現(xiàn)不同的Rici時，其獨立地選自上述基團； 或者 其中所述多胺衍生物為支鏈的多亞烷基亞胺衍生物，所述支鏈的多亞烷基亞胺衍生物 包含式（11)、式（12)和式（13)中每個所示的單元： -[CH2-NR10-(CH2)J- (11) -[CH2-NR11-(CH2)J- (12)和 -(CH2)y-NR102 (13) 其中 Rltl和X如上所定義； Rn包含一個或多個選自式（11)、式（12)和式（13)的單兀； y為1至10的整數(shù)，其中在不同的（CH2)y基團之間，y的值可相同或不同；以及 其中每分子所述直鏈的多亞烷基亞胺或所述支鏈的多亞烷基亞胺的氮原子數(shù)目為12 至 100000。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項的用途，其中 所述多胺衍生物的每個所述羧化取代基包含下列部分中的任何一個或多個作為所述 疏水連接體：亞烷基、亞烯基、亞炔基、亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、亞芳基以及它們的組合；和/或 所述多胺的每個所述疏水取代基包含下列部分中的任何一個或多個：烷基、烯基、炔 基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基以及它們的組合。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的用途，其中所述多胺衍生物中羧化取代基與疏水取 代基的摩爾比在10 :1至〇. 1 :1的范圍內(nèi)，優(yōu)選在3 :1至0. 33 :1的范圍內(nèi)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項的用途，所述多胺衍生物為羧基烷基-烷基-多胺，其 中所述多胺衍生物的所述羧化取代基為具有6至40個碳原子的羧基烷基部分，并且所述多 胺衍生物的所述疏水取代基為烷基部分。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中所述烷基部分為具有至少2個碳原子、優(yōu)選具有6至 40個碳原子的烷基部分。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9中任一項的用途，其中所述羧基烷基-烷基-多胺的所有羧基 烷基部分均相同且所有烷基部分均相同，以及所述羧基烷基部分和所述烷基部分中碳原子 的總數(shù)為10至30,優(yōu)選為15至25。
11. 根據(jù)權(quán)利要求8至10中任一項的用途，其中所述羧基烷基-烷基-多胺基本上為 包含下式（6)所示的單元的直鏈的羧基烷基-烷基-多亞烷基亞胺： -[CH2-NR6-(CH2)J- (6) 其中 X為1至10的整數(shù)，其中在不同的（CH2)x基團之間，X的值可相同或不同， R6為氫、C^H&+1或ChUOOH，當(dāng)所述羧基烷基-烷基-多亞烷基亞胺中出現(xiàn)不同的R6 時，其獨立地選自上述基團， r為2至40的整數(shù)， s為4至40的整數(shù)； 或者 其中所述羧基烷基-烷基-多胺為支鏈的羧基烷基-烷基-多亞烷基亞胺，所述支鏈 的羧基烷基-烷基-多亞烷基亞胺包含式（7)、式（8)和式（9)中每個所示的單元： -[CH2-NR6-(CH2)J- (7) -[CH2-NR7-(CH2)J- (8)和 -(CH2)y-NR62 (9) 其中 R6、x、r以及s如上所定義； R7包含一個或多個選自式（7)、式（8)和式（9)的單兀；y為1至10的整數(shù)，其中在不同的（CH2)y基團之間，y的值可相同或不同；并且 其中每分子所述直鏈的羧基烷基-烷基-多亞烷基亞胺或所述支鏈的羧基烷基-烷 基-多亞烷基亞胺的氮原子數(shù)目為12至100000。
12. 根據(jù)權(quán)利要求8至11中任一項的用途，其中所述多胺的至少IOmol%、優(yōu)選25至 80mol%、更優(yōu)選30至60mol%的氨基被所述羧基烷基和所述烷基取代（取代度）。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項的用途，其中所述聚陰離子為核酸或蛋白質(zhì)。
14. 用于將聚陰離子轉(zhuǎn)染至細胞中的多胺衍生物，所述多胺衍生物包含： 多胺部分，所述多胺部分包含多個氨基； 多個羧化取代基，所述羧化取代基各自包含經(jīng)由疏水連接體與所述多胺部分的氨基結(jié) 合的羧基；以及 多個疏水取代基，所述疏水取代基各自與所述多胺部分的氨基結(jié)合； 所述疏水連接體具有3至20的logP，該IogP是對通過將所述連接體與所述多胺的羧 基以及氨基結(jié)合的鍵替換為與氫原子結(jié)合的鍵從所述連接體獲得的化合物測定的；以及 所述疏水取代基具有1. 5至20的logP，該IogP是對通過將所述疏水取代基與所述多 胺部分的氨基結(jié)合的鍵替換為與氫原子結(jié)合的鍵從所述疏水取代基獲得的化合物測定的。
15. 用于將聚陰離子轉(zhuǎn)染至細胞中的多胺衍生物，所述多胺包含： 多胺部分，所述多胺部分包含多個氨基； 多個羧化取代基，所述羧化取代基包含經(jīng)由疏水連接體與所述多胺部分的氨基結(jié)合的 羧基，其中每個所述羧化取代基包含6至40個碳原子，優(yōu)選6至20個碳原子，以及更優(yōu)選 8至16個碳原子，并且每個所述疏水連接體可包含1至3個選自0、N及S的雜原子；以及 多個疏水取代基，所述疏水取代基與所述多胺部分的氨基結(jié)合，其中每個所述疏水取 代基包含至少2個碳原子，優(yōu)選6至40個碳原子，并且在所述疏水取代基具有至少6個碳 原子的情況下可包含1至3個選自0、N及S的雜原子。
16. 多亞烷基亞胺衍生物，其在多亞烷基亞胺上具有一個或多個羧基烷基取代基以及 一個或多個疏水取代基，所述羧基烷基取代基包含6至40個碳原子，所述疏水取代基選自 具有至少2個碳原子、優(yōu)選6至40個碳原子的烴取代基，其中每個所述疏水取代基可為烷 基或者可包含烷基和/或每個所述疏水取代基可為芳基或者可包含芳基。
17. 羧基烷基-烷基-多胺，其具有一個或多個羧基烷基取代基以及一個或多個烷基取 代基，所述羧基烷基取代基包含6至40個碳原子。
18. 根據(jù)權(quán)利要求15或16的羧基烷基-烷基-多胺，其中所述羧基烷基-烷基-多胺 具有一種類型的羧基烷基部分以及一種類型的烷基部分，并且在該類型的羧基烷基部分和 該類型的烷基部分中碳原子的總數(shù)為10至30,優(yōu)選為15至25。
19. 核酸或蛋白質(zhì)與如前述任一項權(quán)利要求所限定的多胺衍生物的復(fù)合物。
20. -種試劑盒，包含： (i) 如權(quán)利要求1至18中任一項所限定的多胺衍生物， (ii)pH介于4至8之間的緩沖溶液，以及 (iii) 任選地，使用說明手冊。
21. 權(quán)利要求20的試劑盒，其中所述多胺衍生物以溶液的形式提供，并且其中所述 溶劑為選自乙醇、丙醇、1，2-二羥基丙烷或異丙醇的組的低級醇，或者為包含水以及33至 100 %的此類低級醇的混合物。
22. 權(quán)利要求20的試劑盒，其中所述多胺衍生物以干的形式，如以凍干的形式提供。
23. -種利用核酸或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染細胞的方法，其包括：將所述核酸或蛋白質(zhì)與如權(quán)利 要求1至18中任一項所限定的多胺衍生物例如在含水緩沖液中混合，以及利用在先前步驟 中得到的所述混合物處理所述細胞。
24. -種包含多個區(qū)室的容器，所述區(qū)室含有包含轉(zhuǎn)染劑的凍干組合物。
25. 根據(jù)權(quán)利要求24的容器，其中所述轉(zhuǎn)染劑為如權(quán)利要求1至18中任一項所限定的 多胺衍生物或者包含如權(quán)利要求1至18中任一項所限定的多胺衍生物，特別地所述轉(zhuǎn)染劑 為如權(quán)利要求8至12中任一項所限定的羧基烷基-烷基-多胺或者包含如權(quán)利要求8至 12中任一項所限定的羧基烷基-烷基-多胺；或者所述轉(zhuǎn)染劑為羥基烷基-烷基-多胺或 者包含羥基烷基-烷基-多胺。
【專利摘要】本發(fā)明提供多胺衍生物，多胺衍生物用于將聚陰離子轉(zhuǎn)染至細胞中的用途，以及利用聚陰離子轉(zhuǎn)染細胞的方法，該方法包括將所述聚陰離子與多胺衍生物例如在緩沖液中混合，以及利用在先前步驟中得到的混合物處理所述細胞。
【IPC分類】A61K47-48
【公開號】CN104703629
【申請?zhí)枴緾N201380052457
【發(fā)明人】斯特芬·潘茨納, 克里斯汀·賴因施, 沃克瑪·溫迪施, 克里斯蒂娜·德雷爾
【申請人】利普卡利克斯有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2013年10月2日
【公告號】CA2885223A1, EP2903651A1, US20150275220, WO2014056590A1