本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)涉及一種高粱根提取物，同時(shí)還涉及該高粱根提取物的制備方法，及該高粱根提取物用于制備治療血管內(nèi)栓塞或血栓、預(yù)防中風(fēng)或其它血栓性疾病藥物中的用途。

背景技術(shù)：

高粱根為禾本科高粱屬植物高粱sorghomvulgarepers.的根，是一種傳統(tǒng)的中草藥，在《本草綱目》、《中藥大辭典》、《中華本草》等中醫(yī)藥典籍中均有記載。其性味甘、平、無(wú)毒；有平喘、利尿，通絡(luò)等功效，可用于治療咳嗽喘滿(mǎn)，小便不利，足膝疼痛等癥。在貴州民間也多有應(yīng)用，《貴州草藥》中也記載高粱根有平喘，利尿；治咳嗽喘瀾，胃氣疼痛等功效。同時(shí)還附有“清熱利濕，消腫止痛，安神定志”功效的藥方（李時(shí)珍.本草綱目1(谷部第二十三卷)[m].北京:中國(guó)國(guó)際廣播出版社:1994:1626；南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典下冊(cè)[m].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社(第二版),2006:2685；宋立人,胡烈,章國(guó)鎮(zhèn),等.中華本草[m].上海:上?？萍汲霭嫔?1999:426；貴州省中醫(yī)研究所編.貴州草藥[m].貴州:貴州人民出版社,1970:1014.）。而高粱根在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上常被作為廢料丟棄，農(nóng)戶(hù)多將其焚燒，不僅造成空氣污染，而且其中所含有效成分沒(méi)有被利用而造成極大浪費(fèi)。目前對(duì)它的開(kāi)發(fā)利用非常有限，僅少量入藥，大部分被白白丟棄。有關(guān)高粱根的化學(xué)成分及現(xiàn)代藥理研究也少見(jiàn)報(bào)道，目前只有關(guān)于高粱根提取物在制備治療呼吸系統(tǒng)疾病藥物中的用途，尤其是在制備鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘藥物中的用途的報(bào)道，如中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?01210102842.9]，公開(kāi)了一種高粱根提取物及其制備方法和用途。目前國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有對(duì)高粱根提取物及其制備方法和抗凝血作用的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供的一種抗凝血效果好、安全性高，價(jià)格低廉，制備方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低的高粱根提取物。

本發(fā)明的目的提供該高粱根提取物的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供該高粱根提取物用于制備治療血管內(nèi)栓塞或血栓、預(yù)防中風(fēng)或其它血栓性疾病藥物中的用途。

本發(fā)明目的及解決其主要技術(shù)問(wèn)題是采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明的一種高粱根提取物，是將高粱根用水提取，過(guò)濾，濾液濃縮至流浸膏，加入食用酒精，靜置，過(guò)濾，濾液濃縮，干燥得到高粱根提取物。

本發(fā)明的一種高粱根提取物的制備方法，包括以下步驟：

（1）干燥高粱根鍘成小段，加水提取，提取溫度為70～100℃，料液重量比為1:8～1:12，提取1～3次，每次1.5～3h，合并水煎液并濃縮至流浸膏；

（2）加入食用酒精至醇終濃度為60%～80%，靜置12～24h，過(guò)濾，濾液濃縮，干燥得到高粱根提取物。

本發(fā)明的高粱根提取物在制備治療血管內(nèi)栓塞或血栓形成的疾病，預(yù)防中風(fēng)或其它血栓性疾病藥物中的用途。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有明顯的有益效果，從以上技術(shù)方案可知：本發(fā)明的高粱根提取物有效性、安全性高，價(jià)格低廉，制備方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低。藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明：高粱根提取物藥物具有抗凝血的作用，可用于制備治療血管內(nèi)栓塞或血栓形成的疾病，預(yù)防中風(fēng)或其它血栓性疾病的藥物。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種高粱根提取物的制備方法，包括：干燥高粱根鍘成小段，加水提取，提取溫度為70℃，料液重量比為1:12，提取3次，每次1.5h，合并水煎液并濃縮至流浸膏，加入食用酒精至醇終濃度為60%，靜置12～24h，過(guò)濾，濾液濃縮，得到干燥浸膏即為高粱根提取物。

實(shí)施例2

一種高粱根提取物的制備方法，包括：干燥高粱根鍘成小段，加水提取，提取溫度為85℃，料液重量比為1:12，提取2次，每次3h，合并水煎液并濃縮至流浸膏，加入食用酒精至醇終濃度為70%，靜置12～24h，過(guò)濾，濾液濃縮，得到干燥浸膏即為高粱根提取物。

實(shí)施例3

一種高粱根提取物的制備方法，包括：干燥高粱根鍘成小段，加水提取，提取溫度為100℃，料液重量比為1:10，提取2次，每次2h，合并水煎液并濃縮至流浸膏，加入食用酒精至醇終濃度為80%，靜置12～24h，過(guò)濾，濾液濃縮，得到干燥浸膏即為高粱根提取物。

試驗(yàn)例：高粱根提取物抗凝血作用的藥效學(xué)試驗(yàn)

1、高粱根提取物對(duì)小鼠出血時(shí)間（bt）的影響

取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組、云南白藥組（0.5g/kg）、高粱根提取物高、中、低劑量組（8.0g，4.0，2.0g/kg）。將各組灌胃給藥7d，0.2ml/10g，一日一次，末次給藥30min后，分別減去各鼠尖1.5cm，血液流出時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，用濾紙蘸血，每30s進(jìn)行1次，以血液流出至濾紙上血跡消失的時(shí)間為出血時(shí)間，結(jié)果見(jiàn)表1。

2、高粱根提取物對(duì)小鼠凝血時(shí)間（ct）的影響

分組、給藥濃度及時(shí)間同“高粱根提取物對(duì)小鼠出血時(shí)間（bt）的影響”部分。末次給藥30min，小鼠眼內(nèi)眥球后靜脈叢取血，深約4mm，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)再縮回。自血液流入管內(nèi)開(kāi)始計(jì)時(shí)，待血液注滿(mǎn)后，取出毛細(xì)玻璃管平放于桌面，每隔30s折斷毛細(xì)管兩端各約0.5cm，并緩慢向左右拉開(kāi)，觀(guān)察折斷處是否有血凝絲，直至出現(xiàn)血凝絲為止，所歷時(shí)間即為凝血時(shí)間，結(jié)果見(jiàn)表1。

3、高粱根提取物對(duì)小鼠耳廓微動(dòng)脈口徑的影響

分組、給藥濃度及時(shí)間同“高粱根提取物對(duì)小鼠出血時(shí)間（bt）的影響”部分。末次給藥30min后，腹腔注射0.6%戊巴比妥鈉溶液麻醉小鼠，用醫(yī)用膠布將已麻醉的小鼠耳廓上的毛黏除，將其俯視固定于觀(guān)察臺(tái)，調(diào)節(jié)觀(guān)測(cè)儀的光源亮度及觀(guān)察臺(tái)位置，用50倍鏡通過(guò)顯示屏測(cè)量小鼠耳廓微動(dòng)脈口徑，結(jié)果見(jiàn)表1。

由表1結(jié)果可知，與空白對(duì)照組比較，高粱根提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠的出血時(shí)間（p<0.01）和凝血時(shí)間（p<0.05）、擴(kuò)張耳廓微動(dòng)脈口徑（p<0.01）；說(shuō)明其具有抗凝血作用，且能有效地改善小鼠耳廓微循環(huán)。

4、高粱根提取物對(duì)小鼠血漿復(fù)鈣時(shí)間的影響

昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組、華法林鈉組（0.80mg/kg）、高粱根提取物高、中、低劑量組（8.0g，4.0，2.0g/kg）。除華法林鈉組第5天開(kāi)始ig給藥外，其他組連續(xù)灌胃給藥7d，0.2ml/10g，每日一次，末次給藥40min后，股動(dòng)脈取血0.9ml于加有枸櫞酸鈉溶液的刻度試管中，加生理鹽水0.2ml，以1000r/min離心10min。取上清（無(wú)鈣血漿）0.2ml于試管中，置37℃水浴溫育1min后。加入2.8mg/mlcacl2水溶液0.2ml，混勻后計(jì)時(shí)，30s后每隔10s緩慢傾斜試管1次，觀(guān)察血漿是否凝固，記錄小鼠血漿復(fù)鈣時(shí)間。結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，高粱根提取物各個(gè)劑量均有顯著延長(zhǎng)小鼠血漿復(fù)鈣時(shí)間的作用（p<0.05）。

5、高粱根提取物對(duì)大鼠凝血功能的影響

選取健康sd大鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分成6組，每組8只，分別為空白對(duì)照組、模型組、阿司匹林組（16.8mg/kg）、華法林鈉組（0.56mg/kg）、高粱根提取物高、中、低劑量（5.6，2.8，1.4g/kg）。除華法林鈉組第5d開(kāi)始灌胃給藥外，其他組連續(xù)灌胃給藥4d，第5、6、7d灌胃給藥30min后，除空白對(duì)照組外，其他各組鼠均皮下注射0.02%鹽酸腎上腺素注射液0.1ml，造成血瘀癥模型。第7d皮下注射腎上腺素0.5h后，腹腔注射3%戊巴比妥鈉溶液，按45mg/kg麻醉大鼠，下腔靜脈穿刺取血6ml，0.109mol/l枸櫞酸鈉抗凝管抗凝（9:1），取3ml抗凝血液，以3000r/min離心10min，分離血漿備用。按各測(cè)試試劑盒的要求進(jìn)行凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、凝血酶時(shí)間、纖維蛋白原的檢測(cè)，測(cè)試在靜脈穿刺2h內(nèi)完成。另外3ml用于血小板聚集率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。

為模擬動(dòng)物交感神經(jīng)興奮時(shí)，腎上腺素分泌增多的現(xiàn)象，采用短期皮下注射腎上腺素進(jìn)行氣滯血瘀癥的造模。模型組與空白對(duì)照組比較，雖然凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、凝血酶時(shí)間無(wú)明顯改變，但纖維蛋白原含量顯著升高（p<0.05），說(shuō)明形成纖維蛋白單體的機(jī)會(huì)增多，促使血凝過(guò)程和血栓形成，使凝血功能異常，血瘀癥模型復(fù)制成功。高粱根提取物高、中劑量組均能顯著延長(zhǎng)凝血酶原時(shí)間（p<0.05），說(shuō)明二者能通過(guò)影響外源性凝血途徑的凝血酶原、凝血因子v、vii、x的活性產(chǎn)生抗凝血作用，且均有顯著延長(zhǎng)活化部分凝血活酶時(shí)間的作用（p<0.01），表明高粱根提取物能通過(guò)影響內(nèi)源性凝血系統(tǒng)以及血漿中凝血因子viii、ix、xi、xii的活性產(chǎn)生抗凝血作用；高粱根提取物能延長(zhǎng)凝血酶時(shí)間（p<0.05），說(shuō)明能較好的降低凝血過(guò)程中纖維蛋白原的利用度。

6、高粱根提取物對(duì)二磷酸腺苷誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集的影響

將血小板聚集儀打開(kāi)，待溫度上升至37℃，可以開(kāi)始檢測(cè)。取0.109mol/l枸櫞酸鈉抗凝血3ml，以1500r/min離心6min，取上層清液得富血小板血漿,再以3000r/min離心10min，取上層清液得乏血小板血漿。打開(kāi)血小板聚集儀系統(tǒng)控制軟件，按下聚集儀通道一按鈕，將裝有270μl乏血小板血漿的比色杯放入一號(hào)孔，儀器顯示p值，此步驟為調(diào)零，再按一下按鈕，將裝有270μl富血小板血漿和攪拌子的的比色杯放入孔內(nèi)，此刻顯示r值，再按一下按鈕，向比色杯中加入3mmol/l的二磷酸腺苷5μl，按一下按鈕，聚集儀開(kāi)始記錄聚集率。3h以?xún)?nèi)完成，結(jié)果見(jiàn)表4。

與空白對(duì)照組比較，大鼠腎上腺素血瘀模型組對(duì)二磷酸腺苷誘導(dǎo)的血小板最大聚集率顯著升高；高粱根提取物中、低劑量對(duì)腎上腺素血瘀模型大鼠血小板聚集率升高具有顯著的抑制作用，抑制率分別達(dá)到37.0%、40.7%，高劑量也對(duì)血小板聚集有一定的抑制作用。同時(shí)發(fā)現(xiàn)高粱根提取物隨著給藥劑量的加大，最大聚集抑制率反而下降，提示其含有多種影響血小板聚集的成分，且作用效果相反，低劑量時(shí)，抑制血小板聚集的成分的作用占有優(yōu)勢(shì)，表現(xiàn)出對(duì)血瘀模型大鼠血小板聚集性升高的抑制作用，隨著劑量的加大，促進(jìn)血小板聚集的成分的作用優(yōu)勢(shì)凸顯出來(lái)，表現(xiàn)為促進(jìn)血小板的聚集。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。