一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，該制備方法包括以下步驟，首先通過自由基聚合合成光敏性共聚物；再通過膠束化過程將這種光敏性共聚物制備成自組裝膠束粒子；最后以上述所制備的自組裝膠束粒子溶液為電解液，通過恒電位陰極電沉積技術在醫(yī)用鈦合金表面制備生物納米涂層。該方法操作簡便，條件溫和，適用范圍廣，所制備的生物納米涂層改善了醫(yī)用鈦合金的生物相容性、細胞相容性，增加了醫(yī)用鈦合金作為植入材料的成功幾率。
【專利說明】一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，屬于高分子 材料與醫(yī)用生物涂層相結合領域。 技術背景
[0002] 本世紀以來，隨著科學技術和生產(chǎn)力的迅猛發(fā)展，人們生活質(zhì)量不斷提高，如何改 善患者在醫(yī)學治療中的康復效率成為醫(yī)學和材料工作者關注的新焦點。同時我國是一個人 口大國，人口老齡化逐漸加劇，在新的國情下人們開始對醫(yī)療提出更高的要求。生物醫(yī)用材 料的迅速發(fā)展，為實現(xiàn)這種要求提供了可能。
[0003] 現(xiàn)在常用的生物醫(yī)用材料中，已經(jīng)用于臨床的醫(yī)用金屬材料主要有不銹鋼、鈷合 金、鈦合金和鎂合金。相比于其他醫(yī)用金屬材料，醫(yī)用鈦合金具有良好的生物相容性、與骨 組織相近的彈性模量及在生理環(huán)境中優(yōu)秀的耐腐蝕性，在人工骨替代材料、心血管支架等 方面得到了廣泛研究和臨床上的運用。但目前的研究結果表明，生物醫(yī)用鈦合金本質(zhì)上是 一種生物惰性材料，本身不具備生物活性，作為移植材料不能有周圍組織形成強有力的化 學結合；同時由于醫(yī)用鈦合金有較高的表面勢能及表面帶正點荷，使其易吸附血漿蛋白，導 致血栓形成。因此，對醫(yī)用鈦合金表面改性以提高醫(yī)用鈦合金在植入體內(nèi)的生物相容性成 為當前研究熱點之一。
[0004] 目前，改善醫(yī)用鈦合金生物活性的方法主要是在其表面引入羥基磷灰石或其他生 物活性陶瓷涂層。但是所得到的涂層與鈦合金表面結合強度低，易發(fā)生龜裂等問題，在臨 床應用中涂層易脫落，從而導致植入材料失效；另一方面研究者們力學性能優(yōu)異的生物惰 性醫(yī)用金屬材料與生物活性良好的醫(yī)用高分子材料結合在一起，增加其作為醫(yī)學植入材料 的成功幾率。T. Liebert等采用浸涂法在醫(yī)用鈦合金表面制備葡聚糖生物涂層，該涂層對 人體纖維母細胞及成骨細胞均具有良好的細胞相容性（Biomacromolecules，2011，12:310 7-3113) ;Wei-B〇r Tsai等利用多巴胺堿性條件下自聚形成聚多巴胺在鈦合金表面以固定 多肽、羥基磷灰石和成骨蛋白-2,該涂層有效地改善了骨髓干細胞的骨生成能力（Mater. Interfaces, 2013, 5, 6975-6983)。雖然大分子涂層能改善鈦合金的生物相容性，但在實現(xiàn) 涂層的功能化所需條件較為苛刻，制備過程較為復雜或者結合強度仍然不高，在緩釋控制、 藥物載體等方面優(yōu)勢較低。
[0005] 聚合物膠束由于在膠束內(nèi)外都存在親疏水微區(qū)，結構相對松散，因此聚合物膠束 體系在諸如乳化、緩釋控制、藥物載體、生物涂層材料、催化劑及傳感器等領域有廣闊的應 用前景，現(xiàn)已引起了人們研究的廣泛興趣。Nan Huang等采用浸涂法在鈦合金表面制備了基 于磷酸膽堿基團的類細胞膜涂層，通過物理阻隔和降低涂層表面能有效地減少了蛋白質(zhì)和 血小板的粘附，提高了鈦合金的血液相容性（Mater. Interfaces2013, 5, 6975-6983);韓國 教授Sang Cheon Lee等將天冬氨酸與苯丙氨酸（Cat-PAsp-PPhe)嵌段共聚物自組裝膠束 粒子浸涂在醫(yī)用鈦合金表面制備生物醫(yī)用納米涂層材料，并實現(xiàn)對BMP-2的負載及緩釋， 所制備的涂層改善了鈦合金的生物相容性，顯著地提升了人類干細胞的粘附、增殖和堿性 憐酸酶的活性（Journal of Controlled Release 170(2013) 198-208)。
[0006] 本發(fā)明設想通過合成一種光敏性、pH響應性的聚合物并通過簡單實用的方法制備 成聚合物膠束；結合電泳沉積（Electrophoretic deposition, EPD)這種近幾年受到廣泛 的關注與研究的一種材料制備的電化學方法，在醫(yī)用鈦合金表面制備一種醫(yī)用納米涂層， 提高與基材表面的結合強度；再通過紫外光照交聯(lián)固定涂層形貌，所得涂層能改善醫(yī)用鈦 合金的生物相容性和細胞相容性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對現(xiàn)有技術存在的上述問題，本發(fā)明提供了 一種光敏性共聚物自組裝膠束及其 醫(yī)用納米涂層的制備。該方法操作簡便，實用性強，所制備的納米涂層能有效地提高醫(yī)用鈦 合金的生物相容性。
[0008] 為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術方案是：首先通過自由基聚合一步合成 光敏性共聚物，并在選擇性溶劑中通過瞬間自組裝的方法得到荷正電的共聚物自組裝膠束 粒子，最后通過恒電位陰極電沉積技術在鈦合金表面得到醫(yī)用納米涂層。
[0009] -種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，具體步驟包括：
[0010] (1)光敏性共聚物的合成：將一定量的甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，N，N-二甲氨 基乙酯（DMA)和香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于適量1，4-二氧六環(huán)中，加入引發(fā)劑偶氮 二異丁氰（單體總摩爾量的2%)，通氮氣除氧15min，在65°C下恒溫反應24h。反應結束 后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，得到光敏性共聚物 (P(HEMA-r-DMA-r-CA))；
[0011] (2)光敏性共聚物自組裝膠束粒子的制備：光敏性共聚物自組裝膠束粒子的制備 采用瞬間自組裝的方法，將一定量光敏性共聚物充分溶解于1，4-二氧六環(huán)中，在快速攪 拌條件下，迅速注入一定量的蒸餾水，繼續(xù)攪拌一段時間后轉(zhuǎn)移至透析袋中透析除去溶劑 1，4-二氧六環(huán)，即可得光敏性共聚物自組裝膠束粒子水溶液；
[0012] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金基材，然后將基材依 次置于乙醇和丙酮中超聲清洗處理，重復清洗3次；以步驟（2)中所制備的自組裝膠束粒子 溶液為電解液，醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，采用恒電位陰極電沉積技術，使荷正 電荷的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固 定膜的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
[0013] 步驟（1)中所用單體香豆素丙烯酸酯化物（CA)與甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)及 N，N-二甲氨基乙酯（DMA)的配比分別為1:1?1:8,1:1?1:10,所合成的光敏性共聚物中 含有叔氨基團，具有pH響應性和離子響應性。
[0014] 步驟（2)中注入的蒸餾水體積為1，4-二氧六環(huán)體積的1?5倍，繼續(xù)攪拌時間為 1?2h，透析時間為3天，所述光敏性共聚物的1，4-二氧六環(huán)溶液濃度為1?30mg/mL。
[0015] 步驟（2)中所制備的聚合物自組裝膠束粒子表面呈荷正電，平均粒徑為10? lOOOnrn，膠束濃度為1?10mg/mL。
[0016] 步驟（3)中恒電位陰極電沉積電壓為-3V?-25V，沉積時間為Is?60min，所制 備生物醫(yī)用納米涂層具有光敏感響應性、生物相容性及細胞相容性。
[0017] 本發(fā)明的主要優(yōu)點在于：
[0018] 本發(fā)明經(jīng)自由基聚合獲得具有雙親性、pH響應性和光敏感響應性的功能大分子， 經(jīng)簡單適用的組裝過程自組裝得到多重敏感性的聚合物自組裝膠束粒子；所制備的聚合物 膠束粒子表面呈荷正電，粒子性能穩(wěn)定，通過恒電位陰極電沉積技術在鈦合金表面制備了 均一的醫(yī)用納米涂層，并可通過控制電沉積工藝的條件調(diào)節(jié)醫(yī)用金屬表面膠束粒子電沉積 膜的致密程度及厚度，從而調(diào)控涂層材料的實用性能，此方法操作簡便，適用范圍廣；所制 備的生物醫(yī)用納米涂層與基材的結合強度高，增加了植入體的穩(wěn)定性，同時陰極電沉積技 術條件溫和，避免了在制備涂層過程中對膠束粒子的氧化、性能的破壞。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0019] 圖1為光敏性聚合物（P(HEMA-r-DMA-r-CA))的核磁譜圖；
[0020] 圖2為光敏性聚合物膠束粒子的SEM圖片和粒徑分布；
[0021] 圖3為醫(yī)用納米涂層的SEM圖片；
[0022] 圖4為醫(yī)用納米涂層細胞毒性實驗圖片。

【具體實施方式】
[0023] 實施例1
[0024] -種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其特征步驟如下：
[0025] (1)光敏性共聚物的合成：將3. 25g甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，3. 14g N，N-二甲 氨基乙酯（DMA)和1.09g香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于90mL 1，4_二氧六環(huán)中，再加入 0. 164g偶氮二異丁氰（單體總摩爾量的2% )，通氮氣除氧15min，在60°C下恒溫反應24h ; 反應結束后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，可得到光 敏性共聚物（P(HEMA-r-DMA-r-CA))，分子量12000 ;以氘代二甲亞砜（DMS0-d6)為溶劑，核 磁譜圖見說明書附圖圖1 ;
[0026] (2)光敏性共聚物膠束的制備：將光敏性共聚物溶解于1，4_二氧六環(huán)中形成 20mg/mL的溶液，在快速攪拌條件下將3倍體積的去離子水快速注入聚合物溶液中，后轉(zhuǎn)移 至透析袋中進行透析除去溶劑1，4_二氧六環(huán)得到光敏性共聚物（P(HEMA- r-DMA-r-CA))膠 束水溶液，光敏性共聚物自組裝膠束粒子水溶液濃度為4. 08mg/mL ;將自組裝膠束粒子水 溶液用SEM表征粒子形貌，結果見說明書附圖圖2 ;
[0027] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用1200目的金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金，然后依次 用30mL乙醇和30mL丙酮對基材進行超聲處理5min，重復清洗3次；
[0028] 將預處理后的醫(yī)用鈦合金浸入50mL自組裝膠束粒子水溶液中，采用陰極電沉積 技術施加恒電位電壓，恒電位電壓值為-10V，電沉積時間為3min ;其中以醫(yī)用鈦合金為陰 極，鉬片電極為陽極，使荷正電荷的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再 經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
[0029] 實施例2
[0030] 一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其特征步驟如下：
[0031] (1)光敏性共聚物的合成：將3. 25g甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，3. 14g N，N-二甲 氨基乙酯（DMA)和1.09g香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于90mL 1，4_二氧六環(huán)中，再加入 0. 164g偶氮二異丁氰（單體總摩爾量的2% )，通氮氣除氧15min，在60°C下恒溫反應24h ; 反應結束后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，可得到光 敏性共聚物（P(HEMA-r-DMA-r-CA))，分子量 12000 ;
[0032] (2)光敏性共聚物膠束的制備：將光敏性共聚物溶解于1，4_二氧六環(huán)中形成 20mg/mL的溶液，在快速攪拌條件下將3倍體積的去離子水快速注入聚合物溶液中，后轉(zhuǎn)移 至透析袋中進行透析除去溶劑1，4-二氧六環(huán)得到光敏性共聚物膠束水溶液，光敏性共聚 物膠束水溶液濃度為4. 08mg/mL ;
[0033] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用1200目的金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金，然后依次 用30mL乙醇和30mL丙酮對基材進行超聲處理5min，重復清洗3次；將預處理后的醫(yī)用鈦合 金浸入50mL自組裝膠束粒子水溶液中，采用陰極電沉積技術施加恒電位電壓，恒電位電壓 值為-15V，電沉積時間為2min ;其中以醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，使荷正電荷的 自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜的 結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層；將所制備的涂層用SEM表征其形貌， 表征結果見說明書附圖圖3 ;同時其細胞毒性測試結果見說明書附圖圖3。
[0034] 實施例3
[0035] -種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其特征步驟如下：
[0036] (1)光敏性共聚物的合成：將3. 25g甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，3. 14g N，N-二甲 氨基乙酯（DMA)和1.09g香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于90mL 1，4_二氧六環(huán)中，再加入 0. 164g偶氮二異丁氰（單體總摩爾量的2% )，通氮氣除氧15min，在60°C下恒溫反應24h ; 反應結束后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，可得到光 敏性共聚物（P(HEMA-r-DMA-r-CA))，分子量 12000 ;
[0037] (2)光敏性共聚物膠束的制備：將光敏性共聚物溶解于1，4_二氧六環(huán)中形成 10mg/mL的溶液，在快速攪拌條件下將2倍體積的去離子水快速注入聚合物溶液中，后轉(zhuǎn)移 至透析袋中進行透析除去溶劑1，4-二氧六環(huán)得到光敏性共聚物膠束水溶液，光敏性共聚 物膠束水溶液濃度為2. 14mg/mL ;
[0038] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用1200目的金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金，然后依次 用30mL乙醇和30mL丙酮對基材進行超聲處理5min，重復清洗3次；將預處理后的醫(yī)用鈦 合金浸入50mL自組裝膠束粒子水溶液中，采用陰極電沉積技術施加恒電位電壓，恒電位電 壓值為-10V，電沉積時間為4min ;其中以醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，使荷正電荷 的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜 的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
[0039] 實施例4
[0040] (1)光敏性共聚物的合成：將2. 83g甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，2. 73g N，N-二甲 氨基乙酯（DMA)和1.09g香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于90mL 1，4_二氧六環(huán)中，再加入 0. 148g偶氮二異丁氰（單體總摩爾量的2% )，通氮氣除氧15min，在60°C下恒溫反應24h ; 反應結束后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，可得到光 敏性共聚物（P (HEMA-r-DMA-r-CA))，分子量 9000 ;
[0041] (2)光敏性共聚物膠束的制備：將光敏性共聚物溶解于1，4_二氧六環(huán)中形成 20mg/mL的溶液，在快速攪拌條件下將3倍體積的去離子水快速注入聚合物溶液中，后轉(zhuǎn)移 至透析袋中進行透析除去溶劑1，4-二氧六環(huán)得到光敏性共聚物膠束水溶液，光敏性共聚 物膠束水溶液濃度為4. 03mg/mL ;
[0042] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用1200目的金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金，然后依次 用30mL乙醇和30mL丙酮對基材進行超聲處理5min，重復清洗3次；將預處理后的醫(yī)用鈦 合金浸入50mL自組裝膠束粒子水溶液中，采用陰極電沉積技術施加恒電位電壓，恒電位電 壓值為-15V，電沉積時間為2min ;其中以醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，使荷正電荷 的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜 的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
[0043] 實施例5
[0044] (1)光敏性共聚物的合成：將2. 83g甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，2. 73g N，N-二甲 氨基乙酯（DMA)和1.31g香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于90mL 1，4_二氧六環(huán)中，再加入 0. 148g偶氮二異丁氰（單體總摩爾量的2 % )，通氮氣除氧15min，在60°C下恒溫反應24h ; 反應結束后，用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，可得到光 敏性共聚物（P (HEMA-r-DMA-r-CA))，分子量 9000 ;
[0045] (2)光敏性共聚物膠束的制備：將光敏性共聚物溶解于1，4_二氧六環(huán)中形成 10mg/mL的溶液，在快速攪拌條件下將2倍體積的去離子水快速注入聚合物溶液中，后轉(zhuǎn)移 至透析袋中進行透析除去溶劑1，4-二氧六環(huán)得到光敏性共聚物膠束水溶液，光敏性共聚 物膠束水溶液濃度為2. 10mg/mL ;
[0046] (3)醫(yī)用納米涂層的制備：首先用1200目的金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金，然后依次 用30mL乙醇和30mL丙酮對基材進行超聲處理5min，重復清洗3次；將預處理后的醫(yī)用鈦 合金浸入50mL自組裝膠束粒子水溶液中，采用陰極電沉積技術施加恒電位電壓，恒電位電 壓值為-10V，電沉積時間為4min ;其中以醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，使荷正電荷 的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜 的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
【權利要求】
1. 一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其特征步驟如下： (1) 光敏性共聚物的合成：將一定量的甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)，N，N-二甲氨基乙 酯（DMA)和香豆素丙烯酸酯化物（CA)溶于適量1，4-二氧六環(huán)中，加入引發(fā)劑偶氮二異 丁氰（單體總摩爾量的2% )，通氮氣除氧15min，在65°C下恒溫反應24h。反應結束后， 用石油醚作為沉淀劑，反復沉淀、溶解純化3次后，真空干燥至恒重，得到光敏性共聚物 (P(HEMA-r-DMA-r-CA))； (2) 光敏性共聚物自組裝膠束粒子的制備：光敏性共聚物自組裝膠束粒子的制備采用 瞬間自組裝的方法，將一定量光敏性共聚物充分溶解于1，4-二氧六環(huán)中，在快速攪拌條件 下，迅速注入一定量的蒸餾水，繼續(xù)攪拌一段時間后轉(zhuǎn)移至透析袋中透析除去溶劑1，4-二 氧六環(huán)，即可得光敏性共聚物自組裝膠束粒子水溶液； (3) 醫(yī)用納米涂層的制備：首先用金相砂紙打磨醫(yī)用鈦合金基材，然后將基材依次置 于乙醇和丙酮中超聲清洗處理，重復清洗3次；以步驟（2)中所制備的自組裝膠束粒子溶液 為電解液，醫(yī)用鈦合金為陰極，鉬片電極為陽極，采用恒電位陰極電沉積技術，使荷正電荷 的自組裝膠束粒子向醫(yī)用鈦合金表面泳動并沉積成膜，再經(jīng)紫外光照交聯(lián)反應，可固定膜 的結構，得到基于自組裝膠束粒子的生物醫(yī)用納米涂層。
2. 根據(jù)權利要求1中所述的一種光敏性共聚物自組裝納米膠束的制備方法及運用，其 特征在于，步驟（1)中所用單體香豆素丙烯酸酯化物（CA)與甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)及 N，N-二甲氨基乙酯（DMA)的配比分別為1:1?1:8,1:1?1:10。
3. 根據(jù)權利要求1中所述的一種光敏性共聚物自組裝納米膠束的制備及運用，其特征 在于，步驟（1)中所合成的光敏性共聚物中含有叔氨基團，具有pH響應性和離子響應性。
4. 根據(jù)權利要求1所述的一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其 特征在于，步驟（2)中所述光敏性共聚物的1，4_二氧六環(huán)溶液濃度為1?30mg/mL。
5. 根據(jù)權利要求1所述的一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備，其 特征在于，步驟（2)中注入的蒸餾水體積為1，4-二氧六環(huán)體積的1?5倍，繼續(xù)攪拌時間 為1?2h，透析時間為3天。
6. 根據(jù)權利要求1中所述的一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備， 其特征在于，步驟（2)中所制備的聚合物自組裝膠束粒子表面呈荷正電，平均粒徑為10? lOOOnm，膠束濃度為1?10mg/mL。
7. 根據(jù)權利要求1中所述的一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備， 其特征在于，步驟（3)中恒電位陰極電沉積電壓為-3V?-25V，沉積時間為Is?60min。
8. 根據(jù)權利要求1中所述的一種光敏性共聚物自組裝膠束及其醫(yī)用納米涂層的制備， 其特征在于，步驟（3)中所制備生物醫(yī)用納米涂層具有光敏感響應性、生物相容性及細胞 相容性。
【文檔編號】A61L27/34GK104193889SQ201410375222
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年7月31日 優(yōu)先權日:2014年7月31日
【發(fā)明者】劉曉亞, 孟龍, 孫家娣, 魏瑋, 顧瑤, 羅靜 申請人:江南大學