專(zhuān)利名稱(chēng)：一種同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及到一種同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的制備方法、質(zhì)量控制方法及在藥品領(lǐng)域、保健品領(lǐng)域和化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
苦參為豆科槐屬植物苦參Sophora flavescens Ait.的干燥根，具有清熱燥濕、殺蟲(chóng)利尿的功效?？鄥⒅泻写罅康狞S酮類(lèi)成分和生物堿類(lèi)成分，具有抗菌殺蟲(chóng)、抗病毒、抗炎等作用，是苦參發(fā)揮藥效的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，同時(shí)提取分離制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的方法，未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的制備方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種苦參中總黃酮提取物與某些堿或金屬鹽形成的金屬鹽類(lèi)衍生物。
本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供一種苦參中總黃酮提取物與某些金屬離子形成的金屬絡(luò)合物。
本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供一種苦參中總生物堿提取物與某些酸形成的鹽類(lèi)衍生物。
本發(fā)明提出的苦參總黃酮提取物，是從苦參中提取的黃酮類(lèi)活性成分的組合，該類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)

圖1，圖2及表1。


圖1黃酮類(lèi)成分母核結(jié)構(gòu)

圖2黃酮類(lèi)成分取代基類(lèi)型表1黃酮類(lèi)成分



本發(fā)明提出的苦參總生物堿提取物，是從苦參中提取的生物堿類(lèi)活性成分的組合，該類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3及表2。

圖3生物堿類(lèi)成分母核結(jié)構(gòu)表2生物堿類(lèi)成分


本發(fā)明所述原料苦參，來(lái)源于豆科槐屬植物苦參Sophoraflavescens Ait.及同屬其他植物。作為提取苦參中總黃酮提取物和總生物堿提取物的原材料，可以是市售苦參飲片，也可以是此植物的任一部位，其中優(yōu)選的藥材部位為這些植物的干燥根。上述所述的苦參包括未經(jīng)任何炮制處理的原藥材及飲片，還包括各種炮制品，如“酒炙苦參”、“醋炙苦參”、“油制苦參”、“泔制苦參”、“麩炒苦參”、“炒苦參”、“煨苦參”、“苦參炭”等。
本發(fā)明所述的同時(shí)制備的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，是指從上述植物的任何部位提取得到的，其中優(yōu)選的是從苦參Sophora flavescens Ait.的干燥根中提取制備得到的，其中苦參總黃酮提取物中主要包含降苦參酮、苦參酮、異苦參酮等二氫黃酮(醇)類(lèi)化合物和三葉豆紫檀苷、黃腐醇、苦參啶等其他黃酮類(lèi)化合物。苦參總生物堿提取物中主要包含氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐胺堿等。
作為苦參總黃酮提取物，其中黃酮類(lèi)成分百分含量的總和為5～100％(w/w)，其中優(yōu)選的為50～100％(w/w)。
作為苦參總生物堿提取物，其中生物堿類(lèi)成分百分含量的總和為5～100％(w/w)，其中優(yōu)選的為50～100％(w/w)。
本發(fā)明所述的同時(shí)制備的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物及其組合物，除可應(yīng)用于醫(yī)藥工業(yè)外，還可應(yīng)用于化妝品領(lǐng)域，治療面部痤瘡等。
本發(fā)明所述的同時(shí)制備的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物及其組合物可單獨(dú)制成制劑或與其他殺菌、殺蟲(chóng)、抗心律失常、抗風(fēng)濕及治療跌打損傷藥物合用，用于皮膚炎癥、心律失常、風(fēng)濕及跌打損傷的治療。這些制劑具有與上述苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物二者之一或全部相同或相近的藥理活性和用途。
在本發(fā)明所述的苦參所涵蓋的各種活性成分之中，最主要的是降苦參酮等二氫黃酮(醇)類(lèi)化合物和三葉豆紫檀苷、苦參啶等其他黃酮類(lèi)化合物。
在本發(fā)明所述的苦參總生物堿提取物所涵蓋的各種活性成分之中，最主要的是氧化槐果堿、氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿等。
本發(fā)明還提出了所述苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物的制備工藝，它可以采用以下任意一種方法，或這些方法的任意組合進(jìn)行制備(1)溶劑提取法；(2)溶劑萃取法；(3)大孔吸附樹(shù)脂法；(4)超臨界流體萃取法；(5)柱色譜法；(6)液-液逆流分配色譜法。其中優(yōu)選的方法為大孔吸附樹(shù)脂法。
在使用這些方法進(jìn)行制備時(shí)，一般包括以下幾個(gè)步驟(1)提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類(lèi)、酮類(lèi)及酯類(lèi)溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿、鹽配成的酸性或堿性溶劑。提取方法可以是煎煮、加熱回流、超聲提取、冷浸、滲漉、微波提取、高壓提取等。
優(yōu)選的提取工藝為苦參干燥根加30～90％乙醇，回流提取2～3次，每次提取1～2小時(shí)，溶劑用量為5～15倍量(L/kg)。
(2)過(guò)濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任意一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹(shù)脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等。
(3)濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等。
(4)干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。
當(dāng)采用溶劑萃取法進(jìn)行制備時(shí)，一般先將提取物混懸于水中，然后用低極性的酯類(lèi)、烷烴類(lèi)或醚類(lèi)溶劑(如石油醚、乙醚、己烷、汽油、乙酸乙酯等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑，如氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或這些溶劑的混合物，萃取獲得苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物。
當(dāng)采用大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行制備時(shí)，所用的大孔樹(shù)脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱堿性或弱酸性等任意一種類(lèi)型，這些樹(shù)脂的代號(hào)由于生產(chǎn)廠家不同而不同，如D101、D4020、HPD400、AB-8、S-8、HZ-806、D4006、X-5、NKA-II、NKA-9等，其中優(yōu)選的為弱極性或中等極性的樹(shù)脂，如AB-8、HPD400、D101、D4006、X-5等。所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優(yōu)選的為0～100％的乙醇。
優(yōu)選的同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的純化工藝為將苦參乙醇提取物加水分散(溶液濃度為10～30mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)?，殘?jiān)?0～50倍量70～100％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖海掖既芙庖夯厥杖軇┲翢o(wú)醇味，加5～15倍量0.3～1％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴?，殘?jiān)粗行裕瑴p壓干燥，即得苦參總黃酮提取物。合并酸水液與水溶液，2mol/LNaOH調(diào)中性，濃縮至濃度為0.3～0.7g/mL(以藥材量計(jì))后，用2mol/LNaOH調(diào)pH＝7～9，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.18～0.42g/mL，吸附流速為3～9BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶5～1∶10，0～30％乙醇洗脫2～4BV進(jìn)行除雜，除雜流速為2～8BV/h，用40～95％乙醇洗脫5～9倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為3～9BV/h。收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。具體流程見(jiàn)圖4。
圖4苦參總黃酮提取物及總生物堿提取物純化工藝當(dāng)采用超臨界流體萃取法進(jìn)行制備時(shí)，可以對(duì)苦參原材料直接進(jìn)行萃取，也可以對(duì)上述任一方法和步驟所獲得的產(chǎn)物進(jìn)行萃取。萃取時(shí)可以使用或不使用以下任一種類(lèi)溶劑及溶劑混合物水、醇類(lèi)、酮類(lèi)及酯類(lèi)溶劑。
當(dāng)采用柱色譜法進(jìn)行制備時(shí)，其處理的對(duì)象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法或超臨界流體萃取法初步純化后的產(chǎn)物。所用的固定相可以是硅膠、聚酰胺、氧化鋁、葡聚糖(Sephadex系列或Sephadex LH-20系列)、C-8、C-18、活性炭、纖維素等，所用的洗脫液因固定相的不同而不同，一般是由水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、石油醚等組成的混合溶劑。
當(dāng)采用液-液逆流萃取法進(jìn)行制備時(shí)，其處理的對(duì)象可以是上述提取步驟的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法或超臨界流體萃取法初步純化后的產(chǎn)物。一般先將提取物混懸于水中，然后用低極性的酯類(lèi)、烷烴類(lèi)或醚類(lèi)溶劑(如石油醚、乙醚、己烷、汽油、乙酸乙酯等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑，如氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或是這些溶劑的混合物，萃取同時(shí)獲得苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物。
同時(shí)制得的兩個(gè)提取物可以單獨(dú)或組合與其它任何中西藥物或食物，飲料按任意比例配伍，用于制備藥物或功能性食品，所制得的藥物或功能性食品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、沖劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。
本發(fā)明質(zhì)量控制方法可包括以下含量測(cè)定方法中的一種或幾種1.總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱(chēng)取降苦參酮對(duì)照品適量(約3.8mg)，置10mL量瓶中，加70％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密吸取降苦參酮對(duì)照品溶液(濃度為0.38mg/mL)0、0.15、0.30、0.45、0.60和0.75ml，置加有鎂粉250mg的具塞刻度試管中，將試管置冷水浴(15℃左右)中，緩慢滴加濃HCl 3mL，并不時(shí)振搖試管。最后加70％乙醇至7ml，搖勻，置沸水浴中加熱60min，取出，迅速冷卻至室溫后加70％乙醇補(bǔ)足至7ml，搖勻，于483.5nm處測(cè)定吸光度。以降苦參酮對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
含量測(cè)定精密稱(chēng)取3批苦參總黃酮提取物各3份，每份約5mg，精密稱(chēng)定，置5mL量瓶中，加70％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述樣品溶液0.5mL，降苦參酮對(duì)照品溶液0.3和0.6mL，分別置加有鎂粉250mg的具塞刻度試管中。將試管置冷水浴(15℃左右)中，緩慢滴加濃HCl 3mL，并不時(shí)振搖試管。最后加70％乙醇至7mL，搖勻，置沸水浴中加熱60min，取出，迅速冷卻至室溫后加70％乙醇補(bǔ)足至7mL，搖勻，于483.5nm處測(cè)定吸光度。外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量。
2.降苦參酮、黃腐醇、苦參啶色譜柱Phenomenex Luna C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相乙腈-水梯度洗脫，45％乙腈～69％乙腈(0～35min)；檢測(cè)波長(zhǎng)294nm(降苦參酮)、365nm(黃腐醇、苦參啶)；流速1.0mL/min；柱溫35℃。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別精密吸取降苦參酮對(duì)照品溶液(濃度為0.03mg/mL)、黃腐醇對(duì)照品溶液(濃度為0.00101mg/mL)和苦參啶對(duì)照品溶液(濃度為0.051mg/mL)各4，8，12，16，20μL注入液相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積。以對(duì)照品量(μg)為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
含量測(cè)定精密稱(chēng)取3批苦參總黃酮提取物各3份，每份約6mg，置10mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)。分別精密吸取上述溶液10μL，降苦參酮、黃腐醇和苦參啶對(duì)照品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積，計(jì)算含量。
3.三葉豆紫檀苷標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密吸取三葉豆紫檀苷對(duì)照品溶液(濃度為0.02808mg/mL)2、4、6、8、10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積。以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
含量測(cè)定精密稱(chēng)取3批苦參總黃酮提取物各3份，每份約5mg，置5mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，分別精密吸取上述溶液15μL，三葉豆紫檀苷對(duì)照品溶液10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積，計(jì)算含量。
4.總生物堿標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱(chēng)取苦參堿對(duì)照品適量(約2.0mg)，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密吸取苦參堿對(duì)照品溶液(濃度為0.080mg/mL)0、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0mL，蒸干，分別加入pH7.6溴麝香草酚藍(lán)溶液4mL、CHCl36mL，密塞，劇烈振搖2min，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，靜置2h，分取氯仿層，于438.5nm處測(cè)定吸光度。以苦參堿對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
含量測(cè)定精密稱(chēng)取3批苦參總生物堿提取物3份，每份約5mg，置10mL量瓶中，加70％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液0.1mL、苦參堿對(duì)照品溶液0.3和0.5mL，蒸干，加入pH7.6溴麝香草酚藍(lán)溶液4mL、CHCl36mL，密塞，劇烈振搖2min，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，靜置2h，分取CHCl3層于438.5nm處測(cè)定吸光度，外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量。
5.氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿色譜柱Agilent Zorbax C18色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)；流動(dòng)相溶劑A為10mmol/L醋酸銨水溶液(0.1％氨水，pH＝9.2)，溶劑B為20mmol/L醋酸銨的甲醇-乙睛(1∶1)混合溶液，洗脫條件為溶劑A-溶劑B梯度洗脫(90∶10→82∶18→66∶34→60∶40，時(shí)間0min→8min→14min→28min)；流速0.8mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)220nm；柱溫35℃。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別精密吸取氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿對(duì)照品溶液(濃度分別為0.1011、0.1100、0.1033、0.0622mg/mL)2、4、6、8、10、12μL，注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積。以對(duì)照品量(μg)為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
含量測(cè)定精密稱(chēng)取3批苦參總生物堿提取物各3份，每份約5mg，置5mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)。分別精密吸取上述溶液5μL(測(cè)定氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿)或20μL(測(cè)定氧化槐果堿)，氧化苦參堿等對(duì)照品溶液各8μL，注入液相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積，計(jì)算含量。
實(shí)施例1苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物制備工藝苦參干燥根1kg，50％乙醇10L回流提取3次，每次提取1小時(shí)，減壓回收溶劑，得提取物，加水分散(溶液濃度為30mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)?，殘?jiān)?5倍量95％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖?，乙醇溶解液回收溶劑至無(wú)醇味，加10倍量0.5％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴?，殘?jiān)粗行?，減壓干燥，即得苦參總黃酮提取物。合并酸水液與水溶液，2mol/L NaOH調(diào)中性濃縮至濃度為0.68g/mL(以藥材量計(jì))，用2mol/L NaOH調(diào)pH＝8，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.408g/mL，吸附流速4BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶7，2倍樹(shù)脂體積蒸餾水洗脫除雜，70％乙醇洗脫5倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為5BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。測(cè)定苦參總黃酮提取物中總黃酮含量為58％，降苦參酮含量為4.12％，黃腐醇含量為0.23％，苦參啶含量為15.53％，三葉豆紫檀苷含量為1.78％；苦參總生物堿提取物中總生物堿含量為60％，其中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿4種成分的含量之和為41％。
實(shí)施例2苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物制備工藝苦參干燥根1kg，70％乙醇12L，回流提取3次，每次提取1.5小時(shí)，減壓回收溶劑，得提取物，加水分散(溶液濃度為30mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)瑲堅(jiān)?0倍量98％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖?，乙醇溶解液回收溶劑至無(wú)醇味，加12倍量0.7％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴?，殘?jiān)粗行裕瑴p壓干燥，即得苦參總黃酮提取物。合并酸水液與水溶液，2mol/L Na0H調(diào)中性，濃縮至濃度為0.59g/mL(以藥材量計(jì))，2mol/L NaOH調(diào)pH＝9，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.36g/mL，吸附流速3BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶9，2倍樹(shù)脂體積10％洗脫除雜，50％乙醇洗脫7倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為4BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。測(cè)定苦參總黃酮提取物中總黃酮含量為59％，降苦參酮含量為4.15％，黃腐醇含量為0.24％，苦參啶含量為15.61％，三葉豆紫檀苷含量為1.76％；苦參總生物堿提取物中總生物堿含量為62％，其中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿4種成分的含量之和為43％。
實(shí)施例3苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物制備工藝苦參干燥根1kg，70％乙醇14L，回流提取3次，每次提取1小時(shí)，減壓回收溶劑，得提取物，加水分散(溶液濃度為25mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)?，殘?jiān)?5倍量99％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖海掖既芙庖夯厥杖軇┲翢o(wú)醇味，加9倍量0.5％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴海瑲堅(jiān)粗行?，減壓干燥，即得苦參總黃酮提取物。合并酸水液與水溶液，2mol/LNaOH調(diào)中性濃縮至濃度為0.64g/mL(以藥材量計(jì))，2mol/LNaOH調(diào)pH＝8，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.40g/mL，吸附流速5BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶7，2倍樹(shù)脂體積蒸餾水洗脫除雜，70％乙醇洗脫5倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為5BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。測(cè)定苦參總黃酮提取物中總黃酮含量為60％，降苦參酮含量為4.18％，黃腐醇含量為0.24％，苦參啶含量為15.61％，三葉豆紫檀苷含量為1.77％；苦參總生物堿提取物中總生物堿含量為62％，其中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿4種成分的含量之和為42％。
實(shí)施例4苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物制備工藝苦參干燥根1kg，70％乙醇8L，回流提取4次，每次提取1.5小時(shí)，減壓回收溶劑，得提取物，加水分散(溶液濃度為30mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)?，殘?jiān)?0倍量96％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖?，乙醇溶解液回收溶劑至無(wú)醇味，加18倍量0.5％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴?，殘?jiān)粗行裕瑴p壓干燥，即得苦參總黃酮提取物。合并酸水液與水溶液，2mol/L NaOH調(diào)中性，濃縮至濃度為0.70g/mL(以藥材量計(jì))，2mol/L NaOH調(diào)pH＝9，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.41g/mL，吸附流速3BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶8，2倍樹(shù)脂體積20％洗脫除雜，70％乙醇洗脫6倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為5BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。測(cè)定苦參總黃酮提取物中總黃酮含量為60％，降苦參酮含量為4.21％，黃腐醇含量為0.24％，苦參啶含量為15.66％，三葉豆紫檀苷含量為1.77％；苦參總生物堿提取物中總生物堿含量為62％，其中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿4種成分的含量之和為41％。
實(shí)施例5苦參總黃酮提取物片制備苦參總黃酮提取物100g淀粉100g上述組分混合均勻，加滑石粉適量，壓制成1000片。
實(shí)施例6苦參總生物堿提取物片的制備苦參總生物堿提取物100g淀粉 100g上述組分混合均勻，加滑石粉適量，壓制成1000片。
實(shí)施例7苦參總黃酮提取物復(fù)方制劑的制備苦參總黃酮提取物30g生地黃提取物80g黃芩提取物 20g上述組分混合均勻，裝入硬明膠膠囊中，共2000粒膠囊。
實(shí)施例8苦參總生物堿提取物復(fù)方制劑的制備苦參總生物堿提取物50g地龍?zhí)崛∥?00g上述組分混合均勻，制成顆粒劑。
權(quán)利要求
1.同時(shí)制備的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于苦參總黃酮提取物由苦參中提取獲得，主要包含降苦參酮、苦參酮、異苦參酮等二氫黃酮(醇)類(lèi)化合物和三葉豆紫檀苷、黃腐醇、苦參啶等其他黃酮類(lèi)化合物。
2.同時(shí)制備的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于苦參總生物堿提取物由苦參中提取獲得，主要包含氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐胺堿等。
3.如權(quán)利要求1、2所述的同時(shí)制得的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于苦參為市售豆科槐屬植物苦參的干燥根。
4.如權(quán)利要求1、2所述的同時(shí)制得的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于上述苦參總黃酮提取物中黃酮類(lèi)成分的含量以重量計(jì)為5～100％；苦參總生物堿提取物中生物堿類(lèi)成分的含量以重量計(jì)為5～100％。
5.如權(quán)利要求4所述的同時(shí)制得的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于苦參總黃酮提取物中降苦參酮、黃腐醇、苦參啶、三葉豆紫檀苷四種成分的含量占全部黃酮類(lèi)成分含量以重量計(jì)為5～100％；苦參總生物堿提取物中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿四種成分的含量占全部生物堿類(lèi)成分含量以重量計(jì)為5～100％。
6.如權(quán)利要求1～5所述的同時(shí)制得的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物，其特征在于采用溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法、超臨界流體萃取法、柱色譜法、液-液逆流分配色譜法等任意一種方法，或這些方法的任意組合進(jìn)行制備。
7.如權(quán)利要求6所述的同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的制備方法，其特征在于，在使用這些方法進(jìn)行制備時(shí)，包括以下一個(gè)或幾個(gè)步驟提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類(lèi)、酮類(lèi)及酯類(lèi)溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿、鹽配成的酸性或堿性溶劑；提取方法可以是煎煮、加熱回流、超聲提取、冷浸、滲漉、微波提取、高壓提取等；過(guò)濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹(shù)脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等；濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等；干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。
8.如權(quán)利要求6所述的同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的制備方法，其特征在于當(dāng)使用大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行制備時(shí)，所用的大孔樹(shù)脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱堿性或弱酸性等任意一種類(lèi)型，如D101、D4020、HPD400、AB-8、S-8、HZ-806、D4006、X-5、NKA-II、NKA-9等，其中優(yōu)選的為弱極性或中等極性的樹(shù)脂，如AB-8、HPD400、D101、D4006、X-5等，所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優(yōu)選的為0～100％乙醇。
9.如權(quán)利要求8所述的同時(shí)制備苦參總黃酮和苦參總生物堿的制備方法，其特征在于苦參干燥根加30～90％乙醇，回流提取2～3次，每次提取1～2小時(shí)，溶劑用量為5～15倍量(L/kg)；苦參乙醇提取物加水分散(溶液濃度為10～30mg/mL)，離心(3000rpm，30min)，得水溶液和殘?jiān)瑲堅(jiān)?0～50倍量70～100％乙醇超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)鸵掖既芙庖?，乙醇溶解液回收溶劑至無(wú)醇味，加5～15倍量0.3～1％HCl超聲溶解，離心(3000rpm，30min)，得殘?jiān)退崴?，殘?jiān)粗行裕瑴p壓干燥，即得苦參總黃酮提取物；合并酸水液與水溶液，2mol/LNaOH調(diào)中性，濃縮至濃度為0.3～0.7g/mL(以藥材量計(jì))后，用2mol/LNaOH調(diào)pH＝7～9，通過(guò)AB-8、X-5等中等極性大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.18～0.42g/mL，吸附流速為3～9BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶5～1∶10，0～30％7醇洗脫2～4BV進(jìn)行除雜，除雜流速為2～8BV/h，用40～95％乙醇洗脫5～9倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為3～9BV/h；收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得到苦參總生物堿提取物。
10.如權(quán)利要求1～5所述的苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物的應(yīng)用，其特征在于，上述苦參總黃酮提取物和苦參總生物堿提取物及其組合物可以單獨(dú)或組合或與其它任何中西藥物或食物按任意比例配伍，用于制備藥物或功能性食品，所制得的藥物或功能性食品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、沖劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了同時(shí)制備苦參總黃酮提取物和總生物堿提取物的制備方法。其中苦參總黃酮提取物主要包含降苦參酮、苦參酮、異苦參酮等二氫黃酮(醇)類(lèi)化合物和三葉豆紫檀苷、黃腐醇、苦參啶等其他黃酮類(lèi)化合物?？鄥⒖偵飰A提取物主要包含氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐胺堿等?？鄥⒖傸S酮提取物和總生物堿提取物可由溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法、超臨界流體萃取法、柱色譜法、液－液逆流分配色譜法等任意一種方法，或這些方法的任意組合制備獲得。所制得的苦參總黃酮提取物中黃酮類(lèi)成分的含量以重量計(jì)為5～100％，其中降苦參酮、黃腐醇、苦參啶、三葉豆紫檀苷四種成分的含量占全部黃酮類(lèi)成分含量以重量計(jì)為5～100％；苦參總生物堿提取物中生物堿類(lèi)成分的含量以重量計(jì)為5～100％，其中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿四種成分的含量占全部生物堿類(lèi)成分含量以重量計(jì)為5～100％。
文檔編號(hào)C07D311/30GK101084989SQ20071012264
公開(kāi)日2007年12月12日 申請(qǐng)日期2007年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月11日
發(fā)明者劉斌, 石任兵, 朱麗君 申請(qǐng)人:石任兵, 劉斌