本發(fā)明提供一種中國(guó)被毛孢多糖體的用途；進(jìn)一步而言，本發(fā)明提供一種中國(guó)被毛孢多糖體用于促進(jìn)胰島素敏感性的用途。
背景技術(shù)：
：從數(shù)千年前開(kāi)始，亞洲國(guó)家已開(kāi)始使用傳統(tǒng)的中草藥，因此，對(duì)中草藥的應(yīng)用具有相當(dāng)長(zhǎng)遠(yuǎn)的歷史。藥用菇類是常用傳統(tǒng)中草藥劑的一種，其包括例如：牛樟芝(Antrodiacinnamomea)、姬松茸(AgaricusblazeiMurrill)、靈芝(Ganodermalucidum)、以及冬蟲(chóng)夏草(Ophiocordycepssinensis)。這些中草藥劑中含有多種具有生物活性與調(diào)節(jié)免疫能力的化合物，而幾個(gè)世紀(jì)以來(lái)，冬蟲(chóng)夏草一直被用來(lái)增長(zhǎng)人體的壽命與促進(jìn)健康。近期的研究將冬蟲(chóng)夏草無(wú)性生殖菌絲(anamorphicmycelium)定義為中國(guó)被毛孢(Hirsutellasinensis)，并有研究顯示，冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體與中國(guó)被毛孢菌絲體的萃取物對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有多種的功效，包括：抗疲勞、抗發(fā)炎、腎臟保健、以及促進(jìn)性欲等。然而，目前并沒(méi)有冬蟲(chóng)夏草/中國(guó)被毛孢可能對(duì)胰島素抗性有幫助的報(bào)導(dǎo)，而冬蟲(chóng)夏草/中國(guó)被毛孢內(nèi)產(chǎn)生促進(jìn)胰島素敏感性的活性物質(zhì)亦仍未知。第2型糖尿病的特征是無(wú)法調(diào)節(jié)血液中葡萄糖的程度。長(zhǎng)期而言，這種現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致若干并發(fā)癥的產(chǎn)生，例如：心血管疾病、眼睛損傷、足部潰瘍、腎臟衰竭以及中風(fēng)。糖尿病的盛行在現(xiàn)今社會(huì)中是公眾健康主要的威脅之一，全世界估計(jì)有3億8,700萬(wàn)的糖尿病患者。故，糖尿病的預(yù)防為現(xiàn)今社會(huì)的一大挑戰(zhàn)。早期的第2型糖尿病，外圍組織(peripheraltissues)如：肝臟、肌肉、脂肪組織對(duì)胰島素的敏感性降低。對(duì)于早期的第2型糖尿病，可使用如：飲食控制、運(yùn)動(dòng)、以及藥物等方法來(lái)穩(wěn)定血糖程度。舉例而言，二甲雙胍類藥物每福敏(metformin)是一種人工合成的藥物，其可藉由抑制胰臟分泌胰島素來(lái)降低高血脂病。此外，每福敏亦增加外圍組織的胰島素敏感性并減少小腸道吸收葡萄糖。 然而，每福敏以及其他抗糖尿病的藥物皆會(huì)產(chǎn)生一些不良的副作用(如：惡心、腹瀉和其他胃部病征、虛弱無(wú)力或呼吸困難，或口腔內(nèi)有金屬味等)而限制治療的功效。鑒于糖尿病人口的增長(zhǎng)以及對(duì)糖尿病預(yù)防及治療的困難，人們需要一種替代性的方法來(lái)預(yù)防、治療、或控制糖尿病。亟需一種新的方法可直接引入飲食中，而不需要大幅改變?nèi)粘Ｉ盍?xí)慣且不會(huì)產(chǎn)生毒性或不良的影響。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的一方面是提供一種中國(guó)被毛孢(Hirsutellasinensis)多糖體用于制備提升胰島素敏感性的藥物的用途，其中該中國(guó)被毛孢多糖體為中國(guó)被毛孢菌絲體的水萃取物；且其中該中國(guó)被毛孢多糖體物至少包含甘露糖(mannose)、葡萄糖(glucose)、及半乳糖(galactose)。本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體進(jìn)一步包含巖藻糖(fucose)、鼠李糖(rhamnose)、阿拉伯糖(arabinose)、葡萄糖胺(glucosamine)、及半乳糖胺(galactosamine)。在本發(fā)明的一實(shí)施例中，該中國(guó)被毛孢多糖體中巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖、甘露糖以及半乳糖胺的質(zhì)量百分比的比例為3:3:1:4:23:12:50:0.2至4:4:2:5:24:13:51:0.6。其中該中國(guó)被毛孢多糖體的重量平均分子量(weightaveragemolecularweight)是為312kDa，以及范圍是介于15,776Da至1,231,969Da之間，分子量分布指數(shù)(Mw/Mn)是為7.475。本發(fā)明所提供的中國(guó)被毛孢多糖體是降低個(gè)體空腹血液中胰島素含量、空腹血液中葡萄糖含量；同時(shí)，本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體亦可降低個(gè)體對(duì)胰島素的抵抗性。在本發(fā)明的一實(shí)施例中，該中國(guó)被毛孢多糖體的有效劑量是0.001mg/kg至1g/kg。本發(fā)明的另一方面是提供一種中國(guó)被毛孢多糖體的制備方法，包含：由中國(guó)被毛孢菌絲體以水萃取，并續(xù)以一醇類沉淀，再經(jīng)離心分離與濾膜過(guò)濾而得，其中，(a)將中國(guó)被毛孢菌絲體與水混合并以低轉(zhuǎn)速萃取一預(yù)定時(shí)間，取上清液并將該上清液濃縮，以獲得中國(guó)被毛孢萃取濃縮物；(b)將該中國(guó)被毛孢萃取濃縮物加入一醇類靜置一段時(shí)間以沉淀出一中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物；以及(c)將該中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物離心后獲得一沉淀物；以切向流過(guò)濾系統(tǒng)(tangentialflowfiltration,TFF)過(guò)濾該沉淀物，以獲得中國(guó)被毛孢多糖體。在本發(fā)明的一實(shí)施例中，步驟(a)的該上清液是以蒸發(fā)方式濃縮且步驟(a)該中國(guó)被毛孢菌絲體與水混合的比值為5％(w/v)；步驟(b)中該醇類是95％酒精、該中國(guó)被毛孢萃取濃縮物的質(zhì)量體積濃度比值為20％(w/v)與95％酒精混合的比例為1:5、而該一段時(shí)間是至少16小時(shí)；步驟(c)的切向流過(guò)濾系統(tǒng)由0.2μm中空纖維膜過(guò)濾及10-300kDa超限濾膜(50cm2，polyethersulfone，PES)的組合進(jìn)行劃分過(guò)濾。本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體是可用于在動(dòng)物體或人體中降低高血糖癥并促進(jìn)胰島素敏感性，因此，可提供作為制備治療或預(yù)防第2型糖尿病或其他血糖恒定相關(guān)疾病的醫(yī)藥品、補(bǔ)充品、或飲食品。以下將配合圖式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式，以下所列舉的實(shí)施例是用以闡明本發(fā)明，并非用以限定本發(fā)明的范圍，任何熟習(xí)此技藝者，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，當(dāng)可做些許更動(dòng)與潤(rùn)飾，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視后附的申請(qǐng)專利范圍所界定者為準(zhǔn)。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體的萃取流程圖；圖2是本發(fā)明使用高效陰離子交換層析與脈沖安培檢測(cè)(high-performanceanionexchangechromatographywithpulsedamperometricdetection，HPAEC-PAD)分析中國(guó)被毛孢多糖體分餾液(CS-1)中的單糖組成；移動(dòng)相為16mMNaOH，流速為1毫升/分鐘；滯留時(shí)間(分鐘)單糖4.642巖藻糖(Fuc)7.623鼠李糖(Rha)8.558半乳糖胺(GalN)8.921阿拉伯糖(Ara)9.911葡萄糖胺(GlcN)11.374半乳糖(Gal)12.089葡萄糖(Glc)12.848甘露糖(Man)圖3是本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體分餾液(CS-1)的凝膠滲透圖譜(gelpermeationchromatogram)；圖4是本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體分餾液(CS-1)的分子量取對(duì)數(shù)(Logmolecularweight)對(duì)重量分部/微分分子量取對(duì)數(shù)(weightfraction/dLogMW)的曲線圖；圖5是本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體分餾液(CS-1)的分子量取對(duì)數(shù)(Logmolecularweight)對(duì)累積重量分布(cumulativeweightfraction)的曲線圖；圖6是本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體分餾液對(duì)于小鼠口服葡萄糖耐受性測(cè)試(OGTT)與胰島素耐受性測(cè)試(ITT)的影響。(A)代表口服葡萄糖負(fù)荷為3g/kg于時(shí)間點(diǎn)為0施予6至8只空腹小鼠并使用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖測(cè)量?jī)x測(cè)量該些小鼠尾巴頂端靜脈收集血液的血糖的程度；(B)代表經(jīng)由該葡萄糖負(fù)荷處理后的曲線下面積(areaunderthecurve，AUC)；(C)代表監(jiān)控胰島素負(fù)荷為1U/kg于時(shí)間點(diǎn)為0腹腔注射施予的血糖程度；(D)代表經(jīng)由該胰島素負(fù)荷處理后的曲線下面積。在口服葡萄糖耐受性測(cè)試以及胰島素耐受性中，與控制組高脂肪飼料喂食小鼠相比較，以CS-1、CS-2、以及CS-3分餾物處理，可降低高脂肪飼料喂食小鼠的血糖。在數(shù)值統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用上使用Student’sttest(***P<0.001，ns為非顯著)。具體實(shí)施方式定義本文所述的有效劑量表示能減少動(dòng)物及人類體重及脂肪堆積的中國(guó)被毛孢多糖體劑量。適當(dāng)?shù)挠行┝靠梢浪委熒矬w或個(gè)體的不同而有所差異，但可使用劑量遞增的各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)決定有效劑量。本文中所使用數(shù)值為近似值，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)皆表示在20％的范圍內(nèi)，較佳為在10％的范圍內(nèi)，最佳為在5％的范圍內(nèi)。本發(fā)明提供一種能促進(jìn)胰島素敏感性的中國(guó)被毛孢多糖體，經(jīng)由實(shí)驗(yàn)顯示本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體能有效降低個(gè)體空腹血液中胰島素與葡萄糖的含量。概括而言，每日給予哺乳動(dòng)物或人類本發(fā)明的多糖體0.001至1,000mg/kg(體重)劑量可有效降低該哺乳動(dòng)物或人類對(duì)胰島素的抵抗性，詳細(xì)說(shuō)明如下。首先，將中國(guó)被毛孢多糖體定性，之后經(jīng)由實(shí)驗(yàn)顯示該分離的中國(guó)被毛孢多糖體對(duì)于空腹胰島素、空腹血糖、胰島素抗性(HOMA-IR)、以及小鼠口服葡萄糖耐受性的影響。實(shí)施例1本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體的制備方法本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體為中國(guó)被毛孢菌絲體的水萃取物，能有效用于降低高血糖癥以及促進(jìn)胰島素敏感性。本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體可加入至飲食中，其可為飲品、日常補(bǔ)充品或食品，不需要在生活方式有太大的改變，且不會(huì)引起毒素或?qū)】翟斐刹涣嫉挠绊憽?.1本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體的制備方法圖1是顯示從中國(guó)被毛孢(冬蟲(chóng)夏草無(wú)性生殖菌絲體)分離多糖體的方法。首先，由長(zhǎng)庚生物科技股份有限公司(臺(tái)北，臺(tái)灣)取得的干燥液態(tài)發(fā)酵的冬蟲(chóng)夏草無(wú)性生殖菌絲體(即：中國(guó)被毛孢，500g)混合10L蒸餾水形成混合液(50g/L)，其中固體與液體比值為5％(w/v)，以20公升攪拌式反應(yīng)器、121℃高溫以及150RPM轉(zhuǎn)速(revolutionperminute)條件下萃取30分鐘。接著，離心該萃取后混合液以去除固體物質(zhì)，獲得中國(guó)被毛孢水萃取物，并以蒸發(fā)方式濃縮該中國(guó)被毛孢發(fā)酵菌絲體水萃取物至體積為2.5公升，并分裝至20mL暗色玻璃安瓶，接著經(jīng)高溫高壓滅菌處理20分鐘，獲得固體與液體比值為20％(w/v)的中國(guó)被毛孢萃取濃縮物，保存于4℃?zhèn)溆谩?.2本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物的制備步驟如圖1所示，取120mL、20％(w/v)的中國(guó)被毛孢萃取濃縮物(代號(hào)為W1，含有總水溶性碳水化合物2.09g；詳見(jiàn)表1)，加入600mL(五倍于中國(guó)被毛孢水萃取濃縮物體積)、95％酒精混合均勻，在4℃靜置16小時(shí)以沉淀出中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物，接著續(xù)以離心去除上清液，并以120mL、70％冰酒精清洗及離心沉淀中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物三次。接著，將三次的上清液混合為酒精沉淀上清液，體積為1,040mL(代號(hào)為CS-4，含有總水溶性碳水化合物0.83g；詳見(jiàn)表1)。取1,000mL蒸餾水復(fù)溶酒精沉淀的中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物，經(jīng)濃縮至體積為700mL以去除殘留酒精，接著加入蒸餾水定量此中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物體積至2,400mL(代號(hào)為W2，含有總水溶性粗多糖 1.26g；詳見(jiàn)表1與表2)。1.3本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物的分離純化取2,400mL中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物至50℃水浴槽，接著以切向流過(guò)濾系統(tǒng)TFF(Spectrum公司，KrosFlo型號(hào))組合0.2μm中空纖維膜(1,500cm2，PES)進(jìn)行劃分過(guò)濾并將過(guò)膜壓力(transmembranepressure，TMP)控制在15-16psi。當(dāng)回流液體積剩余800-1,000mL時(shí)補(bǔ)入蒸餾水600mL，繼續(xù)進(jìn)行過(guò)濾。重復(fù)操作補(bǔ)入蒸餾水600mL三次，共計(jì)補(bǔ)入蒸餾水1,800mL。得到1,250mL的CS-1-1分餾液(含總水溶性粗多糖0.24g)及3,600mL過(guò)濾液。取上述3,600mL、0.2μm中空纖維膜過(guò)濾液至50℃水浴槽，接著以切向流過(guò)濾系統(tǒng)組合300kDa超限濾膜(50cm2，PES)進(jìn)行劃分過(guò)濾，將過(guò)膜壓力(TMP)控制在18-20psi。當(dāng)回流液體積剩余1,000至1,200mL時(shí)補(bǔ)入蒸餾水600mL，繼續(xù)進(jìn)行過(guò)濾。得到回流液體積為1,040mL的CS-1-2分餾液(含總水溶性粗多糖0.18g)及3,600mL過(guò)濾液。合并CS-1-1分餾液與CS-1-2分餾液得到體積為2,290mL的CS-1分餾液(總水溶性粗多糖0.42g；詳見(jiàn)表2)。另取上述步驟3,600mL、300kDa超限濾膜過(guò)濾液至50℃水浴槽，接著以切向流過(guò)濾系統(tǒng)組合10kDa超限濾膜(50cm2，PES)進(jìn)行劃分過(guò)濾，將過(guò)膜壓力(TMP)控制在18-20psi。當(dāng)回流液體積剩余1,000至1,200mL時(shí)補(bǔ)入蒸餾水600mL，繼續(xù)進(jìn)行過(guò)濾。得到990mL的10kDa至300kDa的CS-2分餾液(總水溶性粗多糖0.64g；詳見(jiàn)表2)，3,600mL的10kDa過(guò)濾液，該10kDa過(guò)濾液即為小于10kDa的CS-3分餾液(總水溶性粗多糖0.16g；詳見(jiàn)表2)。將劃分收集到的四個(gè)CS-1～CS-4分餾液，進(jìn)行濃縮至少量體積并復(fù)溶于蒸餾水至體積120mL。將每一分餾液分裝至20mL暗色玻璃安瓶，接著經(jīng)121℃滅菌20分鐘，保存于4℃?zhèn)溆谩?.4本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體總水溶性碳水化合物或總水溶性粗多糖含量分析本發(fā)明使用酚-硫酸法分析20％(w/v)的中國(guó)被毛孢水萃取濃縮物(代號(hào)為W1，120mL)、中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物(代號(hào)為W2，2,400mL)、CS-1分餾液(2,290mL)、CS-2分餾液(990mL)、CS-3分餾液(3,600mL)與CS-4分餾液(1,040mL)的總水溶性碳水化合物或總水溶性粗多糖含量。配制0、0.02、0.04、 0.06、0.08、0.10、0.12、0.16、0.18與0.20mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。每一濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液分別取200μL至1.5mL微量離心管，再加入200μL、5％苯酚并混合均勻。接著加入1mL硫酸，混合均勻。待靜置20分鐘，以分光亮度計(jì)(spectrophotometer)在波長(zhǎng)490nm下測(cè)定其讀值，并以此讀值建立檢量線，檢量線的R2>0.99。待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，取200μL至1.5mL微量離心管，再加入200μL、5％苯酚，混合均勻。接著加入1mL硫酸，混合均勻。待靜置20分鐘，以分光亮度計(jì)在波長(zhǎng)490nm下測(cè)定其讀值，將讀值帶入檢量線可以計(jì)算獲得總水溶性碳水化合物或總水溶性粗多糖的濃度。中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物的總水溶性碳水化合物與總水溶性粗多糖含量分析結(jié)果如表1及表2所示，其中在表2的20％(w/v)中國(guó)被毛孢萃取濃縮液的總水溶性粗多糖含量分布分析中，中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物(W2)的總水溶性粗多糖中含有0.42克截留分子量大于300kDa的本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體(CS-1)，其占總中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物(W2)的33.3％；0.64克截留分子量10kDa至300kDa的本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體(CS-2)，其占總中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物(W2)的50.8％；0.16克截留分子量小于10kDa的本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體(CS-3)，其占總中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物(W2)的12.7％。表1中國(guó)被毛孢多糖體粗萃取物的總水溶性碳水化合物與總水溶性粗多糖含量分析表220％(w/v)中國(guó)被毛孢菌絲體萃取濃縮液的總水溶性粗多糖含量分布分析1.5本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體的單糖組成分析圖2顯示使用高效能陰離子交換色層分析儀裝配脈沖式安培檢測(cè)器(DionexICS-5000System)分析CS-1多糖體分餾液的單糖組成。巖藻糖(L-fucose)、鼠李糖(L-rhamnose)、半乳糖胺(D-galactosamine)、阿拉伯糖(D-arabinose)、葡萄糖胺(D-glucosamine)、半乳糖(D-galactose)、葡萄糖(D-glucose)與甘露糖(D-mannose)的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液濃度為0.1、0.5、1、2與5mg/L。分析條件是：注射體積為25μL、分析管柱為CarboPacPA1(4×250mm)、移動(dòng)相為純水(92％)與200mM氫氧化鈉水溶液(8％)經(jīng)混合后組成比例為16mM氫氧化鈉水溶液、流速為1ml/min、以及管柱烘箱溫度為30℃。注射入單糖標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)過(guò)30分鐘的分析時(shí)間，可獲得單糖標(biāo)準(zhǔn)品在0.1、0.5、1、2與5mg/L的峰形積分面積，以此積分面積建立各別單糖的檢量線，檢量線的R2>0.99。取1mL中國(guó)被毛孢CS-1分餾液(總水溶性粗多糖3mg)加入1.79mL蒸餾水以及1.33mL三氟醋酸(trifluoroaceticacid)，在112℃下加熱12小時(shí)進(jìn)行酸水解。接著將此混合物濃縮并反復(fù)復(fù)溶于蒸餾水以除酸，最后復(fù)溶于蒸餾水至1mg/mL。此水解產(chǎn)物經(jīng)稀釋4倍(0.25mg/mL)后取25μL，利用高效能陰離子交換色層分析儀搭配脈沖式安培檢測(cè)器與分析管柱分析，移動(dòng)相為純水(92％)與200mM氫氧化鈉水溶液(8％)經(jīng)混合后組成比例為16mM氫氧化鈉水溶液、流速為1ml/min、管柱烘箱溫度為30℃。經(jīng)過(guò)30分鐘的分析時(shí)間，將樣品分析所得峰形的滯留時(shí)間與積分面積與上述8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品相比對(duì)，可經(jīng)由標(biāo)準(zhǔn)品檢 量線計(jì)算出中國(guó)被毛孢分餾液(CS-1)的各別單糖濃度，進(jìn)而獲得單糖組成的百分比。中國(guó)被毛孢分餾液(CS-1)經(jīng)高效能陰離子交換色層分析儀搭配脈沖式安培檢測(cè)器分析單糖組成比例，巖藻糖占3.2％、鼠李糖占3.4％、阿拉伯糖占1.7％、葡萄糖胺占4.6％、半乳糖占23.8％、葡萄糖占12.5％、甘露糖占50.4％以及半乳糖胺占0.4％，詳如表3、表4、以及第2圖所示。表3高效能陰離子交換色層分析儀-脈沖式安培檢測(cè)器分析300kDa分餾液(CS-1)的單糖組成比例表4300kDa分餾液(CS-1)的單糖組成摩爾比率(molarratio)分析1.6本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖分子量分布的分析本發(fā)明使用分子篩滲透層析法(size-exclusionchromatography，SEC)搭配折射(refractiveindex，RI)、以及光散射(lightscattering，LS)二合一偵測(cè)器的高效液相色譜分析儀(highperformanceliquidchromatography，配有Waters2410折射率檢測(cè)器indexdetector，Viscotek270雙檢測(cè)器)來(lái)分析中國(guó)被毛孢分餾液(CS-1)與分餾液(CS-2)中的多糖分子量分布。制備濃度為1.5mg/mL的分子量標(biāo)準(zhǔn)品葡聚糖(Dextran670；分子量為667,800Da)進(jìn)行系統(tǒng)校正。分析條件是：注射體積100μL、分析管柱為串接2組GPC管柱TSKgelG5000PWxL(7.8×300mm)與TSKgelG6000PWxL(7.8×300mm)、移動(dòng)相為純水添加0.02％NaNO3、流速為0.5ml/min、管柱分析溫度為45℃。取CS-1及CS-2分餾液以上述條件以O(shè)mniSEC軟件(Viscotek公司，美國(guó))進(jìn)行分析，其計(jì)算方式如下表示：Mn：數(shù)目平均分子量Mn=ΣNiMiΣNi]]>Mw：重量平均分子量Mw=ΣNiMi2ΣNiMi]]>Mz：較高平均分子量Mz=ΣNiMi3ΣNiMi2]]>Mp：最高波鋒分子量，為分子量分布最高重量分布點(diǎn)的分子量Mi：?jiǎn)捂湻肿恿?molecularweightofachain)Ni：?jiǎn)捂湹臄?shù)目(numberofchainsofthatmolecularweight)利用光散射GPC/SEC系統(tǒng)進(jìn)行CS-1分餾液(總水溶性粗多糖4.0mg/ml)的分子量分析：取得折射率(refractiveindex，RI)以及光散射(lightscattering， LS)數(shù)據(jù)(圖3)。多糖分子量分布以O(shè)mniSEC軟件(Viscotek公司，美國(guó))進(jìn)行分析(圖4)，同時(shí)獲得累積重量分布(cumulativeweightfraction)(圖5)。CS-1分餾液累積重量分布值為0.95(5％)及0.05(95％)，多糖分子量分別為15,776Da及1,231,969Da。在15,776Da及1,231,969Da之間的多糖占有大約90％的總多糖重量，分子量分布指數(shù)(Mw/Mn)為7.475。表5顯示CS-1與CS-2多糖分餾液的比較表。表5CS-1與CS-2多糖體分餾液的比較MW：分子量實(shí)施例2本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)成肥胖小鼠(high-fatdiet-fed，HFD-fed)在促進(jìn)胰島素敏感性的功效圖6A至D顯示本發(fā)明中國(guó)被毛孢多糖體于高脂飲食誘導(dǎo)肥胖的小鼠經(jīng)口服葡萄糖耐受性測(cè)試(OGTT)與口服胰島素耐受性測(cè)試(ITT)的結(jié)果。C57BL/6NCrlBltw小鼠是以標(biāo)準(zhǔn)飼料(能量來(lái)源13.5％為脂肪)或高脂肪含量飼料(能量來(lái)源60％為脂肪)飼養(yǎng)，并每天藉由胃內(nèi)灌食的方式以100μL的中國(guó)被毛孢多糖體分餾液(CS-1、CS-2、CS-3、以及CS-4)或蒸餾水處理，持續(xù)3個(gè)月(n＝5代表每組各有5只小鼠)，分別為HFD+8％CS-1、HFD+8％CS-2、HFD+8％CS-3、HFD+8％CS-4、HFD、Chow+8％CS-1、Chow+8％CS-2、Chow+8％CS-3、Chow+8％CS-4及Chow組。如圖6A至B所示，HFD+8％CS-1、HFD+8％CS-2、HFD+8％CS-3組血 液中葡萄糖的濃度明顯較僅以蒸餾水處理的控制HFD組為低，說(shuō)明以中國(guó)被毛孢多糖體分餾液CS-1至CS-3(8％)處理的小鼠的葡萄糖耐受性提升；另一方面，如圖6C至D所示，HFD+8％CS-1、HFD+8％CS-2、HFD+8％CS-3組在施予監(jiān)控胰島素(1U/kg)后，血液中葡萄糖的濃度下降，尤其是HFD+8％CS-1，說(shuō)明中國(guó)被毛孢多糖體分餾液CS-1至CS-3(8％)可促進(jìn)胰島素的敏感性。此外，中國(guó)被毛孢多糖體分餾液CS-4(8％)則不會(huì)造成顯著的葡萄糖耐受性與胰島素耐受性變化(如圖6A至D所示)。各中國(guó)被毛孢多糖體分餾液的多糖體含量分別為：0.35g/100mL(CS-1)、0.53g/100mL(CS-2)、0.13g/100mL(CS-3)、0.69g/100mL(CS-4)。故，用以處理小鼠(平均體重為30g)的各中國(guó)被毛孢多糖體的劑量是分別為0.00035g/小鼠體重(CS-1)、0.00053g/小鼠體重(CS-2)、0.00013g/小鼠體重(CS-3)、0.00069g/小鼠體重(CS-4)。經(jīng)由換算，可得用以處理人個(gè)體(體重為70kg)的各中國(guó)被毛孢多糖體的劑量是分別為0.82g/人個(gè)體體重(CS-1)、1.24g/人個(gè)體體重(CS-2)、0.30g/人個(gè)體體重(CS-3)、1.61g/人個(gè)體體重(CS-4)，亦即用于人體的劑量分別為：0.012g/kg(CS-1)、0.018g/kg(CS-2)、0.0043g/kg(CS-3)、0.023g/kg(CS-4)。本發(fā)明所提供的分離與純化的中國(guó)被毛孢多糖體可提升哺乳類動(dòng)物葡萄糖耐受性與胰島素敏感性。因此，本發(fā)明的中國(guó)被毛孢多糖體是可作為一新的預(yù)防或治療人類第2型糖尿病與胰島素抗性的方法。鑒于市場(chǎng)上對(duì)糖尿病治療或預(yù)防產(chǎn)品的迫切的需求，本發(fā)明顯然具有產(chǎn)業(yè)上利用的價(jià)值，惟以上的敘述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例說(shuō)明，凡精于此項(xiàng)技藝者當(dāng)可依據(jù)上述的說(shuō)明而作其它種種的改良，惟這些改變?nèi)詫儆诒景l(fā)明的精神及以下所界定的專利范圍中。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3