3-甲基腺嘌呤在制備治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了3-甲基腺嘌呤在制備治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過試驗證明：溶解于磷酸鹽緩沖液中的低濃度3-MA對機(jī)體沒有毒性，并且治療動脈粥樣硬化治療效果明顯。研究發(fā)現(xiàn)：給高脂喂養(yǎng)的Apoe-/-小鼠腹腔注射3-MA，既可有效抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成，又可提高動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。因此，可以預(yù)期，3-MA可以用于治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病，3-MA可成為一種防治動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的新藥，可以用于制備治療或預(yù)防動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物，如，冠心病、心肌梗死、腦中風(fēng)、動脈瘤、動脈硬化癥等。
【專利說明】3-甲基腺嘌呤在制備治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine, 3-MA)在制備治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用，具體地說是3-甲基腺嘌呤在治療動脈粥樣硬化臨床上的應(yīng)用和制備動脈粥樣硬化相關(guān)疾病藥物方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]動脈粥樣硬化(Atherosclerosis, As)是一種血管壁的慢性炎癥性疾病,在成年人中具有很高的發(fā)病率和致死率，是危害人類健康的主要疾病之一。目前，動脈血管壁的內(nèi)皮損傷及內(nèi)膜下脂質(zhì)沉積被認(rèn)為是As發(fā)生的使動因素。其發(fā)病的基本過程如下:高血壓、高脂血癥等刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞受損后使細(xì)胞功能改變和滲透性增高，導(dǎo)致血液中的脂質(zhì)在內(nèi)皮下沉積。隨后血液中的單核細(xì)胞在黏附分子的介導(dǎo)下由損傷處進(jìn)入內(nèi)皮下，變?yōu)榫奘杉?xì)胞后吞噬脂質(zhì)，大量荷脂的巨噬細(xì)胞會變成泡沫細(xì)胞，形成脂肪斑。病灶發(fā)生處的內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和血小板釋放的炎性因子和生長因子會刺激平滑肌細(xì)胞遷移入內(nèi)膜，平滑肌細(xì)胞增生并合成膠原纖維形成纖維帽，使脂肪斑演變成纖維斑塊。脂質(zhì)的進(jìn)一步積累和炎性細(xì)胞浸潤會導(dǎo)致纖維帽變薄，形成不穩(wěn)定斑塊。不穩(wěn)定斑塊的破裂最終導(dǎo)致心腦血管的嚴(yán)重?fù)p害。
[0003]鑒于As發(fā)病各階段 的演變機(jī)制十分復(fù)雜，人們對As的研究已有百余年的歷史，隨著人們對As 了解的不斷深入，抗As的藥物也在不斷發(fā)展。針對As發(fā)生的主要影響因素，抗血小板類藥物、血脂調(diào)節(jié)類藥物、抗脂質(zhì)氧化劑等逐漸成為抗As的主要臨床用藥。
[0004]近年來越來越多的文章表明自噬與As的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。As發(fā)生發(fā)展過程中產(chǎn)生的氧化低密度脂蛋白、炎癥反應(yīng)和代謝應(yīng)激反應(yīng)都可以刺激細(xì)胞自噬水平升高。3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine，3-MA)是一種應(yīng)用廣泛的細(xì)胞自噬抑制劑。它可以通過抑制III型磷脂酰肌醇3磷酸激酶(ClaSSIIIPI3K)的活性來抑制細(xì)胞內(nèi)自噬體的形成。近年來有文章報道在某些條件下，3-MA可以通過抑制I型磷脂酰肌醇三磷酸對自噬的發(fā)生起到促進(jìn)的作用。但體內(nèi)對動脈粥樣硬化是否有防治作用，未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】
，
[0005]針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是探究3-MA對As的作用，達(dá)到治療As的目的。
[0006]本發(fā)明的研究采用3-MA治療小鼠動脈粥樣硬化，通過試驗證明:低濃度溶解于細(xì)胞PBS的3-MA治療動脈粥樣硬化治療效果明顯并且對機(jī)體沒有毒性。研究發(fā)現(xiàn):給高脂喂養(yǎng)的Apoe-/-小鼠同時腹腔注射3-MA不僅可抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成，而且可改善斑塊的穩(wěn)定性。因此，可以預(yù)期，3-MA及其衍生物可以用于治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病，可以用于制備治療或預(yù)防動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物，如，冠心病、心肌梗死、腦中風(fēng)、動脈瘤、動脈硬化癥等。
[0007]所述3-甲基腺嘌呤衍生物是指在3-甲基腺嘌呤基礎(chǔ)上進(jìn)行各種修飾后得到的物質(zhì)。所述各種修飾包括在3-甲基腺嘌呤上用添加不同的化學(xué)基團(tuán)或用不同的化學(xué)基團(tuán)取代原有基團(tuán)。
[0008]本發(fā)明所產(chǎn)生的積極效果是:(I) 3-MA具有減小小鼠主動脈As斑塊面積的作用；
(2)3-MA可以很好地降低As斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量；(3) 3-MA可以很好地減小斑塊內(nèi)壞死核心，增加纖維帽的厚度，穩(wěn)定斑塊；(4)3-MA是一種化學(xué)藥物，合成容易，成本低，體外穩(wěn)定易保存；(5)由于動脈粥樣硬化的發(fā)病率高，市場前景廣泛。
[0009]本發(fā)明采用3-MA治療小鼠動脈粥樣硬化，可明顯抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成和易損性，取得了較好的效果。國內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見3-MA治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的報道，因此，3-MA可成為一種防治動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的新藥。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠腹主動脈斑塊油紅O染色示意圖，其中，a:腹腔注射PBS的對照組Apoe-/-小鼠腹主動脈有明顯的斑塊；b:腹腔注射3-MA的治療組Apoe-/-小鼠腹主動脈斑塊面積顯著減少。
[0011]圖2:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠腹主動脈斑塊面積統(tǒng)計不意圖。
[0012]圖3:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊HE染色示意圖，其中，a:對照組Apoe-/-小鼠主 動脈根部有明顯斑塊；b:3-MA治療組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊明顯減小。
[0013]圖4:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊面積統(tǒng)計示意圖。
[0014]圖5:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊脂質(zhì)ORO染色示意圖，其中，a:對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊含有大量脂質(zhì)；b:3_MA治療組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊脂質(zhì)含量降低。
[0015]圖6:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊脂質(zhì)含量統(tǒng)計示意圖。
[0016]圖7:3-MA治療組和對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊TUNEL染色示意圖，其中，a:對照組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊內(nèi)有大量凋亡細(xì)胞和明顯的壞死核心；b:3_MA治療組Apoe-/-小鼠主動脈根部斑塊內(nèi)凋亡細(xì)胞減少。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0018]實施例13-MA對小鼠動脈粥樣硬化的影響
[0019]取8w雄性Apoe-/-小鼠，體重22_24g，隨機(jī)分為⑴高脂喂養(yǎng)對照組(高脂喂養(yǎng)10周，腹腔注射生理鹽水)；(3) 3-MA治療組(在高脂喂養(yǎng)10周期間每周兩次腹腔注射3-MA30mg/kg, 3-MA用細(xì)胞PBS溶解)。每組15只小鼠，連續(xù)治療10周。
[0020]試驗結(jié)果
[0021]1.動脈粥樣硬化模型:
[0022]高脂喂養(yǎng)10周的Apoe-/-小鼠相比于非高脂喂養(yǎng)的Apoe-/-小鼠，體態(tài)肥大，不活潑，皮毛稀疏油膩。大體染色和主動脈根冰凍切片結(jié)果顯示高脂喂養(yǎng)Apoe-/-小鼠主動脈壁有明顯斑塊生成。
[0023]2.使用3-MA治療動脈粥樣硬化療效觀察:[0024]I)血液常規(guī)檢查
[0025]用高脂喂養(yǎng)10周的Apoe-/-小鼠作為對照，3_MA治療組小鼠的體重和血清中甘油三酯(TGs)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、尿素氮無顯著差別(見表1)，3-MA治療組小鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶水平明顯低于對照組小鼠，更接近正常水平。
[0026]表1
【權(quán)利要求】
1.3-甲基腺嘌呤或其衍生物在制備治療動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病包括冠心病、心肌梗死、腦中風(fēng)、腹主動脈瘤、動脈硬化癥。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于:所述冠心病包括穩(wěn)定性心絞痛、不穩(wěn)定性心絞痛。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于:所述腦中風(fēng)包括腦出血、腦梗死。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述3-甲基腺嘌呤衍生物是指在3-甲基腺嘌呤基礎(chǔ)上進(jìn)行各種修飾后得到的物質(zhì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于:所述各種修飾包括在3-甲基腺嘌呤上用添加不同的化學(xué)基團(tuán)或用不同的化學(xué)基團(tuán)取代原有基團(tuán)。
【文檔編號】A61P35/00GK103948601SQ201410188615
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年5月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月6日
【發(fā)明者】張利寧, 戴珅, 郭春 申請人:山東大學(xué)