專利名稱：抑制酶中ice/ced－3蛋白酶類的新三環(huán)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類新的化合物，這類化合物是白介素-1β轉(zhuǎn)化酶和相關(guān)蛋白酶(“半胱氨酸蛋白酶的ICE/ced-3類”)的抑制劑。本發(fā)明還涉及含有這些化合物的藥物組合物和這些藥物組合物的用法。本發(fā)明化合物，藥物組合物和方法特別適用于抑制ICE/ced-3家族的蛋白酶活性，因此，它們益于被用作抗白介素-1(“IL-1”)介導(dǎo)的疾病，包括炎癥，自身免疫和神經(jīng)變性疾病，和抑制各種病態(tài)如心臟局部缺血損傷(如心肌梗塞)，腦局部缺血損傷(如中風(fēng))，和腎局部缺血損傷(如局部缺血腎病)中所不希望有的細(xì)胞程序死亡的藥劑。
白介素-1(“IL-1”)是主要的促炎和免疫調(diào)節(jié)蛋白，它刺激成纖維細(xì)胞分化和增生，前列腺素的產(chǎn)生，滑液細(xì)胞和軟骨細(xì)胞產(chǎn)生的膠原酶和磷脂酶，嗜堿細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞的失粒和嗜中性細(xì)胞的活化(Oppenheim，J.H.等人，《當(dāng)代免疫學(xué)(Immunology Today)》，745-56(1986))。因此，IL-1參與慢性和急性炎癥和自身免疫疾病的發(fā)病機(jī)理。作為炎癥響應(yīng)的一部分IL-1主要由外圍血液單核細(xì)胞產(chǎn)生(Mosely，B.S.等人，《美國國家科學(xué)院學(xué)報(bào)(Proc.Nat.Acad.Sci.)》，844572-4576(1987)；Lonnemann，G.等人，《歐洲免疫學(xué)雜志(Eur.J.Immunol.)》，191531-1536(1989))。
作為無生物活性前體IL-1β可被合成為proIL-1β。ProIL-1β被稱作白介素-1β轉(zhuǎn)化酶(“ICE”)的半胱氨酸蛋白酶在Asp-116和Ala-117之間斷裂，生成生物活性的C-末端片斷，該片斷可以在人體血清和滑液中找到(Sleath，P.R.等人，《生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.)》，26514526-14528(1992)；A.D.Howard等人，《免疫學(xué)雜志(J.Immunol.)》，1472964-2969(1991))。
ICE是主要存在于單核細(xì)胞中的半胱氨酸蛋白酶。它除了促進(jìn)IL-1β的促炎和免疫調(diào)節(jié)性能外，ICE，尤其是其同類物，還明顯參與細(xì)胞死亡或細(xì)胞程序死亡的調(diào)節(jié)(Yuan，J.等人，《細(xì)胞(Cell)》，75641-652(1993)；Miure，M.等人，《細(xì)胞(Cell)》，75653-660(1993)；Nett-Giordalisi，M.A.等人，《細(xì)胞生物化學(xué)雜志(J.Cell Biochem.)》，17B117(1993))。特別是ICE或ICE/ced-3同類物被認(rèn)為與神經(jīng)變性疾病如阿爾茨海默病和帕金森病中細(xì)胞程序死亡的調(diào)節(jié)有關(guān)(Marx，J.和M.Baringa，《科學(xué)(Science)》，259760-762(1993)；Gagliardini，V.等人，《科學(xué)(Science)》，263826-828(1994))。
因此，可以用ICE/ced-3類半胱氨酸蛋白酶抑制劑作為治療劑進(jìn)行治療的疾病包括傳染病如腦膜炎和輸卵管炎；敗血性休克，呼吸(道)疾病；炎癥如關(guān)節(jié)炎，膽管炎，結(jié)腸炎，腦炎，endocerolitis，肝炎，胰腺炎和再灌注(reperfusion)損傷，局部缺血病如心肌梗塞，中風(fēng)和局部缺血腎??；免疫系統(tǒng)疾病如超敏反應(yīng)；自身免疫疾病如多發(fā)性硬化；骨頭疾?。缓湍承┥窠?jīng)變性疾病如阿爾茨海默病和帕金森病。
ICE抑制劑代表用來控制上列疾病的一類化合物。ICE的肽和肽基抑制劑已有文獻(xiàn)記載。但這種抑制劑以其不希望的藥理性質(zhì)為典型特征，如口服吸收性差，穩(wěn)定性差及代謝快(Plattner，J.J.和D.W，Norbeck，《藥物開發(fā)技術(shù)(Drug Discovery Technologies)》，C.R.Clark和W.H.Moos，Eds.(Ellis Horwood，Chichester，England，1990)，pp.92-126)。這些不希望性質(zhì)阻礙了它們成為有效藥物。
因此，需要能夠有效抑制ICE/ced-3類蛋白酶活性的化合物，用作預(yù)防不希望有的細(xì)胞程序死亡和治療慢性和急性IL-1介導(dǎo)的疾病如炎癥，自身免疫疾病或神經(jīng)變性疾病的藥物。
本發(fā)明化合物具體為結(jié)構(gòu)上限為二肽的模擬物。這種模擬物顯示與其肽對應(yīng)物有關(guān)的性質(zhì)得到改進(jìn)，如改善了吸收性和代謝穩(wěn)定性，進(jìn)而提高了生物利用度。
本發(fā)明的一個(gè)方面是式1化合物及其可藥用鹽，
其中n是1或2；m是1或2；A是R2CO-，R3-O-CO-或R4SO2-；下式基團(tuán)
上面各式中R1是氫原子，烷基或苯基烷基；R2是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R3是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R4是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R5是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R6是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R7是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R8是選自天然或非天然氨基酸的氨基酸側(cè)鏈；B是氫原子，氘原子，烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基，(雜芳基)烷基或鹵代甲基；式-CH2XR9基團(tuán)，其中R9是苯基，取代的苯基，苯基烷基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；及X是氧或硫原子；式-CH2-O-CO-(芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-CO-(雜芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-PO-(R10)R11基團(tuán)，其中R10和R11分別選自烷基，環(huán)烷基，苯基，取代的苯基，苯基烷基和(取代的苯基)烷基。
本發(fā)明的另一方面是含有上述式1化合物及其可藥用載體的藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療自身免疫疾病的方法，包括給需要治療的患者施用有效量的上述藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面是治療炎癥的方法，包括給需要治療的患者施用有效量的上述藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面是治療神經(jīng)變性疾病的方法，包括給需要治療的患者施用有效量的上述藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面是預(yù)防患有局部缺血損傷相關(guān)疾病患者的局部缺血損傷的方法，包括給需要治療的患者施用有效量的上述藥物組合物。
本發(fā)明的一個(gè)方面是式1化合物及其可藥用鹽，
其中n是1或2；m是1或2；A是R2CO-，R3-O-CO-或R4SO2-；下式基團(tuán)
上面各式中R1是氫原子，烷基或苯基烷基；R2是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R3是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R4是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R5是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R6是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R7是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R8是選自天然或非天然氨基酸的氨基酸側(cè)鏈；B是氫原子，氘原子，烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基，(雜芳基)烷基或鹵代甲基；式-CH2XR9基團(tuán)，其中R9是苯基，取代的苯基，苯基烷基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；及X是氧或硫原子；式-CH2-O-CO-(芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-CO-(雜芳基)基團(tuán)；
式-CH2-O-PO-(R10)R11基團(tuán)，其中R10和R11分別選自烷基，環(huán)烷基，苯基，取代的苯基，苯基烷基和(取代的苯基)烷基。
上式中所用術(shù)語“烷基”指取代的或未取代的直鏈或支鏈C1-C8碳鏈，如甲基，乙基，叔丁基，異丙基，正辛基等。適宜的取代基包括羧基，保護(hù)的羧基，氨基，保護(hù)的氨基，鹵素，羥基，保護(hù)的羥基，硝基，氰基，一取代氨基，保護(hù)的一取代氨基，二取代氨基，C1-C7烷氧基，C1-C7?；珻1-C7酰氧基等。
術(shù)語“環(huán)烷基”指一-，二-或三個(gè)環(huán)的完全或部分飽和環(huán)。這種基團(tuán)的例子包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，金剛烷基，環(huán)辛基，順-或反萘烷，雙環(huán)[2.2.1]庚-2-烯，環(huán)己-1-烯基，環(huán)戊-1-烯基，1，4-環(huán)辛二烯基等。
術(shù)語“(環(huán)烷基)烷基”指上面定義的烷基被上述環(huán)烷基環(huán)之一取代。這種基團(tuán)的例子包括(環(huán)己基)甲基，3-(環(huán)丙基)-正丙基，5-(環(huán)戊基)己基，6-(金剛烷基)己基等。
術(shù)語“取代的苯基”指被一個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)下列基團(tuán)取代的苯基鹵素，羥基，保護(hù)的羥基，氰基，硝基，三氟甲基，C1-C7烷基，C1-C7烷氧基，C1-C7酰基，C1-C7酰氧基，羧基，保護(hù)的羧基，羧甲基，保護(hù)的羧甲基，羥甲基，保護(hù)的羥甲基，氨基，保護(hù)的氨基，(一取代)氨基，保護(hù)的(一取代)氨基，(二取代)氨基，氨基甲酰胺，保護(hù)的氨基甲酰胺，N-(C1-C6烷基)氨基甲酰胺，保護(hù)的N-(C1-C6烷基)氨基甲酰胺，N，N-二(C1-C6烷基)氨基甲酰胺，三氟甲基，N-((C1-C6烷基)磺酰基)氨基，N-(苯磺?；?氨基，或取代的或未取代的苯基，如聯(lián)苯基或萘基。
術(shù)語“取代的苯基”的例子包括一-或二(鹵代)苯基，如2，3或4-氯苯基，2，6-二氯苯基，2，5-二氯苯基，3，4-二氯苯基，2，3或4-溴苯基，3，4-二溴苯基，3-氯-4-氟苯基，2，3或4-氟苯基等；一-或二(羥基)苯基，如2，3或4-羥基苯基，2，4-二羥基苯基，它們保護(hù)的羥基衍生物等；硝基苯基，如2，3或4-硝基苯基；氰基苯基，如2，3或4-氰基苯基；一-或二(烷基)苯基，如2，3或4-甲基苯基，2，4-二甲基苯基，2，3，或4-(異丙基)苯基，或4-乙基苯基，2，3或4-(正丙基)苯基等；一-或二(烷氧基)苯基，如2，6-甲氧基苯基，2，3或4-(異丙氧基)苯基，2，3或4-(叔丁氧基)苯基，3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；2，3或4-三氟甲基苯基；一-或二羧基苯基或(保護(hù)的羧基)苯基，如2，3或4-羧基苯基或2，4-二(保護(hù)的羧基)苯基；一-或二(羥甲基)苯基或(保護(hù)的羥甲基)苯基，如2，3或4-(保護(hù)的羥甲基)苯基或3，4-二(羥甲基)苯基；一-或二(氨基甲基)苯基或(保護(hù)的氨基甲基)苯基，如2，3或4-(氨基甲基)苯基或2，4-(保護(hù)的氨基甲基)苯基；或一-或二(N-(甲磺酰氨基))苯基，如2，3或4-(N-(甲磺酰氨基))苯基。術(shù)語“取代的苯基”還代表被兩個(gè)不同的取代基取代的苯基，例如3-甲基-4-羥基苯基，3-氯-4-羥基苯基，2-甲氧基-4-溴苯基，4-乙基-2-羥基苯基，3-羥基-4-硝基苯基，2-羥基-4-氯苯基等。
術(shù)語“(取代的苯基)烷基”指一個(gè)上述取代的苯基連在一個(gè)上述烷基上。這種基團(tuán)的實(shí)例包括2-苯基-1-氯乙基，2-(4’-甲氧基苯基)乙基，4-(2’，6’-二羥基苯基)正己基，2-(5’-氰基-3’-甲氧基苯基)正戊基，3-(2’，6’-二甲基苯基)正丙基，4-氯-3-氨基芐基，6-(4’-甲氧基苯基)-3-羧基(正己基)，5-(4’-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)正戊基，5-苯基-3-氧-正戊-1-基，(4-羥基萘-2-基)甲基等。
術(shù)語“鹵代”和“鹵素”均指氟，氯，溴或碘基團(tuán)?？梢杂幸粋€(gè)或多個(gè)彼此相同或不同的鹵素。優(yōu)選的鹵素是氯和氟。
術(shù)語“芳基”指芳香族5和6員碳環(huán)。優(yōu)選6員環(huán)。
術(shù)語“雜芳基”指任意取代的有1-4個(gè)雜原子的5員或6員環(huán)，雜原子包括氧，硫和/或氮原子，尤其是氮原子，其既可以單獨(dú)也可以與硫或氧原子一起共同成為環(huán)原子。這些5員或6員環(huán)是完全不飽和的。
而且，上述任意取代的5員或6員環(huán)可以任意被稠合成一個(gè)芳族5員或6員環(huán)系。例如，上述環(huán)可以被任意與一個(gè)芳族5員或6員環(huán)系，如吡啶或三唑稠合，優(yōu)選與苯環(huán)稠合。
下列各環(huán)是術(shù)語“雜芳基”所指雜環(huán)基(不論取代不取代)的實(shí)例噻吩基，呋喃基，吡咯基，吡咯烷基，咪唑基，異噁唑基，三唑基，噻二唑基，噁二唑基，四唑基，噻三唑基，噁三唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噠嗪基，噁嗪基，三嗪基，噻二嗪基，四唑并，1，5-[b]噠嗪基和嘌呤基，以及苯并稠合衍生物，如苯并噁唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基和吲哚基。
上述任意取代的雜芳基環(huán)的取代基是1-3個(gè)鹵素，三鹵代甲基，氨基，保護(hù)的氨基，氨基鹽，一取代氨基，二取代氨基，羧基，保護(hù)的羧基，羧酸鹽，羥基，保護(hù)的羥基，羥基的鹽，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷硫基，烷基，取代的烷基，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，取代的(環(huán)烷基)烷基，苯基，取代的苯基，苯基烷基和(取代的苯基)烷基。雜芳基的取代基可以是上面定義的，也可以是三鹵代甲基形式的，如三氟甲基，三氯甲基，三溴甲基或三碘甲基。上面所說用在雜芳基環(huán)的取代基中的術(shù)語“低級(jí)烷氧基”指C1-C4烷氧基。類似地，“低級(jí)烷硫基”指C1-C4烷硫基。術(shù)語“取代的烷基”指上面定義的烷基被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代羥基，保護(hù)的羥基，氨基，保護(hù)的氨基，氰基，鹵素，三氟甲基，一取代氨基，二取代氨基，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷硫基，羧基，保護(hù)的羧基，或羧基，氨基和/或羥基鹽。上面所說用在雜芳基環(huán)的取代基中的術(shù)語“取代的(環(huán)烷基)烷基”和“取代的環(huán)烷基”被定義為被“取代的烷基”中所列取代基取代。術(shù)語“(一取代)氨基”指有一個(gè)下列取代基的氨基苯基，取代的苯基，烷基，取代的烷基，C1-C7?；?，C2-C7烯基，C2-C7取代的烯基，C2-C7炔基，C7-C16烷基芳基，C7-C16取代的烷基芳基和雜芳基。(一取代)氨基可以另外加有一個(gè)氨基保護(hù)基，由術(shù)語“保護(hù)的(一取代)氨基”表示。術(shù)語“(二取代)氨基”指有兩個(gè)下列取代基的氨基苯基，取代的苯基，烷基，取代的烷基，C1-C7?；?，C2-C7烯基，C2-C7炔基，C7-C16烷基芳基，C7-C16取代的烷基芳基和雜芳基，兩個(gè)取代基可以相同或不同。術(shù)語“雜芳基(烷基)”指上面定義的烷基在任何位置被上面定義的雜芳基取代。
術(shù)語“可藥用鹽”包括與羧酸陰離子形成的鹽，以及與有機(jī)和無機(jī)陽離子如來自堿金屬和堿土金屬(如鋰，鈉，鉀，鎂，鋇和鈣)的陽離子；銨和有機(jī)陽離子(如二芐基銨，芐基銨，2-羥乙基銨，雙(2-羥乙基)銨，苯乙基芐基銨，二芐基乙二銨等陽離子)形成的鹽。屬于該術(shù)語的其它陽離子包括普魯卡因，奎寧和N-甲基葡糖胺的質(zhì)子化形式；堿性氨基酸如甘氨酸，鳥氨酸，組氨酸，苯基甘氨酸，賴氨酸和精氨酸的質(zhì)子化形式；和乙酸-類平衡-離子如乙酸鹽和三氟乙酸鹽。另外，羧酸和氨基形成的本化合物的任何兩性離子形式也屬于該術(shù)語范疇。用于羧酸陰離子的優(yōu)選陽離子是鈉陽離子。而且，該術(shù)語還包括通過與堿性基團(tuán)(如氨基)和有機(jī)酸或無機(jī)酸進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)酸-堿反應(yīng)形成的鹽。這些酸包括鹽酸，硫酸，磷酸，乙酸，琥珀酸，檸檬酸，乳酸，馬來酸，富馬酸，棕櫚酸，膽酸，雙羥萘酸，粘酸，D-谷氨酸，D-樟腦酸，戊二酸，肽酸，酒石酸，月桂酸，硬脂酸，水楊酸(salicyclic)，甲磺酸，苯磺酸，山梨酸，苦味酸，苯甲酸，肉桂酸等。
式1化合物也可以溶劑化物和水合物形式存在。因此，這些化合物可以與，例如，水合作用的水，或母液溶劑的一種或一些或任意分子的部分結(jié)晶。這些化合物的溶劑化物和水合物也包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
這里所用術(shù)語“羧基保護(hù)基”指通常用來阻斷或保護(hù)羧酸基團(tuán)的羧酸基團(tuán)的酯衍生物中的一個(gè)，它使反應(yīng)在化合物的其它官能團(tuán)上進(jìn)行。這種羧酸保護(hù)基的實(shí)例包括叔丁基，4-硝基芐基，4-甲氧基芐基，3，4-二甲氧基芐基，2，4-二甲氧基芐基，2，4，6-三甲氧基芐基，2，4，6-三甲基芐基，五甲基芐基，3，4-亞甲基二氧基芐基，二苯甲基，4，4’-二甲氧基三苯甲基，4，4’，4”-三甲氧基三苯甲基，2-苯基丙基，三甲基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，苯甲酰甲基，2，2，2-三氯乙基，β-(三甲基甲硅烷基)乙基，β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基，對甲苯磺酰基乙基，4-硝基芐基磺?；一┍?，肉桂基，1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙烯基等。只要衍生的羧酸對以后的反應(yīng)條件是穩(wěn)定的并在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可以被除去而不會(huì)破壞該分子剩余部分，那么，所用羧基保護(hù)基的種類不受限制。這種基團(tuán)的其它實(shí)例可以分別在下列文獻(xiàn)中找到C.B.Reese和E.Haslam，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(Protective Groups in OrganicChemistry)”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，NY，1973，第5章；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(ProtectiveGroups in Organic Chemistry)”，第2版，John Wiley and Sons，New York，NY，1991，第5章。上述文獻(xiàn)在此引作參考。相關(guān)術(shù)語“保護(hù)的羧基”指被一個(gè)上述羧基保護(hù)基取代的羧基。
術(shù)語“羥基保護(hù)基”指連在羥基上且很容易裂解的基團(tuán)，如四氫吡喃基，2-甲氧基丙-2-基，1-乙氧基乙-1-基，甲氧基甲基，β-甲氧基乙氧基甲基，甲硫基甲基，叔丁基，叔戊基，三苯甲基，4-甲氧基三苯甲基，4，4’-二甲氧基三苯甲基，4，4’，4”-三甲氧基三苯甲基，芐基，烯丙基，三甲基甲硅烷基，(叔丁基)二甲基甲硅烷基，2，2，2-三氯乙氧羰基等。
羥基保護(hù)基的其它實(shí)例如下列文獻(xiàn)所述C.B.Reese和E.Haslam，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(Protective Groups in Organic Chemistry)”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，NY，1973，第3和4章；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有機(jī)合成中的保護(hù)基(Protective Groups inOrganic Synthesis)”，第2版，John Wiley and Sons，New York，NY，1991，第2和3章。優(yōu)選的羥基保護(hù)基是叔丁基。相關(guān)術(shù)語“保護(hù)的羥基”指連在一個(gè)上述羥基保護(hù)基上的羥基。
這里所用術(shù)語“氨基保護(hù)基”指在與分子的其它功能基團(tuán)反應(yīng)時(shí)通常用來阻斷或保護(hù)氨基官能團(tuán)的氨基的取代基，它使反應(yīng)在化合物的其它官能團(tuán)上進(jìn)行。術(shù)語“保護(hù)的(一取代)氨基”指在一取代氨基的氮原子上有一個(gè)氨基保護(hù)基。
這種氨基保護(hù)基的實(shí)例包括甲酰基(“For”)，三苯甲基，苯二甲酰亞氨基，三氯乙?；阴；纫阴；逡阴；偷庖阴；?，尿烷類保護(hù)基如叔丁氧羰基(“Boc”)，2-(4-聯(lián)苯基)丙基-2-氧羰基(“Bpoc”)，2-苯基丙基 2-氧羰基(“Poc”)，2-(4-聯(lián)苯基)異丙氧羰基，1，1-二苯基乙基-1-氧羰基，1，1-二苯基丙基-1-氧羰基，2-(3，5-二甲氧基苯基)丙基-2-氧羰基(“Ddz”)，2-(對甲苯甲?；?丙基-2-氧羰基，環(huán)戊氧羰基，1-甲基環(huán)戊氧羰基，環(huán)己氧羰基，1-甲基環(huán)己氧羰基，2-甲基環(huán)己氧羰基，2-(4-甲苯甲酰基磺?；?乙氧羰基，2-(甲磺?；?乙氧羰基，2-(三苯基膦基)乙氧羰基，9-芴基甲氧羰基(“Fmoc”)，2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基，烯丙氧羰基，1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯基氧羰基，5-苯并異草?；籽豸驶?，4-乙酰氧基芐氧羰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，2-乙炔基-2-丙氧羰基，環(huán)丙基甲氧羰基，異冰片基氧羰基，1-哌啶基氧羰基，芐氧羰基(“Cbz”)，4-苯基芐氧羰基，2-甲基芐氧羰基，α-2，4，5-四甲基芐氧羰基(“Tmz”)，4-甲氧基芐氧羰基，4-氟芐氧羰基，4-氯芐氧羰基，3-氯芐氧羰基，2-氯芐氧羰基，2，4-二氯芐氧羰基，4-溴芐氧羰基，3-溴芐氧羰基，4-硝基芐氧羰基，4-氰基芐氧羰基，4-(癸氧基)芐氧羰基等；苯甲?；谆酋；?，2，2，5，7，8-五甲基苯并二氫吡喃-6-磺?；?“PMC”)，二噻琥珀?；?“Dts”)，2-(硝基)苯基亞磺酰基(“Nps”)，二苯基-氧化膦等氨基保護(hù)基。只要衍生的氨基對以后的反應(yīng)條件是穩(wěn)定的并在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可以被除去而不會(huì)破壞該分子剩余部分，那么，所用氨基保護(hù)基的種類不受限制。優(yōu)選的氨基保護(hù)基是Boc，Cbz和Fmoc。包括在本術(shù)語中的氨基保護(hù)基的其它實(shí)例是有機(jī)合成和肽化學(xué)領(lǐng)域已知的，并且在下列文獻(xiàn)中有所描述T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有機(jī)合成中的保護(hù)基(Protective Groups in OrganicSynthesis)”，第2版，John Wiley and Sons，New York，NY，1991，第7章；M.Bodanzsky，“肽合成原理(Principles of Peptide Synthesis)”，第1和2版，Springer-Verlag，New York，NY，1984和1993；J.M.Stewart和J.D.Young，“固相肽合成(Solid Phase Peptide Synthesis)”，第2版，Pierce Chemical Co.，Rockford，IL，1984；及E.Atherton和R.C.Shephard，“肽合成原理-實(shí)用方法(Principles of Peptide Synthesis-APractical Approach)”，IRL Press，Oxford，England(1989)。上述文獻(xiàn)在此引作參考。相關(guān)術(shù)語“保護(hù)的氨基”指被一個(gè)上述氨基保護(hù)基取代的氨基。
術(shù)語“天然和非天然氨基酸”(α-氨基酸)指天然氨基酸和其它“非蛋白質(zhì)”α-氨基酸，后者常常被用于肽化學(xué)領(lǐng)域來制備天然產(chǎn)生的肽的合成同類物，包括D和L型。天然氨基酸有甘氨酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，絲氨酸，甲硫氨酸，蘇氨酸，苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，半胱氨酸，脯氨酸，組氨酸，天冬氨酸，天冬酰胺，谷氨酸，谷氨酰胺，γ-羧基谷氨酸，精氨酸，鳥氨酸和賴氨酸?！胺堑鞍踪|(zhì)”α-氨基酸的實(shí)例包括羥基賴氨酸，瓜氨酸，犬尿氨酸，(4-氨基苯基)丙氨酸，3-(2’-萘基)丙氨酸，3-(1’-萘基)丙氨酸，甲硫氨酸砜，(叔丁基)丙氨酸，(叔丁基)甘氨酸，4-羥基苯基甘氨酸，氨基丙氨酸，苯基甘氨酸，乙烯基丙氨酸，炔丙基甘氨酸，1，2，4-三唑并-3-丙氨酸，甲狀腺原氨酸，6-羥基色氨酸，6-羥基色氨酸，3-羥基犬尿氨酸，3-氨基酪氨酸，三氟甲基-丙氨酸，2-噻吩基丙氨酸，(2-(4-吡啶基)乙基)半胱氨酸，3，4-二甲氧基-苯基丙氨酸，3-(2’-噻唑基)丙氨酸，鵝膏蕈氨酸，1-氨基-1-環(huán)戊烷羧酸，1-氨基-1-環(huán)己烷羧酸，使君子氨酸，3-(三氟甲基苯基)丙氨酸，(環(huán)己基)甘氨酸，硫代組氨酸，3-甲氧基酪氨酸，彈性蛋白酶抑制劑，正亮氨酸，正纈氨酸，別異亮氨酸，高精氨酸，硫代脯氨酸，脫氫脯氨酸，羥基脯氨酸，高脯氨酸，α-氨基-正丁酸，環(huán)己基丙氨酸，2-氨基-3-苯基丁酸，在苯基部分的鄰位，間位或?qū)ξ槐灰粋€(gè)或兩個(gè)下列基團(tuán)取代的苯基丙氨酸(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，鹵素或硝基，或被亞甲基二氧基取代；β-2-和3-噻吩基丙氨酸，β-2-和3-呋喃基丙氨酸，β-2-，3-和4-吡啶基丙氨酸，β-(苯并噻吩基-2-和3-基)丙氨酸，β-(1-和2-萘基)丙氨酸，絲氨酸，蘇氨酸或酪氨酸的O-烷基化衍生物，S-烷基化半胱氨酸，S-烷基化高半胱氨酸，酪氨酸的O-硫酸酯，O-磷酸酯和O-羧酸酯，3-(磺基)酪氨酸，3-(羧基)酪氨酸，3-(二氧磷基)酪氨酸，酪氨酸的4-甲磺酸酯，酪氨酸的4-甲磷酸酯，3，5-二碘酪氨酸，3-硝基酪氨酸，ε-烷基賴氨酸和δ-烷基鳥氨酸。這些α-氨基酸中任何一個(gè)都可以在α位被甲基取代，α-氨基側(cè)鏈上的任何芳族殘基可以被鹵素取代，或側(cè)鏈殘基的O，N或S原子可以被適當(dāng)保護(hù)基取代。適當(dāng)保護(hù)基如上所述。
根據(jù)溶劑的選擇和本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其它條件，本發(fā)明化合物也可以半縮酮，半縮醛，縮酮或縮醛形式存在，這些形式都屬于本發(fā)明范圍。
另外，應(yīng)該理解，本發(fā)明化合物的平衡形式還包括互變異構(gòu)形式。這些化合物的所有這些形式都包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
而且，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，當(dāng)式1的B是氫原子時(shí)，可以用所得醛形成半卡巴腙。這些半卡巴腙作為式1化合物以及含有這些化合物的藥物組合物都屬于本發(fā)明。這些半卡巴腙包括，例如，最佳基團(tuán)的半卡巴腙衍生物和下面給出的氧吖庚因并吲哚和氧吖庚因喹啉化合物的4-氧丁酸衍生物。
當(dāng)式1中的n為1，尤其是m為1時(shí)，存在式1化合物的最佳基團(tuán)。這些化合物在這里被稱為“氧吖庚因并吲哚”化合物。
當(dāng)式1中的B是氫原子時(shí)，存在氧吖庚因并吲哚化合物的最佳基團(tuán)。這些化合物在這里被稱為“4-氧丁酸衍生物”。當(dāng)式1中的A是式R2CO-基團(tuán)，尤其是R2是2-(羧基)乙-1-基，2-(苯基)乙-1-基，甲基，萘-1-基或苯基，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)這種4-氧丁酸衍生物的一種引人注目的情況。當(dāng)A是式R5-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，尤其是R5是甲基且R8是式-CH2COOH基團(tuán)，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)4-氧丁酸衍生物的另一種形式。當(dāng)A是式R6-O-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R6是芐基且R8是式-CH2COOH基團(tuán)，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)另一種引人注目的4-氧丁酸衍生物形式。當(dāng)A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)4-氧丁酸衍生物的另一種形式。
當(dāng)式1中的B是一氟甲基時(shí)，存在氧吖庚因并吲哚化合物的另一最佳基團(tuán)，稱為“4-一氟甲基衍生物”。當(dāng)A是式R3-O-CO-基團(tuán)，且R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，有一種引人注目的一氟甲基衍生物形式。
當(dāng)式1中的B是式-CH2-O-PO(R10)R11時(shí)，會(huì)出現(xiàn)另一種最佳氧吖庚因并吲哚化合物，該化合物基團(tuán)在此稱為“氧膦基氧基衍生物”。R10和R11分別是苯基的化合物是值得注意的氧膦基氧基衍生物。當(dāng)式1中的A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，存在這種二苯基氧膦基氧基化合物。
當(dāng)式1中的n為2，尤其是m為1時(shí)，存在式1化合物的另一種最佳基團(tuán)。這些化合物在這里被稱為“氧吖庚因喹啉”化合物。
當(dāng)式1中的B是氫原子，尤其是A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，有一種氧吖庚因喹啉化合物。
應(yīng)該理解，可以通過適當(dāng)官能度對本發(fā)明化合物進(jìn)行修飾以提高生物選擇性。這種修飾是本領(lǐng)域已知的，包括增加對所給生物系統(tǒng)(如血液，淋巴系統(tǒng)，中樞神經(jīng)系統(tǒng))的生物滲透性，增加口服利用度，增加注射給藥時(shí)的溶解性，改變代謝性能和改變排泄速率。另外，可以將本化合物換成前藥形式，使之在患者體內(nèi)經(jīng)過代謝作用或?qū)η八幍钠渌饔卯a(chǎn)生所要的化合物。前藥形式的一些例子包括含有酮或醛基團(tuán)，特別是它們在A中出現(xiàn)或者修飾天冬氨酸或谷氨酸殘基連到本發(fā)明化合物三環(huán)核的化合物的縮酮，縮醛，肟和腙形式。
本發(fā)明式1化合物可用常規(guī)技術(shù)合成。有利地，這些化合物一般最好用容易得到的原料合成。
因此，本發(fā)明化合物一般可以通過以下方法合成將式2所示三環(huán)核
與式3a-d所示修飾的天冬氨酸和谷氨酸殘基結(jié)合，
該過程在標(biāo)準(zhǔn)肽偶合劑如二環(huán)己基碳化二亞胺(DDC)/1-羥基苯并三唑(HOBt)，BOP試劑，pyBOP，TBTU，EEDQ，1-乙基(3，3’-二甲基-1’-氨基丙基)碳化二亞胺(EDAC)/HOBt等存在下進(jìn)行。上述偶合劑在J.Jones，“氨基酸和肽合成(Amino Acid and PeptideSynthesis)”，Steven G.Davis編輯，Oxford University Press，Oxford，pp.25-41(1992)中有所描述，該文在此引作參考。式2中APG是氨基保護(hù)基。然后，除去氨基保護(hù)基，并將所得胺與式4Rc-CO-X 式4取代的?；蚴?R4SO2-X 式5磺酰基結(jié)合。
在以上各式中，R1定義如上，Rc是R2，R3-O，R4或含有式1對A定義時(shí)的R8的側(cè)鏈中的任何一個(gè)。當(dāng)然，這些部分都有保護(hù)形式的羥基，羧基或氨基，以致不干擾偶合反應(yīng)(式3a-d)，?；磻?yīng)(式4)或磺化反應(yīng)(式5)。上式中的X代表?；蚧腔磻?yīng)中容易離去的基團(tuán)。
在與式3c氨基醇進(jìn)行偶合反應(yīng)時(shí)，必須在除去保護(hù)基之前將醇部分氧化成相應(yīng)的羰基化合物。進(jìn)行氧化反應(yīng)的優(yōu)選方法包括Swern氧化反應(yīng)(草酰氯-二甲亞砜，二氯甲烷在-78℃反應(yīng)，然后加入三乙胺)；和Dess-Martin氧化反應(yīng)(Dess-Martin高碘烷，叔丁醇和二氯甲烷)。用現(xiàn)有技術(shù)中已知方法除去式2和3a-d中的保護(hù)基。
式2的三環(huán)核是用現(xiàn)有技術(shù)中已知方法合成的。例如，參見D.S.Karanewsky的授權(quán)于1996年4月2日的美國專利5,504,080；J.A.Robl等人，《四面體通訊(Tetrahedron Letters)》，361593-1596(1995)；和S.De Lombaert等人，《四面體通訊(Tetrahedron Letters)》，357513-7516(1994)，所有文獻(xiàn)在此引作參考。
對式3a-d的天冬氨酸或谷氨酸的修飾可以用現(xiàn)有技術(shù)中已知方法實(shí)施。例如，參見歐洲專利申請519,748；PCT專利申請PCT/EP92/02472；PCT專利申請PCT/US91/06595；PCT專利申請PCT/US91/02339；歐洲專利申請623,592；國際專利申請WO93/09135；PCT專利申請PCT/US94/08868；歐洲專利申請623,606；歐洲專利申請618,223；歐洲專利申請533,226；歐洲專利申請528,487；歐洲專利申請618,233；PCT專利申請PCT/EP92/02472；PCT專利申請PCT/EP92/02472；國際專利申請WO93/09135；PCT專利申請PCT/US93/03589和PCT專利申請PCT/US93/00481，所有文獻(xiàn)在此引作參考。
式4?；蛯?yīng)的R4SO2基團(tuán)也是用現(xiàn)有技術(shù)中已知方法合成的。例如，參見授權(quán)于1996年4月2日的美國專利5,504,080，該文在此引作參考。如果該基團(tuán)可以實(shí)現(xiàn)與三環(huán)核的連接，在其連到核心之前最好是未修飾的。
一旦式3和式4或式5的側(cè)鏈連到式2的三環(huán)核上，本領(lǐng)域技術(shù)人員通常應(yīng)該除去任何氨基-，羥基-或羧基保護(hù)基，以提高合成的分子的活性。
本發(fā)明藥物組合物含有任何式1化合物及其可藥用鹽，以及任何可藥用載體，輔劑或賦形劑(以后統(tǒng)稱為“可藥用載體”)?？捎糜诒景l(fā)明藥物組合物的可藥用載體，輔劑和賦形劑包括，但不限于，離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白如人體血清白蛋白，緩沖物質(zhì)如各種磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸部分的甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠態(tài)氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯基吡咯烷酮，纖維素基的物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，多芳基化合物，石蠟，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物，聚乙二醇和羊毛脂。
當(dāng)式1中n為1，尤其是m也為1時(shí)，存在式1的一組最佳藥物組分。這些組合物在此稱作“氧吖庚因并吲哚”組分。
當(dāng)式1中B是氫原子，存在一組最佳氧吖庚因并吲哚組分，該組分在此稱作“4-氧丁酸衍生物”。當(dāng)式1中的A是式R2CO-基團(tuán)，尤其是R2是2-(羧基)乙-1-基，2-(苯基)乙-1-基，甲基，萘-1-基或苯基，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)這種4-氧丁酸衍生物的一種引人注目的情況。當(dāng)A是式R5-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，尤其是R5是甲基且R8是式-CH2COOH基團(tuán)，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)4-氧丁酸衍生物的另一種形式。當(dāng)A是式R6-O-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R6是芐基且R8是式-CH2COOH基團(tuán)，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)另一種引人注目的4-氧丁酸衍生物形式。當(dāng)A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，會(huì)出現(xiàn)4-氧丁酸衍生物的另一種形式。
當(dāng)式1中的B是一氟甲基時(shí)，存在另一組最佳氧吖庚因并吲哚組分，因此稱為“一氟甲基衍生物”。當(dāng)A是式R3-O-CO-基團(tuán)，且R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，有一種引人注目的一氟甲基衍生物形式。
當(dāng)式1中的B是式-CH2-O-PO(R10)R11時(shí)，會(huì)出現(xiàn)另一組最佳氧吖庚因并吲哚組分，該組分基團(tuán)在此稱為“氧膦基氧基衍生物”。R10和R11分別是苯基的組合物是值得注意的氧膦基氧基衍生物。當(dāng)式1中的A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，存在這種二苯基氧膦基氧基組合物的一種情況。
當(dāng)式1中的n為2，尤其是m為1時(shí)，存在另一組最佳式1藥物組分。這些組分在此被稱為“氧吖庚因喹啉”組合物。
當(dāng)式1中的B是氫原子，尤其是A是式R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基，特別是R1是氫原子時(shí)，存在一組氧吖庚因喹啉組分。
本發(fā)明藥物組合物可以口服，胃腸外，噴霧吸入，表面，直腸，鼻，頰，陰道或通過植入的儲(chǔ)藥罐給藥。優(yōu)選口服和胃腸外給藥。這里所用術(shù)語“胃腸外”包括皮下，皮內(nèi)，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，關(guān)節(jié)內(nèi)，滑膜內(nèi)，胸骨內(nèi)，鞘內(nèi)，損害部位內(nèi)和顱內(nèi)采用注射或滴注技術(shù)。
本藥物組合物可以是滅菌注射劑，例如，滅菌的可注射水性或油性懸浮液形式。該懸浮液可根據(jù)本領(lǐng)域已知技術(shù)用適當(dāng)分散劑或潤溫劑(如Tween80)和懸浮劑配制。滅菌注射劑也可以是滅菌可注射溶液或懸浮于無毒可滲透稀釋劑或溶劑中的懸浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。在所用的可用載體和溶劑中有甘露醇，水，Ringer溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌不揮發(fā)油通常也被用作溶劑或懸浮劑。為此目的，可以使用任何無刺激性不揮發(fā)油，包括合成的一-或二甘油酯。脂肪酸如油酸及其甘油酯衍生物都可用于制備注射劑。天然可藥用油如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙酸酯衍生物都可用于制備注射劑。這些油溶液或懸浮液也可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑如Ph.Helv或類似的醇。
本藥物組合物可以任何可口服的劑量形式給藥，包括，但不限于，膠囊，片劑，水懸浮液和水溶液。在使用片劑口服給藥時(shí)常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。一般要添加潤滑劑如硬脂酸鎂?？诜o藥的膠囊所用的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。如果用水懸浮液口服給藥，要將活性成分與乳化劑和懸浮劑混合配制。如果需要，還要加入某些甜味劑和/或調(diào)味劑和/或調(diào)色劑。
本發(fā)明藥物組合物也可以制成栓劑進(jìn)行直腸給藥?？蓪⒈景l(fā)明化合物與適當(dāng)無刺激性賦形劑混合制成這種組合物，其中賦形劑在室溫是固體而在直腸溫度下變成液體，從而在直腸內(nèi)融化釋放出活性成分，這類物質(zhì)包括，但不限于，可可油，蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明藥物組合物的局部給藥方式尤其適用于所要治療的部位或器官容易采用局部方式給藥的部位。為了在皮膚表面使用，藥物組合物應(yīng)該制成含有懸浮于或溶解于載體的活性成分的適當(dāng)軟膏形式。適于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括，但不限于，礦物油，液體石蠟，白凡士林，丙二醇，聚氧乙烯，聚氧丙烯化合物，乳化蠟和水。此外，藥物組合物可制成含有懸浮于或溶解于載體的活性成分的適當(dāng)洗劑或乳油。合適的載體包括，但不限于，礦物油，脫水山梨醇一硬脂酸酯，多乙氧基醚60，鯨蠟醇酯蠟，鯨蠟醇(cetearyl alcohol)，2′-辛基十二醇，芐醇和水。本藥物組合物也可以直腸栓劑或適當(dāng)灌腸劑形式局部使用于腸道下端。局部透皮貼片也屬于本發(fā)明范圍。
本發(fā)明藥物組合物可以鼻內(nèi)噴霧或吸入給藥。這種組合物可以根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域的已知技術(shù)制成鹽水溶液，使用芐醇或其它合適的防腐劑，促進(jìn)吸收劑以提高生物可利用度，氟烴合物和/或其它本領(lǐng)域已知的溶解劑或分散劑。
本發(fā)明藥物組合物可以常規(guī)方式用于治療哺乳動(dòng)物中由IL-1介導(dǎo)的疾病。治療方法，劑量水平和要求可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員從可用方法和技術(shù)中選擇。例如，可以減少疾病嚴(yán)重程度的可藥用方式和有效劑量給患有IL-1介導(dǎo)的疾病的患者施用本發(fā)明藥物組合物。
此外，本發(fā)明化合物可與常規(guī)消炎劑或基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，脂氧合酶抑制劑和非IL-1β的細(xì)胞因子拮抗劑聯(lián)合使用。
本發(fā)明化合物還可以與免疫調(diào)節(jié)劑(如溴匹立明，抗人體α干擾素抗體，IL-2，GM-CSF，甲硫氨酸腦啡肽，干擾素α，二乙基二硫代氨基甲酸酯，腫瘤壞死因子，納曲酮和rEPO)或前列腺素聯(lián)合給藥，以預(yù)防或抵御IL-1介導(dǎo)的病癥如炎癥。
如果本發(fā)明化合物與其它藥劑進(jìn)行結(jié)合治療給藥，則它們可先后或同時(shí)給患者給藥?；蛘撸景l(fā)明藥物組合物可以含有式1化合物和其它治療劑或預(yù)防藥物。
用本發(fā)明藥物組合物可以治療或預(yù)防的疾病包括，但不限于，炎癥，免疫疾病和神經(jīng)變性疾病，并可抑制涉及局部缺血損傷如心臟局部缺血損傷(如心肌梗塞)，腦局部缺血損傷(如中風(fēng))，和腎局部缺血損傷(如局部缺血腎病)所不希望有的細(xì)胞程序死亡。給哺乳動(dòng)物，這里指需要治療的患者(即，患有炎癥，免疫疾病和神經(jīng)變性疾病的患者)，施用有效量的上述藥物組合物的方法是本發(fā)明的另一方面。
本發(fā)明還一個(gè)方面是防止患有與局部缺血損傷相關(guān)疾病患者的局部缺血損傷的方法，包括給需要這種治療的患者施用有效量的上述藥物組合物。
還有，涉及治療炎癥，自身免疫疾病和神經(jīng)變性疾病，以及預(yù)防局部缺血損傷方法的每一種方法包括使用任何一種上述藥物組合物的最佳組和實(shí)例。
可以被治療或預(yù)防的炎癥包括，例如，敗血性休克，敗血癥和成人呼吸窘迫綜合征。所針對的自身免疫疾病包括，例如，類風(fēng)濕病，關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，硬皮病，慢性甲狀腺炎，格雷夫斯病，自身免疫胃炎，依賴胰島素糖尿病，自身免疫溶血性貧血，自身免疫中性白細(xì)胞減少癥，血小板減少癥，慢性活動(dòng)性肝炎，重癥肌無力和多發(fā)性硬化。所針對的神經(jīng)變性疾病包括，例如，肌萎縮側(cè)硬化，阿爾茨海默病，帕金森病和原發(fā)性側(cè)(primary lateral)硬化。本發(fā)明藥物組合物還可用來促進(jìn)傷口愈合。所針對的與傷害相關(guān)的并因此不希望有的細(xì)胞程序死亡的疾病，換句話說，那些與局部缺血損傷有關(guān)的疾病，包括心肌梗塞，中風(fēng)和局部缺血腎病。本發(fā)明藥物組合物還可用來治療傳染病，尤其是涉及病毒的傳染病。
術(shù)語“有效量”指用于治療上述病癥的劑量水平，約為每天每公斤體重0.05-140mg(約每個(gè)患者每天2.5mg-7g活性成分)。例如，以每天每公斤體重約0.01-50mg(約每個(gè)患者每天0.5mg-3.5g)活性化合物的劑量給藥可以有效地治療炎癥。
與載體物質(zhì)結(jié)合制成單劑的式1化合物的量將取決于所要治療的宿主和給藥的具體方式。例如，給人口服給藥的制劑可含有0.5-5g式1化合物和適當(dāng)?shù)那覟槌Ｓ昧康妮d體材料，載體的用量約占組合物總量的5-95％。單位劑量通常含有約1-500mg式1活性化合物。
然而，應(yīng)該理解，對具體患者具體的“有效量”取決于多種因素，包括所用具體化合物的活性，患者的年齡，體重，健康狀況，性別，食欲，給藥時(shí)間，給藥途徑，排泄率，聯(lián)合的用藥和正在治療的具體疾病的嚴(yán)重程度。
雖然本發(fā)明著重用這里公開的化合物預(yù)防和治療IL-1介導(dǎo)的疾病，但本發(fā)明化合物也可以用作其它半胱氨酸蛋白酶的抑制劑。
本發(fā)明化合物還可以用作有效結(jié)合ICE/ced-3類半胱氨酸酶或其它半胱氨酸酶的商用試劑。作為商用試劑本發(fā)明化合物及其衍生物可以用來阻斷靶肽的蛋白解作用，或可衍生以結(jié)合穩(wěn)定樹脂用于親和力色譜法。這些和其它以商用半胱氨酸酶抑制劑為特征的應(yīng)用對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是顯而易見的。
為了使人們更充分地理解本發(fā)明，給出下列實(shí)施例。這些實(shí)施例僅僅是為了說明本發(fā)明而非以任何方式限制本發(fā)明范圍。
在下列實(shí)施例中，質(zhì)子NMR在300MHz得到；化學(xué)位移以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)。
制備例1
制備(2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸，乙酯向在0℃攪拌的(2S-順)-5-氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸，乙酯(0.437g，1.73mmol，按《四面體通訊(tetrahedron Letters)》，36，pp.1593-1596(1995)和美國專利5,504,080(1996年4月2日授權(quán))所述制備的)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入氯甲酸芐酯(0.370mL，2.6mmol)和三乙胺(0.724mL，5.2mmol)，并將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?5分鐘。用水淬滅反應(yīng)，然后在乙酸乙酯和5％硫酸氫鉀水溶液之間分配。用乙酸乙酯重復(fù)萃取水相兩次，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌合并的有機(jī)相，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用乙酸乙酯-己烷(2∶1)洗脫，得到0.558g(68％)粗產(chǎn)品。用乙酸乙酯-己烷(1∶4)研磨，得到0.480g標(biāo)題化合物為白色固體；m.p.139-140℃，TLC(乙酸乙酯-己烷，2∶1)Rf＝0.6；1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.30(m，5H)，7.02-6.94(m，3H)，6.17(d，J＝5.4Hz，1H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，3.46(dd，J＝11.0，16.7Hz，1H)，3.29(m，1H)，3.10(d，J＝116.5，2H)，2.35(m，1H)，2.16(m，1H)，1.23(t，J＝7.2Hz，3H).
制備例2
制備(2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸在(2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸，乙酯(0.428g，1.05mmol)的1，4-二噁烷(7.5mL)和水(2.5mL)的溶液中加入1M氫氧化鋰(1.6mL，1.6mmol)水溶液，并將所得混合物在室溫和氮?dú)庵袛嚢?0分鐘。用5％硫酸氫鉀氯化鈉水溶液酸化反應(yīng)混合物至pH3。用乙酸乙酯重復(fù)萃取水相兩次，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到0.395g(99％)標(biāo)題化合物為細(xì)白色固體；m.p.188-189℃，TLC(乙酸乙酯-甲醇-乙酸，9∶1∶1)Rf＝0.55；1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34-7.26(m，5H)，7.07-6.97(m，3H)，6.08(d，J＝5.7Hz，1H)，5.25(dd，J＝3.2，9.8Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.30(m，1H)，3.36(m，1H)，3.26(m，2H)，3.06(d，J＝12.0Hz，1H)，2.36(m，1H)，2.09(m，1H).
制備例3
制備(3R，S-順)-6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-甲酸，甲酯向在0℃攪拌的(3R，S-順)-6-氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-甲酸，甲酯(0.570g，2.1mmol，按《四面體通訊(tetrahedron Letters)》，36，pp.1593-1596(1995)和美國專利5,504,080(1996年4月2日授權(quán))所述制備的)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入氯甲酸芐酯(0.6mL，4.2mmol)和三乙胺(1.2mL，8.4mmol)，并將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?0分鐘。用水淬滅反應(yīng)，然后在乙酸乙酯和5％硫酸氫鉀水溶液之間分配。用乙酸乙酯重復(fù)萃取水相兩次，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌合并的有機(jī)相，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用乙酸乙酯-己烷(2∶1)洗脫，得到0.643g(76％)標(biāo)題化合物為白色泡沫；TLC(二氯甲烷-甲醇，95∶5)Rf＝0.8.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.36-7.25(m，5H)，7.13-7.02(m，3H)，5.67(d，J＝7.8Hz，1H)，5.02(t，J＝9.15，18.3Hz，2H)，4.34(m，1H)，3.70(s，3H)，3.16(m，1H)，2.69-2.56(m，5H)，2.06(m，1H).質(zhì)譜m/z408(M+H)制備例4
制備(3R，S-順)-6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-甲酸在(3R，S-順)-6-氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-甲酸，甲酯(0.622g，1.53mmol)的1，4-二噁烷(10.5mL)和水(3.5mL)的溶液中加入1M氫化鋰(2.3mL，2.3mmol)水溶液，并將所得混合物在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)。用5％硫酸氫鉀水溶液酸化反應(yīng)混合物至pH2，然后在乙酸乙酯和飽和氯化鈉溶液之間分配。用乙酸乙酯重復(fù)萃取水相兩次，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到0.670g標(biāo)題化合物，TLC(乙酸乙酯-甲醇-乙酸，32∶1∶1)Rf＝0.35.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.38-7.28(m，5H)，7.13-7.04(m，3H)，5.72(d，J＝8.1Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.35(m，1H)，3.77-3.67(m，5H)，3.10(m，1H)，2.72-2.52(m，5H)，2.07(m，1H)，1.70(m，1H).
制備例5
制備N-(芐氧羰基)-L-(N’-甲基-N’-甲氧基)天冬酰胺β-(叔丁酯)向在0℃(冰浴)和氮?dú)庵械腘-(芐氧羰基)-L-天冬氨酸-β-(叔丁基)酯(14.65g，45.3mmol，Bachem)的CH2Cl2(150mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(7.29g，47.6mmol，Aldrich)，接著加入1-乙基-3-(3’，3’-二甲基-1’-氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(9.55g，49.8mmol，Sigma)。在0℃攪拌15分鐘后加入N，O-二甲基羥基胺(5.10g，52.3mmol，Aldrich)和N-甲基嗎啉(5.8mL，53mmol，Aldrich)。用3小時(shí)將混合物暖至室溫，然后在室溫?cái)嚢?6小時(shí)。真空濃縮溶液，剩余物在乙酸乙酯-5％KHSO4(各200mL)之間分配。依次用5％KHSO4，飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相；用無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)成油。將該油從己烷中結(jié)晶，得到標(biāo)題產(chǎn)物(16.10g，97％產(chǎn)率)為松散的白色晶狀固體。TLC(乙酸乙酯)，單斑點(diǎn)(UV和PMA)Rf＝0.37。
用類似上述方法，以29.3g N-(芐氧羰基)-L-天冬氨酸-β-(叔丁基)酯(達(dá)到2倍規(guī)模)為原料，得到31.18g(94％產(chǎn)率)標(biāo)題產(chǎn)物。
制備例6
制備N-(芐氧羰基)-L-天冬氨酸-半卡巴腙β-(叔丁基)酯向在0℃(冰浴)和氮?dú)庵械腘-(芐氧羰基)-L-(N’-甲基-N’-甲氧基)天冬酰胺β-(叔丁酯)(15.50g，42.3mmol)的無水乙醚(400mL)溶液中以保持反應(yīng)溶液溫度在0-5℃的速率滴加1.0M LiAlH4的乙醚(22.0mL，22.0mmol，Aldrich)溶液(添加時(shí)間為15-20分鐘)。加完氫化鋁鋰試劑后將混合物在0-5℃攪拌1小時(shí)，然后滴加0.3M KHSO4溶液(100mL)淬滅反應(yīng)。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到裝有足量5％KHSO4溶液(75mL)的分液漏斗中以溶解固體。分離有機(jī)相，合并的水相用乙醚(100mL)萃取兩次。合并乙醚萃取液，用飽和NaCl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，并微微加熱地真空濃縮。TLC(乙酸乙酯)條狀斑點(diǎn)(UV和PMA)Rf＝0.48。TLC(甲醇/二氯甲烷，1∶9)主要斑點(diǎn)(UV和PMA)Rf＝0.75。
將粗產(chǎn)物醛立即放入乙醇水溶液(45mL水/105mL醇)，放入冰浴并用乙酸鈉(3.82g，46.6mmol)和氨基脲鹽酸鹽(5.20g，46.6mmol，Aldrich)處理。將混合物在0℃(冰浴)和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)，允許升至室溫，再攪拌過夜(16小時(shí))。真空下除去大部分乙醇，剩余物在乙酸乙酯和水(各100mL)之間分配。依次用5％KHSO4，飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相；無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。將反應(yīng)粗產(chǎn)物與用15.40g和4.625g N-(芐氧羰基)-L-(N’-甲基-N’-甲氧基)天冬酰胺β-(叔丁酯)(總共35.525g，97mmol)為原料用類似方法得到的兩次粗產(chǎn)物合并，經(jīng)硅膠快速色譜純化，用丙酮/二氯甲烷(3∶7)，然后用甲醇-丙酮-二氯甲烷(0.5∶3∶7)洗脫，得到純標(biāo)題產(chǎn)物(27.73g，78.5％)為無色泡沫。TLC(MeOH-CH2Cl2，1∶9)單斑點(diǎn)(UV和PMA)Rf＝0.51。
制備例7
L-天冬氨酸半卡巴腙β-(叔丁基)酯，對甲苯磺酸鹽的制備向N-(芐氧羰基)-L-天冬氨酸半卡巴腙β-(叔丁酯)(13.84g，38.0mmol)的無水乙醇(250mL)溶液中加入10％Pd/C(1.50g，Aldrich)，并將所得混合物在氫氣(球)壓下攪拌直到TLC(甲醇/二氯甲烷，1∶9)指示原料已耗盡(60分鐘)。注嚴(yán)格遵守這一反應(yīng)步驟很重要，因?yàn)楫a(chǎn)物可能過度還原。用Celite過濾混合物并蒸發(fā)成油。先后用二氯甲烷(2×75mL)和二氯甲烷/甲苯(1∶1，75mL)雕鏤該油，得到的粗胺為白色晶狀固體。TLC(EtOAc-吡啶-AcOH-H2O，60∶20∶5∶10)單斑點(diǎn)(UV和PMA)Rf＝0.24。注在此TLC系統(tǒng)中，所有過度還原的產(chǎn)物將在所要產(chǎn)物之下立即顯示，Rf＝0.18(僅PMA)。
將此粗胺溶解于CH3CN(60mL)，并用對甲苯甲磺酸一水合物(7.22g，38.0mmol)的乙腈(60mL)溶液處理。收集沉淀的結(jié)晶，用乙腈和乙醚洗滌，空氣干燥，得到標(biāo)題化合物(13.95g，92％產(chǎn)率)為白色晶狀固體。
經(jīng)過將所得物質(zhì)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的Mosher胺檢查其光學(xué)純度[1.05當(dāng)量(R)-(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酰氯，2.1當(dāng)量i-Pr2NEt的CH2Cl2，室溫，30分鐘]。所要的產(chǎn)物在7.13ppm(1H，d，J＝2.4Hz，CH＝N)有一個(gè)雙峰，同時(shí)，該非對映體所對應(yīng)的信號(hào)在7.07ppm。上述方法所得標(biāo)題化合物的光學(xué)純度一般＞95∶5。
制備例8對ICE/ced-3類蛋白酶活性的抑制能力的測定A.IC50值的測定用重組的ICE和CPP32酶檢測式1化合物的活性所采用熒光酶測定法基本上按照下列文獻(xiàn)所述在96孔微滴定板中進(jìn)行Thornberry等人，《自然(Nature)》，356768-774(1992)和Nicholson等人，《自然(Nature)》，37637-43(1995)。上述文獻(xiàn)在此引作參考。ICE測定所用底物是乙?；?Tyr-Val-Ala-Asp-氨基-4-甲基香豆素(AMC)，CPP32，Mch2，Mch3和Mch5測定所用底物是乙酰基-Asp-Glu-Val-Asp-氨基-4-甲基香豆素。酶反應(yīng)在室溫下在含有2mM DTT的ICE緩沖液(25mM HEPES，1mM EDTA，0.1％CHAPS，10％蔗糖，pH7.5)中進(jìn)行二次?；旌舷铝谐煞诌M(jìn)行該項(xiàng)測定50μL ICE，Mch2，Mch5，CPP32(濃度分別為18.8，38，8.1和0.153nM)或Mch3(1單位)酶在含有8.0(ICE，Mch2，Mch5，CPP32)或20(Mch5)mM DTT的ICE緩沖液中；50μL式1化合物或ICE緩沖液(對照組)；及100μL20μM底物。
在加入底物初始化反應(yīng)之前允許將要測定的酶和式1化合物在室溫下在微滴定板中預(yù)培養(yǎng)30分鐘。在室溫下通過用激發(fā)波長為360nm測量在460nm熒光發(fā)射來監(jiān)視熒光AMC產(chǎn)物的形成，用時(shí)1小時(shí)。將作為對照組的雙份孔中產(chǎn)生的熒光變化進(jìn)行平均并畫出平均值曲線，作為抑制劑濃度的函數(shù)，以確定產(chǎn)生50％抑制的抑制劑濃度(IC50)。該測定結(jié)果列于下面表1。
該測定所采用的參照化合物是Cbz-ValAlaAsp-H，其值在表1“參考物”欄中列出
<p>B.不可逆抑制劑離解常數(shù)Ki和不可逆速率常數(shù)k3的測定對于競爭不可逆抑制劑對ICE/ced-3類蛋白酶的不可逆抑制作用可用下式方程表示在t時(shí)間形成的產(chǎn)物可表示如下[P]t=[E]T([S]Ki[I]Ks)(ksk3)[1-e-k3t/(1+Ki[I](1+[S]Ks))]]]>方程式I其中E，I，EI和E-I分別代表活性酶，抑制劑，非共價(jià)酶-抑制劑復(fù)合物和共價(jià)酶-抑制劑加合物。Ki值是所有可逆結(jié)合步驟的離解常數(shù)，k3是不可逆速率常數(shù)。[S]和ks值分別是底物濃度和與酶結(jié)合的底物的離解常數(shù)。[E]T是總酶濃度。
以上方程式用來確定所給與ICE/ced-3類蛋白酶結(jié)合的抑制劑的Ki和k3值，因此，對各種濃度的抑制劑和底物要連續(xù)測定60分鐘。除了反應(yīng)是通過在底物-抑制劑混合物中添加酶開始反應(yīng)的以外，該測定基本上按照上述生成表1數(shù)據(jù)的相同方法進(jìn)行。根據(jù)方程I將形成的產(chǎn)物AMC作為時(shí)間的函數(shù)得到Ki和k3值。該第二種測定結(jié)果列于下面表2。
該測定所采用的參照化合物是Cbz-ValAlaAsp-CH2F，其值在表2“參考物”欄中列出。
實(shí)施例1
(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸(0.375g，0.989mmol)的二氯甲烷(7mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.182g，1.19mmol)和1-乙基-3-(3’，3’-二甲基-1’-氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.284g，1.48mmol)。15分鐘后加入L-天冬氨酸半卡巴腙β-(叔丁基)酯，對甲苯磺酸鹽(0.386g，0.989mmol)和N-甲基嗎啉(0.163mL，1.48mmol)，并允許所得反應(yīng)混合物在1小時(shí)內(nèi)升到室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用2％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.463g(79％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.5.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ_8.42(s，1H)，7.82(d，J＝8.1Hz，1H)，7.32(m，5H)，7.07(m，3H)，5.94(d，J＝6.3Hz，1H)，5.26(d，J＝9Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.82(m，1H)，4.35(m，1H)，3.56(d，J＝18Hz，1H)，3.27(m，2H)，3.07(m，1H)，2.64(dd，J＝4.7，15.8Hz，1H)，2.44(dd，J＝6.6，15.9Hz，2H)，2.22(m，1H)，1.30(s，9H).(M+H).質(zhì)譜m/z 593(M+H)實(shí)施例2
(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.214g，0.362mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL，4.34mmol)和三氟乙酸(0.75mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.195g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，95∶5)Rf＝0.2.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ_9.77(bs，1H)，8.32(d，J＝12Hz，1H)，8.12(d，J-7.8Hz，1H)，7.31-7.27(m，5H)7.13-7.04(m，3H)，6.64(m，1H)5.32(d，J＝9.9Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.86(m，1H)，4.41(m，1H)，3.56(d，J＝15Hz，1H)，3.25(m，2H)，3.10(m，2H)，2.64(m，2H)，2.28(m，2H).
實(shí)施例3
(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(2mL)處理(2-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.195g，0.36mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.073g(42％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.101-104℃；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，97∶2.5∶0.5)Rf＝0.45.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ_7.45(m，1H)，7.30(s，5H)，7.07(d，J＝3.3Hz，1H)，7.00(d，J＝4.8Hz，2H)，6.12(m，1H)，5.17(d，J＝9.6Hz，1H)，5.07(s，2H)，4.49(m，1H)，4.28(m，1H)，3.46(d，J＝9.9Hz，1H)，3.30-3.12(m，2H)，3.04-2.99(m，1H)，2.83-2.76(m，1H)，2.46-2.33(m，2H)，2.03(bs，1H).質(zhì)譜m/z 480(M+H)實(shí)施例4
(2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙將10％鈀炭(0.180g)加到(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.308g，0.520mmol)的甲醇(27mL)溶液中，并用氫氣球(1個(gè)大氣壓，室溫)氫化所得混合物18小時(shí)。用Celite過濾混合物，蒸發(fā)至干，然后用甲苯雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物為米白色固體(0.215g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.15.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.53(s，1H)，7.89(d，J＝7.6Hz，1H)，7.13(m，3H)，5.21(dd，J＝2.3，10.14Hz，1H)，4.82(m，1H)，3.52(m，1H)，3.24(dd，J＝10.3，16.3Hz，1H)，3.03(m，2H)，2.62 &amp; 2.42(AB，dd，J＝4.2，7.1，15.7Hz，2H)，2.19(m，1H)，1.32(s，9H).
實(shí)施例5
(2S-順)-[5-(N-乙?；?(S)-天冬氨酰-β-叔丁酯)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧腘-乙酰基天冬氨酸，β-叔丁酯(0.120g，0.517mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.086g，0.564mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.135g，0.705mmol)。15分鐘后加入(2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.213g，0.47mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，并允許反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)升到室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，先后用5％和10％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.126g(41％)標(biāo)題化合物為白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.4.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.63(s，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，7.82(d，J＝6.6Hz，1H)，7.53(d，J＝4.8Hz，1H)，7.09(m，1H)，7.00(m，2H)，5.18(d，J＝8.1Hz，1H)，4.86(m，1H)，4.39(m，1H)， 3.01(m，1H)，2.92(dd，J＝4.2，14.7Hz，1H)2.68(d，J＝12.3Hz，1H)，2.52(m，2H)，2.51(m，2H)，2.03(s，3H)，1.39(s，9H)，1.24(s，9H).
實(shí)施例6
(2S-順)-[5-(N-乙?；?(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-(N-乙?；?(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.117g，0.178mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.099g)。TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，13∶6∶1)Rf＝0.2。質(zhì)譜m/z 560(M+H)。
實(shí)施例7
(2S-順)-[5-(N-乙?；?(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(2mL)處理(2S-順)-[5-(N-乙?；?(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.097g，0.177mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.050g(56％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.160-175℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，13∶6∶1)Rf＝0.3。質(zhì)譜m/z 503(M+H)。
實(shí)施例8
(2S-順)-[5-琥珀酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.197g，0.435mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中先后加入琥珀酸酐(0.057g，0.566mmol)和吡啶(0.052mL，0.653mmol)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，氯化鈉溶液洗滌；干燥(硫酸鈉)和蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，先后用10％甲醇-二氯甲烷和80∶19∶1二氯甲烷-甲醇-乙酸洗脫，得到0.216g(88％)標(biāo)題化合物為白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，8∶1∶1)Rf＝0.5。質(zhì)譜m/z 557(M-H)。
實(shí)施例9
(2S-順)-[5-琥珀酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-琥珀酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.191g，0.342mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.210g)。TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，8∶1∶1)Rf＝0.4。質(zhì)譜m/z 503(M+H)。
實(shí)施例10
(2S-順)-[5-琥珀酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(3mL)處理(2S-順)-[5-琥珀酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.208g，約0.342mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.064g(42％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.145-160℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，8∶1∶1)Rf＝0.45。質(zhì)譜m/z 446(M+H)。
實(shí)施例11
(2S-順)-[5-(N-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰-β-叔丁酯)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧腘-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰-β-叔丁酯(0.169g，0.521mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.087g，0.569mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.136g，0.711mmol)。15分鐘后加入(2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.217g，0.474mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，并允許反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)升到室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，先后用2％和5％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.224g(67％)標(biāo)題化合物為米白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.55.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.13(s，1H)，7.85(d，J＝6Hz，1H)，7.56(d，J＝5.7Hz，1H)7.23(m，5H)，7.08(m，1H)，7.00(m，2H)，5.13(m，3H)4.77(m，1H)，4.62(m，1H)，4.43(m，1H)，3.60(d，J＝16Hz，1H)，3.22(m，2H)，2.98(m，1H)，2.83(d，J＝15.3Hz，1H)，2.65&amp;2.36(AB，dd，J＝4.2，7.7，16.9Hz，2H)，2.42(m，1H)，2.10(m，1H)，1.35(s，9H)，1.24(s，9H).
實(shí)施例12
(2S-順)-[5-(N-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-(N-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰-β-叔丁酯)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.217g，0.289mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.193g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.35。質(zhì)譜m/z 652(M+H)。
實(shí)施例13
(2S-順)-[5-(N-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(2mL)處理(2S-順)-[5-(N-芐氧羰基-(S)-天冬氨酰)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.191g，0.29mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.111g(64％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.140-144℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.4。質(zhì)譜m/z 593(M-H)。
實(shí)施例14
(2S-順)-[5-二氫肉桂基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧亩淙夤鹚?0.169g，0.521mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.088g，0.576mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.127g，0.665mmol)。15分鐘后加入(2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.203g，0.443mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，并允許反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)升到室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，先后用2％和5％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.208g(79％)標(biāo)題化合物為米白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.7.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.82(s，1H)，7.72(d，J＝8.1Hz，1H)，7.19(m，5H)，7.06(m，1H)，7.01(m，2H)，6.76(d，J＝6.3，1H)，5.23(d，J＝8.4Hz，1HO，4.84(m，1H)，4.50(m，1H)，3.48(m，1H)，3.26(m，2H)，3.05(m，1H)，2.94(m，2H)，2.53(m，4H)，2.28(m，1H)，2.06(m，1H)，1.29(s，9H).質(zhì)譜m/z 591(M+H)實(shí)施例15
(2S-順)-[5-二氫肉桂酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-二氫肉桂酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.189g，0.320mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.183g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.25。質(zhì)譜m/z 535(M+H)。
實(shí)施例16
(2S-順)-[5-二氫肉桂酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(2mL)處理(2S-順)-[5-二氫肉桂酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.181g，約0.320mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.075g(47％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.78-81℃；TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.45。1H-NMR(300MHz，DMSO d6)δ8.58(m，1H)，8.30(d，J＝7.5Hz，1H)，7.24(m，5H)，7.08(m，2H)，6.99(m，1H)，5.04(d，J＝9.3Hz，1H)，4.39(m，1H)，4.19(m，1H)，3.46(m，1H)，3.05(m，2H)，2.93(d，J＝16.8Hz，2H)，2.83(m，2H)，2.00(d，J＝5.1Hz，2H).質(zhì)譜m/z 478(M+H)實(shí)施例17
(2S-順)-[5-乙酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙在室溫和氮?dú)庀孪?2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.222g，0.490mmol)的吡啶(3mL)溶液中加入乙酸酐(0.07mL，0.735mmol)。攪拌過夜后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，并蒸發(fā)成泡沫。將其溶解于乙酸乙酯，并依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到0.130g(53％)標(biāo)題化合物為米白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.55.1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.75(s，1H)，7.75(d，J＝8.4Hz，1H)，7.08(m，1H)，7.01(m，2H)，6.87(d，J＝6.3Hz，1H)，5.25(d，J＝8.1Hz，1H)，4.84(m，1H)，4.52(m，1H)，3.50(m，1H)，3.28(m，2H)，3.02(m，1H)，2.55 &amp; 2.46(AB，dd，J＝4.2，7.1，15.7Hz，2H)，2.36(m，1H)，2.18(m，1H)，2.02(s，3H)，1.31(s，9H).
實(shí)施例18
(2S-順)-[5-乙酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-乙酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.112g，0.224mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.117g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.15。質(zhì)譜m/z 445(M+H)。
實(shí)施例19
(2S-順)-[5-乙酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(2mL)處理(2S-順)-[5-乙酰氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.115g，約0.224mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.044g(51％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.210-215℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，44∶5∶1)Rf＝0.45。質(zhì)譜
(2S-順)-[5-(1-萘甲?；?氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?-萘甲酸(0.072g，0.417mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.077g，0.501mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.120g，0.626mmol)。15分鐘后加入(2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.189g，0.147mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，并允許反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)升到室溫。總共攪拌5小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用5％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.168g(66％)標(biāo)題化合物為米白色固體。m.p.103-105℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.6。質(zhì)譜m/z 613(M+H)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.09(bs，1H)，8.38(d，J＝8.4Hz，1H)，7.82-7.93(m，3H)，7.70(d，J＝6.3Hz，1H)，7.45-7.58(m，3H)，7.37(d，J＝6.6Hz，1H)，7.06-7.15(m，4H)，5.30(d，J＝8.4Hz，1H)，4.80-4.85(m，2H)，3.57(d，J＝3.6Hz，1H)，3.30-3.45(m，2H)，3.16(m，1H)，2.59-2.65(m，2H)，2.27-2.49(m，2H)，1.29(s，9H).
實(shí)施例21
(2S-順)-[5-(1-萘甲?；?氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-(1-萘甲酰基)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.106g，0.173mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次，得到標(biāo)題化合物(0.110g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.3。
實(shí)施例22
(2S-順)-[5-(1-萘甲?；?氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(3mL)處理(2S-順)-[5-(1-萘甲酰基)氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.110g，約0.173mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在硅膠(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)上進(jìn)行快速色譜純化，用5-20％甲醇-二氯甲烷梯度洗脫，得到0.076g(86％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.202-203℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，20∶1∶1)Rf＝0.3。質(zhì)譜m/z 498(M-H)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.38(bs，1H)，8.94(m，1H)，8.56(m，1H)，8.36(m，1H)，7.94-8.02(m，2H)，7.68(d，J＝6.9Hz，1H)，7.51-7.59(m，3H)，7.07-7.13(m，2H)，6.97(m，1H)，5.20(d，J＝10.5，1Hz)，4.67(m，1H)，4.15(m，1H)，3.49(m，1H)，2.95-3.23(m，2H)，2.53(m，1H)，2.22-2.34(m，2H).
實(shí)施例23
(2S-順)-[5-苯甲?；被?1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?2S-順)-[5-氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.121g，0.264mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液中先后加入三乙胺(0.055mL，0.396mmol)和苯甲酰氯(0.037mL，0.317mmol)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀，飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，依次用10％己烷-乙酸乙酯，100％乙酸乙酯和10％甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到0.073g(49％)標(biāo)題化合物為米白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.7。質(zhì)譜m/z 563(M+H)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.61(bs，1H)，7.83-7.86(m，2H)，7.47-7.53(m，3H)，7.06-7.12(m，3H)，5.30(dd，J＝2.2，7.8Hz，1H)，4.89(m，1H)，4.72(m，1H)，3.60(d，J＝16.5Hz，1H)，3.36(m，H)，3.19(m，1H)，2.69(dd，J＝4.4，11.7Hz，1H)，2.52(m，1H)，2.29(m，1H)，1.34(s，9H).
實(shí)施例24
(2S-順)-[5-苯甲?；被?1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(2S-順)-[5-苯甲酰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.064g，0.114mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(0.070g)。TLC(二氯甲烷-甲醇，4∶1)Rf＝0.4。質(zhì)譜m/z 507(M+H)。
實(shí)施例25
(2S-順)-[5-苯甲?；被?1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(3mL)處理(2S-順)-[5-苯甲?；被?1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.070g，約0.114mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在硅膠(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)上進(jìn)行快速色譜純化，先后用10％和20％的甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.042g(82％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.204-205℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇，4∶1)Rf＝0.4。質(zhì)譜m/z 448(M-H)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.84(m，1H)，8.53(m，1H)，7.91-7.95(m，2H)，7.46-7.58(m，3H)，7.11(m，2H)，6.99(t，J＝7.3Hz，1H)，5.14(d，10.2Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.23(m，1H)，3.48(m，1H)，3.12-3.18(m，2H)，2.99(m，1H)，2.58(m，1H)，2.12-2.46(m，3H).
實(shí)施例26
(3R，S-順)-[6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?3R，S-順)-6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羧酸(0.604g，1.5mmol)的二氯甲烷(12mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.282g，1.8mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.442g，3mmol)。15分鐘后加入L-天冬氨酸半卡巴腙β-叔丁酯，對甲苯磺酸鹽(0.60g，1.5mmol)和N-甲基嗎啉(0.25mL，3mmol)，并允許混合物在1小時(shí)內(nèi)升至室溫。再攪拌1小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用10％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.523g(56％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.65。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.89(m，1H)，7.72(m，1H)，7.92(d，J＝9Hz，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，1H)，7.32-7.28(m，5H)，7.12(s，1H)，7.07(d，J＝5.7Hz，2H)，6.03(d，J＝7.5Hz，1H)，5.84(d，J＝8.1Hz，1H)，5.03(s，2H)，5.01(m，1H)4.80(m，1H)，4.31(m，1H)，2.98(m，1H)，2.75-2.41(m，7H)，2.12(m，1H)，1.77(m，1H)，1.39(s，9H).
實(shí)施例27
(3R，S-順)-[6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙向(3R，S-順)-[6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羰基氨基]-4-氧-丁酸叔丁酯半卡巴腙(0.200g，0.33mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL，4.62mmol)和三氟乙酸(1mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后與二氯甲烷共沸兩次，得到標(biāo)題化合物(0.248g)。TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，8∶1∶1)Rf＝0.2。質(zhì)譜m/z 549[M-H]-。
實(shí)施例28
(3R，S-順)-[6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羰基氨基]-4-氧-丁酸用3∶1∶1的甲醇-乙酸-37％甲醛溶液(3mL)處理(3R，S-順)-[6-芐氧羰基氨基-5-氧-2，3，4，5，6，7，8-六氫-1H-吖庚因并[3，2，1-hi]喹啉-3-羰基氨基]-4-氧-丁酸半卡巴腙(0.245g，約0.33mmol)，然后將所得混合物在氮?dú)庵袛嚢?.5小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去甲醇，然后凍干剩下的混合物。粗產(chǎn)物在反相硅膠(MCI硅膠，CHP-20P，75-150微米)上進(jìn)行快速色譜純化，用10-80％甲醇-水梯度洗脫，凍干后得到0.090g(60％)標(biāo)題化合物為白色固體。m.p.120-123℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，32∶1∶1)Rf＝0.45。1H-NMR(300MHz，DMSO d6)δ8.67(m，1H)，7.79(m，1H)，7.57(m，1H)，7.37-7.27(m，5H)，7.17-7.08(m，3H)，5.44(m，1H)，4.95(s，2H)，4.70(m，1H)，4.07(m，1H)，3.92(m，1H)，3.16(m，1H)，2.98(m，1H)，2.75-2.41(m，7H)，2.25(m，1H)，2.11(m，1H)，1.29(m，1H).質(zhì)譜m/z 492(M-H)-實(shí)施例29
3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-氟-4-羥基-戊酸叔丁酯向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸(0.373g，0.98mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.151g，0.98mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.283g，1.47mmol)。15分鐘后加入按《四面體通訊(Tetrahedron Letters)》，35，pp.9693-9696(1994)所述方法制備的3-氨基-4-羥基-5-氟戊酸(0.204g，0.98mmol)，并允許混合物在1小時(shí)內(nèi)升至室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用2％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到0.383g(68％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.6。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.45-7.31(m，5H)，7.08-7.01(m，3H)，6.10(m，1H)，5.26(m，1H)，5.12(s，2H)，4.52(m，1H)，4.38-4.30(m，2H)，4.21-4.19(m，2H)，4.03-3.95(m，2H)，3.43-3.20(m，4H)，3.13(m，2H)，2.62-2.50(m，2H)，2.42(m，1H)，1.42(s，4H)，1.32(s，5H).質(zhì)譜m/z570(M+H)實(shí)施例30
3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-氟-4-氧-戊酸叔丁酯向3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-氟-4-羥基-戊酸叔丁酯(0.114g，0.20mmol)的二甲亞砜(1.3mL)溶液中加入Dess-Martin高碘(periodinane)烷(0.228g)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后再加入一批Dess-Martin高碘烷(0.135g)，2.5小時(shí)后加入第三批(0.10g)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物并用水和飽和氯化鈉溶液洗滌兩次；干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用1∶1乙酸乙酯-己烷洗脫，得到0.076g(67％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。TLC(乙酸乙酯-己烷，1∶1)Rf＝0.6。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.58(d，J＝8.4Hz，1H)，7.34-7.30(m，5H)，7.07-6.99(m，3H)，6.06(m，1H)，5.23(d，J＝12.3Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.53(d，J＝13.2Hz，1H)，4.77(d，J＝9.9Hz，2H)，4.32(m，1H)，3.44(dd，J＝5，8.4Hz，1H)，3.32-3.21(m，2H)，3.06(m，1H)，2.9(m，1H)，2.62(m，1H)，2.41(m，1H)，2.17(m，1H)，1.39(s，4H)，1.29(s，5H).
實(shí)施例31
3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-氟-4-氧-戊酸向3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-氟-4-氧-戊酸叔丁酯(0.063g，0.111mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL，4.62mmol)和三氟乙酸(1.0mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?小時(shí)后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷雕鏤兩次。粗剩余物用乙醚研磨，得到0.030g標(biāo)題產(chǎn)物為白色固體。m.p.106-107℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇-乙酸，32∶1∶1)Rf＝0.3。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.61(m，1H)，7.32(s，5H)，7.1(d，J＝4Hz，1H)，7.03(d，J＝4Hz，2H)，6.17(m，1H)，5.22(m，1H)，5.10(s，2H)，4.75-4.70(m，2H)，4.32(m，1H)，3.5(m，1H)，3.31-3.15(m，2H)，3.03(m，1H)，2.93(m，1H)，2.69(m，1H)，2.36(m，1H)，2.12(m，1H).質(zhì)譜m/z 512(M+H)實(shí)施例32
3{(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基氨基]}-5-溴-4-氧-戊酸，叔丁酯向在0℃和氮?dú)庵袛嚢璧?2S-順)-5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-甲酸(0.302g，0.797mmol)的二氯甲烷(5.5mL)溶液中加入1-羥基苯并三唑水合物(0.146g，0.96mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.230g，1.2mmol)。15分鐘后加入天冬氨酸，α-甲基，β-叔丁基二酯鹽酸鹽(0.191g，0.797mmol)，然后加入N-甲基嗎啉(0.13mL，1.2mmol)，并允許混合物在1小時(shí)內(nèi)升至室溫。攪拌過夜后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，依次用5％硫酸氫鉀和飽和氯化鈉溶液洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脫，得到0.350g(78％)N-[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]]天冬氨酸，α-甲基，β-叔丁基二酯為白色固體。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.8；m.p.147-148℃(分解)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.48(d，J＝7.5Hz，1H)，7.34-7.29(m，5H)，7.07(m，1H)，7.03-6.96(m，2H)，6.15(d，J＝5.7Hz，1H)，5.28(d，J＝7.8Hz 1H)，5.11(s，2H)，4.72(m，1H)，4.32(m，1H)，3.74(s，3H)，3.49(d，J＝16.5Hz，1H)，3.31-3.20(m，2H)，3.05(m，1H)，2.72(ABX，dd，J＝4.65，15，64.5Hz，2H)，2.43(m，1H)，2.15(m，1H)，1.30(s，9H).
往上述產(chǎn)物(0.330g，0.585mmol)的1，4-二噁烷(4.5mL)和水(1.5mL)溶液中加入1M氫氧化鋰水溶液(0.7mL，0.702mmol)，并將所得混合物在室溫和氮?dú)庵袛嚢?0分鐘。用0.1N HCl溶液將反應(yīng)混合物酸化至pH3，然后在乙酸乙酯和飽和氯化鈉溶液之間分配。水相用乙酸乙酯萃取兩次，干燥(硫酸鈉)合并的有機(jī)相并蒸發(fā)。得到0.275g(85％)N-[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]]天冬氨酸，β-叔丁酯為白色泡沫。TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.25。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.57(d，J＝7.8Hz，1H)，d7.35-7.29(m，5H)，7.08(m，1H)，7.03-6.98(m，2H)，6.24(d，J＝6Hz，1H)，5.28(d，J＝5.1Hz 1H)，5.11(s，2H)，4.73(m，1H)，4.35(m，1H)，3.48(d，J＝16.8Hz，1H)，3.36-3.20(m，2H)，3.07(m，1H)，2.76(ABX，dd，J＝4.8，18，66Hz，2H)，2.40(m，1H)，2.19(m，1H)，1.33(s，9H).
向在-10℃和氮?dú)庵袛嚢璧纳鲜霎a(chǎn)物(0.262g，0.475mmol)的四氫呋喃(3.0mL)溶液中加入N-甲基嗎啉(0.114mL，1.05mmol)，然后滴加氯甲酸異丁酯(0.107mL，0.81mmol)。40分鐘后過濾反應(yīng)混合物，用無水THF洗滌該鹽，并將濾液冷卻到0℃。用剛剛制備的重氮甲烷(過量)的醚溶液處理濾液。在0℃攪拌混合物30分鐘后滴加氫溴酸(48％wt.的水溶液)/乙酸(1.3mL，1/1)。再攪拌10分鐘后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，然后依次用飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉溶液洗滌；干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脫，得到0.200g(67％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。TLC(乙酸乙酯-己烷，1∶1)Rf＝0.7。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71(d，J＝9Hz，1H)，d7.35-7.30(m，5H)，7.09(m，1H)，7.04-7.02(m，2H)，6.1(d，J＝5.4Hz，1H)，5.28(d，J＝7.2Hz 1H)，5.12(s，2H)，4.89(dd，J＝4.5，15Hz 1H)，4.35(m，1H)，4.16(s，2H)，3.50-3.21(m，3H)，-3.06(m，1H)，2.76(ABX，dd，J＝4.65，18，103Hz，2H)，2.37(m，1H)，2.15(m，1H)，1.27(s，9H).質(zhì)譜m/z 626/628(M-H)實(shí)施例33
3[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]氨基]-5-(二苯基氧膦基)氧基-4-氧-戊酸，叔丁酯向3[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]氨基]-5-溴-4-氧-戊酸，叔丁酯(0.069g，0.110mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(1.0mL)溶液中先后加入氟化鉀(0.029g，0.495mmol)和二苯次膦酸(0.029g，0.139mmol)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?8小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，然后依次用稀碳酸氫鈉溶液和水洗滌；硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行快速色譜純化(S/P牌硅膠60A，230-400目ASTM)，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脫，得到0.048g(59％)標(biāo)題化合物為清澈的油。TLC(乙酸乙酯-己烷，2∶1)Rf＝0.3。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.89-7.80(m，4H)，7.52-7.30(m，11H)，7.06(m，1H)，7.01-6.96(m，2H)，6.45(m，1H)，5.21(m，1H)，5.13(s，2H)，4.96(dd，J＝8.3，18Hz，1H)，4.78-4.70(m，2H)，4.35(m，1H)，3.35-3.23(m，3H)，3.05(m，1H)，2.76(ABX，dd，J＝4.65，18，103Hz，2H)，2.43(m，1H)，2.18(m，1H)，1.33(s，9H).
實(shí)施例34
3[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]氨基]-5-(二苯基氧膦基)氧基-4-氧-戊酸向3[(2S-順)-[5-芐氧羰基氨基-1，2，3，4，5，6，7-六氫-4-氧吖庚因并[3，2，1-hi]吲哚-2-羰基]氨基]-5-(二苯基氧膦基)氧基-4-氧-戊酸叔丁酯(0.040g，0.054mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中先后加入茴香醚(0.5mL)和三氟乙酸(1.0mL)。在室溫和氮?dú)庵袛嚢?0分鐘后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物并蒸發(fā)，然后用二氯甲烷共沸兩次。粗剩余物用乙醚研磨，得到0.030g標(biāo)題產(chǎn)物為白色固體。m.p.109-111℃(分解)；TLC(二氯甲烷-甲醇，9∶1)Rf＝0.4。質(zhì)譜m/z 710(M+H)1H-NMR(300Mhz，CDCl3)δ7.87-7.66(m，4H)，7.60-7.28(m，11H)，7.05-6.95(m，3H)，6.84(m，1H)，5.12(s，2H)，5.05(m，1H)，4.58(m，1H)，4.42-4.15(m，4H)，3.35-3.10(m，4H)，3.05(m，1H)，2.76(m，1H)，2.56(m，1H)，2.37(m，1H)，2.13(m，1H)，1.93(bs，1H).
權(quán)利要求
1.式1化合物或其可藥用鹽，
其中n是1或2；m是1或2；A是R2CO-，R3-O-CO-或R4SO2-；下式基團(tuán)
上面各式中R1是氫原子，烷基或苯基烷基；R2是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R3是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R4是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R5是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R6是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R7是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R8是選自天然或非天然氨基酸的氨基酸側(cè)鏈；B是氫原子，氘原子，烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基，(雜芳基)烷基或鹵代甲基；式-CH2XR9基團(tuán)，其中R9是苯基，取代的苯基，苯基烷基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；及X是氧或硫原子；式-CH2-O-CO-(芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-CO-(雜芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-PO-(R10)R11基團(tuán)，其中R10和R11分別選自烷基，環(huán)烷基，苯基，取代的苯基，苯基烷基和(取代的苯基)烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中n為1。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中m為1。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中B為氫原子。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中A為R2CO-基團(tuán)。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R2為2-(羧基)乙-1-基，2-(苯基)乙-1-基，甲基，萘-1-基，或苯基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R1為氫原子。
8.權(quán)利要求4的化合物，其中A為式R5-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R5是甲基，R8為式-CH2COOH基團(tuán)。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R1為氫原子。
10.權(quán)利要求4的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1為氫原子。
12.權(quán)利要求4的化合物，其中A為式R6-O-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R6是芐基，R8為式-CH2COOH基團(tuán)。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中R1為氫原子。
14.權(quán)利要求3的化合物，其中B為-CH2F。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中R1為氫原子。
17.權(quán)利要求3的化合物，其中B為-CH2-O-PO-(R10)R11。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R10和R11各為苯基。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中R1為氫原子。
21.權(quán)利要求1的化合物，其中n為2。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中m為1。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中B為氫原子。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中R1為氫原子。
26.含有式1化合物及可藥用載體的藥物組合物，
其中n是1或2；m是1或2；A是R2CO-，R3-O-CO-或R4SO2-；下式基團(tuán)
上面各式中R1是氫原子，烷基或苯基烷基；R2是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R3是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R4是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R5是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R6是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基烷基或(取代的苯基)烷基；R7是烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；R8是選自天然或非天然氨基酸的氨基酸側(cè)鏈；B是氫原子，氘原子，烷基，環(huán)烷基，(環(huán)烷基)烷基，苯基，苯基烷基，取代的苯基，(取代的苯基)烷基，雜芳基，(雜芳基)烷基或鹵代甲基；式-CH2XR9基團(tuán)，其中R9是苯基，取代的苯基，苯基烷基，(取代的苯基)烷基，雜芳基或(雜芳基)烷基；及X是氧或硫原子；式-CH2-O-CO-(芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-CO-(雜芳基)基團(tuán)；式-CH2-O-PO-(R10)R11基團(tuán)，其中R10和R11分別選自烷基，環(huán)烷基，苯基，取代的苯基，苯基烷基和(取代的苯基)烷基。
27.權(quán)利要求26的藥物組合物，其中n為1。
28.權(quán)利要求27的藥物組合物，其中m為1。
29.權(quán)利要求28的藥物組合物，其中B為氫原子。
30.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中A為R2CO-基團(tuán)。
31.權(quán)利要求30的藥物組合物，其中R2為2-(羧基)乙-1-基，2-(苯基)乙-1-基，甲基，萘-1-基，或苯基。
32.權(quán)利要求31的藥物組合物，其中R1為氫原子。
33.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中A為式R5-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R5是甲基，R8為式-CH2COOH基團(tuán)。
34.權(quán)利要求33的化合物，其中R1為氫原子。
35.權(quán)利要求29的化合物，其中A為式R6-O-CO-NH-CHR8-CO-基團(tuán)，其中R6是芐基，R8為式-CH2COOH基團(tuán)。
36.權(quán)利要求35的化合物，其中R1為氫原子。
37.權(quán)利要求28的化合物，其中B為-CH2F。
38.權(quán)利要求37的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
39.權(quán)利要求38的化合物，其中R1為氫原子。
40.權(quán)利要求28的化合物，其中B為-CH2-O-PO-(R10)R11。
41.權(quán)利要求40的化合物，其中R10和R11各為苯基。
42.權(quán)利要求41的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
43.權(quán)利要求42的化合物，其中R1為氫原子。
44.權(quán)利要求26的化合物，其中n為2。
45.權(quán)利要求44的化合物，其中m為1。
46.權(quán)利要求28的化合物，其中B為氫原子。
47.權(quán)利要求46的化合物，其中A為R3-O-CO-基團(tuán)，其中R3是芐基。
48.權(quán)利要求47的化合物，其中R1為氫原子。
49.一種治療自身免疫疾病的方法，包括給需要這種治療的患者施用有效量的權(quán)利要求26的藥物組合物。
50.一種治療炎癥的方法，包括給需要這種治療的患者施用有效量的權(quán)利要求26的藥物組合物。
51.一種治療神經(jīng)變性疾病的方法，包括給需要這種治療的患者施用有效量的權(quán)利要求26的藥物組合物。
52.一種預(yù)防患有局部缺血損傷相關(guān)疾病患者的局部缺血損傷的方法，包括給需要這種治療的患者施用有效量的權(quán)利要求26的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及新三環(huán)ICE/ced－3類抑制劑化合物。本發(fā)明還涉及這種三環(huán)化合物的藥物組合物,以及這些組合物在治療患有炎癥,自身免疫和神經(jīng)變性疾病的患者以及預(yù)防局部缺血損傷方面的用途。
文檔編號(hào)A61K31/40GK1207101SQ97191612
公開日1999年2月3日 申請日期1997年9月12日 優(yōu)先權(quán)日1997年9月12日
發(fā)明者D·S·卡拉尼斯基, S·D·林頓 申請人:伊鄧藥品公司