專利名稱::常春藤皂苷元及其衍生物用于制備抗抑郁產(chǎn)品的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明涉及醫(yī)藥和食品等
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體地說是涉及中藥提取物的用途,更具體地說是涉及中藥預(yù)知子提取物常春藤皂苷元及其衍生物用于制備抗抑郁產(chǎn)品的用途。
背景技術(shù):
:(一)常春藤皂苷元的研究概況1、木通木通為落葉或半常綠藤木。掌狀復(fù)葉互生,小葉5,倒卵形或長倒卵形,長36cm,先端圓、微凹或有短尖,全緣?;▎涡酝辏偁罨ㄐ蛞干?;雌花生于花序上部,花被片3,淡紫色,雄蕊6,雌花生于花序下部,花被3,退化雄蕊6,雌蕊6。果實肉質(zhì),長橢圓形,兩端圓形,成熟時沿腹縫線開裂。花期45月,果期8月。生于山林灌叢。主產(chǎn)江蘇、湖南、湖北、四川、浙江、安徽。夏、秋二季果實綠黃時采收,曬干,或置沸水中略燙后曬干。性味性寒,味苦。歸肝、膽、胃、膀胱經(jīng)。舒肝理氣,活血止痛,利尿,殺蟲。用于脘脅脹痛、經(jīng)閉痛經(jīng)、小便不利、蛇蟲咬傷。用量39g。2、預(yù)知子中藥預(yù)知子(i^c加JfeWae),英文名稱AkebiaFruit,別名八月炸、八月扎、野香蕉,異名盍合子、仙沼子(《日華子本草》),壓驚子(《醫(yī)林纂要》),為木通科植物木通v^eWa《w/"ato(Thunb.)Decne.、三卩十木通(Thunb.)Koidz.或白木通爿A;e6/a(Thunb.)Koidz.iw:tmWrafo(Diels)Rehd.的干燥近成熟果實,置通風(fēng)干燥處。本品呈腎形或長橢圓形,稍彎曲,長39cm,直徑1.53.5cm。表面黃棕色或黑褐色,有不規(guī)則的深鮍紋,頂端鈍圓,基部有果梗痕。質(zhì)硬,破開后,果瓤淡黃色或黃棕色;種子多數(shù),扁長卵形,黃棕色或此褐色,具光澤,有條狀紋理。氣微香,味苦。預(yù)知子含木通皂甙A、木通皂甙B、木通皂甙C、木通皂甙D、木通皂甙E、木通皂甙F、木通皂甙G等,其皂甙元均為常春藤皂甙元。另含油酸甘油酯、亞麻酸甘油酯等。主治①精神病(心氣不足,精神恍惚,語言錯妄,忪悸煩郁,憂悉慘戚,喜怒多風(fēng)扇,健忘少睡,夜多異夢,狂不知人)。用預(yù)知子(去皮)、白茯苓、枸杞子石草蒲、茯神、柏子仁、人胡、地骨皮、遠(yuǎn)志、山藥、黃精(蒸熟)、朱砂(水飛),等分為末,加煉蜜和成丸子,發(fā)芡子大。每嚼服一丸,人參湯送人。②癘風(fēng)(眉落、聲變)。用預(yù)知子、雄璜各二兩,共研為末。另以乳香三兩,同水一斗,煮成五升后,加入藥末熬成膏,收存瓶。生前了一匙,溫酒調(diào)下。3、常春藤皂苷元常春藤皂苷元(hederagenin)及其糖苷在自然界分布相對較廣,但是其在植物中含量一般較低,而含量相對高的植物則相對較少。孫文基、張登科等報道刺楸(《a/叩朋oxw/7tew/W^(Thunb.)Koidz.)根皮中皂苷成分主要是常春藤皂苷元糖苷,且含量較高(孫文基、張登科等.藥學(xué)學(xué)報.1990,25(1):29-34);揚(yáng)中林等報道續(xù)斷("一acwWall.)根中常春藤皂苷元糖苷含量較高,僅木通皂苷(akebin)D含量可高達(dá)8M(揚(yáng)中林等.中藥材.2000.23(2):68-69);馬雙成等報道白木通(7h/o//Wa(Thunb.)Koidz.l^:Xwsfrafc(Diels)Rehd.)種子中皂苷含量高達(dá)38.5%,且主要是常春藤皂苷元糖苷(馬雙成等.中草藥.1994,25(4):171-174;馬雙成等.中草藥.1994,25(11):613;馬雙成等,天然產(chǎn)物與開發(fā).1997,10(3):49-51;馬雙成等.中草藥.1995,26(3):122-124)。有研究資料表明,常春藤皂苷元及其衍生物有治療高血脂癥、抗癌、保肝等作用(參見①專利CN1385158A;②KumaraSSPlantaMed.2001,67(1):29-32;③時京珍等.中國藥理學(xué)報.1996May.17(3):264-266;④劉亞平等.中國藥理學(xué)報.1997Jan.18(1):33-36)。有文獻(xiàn)報道采用HPLC法測定常春藤皂苷元,同時對木通中常春藤皂苷元進(jìn)行定量分析。采用美國Agilent1100型高效液相色譜儀,包括G1311A泵、G1315BDAD二極管陣列檢測器、HP色譜工作站;KromasilC18色譜柱(4.6mmX150mm,5um),流動相甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(87:13:0.04:0.02),檢測波長210跳流速0.8ml/min,柱溫室溫。常春藤皂苷元線性范圍為2.0852.1ug(r=0.9997),平均回收率(n=5)為97.4%(RSD=2.0%)。樣品處理與藥典方法同。(二)抑郁癥的研究概況當(dāng)今世界危害人類健康的五大疾病之一的情感性精神障礙,己經(jīng)給人類社會帶來沉重的負(fù)擔(dān)。中國衛(wèi)生部證實,情感性精神障礙在我國疾病總負(fù)擔(dān)的排名居前。情感性精神障礙中的抑郁癥是以顯著而持久的情緒低落,行為木僵和悲觀厭世為主要特征的一組疾病。實際上它很普通,以至被稱為精神疾病中的"普通感冒",同時它還是嚴(yán)重的、威脅生命的疾病,折磨著世界上數(shù)以千萬計的人。因此,迫切需要安全、高效、低廉的抗抑郁藥。目前用于治療抑郁癥的藥物主要有三環(huán)類抗抑郁劑、單胺氧化酶抑制劑和5—羥色胺重吸收抑制劑,但是均有不同程度的不良反應(yīng),如嗜睡、視物模糊、高血壓、驚厥和性欲低下等,從而限制了其廣泛使用。貫葉連翹提取物(商品名路優(yōu)泰)是近年新上市的抗抑郁植物藥,其對腦細(xì)胞的5-羥色胺(簡稱5-HT)、去甲腎上腺素(簡稱NE)、多巴胺(簡稱DA)的再攝取均有明顯的抑制作用,并且對此3個系統(tǒng)的再攝取抑制作用維持平衡,具有作用機(jī)制新穎、臨床療效明確、不良反應(yīng)小的優(yōu)點,但是其有效成分目前還不十分明確,臨床上一直使用其粗提物,對其藥品質(zhì)量的控制有一定影響。因此,尋找新型、成分明確、療效確切、不良反應(yīng)小的抗抑郁藥仍然勢在必行。(三)常用中草藥有效成分的提取分離方法1、溶劑提取法(1)原理溶劑提取法是根據(jù)中草藥中各種化學(xué)成分在溶劑中的溶解性質(zhì),選用對活性成分溶解度大,對不需要溶出的成分溶解度小的溶劑,將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法。當(dāng)溶劑加到中草藥原料(需適當(dāng)粉碎)中時,溶劑由于擴(kuò)散、滲透作用逐漸通過細(xì)胞壁透入到細(xì)胞內(nèi),溶解了可溶性物質(zhì),而造成細(xì)胞內(nèi)外的濃度差,于是細(xì)胞內(nèi)的濃溶液不斷向外擴(kuò)散,溶劑又不斷進(jìn)入藥材組織細(xì)胞中,如此多次往返,直至細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度達(dá)到動態(tài)平衡時,將此飽和溶液濾出,繼續(xù)多次加入新溶劑,就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草藥成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關(guān)。溶劑可分為親水性有機(jī)溶劑及親脂性有機(jī)溶劑,被溶解物質(zhì)也有親水性及親脂性的不同。有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)中親水性基團(tuán)多,其極性大而疏于油;有的親水性基團(tuán)少,其極性小而疏于水。各類溶劑的性質(zhì),同樣也與其分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。這樣,發(fā)明人就可以通過對中草藥成分結(jié)構(gòu)分析,去估計它們的此類性質(zhì)和選用的溶劑??偟恼f來,只要中草藥成分的親水性和親脂性與溶劑的此項性質(zhì)相當(dāng),就會在其中有較大的溶解度,即所謂"相似相溶"的規(guī)律。這是選擇適當(dāng)溶劑自中草藥中提取所需要成分的依據(jù)之一。(2)溶劑的選擇運(yùn)用溶劑提取法的關(guān)鍵,是選擇適當(dāng)?shù)娜軇?。溶劑選擇適當(dāng),就可以比較順利地將需要的成分提取出來。選擇溶劑要注意以下三點①溶劑對有效成分溶解度大,對雜質(zhì)溶解度??;②溶劑不能與中藥的成分起化學(xué)變化;③溶劑要經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全等。常見的提取溶劑可分為以下三類-①水水是一種強(qiáng)的極性溶劑。中草藥中親水性的成分,如無機(jī)鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。為了增加某些成分的溶解度,也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。②親水性的有機(jī)溶劑也就是一般所說的與水能混溶的有機(jī)溶劑,如乙醇(又稱酒精)、甲醇(又稱木精)、丙酮等,以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好,對中草藥細(xì)胞的穿透能力較強(qiáng)。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外,大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分,在乙醇中的溶解度也較大。還可以根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì),采用不同濃度的乙醇進(jìn)行提取。用乙醇提取比用水量較少,提取時間短,溶解出的水溶性雜質(zhì)也少。乙醇為有機(jī)溶劑,雖易燃,但毒性小,價格便宜,來源方便,有一定設(shè)備即可回收反復(fù)使用,而且乙醇的提取液不易發(fā)霉變質(zhì)。由于這些原因,用乙醇提取的方法是歷來最常用的方法之一。甲醇的性質(zhì)和乙醇相似,沸點較低(64°C),但有毒性,使用時應(yīng)注意。③親脂性的有機(jī)溶劑也就是一般所說的與水不能混溶的有機(jī)溶劑,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙垸等。這些溶劑的選擇性能強(qiáng),不能或不容易提出親水性雜質(zhì)。但這類溶劑揮發(fā)性大,多易燃(氯仿除外),一般有毒,價格較貴,設(shè)備要求較高,且它們透入植物組織的能力較弱,往往需要長時間反復(fù)提取才能提取完全。如果藥材中含有較多的水分,用這類溶劑就很難浸出其有效成分,因此,大量提取中草藥原料時,直接應(yīng)用這類溶劑有一定的局限性。(3)提取方法用溶劑提取中草藥成分,常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續(xù)回流提取法等。同時,原料的粉碎度、提取時間、提取溫度、設(shè)備條件等因素也都能影響提取效率,必須加以考慮。①浸漬提取法(簡稱浸漬法)浸漬法系將中草藥粉末或碎塊裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦?,加入適宜的溶劑(如乙醇、稀醇或水),浸漬藥材以溶出其中成分的方法。本法比較簡單易行,但浸出率較差,且如用水為溶劑,其提取液易發(fā)霉變質(zhì),須注意加入適當(dāng)?shù)姆栏瘎"跐B漉提取法(簡稱滲漉法)滲漉法是將中草藥粉末裝在滲漉器中,不斷添加新溶劑,使其滲透過藥材,自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。當(dāng)溶劑滲進(jìn)藥粉、溶出成分比重加大而向下移動時,上層的溶液或稀浸液便置換其位置,造成良好的濃度差,使擴(kuò)散能較好地進(jìn)行,故浸出效果優(yōu)于浸漬法。但應(yīng)控制流速,在滲渡過程中隨時自藥面上補(bǔ)充新溶劑,使藥材中有效成分充分浸出為止?;虍?dāng)滲滴液顏色極淺或滲涌液的體積相當(dāng)于原藥材重的10倍時,便可認(rèn)為基本上已提取完全。在大量生產(chǎn)中常將收集的稀浸出液作為另一批新原料的溶劑之用。③煎煮提取法(簡稱煎煮法)煎煮法是中國最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿,不宜用鐵鍋,以免藥液變色。直火加熱時最好時常攪拌,以免局部藥材受熱太高,容易焦糊。有蒸汽加熱設(shè)備的藥廠,多采用大反應(yīng)鍋、大銅鍋、大木桶,或水泥砌的池子中通入蒸汽加熱。還可將數(shù)個煎煮器通過管道互相連接,進(jìn)行連續(xù)煎浸。④加熱回流提取法應(yīng)用有機(jī)溶劑加熱提取,需采用回流加熱裝置,以免溶劑揮發(fā)損失。小量操作時,可在圓底燒瓶上連接回流冷凝器。瓶內(nèi)裝藥材約為容量的20%60%,溶劑浸過藥材表面約12cm。在水浴中加熱回流,一般保持沸騰36小時,放冷過濾,再在藥渣中加溶劑,作第二、三次加熱回流分別約半小時,或至基本提盡有效成分為止。此法提取效率較冷浸法高,大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。⑤連續(xù)回流提取法應(yīng)用揮發(fā)性有機(jī)溶劑提取中草藥有效成分,不論小型實驗或大型生產(chǎn),均以連續(xù)提取法為好,而且需用溶劑量較少,提取成分也較完全。實驗室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。連續(xù)提取法,一般需數(shù)小時才能提取完全。提取成分受熱時間較長,遇熱不穩(wěn)定易變化的成分不宜采用此法。2.分離和純化方法上述提取法所得到的中草藥提取液或提取物仍然是混合物,需進(jìn)一步除去雜質(zhì),分離并進(jìn)行精制。(1)溶劑分離法一般是將上述總提取物,選用三、四種不同極性的溶劑,由低極性到高極性分步進(jìn)行提取分離。水浸膏或乙醇浸膏常為膠狀物,難以均勻分散在低極性溶劑中,故不能提取完全,可拌入適量惰性填充劑,如硅藻土或纖維粉等,然后低溫或自然干燥,粉碎后,再以選用溶劑依次提取,使總提取物中各組成成分,依其在不同極性溶劑中溶解度的差異而得到分離。利用中草藥化學(xué)成分,在不同極性溶劑中的溶解度進(jìn)行分離純化,是最常用的方法。(2)溶劑萃取法①萃取法溶劑提取萃取法又簡稱萃取法,是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。萃取時如果各成分在溶劑中分配系數(shù)相差越大,則分離效率越高;如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質(zhì),一般多用親脂性有機(jī)溶劑,如苯、氯仿或乙醚進(jìn)行萃取,如果有效成分是偏于親水性的物質(zhì),在親脂性溶劑中難溶解,就需要改用弱親脂性的溶劑,例如乙酸乙酯、丁醇等。還可以在氯仿、乙醚中加入適量乙醇或甲醇以增大其親水性。提取黃酮類成分時,多用乙酸乙脂和水萃取。提取親水性強(qiáng)的皂苷則多選用正丁醇、異戊醇和水作萃取。不過,一般有機(jī)溶劑親水性越大,與水作萃取的效果就越不好,因為能使較多的親水性雜質(zhì)伴隨而出,對有效成分進(jìn)一步精制影響很大。②逆流連續(xù)萃取法是一種連續(xù)的溶劑萃取法。其裝置可具有一根、數(shù)根或更多的萃取管。管內(nèi)用小瓷圈或小的不銹鋼絲圈填充,以增加溶劑萃取時的接觸面。如果一種中草藥的水浸液需要用比水輕的苯、乙酸乙酯等進(jìn)行萃取,則需將水提濃縮液裝在萃取管內(nèi),而苯、乙酸乙酯貯于高位容器內(nèi)。萃取是否完全,可取樣品用薄層層析、紙層析及顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)進(jìn)行檢查。③逆流分配法逆流分配法又稱逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法與溶劑逆流萃取法原理一致,但加樣量一定,并不斷在一定容量的溶劑中,經(jīng)多次移位萃取分配而達(dá)到混合物的分離。④液滴逆流分配法液滴逆流分配法又稱液滴逆流層析法。為近年來在逆流分配法基礎(chǔ)上改進(jìn)的溶劑萃取法。對溶劑系統(tǒng)的選擇基本同逆流分配法,但要求能在短時間內(nèi)分離成,并可生成有效的液滴。由于移動相形成液滴,在細(xì)的分配萃取管中與固定相有效地接觸、摩擦不斷形成新的表面,促進(jìn)溶質(zhì)在溶劑中的分配,故其分離效果往往比逆流分配法好。(3)大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂是20世紀(jì)60年代發(fā)展起來的一類有機(jī)高聚物吸附劑,具有良好的吸附性能,近十余年來逐漸被應(yīng)用于中草藥化學(xué)成分的提取分離和中藥新藥的開發(fā)研制。大孔吸附樹脂為吸附和篩選原理相結(jié)合的分離材料。它的吸附性是由于范德華引力或生成氫鍵的結(jié)果。篩選原理是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定。由于吸附和篩選原理,有機(jī)化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小,在大孔吸附樹脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。這使得有機(jī)化合物尤其是水溶性化合物的提純得以大大簡化。大孔吸附樹脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯縮聚而生成,由于改性劑的加入,大孔吸附樹脂的極性發(fā)生改變,按照樹脂的表面性質(zhì),吸附樹脂一般分為非極性、中極性和極性三類。非極性吸附樹脂是由偶極矩很小的單體聚合物制得的不帶任何功能基的吸附樹脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯體系的吸附樹脂,如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附樹脂。中極性吸附樹脂指含酯基的吸附樹脂,如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯與雙甲基丙烯酸酯等交聯(lián)的一類共聚物。它是在非極性大孔吸附樹脂的基礎(chǔ)上,加入丙烯酸甲酯或丙烯腈縮聚而成,如中國國內(nèi)經(jīng)常使用的AB-8大孔吸附樹脂。極性吸附樹脂是指含酰胺基、腈基、酚羥基等含氮、氧、硫極性功能基的吸附樹脂。此外,有時把含氮、氧、硫等配體基團(tuán)的離子交換樹脂稱作強(qiáng)極性吸附樹脂,強(qiáng)極性吸附樹脂與離子交換樹脂的界限很難區(qū)別。極性大孔吸附樹脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亞砜類縮聚而成,如日本三菱化工的DiaionHP2MG、美國Rohm-hass公司的XAD-IO,XAD-9大孔吸附樹脂。與活性炭和其它吸附劑相比,大孔吸附樹脂具有很多的優(yōu)點,如對某種物質(zhì)的吸附選擇性較高;物理化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度較好;品種規(guī)格較多,可根據(jù)需要改變樹脂物理或化學(xué)結(jié)構(gòu);吸附樹脂一般為球狀顆粒,流體阻力較小等等。因而被廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥等領(lǐng)域,近年來關(guān)于大孔吸附樹脂在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用研究報道越來越多。大孔吸附樹脂對中草藥化學(xué)成分如生物堿、黃酮、皂苷、香豆素及其他一些苷類成分都有一定的吸附作用。對糖的吸附能力很差,對色素的吸附能力較強(qiáng)。(4)沉淀法是在中草藥提取液中加入某些試劑使產(chǎn)生沉淀,以獲得有效成分或除去雜質(zhì)的方法。如鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經(jīng)典方法之一。由于醋酸鉛及堿式醋酸鉛在水及醇溶液中,能與多種中草藥成分生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀,故可利用這種性質(zhì)使有效成分與雜質(zhì)分離。然后將鉛鹽沉淀懸浮于新溶劑中,通以硫化氫氣體,使分解并轉(zhuǎn)為不溶性硫化鉛而沉淀。(5)鹽析法鹽析法是在中草藥的水提液中,加入無機(jī)鹽至一定濃度,或達(dá)到飽和狀態(tài),可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出,而與水溶性大的雜質(zhì)分離。常用作鹽析的無機(jī)鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。(6)透析法透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜,而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì),達(dá)到分離的方法。反之也可將大分子的雜質(zhì)留在半透膜內(nèi),而將小分子的物質(zhì)通過半透膜進(jìn)入膜外溶液中,而加以分離精制。(7)結(jié)晶、重結(jié)晶和分步結(jié)晶法鑒定中草藥化學(xué)成分,研究其化學(xué)結(jié)構(gòu),必須首先將中草藥成分制備成單體純品。在常溫下,物質(zhì)本身性質(zhì)是液體的化合物,可分別用分餾法或?qū)游龇ㄟM(jìn)行分離精制。一般地說,中草藥化學(xué)成分在常溫下多半是固體的物質(zhì),都具有結(jié)晶體的通性,可以根據(jù)溶解度的不同用結(jié)晶法來達(dá)到分離精制的目的。3、常用干燥方法(1)真空干燥是基于這樣一基本原理水的飽和蒸氣壓與溫度緊密相關(guān),在真空狀態(tài)下,水的沸點降低,即在真空下操作也就是在低溫下操作,可避免在高溫下營養(yǎng)成分如維生素等的破壞,同時提高了千燥速度。真空干燥在食品、制藥、化工等行業(yè)有廣泛的應(yīng)用,中國也開發(fā)和引進(jìn)了各種真空干燥設(shè)備,其結(jié)構(gòu)形式多種多樣。常用的形式主要有箱式真空干燥器、雙錐式真空干燥器、帶式真空干燥器等。這些傳統(tǒng)的真空干燥裝置主要采用熱風(fēng),蒸汽或電等加熱,利用熱傳導(dǎo)、對流或輻射原理將熱量從外部傳到物料內(nèi)部。真空干燥具有干燥溫度低,干燥室內(nèi)相對缺氧,可避免脂肪氧化,色素褐變等一系列優(yōu)點,適合于熱敏感性食品物料的干燥,此外設(shè)備成本、干燥費用也相對較低。(2)噴霧干燥是流化技術(shù)用于液態(tài)物料干燥的一種方法。因是瞬間干燥,特別適用于熱敏性物料,故所得產(chǎn)品質(zhì)量好,保持原來的色香味,且易溶解。利用噴霧千燥來制備微囊的研究正在進(jìn)行,它是將心料混懸在衣料的溶液中,經(jīng)離心噴霧器將其噴入熱氣流中,所得的產(chǎn)品是衣料包心料而成的微囊,這種微囊粉末可采用于直接壓片,也可制備膠囊劑、糖漿劑或混懸劑。(3)冷凍干燥是將干燥液體物料冷凍成固體,在低溫減壓條件下利用冰的升華性能,使物料低溫脫水而達(dá)到干燥的一種方法。由于物料在高度真空及低溫條件下干燥,故對某些極不耐熱物品的干燥很適合。王大林報道了一種噴霧通氣凍干新技術(shù),是利用冷的空氣或氮氣作為介質(zhì),迅速流經(jīng)凍結(jié)物使水升華,噴霧凍干制得的產(chǎn)品微粒小、干燥快、時間短、均勻、流動性好,并具良好的速溶性。近年來,對膏狀物料和粘稠物料干燥的研究取得了較大進(jìn)展,流態(tài)化技術(shù)、噴射技術(shù)、惰性載體技術(shù),則是在此研究基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。旋轉(zhuǎn)閃蒸干燥機(jī)、熱噴射氣流干燥機(jī)、惰性載體干燥機(jī)均適合熱敏性物料和膏狀物料的干燥。這些新的研究成果用于中藥制劑生產(chǎn),將大大改善中藥加工的技術(shù)水平,提高生產(chǎn)效率。(4)遠(yuǎn)紅外加熱干燥法是一項新的干燥技術(shù),其干燥原理是將電能轉(zhuǎn)變?yōu)檫h(yuǎn)紅外輻射,從而被藥材的分子吸收,產(chǎn)生共振,引起分子和原子的振動和轉(zhuǎn)動,導(dǎo)致物體變熱,經(jīng)過熱擴(kuò)散、蒸發(fā)和化學(xué)變化,最終達(dá)到干燥的目的。遠(yuǎn)紅外干燥可節(jié)省電能20%50%,效果較好。(5)微波干燥法是一項20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來的新技術(shù),微波干燥實際上是通過感應(yīng)加熱和介質(zhì)加熱,使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量,并把它轉(zhuǎn)變?yōu)闊崃繌亩_(dá)到干燥的目的。微波干燥可殺滅微生物和霉菌,并具有消毒作用。目前中國生產(chǎn)的微波加熱成套設(shè)備有915mhz和2450mhz兩個頻率。4、超臨界C02萃取方法(1)有關(guān)動、植物脂肪油成分的提取方法有水煮法、水媒分離法、分子蒸餾和減壓蒸餾法、金屬加合法、萃取結(jié)晶法、分盤冷凍壓榨法和有機(jī)溶劑法等。采用水煮加熱法,因加熱時間長、溫度高,易使對熱不穩(wěn)定的揮發(fā)成分發(fā)生變化,如一些不飽和脂肪酸的氧化。水媒分離法,此分離法的明顯優(yōu)點是消除了有機(jī)溶劑法造成的高費用和公害,但是這種技術(shù)的缺點是得到的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的純度或級別不如有機(jī)溶劑分離法高。分子蒸餾和減壓蒸餾法為減少熱變性,需用尿素加合物等方法來除去大部分飽和脂肪酸,在得到的產(chǎn)品中必須將其除去;雖然可得到較純的脂肪酸,但需幾步才能達(dá)到目標(biāo),較費時、費力,增加了生產(chǎn)成本。金屬加合法分離需要較低的低溫處理,最后還要設(shè)法去除金屬離子,清除不盡還會造成金屬離子污染。萃取結(jié)晶法得到脂肪酸純度較高,在較低的溫度下進(jìn)行,能防止脂肪酸的氧化,但時間較長,不太適用于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。分盤冷凍壓榨法缺點是,安放盤架和液壓機(jī)的冷凍室需要數(shù)千平方米的面積和龐大的冷卻系統(tǒng),大的設(shè)施需要多人操作,勞動強(qiáng)度高,分離速度緩慢,效率低,不能連續(xù)操作。有機(jī)溶劑法是采用石油醚或乙醚有機(jī)溶劑在水浴上加熱情況下,進(jìn)行回流循環(huán)提取;由于所采用的有機(jī)溶劑如石油醚或乙醚等均為一種低沸點物質(zhì),易燃易爆,同時,有機(jī)溶劑的使用一方面會污染環(huán)境,另一方面有機(jī)溶劑有可能在提取物中有殘留,會影響提取物在醫(yī)藥上的進(jìn)一步應(yīng)用。(2)有關(guān)動、植物脂肪油成分的超臨界C02萃取方法一種流體當(dāng)處在其臨界溫度和壓力狀態(tài)時,被稱為超臨界流體。由于超臨界流體的密度接近于液體,具有與液體溶劑相當(dāng)?shù)妮腿∧芰?。又具有與氣體相當(dāng)?shù)牡驼扯?,擴(kuò)散能力比液體要大100倍,因而具有較高的傳質(zhì)性。采用超臨界萃取的時候,利用超臨界流體的這些性質(zhì),使之與待分離的物質(zhì)相接觸穿透基體,從中萃取出目標(biāo)物質(zhì)。然后利用降壓和/或升溫的辦法降低其密度,從而降低溶質(zhì)在其中的溶解度,使被萃取物與溶劑分離。因為不同的物質(zhì)在相同的萃取條件下溶解度是不同的,因而有可能借助這種差異將它們進(jìn)一步分開。超臨界流體萃取常常選用C02等臨界溫度低且化學(xué)惰性的物質(zhì)為萃取劑,它特別適用于熱敏物質(zhì)和易氧化物質(zhì)的分離,因此非常適用于對于動物油脂的提取分離。因此,本發(fā)明采取該方法,能夠制備高純度的被提取物的脂肪油。超臨界C02萃取方法是這樣提取的把千燥的被提取物的粗粉放在超臨界萃取設(shè)備中用C02進(jìn)行萃取,減壓后即得被提取物的脂肪油,室溫條件下呈淺黃色透明油狀;提取的被提取物的脂肪油中總脂肪酸的純度在40以上,優(yōu)于其他提取方法;總脂肪酸一般包括油酸、亞油酸、棕櫚酸以及余量的其他組分等。超臨界C02萃取被提取物的脂肪油的方法包括如下歩驟(1)將干燥的被提取物粉碎至1030目后,置于超臨界萃取釜中,連續(xù)地通入超臨界狀態(tài)下的C02進(jìn)行萃取,優(yōu)選的條件一般是<302流量1055kg/h.kg原料、壓力550Mpa、溫度1575°C、時間0.56h;進(jìn)一步優(yōu)選的條件一般是C02流量45kg/hkg原料、壓力35Mpa、溫度50'C、時間lh;(2)將萃取了被提取物的脂肪油的C02減壓至112MPa,即可獲得在室溫條件下被提取物的脂肪油,被提取物的脂肪油中總脂肪酸的純度在40%以上,萃取物的理化性狀和脂肪酸純度都優(yōu)于其他提取方法。萃取條件的選擇是通過以下辦法實現(xiàn)的首先選定四因素、三水平,根據(jù)正交設(shè)計方法,按L9(3,交設(shè)計表安排實驗(正交實驗設(shè)計安排參考郭祖超主編的《醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)》,人民軍醫(yī)出版社,1999年第一版)。從正交實驗結(jié)果,分析得到萃取工藝條件。對超臨界C02萃取的被提取物的脂肪油進(jìn)行脂肪酸甲酯化后,進(jìn)行氣相色譜一質(zhì)譜分析。超臨界C02萃取被提取物的脂肪油的制備方法不使用有機(jī)溶劑等物質(zhì),不會污染環(huán)境,也不存在有害溶劑殘留等問題,而且操作簡便、萃取時間短、產(chǎn)品純度高,使用的C02廉價而且可重復(fù)循環(huán)使用,工業(yè)生產(chǎn)成本低廉。經(jīng)文獻(xiàn)檢索等,到目前為止,尚未發(fā)現(xiàn)有常春藤皂苷元及其衍生物在用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病方面的報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問題是公開了一種中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的新用途,以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。也就是說,本發(fā)明意在明確中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物在抗抑郁應(yīng)用方面的活性,進(jìn)而將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物用于制備抗抑郁產(chǎn)品;所述的抗抑郁產(chǎn)品是指用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究情感性精神障礙中抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品中的一種。所述的抗抑郁產(chǎn)品是包括醫(yī)藥或食品等領(lǐng)域產(chǎn)品中的一種或多種,是包括藥物、試劑或食品等中的一種或多種,例如藥物、試劑、一般食品、保健食品、添加劑或飲料等中的一種或多種,優(yōu)選藥物或食品中的一種,進(jìn)一步優(yōu)選藥物。(一)技術(shù)構(gòu)思自主開發(fā)創(chuàng)新藥物是中國目前的一項緊迫任務(wù),中國中醫(yī)藥學(xué)具有悠久的歷史,用中草藥預(yù)防和治療疾病方面也積累了豐富的經(jīng)驗,因此從中藥中尋找有效的活性成分或發(fā)現(xiàn)現(xiàn)有成分的新用途是一條有效的快捷途徑,也是中國創(chuàng)新藥物研制的優(yōu)勢之所在。發(fā)明人通過對單味預(yù)知子藥材提取物中常春藤皂苷元及其衍生物進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究,在對具有抗抑郁作用的天然藥物活性成分進(jìn)行篩選中,發(fā)明人篩選發(fā)現(xiàn)并證明該常春藤皂苷元及其衍生物對抑郁有較好的防治作用。根據(jù)文獻(xiàn)檢索,發(fā)明人通過實驗發(fā)現(xiàn)常春藤皂苷元及其衍生物具有多種顯著的藥理活性,從而推測知母的在預(yù)防、診斷、保護(hù)和治療抗抑郁等方面活性的臨床藥效,也應(yīng)主要是通過活性部位中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物特別是常春藤皂苷元的藥效來發(fā)揮的,研究結(jié)果也證明和證實了中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物特別是常春藤皂苷元具有顯著的藥理活性。情感性精神障礙在我國疾病總負(fù)擔(dān)的排名居前,研制治療抑郁癥的藥物,尤其是預(yù)防、診斷、保護(hù)和治療抑郁癥等方面產(chǎn)品特別是藥物具有顯著的社會效益、經(jīng)濟(jì)效益。本發(fā)明的目的就是要研制一種安全、高效的情感性精神障礙中抑郁癥的防治藥物。(二)中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的活性在篩選具有抗抑郁作用的天然活性成分過程中,發(fā)明人發(fā)現(xiàn)中藥預(yù)知子(/nYo/Jfe6/"《w'"ata(Thunb.)Decne)的乙醇浸膏具有抗抑郁作用,通過對其進(jìn)行活性指導(dǎo)的分離,發(fā)現(xiàn)活性部位是以常春藤皂苷元為苷元的一系列皂苷的混合物,進(jìn)一步分離得到木通皂苷A、木通皂苷B、木通皂苷C、木通皂苷D、木通皂苷E、木通皂苷F、木通皂苷G、木通皂苷Pd等單體,各單體均顯示強(qiáng)抗抑郁作用。進(jìn)一步研究上述皂苷的苷元——常春藤皂苷元的抗抑郁活性,發(fā)現(xiàn)常春藤皂苷元的抗抑郁活性更強(qiáng),均強(qiáng)于上述皂苷;由于常春藤皂苷元非常難溶于水,通常非常難溶于水的藥物生物利用度較低,將其轉(zhuǎn)化為鹽類衍生物能夠改善其水溶性,通過實驗發(fā)現(xiàn)常春藤皂苷元的鹽類抗抑郁活性強(qiáng)于常春藤皂苷元。表l、常見的常春藤皂苷元及其衍生物<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(三)中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的結(jié)構(gòu)所述的常春藤皂苷元及其衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下:其中,!^是氫或含14個單糖的糖鏈,R2是氫、含14個單糖的糖鏈、堿金屬元素、堿土金屬元素、銨或含16個碳原子的有機(jī)銨等中的一種;所述的單糖是包括吡喃葡萄糖基、吡喃木糖基、吡喃阿拉伯糖基或吡喃鼠李糖基等中的一種,糖鏈為直鏈或支鏈,連接方式為(l-2)、(1-3)、(l-4)或(l-6)連接。上述化合物的基團(tuán)如表l。所述的常春藤皂苷元及其衍生物是包括常春藤皂苷元或常春藤皂苷元衍生物等中的一種或多種,優(yōu)選常春藤皂苷元衍生物;所述的常春藤皂苷元衍生物是包括常春藤皂苷(akebin)、常春藤皂苷元糖基衍生物或常春藤皂苷元鹽類衍生物中的一種或多種,優(yōu)選常春藤皂苷元鹽類衍生物;所述的常春藤皂苷是包括常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖苷(簡稱木通皂苷A)、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃葡萄糖苷、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃木糖苷、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃鼠李糖苷、常春藤皂苷元3-0-{3-D-吡喃木糖-(l一2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷(簡稱木通皂苷B)、常春藤皂苷元3-0-e-D-吡喃葡萄糖-(1—2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷(簡稱木通皂苷C)、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-0-!3-D-吡喃萄萄糖_(1—6)-e-D-吡喃萄萄糖苷(簡稱木通皂苷D)、3-0-e-D-吡喃木糖-(1—2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-0-P-D-吡喃萄萄糖-(1—6)-e-D-吡喃萄萄糖苷(簡稱木通皂苷E)、3-0-e-D-吡喃葡萄糖-(1—2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-0-e-D-吡喃萄萄糖-(1—6)-0-D-吡喃萄萄糖苷(簡稱木通皂苷F)、3-0-3-D-吡喃萄萄糖-(1—2)-a-L-吡喃鼠李糖-(卜4)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1—4)-日-D-吡喃萄萄糖-(1—6)-P-D-吡喃萄萄糖苷(簡稱木通皂苷G)或常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1—2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷(簡稱木通皂苷Po)等中的一種或多種;優(yōu)選木通皂苷A或木通皂苷B中的一種。所述的常春藤皂苷元的鹽類衍生物是包括常春藤皂苷元鈉、常春藤皂苷元鉀、常春藤皂苷元鈣、常春藤皂苷元鎂或常春藤皂苷元銨等中的一種或多種;優(yōu)選常春藤皂苷元鈉或常春藤皂苷元鉀中的一種;也就是說,采用預(yù)知子提取物的主要成分常春藤皂苷元及其衍生物為原料,或者是直接采用含有常春藤皂苷元及其衍生物的預(yù)知子總皂苷提取物為原料,或者直接采用含有常春藤皂苷元及其衍生物的預(yù)知子藥材為原料,都能夠直接或間接用于制備抗抑郁產(chǎn)品。常春藤皂苷元及其衍生物優(yōu)選以基本純的形式使用,如常春藤皂苷元及其衍生物的純度^95%。(四)中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的制備方法上述有關(guān)化合物的制備方法如下上述常春藤皂苷元的制備方法是參考文獻(xiàn)方法(馬雙成等.中草藥.1994,25(4):171-174)制備預(yù)知子總皂苷,取總皂苷,加入含2N的鹽酸乙醇溶液,乙醇濃度為45%,在IO(TC條件下降解3小時,過濾,濾液不溶物用水洗去多余酸后抽干,得粗晶。進(jìn)一步純化采用藥用乙醇加熱溶解粗晶,另加入活性炭脫色,加熱回流半小時,趁熱過濾,醇溶液減壓濃縮后,析出大量針簇狀結(jié)晶,過濾,蒸餾水沖洗,干燥,得白色成品,具體見實施例5。上述鹽類衍生物的制備方法是將常春藤皂苷元溶解在一定濃度的乙醇溶液中,在一定溫度下,與相應(yīng)的堿溶液反應(yīng),再回收溶劑,并在一定濃度的乙醇中進(jìn)行重結(jié)晶,即得到常春藤皂苷元的鹽類衍生物,具體見實施例6。上述的常春藤皂苷元糖基衍生物部分是從木通科植物木通"fe6/a《w/朋to(Thunb.)Decne).、三葉木通爿A:e6/afnyb/fate(Thunb.)Koidz.或白木通M/o/z'a/e(Thunb.)Koidz.ra/:"wWrafc(Diels)Rehd.的干燥近成熟果實中提取分離的,相關(guān)文獻(xiàn)(參見①馬雙成等.中草藥.1994,25(4):171-174;②馬雙成等.中草藥.1994,25(11):613;③馬雙成等.天然產(chǎn)物與開發(fā).1997,10(3):49-51;④馬雙成等.中草藥.1995,26(3):122-124)報道了常春藤皂苷元糖基衍生物的提取分離方法,并對常春藤皂苷元糖基衍生物的理化數(shù)據(jù)進(jìn)行了詳細(xì)的報道,本發(fā)明不再贅述。(五)中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的用途1、概述本發(fā)明的目的是提供一種用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,包括藥物、試劑或食品等中的一種或多種,優(yōu)選藥物。通過藥理活性篩選證明,中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物為其預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的活性部位。已完成的急性毒性實驗證明,小鼠灌胃給藥對該活性部位的最大耐受量超過5.0g/kg,相當(dāng)于臨床推薦用藥劑量的1000倍,表明該有效部位安全可靠,毒性較低,解決了中藥復(fù)方中成分復(fù)雜、有效成分含量低且含有有毒成分的問題。綜上所述,發(fā)明人對中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物進(jìn)行了理論探索,經(jīng)過大量的實驗研究特別是長期的藥理學(xué)試驗,發(fā)現(xiàn)所述及的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物有顯著的預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的活性。因此,中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物可用于制備抗抑郁產(chǎn)品,優(yōu)選以本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物為原料制備而成的藥物。2、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物的使用方法與要求本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物能夠單獨或與其它活性組分聯(lián)合使用,包括用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,包括藥物、試劑或食品等,尤其是藥物。在具體使用方面,本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物能夠單獨使用,還能夠與其他許多化學(xué)物質(zhì)一起使用。無論這些化學(xué)物質(zhì)是否具有生物活性或具有治療疾病的功能,包括輔助功能如協(xié)同放大作用、拮抗或緩解中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的副作用等,這些化學(xué)物質(zhì)是包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體、食品、天然產(chǎn)物、化學(xué)合成藥物或人類用藥等中的一種或多種;優(yōu)選包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體或者食品等中的一種或多種;進(jìn)一步優(yōu)選醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體。本文使用的"醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體"包括任何和所有的生理適用的溶劑、分散介質(zhì)、胞衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑或吸收延遲劑等中的一種或多種。醫(yī)藥學(xué)上可接受載體的例子包括一種或多種的水、鹽水、磷酸緩沖鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇等及其組合物中的一種或多種。在許多情況下,在該組合物中最好包括等滲劑,例如,糖、諸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化鈉等中的一種或多種。醫(yī)藥學(xué)上可接受載體還可以包含少量的輔助物質(zhì),例如潤濕劑或乳化劑、防腐劑或緩沖液等中的一種或多種,它們增強(qiáng)了該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的有效期或效力。從具體的分類上看,所述的醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體是指醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體,包括賦形劑,如淀粉或水等中的一種或多種;潤滑劑,如甘油或硬脂酸鎂等中的一種或多種;崩解劑,如微晶纖維素等;填充劑,如淀粉或乳糖等中的一種或多種;粘接劑,如預(yù)膠化淀粉、糊精、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮等中的一種或多種;滲透壓調(diào)節(jié)劑,如葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一種或多種;稀釋劑,如水等;崩解劑,如瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉等中的一種或多種;吸收促進(jìn)劑,如季銨化合物等;表面活性劑,如十六烷醇等;吸附載體,如高嶺土或皂粘土等中的一種或多種;潤滑劑,如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂或聚乙二醇等中的一種或多種;另外,還可以在組合物中加入其它輔劑,如香味劑或甜味劑等中的一種或多種。例如,將活性組分中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物溶解、混懸或乳化于適宜的水性溶劑中(例如,蒸餾水、生理鹽水或格林溶液等中的一種或多種)或油性溶劑中(例如,植物油例如橄欖油、芝麻油、棉籽油、玉米油或丙二醇等中的一種或多種)中,即可制得注射制劑,其中溶劑中可含有分散劑(例如,聚山梨酯80、聚氧乙烯硬化蓖麻油60、聚乙二醇、苯甲醇、氯代丁醇或苯酚等中的一種或多種)、滲透壓調(diào)節(jié)劑(例如,氯化鈉、甘油、D9—甘露糖、D—山梨醇或葡萄糖等中的一種或多種)。在這種情況下,如有必要,可加入添加劑,例如增溶劑(例如,聚山梨酯80、聚氧乙烯蓖麻油、聚維酮、聚乙二醇40蓖麻油或普郎尼克F-68等中的一種或多種)、穩(wěn)定劑(例如,人血清白蛋白等)、止痛劑(例如,鹽酸普魯卡因或利多卡因等中的一種或多種)等。本發(fā)明所述及的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物還能夠以組合物的形式聯(lián)合使用,特別是與用其它化學(xué)物質(zhì)如藥物對動物尤其是哺乳動物包括人或其他動物進(jìn)行治療所用的組合物或者是類似的組合物。所述哺乳動物,包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、豬、馬、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、獼猴或恒河猴等中的一種或多種,優(yōu)選人、小鼠、大鼠、猴、豬、兔或犬等中的一種或多種,進(jìn)一步優(yōu)選人、大鼠或猴等中的一種或多種。例如,可以將本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物加入適于給與受治療者的藥用組合物中。通常,該藥用組合物包含本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物和藥學(xué)上可接受的載體。中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的組合物特別是藥物組合物可以有各種形式,包括例如液體、半固體和固體等劑量形式中的一種或多種;其中所說的藥物組合物包括治療有效量的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物為活性成分,以及一種或多種醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體。中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的藥物組合物可以采用本領(lǐng)域公知的常規(guī)生產(chǎn)方法制成各種劑型,例如使活性成分與一種或多種載體混合,然后將其制成所需的劑型。所述的劑型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑或注射劑等中的一種或多種,采取口服或注射(包括靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一種或多種)、粘膜透析等中的一種或多種給藥途徑進(jìn)行抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療或科學(xué)研究。藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0.1~99.9%的活性成分中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,進(jìn)一步優(yōu)選含有重量比為1%95%的活性成分中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,最優(yōu)選含有重量比為5%~卯%的活性成分中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物。中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的藥物組合物一般必須無菌且在生產(chǎn)儲存條件下穩(wěn)定??梢詫⒃摻M合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂質(zhì)體或其它適合于高藥物濃度的有序結(jié)構(gòu)。通過將所需量的該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物與所需上述成分的一種或組合一起加入適當(dāng)?shù)娜軇┲胁⒔又M(jìn)行除菌過濾制備無菌注射液。一般而言,通過將該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物加入含有基本分散介質(zhì)和所需的上述其它成分的無菌溶媒中制備分散液。在用于制備無菌注射液的無菌粉劑的情況下,推薦的制備方法是真空干燥和冷凍干燥劑。例如,通過諸如卵磷脂的包衣、在分散液的情況下通過保持所需顆粒大小和通過使用表面活性劑,可以保持溶液的適當(dāng)流動性。通過在該組合物中包括延遲吸收的藥劑(例如單硬脂酸鹽或明膠)可以達(dá)到注射組合物的延長吸收。用于患者時,本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物劑量為153000mg/kgd,該劑量或用量通常根據(jù)患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來決定。本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其藥用組合物可以包括"治療有效量"或"預(yù)防有效量"的本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物。"治療有效量"是指在必要的劑量和時間下有效達(dá)到所需治療效果的量。中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的治療有效量可以根據(jù)諸如個體的病況、年齡、性別和體重以及該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物在該個體引起所需反應(yīng)的能力等因素而變化。治療有效量亦指該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的有益治療效果超過其任何毒性或有害效果的量。"預(yù)防有效量"是指在必要劑量和時間下有效達(dá)到所需預(yù)防效果的量。因為預(yù)防劑量用于患病前或疾病早期的受治療者,預(yù)防有效量通常小于治療有效量。本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的治療或預(yù)防有效量的典型的非限制性范圍是153000mg/kg,更優(yōu)選為450900mg/kg。應(yīng)注意,劑量值將根據(jù)欲減輕的疾病類型和嚴(yán)重性變化,也就是說用于患者時,本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物劑量或用量,通常根據(jù)患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來決定。另外,應(yīng)理解,對于任何特定受治療者,應(yīng)隨著時間根據(jù)個體需要和給與或監(jiān)督給與所述組合物的人的專業(yè)判斷調(diào)整特定劑量制度,并且本文設(shè)定的劑量范圍僅為例證性的,并不會限制要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵺`。也就是說,需要根據(jù)治療的對象、給藥途徑、所治療疾病和狀況等,變化本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的每次和/或每日的劑量或用量。例如,經(jīng)靜脈給予哺乳動物,尤其是成年人(如體重60kg),所述中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的單劑量約為153000mg,優(yōu)選約卯0mg,優(yōu)選每日給藥13次??梢哉{(diào)整劑量單位,以提拱最佳所需反應(yīng)(例如,治療或預(yù)防應(yīng)答)。例如,可以單次大劑量給藥,可以在一段時間內(nèi)給予幾個均分量或根據(jù)治療情況的迫切性按比例降低或增加劑量。配制易于給藥和劑量統(tǒng)一的劑量單位形式的非腸道組合物尤其有利。本文使用的劑量單位形式,指適于欲治療的哺乳動物受治療者的單元劑量的物理分離單位;每個單位含有預(yù)定量的計算用于與所需藥用載體一同產(chǎn)生所需治療效果的活性物中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物。本發(fā)明的劑量單位形式的規(guī)格,由以下確定并直接取決于以下(a)該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的獨特特征和欲達(dá)到的特定治療或預(yù)防效果,和(b)在混合這種用于治療個體敏感性中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的技術(shù)中的內(nèi)在限制。3、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物的藥物劑型和給藥途徑本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物制備的用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,其中按照飲料、食品
技術(shù)領(lǐng)域:
的要求制備的產(chǎn)品能夠用于預(yù)防、保護(hù)和治療抑郁癥及其直接相關(guān)疾病;按照醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域:
的要求制備的產(chǎn)品能夠用于患者的治療或保健,既能夠單獨直接用于制備治療或保健的藥物,也能夠與許多化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行混合或組合,直接或間接用于制備治療或保健的藥物。這里所述的化學(xué)物質(zhì)與本節(jié)上文中所述的相同。在本發(fā)明中,所需物料包括本發(fā)明的原料、上述配套使用的化學(xué)物質(zhì)等,均應(yīng)根據(jù)實際情況和需要,采用食品級或藥用級的物料。本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物,可以用本領(lǐng)域已知的各種方法給藥,盡管在許多治療用途中推薦的給藥途徑/給藥方式是噴霧劑或口服給藥。但是,技術(shù)人員會理解給藥途徑/給藥方式隨所需的結(jié)果而變化。在某些具體實施中,該活性化合物可以與保護(hù)該化合物免于快速釋放的載體一同制備例如空釋制劑,包括移植物傳遞系統(tǒng)、透皮貼傳遞系統(tǒng)或微囊傳遞系統(tǒng)等中的一種或多種。此外,還可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物,例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羥基乙酸、膠原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一種或多種。制備這種制劑的許多方法均已申請專利或一般為本領(lǐng)域技術(shù)人員所矢卩(參見例如SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems,J.R.Robinson編輯,MarcelDekker,Inc.,紐約,1978)。本發(fā)明所述的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物,通常通過口服、鼻吸入、直腸或腸胃外給藥等中的一種或多種方式,施用于需要這種治療的患者。用于口服時,可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、粉劑、粒劑或膠囊等中的一種或多種。在實施時,本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物可以與例如惰性稀釋劑或可同化的食用載體一同口服。該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物(和共它成分,如果需要)亦可以包于硬或軟殼明膠膠囊、壓制成片劑或直接加入受治療者的膳食中。關(guān)于口服治療給藥,可以將所述中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物與賦形劑一起加入并以可食片劑、頰含片劑、錠劑、膠囊、懸液、糖漿或糯米紙囊劑等等中的一種或多種形式使用。為了以非腸道給藥之外給予本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,可能需要用防止其失活的材料對該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物包衣或與該中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物一同給予。亦可以將補(bǔ)充的活性化合物加入該組合物中。在具體實施時,將本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物與一種或多種可以用于治療疾病的其它治療藥物共配制和/或共給予。這種聯(lián)合使用,可以優(yōu)越地利用較低劑量的該給予的治療藥物,因此避免可能的毒性或與各種單一療法相關(guān)的并發(fā)癥。制成液體制劑如水劑、油懸浮劑或其它液體制劑中的一種或多種,如糖漿、酊劑或酏劑等中的一種或多種;用于腸胃外給藥時,可將其制成注射用的溶液劑、水劑或油性懸浮劑等中的一種或多種。以上藥物或藥物組合物能夠使用各種途徑,在所述的使用形式中,優(yōu)選的形式是口服制劑(如片劑、包衣片劑、膠囊、溶液或混懸液等中的一種或多種)、非腸道給予劑型(如注射劑、軟膏或貼劑等中的一種或多種)等中的一種或多種,進(jìn)一步優(yōu)選片劑、膠囊或注射劑等中的一種或多種,特別優(yōu)選片劑或注射劑中的一種。此外,中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子或預(yù)知子總皂苷提取物等在某些情況下也能夠單獨直接用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,也能夠與許多化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行混合或組合,以組合物的形式直接或間接用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品。這里所述的化學(xué)物質(zhì)與本節(jié)上文中所述的相同。例如,中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末用于制備用于抑郁癥預(yù)防、診斷、保護(hù)和治療產(chǎn)品特別是藥物的各種劑型,或者是中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的輔料用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品尤其是藥物的各種劑型,或者是中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品如藥物一起用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品如藥物的各種劑型,或者是中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的輔助藥物一起用于制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品如藥物的各種劑型,如片劑、膠囊劑或混懸劑等中的一種或多種,優(yōu)選膠囊劑。所述的方法之一是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末灌裝為膠囊劑,方法之二是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品如藥物一起灌裝為膠囊劑,方法之三是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的輔助藥物一起灌裝為膠囊劑;方法之四是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末與有關(guān)的輔料一起按常規(guī)方法直接壓為片劑,方法之五是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末、有關(guān)的制備用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品如藥物一起與有關(guān)的輔料按常規(guī)方法直接壓為片劑,方法之六是將中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的粉末、有關(guān)的輔助藥物一起與有關(guān)的輔料按常規(guī)方法直接壓為片劑等。除上述的六種基本方法外,還能夠選擇中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的其他形式或?qū)χ兴幪崛∥锍4禾僭碥赵捌溲苌锼褂玫乃幉脑习A(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等進(jìn)行本領(lǐng)域公知的方法處理后,制備各種劑型的含有中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的產(chǎn)品如藥物。但是,需要注意的是,在上述直接使用中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的時候,應(yīng)先根據(jù)所使用的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的劑量要求,換算得到所需要使用的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物所使用的藥材原料包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物等的用暈。綜上所述,本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及其組合物可用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,優(yōu)選藥物和食品,進(jìn)一步優(yōu)選藥物。(六)技術(shù)特長實驗證明,本發(fā)明的常春藤皂苷元及其衍生物,以及其藥物組合物是一種安全、高效、穩(wěn)定、價廉的防治抑郁癥的藥物。其制備成本低廉,預(yù)知子總皂苷在藥材中含量高達(dá)38.5%,而且提取方法簡單;活性成分明確;活性高,常春藤皂苷元與貫中連翹提取物活性相當(dāng),常春藤皂苷元鈉活性高于貫葉連翹提取物;毒性較低,常春藤皂苷元的最大耐受量〉5g/kg。本發(fā)明對以皂苷為主要成分的中藥預(yù)知子提取物中的常春藤皂苷元及其衍生物拓展了新的醫(yī)藥用途,也為預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病提供了一種新的藥物來源。本發(fā)明的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物安全低毒,藥理作用較強(qiáng),其原料來源豐富、價廉,制備工藝簡單;常春藤皂苷元及其衍生物性質(zhì)穩(wěn)定,可用于制備預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品,制備的制劑質(zhì)量穩(wěn)定,預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的效果明顯,故其更適于抗抑郁癥產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明有針對性地研究中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物特別是鹽類衍生物的藥理作用較強(qiáng),其得率高,使用安全,一物多用,最大限度地發(fā)揮了作用,而且使用范圍特別廣,因此容易推廣應(yīng)用,能夠在較短的時間內(nèi)產(chǎn)生巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益??傊?,本發(fā)明積極適應(yīng)了現(xiàn)代醫(yī)療和科研領(lǐng)域的工作需要和人性化服務(wù)的需要,是用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病等方面的安全原料。具體實施方式本發(fā)明研究了現(xiàn)有的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的新的藥理作用和新的用途,提供了一種能夠用于制備抑郁癥預(yù)防、診斷、保護(hù)和治療等產(chǎn)品的原料,便于醫(yī)療行業(yè)和相關(guān)行業(yè)如食品、飲料等領(lǐng)域的安全使用。本發(fā)明對中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物在預(yù)防、診斷、保護(hù)、治療和研究抑郁癥等方面的活性進(jìn)行了多方面的試驗,本發(fā)明通過具體的實施例進(jìn)行舉例說明。(一)制備方法本發(fā)明中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物的制備方法為(1)提取按常規(guī)將粉碎的知母藥材用20~95%乙醇熱提,首次溶媒體積用量約為生藥的48倍;或?qū)⒎鬯榈闹杆幉挠?0~95%乙醇滲漉提取,溶媒體積用量約為生藥的412倍;得提取液;將提取液過濾、濃縮,濃縮液離心或過濾;(2)分離純化濃縮液的離心上清液或過濾液通過非極性或弱極性大孔樹脂吸附(非極性或弱極性大孔樹脂為以苯乙烯為架橋材料的聚苯乙烯型多孔性吸附樹脂,如D101、D201、ZTC-1、AB-8、1300-1型大孔樹脂等),用水及20%以下的乙醇淋洗除去雜質(zhì);再用含水低級醇洗脫,低級醇為甲醇、乙醇或丙醇等C1C5醇類,其濃度為30~95%,體積用量為生藥的515倍,收集低級醇洗脫液,濃縮至無醇;(3)干燥干燥粉碎或噴霧干燥,即為本發(fā)明的中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,成品收率為生藥量的1.5%以上。(二)常用的實用劑型本發(fā)明制備粉針劑一般采用常規(guī)的冷凍干燥法,以水作為溶媒,其步驟為取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,加入賦形劑,加水溶解,加入活性炭,過濾除菌,灌裝,半軋塞,冷凍干燥,壓塞軋蓋即可。所用的賦形劑選自甘露醇、水解明膠、葡萄糖、乳糖、右旋糖苷等中的一種或幾種。每瓶含中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物10~100mg。本發(fā)明制備粉針劑也可采用噴霧干燥法,以水作為溶媒,其步驟為取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,加或不加賦形劑(賦形劑同上),加水溶解,加入活性炭,過濾除菌,噴霧干燥,無菌分裝,壓塞軋蓋即可。每瓶含中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物10~100mg。本發(fā)明制備小針劑時,以注射用水作為溶媒配制即可,也可加適量輔料,輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯、二甲基乙酰胺中的一種或幾種。每支含中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物10~100mg。本發(fā)明制備葡萄糖輸液或氯化鈉輸液,以注射用水作為溶媒,加入適量葡萄糖或氯化鈉配制即可,也可加適量輔料,輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯、二甲基乙酰胺中的一種或幾種。每瓶含中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物10100mg。本發(fā)明制備片劑、膠囊、顆粒劑、口服液等口服制劑,輔料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸鹽等,按常規(guī)技術(shù)制備。在本發(fā)明中,以上所述的具體實施方式和以下所述的實例均是為了更好地闡述本發(fā)明,并不是用來限制發(fā)明的范圍。下面通過實施例對本發(fā)明作詳細(xì)描述。實施例l、預(yù)知子總皂普片劑的制備處方預(yù)知子總皂苷50g淀粉30g乳糖40g羧甲基淀粉鈉5g淀粉漿(7%)適量硬脂酸鎂1%(1.45g)制成1000片工藝取處方量預(yù)知子總皂苷,粉碎過100目篩,再將處方量的淀粉、乳糖粉碎過100目篩,混勻。將預(yù)知子總皂苷加入混勻的淀粉和乳糖中,混勻。加入適量50%乙醇拌勻,經(jīng)16目鐵篩絲網(wǎng)制粒,6(TC以下干燥,整粒,加入適量硬脂酸鎂混勻,分析含量后壓片。可制成1000片每片含50mg預(yù)知子總皂苷的片劑。實施例2、木通皂苦D膠嚢劑的制備處方木通皂苷D50g淀粉140g微粉硅膠10g制成1000粒工藝取處方量木通皂苷D,粉碎過100目篩,加入處方量的淀粉、微粉硅膠中,混勻,直接裝入膠囊,可制成1000粒每粒含50mg木通皂苷D的膠囊劑。實施例3、常春藤皂苷元膠嚢劑的制備處方常春藤皂苷元50g淀粉140g微粉硅膠10g制成1000粒工藝取處方量常春藤皂苷元,粉碎過100目篩,加入處方量的淀粉、微粉硅膠中,混勻,直接裝入膠囊,可制成1000粒每粒含50mg常春藤皂苷元的膠囊劑。實施例4、常春藤皂苷元鈉注射劑的制備處方常春藤皂苷元鈉10g乙醇(95%)4000g丙二醇(C.P.)lOOOg注射用水加至10000ml制成1000支工藝取2(TC乙醇(95%)5000g,加入活性炭5g攪拌,經(jīng)砂芯組減壓過濾,備用。取處方量常春藤皂苷元鈉加入上述乙醇4000g中,加熱至約50'C,充分?jǐn)嚢瑁怪芙獬蚊?,然后加入處方量丙二醇,再加入新鮮注射用水使全量成lOOOOml,充分?jǐn)嚢?,混勻,加入活性?g,經(jīng)砂芯組減壓過濾澄明,合并前后濾液,再以專用砂芯精濾澄明。檢查含量及澄明度合格后灌封,IO(TC流通蒸氣滅菌30min,即得每只10ml含常春藤皂苷元鈉10mg的注射劑。實施例5、常春藤皂苷元的制備預(yù)知子藥材粗粉(Akebiaquinata(Thunb.)Decne)500g,用石油醚1000ml回流脫脂2次,藥材粗粉揮去石油醚后,用80%EtOH2L回流提取二次,每次lh。提取液減壓濃縮至500ml,放置過夜,過濾,濾液部份加H20至800ml,依次用EtOAc2400ml(分3次),水飽和n-BuOH3200ml(分4次)提取,減壓回收n-BuOH近千,得總皂苷。取總皂苷5g,加6070毫升含2N的鹽酸乙醇溶液,乙醇濃度為45%,在IO(TC條件下降解3小時,過濾,濾液不溶物用水洗去多余酸后抽干,得粗晶。進(jìn)一步純化采用50倍藥用乙醇加熱溶解粗晶,另加入約占粗晶量10%的活性炭,加熱回流半小時,趁熱過濾,棄去炭層,醇溶液減壓濃縮后,析出大量針簇狀結(jié)晶,1—4'C冷藏12小時,濾出結(jié)晶,用蒸餾水沖洗至無氯離子,85i:真空干燥,得白色成品。如果色澤不佳,可用95%乙醇重結(jié)晶1次或用活性炭再處理1次。實施例6、常春藤皂苷元鈉的制備在室溫和攪拌條件下,將常春藤皂苷元(4.73g,lOmmol)的95%乙醇溶液(80ml)分別加入氫氧化鈉(12mmo1)的70%乙醇溶液(80ml)中,加入開始15分鐘后,將所得混合物在50-6(TC下加熱20分鐘。減壓蒸除溶劑,殘渣水洗2次,用95%乙醇重結(jié)晶,得到常春藤皂苷元鈉白色結(jié)晶,mp.312—314'C,與常春藤皂苷元1H-NMR圖譜比較S11.96(lH,brs,-COOH)峰消失說明常春藤皂苷元己經(jīng)形成相應(yīng)的鹽。實施例7、預(yù)知子總急脊的抗抑郁作用實驗預(yù)知子總皂苷的主要成分包括木通皂苷A、B、C、D、E、F、G、PD。預(yù)知子總皂苷的抗抑郁作用采用獲得性小鼠絕望模型(小鼠懸尾實驗和小鼠強(qiáng)迫游泳實驗)進(jìn)行檢測和驗證。①實驗動物1922克ICR雄性小鼠,每10只/籠群養(yǎng),自由覓食和飲水,室溫(23士2)°C,自然光照。②藥物配制將被檢測藥物(預(yù)知子總皂苷,按實施例5方法制備)常規(guī)方法用生理鹽水制成混懸劑,臨用時配成所需濃度。③實驗方法A、小鼠懸尾實驗空白對照組每組動物10只,給予與藥物組等體積的生理鹽水;陽性對照藥組每組動物10只,給予藥物貫葉連翹提取物(路優(yōu)泰),劑量100mg/kg;試驗藥物組每組動物10只,給予被檢測藥物,分低、高劑量,分別為50mg/kg,100mg/kg;每天上午灌胃一次,連續(xù)給藥7天。末次給藥后l小時,將動物尾端2厘米部位貼在一水平支撐物上,使動物成倒掛狀態(tài),支撐物放置于一敞口箱內(nèi),其頭部離底面約5厘米。記錄小鼠6分鐘內(nèi)不動時間,各組小鼠平行操作,數(shù)據(jù)以(X士SD)表示,采用Student,s-t檢驗方法檢驗差異的顯著性。結(jié)果見表l。B、小鼠強(qiáng)迫游泳實驗基本按照Porsolt方法進(jìn)行。藥物和劑量同小鼠懸尾實驗,小鼠每天上午灌胃一次,連續(xù)給藥7天。末次給藥后l小時,將小鼠單獨放入高20厘米、直徑14厘米的圓柱型玻璃缸中,缸內(nèi)水深10厘米,水溫23~25°C。從小鼠入水后記時6分鐘,記錄后4分鐘內(nèi)的累計不動時間,各組小鼠平行操作。數(shù)據(jù)以(X土SD)表示,采用Student,s-t檢驗方法檢驗差異的顯著性。結(jié)果見表2。表2、預(yù)知子總皂苷對小鼠懸尾實驗和強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響(X±SD,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>*p<0.05;**p<0.01從表2結(jié)果可以看出,預(yù)知子總皂苷的高劑量均能明顯縮短小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳不動時間,表明預(yù)知子總皂苷具有明顯的抗抑郁作用。實施例8、木通皂苦D的抗抑郁作用實驗?zāi)就ㄔ碥誅的抗抑郁作用采用獲得性小鼠絕望模型(小鼠懸尾實驗和小鼠強(qiáng)迫游泳實驗)進(jìn)行檢測和驗證。①實驗動物同實施例7。②藥物配制木通皂苷D按文獻(xiàn)方法制備(馬雙成等.天然產(chǎn)物與開發(fā).1997,10(3):49-51),藥物配制同實施例7。③實驗方法A、小鼠懸尾實驗空白對照組同實施例7;陽性對照藥組同實施例7-,試驗藥物組同實施例7;操作方法同實施例7,結(jié)果見表3。B、小鼠強(qiáng)迫游泳實驗同實施例7,結(jié)果見表3。表3、木通竜苷D對小鼠懸尾實驗和強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響(f土SD,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>*p<0.05;**p<0.01從表3結(jié)果可以看出,木通皂苷D的低、高2個劑量均能顯著縮短小鼠懸尾不動時間,明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動時間,表明木通皂苷D具有明顯的抗抑郁作用。實施例9、常春藤皂苷元的抗抑郁作用實驗常春藤皂苷元的抗抑郁作用采用獲得性小鼠絕望模型(小鼠懸尾實驗和小鼠強(qiáng)迫游泳實驗)進(jìn)行檢測和驗證。①實驗動物同實施例7。②藥物配制常春藤皂苷元按實施例5方法制備,藥物配制同實施例7。③實驗方法A、小鼠懸尾實驗空白對照組同實施例7;陽性對照藥組同實施例7;試驗藥物組同實施例7;操作方法同實施例7,結(jié)果見表4。B、小鼠強(qiáng)迫游泳實驗同實施例7,結(jié)果見表7。從表4結(jié)果可以看出,常春藤皂苷元的低、高2個劑量均能明顯縮短小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳不動時間,表明常春藤皂苷元具有明顯的抗抑郁作用。表4、常春藤皂苷元對小鼠懸尾實驗和強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>*p<0.05;**p<0.01實施例IO、常春藤皂苷元鈉的抗抑郁作用實驗常春藤皂苷元鈉的抗抑郁作用采用獲得性小鼠絕望模型(小鼠懸尾實驗和小鼠強(qiáng)迫游泳實驗)進(jìn)行檢測和驗證。①實驗動物同實施例7。②藥物配制常春藤皂苷元鈉按實施例6方法制備,藥物配制同實施例7。③實驗方法A、小鼠懸尾實驗空白對照組同實施例7;陽性對照藥組同實施例7;試驗藥物組同實施例7;操作方法同實施例7,結(jié)果見表5。B、小鼠強(qiáng)迫游泳實驗同實施例7,結(jié)果見表5。表5、常春藤皂苷元鈉對小鼠懸尾實驗和強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>*p<0.05;**p<0.01從表5結(jié)果可以看出,常春藤皂苷元鈉的低、高2個劑量均能明顯縮短小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳不動時間,表明常春藤皂苷元鈉具有明顯的抗抑郁作用。實施例11、中藥提取物常春藤急苷元及其衍生物粉針劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物30g,加入右旋糖苷30g,加500ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至2000ml,加3.0g針用活性炭,充分?jǐn)嚢?0分鐘;脫炭過濾;用0.22pm微孔濾膜過濾;灌裝到無菌的西林瓶中,每瓶2ml,半軋塞;冷凍干燥,再壓塞軋蓋即可。實施例12、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物粉針劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物60g,加500ml注射用水射用水至1000ml,加lg針用活性炭,充分?jǐn)嚢?0分鐘;脫炭過濾過濾;冷凍干燥得無菌粉末,分裝成1000瓶。實施例13、中藥提取物常春藤急香元及其衍生物粉針劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物40g,加入乳糖50g,加100ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至1000ml,加1.5g針用活性炭,充分?jǐn)嚢?0分鐘;脫炭過濾;用0.22nm微孔濾膜過濾;噴霧干燥得無菌粉末,分裝成1000瓶。實施例14、中藥提取物常春藤急脊元及其衍生物粉針劑的制備(1)處方注射用中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物半成品150g甘露醇400g注射用水加至10000ml共制成10000瓶(2)制備工藝按以上處方稱取處方量中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物,加入到適量注射用水中,攪拌使其溶解;加入處方量甘露醇,攪拌使完全溶解,加注射用水至全量;加入液體量的0.1%針用活性炭,充分?jǐn)嚢?0分鐘;脫炭過濾;用0.22pm微孔濾膜過濾;灌裝,半軋塞;冷凍干燥,壓塞軋蓋。共制得9735瓶,成品率為97.35%。實施例15、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物小針劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物5g,加100ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至1000ml,用0.22|_1111微孔濾膜過濾;分裝灌封,每瓶10ml,滅菌即可。,攪拌使其溶解;加注;用0.22pm微孔濾膜實施例16、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物小針劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物10g,加入丙二醇30g,加200ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至1000ml,加1.5g針用活性炭,充分?jǐn)嚢?0分鐘;脫炭過濾;用0.22)am微孔濾膜過濾;分裝灌封,每瓶5ml,滅菌即可。實施例17、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物葡萄糖輸液的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物2g,加入聚乙二醇10g,加入葡萄糖500g,加2000ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至5000ml;用0.22pm微孔濾膜過濾;分裝灌封,每瓶100ml,滅菌即可。實施例18、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物葡萄糖輸液的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物2g,加入葡萄糖250g,加1000ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至5000ml;用0.22pm微孔濾膜過濾;分裝灌封,每瓶250ml,滅菌即可。實施例19、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物氯化鈉輸液的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物lg,加入氯化鈉90g,加1000ml注射用水,攪拌使其溶解;加注射用水至10000ml;用0.22)im微孔濾膜過濾;分裝灌封,每瓶250ml,滅菌即可。實施例20、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物片劑的制備(1)處方中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物1000.0g微晶纖維素1170.0g預(yù)膠化淀粉690.0g乳糖125.0g5。/oPVP無水乙醇適量硬脂酸鎂'15.0g共制成10000片(2)制備工藝按以上處方分別稱取處方量的主藥與輔料,按等量遞加法混合均勻后照處方工藝項下進(jìn)行制軟材、制顆粒,干燥,整粒等過程,計算好片重后用單沖壓片機(jī)和10.5mm淺凹沖模壓片,控制裸片硬度57kg,共制得片劑9698片,成品率為96.98%。采用滾轉(zhuǎn)噴霧法包衣,包衣工藝如下包衣液的配制胃溶薄膜衣料85G61235,由上??房蛋录夹g(shù)有限公司提供包衣工藝將待包衣裸片(硬度57kg)放入包衣鍋中,啟動攪拌裝置和鼓風(fēng)加熱裝置,待裸片溫度升至4(TC時,開始打開噴槍對準(zhǔn)片床的上1/3處噴入包衣液包衣,控制片床溫度3842'C,氣磅壓力6kg,包衣液流速為50mL/min,包衣膜重占包衣片重的3%。實施例21、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物片劑的制備取中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物100g,微晶纖維素80g、乳糖15g、預(yù)膠化淀粉60g,過篩,混合均勻,用適量10%PVP乙醇溶液制軟材,制粒,干燥,加入硬脂酸鎂3g,整粒,壓片,制成1000片。實施例22、中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物膠嚢劑的制備(1)處方中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物1000.0g微晶纖維素1000g羧甲基淀粉鈉140g無水乙醇適量滑石粉80g共制成10000膠囊(2)制備工藝按以上處方分別取原料藥中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物及處方中其它輔料分別過100目篩,置6(TC烘干,稱取處方量中藥提取物常春藤皂苷元及其衍生物與微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉等量遞加法混合均勻,用適量無水乙醇制軟材,30目篩制粒,506(TC干燥2小時,用30目篩整粒,加入處方量的滑石粉和羧甲基淀粉鈉混合均勻。權(quán)利要求1.常春藤皂苷元及其衍生物在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用。2.常春藤皂苷元及其衍生物的組合物在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用。3.常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料是包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物中的一種。5.常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料的組合物在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料的組合物在制備抗抑郁產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的常春藤皂苷元及其衍生物的藥材原料是包括預(yù)知子藥材或預(yù)知子總皂苷提取物中的一種。7.根據(jù)權(quán)利要求16任一項所述的常春藤皂苷元及其衍生物的應(yīng)用,其特征在于,所述的抗抑郁產(chǎn)品是指用于預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病的產(chǎn)品中的一種。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的常春藤皂苷元及其衍生物的應(yīng)用,其特征在于,所述的抗抑郁產(chǎn)品是包括藥物、試劑或食品中的一種。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的常春藤皂苷元及其衍生物的應(yīng)用,其特征在于,所述的抗抑郁產(chǎn)品是藥物。10.根據(jù)權(quán)利要求16任一項所述的常春藤皂苷元及其衍生物的應(yīng)用,其特征在于,該皂苷元及其衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其中,R!是氫或含14個單糖的糖鏈,R2是氫、含14個單糖的糖鏈、堿金屬元素、堿土金屬元素、銨或含16個碳原子的有機(jī)銨中的一種;所述的單糖是包括吡喃葡萄糖基、吡喃木糖基、吡喃阿拉伯糖基或吡喃鼠李糖基中的一種,糖鏈為直鏈或支鏈,連接方式為(l-2)、(1-3)、(l-4)或(l-6)連接。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的該皂苷元及其衍生物是包括常春藤皂苷元或常春藤皂苷元衍生物中的一種。12.根據(jù)權(quán)利要求ll所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷元衍生物是包括常春藤皂苷、常春藤皂苷元糖基衍生物或常春藤皂苷元鹽類衍生物中的一種。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷是包括木通皂苷A、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃葡萄糖苷、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃木糖苷、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃鼠李糖苷、木通皂苷B、木通皂苷C、木通皂苷D、木通皂苷E、木通皂苷F、木通皂苷G或木通卓苷PD中的一種。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷是木通皂苷A或木通皂苷B中的一種。15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷元衍生物是常春藤皂苷元鹽類衍生物。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷元鹽類衍生物是包括常春藤皂苷元鈉、常春藤皂苷元鉀、常春藤皂苷元鈣、常春藤皂苷元鎂或常春藤皂苷元銨中的一種。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的常春藤皂苷元及其衍生物,其特征在于,所述的常春藤皂苷元鹽類衍生物是常春藤皂苷元鈉或常春藤皂苷元鉀中的一種。全文摘要本發(fā)明涉及常春藤皂苷元及其衍生物的新用途。常春藤皂苷元及其衍生物的抗抑郁試驗顯示了顯著的抗抑郁活性,其中常春藤皂苷元的鹽類衍生物抗抑郁活性強(qiáng)于常春藤皂苷元,常春藤皂苷元抗抑郁活性又強(qiáng)于常春藤皂苷,常春藤皂苷元與貫葉連翹提取物活性相當(dāng),常春藤皂苷元鈉活性高于貫葉連翹提取物;其藥理作用顯著,性質(zhì)穩(wěn)定,其原料來源豐富、價廉,安全低毒,制備工藝簡單,得率高,為預(yù)防、診斷、檢測、保護(hù)、治療和研究抑郁癥及其直接相關(guān)疾病提供了一種新的藥物來源,適于工業(yè)化生產(chǎn),且容易推廣應(yīng)用,對開發(fā)利用我國的藥用植物資源具有重要價值。情感性精神障礙在我國疾病總負(fù)擔(dān)的排名居前,研制抑郁癥的防治藥物具有顯著的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。文檔編號A61K31/704GK101214250SQ20081003232公開日2008年7月9日申請日期2008年1月7日優(yōu)先權(quán)日2008年1月7日發(fā)明者吳耀民,李鐵軍,毛俊琴,彥邱,波陸申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)