液將配制好的透明質(zhì) 酸鋼溶液抑值調(diào)節(jié)為5. 0。
[0067] 似稱取3姐DC·肥L加入到步驟（1)中配制得到的透明質(zhì)酸鋼溶液中，攬拌使之 充分溶解，制得交聯(lián)前體溶液。
[0068] (3)稱取6g簇甲基殼聚糖，加入到盛有300mL純化水的容器中，在攬拌條件下使之 完全溶解，配制得到20g/L的簇甲基殼聚糖溶液。
[0069] (4)將步驟（3)中配置好的簇甲基殼聚糖溶液加入步驟（2)中制得的交聯(lián)前體溶 液中，在30°C溫度下攬拌15min，使之均勻，然后靜置13h，使之充分交聯(lián)，可得到交聯(lián)凝膠。
[0070] (5)量取60mL純化水加入到步驟（4)中得到的交聯(lián)凝膠中進(jìn)行洗涂，浸泡15min 進(jìn)行抽濾，洗涂4次。
[00川 （6)將步驟妨中制得的交聯(lián)凝膠注入冷凍盒中，待其自動(dòng)流平溢出，然后用刮刀 沿冷凍盒上沿將其刮平，之后將冷凍盒進(jìn)行冷凍定型化，冷凍定型之后的交聯(lián)凝膠脫冷凍 盒后迅速放入冷凍干燥機(jī)干燥室中，冷凍干燥35h。然后壓片、切片、滅菌后得到可降解生物 復(fù)合止血膜。 陽(yáng)0巧實(shí)施例5
[0073] 生物可降解止血材料體外降解試驗(yàn)
[0074] 對(duì)實(shí)施例1中制得可降解生物復(fù)合止血膜分別置于均含有溶菌酶的緩沖鹽、純化 水和質(zhì)量百分濃度為0. 9%的生理鹽水中，得到1周、2周和3周的降解數(shù)據(jù)，如下表1~3 所示。 陽(yáng)07引其中，緩沖鹽為抑值7. 4、濃度0.Imol/L的憐酸鹽緩沖溶液。
[0076] 表1:實(shí)施例1制得的可降解生物復(fù)合止血膜的1周降解數(shù)據(jù)
[0077]
陽(yáng)07引表2 :實(shí)施例1制得的可降解生物復(fù)合止血膜的2周降解數(shù)據(jù) '
[0079]

陽(yáng)080] 表3 :實(shí)施例1制得的可降解生物復(fù)合止血膜的3周降解數(shù)據(jù) '
[0081]
[00間由表1~表3可W看出，實(shí)施例1中制得可降解生物復(fù)合止血膜能夠在緩沖鹽、純 化水和質(zhì)量百分濃度為0.9%的生理鹽水中被降解。并且隨著時(shí)間的增加其降解量均增多， 實(shí)施例1中制得可降解生物復(fù)合止血膜在3周后大部分被降解，此現(xiàn)象可避免二次手術(shù)給 病人帶來(lái)的痛苦，減少感染機(jī)率，運(yùn)在臨床上具有重大意義。
[0083] W上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并 不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可W做出若干變形和改進(jìn)，運(yùn)些都屬于本發(fā)明的保 護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)W所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： 配制含有透明質(zhì)酸鈉和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽的交聯(lián)前體 溶液； 將羧甲基殼聚糖溶液加入到所述交聯(lián)前體溶液中，l〇°C~40°C下攪拌混勻后靜置使得 充分交聯(lián)，得到交聯(lián)凝膠；以及 采用洗滌液將所述交聯(lián)凝膠洗滌干凈后定型，接著將定型后的所述交聯(lián)凝膠干燥，得 到可降解生物復(fù)合止血膜。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián) 前體溶液中，所述透明質(zhì)酸鈉的濃度為15g/L~25g/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基） 碳酰二亞胺鹽酸鹽的濃度為5g/L~20g/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián) 前體溶液中還含有的N-羥基琥珀酰亞胺； 所述交聯(lián)前體溶液中，所述N-羥基琥珀酰亞胺與所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基） 碳酰二亞胺鹽酸鹽的質(zhì)量比為1:1~3。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述配制 含有透明質(zhì)酸鈉和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽的交聯(lián)前體溶液的操 作為：將1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽加入到pH為4. 5~5. 5的透明 質(zhì)酸鈉溶液中，充分?jǐn)嚢柚敝了?-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽完全 溶解，得到所述交聯(lián)前體溶液。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述羧甲 基殼聚糖溶液的濃度為15g/L~25g/L。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述將羧 甲基殼聚糖溶液加入到所述交聯(lián)前體溶液中的操作中，所述羧甲基殼聚糖溶液與所述交聯(lián) 前體溶液的體積比為1 :1~3。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述采用 洗滌液將所述交聯(lián)凝膠洗滌干凈后定型的操作中，所述洗滌液為純化水或濃度為0. 5mol/ L~3mol/L的氯化鈉溶液，所述洗滌的操作為：將所述洗滌液加入到所述交聯(lián)凝膠中，充分 浸泡后抽濾，重復(fù)洗滌2次~5次。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述采用 洗滌液將所述交聯(lián)凝膠洗滌干凈后定型的操作中，所述定型的操作為：將洗滌干凈的所述 交聯(lián)凝膠攪拌均勻后注入深度為5mm~15mm冷凍盒中，待所述交聯(lián)凝膠自動(dòng)流平溢出后沿 所述冷凍盒的上沿刮平，接著在-10~-30°C下冷凍定型3h~6h。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法，其特征在于，所述將定 型后的所述交聯(lián)凝膠干燥的操作中，所述干燥為在-20~5°C下冷凍干燥24h~35h。10. -種可降解生物復(fù)合止血膜，其特征在于，采用如權(quán)利要求1~9中任一項(xiàng)所述的 可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法制得。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種可降解生物復(fù)合止血膜及其制備方法，制備方法包括如下步驟：配制含有透明質(zhì)酸鈉和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽的交聯(lián)前體溶液；將羧甲基殼聚糖溶液加入到所述交聯(lián)前體溶液中，10℃～40℃下攪拌混勻后靜置使得充分交聯(lián)，得到交聯(lián)凝膠；以及采用洗滌液將所述交聯(lián)凝膠洗滌干凈后定型，接著將定型后的所述交聯(lián)凝膠干燥，得到可降解生物復(fù)合止血膜。這種可降解生物復(fù)合止血膜的制備方法制得的可降解生物復(fù)合止血膜中的透明質(zhì)酸鈉通過(guò)交聯(lián)，相對(duì)于傳統(tǒng)的材料為未交聯(lián)的透明質(zhì)酸鈉的止血膜，能夠在動(dòng)物組織中較長(zhǎng)時(shí)間殘留。
【IPC分類】A61L26/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105381501
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510934417
【發(fā)明人】李紹霞, 陳杰, 李家禎, 羅兆坤, 王婷婷, 劉玉姣
【申請(qǐng)人】日照天一生物醫(yī)療科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年3月9日
【申請(qǐng)日】2015年12月15日