專利名稱：用于遞送活性化合物的膠態(tài)系統(tǒng)的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于制備膠態(tài)系統(tǒng)例如納米膠囊和納米粒子的方法，所述方法包含用于減小粒子尺寸的均質(zhì)化步驟。
背景技術(shù)：
取決于給藥途徑和分子的物理化學(xué)和形態(tài)特征兩者，用于治療目的的生物活性分子的給藥存在大量困難。由于人類和動(dòng)物身體中上皮屏障的通透性有限，一些藥物，包括肽、蛋白質(zhì)和多糖在內(nèi)，不能通過粘膜表面有效吸收。已證實(shí)，將大分子摻入到納米尺寸系統(tǒng)中使它們更容易穿透上皮屏障，并保護(hù)它們免于降解。因此，提出了能夠與所述屏障相互作用的納米顆粒系統(tǒng)作為有希望的策略，以便實(shí)現(xiàn)活性成分通過粘膜的穿透。在這種意義上，已進(jìn)行了重要的研究工作，其目的在于開發(fā)具有正的凈電荷的膠態(tài)系統(tǒng)，從而允許所述系統(tǒng)通過具有陽離子特征的生物環(huán)境被吸收和/或粘附于生物膜 (粘膜和皮膚)。因此，已描述了大量基于由親脂核構(gòu)成并用脫乙酰殼多糖包被的納米乳液和納米膠囊，用于通過不同途徑給藥活性成分的系統(tǒng)[W096/37232 ;Calv0等，Colloid. Polym. Sci. ，1997,275,46-53 ；El-Shabouri, Intern.J.Pharmac,2002,249, 101-8 ； Filipovic-Grcic, J. Microencap.，2001，18(1),3-12]。親水性脫乙酰殼多糖聚合物摻入到水性相中為所述系統(tǒng)提供了正的凈電荷。然而，這些納米膠囊系統(tǒng)的使用產(chǎn)生了一些不穩(wěn)定性問題，因?yàn)樵诔^一個(gè)月的儲(chǔ)存期中，它們的組成導(dǎo)致活性成分從親脂相逐漸釋放。文獻(xiàn)EP 1834635A1描述了納米膠囊系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包含磷脂和油的親脂核以及脫乙酰殼多糖的親水相，其除了具有結(jié)合活性親脂分子并將它們?cè)谶m合的生物環(huán)境中釋放的極大能力之外，在其儲(chǔ)存和運(yùn)輸期間還具有明顯提高的穩(wěn)定性。在所述納米膠囊系統(tǒng)的制備中使用的所有方法都基于溶劑驅(qū)替方法 (solvent-displacing process)，在該方法中，在親脂相與含脫乙酰殼多糖的水性相混合后，自發(fā)形成納米膠囊。然而，源于這種溶劑驅(qū)替方法的一個(gè)缺點(diǎn)是親脂相的有機(jī)溶劑向水性相擴(kuò)散，沖走了活性成分。因此，在隨后的溶劑蒸發(fā)階段和水性相濃縮中，活性成分沉淀形成晶體。因此，所使用的有機(jī)溶劑極為依賴于它在水性相中擴(kuò)散的能力。例如，當(dāng)包封環(huán)孢素時(shí)，由于優(yōu)選的混合物乙醇/甲醇向水性相快速擴(kuò)散，因此需要使用丙酮，盡管它有毒性。此外，能夠摻入到親脂相中的油的量相當(dāng)有限，因?yàn)榇罅渴褂脤?dǎo)致形成獨(dú)立的球滴，其傾向于在乳液表面中形成聚集體而不被脫乙酰殼多糖覆蓋。這種特點(diǎn)相當(dāng)大地限制了摻入到納米膠囊中的活性成分的量，因?yàn)樗鲇蜆?gòu)成了所述活性成分溶解于其中的介質(zhì)。這種方法的另一個(gè)缺點(diǎn)是在混合親脂相和水性相后形成的懸液被高度稀釋，并且在納米膠囊一經(jīng)形成后，必須在隨后的步驟中蒸發(fā)掉大量有機(jī)溶劑和水。這使得所述方法從工業(yè)角度來看沒有生命力，因?yàn)檎舭l(fā)過程非常耗時(shí)。此外，為了避免制劑的去穩(wěn)定化、游離油的存在以及攪拌-蒸發(fā)過程后脫乙酰殼多糖聚集體的形成，需要大量水。脫乙酰殼多糖在納米顆粒的配制中也被用作天然和生物相容的聚合物 (W001/3275U W099/47130)。它也與帶負(fù)電荷的聚合物例如糖胺聚糖(W02004/112758、 W02007/135164)或陰離子多糖例如硫酸軟骨素(W02007/031812)組合使用。用于制備脫乙酰殼多糖納米粒子的方法基于親離子凝膠化方法(ionotropic gelification process)，在該方法中，在將含脫乙酰殼多糖的水性溶液與含有帶負(fù)電荷聚合物和交聯(lián)劑的另一種水性溶液混合后，納米粒子通過脫乙酰殼多糖與帶負(fù)電荷分子之間的靜電相互作用自發(fā)形成。然而，這種方法與脫乙酰殼多糖濃度直接相關(guān)，因?yàn)槿芤涸綕?，納米粒子的尺寸越大。因此，為了獲得在納米范圍內(nèi)的粒子，需要低的脫乙酰殼多糖濃度，其對(duì)方法的得率有不利影響。另一方面，用于制備納米顆粒系統(tǒng)的均質(zhì)化技術(shù)在現(xiàn)有技術(shù)中已廣泛描述 [W098/07414、W002/051390、W003/04225U W001/89522、W02005/072709, W02007/069272、 W02007/059118]。均質(zhì)化是使用動(dòng)態(tài)高壓均質(zhì)作用降低液體藥品的粒子尺寸，來制備穩(wěn)定得多的活性藥劑分散相以增加臨床有效性的方法。然而，上面提到的文獻(xiàn)都沒有描述制備膠態(tài)系統(tǒng)例如包含被脫乙酰殼多糖親水相包圍的磷脂和油的親脂核的納米膠囊、或網(wǎng)狀脫乙酰殼多糖的納米粒子的均質(zhì)化方法，也沒有提出這種方法賦予所述膠態(tài)系統(tǒng)以特殊優(yōu)點(diǎn)?？紤]到這些數(shù)據(jù)，非常需要開發(fā)克服了源于現(xiàn)有技術(shù)狀態(tài)中所描述方法的問題的、用于制備所述膠態(tài)系統(tǒng)的方法。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明的作者開發(fā)了用于制備膠態(tài)系統(tǒng)的新方法，所述方法包含均質(zhì)化步驟，其克服了源于現(xiàn)有技術(shù)的方法例如溶劑驅(qū)替方法和經(jīng)典的親離子凝膠化方法的許多問題。因此，與其中通過混合親脂相和水性相而自發(fā)形成納米膠囊的溶劑驅(qū)替方法相反，本發(fā)明的方法允許將以重量計(jì)至少2%并高達(dá)以重量計(jì)4%的活性成分包封到納米膠囊中，而不在納米系統(tǒng)中形成沉淀的晶體。通過本發(fā)明的方法，用于每種活性分子的優(yōu)選溶劑甚至可能以低得多的量使用， 其允許使用高濃度活性成分并便于膠態(tài)系統(tǒng)的制備，因?yàn)槭聦?shí)上免除了溶劑蒸發(fā)階段。源于本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，與溶劑驅(qū)替方法相比，納米膠囊的平均有效尺寸顯著減小。該特點(diǎn)對(duì)于系統(tǒng)的效能并因此對(duì)于活性成分的釋放真正有利，因?yàn)榧{米膠囊的尺寸減小增加了親脂相與親水相之間的比表面，從而增加親脂相與生物環(huán)境(皮膚和粘膜)之間的接觸并使活性成分的釋放更加容易。此外，本發(fā)明的方法還允許將更大量的油摻入到親脂相中而不形成聚集體，這為系統(tǒng)提供了長(zhǎng)期穩(wěn)定性以及添加更大量親脂性活性成分的可能性。將更大量的、甚至高達(dá)以重量計(jì)2. 5%的脫乙酰殼多糖摻入水性相也是可能的，取決于待摻入的活性成分和待治療的指征，這有時(shí)是重要的。此外，因?yàn)榕c溶劑驅(qū)替方法相比，初始水性溶液中的水可以減少35重量％，因此能夠獲得濃得多的制劑而不會(huì)使系統(tǒng)不穩(wěn)定。
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事實(shí)上，本發(fā)明的方法允許將乳液的濃度增加12倍，因此導(dǎo)致蒸發(fā)過程的顯著減少，這使得方法更經(jīng)濟(jì)也更安全、更快速和成本效益比更高。另一方面，與其中通過混合兩種水性相而自發(fā)形成納米粒子的經(jīng)典親離子凝膠化方法相比，本發(fā)明的方法允許即使在脫乙酰殼多糖濃度顯著增加的情況下也能制備在納米范圍內(nèi)的粒子。因此，本發(fā)明的一個(gè)方面包括用于制備尺寸小于Iym的膠態(tài)系統(tǒng)的方法，所述方法包含a)在有機(jī)溶劑存在或不存在下提供親脂相，該親脂相包含a. 1)至少磷脂組分；和a. 2)油；以及a. 3)生物活性親脂分子；
b)提供水性相，該水性相包含b. 1)脫乙酰殼多糖或其衍生物；以及b. 2)聚氧亞烷基化化合物；c)將所述親脂相和水性相混合以便形成乳液；d)對(duì)所述乳液進(jìn)行均質(zhì)化處理以形成平均有效粒子尺寸小于1 μ m的納米膠囊；或者，作為替代，e)提供水性溶液，其包含脫乙酰殼多糖或其衍生物以及任選的選自葡甘露聚糖、 透明質(zhì)酸、聚氧亞烷基化化合物及其衍生物的聚合物，以及f)提供水性溶液，其包含交聯(lián)劑和生物活性分子；g)將所述兩種水性溶液混合以便形成團(tuán)集物；以及h)對(duì)所述團(tuán)集物進(jìn)行均質(zhì)化處理以形成平均有效粒子尺寸小于1 μ m的粒子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及可以通過如上定義的方法獲得的膠態(tài)系統(tǒng)。發(fā)明詳述在本發(fā)明的情形中，下列術(shù)語具有下面詳述的意義。術(shù)語“膠態(tài)系統(tǒng)”是指其平均有效尺寸小于1 μ m的物理實(shí)體。它包括納米膠囊和納米粒子。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，平均有效尺寸小于350nm、更優(yōu)選小于300nm、更優(yōu)選小于mOnm。術(shù)語“納米膠囊”被理解為由親水相包圍的親脂性質(zhì)的核，所述親水相包含具有正電荷并“包封”所述核的親水性聚合物。納米膠囊分散在水性介質(zhì)中，其中所述水性介質(zhì)可以包含溶解的附加量的親脂性聚合物。納米膠囊的不同的親脂組分和親水組分之間產(chǎn)生的離子相互作用產(chǎn)生特征性的物理實(shí)體，其是獨(dú)立和可觀察的，其平均有效尺寸小于ι μ m，即平均尺寸在Inm至999nm之間。術(shù)語“納米粒子”被理解為是由脫乙酰殼多糖和活性成分之間的靜電相互作用以及通過添加網(wǎng)化劑獲得的偶聯(lián)物的親離子凝膠化而形成的結(jié)構(gòu)。納米粒子的兩種組分之間產(chǎn)生的靜電相互作用和隨后的網(wǎng)化產(chǎn)生特征性的物理實(shí)體，其是獨(dú)立和可觀察的，其平均有效尺寸小于ι μ m,即平均尺寸在Inm至999nm之間。術(shù)語“平均有效尺寸”被理解為在水性介質(zhì)中移動(dòng)的膠態(tài)粒子的平均直徑。這些系統(tǒng)的平均尺寸可以使用本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知、并且描述在例如下面的實(shí)驗(yàn)部分中的標(biāo)準(zhǔn)程序來測(cè)量?！熬|(zhì)化方法”被理解為是指允許通過機(jī)械手段減小從執(zhí)行本發(fā)明方法的步驟a) 至d)得到的乳液中形成的球滴的尺寸，或減小作為執(zhí)行步驟e)至h)的結(jié)果形成的團(tuán)集物的尺寸的任何方法。均質(zhì)化方法的實(shí)例包括高壓均質(zhì)化、超聲、高剪切混合或施加沖擊力或機(jī)械應(yīng)力?？蛇x方案1本發(fā)明的用于制備膠態(tài)系統(tǒng)的方法包含一種可選方案，其包含下列步驟
a)在有機(jī)溶劑存在或不存在下提供親脂相，該親脂相包含a. 1)至少磷脂組分；和a. 2)油；以及a. 3)生物活性親脂分子；b)提供水性相，該水性相包含b. 1)脫乙酰殼多糖或其衍生物；以及b. 2)聚氧亞烷基化化合物；c)將所述親脂相和水性相混合以便形成乳液；d)對(duì)所述乳液進(jìn)行均質(zhì)化處理以形成平均有效粒子尺寸小于1 μ m的納米膠囊。這種方法導(dǎo)致產(chǎn)生納米膠囊形式的膠態(tài)系統(tǒng)，其中親脂相構(gòu)成納米膠囊的核，該核被為納米膠囊表面提供正電荷的親水相所包圍。通過執(zhí)行本發(fā)明方法的步驟a)和d)所獲得的納米膠囊，其特征在于它們具有小于1 μ m的平均有效尺寸，優(yōu)選情況下它們具有Inm至999nm之間、優(yōu)選50nm至800nm之間、 更優(yōu)選IOOnm至300nm之間的平均尺寸。膠囊的平均尺寸主要受磷脂組分的量(量越大， 得到的尺寸越小)、脫乙酰殼多糖的量和分子量(量或分子量較大，尺寸增加)、使用的油的密度、和均質(zhì)化處理的參數(shù)例如壓力、溫度或施加的機(jī)械力的幅度的影響。此外，歸因于脫乙酰殼多糖的胺基，納米膠囊可以具有表面電荷(由ξ電位度量)，其幅度可以在+ImV至+70mV之間變化。親脂相通過對(duì)至少一種磷脂組分、油和生物活性分子進(jìn)行物理混合來制備親脂相。親脂相的功能是容納活性親脂成分并在晚些時(shí)候?qū)⑵溽尫旁谶m合的生物環(huán)境中。在具體實(shí)施方案中，可以將親脂相的組分溶解在有機(jī)溶劑中。與溶劑驅(qū)替方法相反，本發(fā)明的方法允許使用每種活性成分的優(yōu)選溶劑而不向水性溶液擴(kuò)散。然而，優(yōu)選使用可藥用有機(jī)溶劑例如乙醇和異丙醇?？蛇x地，不將親脂相的組分溶解在任何有機(jī)溶劑中而照原樣使用和混合。該相中存在的油也起到用于其余組分的溶劑的作用。磷脂組分在本申請(qǐng)的情形中，磷脂組分被理解為是一類離子性脂類，其在最簡(jiǎn)單形式下包含甘油，所述甘油與兩個(gè)脂肪酸(1，2-二酰甘油)和磷酸基團(tuán)鍵合。通常情況下，磷酸基團(tuán)通過磷酸二酯鍵與另一個(gè)原子團(tuán)鍵合，所述原子團(tuán)通常含有氮，例如是膽堿、絲氨酸或乙醇胺。其他磷脂源自于氨基醇鞘氨醇或二氫鞘氨醇(鞘磷脂)，不是必需源自于甘油。得到的化合物具有源自于脂肪酸鏈的親脂部分和源自于磷酸基團(tuán)的親水部分、以及電荷。
在本發(fā)明的方法中使用的磷脂組分優(yōu)選選自磷酸甘油酯、鞘磷脂、腦磷脂及其混合物。磷酸甘油酯例如磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰膽堿和磷脂酸，是由脂肪酸、甘油、磷酸和醇(例如膽堿、絲氨酸、乙醇胺、甘油或肌醇)形成的脂類。鞘磷脂例如神經(jīng)鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸、磷酸和醇或氨基醇形成。腦磷脂由甘油、磷酸、兩種脂肪酸和兩種醇類堿(膽堿和鞘氨醇)形成。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，磷脂組分包含磷酸甘油酯。更優(yōu)選情況下，它包含選自磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰膽堿和磷脂酸的磷酸甘油酯或其混合物。在優(yōu)選的變化形式中，磷脂組分是卵磷脂。優(yōu)選情況下使用可商購(gòu)的大豆卵磷脂， 盡管也可以使用雞蛋卵磷脂。卵磷脂是脂類化合物的復(fù)雜混合物，所述脂類化合物中大部分是磷脂化合物，特別是磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰膽堿。一般來說，卵磷脂由其商品名和指示其組成中磷脂酰膽堿的百分率的數(shù)字標(biāo)明。卵磷脂中磷脂酰膽堿的百分率可以在35%至高達(dá)事實(shí)上100%之間變化，然而在本發(fā)明中使用的卵磷脂具有在35%至75%之間、優(yōu)選在 35%至55%之間的卵磷脂百分率。使用非常的高磷脂酰膽堿百分率(高于80% )的卵磷脂是不可取的，因?yàn)樗岣吡思{米膠囊懸液中游離油的存在。就此而言，市場(chǎng)上可以獲得幾種磷脂酰膽堿百分率不超過80%的卵磷脂。因此，優(yōu)選使用Epikuron 135F、Epikuron 145V、 Epikuron 170、Lipoid S30、Lipoid S45 禾口 Lipoid S75。同樣地，磷脂酰膽堿/磷脂酰乙醇胺的比率影響具有適合的穩(wěn)定性性質(zhì)的納米膠囊的形成。因此，已證實(shí)使用其中磷脂酰膽堿/磷脂酰乙醇胺比率為約7/1，且組成中磷脂酰膽堿的比例高于35%的Epikur0nl35F，提供了最好的穩(wěn)定性結(jié)果。在優(yōu)選實(shí)施方案中，膠態(tài)系統(tǒng)中，相對(duì)于包括水的總重量，磷脂組分的比例以重量計(jì)在0.5%至20%之間，更優(yōu)選以重量計(jì)高于10%。油在親脂相的制備中使用的油包括基于植物的油，其被理解為任何可以從植物來源獲得的油?；谥参锏挠偷膶?shí)例包括葵花籽油、玉米油、大豆油、棉籽油、花生油、大豆油、月見草油、琉璃苣油、橄欖油、椰子油、棕櫚油、大麻籽油、杏仁或種籽油、小麥胚芽油、玉米胚芽油、可可油、澳洲堅(jiān)果油(macadamia oil)、杏仁油、鱷梨油、金盞花油、葡萄籽油、芝麻油、 霍霍巴油或榛子油。然而，在本發(fā)明的情形中，術(shù)語油還打算包括具有一種或多種不飽和的和/或飽和的鏈脂肪酸或其衍生物的油。所述脂肪酸的實(shí)例包括但不限于飽和脂肪酸例如辛酸/ 癸酸甘油三酯(Mygliol)、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、金合歡酸(acacidic acid)、 carnacilic acid, araquidic acid、山崳酸、二十四烷酸、或二十六烷酸；單不飽和脂肪酸例如月桂烯酸、棕櫚油酸、油酸、11-十八碳烯酸、9-二十碳烯酸、鯨蠟烯酸或芥酸；多不飽和脂肪酸例如亞油酸、亞麻酸、Y-亞麻酸、十八碳四烯酸、花生四烯酸、4，7，11-二十二碳三烯-18-炔酸或二十二碳六烯酸或其混合物。同樣地，可以使用這些脂肪酸的衍生物，其根據(jù)本定義理解為具有高親脂特點(diǎn)并作為酸基團(tuán)與醇類或胺類反應(yīng)的結(jié)果而產(chǎn)生的化合物，例如所述脂肪酸的酯類或酰胺。同樣地，脂肪酸衍生物的定義包括具有羥基、醚基或烷基作為烴鏈的取代基的脂肪酸，例如 2-羥基二十四烷酸、2-羥基二十四碳-15-烯酸、蓖麻油酸、結(jié)核硬脂酸或植烷酸或它們的酯或它們的酰胺；或在烴鏈中具有環(huán)結(jié)構(gòu)的脂肪酸，例如乳桿菌酸或環(huán)戊烯-2-十三烷酸。
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在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，包含在親脂溶液中的油是蓖麻油。所述油通過冷壓榨蓖麻(Ricinus Communis L.)種子獲得，盡管它是可商購(gòu)的。它具有長(zhǎng)鏈脂肪酸(C16-C18) 組成2% (最大值)的棕櫚酸，2. 5% (最大值)的硬脂酸，2. 5-6.0%的油酸，2. 5-7.0%的亞油酸，(最大值)的亞麻酸和85-92%的蓖麻油酸。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，膠態(tài)系統(tǒng)的制劑中，相對(duì)于系統(tǒng)總重量，油的比例以重量計(jì)為至少7%。這種油的比例允許包封以重量計(jì)至少2%并高達(dá)以重量計(jì)4%的活性成分而不形成沉淀的晶體。優(yōu)選情況下，膠態(tài)系統(tǒng)中，相對(duì)于系統(tǒng)總重量，油的比例大于以重量計(jì)20%，更優(yōu)選以重量計(jì)為至少25%。與溶劑驅(qū)替方法相反，這些大量油的存在賦予膠態(tài)系統(tǒng)以長(zhǎng)期穩(wěn)定性，并且避免了聚集體的形成。生物活性親脂分子親脂相還包含至少一種生物活性親脂分子。這種分子的摻入通過將其與磷脂組分和油一起溶解在該親脂相中來進(jìn)行，組分添加的次序無關(guān)緊要。術(shù)語“生物活性親脂分子”是指被用于疾病的治療、治愈、預(yù)防或診斷或被用于改善人類和動(dòng)物的身心健康的任何具有親脂特點(diǎn)的物質(zhì)。這些具有親脂特點(diǎn)的分子包括蛋白質(zhì)、肽類、脂類、改性寡核苷酸(冷凍干燥)、皮質(zhì)類固醇、親脂性維生素例如維生素A、D、 K和E、抗真菌劑、制菌劑、愈合劑、抗組胺劑、麻醉劑、止癢劑、抗牛皮癬藥劑、抗生素、抗病毒劑、防腐劑、抗痤瘡劑、脫色劑、抗皮脂溢藥、免疫抑制劑、非留體抗炎藥(NSAID)、源自于 Capsilum的消炎藥。在優(yōu)選實(shí)施方案中，生物活性親脂分子是環(huán)孢素。在另一個(gè)具體實(shí)施方案中，生物活性親脂分子是抗生素，例如紅霉素、克拉霉素、 阿奇霉素、羅紅霉素、地紅霉素。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，生物活性親脂分子是皮質(zhì)類固醇，例如氫化可的松、強(qiáng)的松、氟替卡松、潑尼松龍、曲安西龍、曲安奈德、地塞米松、倍他米松、倍氯米松、二丙酸倍氯米松。在具體實(shí)施方案中，膠態(tài)粒子中，相對(duì)于包括水的總重量，生物活性親脂化合物的比例以重量計(jì)在0. 5 %至20 %之間，更優(yōu)選以重量計(jì)在1 %至10 %之間，更優(yōu)選以重量計(jì)在 2%至10%之間，更優(yōu)選在2至5%之間。優(yōu)選情況下，親脂相還包含苯甲醇，其有助于維護(hù)系統(tǒng)并且也有助于溶解活性成分。親水相親水相通過將脫乙酰殼多糖和聚氧亞烷基化化合物溶解在水中來制備。該水性相的功能在于包被納米膠囊，此外還為它提供正電荷，允許其通過具有陽離子特點(diǎn)的生物環(huán)境被吸收或吸附在其上。脫乙酰殼多糖脫乙酰殼多糖是源自于幾丁質(zhì)(聚-N-乙酰-D-葡萄糖胺)的天然來源的聚合物，其中很大部分N的乙?；淹ㄟ^水解被消除。脫乙酰的程度優(yōu)選高于40%、更優(yōu)選高于 60%。在變體中，它在60-98%之間。因此，它具有氨基多糖結(jié)構(gòu)和陽離子特點(diǎn)。它包含式 (I)的單體單元的重復(fù)
權(quán)利要求
1.用于制備尺寸小于ιμ m的膠態(tài)系統(tǒng)的方法，所述方法包含a)在有機(jī)溶劑存在或不存在下提供親脂相，該親脂相包含 a. 1)至少磷脂組分；和a. 2)油；以及a.3)生物活性親脂分子；b)提供水性相，該水性相包含b.1)脫乙酰殼多糖或其衍生物；以及 b. 2)聚氧亞烷基化化合物；c)將所述親脂相和水性相混合以便形成乳液；d)對(duì)所述乳液進(jìn)行均質(zhì)化處理以形成平均有效粒子尺寸小于1μ m的納米膠囊； 或作為替代e)提供水性溶液，其包含脫乙酰殼多糖或其衍生物以及任選的選自葡甘露聚糖、透明質(zhì)酸、聚氧亞烷基化化合物及其衍生物的聚合物，f)提供水性溶液，其包含交聯(lián)劑和生物活性分子；g)將所述兩種水性溶液混合以便形成團(tuán)集物；以及h)對(duì)所述團(tuán)集物進(jìn)行均質(zhì)化處理以形成平均有效粒子尺寸小于1μ m的粒子。
2.權(quán)利要求1的方法，其中磷脂組分是卵磷脂。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中，相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，油以重量計(jì)至少 7%的比例添加。
4.權(quán)利要求1至3的方法，其中油是蓖麻油。
5.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的方法，其中聚氧亞烷基化化合物是聚環(huán)氧乙烷或環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷共聚物。
6.權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，磷脂組分的比例以重量計(jì)在0. 5%至20%之間。
7.權(quán)利要求6的方法，其中相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，磷脂組分的比例以重量計(jì)高于10%并以重量計(jì)最高達(dá)到20%。
8.權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，油的比例以重量計(jì)高于20%。
9.權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，生物活性親脂分子的比例以重量計(jì)在0. 5%至20%之間。
10.權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的方法，其中親脂相還包含苯甲醇。
11.權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)的方法，其中生物活性親脂分子選自環(huán)孢素、倍他米松和抗生素。
12.權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)的方法，其中在步驟b.1)中，相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，脫乙酰殼多糖的比例以重量計(jì)在0. 至4%之間。
13.權(quán)利要求1至12任一項(xiàng)的方法，其中在步驟b.2)中，相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，聚氧亞烷基化化合物的比例以重量計(jì)在0. 5%至10%之間。
14.權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的方法，其中從步驟a)至d)產(chǎn)生的膠態(tài)系統(tǒng)是納米膠囊。
15.權(quán)利要求1的方法，其中在步驟e)中，相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，脫乙酰殼多糖的比例以重量計(jì)在0. 01 %至4%之間。
16.權(quán)利要求1或13的方法，其中在步驟f)中，相對(duì)于包括水的膠態(tài)系統(tǒng)的總重量，生物活性分子的比例以重量計(jì)在0. 001%至5%之間。
17.權(quán)利要求1和15至16任一項(xiàng)的方法，其中從步驟e)至h)產(chǎn)生的膠態(tài)系統(tǒng)是納米粒子。
18.能夠通過權(quán)利要求1至17任一項(xiàng)的方法獲得的膠態(tài)系統(tǒng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于制備膠態(tài)系統(tǒng)例如納米膠囊和納米粒子的方法，所述方法包含用于減小粒子尺寸的均質(zhì)化步驟。
文檔編號(hào)A61K8/73GK102458378SQ201080025376
公開日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月8日
發(fā)明者佩納 阿納·伊薩貝爾·維拉, 雷蓋羅 阿納·貝倫·庫(kù)斯塔 申請(qǐng)人:阿德萬塞先進(jìn)體外細(xì)胞技術(shù)公司