一種溫敏凝膠藥物制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種溫敏凝膠藥物制劑及其制備方法。該溫敏凝膠藥物制劑原料配方含有藥物，溫敏凝膠組合物，以及輔料C；所述的輔料C為金屬鹽、糖類物質(zhì)、以及注射藥用的親水性聚合物中的一種或多種；所述的金屬鹽為藥學(xué)上可接受的且水溶液中離解二價金屬陽離子的金屬鹽；所述的藥物為在水溶液中以陰離子形態(tài)存在的物質(zhì)A，所述的物質(zhì)A為蛋白類藥物、多肽類藥物和糖肽類抗生素中的一種或多種。該制備方法包括如下步驟：按原料配方，將藥物溶解于以溶液形式存在的溫敏凝膠組合物即可。該溫敏凝膠藥物制劑特別適合水溶性藥物，減低突釋作用，緩慢地釋放藥物，達(dá)到緩釋目的。
【專利說明】一種溫敏凝膠藥物制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種溫敏凝膠藥物制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]艾賽那妝(又稱exenatide 或 exendin-4)最先從大毒晰(Heloderm suspectum)的唾液分泌物中分離而出，是含有39個氨基酸的多肽(Eng，J.等，J.Biol.Chem.，1990(265) =20259-20262 ;或者 J.Biol.Chem., 1992(267):7402-7405)，其氨基酸序列與類胰高血糖素(glucagon-like peptide-1,GLP-1)有約53%的相同組分。藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，艾賽那肽具有和GLP-1相似的作用，即能刺激胰腺β細(xì)胞分泌胰島素。艾賽那肽可以在體外作用于某些分泌胰島素的細(xì)胞上的GLP-1受體、作用于來自豚鼠胰臟的散布腺泡細(xì)胞或者作用于來自胃的壁細(xì)胞；還有報道稱艾賽那肽能刺激促生長素抑制素釋放并且抑制分離的胃中的胃泌素釋放(Goke 等，J.Biol.Chem., 1993(268):19650-19655 ；Schepp7, Eur.J.PharrrLacol., 1994(69): 183-191 ;Eissele 等，Life Sc1., 1994(55):629-634)。艾賽那肽在人類和大鼠的基礎(chǔ)受體系統(tǒng)中誘導(dǎo)cAMP產(chǎn)生的作用與GLP-1基本相同，最顯著的受體結(jié)合部位在胰腺胰島部位。
[0003]藥物艾賽那肽由美國Amylin公司和禮來公司合作開發(fā)，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)其上市，商品名Byetta，用于對單獨使用二甲雙胍、磺脲類藥物、或二甲雙胍和磺脲類藥物聯(lián)用治療未能獲得良好控制的II型糖尿病患者的輔助治療。艾賽那肽注射液臨床用于II型糖尿病的治療，現(xiàn)有的方案是每次給藥5-10微克，每天給藥2-3次，使用周期長達(dá)半年以上。因此，制備一種緩釋、方便病人給藥的長效注射劑對于艾賽那肽的臨床應(yīng)用是極其重要的。
[0004]微球是一種將藥物均勻分散于可生物降解材料為骨架的球形或類球形的實體，使用前加入助懸劑后，可以順利注射如皮下或肌內(nèi)，微球注射劑有以下優(yōu)點:(I)可以通過普通注射器注射至患者皮下或肌內(nèi)，用藥方便；(2)藥物在體內(nèi)以恒速緩慢釋放，維持體內(nèi)持久的藥效；(3)微球骨架材料具有生物可降解`和生物相容性質(zhì)，在體內(nèi)，藥物可以從微球緩慢釋放，而骨架材料可不斷為機(jī)體吸收，由于材料具有良好的生物相容性，不至于產(chǎn)生毒副作用等優(yōu)點(李坤，劉曉君，陳慶華，可生物降解長效注射劑給藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展，中國工業(yè)雜志，2012，43 (3):34)。
[0005]在已上市的微球注射劑品種中，以聚酯類材料的微球注射劑占主導(dǎo)地位，其
中人工合成多妝-黃體激素釋放激素(luteinisin hormone releasing hormones,
LHRH)類似物微球是上世紀(jì)90年代開發(fā)并獲得了成功一類多肽長效注射劑產(chǎn)品。2011年7月份歐盟批準(zhǔn)禮來公司的Bydureon? (艾賽那肽微球注射劑)上市(中國專利，CN200580019229.9)，目前Bydureon?是首個也是唯——個用于Il型糖尿病治療的長效注射劑,一周注射一次。臨床數(shù)據(jù)顯示,使用Bydureon? 6個月后，糖化血紅蛋白指標(biāo)與基線相比下降1.5% -1.9%，患者血糖可以得到很好的控制。
[0006]但是，微球作為長效注射劑載體仍然存在以下缺點:(I)制備工藝復(fù)雜，存在驅(qū)除有機(jī)溶劑的復(fù)雜工序，生產(chǎn)周期較長，成本較高；(2)微球制備中往往有藥物包封率的問題，藥物含量很難提高；(3)滅菌的處理非常困難等。
[0007]近年來，溫度敏感型生物可降解聚合物作為注射給藥系統(tǒng)的載體受到了越來越多的關(guān)注。該類聚合物對環(huán)境溫度十分敏感，當(dāng)環(huán)境溫度低于最低臨界相變溫度(LCST)時，聚合物可溶于水形成自由流動的液體，而當(dāng)環(huán)境溫度大于LCST時，聚合物水溶液形成半固體狀態(tài)的物理交聯(lián)凝膠，完成從溶膠到凝膠的相變。聚酯(縮寫記為A)/聚乙二醇(縮寫記為B)三嵌段共聚物是最常用的一種溫度敏感型聚合物，按聚合方式分為ABA和BAB兩種類型；將親水性的聚乙二醇(PEG)插入到可生物降解的聚酯鏈中可調(diào)節(jié)共聚物的親水性和降解速率。在特定比例的條件下，這類共聚物可溶于水，當(dāng)濃度大于臨界膠束濃度時，共聚物在水中以核-殼結(jié)構(gòu)的膠束狀態(tài)存在，即疏水性嵌段A形成內(nèi)核，而親水性B嵌段則分布在水分子界面形成膠束的外殼；當(dāng)環(huán)境溫度> LCST時，膠束聚集形成物理交聯(lián)的水凝膠。由此,藥物從生物可降解的溫度敏感型ABA或BAB三嵌段共聚物中的釋放主要由藥物擴(kuò)散，以及聚合物的降解和溶蝕(兩者統(tǒng)稱為降解行為)這兩種機(jī)制或兩者結(jié)合控制。釋放速度是評價凝膠注射劑質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)之一。因此溫敏凝膠可作為長效注射劑的載體，有望可以很好的解決微球作為給藥系統(tǒng)載體的上述缺點，所以它的成功研發(fā)，受到化工，藥學(xué)等領(lǐng)域的普遍重視。ReGel?是MacroMed公司作為第一家專有擁有的溫敏型原位凝膠產(chǎn)品。這種未載藥的凝膠是由低分子量的ABA型PLGA-PEG-PLGA三嵌段共聚物溶解在pH7.4的磷酸鹽緩沖液制成的，此處PLGA是指聚乳酸-羥基乙酸共聚物。該凝膠系統(tǒng)有以下特點:①ReGel?從聚合物的合成到產(chǎn)品的制備均無需采用有機(jī)溶劑，在低溫下可以過濾除菌，由此保證了產(chǎn)品的安全性。②“低溫溶膠，高溫凝膠”的反相溫敏凝膠特性方便了制劑的制備，提高了貯存和運(yùn)輸時藥物的化學(xué)穩(wěn)定性。③良好的生物降解性和生物相容性，避免了手術(shù)植入，改善了用藥的安全性和順應(yīng)性。④兩親性聚合物水溶液提高了很多疏水性藥物的溶解性，不僅能傳遞水溶性藥物，也可應(yīng)用于小劑量的水難溶性藥物，拓寬了傳遞藥物的范圍。⑤以核-殼結(jié)構(gòu)的膠束狀態(tài)溫和的內(nèi)部環(huán)境提高了很多藥物的化學(xué)穩(wěn)定性，更適合傳遞日益增加的多肽蛋白類藥 物。⑥具有I~6周的緩釋能力和2年的產(chǎn)品有效期，具備了開發(fā)成長效注射劑的基礎(chǔ)。除了上述優(yōu)點，系統(tǒng)內(nèi)藥物的釋放速率可通過改變?nèi)抖尉酆衔锏氖杷?親水組分含量、聚合物濃度、分子量和多分散性調(diào)節(jié)，在設(shè)計處方時可根據(jù)不同的應(yīng)用要求制成適合的處方，具有廣泛的應(yīng)用空間。
[0008]OncoGel?是將紫杉醇溶于ReGel?中制成劑量為2mg/g的長效注射劑，該制劑可用于治療食道癌，目前在美國處于II期臨床研究中，也是第一個溫敏凝膠注射劑的品種。根據(jù)該載體的優(yōu)點，可以看出作為治療的劑型，有著很好的研究開發(fā)空間和應(yīng)用前景。然而經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，ReGel?存在的缺點如下:①聚合物材料超出一定嵌段組成(如GA/LA中的乳酸和羥基乙酸單元摩爾比超過一定比值、或者PLGA/PEG中聚合物單元ABA中的A/B比例超過一定比值)，以及超出一定的嵌段共聚物分子量大小，就只能完全溶于水或部分甚至完全變?yōu)槌恋恚瑥亩鴨适Я巳苣z-凝膠轉(zhuǎn)變性能，以及溫敏膠凝化的性能；②部分聚合物即使出現(xiàn)熱敏特性，但其膠凝化溫度不適合人體應(yīng)用；③該凝膠的降解速率的調(diào)節(jié)范圍和動力學(xué)過程有一定局限性，限制了其在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。
[0009]中國專利申請?zhí)枮?00910049664.6報道由兩種或兩種以上PLGA-PEG-PLGA嵌段聚合物組成的混合凝膠具有單一聚合物凝膠所不具有溫敏的特性。這種混合聚合物凝膠具有靈敏、可逆、合適的膠凝化溫度，突破了 ReGel?專利的桎梏，通過調(diào)整各聚合物的比例可更靈活地調(diào)節(jié)凝膠的膠凝化溫度、降解速度等性質(zhì)，有應(yīng)用潛力。然而，由于溫敏凝膠的水性環(huán)境，制備的水溶性藥物溫敏凝膠時，水溶性藥物很容易通過凝膠內(nèi)部水溶性通道擴(kuò)散出去，造成用藥初期釋放大部分的藥物，用藥后開始一段時間會出現(xiàn)嚴(yán)重的藥物突釋效應(yīng)(Burst effect)，并且達(dá)不到制劑的緩釋效果，或緩釋效果不明顯，限制了水溶性藥物溫敏凝膠的應(yīng)用?，F(xiàn)階段有通過增加溫敏聚合物濃度來降低藥物的突釋效應(yīng)，但效果不明顯，至今很少見到有研究成功解決該問題的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服了水溶性藥物溫敏凝膠中的水溶性藥物很容易通過凝膠內(nèi)部水溶性通道擴(kuò)散出去，造成用藥初期釋放大部分藥物，用藥后開始一段時間會出現(xiàn)嚴(yán)重的藥物突釋效應(yīng)，達(dá)不到制劑的緩釋效果等缺陷，而提供了一種特別適合水溶性藥物，減低突釋作用，能緩慢地釋放藥物的溫敏凝膠藥物制劑及其制備方法。
[0011]本發(fā)明的溫敏凝膠藥物制劑，其原料配方含有藥物，溫敏凝膠組合物，以及輔料C ；所述的輔料C為金屬鹽、糖類物質(zhì)、以及注射藥用的親水性聚合物中的一種或多種；所述的金屬鹽為藥學(xué)上可接受的且水溶液中離解二價金屬陽離子的金屬鹽；所述的藥物為在水溶液中以陰離子形態(tài)存在的物質(zhì)A，所述的物質(zhì)A為蛋白類藥物、多肽類藥物和糖肽類抗生素中的一種或多種。
[0012]本發(fā)明中，所述的藥物較佳的為胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1類似物)、促黃體激素釋放激素(LHRH類似物)、生長激素類物質(zhì)，更佳的為利拉魯肽、艾賽那肽、GLP-1 (7-37)、亮丙瑞林、組胺瑞林、戈舍瑞林、重組人生長激素、重組牛生長激素、重組豬生長激素、人生長抑素、奧曲肽、C肽(又稱連接肽)、降鈣素、萬古霉素、去甲萬古霉素和替考拉寧中的一種或多種，進(jìn)一步更佳的為艾賽那肽。
[0013]本發(fā)明中，所述的藥物的含量可按本領(lǐng)域常規(guī)用量，較佳的為占溫敏凝膠藥物制劑重量0.01%~5%，更佳的為0.2%~2%。當(dāng)所述的藥物為艾賽那肽時，所述的藥物的用量較佳的為按溫敏凝膠藥物制劑重量計為0.01 %~2%，更佳的為0.05%~0.5%，進(jìn)一步更佳的為0.2%~0.5%。
[0014]本發(fā)明中，所述的溫敏凝膠組合物為本領(lǐng)域常規(guī)使用的溫敏凝膠組合物，較佳的為按照中國專利申請，申請?zhí)枮?00910049664.6所說的溫敏凝膠組合物。所述的溫敏凝膠組合物較佳的含有聚合物；所述的聚合物包括疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物；其中，所述的疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物各自均包括聚乙二醇親水嵌段A和聚酯疏水嵌段B (此處將嵌段引入A和B標(biāo)識以便于為后文引用)。本領(lǐng)域技術(shù)人員均知道根據(jù)本領(lǐng)域常識，調(diào)整聚乙二醇親水嵌段A和聚酯疏水嵌段B之間的比例來分別獲得疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物。
[0015]其中，所述的疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物的總量較佳的為占溫敏凝膠組合物總量的重量百分含量3%~50% ;所述的疏水性嵌段聚合物與親水性嵌段聚合物的用量重量比較佳的為0.5:1~3: 1，更佳的為1:1。
[0016]其中，所述的聚乙二醇親水嵌段A的重量百分比較佳的為10wt%~90wt%。所述的聚乙二醇親水嵌段A較佳的為具有400至8000的數(shù)均分子量的聚乙二醇嵌段。
[0017]其中，所述的聚酯疏水嵌段B的重量百分比較佳的為IOwt %~90wt%。所述的聚酯疏水嵌段B較佳的為具有500~40000的數(shù)均分子量的聚酯嵌段。
[0018]其中，所述的聚酯疏水嵌段B中的聚酯較佳的為聚DL-丙交酯、聚D-丙交酯、聚L-丙交酯、聚乙交酯、聚原酸酯、聚己內(nèi)酯、聚烷基取代己內(nèi)酯、聚δ -戊內(nèi)酯、聚酰胺酯、聚碳酸酯、聚丙烯酸酯或聚醚酯，以及上述各類聚酯中的兩種以上的聚酯所形成的共聚物。
[0019]本發(fā)明中，所述的聚合物較佳的為ABA嵌段構(gòu)型的三嵌段共聚物、BAB嵌段構(gòu)型的三嵌段共聚物、BA嵌段構(gòu)型的二嵌段共聚物、A (BA) η嵌段構(gòu)型的多嵌段共聚物或B (AB) η嵌段構(gòu)型的多嵌段共聚物，其中η為2至10的整數(shù)。所述的聚合物較佳的至少一種聚合物不具有熱可逆凝膠化的性質(zhì)。
[0020]本發(fā)明中，所述的疏水性嵌段聚合物較佳的為PLGA-PEG-PLGA共聚物；其中PLGA嵌段的數(shù)均分子量為1000~2000，更佳的為1571 ；PLGA嵌段中乳酸單元與羥基乙酸單元的摩爾比為I~10，更佳的為4 ;PEG嵌段的數(shù)均分子量為1400~1600，更佳的為1500。所述的疏水性嵌段聚合物的分子量分布系數(shù)為1.01~1.40，更佳的為1.23。
[0021]本發(fā)明中，所述的親水性嵌段聚合物較佳的為PLGA-PEG-PLGA共聚物，其中PLGA嵌段的數(shù)均分子量為800~1600，更佳的為1255 ；PLGA嵌段中乳酸單元與羥基乙酸單元的摩爾比為I~10，更佳的為4 ;PEG嵌段的數(shù)均分子量為1000~2000，更佳的為1500。所述的親水性嵌段聚合物的分子量分布系數(shù)較佳的為1.01~1.50，更佳的為1.15。
[0022]本發(fā)明中，所述的溫敏凝膠組合物中的溶劑按本領(lǐng)域常規(guī)，一般為純水、生理鹽水、緩沖溶液、動植物或人體的體液、組織培養(yǎng)液或細(xì)胞培養(yǎng)液，以及其它水溶液和不以有機(jī)溶劑為主體的介質(zhì)，較佳的為水、等滲生理鹽水或等滲的pH為7.4的PBS溶液。
[0023]如前所述，本發(fā)明中所述的溫敏凝膠藥物制劑中的輔料C為金屬鹽、糖類物質(zhì)、以及注射藥用的親水性聚合物中`的一種或多種；所述的金屬鹽為藥學(xué)上可接受的且水溶液中離解二價金屬陽離子的金屬鹽。
[0024]本發(fā)明中，所述的二價金屬陽離子較佳的為鋅離子，鈣離子或鎂離子。所述的金屬鹽更佳的為乙酸鋅。
[0025]本發(fā)明中，所述的金屬鹽的用量較佳的為占溫敏凝膠組合物重量百分比0.1%~10%，更佳的為1%~3%，進(jìn)一步更佳的為0.5%~1.5%。
[0026]本發(fā)明中，所述的糖類物質(zhì)為本領(lǐng)域常規(guī)使用的藥學(xué)可接受的糖類物質(zhì)，較佳的為蔗糖、乳糖、果糖、葡萄糖、麥芽糖和海藻糖中的一種或多種；所述的糖類物質(zhì)的用量為本領(lǐng)域常規(guī)用量，較佳的為占溫敏凝膠組合物重量的0.1 %~20 %，更佳的為2 %~5 %，進(jìn)一步更佳的為2.5%~5%。
[0027]本發(fā)明中，所述的注射藥用的親水性聚合物為本領(lǐng)域常規(guī)使用，其生物相容性良好且在水凝膠中具有增稠作用；較佳的為聚乙二醇，更佳的為聚乙二醇數(shù)均分子量200~6000，進(jìn)一步更佳的為PEG數(shù)均分子量200。所述的注射藥用的親水性聚合物的用量較佳的為占溫敏凝膠組合物重量的0.1 %~20 %，更佳的為2 %~5 %，更佳的為2.5 %~5 %。
[0028]本發(fā)明中，一較佳實例，所述的輔料C為1.25%的乙酸鋅、5%的蔗糖、以及5%的PEG數(shù)均分子量200，百分比為占溫敏凝膠組合物重量計。
[0029]本發(fā)明還提供一種前述的溫敏凝膠藥物制劑的制備方法，其包括如下步驟:按原料配方，將各成分溶解于以溶液形式存在的溫敏凝膠組合物即可；
[0030]當(dāng)所述的輔料C含有金屬鹽時，將金屬鹽與藥物在水溶液中溶解均勻混合，然后冷凍干燥，之后再與溫敏凝膠組合物均勻混合；
[0031]當(dāng)所述的輔料C含有糖類物質(zhì)時，將糖類物質(zhì)直接溶解于溫敏凝膠組合物；或者與藥物在水溶液中溶解均勻混合，然后冷凍干燥，之后再與溫敏凝膠組合物均勻混合。
[0032]本發(fā)明的溫敏凝膠藥物制劑較佳的用于注射于人體皮下或肌內(nèi)，控制水溶性藥物以恒定的速率，緩慢持續(xù)釋放的生物可降解的溫敏凝膠藥物制劑。如艾賽那肽溫敏凝膠藥物制劑治療II型糖尿病效果極好。
[0033]本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0034]在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，本發(fā)明中上述的各技術(shù)特征的優(yōu)選條件可以任意組合得到本發(fā)明較佳實例。
[0035]本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于:本發(fā)明的溫敏凝膠藥物制劑能較好地改善多肽、蛋白類水溶性藥物和糖肽類抗生素的突釋問題，緩慢地釋放藥物，以達(dá)到緩釋藥物的目的；特別是治療II型糖尿病藥物GLP-1類似物的溫敏凝膠藥物制劑能夠在體外均勻釋放9天，小鼠體內(nèi)有效降糖5至9天，從而改善了糖尿病病人的用藥順應(yīng)性；這對多肽、蛋白類大分子藥物的長效注射劑的研究和開發(fā)，將具有很好的參考價值和應(yīng)用意義。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0036]圖1為對比例1-7制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0037]圖2為對比例8-9制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0038]圖3為實施例1-2制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0039]圖4為實施例3-4制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0040]圖5為實施例5-6制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0041]圖6為實施例7制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0042]圖7為實施例8制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0043]圖8為實施例9制得的溫敏凝膠藥物制劑的藥物體外釋放曲線圖。
[0044]圖9為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖。
[0045]圖10為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖；***p
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0046]圖11為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0047]圖12為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0048]圖13為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0049]圖14為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0050]圖15為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0051]圖16為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖
<0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。[0052]圖17為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖< 0.001，**p < 0.01，*p < 0.05vs NaCl。
[0053]圖18為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖。
[0054]圖19為效果實施例1艾賽那肽凝膠制劑對ICR小鼠血糖的影響關(guān)系圖。
【具體實施方式】
[0055]下面通過實施例的方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。
[0056]對比例1-7
[0057]1.1對比例1-7溫敏凝膠藥物制劑(不含有輔料C)的制備
[0058]表1~3中的嵌段聚合物分別按照中國專利申請，申請?zhí)枮?00910049664.6實施例I~3中方法合成，具體配比記錄于表1和2。
[0059]其中表1的嵌段共聚物為親水性嵌段聚合物(只是能夠在水中溶解)，表2的嵌段共聚物為疏水性嵌段聚合物(不能夠溶解在水中或不能夠完全溶解在水中)；而表3的嵌段共聚物本身就具有熱可逆膠凝化的性能。
[0060]對比例1-7為從表1中選取一種或一種以上嵌段共聚物，結(jié)合從表2和/或表3中選取一種或一種以上嵌段共聚物以按比例混合，按照一定濃度溶解在去離子水中，獲得具有熱可逆膠凝化的凝膠水溶液。
[0061]對比例1-7的具體的原料配比如表4所述。將艾賽那肽藥物溶解在凝膠溶液中，攪拌使藥物溶解，0.22 um濾膜過濾滅菌，制成溫敏凝膠藥物制劑。
[0062]1.2對比例1-7溫敏凝`膠藥物制劑的藥物體外釋放實驗
[0063]將對比例1-7制得的溫敏凝膠藥物制劑各約0.5g分別置于IOml具塞刻度試管中，于37°C恒溫空氣搖床中放置15min待聚合物溶液完全膠凝后，加入IOml pH = 7.4的同溫磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液作為釋放介質(zhì)，釋放面積為0.18cm2,轉(zhuǎn)速為50rpm。釋放開始后的1、3、5、7和9天分別取出全部的釋放介質(zhì)，測量底部殘余凝膠中的藥物含量，間接計算藥物釋放量，平行操作3份。以累計藥物釋放量對時間作圖，得到釋放曲線，結(jié)果見圖1。
[0064]測定艾賽那肽的HPLC方法如下:色譜柱:Sepax Technologies Inc.C4鍵合硅膠色譜柱(4.6*150mm, 5um),流動相A:pH = 1.9 (磷酸二氫鉀11.58g，85%磷酸10.9g,加水至 1000ml)的 PBS-乙腈(468: 26, w/w),流動相 B:pH = 1.9 (磷酸二氫鉀 11.58g, 85 %磷酸10.9g，加水至1000ml)的PBS-乙腈(536: 338, w/w),洗脫程序:0~6min,流動相A從35%降至28%，6~33min，流動相A比例保持28%不變，檢測波長:214nm，柱溫，55°C，流速1.0ml/min,進(jìn)樣量50 μ I。
[0065]由圖1可知，對比例1-7的溫敏凝膠藥物制劑，藥物在水凝膠基質(zhì)中首日突釋均比較嚴(yán)重，前5天基本上藥物的累積釋放量均超過80%，第24小時的累積釋藥已超過60%，藥物釋放速率過快，藥物突釋的數(shù)據(jù)很明顯。
[0066]表1
[0067]
【權(quán)利要求】
1.一種溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，其原料配方含有藥物，溫敏凝膠組合物，以及輔料C ;所述的輔料C為金屬鹽、糖類物質(zhì)、以及注射藥用的親水性聚合物中的一種或多種；所述的金屬鹽為藥學(xué)上可接受的且水溶液中離解二價金屬陽離子的金屬鹽；所述的藥物為在水溶液中以陰離子形態(tài)存在的物質(zhì)A，所述的物質(zhì)A為蛋白類藥物、多肽類藥物和糖肽類抗生素中的一種或多種。
2.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的二價金屬陽離子為鋅離子，鈣離子或鎂離子；所述的金屬鹽較佳的為乙酸鋅；所述的金屬鹽的用量為占溫敏凝膠組合物重量百分比0.1%~10%，較佳的為1%~3%，更佳的為0.5%~2.5%。
3.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的糖類物質(zhì)為蔗糖、乳糖、果糖、葡萄糖、麥芽糖和海藻糖中的一種或多種；所述的糖類物質(zhì)的用量為占溫敏凝膠組合物重量的0.1 %~20 %，較佳的為2 %~5 %，更佳的為2.5 %~5 %。
4.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的注射藥用的親水性聚合物為聚乙二醇，較佳的為聚乙二醇數(shù)均分子量200~6000，更佳的為PEG數(shù)均分子量200 ;所述的注射藥用的親水性聚合物的用量為占溫敏凝膠組合物重量的0.1%~20%，較佳的為2%~5%，更佳的為2.5%~5%。
5.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的藥物的含量為占溫敏凝膠藥物制劑重量0.01%~5%，較佳的為0.2%~2%;當(dāng)所述的藥物為艾賽那肽時，所述的藥物的用量為按溫敏凝膠藥物制劑重量計為0.01%~2%，較佳的為0.05%~0.5%，更佳的為0.2%~0.5%。
6.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的藥物為胰高血糖素樣肽-1、促黃體激素釋放激素或者生長激素類物質(zhì)，較佳的為利拉魯肽、艾賽那肽、GLP-1 (7-37)、亮丙瑞林、組胺瑞林、戈舍瑞林、重組人生長激素、重組牛生長激素、重組豬生長激素、人生長抑素、奧曲肽、C肽、降鈣素、萬古霉素、去甲萬古霉素和替考拉寧中的一種或多種；所述的輔料C較佳的為1.25 %的乙酸鋅、5 %的蔗糖、以及5 %的PEG數(shù)均分子量200，百分比為占溫敏凝膠組合物重量計。
7.如權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的溫敏凝膠組合物含有聚合物；所述的聚合物包括疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物；其中，所述的疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物各自均包括聚乙二醇親水嵌段A和聚酯疏水嵌段B。
8.如權(quán)利要求7所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的疏水性嵌段聚合物和親水性嵌段聚合物的總量為占溫敏凝膠組合物總量的重量百分含量3%~50% ;所述的疏水性嵌段聚合物與親水性嵌段聚合物的用量重量比為0.5:1~3: 1，較佳的為1:1; 所述的聚乙二醇親水嵌段A的重量百分比為IOwt %~90wt%;K述的聚乙二醇親水嵌段A為具有400至8000的數(shù)均分子量的聚乙二醇嵌段； 所述的聚酯疏水嵌段B的重量百分比為IOwt^~90Wt%;所述的聚酯疏水嵌段B為具有500~40000的數(shù)均分子量的聚酯嵌段； 所述的聚酯疏水嵌段B中的聚酯為聚DL-丙交酯、聚D-丙交酯、聚L-丙交酯、聚乙交酯、聚原酸酯、聚己內(nèi)酯、聚烷基取代己內(nèi)酯、聚δ -戊內(nèi)酯、聚酰胺酯、聚碳酸酯、聚丙烯酸酯或聚醚酯，以及上述各類聚酯中的兩種以上的聚酯所形成的共聚物。
9.如權(quán)利要求7所述的溫敏凝膠藥物制劑，其特征在于，所述的聚合物較佳的為ABA嵌段構(gòu)型的三嵌段共聚物、BAB嵌段構(gòu)型的三嵌段共聚物、BA嵌段構(gòu)型的二嵌段共聚物、A(BA)n嵌段構(gòu)型的多嵌段共聚物或B (AB) η嵌段構(gòu)型的多嵌段共聚物，其中η為2至10的整數(shù)；所述的聚合物至少一種聚合物不具有熱可逆凝膠化的性質(zhì)； 所述的疏水性嵌段聚合物較佳的為PLGA-PEG-PLGA共聚物；其中PLGA嵌段的數(shù)均分子量為1000~2000，更佳的為1571 ；PLGA嵌段中乳酸單元與羥基乙酸單元的摩爾比為I~10，更佳的為4 ;PEG嵌段的數(shù)均分子量為1400~1600，更佳的為1500 ;所述的疏水性嵌段聚合物的分子量分布系數(shù)為1.01~1.40，更佳的為1.23 ； 所述的親水性嵌段聚合物較佳的為PLGA-PEG-PLGA共聚物，其中PLGA嵌段的數(shù)均分子量為800~1600，更佳的為1255 ;PLGA嵌段中乳酸單元與羥基乙酸單元的摩爾比為I~10，更佳的為4 ；PEG嵌段的數(shù)均分子量為1000~2000，更佳的為1500 ;所述的親水性嵌段聚合物的分子量分布系數(shù)為1.01~1.50，更佳的為1.15。
10.一種如權(quán)利要求1-9任一項所述的溫敏凝膠藥物制劑的制備方法，其特征在于，其包括如下步驟:按原料配方，將各成分溶解于以溶液形式存在的溫敏凝膠組合物即可；當(dāng)所述的輔料C含有金屬鹽時，將金屬鹽與藥物在水溶液中溶解均勻混合，然后冷凍干燥，之后再與溫敏凝膠組合物均勻混合； 當(dāng)所述的輔料C含有糖類物質(zhì)時，將糖類物質(zhì)直接溶解于溫敏凝膠組合物；或者與藥物在水溶液中溶解均勻混合 ，然后冷凍干燥，之后再與溫敏凝膠組合物均勻混合。
【文檔編號】A61K38/17GK103622902SQ201210305356
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2012年8月24日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月24日
【發(fā)明者】李坤, 陳慶華, 劉曉君, 包泳初, 潘峰, 韓蕾, 房超 申請人:上?，F(xiàn)代藥物制劑工程研究中心有限公司