本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，尤其涉及一種對(duì)酒精性肝損傷具有輔助保護(hù)作用的保健食品。

背景技術(shù)：

我們知道，肝臟是人體主要的解毒器官，酒精屬于微毒類飲品，進(jìn)入人體的酒精被吸收后，約90％必須在肝臟經(jīng)肝細(xì)胞漿中的乙醇脫氫酶和過氧化氫酶的化學(xué)作用，氧化解毒為乙醛，乙醛再經(jīng)過醛脫氫酶，三羧酸循環(huán)的進(jìn)一步的氧化，才成為二氧化碳和水，因此，一次飲入過量酒精或酒類飲料或長(zhǎng)期過度飲酒，就會(huì)損傷、破壞肝細(xì)胞，最后因肝細(xì)胞反復(fù)發(fā)生脂肪變性，壞死和再生，而導(dǎo)致肝纖維化和肝硬化等酒精中毒性肝病的發(fā)生?？梢?，對(duì)有飲酒習(xí)慣的人來說，保護(hù)肝臟、防治肝病有極為重要的意義。

目前，我國(guó)保健食品市場(chǎng)對(duì)于酒精肝損傷的護(hù)肝保肝產(chǎn)品需求量很大，盡管市場(chǎng)該類產(chǎn)品的研發(fā)很多，但大多數(shù)產(chǎn)品的功效不顯著，本發(fā)明的特征為以枳椇子、銀耳、葛根、甘草、五味子、猴頭菇、殼寡糖為主要組分，經(jīng)過科學(xué)合理的提取加工過程，得到的產(chǎn)品對(duì)酒精性肝損傷具有明顯的輔助保護(hù)作用。

銀耳(Tremella fuciformis Berk)，又名白木耳、雪耳，屬擔(dān)子菌亞門，層菌綱，有隔擔(dān)子菌亞綱，銀耳目，銀耳科，銀耳屬。性平，味甘、淡、無毒。銀耳其名始見于陶弘景(公元452～546)所著《名醫(yī)別錄》。從我國(guó)漢代的《神農(nóng)本草經(jīng)》，到明代杰出的醫(yī)學(xué)家李時(shí)珍的《本草綱目》，以及近代《中國(guó)藥學(xué)大辭典》對(duì)銀耳藥用的功效都作過記載。清末葉小峰著《本草再新》一書稱銀耳能“潤(rùn)肺滋陰”?！侗静輪柎稹分杏终f銀耳“能治口干肺疹，痰郁咳逆”?！对鲇唫嗡帡l辨》謂銀耳能治“肺熱肺燥，便血，去面上黑斑”。唐慎生著《抗癌縱橫談一探索與希望》講銀耳主治肺熱咳嗽，胃炎，大便下血，痢疾，面部面斑，癌癥腫瘤等病癥。銀耳是一種藥用價(jià)值極高的食用菌，具有強(qiáng)精、補(bǔ)腎、潤(rùn)腸、益胃、補(bǔ)氣、和血、強(qiáng)心、壯身、補(bǔ)腦、提神、美容、嫩膚、延年益壽之功效。是一種高級(jí)滋養(yǎng)補(bǔ)品。

銀耳中主要含多糖類成分，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，銀耳多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化衰老、降血糖血脂、抗凝血血栓、抗?jié)?、促進(jìn)蛋白質(zhì)合成、抗病毒、促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)及改善記憶力等多方面的活性。近年來研究發(fā)現(xiàn)，銀耳多糖口服或腹腔注射給藥能明顯對(duì)抗由四氯化碳所致的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的升高，緩解四氯化碳引起的肝細(xì)胞損傷。銀耳多糖皮下注射小鼠，發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、糖元有明顯增加，而基質(zhì)卻相應(yīng)降低。這說明銀耳多糖有促進(jìn)肝臟細(xì)胞蛋白質(zhì)合成，增加機(jī)體能量供給和儲(chǔ)備的功效。銀耳抱子多糖還可治療慢性活動(dòng)性肝炎和慢性遷延性肝炎，使乙型肝炎表面抗原(HbsAg)轉(zhuǎn)陰，緩解乙肝癥狀。

猴頭菇(Hericium erinaceus)隸屬于擔(dān)子菌門、猴頭菇科，為著名的藥食兼用菌。子實(shí)體和發(fā)酵菌絲體均可入藥，性平味甘，具有助消化、利五臟的功能，營(yíng)養(yǎng)豐富，素有“山珍猴頭，海味燕窩”之說。其藥效成分主要有多糖、低聚糖、猴頭菇素(erinacine)和猴頭菇酮(hericenone)等，具有保肝養(yǎng)胃、增強(qiáng)免疫力、降血糖、保護(hù)神經(jīng)、抗癌和抗氧化等功效。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，猴頭菇中多糖為主要成分，猴頭菇提取物在胃黏膜保護(hù)方面作用尤為突出：①對(duì)急、慢性潰瘍形成均有明顯的抑制作用，對(duì)胃酸分泌也有一定的抑制作用；②可促進(jìn)防御因子NOS、NO和EGF、EGFR的內(nèi)源性釋放，從而提高黏膜再生修復(fù)能力，增強(qiáng)胃黏膜防御機(jī)制，有利于潰瘍的愈合；③抗氧化力強(qiáng)，增強(qiáng)胃黏膜上皮細(xì)胞抗H+的機(jī)能，改善胃黏膜營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，對(duì)受損胃黏膜有修復(fù)和營(yíng)養(yǎng)作用；④對(duì)胃腸蠕動(dòng)及排便運(yùn)動(dòng)有正向調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)胃腸排空，顯著改善消化功能；⑤可顯著的促進(jìn)胸腺細(xì)胞和脾臟淋巴細(xì)胞的增殖，提高自然殺傷細(xì)胞的能力從而提高機(jī)體對(duì)抗胃炎的免疫力；⑥治療胃病同時(shí)具有止痛、鎮(zhèn)痛作用。

枳椇子(Semen Hoveniae)是鼠李科(Rhamnaceae)枳椇屬(Hovenia)植物枳椇(Hovenis acerba Lindl.)、北枳椇(Hovenia dulcis Thunb)和毛果枳椇(Hovenia trichocarpa Chun et Tsiang)的成熟種子或具有花序軸的果實(shí)，又名拐棗、木蜜、樹蜜、雞距子、天藤雞爪子、棘拘、雞爪梨等。枳椇子性甘、味平、無毒，能養(yǎng)陰、生津、潤(rùn)燥、止渴、涼血，具有清熱利尿、解酒毒之功效，主治醉酒、煩熱、口渴、嘔吐、二便不利等癥。有研究表明，枳椇子有顯著的解酒、保肝、抗肝纖維化及抗衰老、抗疲勞等作用。枳椇子具有解酒作用的記載始見于唐代的《新修本草》，稱其“味甘、平，無毒。以木為屋，屋中酒則味薄”。《千金翼方》中也有記載，認(rèn)為“枳椇以為木屋，屋中酒則味薄”，《證治準(zhǔn)繩》中記載“解酒毒無如枳椇子之妙”?！蹲C類本草》、《方考》、《滇南本草》、《本草從新》、《本草述鉤元》、《得配本草》、《本草分經(jīng)》和《本草便讀》中都有關(guān)于枳椇子具有解酒作用的記載。

Hase等發(fā)現(xiàn)，枳椇子水提取液可顯著降低大鼠血中的乙醇濃度，加速乙醇代謝。嵇揚(yáng)等報(bào)道，枳椇子水提取液可顯著縮短小鼠翻正反射恢復(fù)時(shí)間。

Yoshikawa等對(duì)枳椇子果實(shí)和種子的甲醇溶解部位做了研究，發(fā)現(xiàn)此部位能顯著縮短由乙醇誘導(dǎo)的肌肉松弛時(shí)間。

朱肖鴻等報(bào)道，枳椇子對(duì)SD大鼠酒精性脂肪肝具有預(yù)防作用，可明顯降低乙醇引起的血清ALT、AST升高，在組織學(xué)上可明顯改善肝細(xì)胞的脂肪變性。Hase等報(bào)道了北枳椇的果實(shí)對(duì)四氯化碳或氨基半乳糖等引起的小鼠肝損傷有保護(hù)作用，其中所含二氧楊梅素的活性高于現(xiàn)在歐洲國(guó)家治肝病常用藥益肝靈。嵇揚(yáng)等發(fā)現(xiàn)枳椇子水提液能提高肝細(xì)胞存活和增殖率。施震等用CCl4制備大鼠肝纖維化模型，結(jié)果顯示枳椇子提取物可明顯減少肝纖維化大鼠肝內(nèi)膠原、HA、TGFβ1的含量，降低轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子含量，并抑制脂細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞，具有抗早期肝纖維化作用。張洪等用CCl4建立大鼠肝纖維化模型，發(fā)現(xiàn)枳椇子能促進(jìn)肝纖維化過程中I、III型膠原的降解，其機(jī)理可能與抑制肝星狀細(xì)胞活化有關(guān)。張洪等連續(xù)給予大鼠枳椇子醋乙酸乙酯提取物10天后發(fā)現(xiàn)，枳椇子醋酸乙酯提取物可抑制苯胺經(jīng)化酶活性，增加氨基比林N-脫甲基酶活性(增長(zhǎng)率，在mRNA水平上，明顯增加CYP1A1、CYP2C11和CYP3A1基因表達(dá)水平。

有研究表明，枳椇子提取物解酒和清除羥自由基的活性集中在乙酸乙酯部位，枳椇子乙酸乙酯提取物能夠提高小鼠機(jī)體糖原儲(chǔ)備和耐缺氧的能力。鄭鵬鵬等報(bào)道了拐棗不同提取物的體外抗氧化作用，發(fā)現(xiàn)拐棗的乙酸乙酯萃取物的抗氧化能力最強(qiáng)，其多酚含量為202.8mg/g，且其抗氧化活性與多酚含量有關(guān)。

葛根(Radix Puerariae)為豆科(Leguminosae)葛屬(Pueraria)植物野葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)或甘葛藤(習(xí)稱粉葛)(Pueraria thomsonii Benth.)的干燥根，又名葛藤、葛麻葉、甜葛藤、粉葛藤等，在我國(guó)資源十分豐富。其性涼，味甘、辛，歸脾胃經(jīng)，具有解肌退熱、生津透疹、升陽止瀉等功效，主要用于治療表證發(fā)熱，項(xiàng)背強(qiáng)痛；熱病口渴，消渴證，麻疹不透；熱污熱痢，脾虛泄瀉等癥。葛根始載于秦漢時(shí)期《神農(nóng)本草經(jīng)》，記載：葛根“主消渴，身大熱，嘔吐，諸痹，起陰氣，解諸毒?！薄侗静菥V目拾遺》、《本草衍義》、《醫(yī)學(xué)啟源》、《珍珠囊補(bǔ)遺藥性賦》、《藥品化義》、《得配本草》等中都有關(guān)于葛根具有解酒毒作用的記載。

現(xiàn)代研究表明，葛根提取物有一定的解酒作用，能提高小鼠對(duì)酒精的耐受閾值和醉酒潛伏期，加速酒精代謝、降低其肝毒性。研究表明，其主要活性成分為葛根總黃酮和葛根素。葛根素不僅可發(fā)揮解酒作用，還能對(duì)抗乙醇中毒誘發(fā)的各種并發(fā)癥。

葛根能通過清除氧自由基和抗脂質(zhì)過氧化而使酒精導(dǎo)致的血清黏度異常變化恢復(fù)到正常狀態(tài)。葛根異黃酮化合物可顯著抑制氧化損傷引起的紅細(xì)胞溶血、微粒體活性氧類造成的過氧化反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，并提高體內(nèi)SOD活性強(qiáng)度。葛根中的葛根素、大豆苷元及大豆苷均可抑制嗜酒大鼠的酒精消耗。

五味子為木蘭科(Magnoliacence)植物五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.)或華中五味子(Schisandra sphenanthera Rehd.Et Wils.)的干燥成熟果實(shí)。其味酸，甘，性溫，無毒，具有斂肺生津，補(bǔ)腎養(yǎng)心，收斂固澀等功效，用于久嗽虛喘，津虧口渴，自汗盜汗，夢(mèng)遺滑精，遺尿尿頻，久瀉久痢，失眠健忘，心悸怔忡等癥。五味子藥用歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。《本草綱目》云：“五味今有南北之分，南產(chǎn)者色紅，北產(chǎn)者色黑，入滋補(bǔ)藥必用此產(chǎn)者乃良。”《別錄》、《本草經(jīng)集注》、《新修本草》、《本草圖經(jīng)》等均有五味子滋補(bǔ)保健作用的記載。

五味子的醇提物以及五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、酯甲和酯乙均有不同程度的降低因化學(xué)物質(zhì)引起的血清轉(zhuǎn)氨酶升高，并具有誘導(dǎo)肝臟藥物代謝酶的作用。高曄等研究表明五味子對(duì)BCG+LPS誘發(fā)的肝損傷有顯著的防治作用，從免疫機(jī)制的角度證明了五味子的保肝降酶作用。李競(jìng)等研究表明五味子水煎劑可顯著提高腦、肝及血液中SOD活性，對(duì)肝細(xì)胞膜的完整性具有保護(hù)作用。曲玲等采用四氯化碳和高膽固醇喂養(yǎng)制造大鼠肝損傷模型，結(jié)果表明緋紅南五味子能降低肝組織脂質(zhì)過氧化，提高氧自由基清除能力，對(duì)肝損傷具有一定的保護(hù)作用。Chiu等研究表明，預(yù)處理五味子乙素可提高肝組織線粒體谷胱甘肽抗氧化作用，同時(shí)誘導(dǎo)熱休克蛋白25/70的生成，對(duì)CCL4引起的肝中毒具有保護(hù)作用。Ip等研究表明五味子乙素與丙素對(duì)肝的保護(hù)作用與增加肝線粒體谷胱甘肽和谷胱甘肽還原酶的活性有關(guān)。五味子中的多種成分，如五味子甲、乙、丙素、醇乙及五味子酚等均能顯著提高肝微粒體肝臟P450、NADPH細(xì)胞色素C還原酶和氨基比林脫甲基酶的活性，增強(qiáng)肝臟的解毒功能。

殼寡糖(Chitosan oligosaccharide，COS)是指2-20個(gè)單糖單位組成的低分子量水溶性氨基葡萄糖聚糖類，它是由甲殼素或殼聚糖經(jīng)酶降解或化學(xué)降解制成的水溶性低分子量的聚糖。將由甲殼素制得的低聚糖稱為甲殼質(zhì)低聚糖，由殼聚糖制得的低聚糖稱為殼低聚糖。甲殼素(Chitin)是由乙酰氨基葡萄糖經(jīng)β-1,4-糖苷鍵連接而成的聚合物，其脫乙酰基后的產(chǎn)物為殼聚糖(Chitosan)，學(xué)名為β-1,4-聚-D-氨基葡萄糖，分子式(C6H11NO4)n。殼聚糖廣泛分布于自然界甲殼綱動(dòng)物(蝦、蟹、昆蟲)的甲殼、真菌和某些植物的細(xì)胞壁中，是一種天然有機(jī)高分子多糖，在自然界，生物合成量?jī)H次于纖維素。與殼聚糖相比，殼寡糖具有良好的水溶性，所以很容易被吸收利用，同時(shí)還具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、強(qiáng)化肝脾功能和抗腫瘤等作用。

殼寡糖有利于脂質(zhì)代謝而保護(hù)肝臟不發(fā)生脂肪肝。殼寡糖與干擾素并用，可促進(jìn)肝炎病毒抗體的產(chǎn)生，有利于防治肝炎。殼寡糖有強(qiáng)化醛脫氫酶活性的作用，從而將嗜酒者肝內(nèi)的乙醇氧化成毒性較強(qiáng)的乙醛，后者再氧化成CO2與H2O，緩解乙醇對(duì)肝臟的損傷，起到護(hù)肝作用。

殼寡糖可以調(diào)節(jié)消化道微生物區(qū)系。從目前已報(bào)道的雙歧桿菌促生長(zhǎng)因子(bifidufactor，BF)研究結(jié)果分析，殼寡糖是BF的一種重要種類，它能調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道內(nèi)微生物的代謝活動(dòng)，改善腸道微生物區(qū)系分布，促進(jìn)雙歧桿菌生長(zhǎng)繁殖，從而提高機(jī)體免疫力，抑制腸道有害菌生長(zhǎng)，產(chǎn)生B族維生素，分解致癌物質(zhì)，促進(jìn)腸蠕動(dòng)，增進(jìn)蛋白質(zhì)吸收。任林等發(fā)現(xiàn)殼寡糖可使小鼠盲腸內(nèi)容物內(nèi)雙歧桿菌、乳酸桿菌增加，大腸桿菌和腸球菌減少。實(shí)驗(yàn)證明，殼寡糖應(yīng)用于乳制品，可使雙歧桿菌增生120倍。

甘草來源于豆科(Leguminosae)植物甘草(又名烏拉爾甘草G.uralensis Fisch.)、脹果甘草(G.inflate Bat.)或光果甘草(G.glabra L.)的干燥根及根莖。中醫(yī)認(rèn)為甘草性平，味甘，具有補(bǔ)脾益氣，清熱解毒，潤(rùn)肺止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥的功效；中醫(yī)臨床主要用于脾胃虛弱、倦怠乏力、心悸氣短、咳嗽痰多、脘腹及四肢攣急疼痛、癰腫瘡毒，還可緩解藥物的毒性、烈性。

有研究表明，甘草浸膏口服，對(duì)四氯化碳所致大鼠肝損傷有明顯保護(hù)作用，可使肝臟的變性和壞死顯著減輕。肝細(xì)胞內(nèi)的糖原及核糖核酸恢復(fù)，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力顯著下降，甘草甜素、甘草次酸可使結(jié)扎總膽管的家兔、大鼠血膽紅素降低，尿膽紅素排泄增加，此作用比葡萄糖醛酸內(nèi)酯及蛋氨酸強(qiáng)。甘草酸制劑強(qiáng)力寧(potenlin)對(duì)慢性活動(dòng)性肝炎GPT增高者效果顯著。

趙世元等研究表明，甘草總黃酮可降低荷瘤小鼠脾細(xì)胞，升高胸腺指數(shù)，即甘草總黃酮有改善荷瘤小鼠免疫功能的作用。

綜上所述，銀耳、猴頭菇、枳椇子、葛根、五味子、殼寡糖、甘草聯(lián)合應(yīng)用，以不同的藥效物質(zhì)從不同的作用靶點(diǎn)和途徑對(duì)于酒精性肝損傷具有明顯的輔助保護(hù)作用，可有效的預(yù)防和保護(hù)酒精性肝損傷。在本發(fā)明之前，未前相同或者類似的組成用于輔助保護(hù)酒精性肝損傷的報(bào)道，市場(chǎng)上也也未見相同或類似的產(chǎn)品。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的之一是提供一種與現(xiàn)有的保肝解酒的產(chǎn)品具有本質(zhì)區(qū)別的產(chǎn)品，本產(chǎn)品采用古代中醫(yī)理論組方而成，同時(shí)也恰好符合現(xiàn)在藥理學(xué)研究的結(jié)論。

本產(chǎn)品以銀耳、猴頭菇、枳椇子、葛根、五味子、殼寡糖、甘草為主要原料制成的保健食品，具有解酒護(hù)肝、保護(hù)胃黏膜、增強(qiáng)免疫力等功效。本發(fā)明組方中的君藥銀耳，具有潤(rùn)肺滋陰，平肝益胃之功效；臣藥猴頭菇，具有保肝養(yǎng)胃，降火滋陰的作用；佐以枳椇子、葛根、五味子、殼寡糖4味，可共奏清熱解毒，平肝瀉火，養(yǎng)陰生津，滋肝補(bǔ)腎之功效；以甘草為使，補(bǔ)脾益氣，調(diào)和諸藥，共同達(dá)到平肝解毒，保肝解酒的目的。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明，適量飲酒可以舒筋活血，有利于身體健康，但長(zhǎng)期過量飲酒會(huì)對(duì)肝、胃、脾等內(nèi)臟器官造成損傷，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致精神障礙、胃潰瘍、脂肪肝、酒精性肝炎以及肝硬化等。本發(fā)明組方中的銀耳、猴頭菇、殼寡糖的多糖類成分具有提高肝臟解毒能力，保護(hù)肝臟，增強(qiáng)機(jī)體抗免疫能力，防治胃粘膜損傷。枳椇子、葛根中的黃酮類成分不僅可發(fā)揮解酒作用，還能對(duì)抗乙醇中毒誘發(fā)的各種并發(fā)癥。五味子的醇提物有降低因化學(xué)物質(zhì)引起的血清轉(zhuǎn)氨酶升高，并具有誘導(dǎo)肝臟藥物代謝酶的作用。甘草總黃酮有改善荷瘤小鼠免疫功能的作用。

在選取本發(fā)明保健食品的各原料進(jìn)行組合搭配時(shí)，經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，選用了銀耳、猴頭菇、枳椇子、葛根、五味子、殼寡糖、甘草等七種衛(wèi)生部規(guī)定的既是食品又是藥品和可用于保健食品的原料，充分發(fā)揮了它們各自的功效，并經(jīng)合理搭配所能產(chǎn)生的協(xié)調(diào)效果。與目前已有的護(hù)肝解酒類保健食品相比，具有活性更確切，化學(xué)組成具有明顯的特色，這也是本發(fā)明的對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的突出貢獻(xiàn)。

本發(fā)明的目的之二是提供一種能夠?qū)⒎街杏糜诒８谓饩频挠行С煞肿畲笙薅鹊靥崛〕鰜淼闹苽浞椒?，通過大量實(shí)驗(yàn)得到的制備方法不僅達(dá)到了上述目的，而且該方法可以產(chǎn)業(yè)化大量制備，提取所用到的溶劑為水，成本低，同時(shí)為保證組分中枳椇子，葛根，五味子，甘草的有效解酒護(hù)肝成分的富集，僅采用少量的有機(jī)溶劑進(jìn)行醇沉，最大限度地減少了有機(jī)溶劑乙醇的用量，更為環(huán)保。綜上,本發(fā)明的制備方法低成本、高環(huán)保，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有實(shí)質(zhì)的突出特點(diǎn)和顯著的技術(shù)進(jìn)步。

本發(fā)明保健食品的各組分的質(zhì)量配比為銀耳5-10份，猴頭菇5-10份，枳椇子4-8份，葛根5-8份，五味子1-3份，殼寡糖1-3份；甘草1-5份；所護(hù)保健食品的劑型為口服液。優(yōu)選的最佳質(zhì)量配比為銀耳8份，猴頭菇8份，枳椇子6份，葛根6份，五味子2份，殼寡糖2份，甘草3份；所述保健食品的劑型為口服液。

本發(fā)明的組合物的制備方法如下：

(1)將銀耳、猴頭菇加20倍量的水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾液濃縮至每毫升含0.15克原料，得水提物，備用；

(2)將枳椇子、葛根、五味子、甘草，加8倍量的水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾液濃縮至每毫升含0.3克原料，加乙醇至醇濃度達(dá)50％，靜置，離心，上清液回收乙醇至每ml含0.3g原料，得醇沉提取物，備用；

(3)將水提物和醇沉提取物兩部分液體混合，加入殼寡糖，攪拌溶解，3000rps/5min離心，離心液加蒸餾水至200毫升，即得。

由本發(fā)明的七味原料制得的的保健食品具有酒精性肝損傷的輔助保護(hù)作用，是通過以下的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)的。

1材料和方法

1.1樣品及供試液制備：本實(shí)驗(yàn)所用的樣品為具體實(shí)施方式中實(shí)施例1的口服液，人體推薦用量為每人(成人)每日2次，每次100ml，用前將200ml濃縮至20ml。陽性對(duì)照：紐斯葆牌葛維片(廣州健之嘉健康食品有限公司，批號(hào)：61402，規(guī)格：0.6g/片×6片)。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：成年小鼠(18-22克)。

1.3劑量選擇與受試物給予方式：根據(jù)樣品的人體推薦量，設(shè)13ml/kg、26ml/kg、39ml/kg(分別相當(dāng)于推薦量的5、10、15倍)，另設(shè)一個(gè)酒精肝損傷模型組(模型對(duì)照組)和一個(gè)陰性對(duì)照組。每組12只動(dòng)物，以經(jīng)口方式給予受試溶液；陽性對(duì)照組灌胃濃度為78mg/ml，0.4ml/20g；空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水。每日稱重調(diào)整受試樣品劑量。連續(xù)給藥30d，給予受試樣品結(jié)束時(shí)將模型對(duì)照組及樣品高、中、低3個(gè)劑量組一次灌胃給予50％乙醇12mL/kgBW，空白對(duì)照組給蒸餾水，禁食16h放血處死。取肝臟進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。

1.4主要儀器與試劑

儀器：半自動(dòng)生化分析儀、冷凍切片機(jī)、754-紫外可見光度計(jì)、電子分析天平、顯微鏡、離心機(jī)、組織勻漿器、漩渦混勻器、水浴鍋及微量加樣器等。

試劑：無水乙醇、還原型GSH、磺基水楊酸、5,5’-二硫硝基甲酸、Na₂HPO₄、NaH₂PO₄、KH₂PO₄、EDTA-Na₂、NaN₃等；MDA試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，批號(hào)：20030116)，TG試劑盒(中生北控科技股份有限公司，批號(hào)：081171)。

在模型成立的條件下，受試樣品組各項(xiàng)指標(biāo)與肝損傷模型對(duì)照組比較，MDA含量下降、GSH含量升高、TG含量降低，且與模型對(duì)照組差異有顯著性，可判定其結(jié)果陰性。

1.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理：用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。、

1.6結(jié)果判定：滿足以下任一條件，可判定受試樣品具有對(duì)酒精肝損傷有輔助作用。

1.6.1肝臟MDA、還原型GSH和TG三項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)陽性。

1.6.2肝臟MDA、還原型GSH和TG三項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)中任兩項(xiàng)指標(biāo)陽性和病理組織學(xué)檢查結(jié)果陽性。

2.試驗(yàn)結(jié)果

表1樣品對(duì)酒精肝損傷小鼠MDA、GSH和TG含量影響(n＝12)

注:與模型組比較¹⁾P<0.05，²⁾P<0.01；與空白對(duì)照組比較³⁾P<0.05，⁴⁾P<0.01

2.1樣品對(duì)MDA含量的影響的結(jié)果

從表1可以看出，模型組MDA含量明顯高于空白對(duì)照組(P<0.05)，說明肝損傷模型成立。陽性對(duì)照組和樣品高中低三個(gè)劑量組的MDA含量明顯下降，與模型組和空白對(duì)照組比較，均有顯著性差異。表明該樣品對(duì)酒精肝損傷的小鼠肝組織中的過氧化脂質(zhì)含量具有顯著的降低作用。

2.2樣品對(duì)GSH含量影響的結(jié)果

結(jié)果表明,模型組肝勻漿中GSH明顯下降，與空白組比較具有顯著性差異，表明肝損傷模型成立。陽性對(duì)照組和樣品高中低三個(gè)劑量組肝勻漿中GSH均有上升，但只有高劑量組與模型組比較具有顯著性(P<0.05)。表明該樣品具有提高酒精肝損傷的小鼠肝組織個(gè)GSH含量的作用。

2.3樣品對(duì)TG含量影響的結(jié)果

結(jié)果表明，肝損傷模型對(duì)照組小鼠的肝組織TG含量明顯高于陰性對(duì)照，兩者具有顯著性差異，說明肝損傷模型成立。陽性對(duì)照組和樣品各劑量組小鼠的肝組織TG含量均低于肝損傷模型組，說明該樣品具有降低酒精肝損傷的小鼠肝組織TG含量的作用。

3.小結(jié)

分別以相當(dāng)于人體推薦用量5、10、15倍的劑量給小鼠連續(xù)灌胃30天，能降低酒精肝損傷模型小鼠的肝組織中的甘油三酯(TG)含量，提高其肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)含量，減輕其肝組織的脂肪變性程度。由此可見，該保健食品具有對(duì)酒精肝損傷有輔助保護(hù)功能。

本發(fā)明通過下面的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的說明，但不意味著本發(fā)明僅限于此，具體實(shí)施方案如下。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種對(duì)酒精性肝損傷具有輔助保護(hù)作用的保健食品，所述各成分的質(zhì)量配比為：銀耳8份，猴頭菇8份，枳椇子6份，葛根6份，五味子2份，殼寡糖2份,甘草3份；所述保健食品的劑型為口服液。本口服液的服用方法為：每日2次，每次20ml。本口服液的制備方法為：

(1)將銀耳、猴頭菇加20倍量的水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾液濃縮至每毫升含0.15克原料，得水提物，備用；

(2)將枳椇子、葛根、五味子、甘草，加8倍量的水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾液濃縮至每毫升含0.3克原料，加乙醇至醇濃度達(dá)50％，靜置，離心，上清液回收乙醇至每ml含0.3g原料，得醇沉提取物，備用；

(3)將水提物和醇沉提取物兩部分液體混合，加入殼寡糖，攪拌溶解，3000rps/5min離心，離心液加蒸餾水至200毫升，即得。

實(shí)施例2

一種對(duì)酒精肝損傷具有輔助保護(hù)作用的保健食品。所述各成分的質(zhì)量配比為：銀耳5份，猴頭菇5份，枳椇子4份，葛根5份，五味子1份，殼寡糖3份，甘草1份；所述保健食品的劑型為口服液。本保健食品的服用方法為：每日2次，每次20ml。本口服液的制備方法同實(shí)施例1。

實(shí)施例3

一種對(duì)酒精肝損傷具有輔助保護(hù)作用的保健食品，所述各成分的質(zhì)量配比為：銀耳10份，猴頭菇10份，枳椇子8份，葛根8份，五味子3份，殼寡糖3份，甘草5份；所述保健食品的劑型為口服液。本發(fā)明的服用方法為：每日2次，每次20ml。本口服液的制備方法同實(shí)施例1。