技術(shù)特征：

1.一種以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：包括重組修飾的桿狀病毒，所述的桿狀病毒能夠表達禽流感病毒主要保護性抗原HA蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的禽流感病毒主要保護性抗原HA蛋白包括H7N9亞型禽流感病毒血凝素蛋白HA的全長，所述的禽流感病毒主要保護性抗原HA蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的重組修飾的桿狀病毒的基因組中雙啟動子基因盒被替換，所述雙啟動子基因盒如下組件：多角體蛋白啟動子被巨細胞病毒早期增強子啟動子替換，巨細胞病毒早期增強子啟動子下游為主要保護性抗原血凝素蛋白HA，P₁₀啟動子被巨細胞病毒早期增強子啟動子替換，巨細胞病毒早期增強子表達盒下游為主要保護性抗原血凝素蛋白HA；得到含雙CMV啟動子雙向表達的重組核苷酸序列HA-CMV-CMV-HA，其中CMV-HA核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的重組修飾的桿狀病毒的基因組中雙啟動子基因盒被替換，是以pFastBac^TMDual為骨架質(zhì)粒，pcDNA3.1(+)為材料，通過下述方法獲得：以pcDNA3.1(+)質(zhì)粒為模板，PCR擴增CMV序列，其上下游帶有BstZ 17I和BbsI酶切位點，用BstZ 17I和Bbs I酶切擴增片段CMV，回收包含663bp的片段，置換pFastBac^TM Dual的P₁₀啟動子，得到中間質(zhì)粒pFast-CMV；以pcDNA3.1(+)質(zhì)粒為模板，PCR擴增CMV序列，其上下游帶有BstZ 17I和BamH I酶切位點，用BstZ 17I和BamH I酶切擴增片段CMV，回收包含663bp的片段，置換中間質(zhì)粒pFast-CMV的多角體啟動子，最終獲得質(zhì)粒pFast-(CMV)₂，實現(xiàn)重組修飾的昆蟲桿狀病毒的基因組中雙啟動子基因盒被替換；其中CMV啟動子核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的重組修飾的桿狀病毒的構(gòu)建所用的出發(fā)載體為pFastBac^TM Dual。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的桿狀病毒為苜蓿丫紋夜蛾核型多角體病毒。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗，其特征在于：所述的重組修飾的桿狀病毒命名為重組桿狀病毒BV-(CHA)₂。

8.權(quán)利要求1～7任一項所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：首先通過對H7N9亞型禽流感病毒的HA基因的生物信息學(xué)軟件分析，獲得編碼H7N9流感病毒HA蛋白的基因的全長序列，分別在重組修飾的桿狀病毒供體質(zhì)粒pFast-(CMV)₂兩邊的多克隆位點依次插入流感病毒基因組HA，得到含雙CMV啟動子雙向表達的重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pFast-(CHA)₂；將重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH10Bac大腸桿菌，通過轉(zhuǎn)座重組，獲得重組桿狀病毒質(zhì)粒Bacmid-(CHA)₂；最后用脂質(zhì)體法將Bacmid-(CHA)₂轉(zhuǎn)染sf9昆蟲細胞從而獲得第一代重組桿狀病毒BV-(CHA)₂，采用sf9細胞培養(yǎng)和重組桿狀病毒增殖，結(jié)合超速離心分離技術(shù)，純化得到以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗。

9.權(quán)利要求1～7任一項所述的以桿狀病毒為載體的H7N9亞型禽流感基因工程疫苗的應(yīng)用，其特征在于：應(yīng)用于制備H7N9亞型禽流感疫苗。