專利名稱：穩(wěn)定化的黑皮質(zhì)素配體的制作方法
穩(wěn)定化的黑皮質(zhì)素配體
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供具有耐降解的C-端延伸以最小化或消除心血管效應(yīng)的黑皮質(zhì)素配體，其用于治療各種病理學(xué)情況。
背景技術(shù)：
以下討論引用作者的許多出版物和出版物年。本文中提供該出版物的討論來展現(xiàn)更完整背景，且不解釋為承認(rèn)該出版物是"現(xiàn)有技術(shù)"。黑皮質(zhì)素是結(jié)合于5種知道的黑皮質(zhì)素受體(MC1R MC5R)家族的一組小肽 (Cone，R.D. , 2006, Endocr. Rev. ,27(7) :736-749)。它們源于常見的前體蛋白，促-阿片黑皮質(zhì)素(POMC)，其在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元中，及垂體腺中表達(dá)(Voisey，J et al., 2003，Curr. Drug Targets, 4 (7) :586-597)。POMC的蛋白水解切割除了幾種其他生物學(xué)重要的肽之外，產(chǎn)生α-黑皮質(zhì)素、β-黑皮質(zhì)素及Y-黑皮質(zhì)素和腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)。在5種知道的黑皮質(zhì)素受體中，MC3R和MC4R被認(rèn)為主要在哺乳動物腦中表達(dá)， MC3R在下丘腦的弓狀核中最高度表達(dá)，及MC4R在丘腦，下丘腦和海馬中表達(dá)。MClR是主要在其被發(fā)現(xiàn)的周邊表達(dá)，例如，在黑色素瘤細(xì)胞和黑色素細(xì)胞和免疫細(xì)胞中。在神經(jīng)元系統(tǒng)中，MClR僅存在于中腦的導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)的神經(jīng)元中，其中其被認(rèn)為在控制疼痛中具有作用。MC2R是主要在腎上腺皮質(zhì)中表達(dá)，其中其控制類固醇生成。MC5R主要見于外周組織諸如許多外分泌腺的分泌上皮，其中其影響分泌和營養(yǎng)控制。起初認(rèn)為黑皮質(zhì)素肽具有主要針對皮膚色素沉著控制的生理學(xué)功能。但是，在最近25年，許多額外的生物學(xué)活性歸因于黑皮質(zhì)素。是激動劑(活化物)或拮抗劑(抑制劑)的黑皮質(zhì)素肽已顯示控制許多生理學(xué)過程，包括色素沉著，飼喂，總體代謝速度/能量穩(wěn)態(tài)，內(nèi)分泌和外分泌腺分泌，發(fā)炎，通過腎的鈉排泄，疼痛感覺，成癮行為和性沖動。因此，已合成黑皮質(zhì)素類似物用于潛在調(diào)節(jié)和治療許多條件，包括重量調(diào)節(jié)(例如，肥胖癥，厭食癥和惡病質(zhì))，激素分泌，及許多外分泌腺的分泌過少(例如，Sjogren 氏綜合征)，免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙(Cone，R. D.，2006，Endocr. Rev.，27 (7) 736-749 ；Cone, R. D. ，2005， Nat. Neurosci,8(5) :571-578 ；Bazzani, C. ， et al. ，2002， Resuscitation,52 (1) 109-115 ；and Bertonlini, A. , et al. ,2009, Pharmacol. Res, 59(1) :13-47)。但是，在調(diào)控這些生理學(xué)效應(yīng)中，黑皮質(zhì)素類似物也顯示導(dǎo)致高血壓 (Gruber，et al.，1984，Hypertension,6 :468_474and Klein，et al.，1985，Life Sci. 36 769-77 。實(shí)驗(yàn)研究顯示，黑皮質(zhì)素類似物(配體)的施用增加動脈壓力和心律，且可產(chǎn)生心律失常(Gruber and Callahan, 1989，Am. J. Physiol. 257 :R681_R694 ；及未公開的數(shù)據(jù))。通過黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)=(His-Phe-Arg-Trp) (SEQ ID NO :1)達(dá)到黑皮質(zhì)素肽的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)；此藥效團(tuán)是黑皮質(zhì)素-調(diào)控的活性必需的最小集合的氨基酸(Holder， J. R. and C. Haskel-Luevano, 2004,Med. Res. Rev. ,24(3) :325-356)。一般而言，全部黑皮質(zhì)素肽共享相同的活性核心序列=His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1)，包括促黑素神經(jīng)肽和促腎上腺皮質(zhì)素。在天然存在的黑皮質(zhì)素肽中此核心序列周圍的氨基酸被認(rèn)為影響特定黑皮質(zhì)素受體的相對親和性。已合成增強(qiáng)了黑皮質(zhì)素受體的親和性的各種非-天然存在的黑皮質(zhì)素類似物。例如，Klemes et al. 1986，Biochem. Biophys. Res. Commun. , 137(2) :722-728 合成了黑皮質(zhì)素類似物(Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp)禾Π (Ac-Nle-Asp-His-Phe-Arg Trp) (SEQ ID NO :2)。這些修飾的類似物顯示增加的促黑素活性潛力。已鑒定幾種其他黑皮質(zhì)素類似物。 已合成的，具有增加的潛力的黑皮質(zhì)素類似物的進(jìn)一步例包括(Ac-Nle-環(huán)-Asp-His-Phe-Arg-Trp-Lys)禾口 (Ac-Nle-環(huán)一Asp-His-D—Phe—Arg-Trp-Lys) (al—Obeidi et al. , 1989, J. Med. Chem,32(12) :2555-2561) ； (Ac-Nle-環(huán)-Asp-His-D-Nal2 ' -Arg-Trp-Lys)禾Π (Ac -i^-Cys-Glu-His-D-Na12' -Arg-Trp-Gly-Cys-Pro-Pro-Lys-Asp)(Balse-Srinivasan et al.，2003，J. Med. Chem.，46 (17) :3728-3733) ； (Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-D-Trp-Gly) (al-Obeidi et al.，1989，Pept. Res.，2(1) :140-146)；及(His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pr o-Val) (SEQID NO :3)，(Masman et al.，2008，Bioorg. Med. Chem.，16(8) :4347-58)。但是，由于它們的強(qiáng)心血管副作用(Greenfieldet al.，2009，N. Eng. J. Med. 360 44-52 ；Gupta,2007, Reuters Aug.30,2007 ；Mishra，2007，Reuters Sept. 10,2007 ； Nordheim et al. ,2006, Peptides 27 :438-443)，至今合成的黑皮質(zhì)素類似物尚未導(dǎo)致用于治療許多黑皮質(zhì)素-相關(guān)的病情之任何的政府調(diào)控機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的治療性藥物。黑皮質(zhì)素類似物的臨床無法接受的心血管效應(yīng)由位于第1藥效團(tuán)之內(nèi)的第2藥效團(tuán)(Arg-Trp)
帛。(Klein et al. , 1985, Life Sci. ,36 :769-775 ；Gruberand Callahan, 1989, Am. J. Physiol.，257 :R681_694)。此第2藥效團(tuán)被認(rèn)為與RFamide受體家族的亞組相互作用，導(dǎo)致中樞交感神經(jīng)激動的升高及心血管效應(yīng)的起始。在或接近許多合成黑皮質(zhì)素配體的C-端的Arg-芳族二 -肽序列的一般化的基序是RFamide類的藥效團(tuán)的更包括性的描述(Gruber and Callahan, Am. J. Physiol. , 1989, 257 :R681-694 ；Klein et al.，1985， Life Sci. 36 :769-775 ；Clements et al.,2001, Biochem.Biophys. Res. Commun. , 284 1189-1193)。盡管長期相信黑皮質(zhì)素心血管效應(yīng)不可從非-高血壓，及潛在地治療性，生理學(xué)效應(yīng)分離，Gruber 和 Callahan 顯示這不正確(Gruber 和 Callahan 1989，Am. J. Physiol.， 257 :R681-694)。黑皮質(zhì)素類似物的肽C-端延伸可最小化急性心血管活性，而保存黑皮質(zhì)素效應(yīng)。有效地，額外的C-端氨基酸通過在肽的分子結(jié)構(gòu)之內(nèi)更深運(yùn)動暫時(shí)“隱藏”心血管/RFamide-樣藥效團(tuán)(Arg-Trp)。此不影響黑皮質(zhì)素活性地急性地抑制心血管效應(yīng)。雖然如此，在體外測定中已顯示了最小化的心血管活性的黑皮質(zhì)素類似物上的許多C-端延伸已顯示體內(nèi)降解。具有C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物可起初僅賦予期望效果， 但一旦降解發(fā)生，(Arg-Trp)RFamide藥效團(tuán)暴露，賦予關(guān)聯(lián)的心血管效應(yīng)。發(fā)明概述由于黑皮質(zhì)素藥物會潛在地用于處理慢性病情，它們不必需在延長的施用期間產(chǎn)生潛在地危險(xiǎn)的副作用。由此，慢性施用期間的黑皮質(zhì)素配體心血管效應(yīng)的阻遏對于臨床安全的黑皮質(zhì)素藥物重要。此需要自其治療性黑皮質(zhì)素效應(yīng)的黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)的RFamide 心血管作用的延長的體內(nèi)分離。此會允許黑皮質(zhì)素類似物用作用于各種病理學(xué)情況的治療，伴隨心血管病理學(xué)的最小風(fēng)險(xiǎn)。在本發(fā)明的第1方面，提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物，有效產(chǎn)生自RFamide心血管活性的黑皮質(zhì)素的慢性分離。在本發(fā)明的第2方面，提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的 C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物，其選自至少1種氨基酸，至少1種修飾的氨基酸，肽模擬物，及其組合。在本發(fā)明的第3方面，提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的 C-端延伸和耐降解的N-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物。發(fā)明詳述提供組合物，其包含非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸， 以抑制RFamide/心血管藥效團(tuán)的暴露和效應(yīng)，及任選地偶聯(lián)于N-端延伸，以防止黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)的N C-端(S卩，從左至右)酶促降解。耐降解的C-端延伸是至少1種氨基酸，至少1種修飾的氨基酸，肽模擬物(非-氨基酸小分子)，或其組合。耐降解的C-端延伸選擇為當(dāng)急性地或慢性地施用于人或哺乳動物時(shí)抵抗在生理?xiàng)l件下降解，由此允許黑皮質(zhì)素類似物維持至少一種黑皮質(zhì)素生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)而呈現(xiàn)最小化的或消除的心血管效應(yīng)的C-端延伸。術(shù)語黑皮質(zhì)素類似物至少指黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)。黑皮質(zhì)素類似物是在生理?xiàng)l件下結(jié)合黑皮質(zhì)素受體的分子。黑皮質(zhì)素類似物包括非-天然存在的黑皮質(zhì)素多肽及黑皮質(zhì)素全長蛋白或多肽的截短的和/或修飾的形式。例如，在由Ml個(gè)氨基酸組成的"亞-肽"的蛋白水解切割之前的全長POMC蛋白。POMC的組織-特異性蛋白水解切割產(chǎn)生跨13個(gè)氨基酸 76 個(gè)氨基酸的尺寸的肽(Bicknell 和 Lawry, 2000, Encyclopediaof Stress, vol. 3，257-265， Academic Press) 0本文討論的增加了黑皮質(zhì)素受體活性的合成的，非-天然存在的黑皮質(zhì)素類似物是約7 12個(gè)氨基酸的尺寸。黑皮質(zhì)素類似物呈現(xiàn)與黑皮質(zhì)素受體的結(jié)合官能性。結(jié)合是活化(激動劑)或抑制性(拮抗劑)的。除了肽之外，黑皮質(zhì)素類似物包括黑皮質(zhì)素的小分子類似物或其部分，其包括有機(jī)或無機(jī)化合物，或肽和小分子-即，肽模擬物的組合。黑皮質(zhì)素類似物可與黑皮質(zhì)素蛋白結(jié)構(gòu)上類似和/或在它們結(jié)合黑皮質(zhì)素受體的能力上功能性地類似。而且，黑皮質(zhì)素類似物通常含有藥效團(tuán)=His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1)或其修飾的形式，或其結(jié)構(gòu)或功能肽模擬物。肽模擬物是模擬肽(氨基酸鏈)或1個(gè)氨基酸殘基的非-氨基酸分子。藥效團(tuán)是達(dá)到生理學(xué)效應(yīng)必需的氨基酸殘基的最小集合；或是結(jié)合和活化受體需要的氨基酸殘基的(對于受體)結(jié)構(gòu)模擬物的小分子。His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1)和它們的類似物是用于調(diào)控的生理學(xué)效應(yīng)的黑皮質(zhì)素的藥效團(tuán)。因此，非-天然存在的黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)類似物可為設(shè)計(jì)為模擬黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)核心序列肽的外觀或功能(包括受體活性的活化或滅活)的小肽或有機(jī)分子。心血管效應(yīng)包括高血壓的醫(yī)學(xué)定義，即高血壓的醫(yī)學(xué)定義(至少120/80mm Hg以上，及尤其如果140/90mm Hg(心臟收縮/心臟舒張)以上)，對血管系統(tǒng)，腎和心臟，及其他關(guān)聯(lián)的效應(yīng)的病理學(xué)效應(yīng)。相反，低血壓是當(dāng)血壓下落到醫(yī)學(xué)上接受的標(biāo)準(zhǔn)以下時(shí)。心律失常暗示在動脈壓力的脈動壓力波的正常對稱呈現(xiàn)中的改變。此可為增加的每分鐘心跳
6(心動過速)或降低的每分鐘心跳(心動過緩)。其也可暗示在心電圖的正常波圖案中的改變。實(shí)質(zhì)性降解指稱可相比無C-端延伸的黑皮質(zhì)素配體或黑皮質(zhì)素類似物，本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的黑皮質(zhì)素類似物的C-端延伸，N-端延伸，或其他區(qū)通過生理學(xué)酶和其他因素，以該方式或RFamide藥效團(tuán)通過RFamide受體或其他生理學(xué)系統(tǒng)再次能起始心血管效應(yīng)的程度的降解。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的方面，具有抵抗實(shí)質(zhì)性降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物是相比缺乏C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物，無大于50%，優(yōu)選無大于25%，及更優(yōu)選小于10%的施用的配體可重建心血管效應(yīng)的黑皮質(zhì)素類似物。藥物組合物包括本發(fā)明的配體，或其藥學(xué)可接受的鹽，及藥學(xué)可接受的載體。載體可為液體制劑，例如，緩沖的，等滲性水溶液。藥學(xué)可接受的載體也可包括賦形劑，諸如稀釋劑，載體等，及添加劑，諸如穩(wěn)定化劑，防腐劑，溶解劑，緩沖劑等。藥學(xué)可接受的鹽指稱自藥學(xué)可接受的非-毒性堿或酸，包括無機(jī)和有機(jī)酸和堿制備的鹽。源于無機(jī)堿的鹽包括鋁，銨，鈣，銅，鐵，亞鐵，鋰，鎂，錳，二價(jià)錳，鉀，鈉，鋅鹽和類似鹽。特別優(yōu)選的是銨，鈣，鋰，鎂，鉀和鈉鹽。源于藥學(xué)可接受的有機(jī)，非-毒性堿的鹽包括伯，仲和叔胺，取代的胺，包括天然存在的取代的胺，環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂，諸如精氨酸，甜菜堿，咖啡因，膽堿，N, N' - 二芐乙烯二胺，二乙基胺，2- 二乙基氨基乙醇，2- 二甲基氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基-嗎啉，N-乙基哌啶，葡萄糖胺，葡萄糖胺，組氨酸，海巴明，異丙基胺，賴氨酸，甲基葡萄糖胺，嗎啉，哌嗪，哌啶，聚胺樹脂，普魯卡因，嘌呤，可可堿， 三乙基胺，三甲胺，三丙基胺，緩血酸胺和類似堿性離子交換樹脂的鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物是堿性時(shí)，鹽可從藥學(xué)可接受的非-毒性酸，包括無機(jī)和有機(jī)酸制備。該酸包括乙酸，苯磺酸，苯甲酸，樟腦磺酸，檸檬酸，乙磺酸，甲酸，富馬酸，葡萄糖酸，谷氨酸，氫溴酸，鹽酸，羥乙磺酸，乳酸，馬來酸，蘋果酸，扁桃酸，甲基磺酸，丙二酸，粘酸，硝酸，雙羥萘酸，泛酸，磷酸，丙酸，琥珀酸，硫酸，酒石酸，P"甲苯磺酸，三氟乙酸和類似酸。特別優(yōu)選的是檸檬酸，富馬酸，氫溴酸，鹽酸，馬來酸，磷酸，硫酸和酒石酸。需知，如本文所用，式I和式II的化合物意指也包括這些化合物的藥學(xué)可接受的鹽，諸如鹽酸鹽，等?；衔锪兄械目s寫具有它們的常規(guī)含義。由此，“Nle"是正亮氨酸；“Nal" 是正丙氨酸；‘‘D-Nal"是D-正丙氨酸；‘‘Asp"是天冬氨酸；‘‘His"是組氨酸；“D-Phe"是D-苯丙氨酸；“Arg"是精氨酸；“Trp"是色氨酸；“Lys"是賴氨酸；“Gly"是甘氨酸；“Pro"是脯氨酸；“Tyr"是酪氨酸；“Ser"是絲氨酸；“Cys” 是半胱氨酸；"Val"是纈氨酸；"D/L-Thr"是D-蘇氨酸或L-蘇氨酸；"D/L-Pro"是 D-脯氨酸或L-脯氨酸。此外，“Ac"是N-乙酰和"環(huán)"指稱環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其在文獻(xiàn)中也顯示為"c"或指稱為"內(nèi)酰胺"。額外的縮寫定義如下Nal(2' ) = D_2 ‘-奈基丙氨酸；tBu =叔-丁基； Hyp(Bzl)=芐基-L-羥基-脯氨酸；Mamb = 3-氨基甲基-苯甲酸；戊二酸接頭= CO- (CH2) 3-C0 ；Pen = L-青霉胺；Aib = 2-氨基異丁酸；Tie = 1,2,3,4-四氫異喹啉 _3_ 羧酸；Aba = 4-氨基-1，2. 4，5-四-氫-2-苯并氮草-3-酮；Pip =哌啶_2_羧酸；Nip =哌啶-3-羧酸；Tic =四氫喹啉-3-羧酸；Bip =聯(lián)苯胺；Phg = α -苯基-甘氨酸；Sar =肌氨酸;Azt = 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷；Oic =八氫吲哚-2-羧酸。
黑皮質(zhì)素類似物在一實(shí)施方式中，非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體如式I所示，及包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸和任選的N-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-X1-X2-X3 ( ζ I)其中Y1-Y2-Y3代表任選的穩(wěn)定化N-端殘基或氨基酸殘基模擬物；R1 R7代表黑皮質(zhì)素類似物的殘基；及X1-X2-X3代表耐降解的C-端殘基或氨基酸殘基模擬物?？傊琑1 R7 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7)可為許多知道的黑皮質(zhì)素類似物之一，其中各 7個(gè)殘基是獨(dú)立地氨基酸或肽模擬物。一些黑皮質(zhì)素類似物具有小于7個(gè)殘基。在另一實(shí)施方式中，R1 R7，共同，代表α黑皮質(zhì)素類似物。在另一實(shí)施方式中，R1 R7，共同，代表結(jié)合作為激動劑或拮抗劑的MC3-MC5受體的黑皮質(zhì)素類似物。在一實(shí)施方式中，黑皮質(zhì)素配體由以上式I所示，且殘基R1 R7，共同，代表黑皮質(zhì)素類似物，其中R1缺失或選自半胱氨酸，正亮氨酸，乙?；恼涟彼?，乙?；陌腚装彼?，D-苯丙氨酸，甲基化的D-苯丙氨酸，琥珀酸，ο-酞酸，酪氨酸，天冬氨酸，戊二酸，CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?；?，及η-己?；籖2缺失或選自脯氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，甘氨酸，半胱氨酸，正亮氨酸，精氨酸， 琥珀酸，戊二酸，CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?；唉?己?；?；R3選自組氨酸，在第1或3位甲基化的組氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸， D-Nal (2 ‘ ),L-Nal(2')，琥珀酸，tButGly，Hyp φζ )，Mamb，Oic，正亮氨酸，Aba，β _ 丙氨酸和Tie ；R4選自組氨酸，D-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸，D-Nal (2' )，pCl-D-Phe和(o-Phe) Phe ；R5選自精氨酸，高精氨酸，鳥氨酸，丙氨酸，脯氨酸，Pip, Nip, Tic, Phg, Sar和 Azt ；R6 選自D-色氨酸，L-色氨酸，D-Nal (2 ‘ )，L_Nal(2' )，Tic 和 Bip ；R7缺失或選自甘氨酸，谷氨酸，半胱氨酸，賴氨酸和2，3-二氨基-丙酸；其中如果R3 是 Aba,則 R4 選自=D-Phe, D-Nal (2')和 pCl-D-Phe ；以及其中如果R2是η-戊酰基或η-己?；?，則R1，Y1，Y2和Y3缺失。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體如式II所示Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9-X1-X2-X3 (式 11)。總之，R1 R9 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9)可為許多知道的黑皮質(zhì)素類似物之一， 其中各9個(gè)殘基是氨基酸或肽模擬物。一些黑皮質(zhì)素類似物具有小于9個(gè)殘基。在另一實(shí)施方式中，R1 R9，共同，代表Y黑皮質(zhì)素類似物。在另一實(shí)施方式中，R1 R9，共同，代表結(jié)合作為拮抗劑的MC3受體的黑皮質(zhì)素類似物。在一實(shí)施方式中，黑皮質(zhì)素配體如以上式II所示，及殘基R1 R9，共同，代表黑皮質(zhì)素類似物，其中R1是酪氨酸；R2是纈氨酸；R3選自甲硫氨酸，正亮氨酸，半胱氨酸和L-青霉胺；
R4選自甘氨酸，D-半胱氨酸，L-半胱氨酸，天冬氨酸，及正亮氨酸；R5選自組氨酸，正亮氨酸，脯氨酸和Aib ；R6 選自苯丙氨酸，D-Nal (2‘)和 L_Nal(2')；R7是精氨酸；R8選自色氨酸和D-Nal (2')；以及R9缺失或選自天冬氨酸，半胱氨酸，青霉胺和賴氨酸。在另一實(shí)施方式中，提供如式I或式II所示的黑皮質(zhì)素配體，其中至少1個(gè)D-苯丙氨酸殘基，或全部D-苯丙氨酸殘基被鹵化(例如，氟或氯)，以賦予與其對應(yīng)MC受體的改善的黑皮質(zhì)素蛋白-配體相互作用(Ippolito，J. A and D. W. Christianson，1992，Int. J. Biol.Macromol,14(4) :193-197)C-端延伸向式I的R1 R7黑皮質(zhì)素類似物，或向式II的R1 R9 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9) 黑皮質(zhì)素類似物，提供C-端延伸，以便賦予C-端延伸的降解-抗性，以防止RFamide序列
的暴露。在一實(shí)施方式中，C-端延伸由式I的X1-X2-X3表示，其中X1選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；X2缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；以及X3缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)。在另一實(shí)施方式中，C-端延伸由式II的X1-X2-X3表示，其中X1選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；X2缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；以及X3缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)。在一實(shí)施方式中，C-端延伸具有慢性地抑制由羧基肽酶的降解的構(gòu)象。慢性地抑制降解的 C-端延伸的例包括 D-Pro-D-Pro, D-Thr-D-Pro, D-Thr-D-Pro-D-Thr 的二 -及三月太，如描述于 Tugyi et al. , 2005, Proc. Nat. Acad. Sci. (USA), 102 (2) :413_418。在另一實(shí)施方式中，脯氨酸模擬物(哌嗪-2-酮環(huán))取代D-Pro。在一種方法中， 脯氨酸模擬物如 Teixido, M.，et al.，2007，Brain Res. Bull. ,73(1-3) :103-107 所述合成。哌嗪-2-酮環(huán)也討論于 Bhatt，U. andjust, G.，2000，Helvetica Chimica Acta, 83 722-727。對于脯氨酸用哌嗪-2-酮環(huán)的取代而言，在2個(gè)相鄰α-氨基的氮分子之間的乙烯橋合并。此產(chǎn)生含有2個(gè)氮和4個(gè)碳原子的6-元環(huán)，是類似于2個(gè)相鄰氨基酸殘基官能團(tuán)之間的脯氨酸環(huán)(盡管6-元)的結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)，黑皮質(zhì)素類似物的C-端延伸在配體自人或動物身體內(nèi)的血流清除之前耐受實(shí)質(zhì)性降解。在一實(shí)施方式中，C-端延伸足夠穩(wěn)定，使得當(dāng)施用于人或動物時(shí)，黑皮質(zhì)素配體不導(dǎo)致心血管效應(yīng)，或最小化了心血管效應(yīng)。由于肽，氨基酸和小分子的穩(wěn)定性廣泛改變，本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體在細(xì)胞外生理學(xué)環(huán)境中具有可變的長度C-端延伸。C-端延伸足夠穩(wěn)定(例如，長度，立體結(jié)構(gòu))使得在其自血流清除之前身體內(nèi)的任何降解不會再暴露心血管藥效團(tuán)，以達(dá)到其效應(yīng)。
9
N-端延伸在本發(fā)明的一實(shí)施方式中，N-端延伸偶聯(lián)于黑皮質(zhì)素類似物。N-端延伸如式I中的Y1-Y2-Y3表示，其中Y1缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸和L-脯氨酸；Y2缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；以及Y3缺失或選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)。在另一實(shí)施方式中，N-端延伸如式II中的Y1-Y2-Y3表示，其中Y1缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸和L-脯氨酸；Y2缺失或選自D_蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪_2_酮環(huán)；以及Y3缺失或選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)。式I的黑皮質(zhì)素配體的環(huán)化環(huán)化的黑皮質(zhì)素類似物顯示了改善的功效和穩(wěn)定性(Balse-Srinivasan et al. , 2003, J. Med. Chem. , 46 (17) :3728-3733 andBednarek et al. ,2001, Biochem. Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641-645 ；Kavarana, et al. , 2002, J. Med. Chem. ,45(12) 沈44-2650)。在一實(shí)施方式中，將如式I所示的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化。以下顯示如何可將如式I所示的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化的例的非限制性列表當(dāng)R1或R2是半胱氨酸和R7或X1是半胱氨酸時(shí)，R1或R2和R7或X1之間的二硫鍵如描述于 Balse-Srinivasan et al. , 2003, J. Med. Chem. , 46 (23) :4965_4973。當(dāng) X1 是半胱氨酸時(shí)，X2不缺失，但選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)。當(dāng)R1是正亮氨酸和R7是谷氨酸時(shí)，R1和R7之間的內(nèi)酰胺橋如描述于Mayorov et al.,2006, J. Med. Chem. ,49 :1946-1952, andBednarek et al. ，2001， Biochem Biophys. Res.Commun. ,286(3) :641_645。當(dāng)R2是谷氨酸或天冬氨酸和R7是賴氨酸時(shí)，R2和R7之間的側(cè)鏈內(nèi)酰胺橋如描述于 Bednarek et al. ,2001Biochem Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641_645。當(dāng)R1是琥珀酸或ο-酞酸和R7是賴氨酸時(shí)，R1和R7之間的內(nèi)酰胺閉合如描述于 Bednarek et al. ,2001, Biochem Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641-645 禾口 Kavarana,et al.，2002，J. Med. Chem.，45 (12) :2644_2650。當(dāng)R2或R3是琥珀酸和R7是2，3_ 二氨基-丙酸時(shí)，R2或R3和R7之間的內(nèi)酰胺閉合如描述于 Bednarek et al.，2001，Biochem Biophys. Res. Commun. , 286 (3) :641_645。通過目的線性肽的N和/或C末端之間的共價(jià)鍵形成來形成“主鏈”環(huán)化的肽。此一例描述于經(jīng)由烷基和酰胺組成的橋的2個(gè)酰胺氮的鍵合，如描述于Hess et al. ,2007, J. Med. Chem. ,50 :6201-6211。氨基酸-異構(gòu)體和非-標(biāo)準(zhǔn)氨基酸在一實(shí)施方式中，用于本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體的本文提供的氨基酸殘基，可為D-或L-氨基酸或可用它們的非-標(biāo)準(zhǔn)物，異構(gòu)對應(yīng)物取代。例如，α氨基酸可用β氨基酸取代，及L氨基酸可用D氨基酸取代。本文公開的氨基酸不指定為D-或 L-異構(gòu)體，可為任何異構(gòu)體。式II的黑皮質(zhì)素配體的環(huán)化在另一實(shí)施方式中，將如式II所示的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化。當(dāng)R4 是天冬氨酸和R9是賴氨酸時(shí)，可將如式II所示黑皮質(zhì)素類似物通過R4和R9之間的內(nèi)酰胺側(cè)鏈環(huán)化，如描述于(Bednarek etal. ,2001, Biochem Biophys. Res. Commun.，286 (3) 641-645 和 Mayorov et al.，2006，J. Med. Chem.，49 1946-1952)。用于MC受體結(jié)合的黑皮質(zhì)素配體在一實(shí)施方式中，本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是α黑色素細(xì)胞-刺激激素(MSH)基團(tuán)的MC4受體激動劑，MC4受體拮抗劑，MC3受體激動劑，MC3受體拮抗劑，和/或 MC5激動劑。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是Y黑色素細(xì)胞-刺激激素基團(tuán)的MC3拮抗劑。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是Y黑色素細(xì)胞-刺激激素基團(tuán)的MC3激動劑。肽的合成和延伸一般而言，公開的黑皮質(zhì)素配體通過例如固相合成來合成，及根據(jù)本領(lǐng)域知道的方法純化。將利用各種樹脂和試劑的許多熟知的方法用于制備本發(fā)明的化合物。有機(jī)分子根據(jù)本領(lǐng)域知道的方法類似地合成。本發(fā)明的配體可為任何藥學(xué)可接受的鹽形式。本發(fā)明的配體的酸加成鹽在適合的溶劑中自分子和過量的酸，諸如鹽酸，氫溴酸，硫酸，磷酸，乙酸，三氟乙酸，馬來酸，琥珀酸或甲基磺制備。其中配體包括酸性部分，適合的藥學(xué)可接受的鹽可包括堿金屬鹽，諸如鈉或鉀鹽，或堿土金屬鹽，諸如鈣或鎂鹽。在一實(shí)施方式中，肽通過固相方法通過使用游離C-端肽的P-芐氧基-苯甲醇樹脂用手動合成制備。全部氨基酸作為9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)-衍生物偶聯(lián)，如描述于 Fields et al. , 1992, Synthetic Peptides :A User' s Guide, W. H. Freeman and Company, New York,77-183 ；及 Fields and Noble,1990, Int. J. Peptide Protein Res., 35 :161-214 ；Fieldset al. , 1991, Peptide Res. 4 :95-101。簡言之，叔-丁基在 N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中應(yīng)用為用于1-羥基苯并三唑/N，N' 二異丙基碳二亞胺原位活性酯方法的保護(hù)基。分別通過DMF中的20%哌啶，或DMF中的2%哌啶和2%二氮雜二環(huán)[5. 4. 0] 十一碳-7-烯除去Fmoc基。通過茚三酮測試和/或靛紅測定監(jiān)控偶聯(lián)及脫保護(hù)的成功。合成完成之后，將肽用含有5%水的三氟乙酸自樹脂切割。通過RP-HPLC在Supelcosil C18 柱上通過使用梯度洗脫用下列洗脫液進(jìn)行粗產(chǎn)物純化A，水中的0. 三氟乙酸；及B，乙腈/水(80 20, vol/vol)中的0.1%三氟乙酸。用5%洗脫液B等度洗脫5min之后，經(jīng) 25分鐘于室溫及用4mL/min的流速產(chǎn)生O 25%B或5 30%B的線性梯度。以λ = 214nm 進(jìn)行 UV 檢測。通過分析 RP-HPLC 在 Synergi (4. 6mm X 25cm，MAX-RP 8θΑ,4 μ m)柱上進(jìn)行肽純度研究。以下參考文獻(xiàn)公開合成本發(fā)明中具體化的殘基和連接的方法。對于哌嗪-2-酮 if-BBhatt, U and Just, G,2000, Helvetica ChimicaActa, 83 :722-727 ；Mohamed, N.，et al.,1998,Tetrahedron Lett. ,39 :8213-8216 ；Teixido，M.，et al. ,2007,Brain Res. Bull.，73 (1-3) : 103-107。對于 Nal (2')-見 Kavarana，MJ et al.，2000，J. Med. Chem.， 45 :2644-22650 ；and Holder, J. R.，et al.，2002，J.Med. Chem. ,45 :5736_5744。對于 Aba-D-Phe, Aba-pCL-D-Phe 和 Aba-D-Nal (2 ‘)的二肽模擬物-見 Ballet, S.，et al.， Bioorganic&Med. Chem. Lett.，2007，17 :2492_2498。對于 OIC，BIP 和 PIP-見 Bednarek， Μ. Α.，et al.，2007，J. Med Chem, 50 :2520_2526。對于戊二酸接頭-見 Mayorov，Α. V. et al. ,,2008, J. Med. Chem. 51 :187_195。對于 Hyp (Bzl)，t_ 丁基甘氨酸和 MAMB-見 Grieco， P.，et al. ,2007, Peptides 28:1191—1196。對于 Azt，Pip, Nip, Tic, Oic-見 Bednarek, Μ. Α. ,2007, Chem. Biol. DrugDesign，69 :350-355。對于內(nèi)酰胺環(huán)化-見 Mayorov，Α. V,. et al. ，2006，J. Med. Chem. 49 :1946_1952。對于 Pen 和 Aib-見 Balse-Srinivasan. P. ，et al.，2003 J. Med. Chem, 46 :4965-4973。對于 η-戊酰基和 η-己?；?見 Cheung A. W. -H.， et al.，2003，Bio-organic&Med. Chem. Lett. , 13 1307-1311。ORN (鳥氨酸)禾口 homoArg-見 Holder, J. R. et al.，2003，Peptides, 24 :73_82。對于 Phg-見 Holder, J. R. et al.，2002， J. Med. Chem.，45，3073-3081。對于 2，3 二氨基丙酸-見 2004，Vig, B. S.，et al.，J. Med. Chem. ,47(2) :446-455。使用本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體檢定心血管效應(yīng)有許多直接和間接檢定本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的降解和心血管效應(yīng)的本領(lǐng)域技術(shù)人員會知道，顯而易見或可利用的可能的方法。使用本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體檢定急性和慢性心血管測試，以便測定是否本文所述的C-端延伸可保護(hù)RF-藥效團(tuán)免于暴露。以此方式，間接，但以治療可應(yīng)用的方式測量 C-端降解抗性。此外，用急性和慢性心血管測量，將黑皮質(zhì)素配體導(dǎo)入/施用到人或哺乳動物后，及直到黑皮質(zhì)素配體自人或哺乳動物身體血流清除，則知道心血管效應(yīng)。急性心血管記錄允許經(jīng)數(shù)小時(shí)時(shí)期的這些藥物作用的連續(xù)分析，允許配體施用后效應(yīng)的密集觀察。 急性心血管測試的心血管參數(shù)包括直接動脈壓力組分(心臟收縮，心臟舒張，平均動脈壓力，及心律)和EKG。經(jīng)Millar固體狀態(tài)壓力變換器在股動脈中測量動脈壓力組分。此允許任何動脈壓力/心律異常的更精確的評估。自Millar變換器的信號在跨音速動脈壓力模塊中放大，然后發(fā)送到計(jì)算機(jī)運(yùn)行EMKA軟件(EMKA Technologies, Inc. ,Falls Church, VA)。一般逐秒測量動脈壓力組分信號，盡管毫秒或逐搏分析是替代性的測量。后來的分析可回顧地進(jìn)行，經(jīng)實(shí)驗(yàn)回放。起初，待分析的動脈壓力組分包括峰MAP (平均動脈壓力)和 HR(心律)應(yīng)答，及各相應(yīng)曲線下面積。因?yàn)楸┞读?RF藥效團(tuán)的黑皮質(zhì)素類似物產(chǎn)生延長及可變壓力和心動加速作用，計(jì)算各曲線下面積(AUC)(見，例如，D' Angelo et al. ,2005, Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , 288 (4) :Η18^_Η18;35)，如是描述各心血管參數(shù)曲線的方程的第1和第2導(dǎo)數(shù)。對于慢性心血管測試，遙測系統(tǒng)允許經(jīng)長時(shí)間(數(shù)天或周)監(jiān)控多動物。各動物僅記錄數(shù)秒(例如，5 IOs)/分鐘，以最大化電池生命及允許監(jiān)控多動物。但是，現(xiàn)在較新模型允許無線再充電移植的發(fā)射機(jī)。以下描述了用于慢性心血管測試的一種遙測模型。遙測系統(tǒng)可用于用直接輸入到運(yùn)行EMKA eCgAut0-Cardi02+的計(jì)算機(jī)同時(shí)和連續(xù)監(jiān)控。在此方法中，使用無菌過程將遙測發(fā)射機(jī)手術(shù)移植到大鼠腹腔。手術(shù)期間，將發(fā)射機(jī)的導(dǎo)管插入腹部主動脈及用組織粘合劑緊固。將遙測單元ECG電極皮下縫合到右上胸肌肉和左上部腹部壁肌肉。這些單元同時(shí)提供ECG和動脈壓力信號。動物一般允許7 10天的手術(shù)恢復(fù)，使用動脈壓力和HR的晝夜節(jié)律的返回作為目的度量。對于急性實(shí)驗(yàn)，將股IV 線隧通到上背部，取出及存儲在鋼鈕組件之內(nèi)，縫合到動物的背部。發(fā)射機(jī)會使用鉛II構(gòu)型產(chǎn)生動脈壓力信號(經(jīng)插導(dǎo)管的腹部主動脈)和ECG信號。對此，將鉛移植在胸的右上部象限的肌肉組織下，及左上部腹部區(qū)的肌肉組織之內(nèi)。這些過程良好描述于文獻(xiàn)(Stieber 等人，2006，Mol. Pharmacol.，69 (4) 1328-37)，以及制造商的流程。對于黑皮質(zhì)素配體慢性施用到大鼠模型，使用用于IV輸注的Alza微型泵及持續(xù)的釋放顆粒(Strader, A. D.，et al.，2007，J. Pharmacol. Exp. Ther. ,322(3) :1153-1161 ； and Innovative Research of America，SarasotEi，F(xiàn)L) 。 H明的女臺效每天劑量是lmg/kg/天持續(xù)14天，及滴定達(dá)10mg/kg/天。作為在微型泵中藥物降解的對照，運(yùn)行并行溫育的(37°C )對照及通過高效液相層析(HPLC)評定任何肽破斷。施用方法包括注射，口腔，鼻和粘膜施用。如果通過注射施用，注射可為靜脈內(nèi)，皮下，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)或其他本領(lǐng)域知道的手段。本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體可通過任何本領(lǐng)域知道的手段配制，包括但不限制于作為片劑，膠囊，小膠囊，懸浮液，粉劑，凍干制劑，栓劑，目鏡滴，皮膚貼劑，口腔可溶性制劑，噴霧劑，氣霧劑等的制劑，及可與緩沖劑，結(jié)合劑，賦形劑， 穩(wěn)定劑，抗氧化劑和本領(lǐng)域知道的其他劑混合及配制。鼻施用包括本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的任何形式的鼻內(nèi)施用。本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體可在水溶液，諸如包括鹽水，檸檬酸鹽或其他常見的賦形劑或防腐劑的溶液中。黑皮質(zhì)素配體也可為干，粉或凍干制劑。當(dāng)用本發(fā)明的不同黑皮質(zhì)素配體施用時(shí)，減少的心血管效應(yīng)(血壓和心律失常) 在人或動物中相對。當(dāng)比較本發(fā)明的具有C-端延伸的黑皮質(zhì)素配體對比其無C-端延伸的對應(yīng)物之間時(shí)，其相對減少。包含本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的藥物組合物和/或試劑盒用于調(diào)控及治療跨重量調(diào)節(jié)(例如，肥胖癥，厭食癥和惡病質(zhì))，激素分泌，外分泌腺分泌過多，免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙的許多病情。應(yīng)用跨激素，神經(jīng)元，酶促和其他細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)機(jī)理的本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)還影響身體情況諸如重量調(diào)節(jié)(例如，肥胖癥，厭食癥和惡病質(zhì))，激素分泌 (例如，干眼和/或干口綜合征)，以及免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙。許多這些生理學(xué)機(jī)理的功能障礙導(dǎo)致疾病。在本申請中，生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)可區(qū)分及不同于心血管效應(yīng)。在一實(shí)施方式中，本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)致使使用激動劑黑皮質(zhì)素類似物(al-0beidi et al. ,J. Med Chem，1989，32 (12)，2555-2561)。在另一實(shí)施方式中，生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)致使使用拮抗劑黑皮質(zhì)素類似物(Hruby et al. , 1995, J.Med. Chem., 38 :3454-3461 Jayawickreme et al.，1994，J.Biol. Chem.，269 :29846-29854)?？傊峁┓?天然存在的黑皮質(zhì)素配體，包括偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸(及任選地，N-端延伸)，以產(chǎn)生具有減小的或消除的心血管活性而保留期望的黑皮質(zhì)素調(diào)控活性的穩(wěn)定的黑皮質(zhì)素配體的黑皮質(zhì)素類似物。將本申請引用的全部參考文獻(xiàn)，特別是針對合成方法的全部參考文獻(xiàn)如在本文明確地引用地整體并入本文。
權(quán)利要求
1.非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物。
2.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中耐降解的C-端延伸選自至少1 種氨基酸，至少1種修飾的氨基酸，肽模擬物，及其組合。
3.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中耐降解的C-端延伸選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮-環(huán)。
4.權(quán)利要求3的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其還包含N-端延伸。
5.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其如式I所示 Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-X1-X2-X3 (式 I)其中各R1 R7獨(dú)立地是氨基酸或肽模擬物；Y1缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸和L-脯氨酸；Y2缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)；Y3缺失或選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)；X1選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸和L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)； X2缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)；以及 X3缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)。
6.權(quán)利要求5的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中R1缺失或選自半胱氨酸，正亮氨酸，乙?；恼涟彼幔阴；陌腚装彼?，D-苯丙氨酸，乙?；腄-苯丙氨酸，琥珀酸，ο-酞酸，酪氨酸，天冬氨酸，戊二酸，CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?；?，及η-己?；?；R2缺失或選自脯氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，甘氨酸，半胱氨酸，正亮氨酸，精氨酸，琥珀酸，戊二酸，CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?；?，及η-己酰基；R3選自組氨酸，在第1或3位甲基化的組氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，D-Nal (2‘)， L-Nal (2 ‘)，琥珀酸，丨8肚617，辦？(俶1)，1&111113，0化，正亮氨酸，八匕3，β-丙氨酸，及Tic; R4選自組氨酸，D-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸，D-Nal (2' )，pCl-D-Phe和(O-Phe)Phe ； R5選自精氨酸，高精氨酸，鳥氨酸，丙氨酸，脯氨酸，Pip, Nip, Tic, Phg, Sar和Azt ； R6 選自D-色氨酸，L-色氨酸，D-Nal (2 ‘ ), L-Nal(2' )，Tic 和 Bip ； R7缺失或選自甘氨酸，谷氨酸，半胱氨酸，賴氨酸和2，3- 二氨基-丙酸； 其中如果 R3 是 Aba，則 R4 選自=D-Phe, D-Nal (2 ‘)和 pCl-D-Phe ；以及其中如果R2是η-戊?；颚?己?；?，則R1jY1, Y2和Y3缺失。
7.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中黑皮質(zhì)素配體被環(huán)化。
8.權(quán)利要求7的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中黑皮質(zhì)素配體通過選自下列的部分被環(huán)化當(dāng)R1或R2是半胱氨酸，且R7或X1是半胱氨酸時(shí)，R1或R2和R7或X1之間的二硫鍵； 當(dāng)R1是正亮氨酸，且R7是谷氨酸時(shí)，R1和R7之間的內(nèi)酰胺橋； 當(dāng)R2是谷氨酸或天冬氨酸，且R7是賴氨酸時(shí)，R2和R7之間的側(cè)鏈內(nèi)酰胺橋； 當(dāng)R1是琥珀酸或ο-酞酸，且R7是賴氨酸時(shí)，R1和R7之間的內(nèi)酰胺閉合；以及當(dāng)R2或R3是琥珀酸，且R7是2，3- 二氨基-丙酸時(shí)，R2或R3和R7之間的內(nèi)酰胺閉合。
9.權(quán)利要求8的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中當(dāng)X1是半胱氨酸時(shí)，X2不缺失。
10.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其如式II所示 Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9-X1-X2-X3(式 II)其中各R1 R9獨(dú)立地是氨基酸或肽模擬物；Y1缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸和L-脯氨酸；Y2缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)；Y3缺失或選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)；X1選自半胱氨酸，D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)； X2缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，D-脯氨酸，L-脯氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)；以及 X3缺失或選自D-蘇氨酸，L-蘇氨酸，及哌嗪-2-酮環(huán)。
11.權(quán)利要求10的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中 R1是酪氨酸；R2是纈氨酸；R3選自甲硫氨酸，正亮氨酸，半胱氨酸和L-青霉胺；R4選自甘氨酸，D-半胱氨酸，L-半胱氨酸，天冬氨酸，及正亮氨酸；R5選自組氨酸，正亮氨酸，脯氨酸和Aib ；R6 選自苯丙氨酸，D-Nal (2 ‘)和 L-Nal (2 ‘)；R7是精氨酸；R8選自色氨酸和D-Nal (2 ‘)；以及R9缺失或選自天冬氨酸，半胱氨酸，青霉胺和賴氨酸。
12.權(quán)利要求11的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中黑皮質(zhì)素配體被環(huán)化。
13.權(quán)利要求12的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中當(dāng)R4是天冬氨酸和R9是賴氨酸時(shí)，黑皮質(zhì)素配體通過R4和R9之間的內(nèi)酰胺側(cè)鏈被環(huán)化。
14.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中黑皮質(zhì)素類似物是MC4受體激動劑，MC4受體拮抗劑，MC3受體激動劑，MC3受體拮抗劑，和/或MC5激動劑。
15.權(quán)利要求11的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中黑皮質(zhì)素類似物是MC3拮抗劑。
16.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體，其中當(dāng)R4是D-苯丙氨酸時(shí)，D-苯丙氨酸在對位被鹵化。
17.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體和藥學(xué)鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體的組合物和方法，包括偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸(及任選地，N-端延伸)的黑皮質(zhì)素類似物，以產(chǎn)生具有減小的或消除的心血管活性而保留期望的黑皮質(zhì)素調(diào)控活性的穩(wěn)定的黑皮質(zhì)素配體。
文檔編號A61K38/10GK102574894SQ201080038469
公開日2012年7月11日 申請日期2010年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月31日
發(fā)明者K·A·格魯伯 申請人:張力控制股份有限公司