一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 鹽酸胺碘酮（Amiodarone)是一種常用的抗心律失常藥物，廣泛用于室性早搏、室 性心動(dòng)過速(包括室速、室顫、室撲)、室上性心動(dòng)過速、房顫、房撲等各類心律失常，相對(duì)于 其他抗心律失常藥物，更適合用于心肺復(fù)蘇、心梗后心律失常及心衰等病理情況下應(yīng)用。但 胺碘酮存在一些缺陷，例如吸收慢，半衰期長(zhǎng)，個(gè)體差異性大，且由于胺碘酮高脂溶性，導(dǎo) 致藥物給藥后血漿中藥物濃度下降較快(從血漿中再分布于組織中)，并且更多的分布于肝 臟、肺、脂肪、皮膚及其他非心臟組織，因此起始治療需要負(fù)荷劑量，起效時(shí)間很長(zhǎng)(胺碘酮 治療陣發(fā)性房顫平均起效時(shí)間需6~8小時(shí))，并且使用時(shí)還需要密切關(guān)注其毒副作用，包括： 低血壓、負(fù)性肌力作用、甲狀腺毒性、肺纖維化、肝毒性、皮膚藍(lán)灰色改變、負(fù)荷劑量時(shí)消化 道不良反應(yīng)、神經(jīng)系統(tǒng)共濟(jì)失調(diào)以及與影響如地高辛、華法令等藥物效應(yīng)等。
[0003] 脂質(zhì)體（liposome)系指將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層形成的薄膜中間所制成的 超微型球狀藥物載體制劑，由于其結(jié)構(gòu)類似生物膜，可包封水溶性和脂溶性藥物，具有減少 藥物劑量，降低毒性，延緩釋放，改變藥物體內(nèi)分布，并具有靶向治療效應(yīng)，提高藥物療效， 因此我們研制出"胺碘酮脂質(zhì)體"，依據(jù)目前研宄結(jié)果顯示能明顯提高心臟組織，包括心肌 梗死、射頻消融、手術(shù)損傷等病理狀態(tài)下局部胺碘酮藥物濃度，并減少非心臟組織的藥物濃 度；藥代動(dòng)力學(xué)研宄也顯示靜脈注射胺碘酮脂質(zhì)體，明顯減緩血漿中胺碘酮藥物清除速度， 延緩了胺碘酮組織再分布過程。從而在臨床使用中可以減低藥物劑量，降低藥物毒副作用， 并且具有心臟組織靶向性，將可以更廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療心肌梗死后心律失常、射頻消 融手術(shù)后預(yù)防復(fù)發(fā)、各類快速性心律失常等領(lǐng)域，相對(duì)于普通胺碘酮藥物具有顯著優(yōu)勢(shì)。
[0004] 相關(guān)研宄證實(shí)胺碘酮脂質(zhì)體相較于普通胺碘酮藥物能明顯減少心肌梗死后及再 灌注引起的致命性心律失常，并且明顯減少胺碘酮對(duì)心臟的負(fù)性肌力作用和低血壓反應(yīng)。 同時(shí)研宄也顯示，該制備的胺碘酮脂質(zhì)體可靶向聚集在心臟射頻消融損傷部位，局部濃度 較普通胺碘酮藥物組顯著提高，在臨床中具有進(jìn)一步減少射頻消融后心律失常復(fù)發(fā)率的潛 在效能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法及其應(yīng)用，以解決上述背景 技術(shù)中提出的問題。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案： 一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法，具體制備步驟如下：（1)將蛋黃卵磷脂、膽固醇和鹽酸 胺碘酮按照（40~41) : (5~6) :1的質(zhì)量比倒入圓底燒瓶中混合，并倒入20ml氯仿進(jìn)行 充分溶解；（2)將圓底燒瓶放置在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在60° C水浴下蒸發(fā)干燥，得到的干 膜加去離子水水化；（3)通過超聲波進(jìn)行超聲降解30min得到混懸液；（4)將混懸液通過 〇· 45 μ m微孔膜過濾去除游離ADHC晶體，即可得到純胺碘酮脂質(zhì)體。
[0007] 作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：制備的胺碘酮脂質(zhì)體應(yīng)用于預(yù)防和治療心肌梗死后心 律失常。
[0008] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明方法得到的胺碘酮脂質(zhì)體應(yīng)用于 預(yù)防和治療心肌梗死后心律失常，降低射頻消融術(shù)后心律失常(如房顫，室性心律失常）的 復(fù)發(fā)率，縮短治療心律失常的復(fù)律時(shí)間（如室上速、陣發(fā)性房顫，室速等)，并減少胺碘酮毒 副作用（如甲狀腺毒性，低血壓反應(yīng))。
【附圖說明】
[0009] 圖1為電鏡下觀察胺碘酮脂質(zhì)體的電鏡圖。
[0010] 圖2為胺碘酮脂質(zhì)體的穩(wěn)定性測(cè)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)圖。
[0011] 圖3為大鼠心臟消融后胺碘酮的組織分布圖。
[0012] 圖4為IR-775脂質(zhì)體的心臟熒光成像圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完 整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；?本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他 實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0014] -種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法，具體制備步驟如下：（1)將蛋黃卵磷脂、膽固醇和 鹽酸胺碘酮按照40. 48 :5. 45 :1的質(zhì)量比倒入圓底燒瓶中混合，并倒入20ml氯仿進(jìn)行充 分溶解；（2)將圓底燒瓶放置在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在60° C水浴下蒸發(fā)干燥，得到的干 膜加去離子水水化；（3)通過超聲波進(jìn)行超聲降解30min得到混懸液；（4)將混懸液通過 〇· 45 μ m微孔膜過濾去除游離ADHC晶體，即可得到純胺碘酮脂質(zhì)體。
[0015] 在這個(gè)最優(yōu)化的條件下，測(cè)量的各項(xiàng)胺碘酮脂質(zhì)體質(zhì)量參數(shù)： 包封率EE值是99. 49 ± 13. 31% ; 粒度儀下粒徑是99. 90 ±0. 36 nm ; PI :0. 224±0. 010 ; Zeta 電位：35· 07±10. 86 mV ; 如圖1為電鏡下觀察胺碘酮脂質(zhì)體。
[0016] 如圖2為胺碘酮脂質(zhì)體的穩(wěn)定性測(cè)驗(yàn)結(jié)果：置于4°C環(huán)境下胺碘酮脂質(zhì)體ADHC-L 的平均粒徑和zeta電位變化。
[0017] 從圖2中可以得知制備的胺碘酮脂質(zhì)體很穩(wěn)定。
[0018] 得到的胺碘酮脂質(zhì)體顯示在射頻消融損傷的心臟組織也具有明顯的心臟靶向效 應(yīng)，大鼠體內(nèi)組織分布實(shí)驗(yàn)顯示發(fā)生消融損傷的心肌組織胺碘酮濃度明顯升高，心臟熒光 成像也提示發(fā)生消融損傷的心肌組織熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，同時(shí)藥代動(dòng)力學(xué)顯示胺碘酮脂質(zhì) 體與不同劑量的游離胺碘酮相比，明顯提高了胺碘酮在體內(nèi)的藥時(shí)曲線下面積，延長(zhǎng)了其 在體內(nèi)的滯留時(shí)間，可以有效降低胺碘酮的臨床使用劑量，減輕其毒副作用。
[0019] 在藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)中，隨機(jī)將大鼠分成三組，第一組為游離胺碘酮對(duì)照組（3 mg/ kg);第二組為游離胺碘酮對(duì)照組（9 mg/kg);第三組為脂質(zhì)體組（3 mg/kg)。給藥后于不同 時(shí)間點(diǎn)各收集500 μL血液樣品置于肝素鈉化的離心管，測(cè)定血漿中的胺碘酮含量，再通過 藥動(dòng)學(xué)軟件計(jì)算不同組的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
[0020] 各組的藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表：
由上表所示，脂質(zhì)體組與對(duì)照組（3 mg/kg和9 mg/kg)相比，其體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特性均有 顯著的改善，明顯提高了胺碘酮在體內(nèi)的藥時(shí)曲線下面積，延長(zhǎng)了其在體內(nèi)的滯留時(shí)間，可 以有效降低胺碘酮的臨床使用劑量，減輕其毒副作用。
[0021] 在大鼠體內(nèi)組織分布實(shí)驗(yàn)中，具體步驟如下：（1)隨機(jī)將大鼠分成四組，第一組心 臟消融后，對(duì)照組（3 mg/kg)靜脈給藥；第二組心臟消融后，脂質(zhì)體組（3 mg/kg)靜脈給藥； 第三組開胸不消融，對(duì)照組（3 mg/kg)靜脈給藥；第四組開胸不消融，脂質(zhì)體組（3 mg/kg)靜 脈給藥；（2)300g左右大鼠常規(guī)麻醉，氣管插管，人工輔助呼吸；于第四肋間隙開胸，暴露大 鼠心臟，用一個(gè)金屬鑷子托起，再用專門的射頻消融導(dǎo)管，消融部位為左心室游離壁（前外 側(cè)面)，消融能量設(shè)置：12W，15秒鐘，每只大鼠消融4個(gè)點(diǎn)，形成一條直線；（3)大鼠于藥物 靜脈注射后20 min處死，取出各組織（心，肺，肝，脾，腎)，計(jì)算各組實(shí)驗(yàn)組織中胺碘酮藥物 含量。
[0022] 結(jié)果顯示，胺碘酮脂質(zhì)體在射頻消融后其心臟組織中的藥物含量顯著高于對(duì)照組 游離胺碘酮，是其3. 96倍。
[0023] 如圖3是大鼠心臟消融后胺碘酮的組織分布。
[0024] 在大鼠心臟熒光成像實(shí)驗(yàn)中，具體步驟如下：按照胺碘酮脂質(zhì)體的制備工藝和處 方，等量制備載IR-775的熒光脂質(zhì)體；隨機(jī)將大鼠分成三組，其中第一組作為對(duì)照組注射 胺碘酮脂質(zhì)體僅開腔，不消融；第二組作為實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行心臟消融手術(shù)后注射胺碘酮脂質(zhì)體， 第三組作為空白組注射等量的生理鹽水；注射給藥后20 min取出大鼠心臟，放置于裝備有 熒光濾鏡(激發(fā)波長(zhǎng)770 nm，發(fā)射波長(zhǎng)830 nm)的柯達(dá)多光譜熒光活體成像系統(tǒng)，分別對(duì)心 臟進(jìn)行X-ray及焚光拍攝。
[0025] 如圖4為IR-775脂質(zhì)體的心臟熒光成像，結(jié)果顯示發(fā)生消融損傷的心肌組織熒光 強(qiáng)度明顯增強(qiáng)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，具體制備步驟如下：（1)將蛋黃卵磷 月旨、膽固醇和鹽酸胺碘酮按照（40~41): (5~6):1的質(zhì)量比倒入圓底燒瓶中混合，并倒入 20ml氯仿進(jìn)行充分溶解；（2)將圓底燒瓶放置在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在60° C水浴下蒸發(fā) 干燥，得到的干膜加去離子水水化；（3)通過超聲波進(jìn)行超聲降解30min得到混懸液；（4) 將混懸液通過0. 45 y m微孔膜過濾去除游離ADHC晶體，即可得到純胺碘酮脂質(zhì)體。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，制備的胺碘酮脂質(zhì) 體應(yīng)用于預(yù)防和治療心肌梗死后心律失常。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種胺碘酮脂質(zhì)體的制備方法及其應(yīng)用，將蛋黃卵磷脂、膽固醇和鹽酸胺碘酮按照40.48：5.45：1的質(zhì)量比倒入圓底燒瓶中混合，并倒入20ml氯仿進(jìn)行充分溶解，然后放置在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在60°C水浴下蒸發(fā)干燥，得到的干膜加去離子水水化，通過超聲波進(jìn)行超聲降解30min得到混懸液，將混懸液通過0.45μm微孔膜過濾去除游離ADHC晶體，即可得到純胺碘酮脂質(zhì)體。本發(fā)明方法得到的胺碘酮脂質(zhì)體顯示在射頻消融損傷的心臟組織也具有明顯的心臟靶向效應(yīng)，發(fā)生消融損傷的心肌組織胺碘酮濃度明顯升高，熒光標(biāo)記也提示發(fā)生消融損傷的心肌組織熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，延長(zhǎng)胺碘酮在體內(nèi)的滯留時(shí)間，有效降低胺碘酮的臨床使用劑量，減輕其毒副作用。
【IPC分類】A61K9/127, A61K31/343, A61P9/06
【公開號(hào)】CN104983681
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510314551
【發(fā)明人】諸葛縈, 高峰, 汪芳, 謝木青
【申請(qǐng)人】上海市第一人民醫(yī)院
【公開日】2015年10月21日
【申請(qǐng)日】2015年6月10日