本發(fā)明涉及一種非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或口腔內(nèi)的菌群改善劑以及包含該生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑的口腔用組合物，其中，該生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑具有優(yōu)良的口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和口腔內(nèi)的菌群改善效果，并能有效保持常駐細(xì)菌群的平衡。

背景技術(shù)：

人體與各種細(xì)菌是共生的，并形成稱為常駐細(xì)菌群的細(xì)菌群落。該常駐細(xì)菌群中存在病原菌和機(jī)會(huì)性感染菌，但在保持細(xì)菌群的平衡狀態(tài)下，能抑制以這些細(xì)菌作為原因的疾病，即處于所謂的健康狀態(tài)。然而，由于飲食和抗生素的攝取、壓力、老化等原因，細(xì)菌群的平衡被破壞，病原菌和機(jī)會(huì)性感染菌增加而導(dǎo)致疾病。因此，為了控制疾病，不僅需要抑制病原菌，對(duì)于通過活化非致病性的常駐菌而保持常駐細(xì)菌群的平衡也是重要的。

在口腔內(nèi)生長(zhǎng)的數(shù)百種細(xì)菌中，呈現(xiàn)致病性的細(xì)菌只有以作為牙周病致病菌的牙齦卟啉單胞菌(porphyromonasgingivalis)、作為齲齒的致病菌的變形鏈球菌(streptococcusmutans)為代表的數(shù)種細(xì)菌。其余大部分通常為以未顯示對(duì)人體產(chǎn)生致病性的格氏鏈球菌(streptococcusgordonii)、緩癥鏈球菌(streptococcusmitis)和口腔鏈球菌(streptococcusoralis)為代表的緩癥鏈球菌群等的鏈球菌(streptococcus)屬細(xì)菌，小韋榮球菌(veillonellaparvula)等的韋榮球菌屬細(xì)菌，以及微黃奈瑟菌(neisseriasubflava)等奈瑟菌屬細(xì)菌等的通常口腔內(nèi)的非致病性常駐菌。因此，為了預(yù)防口腔疾病，在口腔內(nèi)良好地維持和形成由這些非致病性的常駐菌構(gòu)成的細(xì)菌群的平衡是重要的。

特別是，已知緩癥鏈球菌群的鏈球菌會(huì)干預(yù)上述的齲齒和牙周病致病菌的齒表面附著，具有抗菌作用(非專利文獻(xiàn)1)，且也公開了作為益生菌的應(yīng)用(專利文獻(xiàn)1：國際公開第2013/021957號(hào))，是具有口腔疾病抑制作用的常駐菌。

因此，提出了以神經(jīng)節(jié)苷脂作為有效成分的口腔內(nèi)細(xì)菌群改善劑和常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑(專利文獻(xiàn)2：日本專利特開2005-320275號(hào)公報(bào))，使用咖啡因的改善口腔細(xì)菌群的技術(shù)(專利文獻(xiàn)3：日本專利特開2012-77053號(hào)公報(bào))，以及具有針對(duì)齲齒原性細(xì)菌的抗菌力并同時(shí)具有增加乳酸分解細(xì)菌效果的口腔用組合物(專利文獻(xiàn)4和5：日本專利特開平08-175946號(hào)公報(bào)、日本專利特開平08-175947號(hào)公報(bào))，但這些技術(shù)產(chǎn)生的效果并不充分。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：國際公開第2013/021957號(hào)

專利文獻(xiàn)2：日本專利特開2005-320275號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)3：日本專利特開2012-77053號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)4：日本專利特開平08-175946號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)5：日本專利特開平08-175947號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)6：日本專利特開2007-1961號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)7：日本專利特開2010-77028號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)8：日本專利特開2004-26701號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)9：日本專利特開2001-151690號(hào)公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：vanhoogmoedcg,etal.appliedenvironmentalmicrobiology,2000,66(2):p659-663

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明要解決的問題

因此，希望開發(fā)通過促進(jìn)口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)而改善菌群并能良好地維持和形成常駐細(xì)菌群的平衡的新技術(shù)。

本發(fā)明是鑒于上述情況而形成的，其目的在于提供一種口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和口腔內(nèi)的菌群改善效果優(yōu)良，并能有效保持常駐細(xì)菌群平衡的非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或口腔內(nèi)的菌群改善劑以及口腔用組合物。

解決問題的手段

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明人經(jīng)專心研究，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，特定蘑菇的干燥粉末或其提取物能起到促進(jìn)口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)并改善細(xì)菌群的優(yōu)良效果，通過將特定蘑菇的干燥粉末或其提取物混入口腔用組合物，能獲得優(yōu)良的非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果，并能使口腔內(nèi)的常駐細(xì)菌群平衡保持良好。

也就是說，已知蘑菇及其提取物具有針對(duì)口腔疾病的致病菌的抗菌作用、抑制牙垢形成和抗炎等作用，并通過將蘑菇及其提取物混入口腔用組合物時(shí)，能有效抑制齲齒和牙周病(專利文獻(xiàn)6～9：日本專利特開2007-1961號(hào)公報(bào)、日本專利特開2010-77028號(hào)公報(bào)、日本專利特開2004-26701號(hào)公報(bào)以及日本專利特開2001-151690號(hào)公報(bào))。然而，在本發(fā)明中，意外地發(fā)現(xiàn)，后述特定蘑菇的干燥粉末或其提取物能起到以下的至今未知的作用：不僅不對(duì)口腔內(nèi)的非致病性常駐菌具有抗菌作用，反而能選擇性地活化其增殖而促進(jìn)生長(zhǎng)。由此，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)特定蘑菇的干燥粉末或其提取物適用于作為非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或口腔內(nèi)的菌群改善劑這種新的用途中。

在這種情況下，本發(fā)明中，通過特異性活化口腔內(nèi)的非致病性常駐菌(特別是選自格氏鏈球菌(streptococcusgordonii)、緩癥鏈球菌(streptococcusmitis)和口腔鏈球菌(streptococcusoralis)中的緩癥鏈球菌群的鏈球菌(streptococcus))的增殖而促進(jìn)其生長(zhǎng)，并能改善細(xì)菌群的平衡。因而，通過防止因飲食生活的紊亂等破壞口腔內(nèi)的常駐細(xì)菌群的平衡而保持其健康的狀態(tài)，并且通過增加參與抑制口腔疾病的緩癥鏈球菌群的鏈球菌，能抑制齲齒和牙周病等口腔疾病，防止傾向于致病性。

因此，根據(jù)本發(fā)明，能提供作為口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑以及作為菌群改善劑的有用制劑，其中，菌群改善劑能通過對(duì)口腔內(nèi)的非致病性常駐菌進(jìn)行選擇性的生長(zhǎng)促進(jìn)，特別地形成以非致病性的常駐菌為主體的細(xì)菌群。

因此，本發(fā)明提供一種下述的非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑以及口腔用組合物。

[1]一種非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或口腔內(nèi)的菌群改善劑，其包含：

選自猴頭菇(hericiumerinaceus)、灰樹花(grifolafrondosa)、玉蕈離褶傘(lyophyllumshimeji)、真姬菇(hypsizygusmarmoreus)、平菇(pleurotusostreatus)、姬松茸(agaricusblazei)以及香菇(lentinulaedodes)中的一種以上的蘑菇的干燥粉末或其提取物。

[2]如[1]記載的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑，其中，蘑菇的干燥粉末或其提取物是蘑菇子實(shí)體的干燥粉碎粉末或其水提取物。

[3]如[1]或[2]記載的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑，其中，蘑菇為猴頭菇(hericiumerinaceus)。

[4]如[1]、[2]或[3]記載的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑，其中，非致病性口腔內(nèi)常駐菌是選自格氏鏈球菌(streptococcusgordonii)、緩癥鏈球菌(streptococcusmitis)和口腔鏈球菌(streptococcusoralis)中的緩癥鏈球菌群(mitisgroup)的鏈球菌。

[5]如[1]～[4]中的任一項(xiàng)記載的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑，其中，以蘑菇的干燥粉末換算，蘑菇的干燥粉末或其提取物的濃度為0.001～50質(zhì)量％。

[6]一種口腔用組合物，其含有[1]～[5]中的任一項(xiàng)記載的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑。

[7]如[6]記載的口腔用組合物，其中，以蘑菇的干燥粉末換算，生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑所含的所述蘑菇的干燥粉末或其提取物的含量為組合物總量的0.001～50質(zhì)量％。

[8]如[6]或[7]記載的口腔用組合物，其中，所述組合物被制備成選自片劑、顆粒劑、軟糖、飲料、潔齒劑、漱口劑以及口噴劑中的劑型。

發(fā)明效果

根據(jù)本發(fā)明，能提供一種口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果優(yōu)良并能有效保持常駐細(xì)菌群平衡的非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑以及含有該生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑的口腔用組合物。

附圖說明

圖1是顯示實(shí)驗(yàn)例1中口腔內(nèi)細(xì)菌在不同濃度的猴頭菇干燥粉碎粉末懸浮液下的生長(zhǎng)度的圖。

具體實(shí)施方式

以下，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步地詳述。本發(fā)明的非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑是以蘑菇的干燥粉末或其提取物為有效成分，且該有效成分能選擇性活化口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的增殖而促進(jìn)生長(zhǎng)，改善細(xì)菌群。

此處，非致病性口腔內(nèi)常駐菌是在口腔內(nèi)生長(zhǎng)的通常不呈現(xiàn)人體致病性的細(xì)菌，具體來說，可舉出格氏鏈球菌(streptococcusgordonii)和緩癥鏈球菌(streptococcusmitis)以及口腔鏈球菌(streptococcusoralis)等的鏈球菌(streptococcus)屬細(xì)菌、小韋榮球菌(veillonellaparvula)等的韋榮球菌屬細(xì)菌，以及微黃奈瑟菌(neisseriasubflava)等的奈瑟菌屬細(xì)菌等。本發(fā)明對(duì)于這些中，特別是選自格氏鏈球菌、緩癥鏈球菌和口腔鏈球菌中的緩癥鏈球菌群的鏈球菌的增殖和活化效果優(yōu)良。

本發(fā)明中，作為蘑菇，使用猴頭菇(hericiumerinaceus)、灰樹花(grifolafrondosa)、玉蕈離褶傘(lyophyllumshimeji)、真姬菇(hypsizygusmarmoreus)、平菇(pleurotusostreatus)、姬松茸(agaricusblazei)以及香菇(lentinulaedodes)中的一種以上。這些可單獨(dú)使用一種或在體現(xiàn)效果方面將兩種以上組合使用。其中，使用猴頭菇、灰樹花、玉蕈離褶傘和姬松茸(特別是猴頭菇)時(shí)，口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的增殖活化效果好，并能賦予優(yōu)良的生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果，因而，它們是優(yōu)選的。

作為蘑菇的干燥粉末或其提取物，可使用以下的物質(zhì)：將上述蘑菇作為原料使用，并按照公知的方法制備而得的物質(zhì)。

在這種情況下，作為原料，可僅為蘑菇的子實(shí)體和菌絲體中的任一方，或者可使用這兩者，但首選使用蘑菇的子實(shí)體。子實(shí)體在具有食用經(jīng)驗(yàn)的安全性方面是優(yōu)選的。

對(duì)于蘑菇的干燥粉末，其制備方法并沒有特別限定，可采用通常的方法，可使用將作為原料的蘑菇子實(shí)體或菌絲體冷凍干燥或加熱干燥后粉碎而獲得的干燥粉碎粉末。另外，冷凍干燥和加熱干燥的條件可如同常規(guī)方法中的條件，且對(duì)于干燥粉末的粒徑等物性，只要其能分散于水并能通過懸浮等來使用，就沒有特別限定。

另外，蘑菇的提取物可直接從作為原料的蘑菇的子實(shí)體和/或菌絲體中提取而得，但優(yōu)選用溶劑提取蘑菇的干燥粉末而得的提取物。

獲得提取物的方法并沒有特別限定，可采用公知的方法。

作為提取溶劑，可舉出：水和醇類(例如，甲醇、無水乙醇、乙醇等碳原子數(shù)1～3的低級(jí)醇，丙二醇和1,3-丁二醇等多元醇)、丙酮等酮類、二乙醚、二惡烷、乙腈、乙酸乙酯等酯類、二甲苯、苯、氯仿等極性溶劑以及非極性溶劑。這些可單獨(dú)使用一種或使用以任意組合的方式將兩種以上進(jìn)行組合而形成的混合液。另外，也可將通過不同的溶劑所提取的提取物進(jìn)行組合，作為溶劑提取物使用。上述溶劑中，特別是考慮作為用于人體的物質(zhì)，從安全性方面來看，優(yōu)選水和/或乙醇，但本發(fā)明中，特別是采用極性溶劑(尤其是極性高的水)進(jìn)行提取時(shí)，能提高非致病性口腔內(nèi)常駐菌的增殖活化效果，從而使生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果更優(yōu)良。

此外，相對(duì)于原料的溶劑使用量、提取溫度和提取時(shí)間并沒有特別限定，可進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

對(duì)于所得提取物，可根據(jù)應(yīng)用制劑的劑型和形態(tài)進(jìn)行任意地干燥、濃縮或稀釋等來制備。另外，在許多情況下，能直接進(jìn)行使用。但根據(jù)需要，在不影響其功效的范圍內(nèi)，還可增加脫臭和脫色等純化處理，用滅菌過濾器進(jìn)行過濾，或任意選擇進(jìn)行一般情況下適用于提取物的通常手段。

本發(fā)明中，作為蘑菇的干燥粉末或其提取物，優(yōu)選使用上述物質(zhì)中的特別是蘑菇子實(shí)體的干燥粉碎粉末或其提取物，尤其是蘑菇子實(shí)體的干燥粉碎粉末。另外，干燥粉碎粉末可直接使用，但優(yōu)選使用將其分散于水而形成的懸浮液。使用這些時(shí)，能使口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果更優(yōu)良。此外，對(duì)于干燥粉碎粉末，優(yōu)選作為水懸浮液使用時(shí)，在低于提取物的濃度下，也能表現(xiàn)出充分的效果。

另外，對(duì)于所述干燥粉末，優(yōu)選粒徑500μm以下的粉末為95質(zhì)量％以上，更優(yōu)選粒徑150μm以下的粉末為95質(zhì)量％以上。粒徑500μm以下的干燥粉末是通過30目(jis規(guī)格)篩的顆粒，而粒徑150μm以下的干燥粉末是通過采用100目(jis規(guī)格)篩而獲得的(以下相同)。

以蘑菇的干燥粉末換算，蘑菇的干燥粉末或其提取物的濃度優(yōu)選為0.001～50％(質(zhì)量％，以下相同)，更優(yōu)選0.01～20％，進(jìn)一步優(yōu)選0.1～20％。當(dāng)濃度在上述范圍內(nèi)時(shí)，通過活化非致病性常駐菌的增殖而進(jìn)一步促進(jìn)生長(zhǎng)，可進(jìn)一步改善菌群。另外，當(dāng)濃度過高時(shí)，存在對(duì)非致病性常駐菌也能表現(xiàn)出抗菌性的情況，但濃度為50％以下時(shí)，能充分防止該情況的發(fā)生。此外，使用提取物時(shí)的“蘑菇的干燥粉末換算量”是指為了獲得所使用的蘑菇提取物量所需要的蘑菇的干燥粉末量計(jì)算而得的濃度(以下相同)。

本發(fā)明中的蘑菇的干燥粉末或其提取物適宜作為非致病性口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑或菌群改善劑混入口腔內(nèi)組合物中。具體來說，可制備成固體、液體、糊狀和凝膠狀等形態(tài)，并能制備成以下的各種劑型：口香糖、糖錠、藥片和糖果等片劑，顆粒劑，軟糖(グミ)，粉末飲料等飲料，牙膏、液狀潔齒劑、液體潔齒劑和濕潤(rùn)潔齒劑等潔齒劑，漱口劑以及口噴劑等。特別優(yōu)選的是，適合作為口香糖、糖錠、藥片和糖果等片劑，以及顆粒劑、軟糖和飲料。

在這種情況下，相對(duì)于組合物總量的蘑菇的干燥粉末或其提取物的混合量?jī)?yōu)選在上述濃度范圍內(nèi)，且以干燥粉末換算時(shí)，優(yōu)選為0.001～50％，更優(yōu)選0.01～20％，進(jìn)一步優(yōu)選0.1～20％。當(dāng)該混合量在上述濃度范圍內(nèi)時(shí)，能通過活化非致病性常駐菌的增殖而進(jìn)一步促進(jìn)生長(zhǎng)，并進(jìn)一步改善菌群。

另外，當(dāng)濃度變高時(shí)，特別是超過0.1％時(shí)，能提高非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)效果，并能充分發(fā)揮針對(duì)牙齦卟啉單胞菌等致病性細(xì)菌的抗菌作用，因而，更加優(yōu)選。當(dāng)為50％以下時(shí)，能抑制對(duì)非致病性常駐菌的抗菌作用并充分促進(jìn)非致病性常駐菌的生長(zhǎng)，因而，其是優(yōu)選的。

另外，口腔用組合物中，除了上述成分以外，還可在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，根據(jù)需要混入對(duì)應(yīng)于劑型的適當(dāng)?shù)墓煞?，并通過通常方法制備。

例如，口香糖中可混入：膠基、食用膠質(zhì)等結(jié)合劑，甜味劑、著色劑、酸味劑、防腐劑、光澤劑、香料以及有效成分等。另外，還可根據(jù)需要，用糖衣被覆口香糖。

片劑中可混入：山梨糖醇和麥芽糖醇等糖醇，纖維素、乳糖和糊精等賦形劑，微粒二氧化硅，酸味劑，甜味劑，著色劑，乳化劑，增粘劑，膠凝化劑，果汁，香辛料以及有效成分等。

軟糖中可混入：甘油和明膠等增粘劑或膠凝化劑，糖類，酸味劑，甜味劑，著色劑，乳化劑，果汁以及有效成分等。

潔齒劑中可混入：研磨劑、粘稠劑、粘結(jié)劑、表面活性劑、甜味劑、著色劑、防腐劑、香料以及有效成分等。

具體來說，作為口香糖中所使用的膠基，可使用混入了以下成分的市售膠基：聚醋酸乙烯基樹脂、天然樹脂類、酯膠等膠基用樹脂，乳化劑，碳酸鈣、磷酸鈣和滑石等填充劑，羊毛脂、硬脂酸或其鹽、甘油等增塑劑或軟化劑等。

作為甜味劑，可舉出：蔗糖、葡萄糖、右旋糖、轉(zhuǎn)化糖和果糖等糖類，麥芽糖醇、木糖醇、赤蘚醇和山梨糖醇等糖醇，糖精以及阿斯巴甜等。

作為潔齒劑等中所使用的研磨劑，可舉出二氧化硅系研磨劑、磷酸鈣系研磨劑和碳酸鈣等研磨劑，其混合量通常如下：在牙膏中，該混合量為2～50％；液狀潔齒劑中，該混合量為0～30％。

作為粘稠劑，可舉出山梨糖醇和木糖醇等糖醇，以及甘油和丙二醇等多元醇。該粘稠劑的混合量通常為5～50％。

作為粘結(jié)劑，可混合羧甲基纖維素鈉等纖維素衍生物、黃原膠等膠類、膠凝化二氧化硅、膠凝化鋁二氧化硅等有機(jī)或無機(jī)粘結(jié)劑。其混合量通常為0.5～10％。

另外，作為表面活性劑，可混合口腔用組合物中一般所使用的陰離子性表面活性劑、非離子性表面活性劑、陽離子性表面活性劑和兩性表面活性劑。作為陰離子性表面活性劑，可舉出十二烷基硫酸鈉等烷基硫酸鹽、n-酰基肌氨酸鹽等。作為非離子性表面活性劑，可舉出蔗糖脂肪酸酯等糖脂肪酸酯、糖醇脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油等聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯高級(jí)醇醚以及脂肪酸烷醇酰胺等。作為陽離子性表面活性劑，可舉出烷基銨鹽等。作為兩性表面活性劑，可舉出甜菜堿系和咪唑啉系的兩性表面活性劑。表面活性劑的混合量通常為0～10％，特別為0.01～5％。

作為著色劑，可舉出紅色2號(hào)、藍(lán)色1號(hào)和黃色4號(hào)等。作為防腐劑，可舉出對(duì)羥基苯甲酸酯等。

作為香料，可舉出：胡椒薄荷油、留蘭香油、茴香油、桉樹油、冬青油、肉桂油、丁香油、百里香油、鼠尾草油、檸檬油、橙油、薄荷油、小豆蔻油、芫荽油、橘子油、酸橙油、薰衣草油、迷迭香油、月桂油(laureloil)、洋甘菊油、葛縷子油、馬郁蘭油、月桂果油(bayoil)、檸檬草油、牛至油、松針油、橙花油、玫瑰油、茉莉油、葡萄柚油、白金柚油、柚子油、鳶尾花浸膏(イリスコンクリート)、薄荷凈油(absolutepeppermint)、玫瑰凈油(absoluterose)和橙花等天然香料及對(duì)這些天然香料加工處理(去前餾部、去后餾部、分餾、液液提取、純化和粉末香料化等)過的香料，薄荷醇、香芹酮、茴香腦、桉樹腦、水楊酸甲酯、肉桂醛、丁子香酚、3-l-薄荷氧基丙烷-1,2-二醇、百里酚、芳樟醇、乙酸芳樟醇酯、檸烯、薄荷酮、醋酸薄荷酯、n-取代-對(duì)薄荷烷-3-甲酰胺、蒎烯、辛醛、檸檬醛、長(zhǎng)葉薄荷酮、乙酸卡必醇酯、茴香醛、乙酸乙酯、丁酸乙酯、烯丙基環(huán)己烷丙酸酯、鄰氨基苯甲酸甲酯、乙基甲基苯基縮水甘油酸酯、香草醛、十一烷酸內(nèi)酯、己醛、丁醇、異戊醇、己烯醇、二甲基硫醚、甲基環(huán)戊烯醇酮(cyclotene)、糠醛、三甲基吡嗪、乳酸乙酯和乙基硫代乙酸酯等單品香料，以及草莓香料、蘋果香料、香蕉味香料、菠蘿香料、葡萄香料、芒果香料、黃油香料、牛奶香料、水果混合香料和熱帶水果香料等調(diào)合香料等。并可使用口腔用組合物中所用的公知香料原材料。

這些香料的混合量通常如下：在口香糖、片劑、顆粒劑、軟糖和飲料中，該混合量為0.001～50％；此外，在潔齒劑、漱口劑和口噴劑等中，該混合量為0.00001～1％；對(duì)于使用上述香料材料的賦香用香料，優(yōu)選在組成中使用0.1～10％。

作為有效成分，可在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，混合口腔用組合物中通?；烊氲墓煞帧Ｗ鳛橛行С煞?，可舉出異丙基甲基苯酚等非離子性殺菌劑、西吡氯銨等陽離子性殺菌劑、凝血酸和ε-氨基己酸等抗炎劑、葡聚糖酶等酶、氟化鈉和單氟磷酸鈉等的氟化物、水溶性磷酸化合物、銅化合物、硝酸鉀、乳酸鋁、各種維生素類和植物提取物等。另外，上述有效成分的混合量為在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)的有效量。

實(shí)施例

以下，通過示出的實(shí)施例和處方例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體地說明，但本發(fā)明并不局限于下述實(shí)施例。另外，下述例子中，％為質(zhì)量％，除非另有特別說明。

[實(shí)施例1]

(1)猴頭菇干燥粉末的制備方法

在60～70℃下，邊加熱猴頭菇(hericiumerinaceus)的子實(shí)體，邊使其干燥，使用研磨機(jī)將干燥后的子實(shí)體粉碎，制備成干燥粉碎粉末。對(duì)于粉碎后的干燥粉碎粉末，將通過100目篩的粉碎粉末用于試驗(yàn)。

(2)影響口腔內(nèi)細(xì)菌生長(zhǎng)效果的評(píng)價(jià)方法

將按上述方法所得的猴頭菇干燥粉碎粉末分散于蒸餾水，取100μl加入到96孔板中。通過用蒸餾水100μl對(duì)該猴頭菇干燥粉碎粉末的分散液進(jìn)行成倍稀釋，以梯度稀釋成對(duì)半濃度，從而制備成如圖1所示的兩倍濃度系列。對(duì)于各濃度的猴頭菇干燥粉碎粉末的懸浮液，加入下述各種菌液100μl，在37℃下厭氧培養(yǎng)約20小時(shí)。另外，采用以下的菌液：對(duì)于用在胰蛋白酶大豆培養(yǎng)基(ts培養(yǎng)基，bectonanddickinson公司制造)中添加了氯化血紅素0.0005％、甲萘醌0.0001％而形成的培養(yǎng)基進(jìn)行前培養(yǎng)后的細(xì)菌，將其以2％的濃度接種于2倍濃度系列的同培養(yǎng)基中而獲得的菌液。

細(xì)菌的增殖量是用以下方式來評(píng)價(jià)的：測(cè)定波長(zhǎng)550nm的濁度，算出相對(duì)于對(duì)照組(未添加樣品(0％))濁度的相對(duì)值，并將其作為細(xì)菌的生長(zhǎng)度。也就是說，生長(zhǎng)度大于1時(shí)，促進(jìn)生長(zhǎng)，該數(shù)值越大，生長(zhǎng)促進(jìn)效果越好；而當(dāng)生長(zhǎng)度小于1時(shí)，生長(zhǎng)被抑制。結(jié)果如圖1所示。

用于評(píng)價(jià)的口腔內(nèi)常駐菌是購自americantypeculturecollection(以下，縮寫為atcc)的下述3種菌。

非致病性細(xì)菌：streptococcusgordoniaeatcc10558(以下，縮寫成s.gordonii)

致病性細(xì)菌：streptococcusmutansatcc25175(以下，縮寫成s.mutans)

porphyromonasgingivalisatcc33277(以下，縮寫成p.gingivalis)。

另外，濁度測(cè)定前，通過振搖板來攪拌培養(yǎng)液。

根據(jù)圖1的結(jié)果可知，猴頭菇干燥粉碎粉末顯示出對(duì)作為致病性細(xì)菌的p.gingivalis的抗菌性，但對(duì)作為非致病性常駐菌的s.gordonii具有促進(jìn)其生長(zhǎng)的作用。另外，幾乎沒有觀察到針對(duì)致病性細(xì)菌s.mutans的抗菌作用或生長(zhǎng)促進(jìn)作用。

[實(shí)施例2]

(1)蘑菇的干燥粉碎粉末及提取液的制備方法

將猴頭菇、灰樹花(grifolafrondosa)、玉蕈離褶傘(lyophyllumshimeji)、真姬菇(hypsizygusmarmoreus)、平菇(pleurotusostreatus)、姬松茸(agaricusblazei)和香菇(lentinulaedodes)的子實(shí)體在-20℃下保存1天，使它們冷凍干燥。用研磨機(jī)將冷凍干燥后的子實(shí)體粉碎，制備成干燥粉碎粉末。對(duì)于粉碎后的干燥粉碎粉末，將通過100目篩的粉碎粉末用于試驗(yàn)。

另外，蘑菇提取液是通過以下方法制備的：

在按上述方法制備的蘑菇干燥粉碎粉末約0.1g中加入2ml蒸餾水，制備成5％懸浮液，在80℃下加熱約4小時(shí)進(jìn)行提取后，將其在10000g下離心10分鐘獲得的上清液用孔徑0.22μm的滅菌過濾器進(jìn)行過濾而得。

(2)口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)效果的評(píng)價(jià)方法

將按上述方法所得的各種蘑菇的干燥粉碎粉末分散于蒸餾水而形成的濃度0.01％的蘑菇干燥粉碎粉末懸浮液，以及按上述方法所得的各種蘑菇提取液的4％水溶液作為樣品，各取100μl加入到96孔板中。另外，由于用于提取的蘑菇的干燥粉末懸浮液的濃度為5％，因而，對(duì)于蘑菇提取液的4％水溶液，以干燥粉末換算的濃度相當(dāng)于0.2％(4×5÷100％)。

向該樣品的蘑菇干燥粉碎粉末懸浮液和蘑菇提取液中，加入100μl表1和2所示細(xì)菌的菌液，在37℃下好氧培養(yǎng)12小時(shí)。另外，采用以下的菌液：

將用胰蛋白酶大豆培養(yǎng)基(ts培養(yǎng)基，bectonanddickinson公司制造)進(jìn)行前培養(yǎng)后的細(xì)菌以2％濃度接種于2倍濃度的ts培養(yǎng)基而形成的菌液。

對(duì)于細(xì)菌的增殖量，如同實(shí)驗(yàn)例1進(jìn)行測(cè)定、計(jì)算和評(píng)價(jià)。結(jié)果一并記于表1和2中。

用于評(píng)價(jià)的口腔內(nèi)常駐菌是購自atcc的下述3個(gè)菌種。

非致病性細(xì)菌：streptococcusgordoniaeatcc10558(s.gordonii)

streptococcusmitisatcc47456(以下，縮寫為s.mitis)

streptococcusoralisatcc9811(以下，縮寫為s.oralis)

另外，濁度測(cè)定前，通過振搖板來攪拌培養(yǎng)液。

【表1】

各種蘑菇的干燥粉碎粉末所帶來的細(xì)菌生長(zhǎng)度

【表2】

各種蘑菇提取液所帶來的細(xì)菌生長(zhǎng)度

由表1和2所示可知，作為抗菌劑的三氯生抑制了非致病性常駐菌s.gordonii、s.mitis和s.oralis的增殖，但蘑菇的干燥粉碎粉末和水提取液能使這些非致病性常駐菌增殖而促進(jìn)其生長(zhǎng)。

另外，使用蘑菇干燥粉碎粉末在水中的懸浮液狀態(tài)時(shí)，可知在低于水提取液的濃度下，也發(fā)現(xiàn)有效。

根據(jù)這些結(jié)果可知，選自猴頭菇、灰樹花、玉蕈離褶傘、真姬菇、平菇、姬松茸和香菇中的蘑菇的干燥粉末或其提取物作為口腔內(nèi)的非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)劑，或者通過選擇性對(duì)非致病性常駐菌進(jìn)行生長(zhǎng)促進(jìn)，特別是形成非致病性常駐菌主體的細(xì)菌群的菌群改善劑是有用的。

[實(shí)驗(yàn)例3]

(1)猴頭菇干燥粉末的制備方法

在60～70℃下，邊加熱猴頭菇的子實(shí)體邊使其干燥，并使用研磨機(jī)將干燥后的子實(shí)體粉碎，制備成干燥粉碎粉末。對(duì)于粉碎后的干燥粉碎粉末，將通過100目篩的粉碎粉末用于試驗(yàn)。

(2)口腔內(nèi)常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)效果(濃度依賴性)的評(píng)價(jià)方法

將所得的猴頭菇干燥粉碎粉末分散于蒸餾水，取100μl加入到96孔板中。通過將該猴頭菇干燥粉碎粉末的分散液加入100μl蒸餾水中，進(jìn)行成倍稀釋，以梯度稀釋成對(duì)半濃度，制備成表3所示的濃度系列。對(duì)于各濃度的猴頭菇干燥粉碎粉末的懸浮液，如同實(shí)施例1進(jìn)行非致病性細(xì)菌(s.gordonii)生長(zhǎng)度的測(cè)定。另外，濃度是以干燥粉末換算的。結(jié)果一并記于表3。

【表3】

猴頭菇干燥粉末的水懸浮液所帶來的細(xì)菌生長(zhǎng)度(濃度依賴性)

由表3所示的結(jié)果可知，從所討論的濃度0.001％開始，以濃度依賴的方式對(duì)非致病性細(xì)菌進(jìn)行生長(zhǎng)促進(jìn)，并在約0.03％下，其效果幾乎到達(dá)飽和狀態(tài)。

[實(shí)驗(yàn)例4]

(1)猴頭菇干燥粉末的制備方法

在60～70℃下，邊加熱猴頭菇的子實(shí)體邊使其干燥，并使用研磨機(jī)將干燥后的子實(shí)體粉碎，制備成干燥粉碎粉末。對(duì)于粉碎后的干燥粉碎粉末，將通過100目篩的粉碎粉末用于試驗(yàn)。

(2)口腔內(nèi)的菌群改善效果的評(píng)價(jià)

為了評(píng)價(jià)口腔內(nèi)的菌群改善效果，使用上述方法所得的猴頭菇干燥粉末，并由8名受試者來進(jìn)行交叉試驗(yàn)。

進(jìn)行口腔清潔并去除口腔內(nèi)細(xì)菌后，攝入下述表4所示濃度的猴頭菇干燥粉末的95℃的熱水懸浮液100ml，耗時(shí)約10分鐘。對(duì)攝取5小時(shí)后的口腔內(nèi)的細(xì)菌群進(jìn)行評(píng)價(jià)。細(xì)菌群的評(píng)價(jià)是按照以下方式進(jìn)行的：

對(duì)包括作為漱口吐出唾液中的常駐菌的緩癥鏈球菌群在內(nèi)的鏈球菌，和作為導(dǎo)致牙周病和口臭的病原菌的黑色素產(chǎn)生菌的生菌數(shù)進(jìn)行測(cè)定，并作為各細(xì)菌相對(duì)于常駐菌和病原菌的合計(jì)數(shù)的菌構(gòu)成比率進(jìn)行評(píng)價(jià)。另外，漱口吐出唾液是在口中含有10ml蒸餾水并進(jìn)行約30秒的漱口后回收的吐出唾液。此外，常駐菌的測(cè)定中采用mithissalivarius平板培養(yǎng)基(bectonanddickinson公司制造)，而病原菌的測(cè)定中采用添加了200μg/ml卡那霉素的血液平板培養(yǎng)基^*1。在37℃，厭氧條件下(80vol％氮?dú)狻?0vol％二氧化碳、10vol％氫氣)進(jìn)行約一周的菌培養(yǎng)，并通過計(jì)數(shù)，算出生長(zhǎng)的菌落數(shù)。

*1：血液平板培養(yǎng)基的組成：以1升中的質(zhì)量表示。

toddywhitbrother(トッドへーウィットブロース)(bectonanddickinson公司制造)：30g/l

瓊脂(bectonanddickinson公司制造)：15g/l

氯化血紅素(sigma-aldrich公司制造)：5mg/l

維生素k(和光純藥工業(yè)公司制造)：1mg/l

蒸餾水：平衡量(總量配制成1l，并在121℃下高壓滅菌20分鐘。)

綿羊脫纖血(日本biotest研究所制造)100ml

【表4】

由表4所示的結(jié)果可知，通過攝取猴頭菇干燥粉末懸浮液，與未攝取(0％)相比，攝取5小時(shí)后的常駐菌比率增加，并形成病原菌比率較少的以常駐菌為主體的菌群。

接著，顯示出處方例。包含各例的蘑菇的干燥粉末或其提取物的口腔用組合物具有優(yōu)良的口腔內(nèi)非致病性常駐菌的生長(zhǎng)促進(jìn)和菌群改善效果。

另外，對(duì)于蘑菇的粉碎后的干燥粉碎粉末，將通過100目篩的粉碎粉末用于試驗(yàn)。

[處方例1]口香糖

[處方例2]口香糖

[處方例3]片劑

[處方例4]片劑

[處方例5]片劑

[處方例6]片劑

[處方例7]軟糖

[處方例8]軟糖

[處方例9]潔齒劑

[制劑例10]潔齒劑

[處方例11]漱口劑

[處方例12]漱口劑

[處方例13]粉末飲料(分散溶解于熱水或涼水100ml中來使用)

[處方例14]粉末飲料(分散溶解于熱水或涼水100ml中來使用)

[處方例15]粉末飲料(分散溶解于熱水或涼水100ml中來使用)

[處方例16]粉末飲料(分散溶解于熱水或涼水100ml中來使用)