專利名稱：：含有黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的抗癌增效劑的制作方法抗癌增效劑本發(fā)明涉及的是一種含有黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的抗癌增效劑，其雖特別適合作為與抗癌藥物順鉑聯(lián)合使用的抗癌增效劑，但也可以作為與其它化學(xué)抗癌藥或放射治療聯(lián)合使用的抗癌增效劑?？Х纫?1，3，7-三甲基黃嘌呤)、茶堿(1，3，-二甲基黃嘌呤)及柯柯堿(3，7-二甲基黃嘌呤)等黃嘌呤甲基衍生物，作為臨床上常用的精神興奮藥物和利尿藥物已很久了。但其可對(duì)化學(xué)抗癌藥物具有的增效作用是近些年才被發(fā)現(xiàn)的。如，對(duì)咖啡因，及含有茶堿的茶葉等可具有良好的抗癌輔助作用和效果已多有報(bào)導(dǎo)，特別是對(duì)其中咖啡因的研究較為深入。現(xiàn)已有細(xì)胞學(xué)的實(shí)驗(yàn)報(bào)導(dǎo)證實(shí)，咖啡因在與鉑類或烷化劑等抗癌藥物聯(lián)合使用時(shí)，可通過(guò)抑制被化療藥物損害后的細(xì)胞的DNA的修復(fù)而發(fā)揮抗癌增效作用的。但另一方面，這些黃嘌呤甲基衍生物，特別是其中的咖啡因，又是眾所周知具有很強(qiáng)的中樞興奮作用的藥物，其小劑量時(shí)可興奮大腦皮層及收縮腦內(nèi)小動(dòng)脈；大劑量時(shí)能興奮延腦呼吸中樞、血管運(yùn)動(dòng)中樞和迷走中樞；過(guò)量時(shí)可興奮脊髓，引起驚厥和肌肉震顫。當(dāng)其作為抗癌增效劑使用時(shí)，由目前的試驗(yàn)和研究可知，增大劑量可提高其抗癌增效的效果。而此時(shí)所不需要但又為其本身所固有的強(qiáng)烈的精神興奮作用所帶來(lái)的中樞興奮、躁動(dòng)不安、呼吸加快、肌肉震顫、心動(dòng)過(guò)速和期外收縮等副作用也必然隨之增大。因此，當(dāng)輔助使用咖啡因作為抗癌增效劑時(shí)，在研究和探索其最佳增效用量的同時(shí)，盡量減少和克服因其強(qiáng)烈精神興奮作用所帶來(lái)的副作用及影響也是不容忽視和需要解決的一個(gè)重要問(wèn)題。本發(fā)明的目的是針對(duì)上述問(wèn)題，在研究和探索使用這些黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分，特別是其中咖啡因的最佳抗癌增效用量的同時(shí)，為盡量減少和克服因其強(qiáng)烈的精神興奮作用所帶來(lái)的副作用及影響而提供一種含黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的抗癌增效劑。由目前對(duì)其抗癌增效作用機(jī)理的研究可知，本發(fā)明的這一抗癌增效劑雖特別適合作為與抗癌藥物順鉑聯(lián)合使用的抗癌增效劑，但顯然也可以作為與其它化學(xué)抗癌藥或放射治療聯(lián)合使用的抗癌增效劑。本發(fā)明所說(shuō)的含有黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分，特別是含咖啡因的抗癌增效劑，是以黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分和巴比妥類化合物為有效藥物組分，其重量組成比例為黃嘌呤甲基衍生物∶巴比妥類化合物＝(4～12)∶1，必要時(shí)可加入藥物制劑允許其它的輔助添加成分，如常用的賦型劑、填充分散劑、崩解劑、矯味劑等輔助添加成分。其中所說(shuō)的黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分可為咖啡因、茶堿或柯柯堿中的任何一種。巴比妥類化合物屬于巴比妥酸的衍生物或其鹽類化合物，隨著其結(jié)構(gòu)中取代基和/或是否成鹽，本發(fā)明中所說(shuō)的這類化合物可以有常用的巴比妥、苯巴比妥(鈉)、異戊巴比妥、戊巴比妥(鈉)，以及速可眠等，其均具有與所說(shuō)的黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分，特別是其中的咖啡因的精神興奮作用相對(duì)抗的中樞抑制和鎮(zhèn)靜作用。上述的幾種黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分，特別是其中咖啡因與這類巴比妥類化合物的重量組成在上述的比例范圍內(nèi)，均可同時(shí)具有抗癌增效作用和抑制中樞興奮的副作用的雙重效果。其中尤以采用比例≥8∶1時(shí)為好，通常在比例(8～9)∶1時(shí)即可有較為滿意的效果。在研究實(shí)驗(yàn)中，首先以咖啡因?yàn)槔?，由咖啡因與常用的苯巴比妥以不同組成比例所成的抗癌增效劑與抗癌藥順鉑聯(lián)合應(yīng)用，進(jìn)行了藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，以確定其有效和最佳的組成比例及用藥量。實(shí)驗(yàn)方法為將Hela細(xì)胞株在RPMI1640培養(yǎng)基(美國(guó)GIBCO)中培養(yǎng)后轉(zhuǎn)移到96孔板，細(xì)胞濃度為30萬(wàn)/毫升，設(shè)4組以不同組成比例的本發(fā)明抗癌增效劑與順鉑同時(shí)使用的實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)1～4組所用的抗癌增效劑中咖啡因與苯巴比妥的組成比例分別為2∶1；4∶1；8∶1和12∶1，并設(shè)置只單用順鉑的對(duì)照組。于CO2孵箱中培養(yǎng)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，并用二種檢測(cè)手段(活細(xì)胞計(jì)數(shù)和MTT測(cè)定法)進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，由咖啡因與苯巴比妥以不同組成比例所成的本發(fā)明抗癌增效劑均能增加順鉑對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，且其抗癌增效作用隨咖啡因比例的增大而增強(qiáng)。由表1的結(jié)果顯示，其中咖啡因的比例以≥8為佳。由于使用中咖啡因強(qiáng)烈的精神興奮作用是不需要，但又是不可避免而同時(shí)存在的副作用，為考察其隨使用量的變化關(guān)系，以及在本發(fā)明抗癌增效劑中的巴比妥類化合物對(duì)其副作用的對(duì)抗效果，取小鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只，各組以按等體積灌胃給藥的方式進(jìn)行了對(duì)照實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)1～3組均單用咖啡因，其咖啡因濃度分別為25、50和75(毫克/千克)，對(duì)照組為按咖啡因∶苯巴比妥＝50毫克∶6毫克/千克給藥。給藥后立即觀察，并連續(xù)觀察7天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果參見(jiàn)表2。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果清楚顯示，實(shí)驗(yàn)組中咖啡因的精神興奮副作用隨其使用量的增大在明顯增大，而使用同時(shí)含有苯巴比妥成分的本發(fā)明增效劑的對(duì)照組則能明顯對(duì)抗咖啡因的精神興奮副作用，達(dá)到增加咖啡因用量但副作用較小的使用效果。為進(jìn)一步考察各種巴比妥類會(huì)化合物在本發(fā)明抗癌增效劑中使用時(shí)對(duì)其抗癌增效作用的影響，對(duì)由咖啡因與不同巴比妥類化合物組成的本發(fā)明的抗癌增效劑進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)將Hela細(xì)胞株在RPMI1640培養(yǎng)基(美國(guó)GIBCO)中培養(yǎng)后轉(zhuǎn)移到96孔板，細(xì)胞濃度為30萬(wàn)/毫升。實(shí)驗(yàn)組加入順鉑和由咖啡因與不同巴比妥類化合物按8∶1比例組成形式的本發(fā)明抗癌增效劑，并設(shè)置單用順鉑的對(duì)照組，于CO2孵箱中培養(yǎng)。用活細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)定法進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，由不同巴比妥類化合物按同一組成比例所成的本發(fā)明的抗癌增效劑與順鉑聯(lián)合使用時(shí)均可明顯提高對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，在上述的實(shí)驗(yàn)條件下，以實(shí)驗(yàn)1組的增效效果最佳，但適當(dāng)調(diào)整咖啡因與其它巴比妥類化合物的組成比例后，其可具有更為滿意的增效效果。對(duì)本發(fā)明的抗癌增效劑進(jìn)一步進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)，以檢驗(yàn)與順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的抗癌增效效果。將Hela細(xì)胞株在RPMI1640培養(yǎng)基(美國(guó)GIBCO)中培養(yǎng)后轉(zhuǎn)移到96孔板，細(xì)胞濃度為30萬(wàn)/毫升，以單用不同濃度順鉑作為對(duì)照的對(duì)照組，對(duì)照1～3組的順鉑濃度(微克/毫升)分別為1.25、0.625和0.3125；實(shí)驗(yàn)1～3組分另為在上述相應(yīng)順鉑濃度的基礎(chǔ)上均按250微克/毫升同時(shí)加入本發(fā)明抗癌增效劑(均為采用上述8∶1的比例組成形式)，于CO2孵箱中培養(yǎng)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，并用二種檢測(cè)手段(活細(xì)胞計(jì)數(shù)和MTT測(cè)定法)進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4。表4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明的抗癌增效劑可顯著增強(qiáng)順鉑的細(xì)胞毒作用，聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可使相同劑量時(shí)的順鉑對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用增強(qiáng)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，與對(duì)照組的結(jié)果間有顯著差異(P＜0.01)。用MTT法測(cè)定的面積圖結(jié)果還同時(shí)顯示出，本發(fā)明的抗癌增效劑單獨(dú)使用時(shí)并無(wú)細(xì)胞殺傷作用，只有在與抗癌藥順鉑聯(lián)合使用時(shí)才顯示出如表4所示的這一顯著增強(qiáng)順鉑細(xì)胞毒的作用。在以咖啡因作為黃嘌呤甲基衍生物成分代表的上述實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，又分別對(duì)由茶堿和柯柯堿兩種黃嘌呤甲基衍生物成分與苯巴比妥組合所成的本發(fā)明抗癌增效劑進(jìn)行了抗癌增效效果的對(duì)比實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法同樣為將Hela細(xì)胞株在RPMI1640培養(yǎng)基(美國(guó)GIBCO)中培養(yǎng)后轉(zhuǎn)移到96孔板，細(xì)胞濃度為30萬(wàn)/毫升。實(shí)驗(yàn)組分別加入順鉑和由咖啡因、茶堿及柯柯堿與苯巴比妥按8∶1比例分別所成的本發(fā)明的抗癌增效劑，并設(shè)置單用順鉑的對(duì)照組，于CO2孵箱中培養(yǎng)。用活細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)定法進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以咖啡因、茶堿或柯柯堿等不同的黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分構(gòu)成的本發(fā)明抗癌增效劑均可具有較好的抗癌增效效果，且在均采用與苯巴比妥以8∶1比例組成的形式下，表5的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以咖啡因組的抗癌增效效果最佳。在對(duì)本發(fā)明抗癌增效劑的抗癌增效作用進(jìn)行上述藥效學(xué)和細(xì)胞學(xué)的研究和考察的同時(shí)，還進(jìn)行了動(dòng)物急性毒性實(shí)驗(yàn)。將體重為18-21克的昆明種小鼠50只隨機(jī)分為5組，每組10只。各組按0.2毫升/10克的量等體積灌胃給予不同濃度的本發(fā)明抗癌增效劑，給藥后立即觀察，并連續(xù)觀察7天，測(cè)定其LD50。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表6。給藥后，有些動(dòng)物出現(xiàn)躁動(dòng)、興奮，甚至抽搐等現(xiàn)象，死亡動(dòng)物在給藥后一日內(nèi)死亡，其余動(dòng)物第二日后恢復(fù)正?；顒?dòng)。經(jīng)Bliss法計(jì)算結(jié)果，本發(fā)明抗癌增效劑的LD50為387.91毫克/千克，其95％的置信限為354.98～423.90毫克/千克。上述實(shí)驗(yàn)清楚顯示，以黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分和巴比妥類化合物為有效藥物組分所構(gòu)成的本發(fā)明抗癌增效劑在與抗癌藥物順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可具有顯著的抗癌增效作用。在研究增大及探索咖啡因等黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的最佳增效用量的同時(shí)，還達(dá)到了盡量減少和克服其在發(fā)揮抗癌增效作用的同時(shí)因其強(qiáng)烈的精神興奮作用所帶來(lái)的副作用和不良影響，增大了其在發(fā)揮抗癌增效作用時(shí)的使用安全性和適用范圍，具有療效確切和毒性小的顯著特點(diǎn)。由目前對(duì)其作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)和研究可知，本發(fā)明的這一抗癌增效劑除可與順鉑藥物聯(lián)合應(yīng)用外，在與其它抗癌藥物的化療及放射治療中聯(lián)合應(yīng)用，同樣會(huì)具有相應(yīng)的抗癌增效作用，在提高癌癥治療效果中具有不可忽視的價(jià)值和前景。表1藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)的Hela細(xì)胞死亡時(shí)間</tables>表2苯巴比妥對(duì)抗咖啡因副作用的實(shí)驗(yàn)</tables>表3不同組成形式抗癌增效劑的Hela細(xì)胞死亡時(shí)間表4細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)的Hela細(xì)胞死亡時(shí)間表5含不同黃嘌呤甲基衍生物增效劑的抗癌增效實(shí)驗(yàn)</tables>表6急性毒性實(shí)驗(yàn)及LD50測(cè)定</tables>權(quán)利要求1.一種含有黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的抗癌增效劑，其特征在于由黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分和巴比妥類化合物為有效藥物組分，其重量組成比例為黃嘌呤甲基衍生物∶巴比妥類化合物＝(4～12)∶1，必要時(shí)可加入藥物制劑允許的其它輔助添加成分。2.如權(quán)利要求1所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分的重量組成比例為黃嘌呤甲基衍生物∶巴比要類化合物≥8∶1。3.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的黃嘌呤甲基衍生物為咖啡因。4.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的黃嘌呤甲基衍生物為茶堿。5.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的黃嘌呤甲基衍生物為柯柯堿。6.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的巴比妥類化合物為苯巴比要或其鈉鹽。7.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的巴比妥類化合物為巴比妥。8.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的巴比妥類化合物為戊巴比妥鈉。9.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的巴比妥類化合物為異戊巴比妥。10.如權(quán)利要求1或2之一所述的抗癌增效劑，其特征在于所說(shuō)的有效藥物組分中的巴比妥類化合物為速可眠。全文摘要本發(fā)明涉及的是含有黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分的抗癌增效劑,由黃嘌呤甲基衍生物類精神興奮成分和巴比妥類化合物為有效藥物組分,其重量組成比例為:黃嘌呤甲基衍生物∶巴比妥類化合物=(4～12)∶1,必要時(shí)可加入藥物制劑允許的其它輔料添加成分。文檔編號(hào)A61P35/00GK1175415SQ9710766公開(kāi)日1998年3月11日申請(qǐng)日期1997年9月4日優(yōu)先權(quán)日1997年9月4日發(fā)明者殷勁申請(qǐng)人:殷勁