本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，具體涉及三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物及其制備和用途。
背景技術(shù)：
三氧化二砷（As2O3），又稱砒霜、無水砷酸、亞砷酸酐。三氧化二砷生理活性顯著，有明顯的抗腫瘤作用，在臨床上用于治療白血病、肝癌、食道癌、胃癌、結(jié)腸癌、口咽癌等多種癌癥，目前臨床上制劑有亞砷酸氯化鈉注射液，其主要成分為As2O3，是一種無色、味微咸的澄明液體，適用于治療急性早幼粒細(xì)胞性白血病。但是三氧化二砷又屬于毒性很強(qiáng)的藥物，半數(shù)致死量（LD50）約為10mg/kg（小鼠靜脈注射）、40mg/kg(小鼠經(jīng)口)。因此臨床用藥很不安全，這大大限制了該類藥物的應(yīng)用。研究開發(fā)減少三氧化二砷的毒性，同時(shí)提高或維持其抗癌活性的方法，對(duì)于提高三氧化二砷的臨床應(yīng)用安全性具有重要意義。
南天竹為小檗科南天竹屬南天竹 ( Nandina domestica Thunb. ) 植物。具有斂肺，止咳，清肝，明目之功效。治久咳，喘息，百日咳，瘧疾，下疳潰爛?！锻跏ビ崾旨酚涊d南天竹子“明目烏須，解肌熱，清肝火，活血散滯”。南天竹總生物堿為南天竹植物提取、分離而制備的總生物堿化學(xué)部位。
本發(fā)明公開了三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物及其制備方法和用途，該藥物組合物與三氧化二砷原藥物和南天竹提取物與三氧化二砷組合物相比較，對(duì)三氧化二砷所致的心臟毒性具有更明顯的減毒作用，并顯示更好抗腫瘤活性，大大提高臨床應(yīng)用的安全性, 可作為抗腫瘤藥使用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物及其制備方法和用途，該藥物組合物與三氧化二砷原藥物和南天竹提取物與三氧化二砷組合物相比較，對(duì)三氧化二砷所致的心臟毒性具有更明顯的減毒作用，并顯示更好抗腫瘤活性，大大提高臨床應(yīng)用的安全性, 可作為抗腫瘤藥使用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：
三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物由下列重量份的原料藥組成：三氧化二砷1份、南天竹總生物堿1—103份。優(yōu)選配比：三氧化二砷：南天竹總生物堿=1：10。
上述藥物組合物的制備方法：取南天竹藥材，加適量乙醇加熱回流提取3次，過濾，濾液濃縮至適量，備用。將上述濃縮液加入一定濃度的鹽酸溶解，過濾，濾液再加入一定濃度的氨水調(diào)節(jié)PH值，使之成弱堿性，再用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，濃縮、干燥、粉碎，得南天竹總生物堿；將1—103份重量份的南天竹總生物堿與1份三氧化二砷混合均勻，即得。
該藥物組合物可直接藥用，或采用公知方法加入藥用輔料制成片劑、膠囊、口服液、顆粒劑、軟膏、乳劑、納米、緩釋或控釋制劑等藥劑學(xué)上可接受的合適劑型使用。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但應(yīng)理解本發(fā)明的范圍非僅限于這些實(shí)施例的范圍。
實(shí)施例1：
取南天竹種子，加適量乙醇加熱回流提取3次，過濾，濾液濃縮至適量，備用。將上述濃縮液加入一定濃度的鹽酸溶解，過濾，濾液再加入一定濃度的氨水調(diào)節(jié)PH值，使之成弱堿性，再用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，回收乙酸乙酯，濃縮、干燥、粉碎，即得南天竹總生物堿。
實(shí)施例2：
取南天竹根莖，加適量乙醇加熱回流提取3次，過濾，濾液濃縮至適量，備用。將上述濃縮液用一定量離子交換樹脂吸附后進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液后，進(jìn)行濃縮、干燥、粉碎，即得南天竹總生物堿。
實(shí)施例3：
藥物組合物與三氧化二砷原藥物急性毒性比較試驗(yàn)：
采用改良寇氏法進(jìn)行小鼠口服急性毒性比較試驗(yàn)，結(jié)果表明（見表1）：藥物組合物L(fēng)D50均大于三氧化二砷原藥物L(fēng)D50，而且動(dòng)物生長狀況相對(duì)更好。
表1. 小鼠口服急性毒性比較試驗(yàn)結(jié)果
實(shí)施例4：
對(duì)大鼠LDH、CK 、SOD、GSH-Px、MDA活力影響：
口服給藥，分為三氧化二砷組、空白組、及組合物組（1：5）。三氧化二砷單獨(dú)給藥組與聯(lián)合給藥組比，LDH、CK、MDA水平顯著升高，SOD、GSH-Px水平顯著地降低，并且南天竹總生物堿類與三氧化二砷聯(lián)合用藥無顯著差異，見表2及表3。
表2：LDH、CK活力的影響
表3：SOD、GSH-Px、MDA水平變化
實(shí)施例5：
藥物組合物與三氧化二砷原藥物體外抗腫瘤活性比較試驗(yàn)：
采用MTT法測(cè)定三氧化二砷原藥物、藥物組合物對(duì)以下人腫瘤細(xì)胞體外生長的抑制作用，測(cè)定半數(shù)殺傷濃度（IC50），陽性對(duì)照藥為順鉑（Cisplatin）。
人腫瘤細(xì)胞株：早幼粒白血病細(xì)胞株HL-60，多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266，胃癌細(xì)胞株MGC-803，肺癌細(xì)胞株A-549，肝癌細(xì)胞株SMMC-7721，宮頸癌細(xì)胞株Hela，乳腺癌細(xì)胞株MCF-7，鼻咽癌細(xì)胞株HNE-1，卵巢癌細(xì)胞株Caov-3，喉癌細(xì)胞株Hep-2，結(jié)腸癌細(xì)胞株Col-6，腎癌細(xì)胞株Re-01，前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3，T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Jurkat。
試驗(yàn)結(jié)果表明（見表4）：藥物組合物比原藥物對(duì)各測(cè)試腫瘤細(xì)胞的IC50更小，說明藥物組合物比原藥物抗腫瘤效果更好。
表4受試藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞株的半數(shù)殺傷濃度（IC50）
實(shí)施例6：
藥物組合物與三氧化二砷原藥物體內(nèi)抗腫瘤活性比較：
比較三氧化二砷原藥物、藥物組合物對(duì)小鼠S180肉瘤體內(nèi)生長的抑制作用，測(cè)定抑瘤率。
昆明種小鼠，雌雄各半，體重20g±2g，于每只小鼠右腋皮下接種S180小鼠腫瘤細(xì)胞4×106, 建立S180小鼠腫瘤移植模型。隨機(jī)分成生理鹽水組、陽性對(duì)照組、高中低劑量給藥組，每組各10只。接種24h后開始灌胃給藥，陽性對(duì)照組給予依托泊苷（VP-16）4mg/kg，給藥組給予高中低劑量相應(yīng)藥物，每天1次，連續(xù)10天。于末次給藥24h后處死動(dòng)物，稱體重，完整剝離瘤塊，用濾紙吸干后稱重，求抑瘤率。
試驗(yàn)結(jié)果表明（見表5）：藥物組合物比原藥物對(duì)小鼠S180肉瘤體內(nèi)生長的抑制效果更好。
表5對(duì)小鼠S180肉瘤體內(nèi)生長的抑制作用
實(shí)施例7：
藥物組合物配比：三氧化二砷10g、南天竹子總生物堿100g
取南天竹藥材，加適量乙醇加熱回流提取3次，過濾，濾液濃縮至適量，備用。將上述濃縮液加入一定濃度的鹽酸溶解，過濾，濾液再加入一定濃度的氨水調(diào)節(jié)PH值，使之成弱堿性，再用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，濃縮、干燥、粉碎，得南天竹總生物堿；將1—103份重量份的南天竹總生物堿與1份三氧化二砷混合均勻，即得藥物組合物。
實(shí)施例8：
藥物組合物配比：三氧化二砷100mg、南天竹總生物堿10g
取南天竹根莖，加適量乙醇加熱回流提取3次，過濾，濾液濃縮至適量，備用。將上述濃縮液用一定量離子交換樹脂吸附后進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液后，進(jìn)行濃縮、干燥、粉碎，即得南天竹總生物堿。將南天竹總生物堿10g與100mg三氧化二砷混合均勻，即得藥物組合物。
實(shí)施例9：
三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物的片劑制備
取制得的藥物組合物 1g與淀粉0.5g，糊精0.5g混合，用適量30%乙醇做濕潤劑，制成軟材，用常規(guī)方法制粒，加入適量硬脂酸鎂混合，制成片劑。
實(shí)施例10：
三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物的膠囊劑制備
取藥物組合物1g與淀粉1.2g，糊精0.5mg，糖粉0.5g混合，用適量30%乙醇做濕潤劑，制成軟材，用常規(guī)方法制粒，裝入硬膠囊中，即得。
實(shí)施例11：
三氧化二砷與南天竹總生物堿配伍的藥物組合物的緩釋膠囊劑制備
取藥物組合物1g與羥丙基甲基纖維素K15M 1.2g，乙基纖維素45cps 0.5g，乳糖0.5g混合，加適量10%聚乙烯吡咯烷酮k30乙醇溶液，制成軟材，用常規(guī)方法制粒，裝入硬膠囊中，即得。