專利名稱：：含有赤楊樹皮或樹干提取物的抗流感病毒組合物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及含有赤楊(Alnusjaponica)提取物的抗病毒組合物，具體涉及制備赤楊樹皮或樹干提取物的方法以及含有該提取物的組合物，所述提取物具有高度的抗病毒活性。
背景技術：
：禽流感病毒屬于正粘病毒科(orthomyxoviridaefamily)，并引起對家禽諸如小雞、火雞的傷害。根據(jù)致病性程度，禽流感病毒被分為高致病性、低致病性和非致病性禽流感病毒三種類型，其中高致病性病毒由世界動物衛(wèi)生組織(WorldOrganizationforAnimalHealth,ΟΙΕ)分類為OIEListA疾病，并且在韓國分類為“1類家畜感染疾病”。根據(jù)核殼體蛋白和基質(zhì)蛋白的抗原性，流感病毒分A、B或C型。此外，根據(jù)血凝素(HA)和唾液酸苷酶(NA)抗原結(jié)構的差別，HA被分為16個亞型，NA被分為9個亞型，其中HA幫助宿主細胞受體結(jié)合，并在宿主細胞膜與病毒包膜之間融合，引起病毒感染，并且當病毒在增殖后經(jīng)過細胞膜出芽時NA起到重要作用。理論上講，通過兩種蛋白質(zhì)組合存在144種病毒亞型。感染通過與受到污染的分泌物接觸發(fā)生，此外，其可以粒子和小滴兩種形式通過空氣、人的足部、飼料運輸車輛、設備和蛋表面上的糞便等傳播。根據(jù)感染病毒的致病性雖然存在各種癥狀，一般說來，它們是呼吸系統(tǒng)癥狀，腹瀉以及產(chǎn)蛋量急劇下降等。此外，在一些情況下，在頭部區(qū)域諸如鳥冠出現(xiàn)黃萎病，在面部出現(xiàn)水腫或者羽毛豎起(ruffled)。根據(jù)致病性，致死率從0%到100%，但是由于癥狀與雞新城疫(NewcastleDisease)、雞傳染性喉氣管炎(infectiouslarynogotracheitis)、支原體感染以及類似疾病的癥狀相似，需要進行準確診斷。高致病性禽流感從1959到2003在全世界已經(jīng)出現(xiàn)了23次，其中大多數(shù)是地方性的并被圍控(contained)。H5W亞型高致病性禽流感的爆發(fā)于2003年12月在韓國已經(jīng)出現(xiàn)，在包括歐洲、非洲和南亞的大多數(shù)國家諸如日本、中國、越南和印度尼西亞的超過30個國家已經(jīng)出現(xiàn)并因此變得全球性流行。雖然已知人類不會受到禽流感的感染，由于人類在1997年感染H5W，1999年在香港從人類分離出H9N2禽流感病毒，以及2004年在加拿大人感染H7禽流感病毒的情況，禽流感的預防對于公共健康部門來說是極為重要的。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的艮道(http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table_2006_06_20/en/index.html)，確認228人已經(jīng)感染過H5m亞型病毒，并且其中10個國家的130人在2003年到2006年6月20日的時間內(nèi)死亡。在韓國，H9N2亞型病毒引起的低致病性禽流感的爆發(fā)自1996年已經(jīng)出現(xiàn)以來，在1999再次出現(xiàn)。如果在大多數(shù)國家出現(xiàn)禽流感爆發(fā)，則家禽需要被拋棄，并且其中出現(xiàn)禽流感爆發(fā)的國家不能出口家禽產(chǎn)品，由此引起家禽工業(yè)的極大損失。此外，當存在人類感染的風險時，這種損害傳播到整個工業(yè)，包括旅游業(yè)以及運輸業(yè)，由此引起巨大損失。天然物質(zhì)指的是不含人工成分的最小加工程度的物質(zhì)，被分類為GRAS(通常被識別為安全)的天然物質(zhì)在其量或在使用天然物質(zhì)的食物的使用中沒有限制。在飼養(yǎng)業(yè)，天然物質(zhì)被分為天然添加劑，并被用作食品添加劑，在國外，由于其極佳的功能性，其已經(jīng)被用作健康食品和用于用戶目的的藥品而沒有額外限制。同時，赤楊是樺木科山毛櫸目的落葉雙子葉樹種，通常被稱為赤楊樹。它們分布在韓國、日本、中國等，并在沼澤條件下生長，其高度大約為20m，其樹皮為深棕紫色(deeppurplish-brown)0其冬芽為長的卵圓形，正如朝下翻轉(zhuǎn)的雞蛋的形狀，具有三條線和總花柄。赤楊的樹葉交錯生長，并且它們是雞蛋狀的卵圓形形狀(兩端或多或少為圓形，底部最寬)或者披針狀。葉片的兩側(cè)有光澤，并且葉邊為鋸齒狀。赤楊的花在三到四月開放，雌雄異體，并且形成柔荑。雄蕊花穗(Staminatespike)開雄花，并且每個苞葉將3_4朵花包在葉腋內(nèi)。每朵花有四個花被和四個雄蕊。果實在10月成熟，并且產(chǎn)生2-6個果實。其為長卵圓形，看起來象松果。有關赤楊提取物的常見專利的例子包括含有赤楊提取物的化妝品組合物(韓國專利公開號.10-2003-0074500)以及制備對于解酒有效的含有赤楊和綠茶葉提取物的健康飲料的方法(韓國專利公開號.10-2006-0023093)等等。近來，全世界付出了許多研究努力來開發(fā)抗病毒試劑。用于治療HIV(人體免疫缺陷病毒)_1和乙肝病毒的拉米夫定(Lamibudine)，用于治療皰疹病毒感染的更昔洛韋(gancyclovir)，主要用于治療呼吸道合胞體病毒感染癥狀但當在急救時也可用于治療各種病毒感染癥狀的病毒唑(ribavirin)，以及人工合成的作為流感病毒唾液酸苷酶抑制劑的zanamivirRELENZA和oseltamivirTAMIFLU均可在獲得批準后從市場上購買。但是，被許可用于治療A型流感病毒的金剛烷胺(amantadine)及其類似物金剛烷乙胺(rimantadine)的使用由于抗性病毒的出現(xiàn)及其副作用而減少。近來，在H5W禽流感病毒中對奧賽米韋(oseltamivir)抗性的病毒已經(jīng)出現(xiàn)，因此，存在對于開發(fā)各種抗病毒劑的迫切需要。本發(fā)明的發(fā)明人在韓國專利注冊號.10-0721703和韓國專利注冊號.10-0769050中已經(jīng)證實赤楊的甲醇提取物的抗病毒活性。但是，上面提到的專利具有的缺點在于僅僅當提取物以高濃度給藥時才顯示抗病毒活性，因此其可能的應用受到限制。因此，本發(fā)明的發(fā)明人付出了極大的努力來開發(fā)對正常細胞具有低毒性的天然物質(zhì)，同時即便在低濃度給藥時也具有極佳的流感病毒增殖抑制效果，結(jié)果確定，通過在30-80°C下以80-90%的乙醇提取赤楊的樹皮或樹干得到的提取物具有極好的抗病毒效果，由此完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的主要目的在于提供制備赤楊樹皮或者樹干提取物的方法，所述提取物具有高抗流感病毒活性。本發(fā)明的另一目的在于提供預防或改善流感病毒感染的食物組合物，其含有由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物。本發(fā)明的還一目的在于提供用于預防或治療流感病毒感染的藥物組合物，其含有由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了制備具有抗流感病毒活性的赤楊樹皮或者樹干提取物的方法，所述方法包括下列步驟(a)在30-80°C下使用80-100%的乙醇從韓國本土赤楊的樹皮或者樹干中提取；并且(b)回收得到的提取物溶液。本發(fā)明還提供了預防或者改善流感病毒感染的食物組合物，其包括由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物以及營養(yǎng)學上可接受的輔助添加劑。本發(fā)明還提供了預防或者改善流感病毒感染的藥物組合物，其包括由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物作為活性成分。本發(fā)明還提供了由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物用于治療流感病毒感染的應用。本發(fā)明還提供了利用由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物治療流感病毒感染的方法。在本發(fā)明中，流感病毒優(yōu)選選自下組，該組由人類流感病毒，豬流感病毒，馬流感病毒和禽流感病毒組成。優(yōu)選地，禽流感病毒為KBNP-0028(KCTC10866BP)。本發(fā)明的其他特征和實施例將通過下面的詳細描述和隨附的權利要求書進一步闡明。具體實施例方式在一個方面，本發(fā)明涉及制備具有抗流感病毒活性的赤楊樹皮或者樹干提取物的方法，所述方法包括下列步驟(a)在30-80°C下使用80-100%的乙醇從韓國本土赤楊的樹皮或者樹干中提??；并且(b)回收得到的提取物溶液。在本發(fā)明的一種實施方式中，在將赤楊樹皮或樹干粉末化并通過熱水提取、冷水提取、回流冷卻提取或者超聲提取方法使用水或者乙醇提取之后，將它們離心，由此得到赤楊樹皮或樹干的提取物。在本發(fā)明中，在將含有赤楊樹皮或者樹干提取物的組合物加入到由禽流感病毒感染的SPF孵化蛋中并培養(yǎng)之后，進行平板凝血反應檢測(platehemagglutinationtest),結(jié)果確定含有赤楊樹皮或樹干提取物的組合物具有極好的抗流感病毒效果，即便以低濃度給藥時也是如此。在另一方面，本發(fā)明涉及預防或者治療流感病毒感染(流感病毒病)的藥物組合物，其包括由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物作為活性成分。在本發(fā)明中，流感病毒優(yōu)選選自下組，該組由人類流感病毒，豬流感病毒，馬流感病毒和禽流感病毒組成。更優(yōu)選地，禽流感病毒為KBNP-0028(KCTC10866BP)。本發(fā)明的赤楊樹皮或樹干的提取物是天然物質(zhì)，因此沒有毒性，能夠作為醫(yī)療產(chǎn)品大劑量長期給藥。包括本發(fā)明的赤楊樹皮或樹干的提取物的組合物可通過將藥劑諸如抗組胺劑、消炎止痛劑、抗腫瘤劑以及抗生素混合在一起制備，或者可與它們組合使用。藥物劑量形式的本發(fā)明的組合物可以藥物學上可接受的鹽的形式使用，并且還可單獨或者以適當?shù)亟Y(jié)合使用，以及與其他藥物活性化合物組合使用。包括本發(fā)明的提取物的藥物組合物可根據(jù)常規(guī)制備方法制成口服制劑諸如粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、懸液、乳液、糖漿、氣霧劑等，外用制劑，栓劑和無菌注射液等。包括本發(fā)明的提取物的藥物組合物可包括載體、賦形劑和稀釋劑，合適的載體、賦形劑和稀釋劑的例子可包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藻糖醇、麥芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡膠、藻酸鹽、白明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、7jC、輕苯甲酉旨(methylhydroxylbenzoate)、輕苯丙酉旨(propylhydroxylbenzoate)、滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油。本發(fā)明的組合物可與常規(guī)稀釋劑或者賦形劑一起制成制劑形式，諸如與填充劑、延伸劑、結(jié)合劑、濕潤劑、崩解劑、表面活性劑等一起制成制劑。用于口服給藥的固體制劑包括片劑、丸劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑等，并且固體制劑通過將提取物與至少一種賦形劑混合來制備，例如與淀粉、碳酸鈣、蔗糖、乳糖、白明膠等混合來制備。而且，除賦形劑之外還使用潤滑劑諸如硬脂酸鎂和滑石粉。用于口服給藥的液體制劑包括懸浮劑、齊培丙醇(zipeprol)、乳劑、糖漿等，并且除常規(guī)稀釋劑諸如水和液體石蠟之外各種賦形劑例如濕潤劑、矯臭劑、香味劑、保護劑等可被包含在其中。注射給藥制劑包括無菌水溶液、非水溶液、懸液、乳液、凍干劑和栓劑。非水溶液和懸液的例子包括菜油諸如丙二醇、聚乙二醇和橄欖油，以及可注射酯諸如醋酸乙酯及其類似物。栓劑的基質(zhì)包括半合成脂肪酸酯(witepsol)，聚乙二醇(macrogol),吐溫60,可可黃油(cacaobutter),月桂油(laurinbutter),甘油白明膠及其類似物。雖然根據(jù)本發(fā)明的提取物的劑量基于患者體重和狀況、疾病的嚴重程度、劑型、給藥途徑和治療階段而變化，但本領域技術人員可正確確定劑量。但是，為了達到所需效果，本發(fā)明的提取物以每天0.01-200mg/kg的劑量給藥，優(yōu)選每天0.l-100mg/kg。前述劑量可作為每天的單劑量給藥，或者分成多個劑量，并且該劑量不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的提取物可經(jīng)各種途徑給藥到動物，包括大鼠，小鼠，家畜，人類等哺乳動物。給藥模式可包括例如口服和直腸給藥，或者靜脈、肌肉、皮下、子宮內(nèi)膜或者側(cè)腦室(intracerebroventricular)注身寸0在另一方面，本發(fā)明提供了預防或改善流感病毒感染的食物組合物，其含有由上述方法制備的赤楊樹皮或樹干的提取物以及營養(yǎng)學上可接受的輔助添加劑。在該方面的一種實施方式中，流感病毒優(yōu)選選自下組，該組由人類流感病毒，豬流感病毒，馬流感病毒和禽流感病毒組成。更優(yōu)選地，禽流感病毒為KBNP-0028(KCTC10866BP)。當制備各種功能性食品和健康功能性食品時，包括本發(fā)明的提取物或其藥物學上可接受的鹽的組合物可被用作主要成分、食物添加劑和輔助成分。在本發(fā)明中，術語“功能性食品”指的是通過將本發(fā)明的提取物加入到其中其功能得到改善的食品。功能在廣義上可分為如合成香料的物理功能和天然香料生理學功能。當將本發(fā)明的提取物加入到一般食品諸如合成香料和天然香料中時其生理學功能得到改善。因此，在本發(fā)明中，具有改善的功能的食品廣義上被定義為功能性食品。除了上面提到的以外，本發(fā)明的提取物可含有各種營養(yǎng)成分、維生素、礦物質(zhì)(電解質(zhì))、香料諸如合成香料和天然香料、著色物質(zhì)、增強劑(奶酪、巧克力等)果膠酸及其鹽、褐藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠體增厚劑、PH控制劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、酒精和用于碳酸化飲料用途的碳化劑等。另外，本發(fā)明的提取物可含有天然果汁以及用于果汁飲料和蔬菜飲料食品(provision)的果漿。這些成分可單獨或者組合使用。這些添加劑的比例不是6嚴格的，但一般基于100重量份的本發(fā)明的提取物，選自0.01-20重量份的范圍。實施例此后，將通過實施例更詳細地描述本發(fā)明。但是，對本領域技術人員來說容易想到的是，這些實施例僅用于說明的目的，而不解釋為對本發(fā)明的范圍的限制。實施例1赤楊提取物的制備1-1各種溫度下提取物溶劑和提取物的制備將購自韓國首爾市Kyungdong市場的韓國本土赤楊的樹皮在室溫下干燥24小時，切碎并粉碎，將Ikg得到的樹皮碎片使用IOL95%的乙醇在40°C、60°C和80°C下回流提取8小時，或者在10(TC下使用IOL水提取4小時，并在真空下過濾以收集上清液，接著從得到的碎片中洗脫有用物質(zhì)。將洗脫的有用物質(zhì)在真空下干燥24小時以得到IOOg赤楊粉末，然后將得到的粉末在99.9%的二甲亞砜(DMSO)溶液中溶解至濃度為20mg/ml，然后用于下面的實驗。為了進行對比實驗，通過韓國專利注冊號.10-0721703和韓國注冊號.10-0769050的實施例1中的方法制備赤楊樹皮提取物(含有赤楊提取物的抗病毒組合物)作為對照組。1-2使用來自不同區(qū)域的赤楊的提取物制備將購自韓國首爾市Kyungdong市場的韓國本土赤楊的樹皮或樹干以及購自中國延邊市場的中國本土赤楊樹皮在室溫下干燥24小時，切碎并粉碎，將Ikg得到的樹皮碎片分別使用IOL的80%乙醇和95%乙醇在40°C下回流提取并在真空下過濾以收集上清液，接著從得到的碎片中洗脫有用物質(zhì)。將洗脫的有用物質(zhì)在真空下干燥24小時以得到IOOg赤楊粉末，然后將得到的粉末在99.9%的二甲亞砜(DMSO)溶液中溶解至濃度為20mg/ml，然后用于下面的實驗。實施例2赤楊提取物的抗病毒效果測定2-1:KBNP-0028的制備當在實驗中使用禽流感病毒時，使用將A/雞/韓國/SNU0028/2000(H9N2)病毒(于2000年分離自韓國)在雞胚中傳代之后克隆的超增殖(hyperproliferative)KBNP-0028(KR2006-0026591)。也就是說，SNU0028[A/雞/韓國/SNU0028/2000(H9N2)；2005年5月9日分離并報告給NationalVeterinaryResearchandQuarantineService]是低致病性H9N2亞型禽流感病毒，并于2000年1月28日分離自位于NorthjeolaProvince的養(yǎng)雞場的開始大量死亡并且產(chǎn)蛋減少癥狀的雞群中。分離方法如下將來自感染小雞的腎臟和氣管樣品溶解后，懸浮在磷酸緩沖液中，并使用0.45μm濾紙過濾，將每種樣品接種到三個SPF(無特定病原體，SpecificPathogenFree)尿囊腔孵化蛋(SunriseCo.，NY)中，并在37°C下培養(yǎng)得到尿囊液。將20μ1尿囊液和20μ1從SPF孵化蛋孵化的小雞提取的0.雞血紅細胞滴到玻璃板上，并混合以進行平板凝血反應檢測。結(jié)果，在通過培養(yǎng)腎臟樣品和氣管樣品得到的所有尿囊液中均出現(xiàn)凝血反應。使用Η9Ν2專一性引物進行RT-PCR和堿基序列分析(KimMinChul,Master'sThesis,2002,SeoulNationalUniversity)對病毒進行鑒定，并在_70°C下儲存。其中，分離自氣管樣品的病毒在實驗中使用。為了在孵化蛋中選擇具有高產(chǎn)率的牛痘株(vacciniastrain)將SNU0028使用磷酸緩沖液稀釋至濃度為0.05到0.5HAU/ml，并將200μ1稀釋液接種到10-11日齡的SPF孵化蛋(SunriseCo.,NY)的尿囊腔中，然后在37°C下培養(yǎng)三天。經(jīng)早晨和下午檢查，每天將3天前死亡的孵化蛋拋棄。將存活3天的孵化蛋在4°C下儲存12-24小時，從其中收集尿囊液以測定每個蛋的體積和凝血反應滴度。其中，使用上面描述的相同方法將具有最大量和最高凝血反應滴度的尿囊液接種到孵化蛋中，并傳代19次以選擇其凝血感應滴度和產(chǎn)量顯示產(chǎn)量增加的尿囊液，因此，將毒株命名為KBNP-0028并于2005年10月26日保藏在位于韓國大田市儒城區(qū)魚隱洞的基因銀行(KCTC10866BP)處。2-2培養(yǎng)孵化蛋殼碎片將1011日齡的SPF孵化蛋(SunriseCo.，NY)的蛋殼使用70%酒精洗滌并除去所有雞胚和所有體液。將得到的蛋殼切成8mm長8mm寬的片，同時保持絨毛和尿囊粘附于蛋殼的內(nèi)表面上，將每片加入到24孔培養(yǎng)板中。通過下列方式制備培養(yǎng)基(i)將199培養(yǎng)基(GIBCO-BRL,NY,USA)與FlO培養(yǎng)基(GIBCO-BRL，NY，USA)以11的比例混合，(ii)加入0.075%的碳酸氫鈉和100μg/ml的慶大霉素。通過將100μ14-10倍稀釋的在實施例2-1中制備的尿囊液原液ΚΒΝΡ-0028加入到孵化蛋殼碎片的絨毛和尿囊中并在37°C下培養(yǎng)30分鐘使10-11日齡SPF孵化蛋(SunriseCo.，NY)感染病毒，并加入1000μ1培養(yǎng)基，然后將在實施例1_1和實施例1_2中制備的赤楊提取物分別以各種濃度加入到6個孔板中，接著在37°C下培養(yǎng)7天。2-3抗病毒效果的檢測加入了各種濃度赤楊提取物的在實施例2-2中培養(yǎng)7天的所述病毒感染液的培養(yǎng)液進行平板凝血反應檢測。將25μ1培養(yǎng)液和25ul雞血細胞(0.)滴到玻璃板上并均勻混合。根據(jù)上下左右移動玻璃板在兩分鐘內(nèi)是否出現(xiàn)血液凝集反應來確定病毒增殖。表1對照提取物溶劑赤楊提取物(μ/ml)病毒無病毒400200100506/60/6800C,95%乙醇0/60/62/65/6600C,95%乙醇0/60/62/65/6400C,95%乙醇0/60/61/63/61000C,水1/64/66/66/699.9%甲醇0/62/66/6-結(jié)果，如表1所示，在加入100°C水提取物作為陰性對照的樣品中，400μg/ml的6個測試樣品中有一個出現(xiàn)血液凝集反應，顯示了部分抗病毒效果，但是，在50μg/ml和100μg/ml的6個檢測樣品中都顯示血液凝集反應活性，表明病毒增殖沒有受到抑制。另一方面，在加入了95%乙醇提取物(80°C下)的樣品中，血液凝集反應在400μg/ml和200μg/ml的6個檢測樣品中都沒有發(fā)生，顯示病毒增殖完全被抑制，在100yg/ml的6個檢測樣品中有兩個出現(xiàn)了血液凝集反應，顯示了部分病毒抑制效果，在50yg/ml的6個檢測樣品中有五個出現(xiàn)了血液凝集反應，顯示了弱病毒抑制效果。加入了95%乙醇提取物(60°C下)的樣品顯示了與95%乙醇提取物(80°C下)相同的血液凝集反應結(jié)果。400μg/ml和200μg/ml的95%的乙醇提取物(40°C)顯示了與95%乙醇提取物(分別在80°C、65°C下)相同的血液凝集反應結(jié)果，因此，在所有樣品中都沒有顯示血液凝集反應活性，表明病毒增殖完全被抑制，并顯示在100μg/ml的6個檢測樣品中有一個出現(xiàn)了部分抗病毒效果的血液凝集反應，在50μg/ml的6個檢測樣品中有三個出現(xiàn)血液凝集反應，由此確定提取物以各種有效甚至很低的濃度顯示了高抗病毒活性。以100μg/ml的提取物濃度為基礎，各種溶劑的抗病毒活性順序如下95%乙醇提取物(40°C下)>95%乙醇提取物(80°C下)以及95%乙醇提取物(60°C下)>水提取物(100°C下)。因此確定，95%赤楊提取物(40°C下)最適合作為制備本發(fā)明的抗病毒組合物的赤楊提取物。為了比較對病毒增殖顯示最高抑制效果的40°C下并以各種提取溶劑提取不同來源的赤楊的抗病毒效果，在表2中顯示的條件下進行上述相同的實驗。表權利要求1.一種制備具有抗流感病毒活性的赤楊樹皮或者樹干提取物的方法，所述方法包括下列步驟(a)在30-80°C下使用80-100%的乙醇從韓國本土赤楊的樹皮或者樹干中提??；并且(b)在相同溫度下通過真空濃縮回收得到的提取物溶液并干燥。2.一種預防或者改善流感病毒感染的食物組合物，其特征在于，含有由權利要求1的方法制備的赤楊樹皮或樹干提取物以及營養(yǎng)學上可接受的輔助添加劑。3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，流感病毒選自下組，該組由人類流感病毒、豬流感病毒、馬流感病毒和禽流感病毒組成。4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于，所述禽流感病毒為KBNP-0028(KCTC10866BP)。5.一種預防或者改善流感病毒感染的藥物組合物，其含有由權利要求1的方法制備的赤楊樹皮或樹干提取物作為活性成分。6.根據(jù)權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述流感病毒選自下組，該組由人類流感病毒、豬流感病毒、馬流感病毒和禽流感病毒組成。7.根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述禽流感病毒為KBNP-0028(KCTC10866BP)。全文摘要本發(fā)明涉及含有赤楊提取物的抗病毒組合物，具體涉及制備含有赤楊樹皮或樹干提取物的高度活化的抗流感病毒組合物的方法以及含有該提取物的抗流感病毒組合物。根據(jù)本發(fā)明的赤楊的樹皮或者樹干的提取物對正常細胞具有很低的毒性，同時具有極佳的抗病毒效果，即便在以很低的濃度給藥時也是如此，因此，含有赤楊提取物的組合物可在預防和治療流感病毒感染中有效使用。文檔編號A61K36/185GK102215851SQ200880125161公開日2011年10月12日申請日期2008年12月4日優(yōu)先權日2007年12月11日發(fā)明者俞錫鉉,權赫俊,羅正燦,金炳啟申請人:Rnl生物技術株式會社