一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚c環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法，步驟為，以補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用雷斯青霉ATCC?10490為生物催化劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取和硅膠分離與純化后得到在補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應(yīng)的衍生物。該方法工藝步驟簡(jiǎn)單、安全性高、反應(yīng)高效專一。本發(fā)明不僅克服了目前二氫黃酮類化合物衍生物化學(xué)制備方法中反應(yīng)效率低、大量使用有機(jī)溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問(wèn)題。而且，制備得到的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物是結(jié)構(gòu)新穎的新化合物，對(duì)正常細(xì)胞有一定的促進(jìn)增殖作用，具有和底物相當(dāng)或者更好的抗腫瘤活性。
【專利說(shuō)明】一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物制藥及醫(yī)藥工程領(lǐng)域，尤其是一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚(Bavachinin)是一種二氫黃酮類化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是在二氫黃酮骨架的A環(huán)7號(hào)位取代了一個(gè)甲氧基，A環(huán)6號(hào)位取代了一個(gè)異戊烯基。研究表明，該化合物具有抗氧化、抗細(xì)菌、抗真菌、抗炎、抗腫瘤、退熱性、止痛等多種生物和藥理活性。目前主要從天然植物Psoralea corylifolia中分離得到,但由于較低的分離和純化效率，生產(chǎn)成本較高，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用受到極大限制。因此，通過(guò)結(jié)構(gòu)修飾和改造獲得結(jié)構(gòu)多樣的新化合物，是提高該化合物生物利用度的重要方法。
[0003]二氫黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)修飾和改造工作中，還原反應(yīng)的發(fā)生及其發(fā)生的位點(diǎn)與它的藥理活性密切相關(guān)。目前二氫黃酮類化合物還原產(chǎn)物的化學(xué)制備方法具有反應(yīng)效率低、大量使用有機(jī)溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問(wèn)題。[0004]目前尚無(wú)利用微生物菌種制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物的生物制備方法的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)率高、分離純化過(guò)程簡(jiǎn)單、成本低廉、無(wú)污染的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法。
[0006]本發(fā)明實(shí)現(xiàn)目的技術(shù)方案如下:
[0007]—種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)式如下:
[0008]
【權(quán)利要求】
1.一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物，其特征在于，結(jié)構(gòu)式如下:
2.一種制備權(quán)利要求1所述的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物的方法，其特征在于:以補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用雷斯青霉(Penicillium raistrickii) ATCC10490為生物催化劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)，獲得在補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應(yīng)的衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于:具體步驟如下: ⑴生物催化劑的制備:制備濃度為IO5-1O8個(gè)/ml的雷斯青霉(Penicilliumraistrickii) ATCC 10490的孢子懸浮液，以5%_15%的接種量接種于新鮮的發(fā)酵培養(yǎng)基中，26-30°C，120-200r/min培養(yǎng)24_60h，得到菌體發(fā)酵液； ⑵轉(zhuǎn)化反應(yīng):向菌體發(fā)酵液中投入已經(jīng)溶解的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚，26-30°C，120-200r/min，培養(yǎng)24_120h后終止反應(yīng)； ⑶產(chǎn)物的提取與精制:轉(zhuǎn)化反應(yīng)結(jié)束后，抽濾，分離菌絲體和發(fā)酵液，分別用有機(jī)溶劑萃取菌絲體和發(fā)酵液，合并萃取液，干燥，減壓濃縮，濃縮后用硅膠色譜柱分離獲得補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:分離獲得的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物是利用有機(jī)溶劑通過(guò)重結(jié)晶得到在補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應(yīng)的衍生物的純品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于:所述用于重結(jié)晶的有機(jī)溶劑為石油醚、丙酮、正己烷、乙腈或甲醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成 g/L:葡萄糖 5-30，玉米漿 5-15，NaNO31-3, KH2PO40.5-2, K2HPO41-3, MgSO40.2-1,FeSO40.01-0.03，KC10.2-1, ρΗ7.0-8.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚投入的終濃度為:0.01-0.lg/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述步驟⑵中溶解補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、二甲基亞砜或二甲基甲酰胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述的用于萃取處理的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、正丁醇、甲醇或乙酸丁酯。
10.一種權(quán)利要求1所述的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物用于制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K31/353GK103724310SQ201310733711
【公開(kāi)日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年12月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月23日
【發(fā)明者】駱健美, 申雁冰, 王敏, 梁奇坤, 王家明, 鄭宇
申請(qǐng)人:天津科技大學(xué)