一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法，以補骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用黃曲霉ATCC3089和雅致小克銀漢霉CICC4025為生物催化劑進行轉(zhuǎn)化反應，經(jīng)有機溶劑萃取和硅膠分離與純化后得到在補骨脂二氫黃酮甲醚A環(huán)C2”,C3”位點形成兩個羥基的衍生物，本方法工藝步驟簡單、安全性高、反應高效專一，本發(fā)明不僅克服了目前二氫黃酮類化合物衍生物化學制備方法中反應效率低、大量使用有機溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問題，而且，制備得到的補骨脂二氫黃酮甲醚的羥基化衍生物是結構新穎的新化合物，對正常細胞有一定的促進增殖作用，表現(xiàn)出一定的抗腫瘤活性，水中的溶解度也有所增加。
【專利說明】一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物制藥及醫(yī)藥工程領域，尤其是一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法。
【背景技術】
[0002]補骨脂二氫黃酮甲醚(Bavachinin)是一種二氫黃酮類化合物，其化學結構是在二氫黃酮骨架的A環(huán)7號位取代了一個甲氧基，A環(huán)6號位取代了一個異戊烯基。研究表明，該化合物具有抗氧化、抗細菌、抗真菌、抗炎、抗腫瘤、退熱性、止痛等多種生物和藥理活性。目前主要從天然植物Psoralea corylifolia中分離得到,但由于較低的分離和純化效率，生產(chǎn)成本較高，導致其臨床應用受到極大限制。因此，通過結構修飾和改造獲得結構多樣的新化合物，是提高該化合物生物利用度的重要方法。
[0003]對于二氫黃酮類化合物，羥基基團的存在和位點與它的藥理活性密切相關。但利用化學方法制備這類芳香族化合物的羥基化衍生物需要經(jīng)過多個步驟，反應效率較低。由于C-H轉(zhuǎn)化為C-OH的反應是許多芳香族化合物氧化代謝的關鍵特征，因此，可以通過微生物轉(zhuǎn)化法實現(xiàn)這類化合物的一步羥基化。
[0004]目前，尚無利用微生物菌種制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的生物合成方法的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足之處，提供一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法，本方法具有反應條件溫和、易于控制、無污染、目標產(chǎn)物產(chǎn)率高、分離純化過程簡單、成本低廉、安全性高等優(yōu)點`。
[0006]本發(fā)明實現(xiàn)目的的技術方案如下:
[0007]一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物，結構式如下:
[0008]
【權利要求】
1.一種補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物，其特征在于，結構式如下:

2.一種制備權利要求1所述補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:以補骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用黃曲霉ATCC3089或雅致小克銀漢霉CICC4025為生物催化劑進行轉(zhuǎn)化反應，獲得在補骨脂二氫黃酮甲醚A環(huán)C2”，C3”位點形成兩個羥基的衍生物。
3.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:步驟如下: ⑴生物催化劑的制備:無菌水制備濃度為IO5-1O8個/ml的生物催化劑的孢子懸浮液，以5%-15%的接種量接種于新鮮的發(fā)酵培養(yǎng)基中，26-30°C，120-200r/min培養(yǎng)12_48h，得到菌體發(fā)酵液； ⑵轉(zhuǎn)化反應:向菌體發(fā)酵液中投入溶解的補骨脂二氫黃酮甲醚，26-30°C，120-2001./min培養(yǎng)24-120h后終止反應； ⑶產(chǎn)物的提取與精制:轉(zhuǎn)化反應結束后，抽濾，分離菌絲體和發(fā)酵液，分別用有機溶劑萃取菌絲體和發(fā)酵液，合并萃取液，干燥，減壓濃縮，濃縮后用硅膠色譜柱分離獲得補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物。
4.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:將步驟⑶獲得的產(chǎn)物是利用有機溶劑通過重結晶得到補骨脂二氫黃酮甲醚在A環(huán)C2’，C3’位點形成兩個羥基的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的純品。
5.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述黃曲霉ATCC3089發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成g/L:葡萄糖5_30，玉米漿5_10，NaNO31-2, KH2PO41-2, K2HP042_3，MgSO40.5-1, FeSO40.02-1, KC10.5-1, ρΗ7.0-8.0。
6.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述雅致小克銀漢霉CICC4025發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成g/L:葡萄糖5-30，玉米漿5-35，(NH4)2S042-8,酵母粉 1-4，ρΗ4.0-6.0。
7.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述補骨脂二氫黃酮甲醚投入的終濃度為:0.01-0.lg/L。
8.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述的用于萃取處理的有機溶劑為乙酸乙酯、正丁醇、甲醇或乙酸丁酯。
9.根據(jù)權利要求1所述的制備補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述用于重結晶的有機溶劑為石油醚、丙酮、正己烷、乙腈或甲醇。
10.權利要求1所述的補骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物作為制備抗腫瘤藥物的應用。
【文檔編號】A61P35/00GK103724309SQ201310733691
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月23日 優(yōu)先權日:2013年12月23日
【發(fā)明者】王敏, 駱健美, 申雁冰, 梁奇坤, 鄭宇 , 王家明 申請人:天津科技大學