生物流體中細(xì)菌的檢測(cè)的制作方法
【專利說(shuō)明】生物流體中細(xì)菌的檢測(cè)
[00011 本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2012年4月20日、申請(qǐng)?zhí)枮?01210118926.1、發(fā)明名稱為"生物 流體中細(xì)菌的檢測(cè)"的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 通常將血液加工例如分離成成分，得到各種有價(jià)值的產(chǎn)品，例如輸血產(chǎn)品?？梢栽?加工過(guò)程中匯集血液成分或產(chǎn)品，例如血沉棕黃層和血小板，例如，可以在作為輸血產(chǎn)品給 予前匯集4-6個(gè)單位的血小板濃縮物。另外，可以在給予前貯存在封閉系統(tǒng)中（例如不使成 分暴露于外部環(huán)境)加工的血液成分。例如，可以將紅細(xì)胞貯存幾周，并且可以將血小板貯 存幾天(例如根據(jù)目前的美國(guó)實(shí)踐5天）。
[0004] 貯存的和/或未貯存的成分可能包括不期望的材料例如細(xì)菌。細(xì)菌可以在血液采 集(包括采血樣)和/或貯存過(guò)程中污染血液或血液成分。細(xì)菌污染的一個(gè)來(lái)源可以是血液 捐獻(xiàn)者皮膚，其可能包含一種或多種種類的細(xì)菌。由于在靜脈穿刺前擦拭捐獻(xiàn)者皮膚(例如 用酒精)可能不足以確保無(wú)菌，所以細(xì)菌可以進(jìn)入采血容器并且細(xì)菌可以在貯存血液或血 液成分的同時(shí)再生。另外，靜脈采血針頭在該靜脈采血針頭插入捐獻(xiàn)者時(shí)可能切下一圓片 皮膚，使得包含細(xì)菌的皮片與血液一起進(jìn)入采血容器。
[0005] 污染的其他來(lái)源包括捐獻(xiàn)者血液、環(huán)境(包括空氣和環(huán)境中的設(shè)備）和靜脈采血 者。污染可以在捐獻(xiàn)血液?jiǎn)挝缓?或得到血樣的同時(shí)發(fā)生。
[0006] 由于將一些血樣成分(例如血小板)典型地貯存在環(huán)境溫度，所以污染問(wèn)題可能被 放大，因?yàn)樵S多種類的細(xì)菌在環(huán)境溫度更快速地再生。
[0007] 污染的血液產(chǎn)品、尤其是細(xì)菌污染的血液產(chǎn)品對(duì)接觸或接受這些產(chǎn)品的那些人形 成了潛在的健康風(fēng)險(xiǎn)。例如，給予存在細(xì)菌污染的輸血產(chǎn)品可以對(duì)接受者產(chǎn)生不良反應(yīng)，并 且在美國(guó)，給予具有高水平細(xì)菌污染的血小板每年?duì)窟B許多嚴(yán)重的疾病或死亡病例。
[0008] 用于檢測(cè)細(xì)菌的一些現(xiàn)存的技術(shù)是耗費(fèi)勞動(dòng)且耗時(shí)的并且可能需要昂貴的設(shè)備。 一些技術(shù)可能使得采樣受限、得到不精確的結(jié)果和/或難以檢測(cè)一些種類的細(xì)菌。另外，這 些技術(shù)可能將污染從環(huán)境中導(dǎo)入樣品。
[0009] 本發(fā)明提供了用于對(duì)至少一些現(xiàn)有技術(shù)缺陷的改善。本發(fā)明的這些和其他優(yōu)點(diǎn)從 如下舉出的描述中顯而易見(jiàn)。
[0010] 發(fā)明概述
[0011] 在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了用于檢測(cè)生物流體例如血液和血液產(chǎn)品中細(xì)菌的方 法，該方法包括使可能包含細(xì)菌的生物流體接觸減少血細(xì)胞呼吸的清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn) 劑;和在一定時(shí)間期限內(nèi)，測(cè)定和/或檢測(cè)容器中的葡萄糖水平，所述容器包含所述的生物 流體、清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑。
[0012] 本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了檢測(cè)生物流體例如血液和血液產(chǎn)品中的細(xì)菌的 系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含讀取和/或測(cè)定裝置，和包含適合于裝載生物流體的容器的生物流體采樣 裝置，該容器包含入口并且包含用于減少血細(xì)胞呼吸的清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑。
[0013] 由于血細(xì)胞呼吸(使用葡萄糖作為其代謝的底物)在清潔劑的存在下減少，且由于 細(xì)菌在其代謝周期過(guò)程中利用葡萄糖（需氧菌在糖酵解過(guò)程中利用葡萄糖、厭氧菌在發(fā)酵 過(guò)程中利用葡萄糖），所以如果生物流體中存在細(xì)菌，則細(xì)菌生長(zhǎng)將在生長(zhǎng)促進(jìn)劑的存在下 得到促進(jìn)，且葡萄糖的水平將隨時(shí)間減少。因此，葡萄糖的水平改變用作細(xì)菌檢測(cè)的替代標(biāo) 記。
【附圖說(shuō)明】
[0014] 圖1顯示根據(jù)本發(fā)明的細(xì)菌檢測(cè)系統(tǒng)的實(shí)施方案，包含生物流體采樣裝置，其包含 適合于裝載生物流體的容器，該容器包含葡萄糖采樣入口并且包含用于減少血細(xì)胞呼吸的 清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑和葡萄糖讀取和/或葡萄糖測(cè)定裝置。
[0015] 圖2顯示根據(jù)本發(fā)明的細(xì)菌檢測(cè)系統(tǒng)的另一個(gè)實(shí)施方案，包含葡萄糖讀取和/或葡 萄糖測(cè)定裝置和生物流體加工系統(tǒng)，其包含多個(gè)生物流體容器和如圖1中所示的生物采樣 裝置。
[0016] 圖3顯示根據(jù)本發(fā)明的細(xì)菌檢測(cè)系統(tǒng)的另一個(gè)實(shí)施方案，包含葡萄糖讀取和/或葡 萄糖測(cè)定裝置和生物流體加工系統(tǒng)，其包含多個(gè)生物流體容器、排氣口、白細(xì)胞耗盡濾器和 如圖1中所示的生物采樣裝置。
[0017]發(fā)明詳述
[0018]有利的是，本發(fā)明不僅能夠檢測(cè)需氧菌，而且能夠檢測(cè)專門(mén)的厭氧菌并且能夠檢 測(cè)對(duì)于其代謝不使用氧的兼性厭氧菌。
[0019] 在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了用于檢測(cè)生物流體中的細(xì)菌的方法，該方法包括：（a) 將生物流體(該生物流體可能包含細(xì)菌)置于容器中，該容器包括（i)用于減少血細(xì)胞呼吸 的清潔劑;和（ii)細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑;和(b)在一定時(shí)間期限內(nèi)，測(cè)定和/或檢測(cè)容器內(nèi)生物流 體中的葡萄糖水平，其中在該時(shí)間期限內(nèi)葡萄糖水平的下降表示存在細(xì)菌。
[0020] 該方法的實(shí)施方案包括測(cè)定和/或檢測(cè)容器內(nèi)的第一葡萄糖水平，并且在測(cè)定和/ 或檢測(cè)容器內(nèi)第一葡萄糖水平的約4一約15小時(shí)內(nèi)，測(cè)定和/或檢測(cè)容器內(nèi)的第二葡萄糖水 平;或包括在一定時(shí)間期限內(nèi)，連續(xù)測(cè)定和/或檢測(cè)容器內(nèi)PC中的葡萄糖水平。
[0021 ]在一個(gè)實(shí)施方案中，在最初從受試者得到生物流體的約24小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi)將加 工的生物流體置于容器中。
[0022] 或者或另外，該方法的實(shí)施方案包括從受試者采集生物流體，并且在采集生物流 體的約24小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi)，使部分生物流體進(jìn)入容器，其中使該部分生物流體保持與清 潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑接觸，并且在適合的時(shí)間期限后，在一定時(shí)間期限內(nèi)，測(cè)定和/或檢 測(cè)容器中的葡萄糖水平。示例地，可以采集1單位的血液并且加工以便將血液分離成一種或 多種成分，包括，例如，PC。在采血的約24小時(shí)內(nèi)，可以使部分分離的PC進(jìn)入容器，其中使該 部分PC保持與清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑接觸，并且在適合的時(shí)間期限后，在一定時(shí)間期限 內(nèi)，測(cè)定和/或檢測(cè)容器中的葡萄糖水平。
[0023] 該方法的實(shí)施方案可以包括將清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑置于容器中，然后將生物 流體置于容器中，例如，該方法可以包括將生物流體置于采樣裝置容器中，該容器包含葡萄 糖采樣入口并且包含用于減少血細(xì)胞呼吸的清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑。
[0024] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，生物流體包含含有血小板的流體、例如富含血小板的血漿 或血小板濃縮物;包含紅細(xì)胞的流體例如白細(xì)胞或濃集紅細(xì)胞;包含臍帶血、干細(xì)胞的流體 或細(xì)胞培養(yǎng)物。在一些實(shí)施方案中，生物流體包含白細(xì)胞耗盡的流體。
[0025] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了用于檢測(cè)生物流體中細(xì)菌的系統(tǒng)，包括：（a)生物流 體采樣裝置，其包含適合于包含生物流體的容器，該容器包含入口（優(yōu)選葡萄糖采樣入口）， 該容器包含(i)有效量的用于減少血細(xì)胞呼吸的清潔劑;和（ii)有效量的細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑， 該系統(tǒng)還包含：（b)葡萄糖讀取裝置和/或葡萄糖測(cè)定裝置，該裝置還包含葡萄糖采樣裝置 (例如試劑墊和/或測(cè)試條），其中讀取和/或測(cè)定裝置適合于在一定時(shí)間期限內(nèi)測(cè)定和/或 檢測(cè)生物流體內(nèi)的第一葡萄糖水平和生物流體內(nèi)的第二葡萄糖水平，其中該時(shí)間期限內(nèi)葡 萄糖水平的下降表示存在細(xì)菌。
[0026] 典型地，適合于包含生物流體的生物流體采樣裝置容器是軟包裝容器。
[0027] 在細(xì)菌檢測(cè)系統(tǒng)的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該系統(tǒng)包含生物流體加工系統(tǒng)，該系 統(tǒng)包含多個(gè)容器，例如用于接收和/或采集生物流體的第一個(gè)容器(例如"源容器"）和至少 第二個(gè)用于接收部分生物流體的容器(例如作為生物流體采樣裝置的組成部分，其也是所 述系統(tǒng)的組成部分），其中第二個(gè)容器包含清潔劑和細(xì)菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑;和葡萄糖讀取和/或 測(cè)定裝置，其檢測(cè)該時(shí)間期限內(nèi)生物流體中的葡萄糖水平。生物流體加工系統(tǒng)典型地包括 多個(gè)用于提供容器之間流體溝通的導(dǎo)管并且可以包括另外的部件，例如一個(gè)或多個(gè)另外的 容器(例如用于另外的溶液和/或用于包含加工的生物流體成分)和/或過(guò)濾裝置(例如白細(xì) 胞耗盡過(guò)濾裝置)和/或一個(gè)或多個(gè)排氣口例如氣體入口和/或氣體出口。典型地，該生物流 體加工系統(tǒng)還包括一個(gè)或多個(gè)流量控制裝置，例如夾子、轉(zhuǎn)移路徑截止器、止回閥和/或可 旋轉(zhuǎn)閥。
[0028] 該細(xì)菌檢測(cè)系統(tǒng)和/或生物流體加工系統(tǒng)的實(shí)施方案優(yōu)選包括可拆卸的（或可連 接和可拆卸的）生物流體采樣裝置