專利名稱：聚明膠肽注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及聚明膠肽注射液制備方法，具體涉及一種以牛骨或豬骨明膠生產(chǎn)聚明 膠肽注射液的處方及制備工藝。
背景技術(shù)：
聚明膠肽注射液在臨床上廣泛用于各種原因引起的失血性休克、失體液性休克等 癥，具有迅速補充血容量、維持血壓的作用，已替代血漿。目前，該產(chǎn)品存在不同的制備方 法，如公開號為CN1387912A的“聚明膠肽注射液的制備工藝”發(fā)明專利申請，該申請公開 了以下技術(shù)方法1、溶膠用注射用熱水溶解牛骨、豬骨或其他明膠；2、熱降解調(diào)牛骨、豬 骨或其他明膠水溶液PH值在5. (Γ6. 0之間，升溫至11(T125°C，維持這一溫度，測量相對粘 度，至相對粘度達(dá)到2. (Γ2. 5時，停止加熱，快速冷卻至3(T37°C ； 3、交聯(lián)降解液調(diào)pH至
6.5 7. 5，維持溫度25 35°C，加入明膠蛋白含量為0. 7 1. 2%的交聯(lián)劑，攪拌交聯(lián)廣3小時；
4、加入電解質(zhì)調(diào)pH值7.Γ7. 6，加入氯化鈉、氯化鈣和氯化鉀電解質(zhì)，使電解質(zhì)完全溶解；
5、吸附澄清加入活化后的0.廣1%硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至115°C并保溫，密封反應(yīng) 釜，降溫冷卻至35°C，靜置；6、將上述靜置后的液體用無菌虹吸轉(zhuǎn)到無菌容器中，加入活化 后的0. 19Tl%硅藻土與活性炭，檢測并調(diào)節(jié)ρΗ7. (Γ7. 6，攪拌吸附，然后經(jīng)4級過濾，分裝；
7、滅菌；8、燈檢包裝。該制備方法存在工藝參數(shù)不確切，可控性差，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定，存在一 定的安全隱患，主要缺點在于1、熱降解程度差。當(dāng)降解程度以相對密度控制為2. (Γ2. 5， 降解產(chǎn)物的重均分子量超過20000道爾頓，不適合環(huán)己烷二異氰酸酯交聯(lián)劑的反應(yīng)要求。 2、交聯(lián)工序可操作性差。三種交聯(lián)劑(琥珀酸酐、乙二醛或環(huán)己烷二異氰酸酯)性質(zhì)各異，反 應(yīng)條件各不相同。環(huán)己烷二異氰酸酯不溶于水，必須以適當(dāng)?shù)娜軇┤芙夂蠓侥芗尤?，故上?交聯(lián)工序不能適用以環(huán)己烷二異氰酸酯為交聯(lián)劑的交聯(lián)反應(yīng)。3、交聯(lián)度低。由于降解產(chǎn)物 的分子量在20000以上時肽鏈上氨基或酰胺的活性低，增加了交聯(lián)難度，導(dǎo)致交聯(lián)度低，且 交聯(lián)產(chǎn)物為鏈狀分子，重均分子量大于40000道爾頓(見圖1)。4、由于產(chǎn)品主要為鏈狀分 子，臨床補充血容量、維持血壓的作用較差，難以保證療效和安全性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種以牛骨或豬骨明膠生產(chǎn)聚明膠肽注射液及其制備方 法。本發(fā)明聚明膠肽注射液制備工藝技術(shù)方案為 一種聚明膠肽注射液制備方法，該方法包括以下步驟 一種聚明膠肽注射液制備方法，該方法包括以下步驟
a、明膠的熱降解將牛骨或豬骨明膠用4(T9(TC注射用水溶解，調(diào)節(jié)明膠溶液的pH值 為4. 5 6. 0，升溫至116 131°C，至相對粘度達(dá)到1. 30 1· 85 (優(yōu)選相對粘度1. 5 1. 7)時， 停止加熱，并冷卻至2(T40°C得到降解液；
b、交聯(lián)調(diào)節(jié)降解液的pH值為8.(Γ9. 0，在25、0°C溫度條件下加入交聯(lián)劑濃度為Γ15% (ν/ν)的環(huán)己烷二異氰酸酯的丙酮溶液或6-亞己基二異氰酸酯的丙酮溶液，不斷攪 拌，交聯(lián)1.5 2. 5小時；
c、蒸餾將步驟b的交聯(lián)產(chǎn)物加熱升溫至45飛5°C，減壓蒸餾45 180分鐘，將丙酮蒸
出；
d、電解質(zhì)的調(diào)節(jié)向步驟c蒸餾后剩下的溶液中加注射用水，加入氯化鉀、氯化鈉和氯 化鈣，溶解后，加鹽酸溶液調(diào)PH值至6. 5^7. 5 ；
e、吸附、過濾；
f、灌封、滅菌、燈檢、包裝；
上述明膠、交聯(lián)劑、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和注射用水的用量比為3. 2 k g 0. 25-0. 50L 3. 6-3. 8kg 0. 09 — 0. 12kg 0. 05 — 0. 06kg 490 — 500L (其中的用量單位
kg和L僅為明確其比例關(guān)系而不限制其具體用量，也就是說同比例放大或縮小都應(yīng)該在本 發(fā)明范圍內(nèi));其中明膠以含N量計，交聯(lián)劑以環(huán)己烷二異氰酸酯或6-亞己基二異氰酸酯的量計。上述步驟a中注射用水用量為注射用水總體積量的359Γ45%。上述步驟c中，減壓蒸餾的真空度為-0. 08Mpa。上述步驟d中，加入的注射用水量為注射用水總體積量的359Γ45% ；步驟e中，吸 附是指加入經(jīng)活化處理的0. Γ0. 5%硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至115 125°C，保溫45 90分鐘；迅速冷卻至6(T80°C，放置至少8小時，棄去沉淀泥漿，將溶液轉(zhuǎn)移至另一容器中， 加入經(jīng)活化處理的0. Γ0. 5%硅藻土和0. Γ0. 5%活性炭，加入剩余量的注射用水，調(diào)PH值 至6. 5 7. 5，攪拌吸附1. 5 2. 5小時；過濾是指依次用10 μ m、0. 45 μ m和0. 22 μ m的濾 膜過濾。上述步驟f中，滅菌工序為采用115°C滅菌30分鐘。上述方法生產(chǎn)包裝的聚明膠肽注射液的規(guī)格可以是250ml:1.6g (以含氮量計)、 500ml: 3. 2g (以含氮量計)。本發(fā)明有如下特點
1、熱降解條件易于控制。分子量越大，溶液的相對粘度越大，熱降解程度可用相對粘度 來控制。如果溶液的相對粘度大于2. 0，降解產(chǎn)物的重均分子量超過20000道爾頓，這不僅 將增加交聯(lián)難度，而且交聯(lián)產(chǎn)物的重均分子量超過40000道爾頓，將導(dǎo)致產(chǎn)品不合格。申請 人發(fā)現(xiàn)，溶液的相對粘度在1. 3(Tl. 85范圍內(nèi)時，降解產(chǎn)物的重均分子量在500(Γ18500道 爾頓之間，符合環(huán)己烷二異氰酸酯(或6-亞己基二異氰酸酯)交聯(lián)劑的最佳反應(yīng)要求，有利 于下一步的交聯(lián)反應(yīng)，以確保所得交聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)物為球狀分子且分子量符合要求。2、交聯(lián)反應(yīng)條件能準(zhǔn)確控制，交聯(lián)度高。將交聯(lián)劑配制成59Γ15%環(huán)己烷二異氰酸 酯(或6-亞己基二異氰酸酯)丙酮溶液，有利于提高交聯(lián)劑的穩(wěn)定性、有利于交聯(lián)劑的分散 和交聯(lián)反應(yīng)完全。交聯(lián)劑環(huán)己烷二異氰酸酯和6-亞己基二異氰酸酯均不溶于水，且性質(zhì)均 不穩(wěn)定，容易與包含有活潑氫原子的化合物如醇、酸、胺、水、堿等發(fā)生反應(yīng)。申請人發(fā)現(xiàn)在 環(huán)己烷二異氰酸酯或6-亞己基二異氰酸酯加入丙酮，可起到封閉作用以提高其穩(wěn)定性；且 降低粘度，增加分散性，同時充當(dāng)油性基和水性基的媒介，有利于交聯(lián)劑的分散和交聯(lián)反 應(yīng)完全，交聯(lián)度高。申請人:還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明在弱堿性溶液中有利于交聯(lián)反應(yīng)的發(fā)生，在酸性溶液卻很慢。反應(yīng)中當(dāng)堿性氨基轉(zhuǎn)化為弱堿性脲基，且羧基形成鹽時，溶液的PH值將變小。本發(fā) 明交聯(lián)反應(yīng)的PH值控制在8. (Γ9. 0時交聯(lián)效果較佳。3、蒸餾條件能準(zhǔn)確控制，溶劑回收完全。丙酮的沸點低、易于回收，采用加熱減壓 蒸餾，可保證產(chǎn)品中無有機溶劑殘留。4、能準(zhǔn)確控制產(chǎn)品的鉀、鈉、鈣離子濃度，使之與血電解質(zhì)相等。5、產(chǎn)品質(zhì)量易于控制，合格率高，穩(wěn)定性好，無毒副作用，用藥安全。能夠延長在血 液中存留時間，增加交替滲透壓，從而起到補充血容量、維持血壓的治療作用。


圖1為現(xiàn)有技術(shù)制得的聚明膠肽分子形狀照片； 圖2、為本發(fā)明制得的聚明膠肽分子形狀照片。圖中聚明膠肽分子形狀系采用專利技術(shù)“一種物體外輪廓非線性多級放大光學(xué)成 像技術(shù)原理、裝置和攝像方法”(申請?zhí)?專利號200910060951)拍攝。
具體實施例方式一、聚明膠肽注射液的處方
明膠(以含N量計)3. 2kg環(huán)己烷二異氰酸酯0. 34L氫氧化鈉0. 36kg氯化鈉3. 71kg氯化鉀0. Ilkg氯化鈣55. 5g鹽酸適量注射用水適量500L(pH 值 6· 5 7· 5)
二、按處方組成和技術(shù)方案要求生產(chǎn)聚明膠肽注射液
1、溶膠取牛骨或豬骨明膠按處方量投入注射用水的溫度為42°c。2、明膠的熱降解用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)明膠溶液的PH值在4. 5 6. 0范圍 內(nèi)(pH值優(yōu)選5. 5 5. 8)，升溫至116 131 °C (優(yōu)選12(Tl25°C )，保持溫度2 3小時，至溶 液的相對粘度達(dá)到1. 30 1. 85 (25°C測定)范圍內(nèi)時(優(yōu)選相對粘度1. 5 1. 7)，立即停止 加熱，迅速使溶液冷卻至25、0°C。3、肽鏈的交聯(lián)用NaOH溶液調(diào)節(jié)降解液的pH值至8. 0 9. 0 (優(yōu)選pH值8. 5)，維 持溶液溫度25、0°C，緩慢加入4% 15% (ν/ν)環(huán)己烷二異氰酸酯丙酮(或6-亞己基二異氰 酸酯)溶液3. 4L (優(yōu)選10%環(huán)己烷二異氰酸酯丙酮溶液)，并不斷攪拌1. 5^2. 5小時。4、蒸餾加熱升溫至45飛5°C，減壓蒸餾45 180分鐘，將丙酮蒸出。5、電解質(zhì)的調(diào)節(jié)向蒸餾后剩下的溶液中加注射用水至總量的709Γ90%，混勻，按 處方量加入氯化鉀、氯化鈉和氯化鈣，攪拌使溶解后，加鹽酸溶液調(diào)PH值至6. 5^7. 5。6、吸附、過濾加入經(jīng)活化處理過的0.廣0.5%硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至 115 125°C，保溫45 90分鐘，測定溶液的相對粘度應(yīng)在1. 85 2. 20(25°C測定)范圍內(nèi)。 迅速冷卻，放置至少8小時，棄去沉淀泥漿，將上清液轉(zhuǎn)移至另一容器中，加入經(jīng)活化處理 過的0. Γ0. 5%硅藻土和0. Γ0. 5%活性炭，加入注射用水至處方總量，調(diào)pH值至6. 5 7. 5，攪拌吸附1. 5 2. 5小時，依次用10 μπι,Ο. 45 μ m和0. 22 μ m的濾膜過濾，灌封。7、滅菌115 °C滅菌30分鐘。8、燈檢、包裝。依上述工藝生產(chǎn)包裝的聚明膠肽注射液的規(guī)格有250ml:1.6g (以含氮量計)、 500ml: 3. 2 g (以含氮量計)。依上述工藝生產(chǎn)的聚明膠肽注射液，按聚明膠肽注射液國家藥品標(biāo)準(zhǔn)檢驗，結(jié)果 均符合國家標(biāo)準(zhǔn)。且制得的聚明膠肽分子呈球狀分子(見圖2)。實施例1
1、取豬骨明膠200g，加溫度為40°C的注射用水1750ml，攪拌使溶解。用鹽酸或氫氧化 鈉溶液調(diào)節(jié)明膠溶液的PH值至4. 5，升溫至116°C，保持溫度3小時，至溶液的相對粘度達(dá) 到1.85，使水解所得肽鏈的重均分子量為16000-18500，立即停止加熱，迅速(如采用常規(guī) 的冷循環(huán)冷卻)使溶液冷卻至25 °C。2、用NaOH溶液調(diào)節(jié)上述降解液的pH值至8. 0，維持溶液溫度25°C，緩慢(以28ml/ 小時的速度)加入環(huán)己烷二異氰酸酯丙酮溶液(由3. 4ml環(huán)己烷二異氰酸酯溶于68ml丙酮 中得到環(huán)己烷二異氰酸酯丙酮溶液)，不斷攪拌2. 5小時，每隔20分鐘，測量溶液的pH值， 并用NaOH溶液調(diào)節(jié)以保持溶液的pH值為8. 0。3、將上述溶液在真空度-0.08Mpa、溫度50°C條件下，減壓蒸餾180分鐘，至不再有 丙酮被蒸出。4、向蒸餾后剩下的溶液中加注射用水2250ml，混勻，加入氯化鉀1. lg、氯化鈉 37. Ig和氯化鈣555mg，攪拌使溶解后，加鹽酸溶液調(diào)pH值至6. 5。6、加入經(jīng)活化處理過的0. 1%硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至115°C，保溫90分鐘， 測定溶液的相對粘度為1.85，所得聚明膠肽的重均分子量為29006，其形狀為球狀分子，見 圖2。迅速冷卻，放置8小時，棄去沉淀泥漿，將上清液轉(zhuǎn)移至另一容器中，加入經(jīng)活化處理 過的0. 5%硅藻土和0. 1%活性炭，加入注射用水1000ml，調(diào)pH值至6. 8左右，攪拌吸附1. 5 小時，依次用10 μ m、0. 45 μ m和0. 22 μ m的濾膜過濾，灌封。7、滅菌115 °C滅菌30分鐘。8、燈檢、包裝。分裝規(guī)格為500ml 3. 2g (以含氮量計)。實施例2
1、取牛骨明膠200g，加溫度為65°C的注射用水1900ml，攪拌使溶解。用鹽酸或氫氧化 鈉溶液調(diào)節(jié)明膠溶液的PH值至5. 5，升溫至121°C，保持溫度2. 5小時，至溶液的相對粘度 達(dá)到1.60，使水解所得肽鏈的重均分子量為10000-15500，立即停止加熱，迅速使溶液冷卻 至 35 0C ο2、用NaOH溶液調(diào)節(jié)上述降解液的pH值至8. 5，維持溶液溫度35°C，緩慢加入環(huán)己 烷二異氰酸酯丙酮溶液(由3. 4ml環(huán)己烷二異氰酸酯溶于34ml丙酮中得到)，不斷攪拌2小 時，每隔20分鐘，測量溶液的pH值，并用NaOH溶液調(diào)節(jié)以保持溶液的pH值為8. 5。3、將上述溶液在真空度-0. 08Mpa、溫度65°C條件下，減壓蒸餾45分鐘，至不再有 丙酮被蒸出。4、向蒸餾后剩下的溶液中加注射用水2750ml，混勻，加入氯化鉀1. lg、氯化鈉 37. Ig和氯化鈣555mg，攪拌使溶解后，加鹽酸溶液調(diào)pH值至7. 0。
6、加入經(jīng)活化處理過的0. 3 %硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至115°C，保溫70分鐘， 測定溶液的相對粘度為2. 20，所得聚明膠肽的重均分子量為33924，其形狀為球狀分子，見 圖3。迅速冷卻，放置12小時，棄去沉淀泥漿，將上清液轉(zhuǎn)移至另一容器中，加入經(jīng)活化處 理過的0. 1%硅藻土和0. 3 %活性炭，加入注射用水350ml，調(diào)pH值至7. 0左右，攪拌吸附2 小時，依次用10 μ m、0. 45 μ m和0. 22 μ m的濾膜過濾，灌封。7、滅菌115 °C滅菌30分鐘。8、燈檢、包裝。分裝規(guī)格為250ml: 1.6 g (以含氮量計)。實施例3
1、取豬骨明膠200g，加溫度為90°C的注射用水2000ml，攪拌使溶解。用鹽酸或氫氧 化鈉溶液調(diào)節(jié)明膠溶液的PH值至6. 0，升溫至131°C，保持溫度2小時，至溶液的相對粘度 達(dá)到1. 3，使水解所得肽鏈的重均分子量為5500-9000，立即停止加熱，迅速使溶液冷卻至
40 "C。2、用NaOH溶液調(diào)節(jié)上述降解液的pH值至9. 0，維持溶液溫度40°C，緩慢加入環(huán)己 烷二異氰酸酯丙酮溶液(由3. 4ml環(huán)己烷二異氰酸酯溶于24ml丙酮中得到)，不斷攪拌1. 5 小時，每隔20分鐘，測量溶液的pH值，并用NaOH溶液調(diào)節(jié)以保持溶液的pH值為9. 0。3、將上述溶液在真空度-0. 08Mpa、溫度45°C條件下，減壓蒸餾100分鐘，至不再有 丙酮被蒸出。4、向蒸餾后剩下的溶液中加注射用水2500ml，混勻，加入氯化鉀1. lg、氯化鈉 37. Ig和氯化鈣555mg，攪拌使溶解后，加鹽酸溶液調(diào)pH值至6. 5。6、吸附、過濾加入經(jīng)活化處理過的0. 5 %硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至125°C， 保溫45分鐘，測定溶液的相對粘度應(yīng)為2. 0，所得聚明膠肽的重均分子量為31783，其形狀 為球狀分子，見圖4。迅速冷卻，放置16小時，棄去沉淀泥漿，將上清液轉(zhuǎn)移至另一容器中， 加入經(jīng)活化處理過的0. 3%硅藻土和0. 3%活性炭，加入注射用水500ml，調(diào)pH值至7. 3左 右，攪拌吸附2. 5小時，依次用10 ym.O. 45 μ m和0. 22 μ m的濾膜過濾，灌封。7、滅菌115 °C滅菌30分鐘。8、燈檢、包裝。分裝規(guī)格為500ml 3. 2g (以含氮量計)。表1.本發(fā)明聚明膠肽注射液的檢驗結(jié)果
權(quán)利要求
一種聚明膠肽注射液制備方法，該方法包括以下步驟a、明膠的熱降解將牛骨或豬骨明膠用40～90℃注射用水溶解，調(diào)節(jié)明膠溶液的pH值為4.5～6.0，升溫至116～131℃，至相對粘度達(dá)到1.30～1.85時，停止加熱，并冷卻至20～40℃得到降解液；b、交聯(lián)調(diào)節(jié)降解液的pH值為8.0～9.0，在25～40℃溫度條件下加入交聯(lián)劑體積濃度為4～15%的環(huán)己烷二異氰酸酯的丙酮溶液或體積濃度為4～15%的6 亞己基二異氰酸酯的丙酮溶液，不斷攪拌，交聯(lián)1.5～2.5小時；c、蒸餾將步驟b的交聯(lián)產(chǎn)物加熱升溫至45～65℃，減壓蒸餾45～180分鐘，將丙酮蒸出；d、電解質(zhì)的調(diào)節(jié)向步驟c蒸餾后剩下的溶液中加注射用水，加入氯化鉀、氯化鈉和氯化鈣，溶解后，加鹽酸溶液調(diào)pH值至6.5～7.5；e、吸附、過濾；f、灌封、滅菌、燈檢、包裝；上述明膠、交聯(lián)劑、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和注射用水的用量比為3.2kg0.25 0.50L3.6－3.8kg0.09－0.12kg0.05－0.06kg490－500L；其中明膠以含N量計，交聯(lián)劑以環(huán)己烷二異氰酸酯或6 亞己基二異氰酸酯的量計。
2.如權(quán)利要求1所述的聚明膠肽注射液制備方法，其特征在于，步驟a中注射用水用量 為注射用水總體積量的35% 45%。
3.如權(quán)利要求1或2所述的聚明膠肽注射液制備方法，其特征在于，步驟c中，減壓蒸 餾的真空度為-0. OSMpa0
4.如權(quán)利要求1或2所述的聚明膠肽注射液制備方法，其特征在于，步驟d中，加入 的注射用水量為注射用水總體積量的35% 45% ；步驟e中，吸附是指加入經(jīng)活化處理的 0. 1 0. 5%硅藻土，邊加入邊攪拌，升溫至115 125°C，保溫45 90分鐘；迅速冷卻至 60 80°C，放置至少8小時，棄去沉淀泥漿，將溶液轉(zhuǎn)移至另一容器中，加入經(jīng)活化處理的 0. 1 0. 5%硅藻土和0. 1 0. 5%活性炭，加入剩余量的注射用水，調(diào)PH值至6. 5 7. 5， 攪拌吸附1. 5 2. 5小時；過濾是指依次用10 μ m、0. 45 μ m和0. 22 μ m的濾膜過濾。
5.如權(quán)利要求1或2所述的聚明膠肽注射液制備方法，其特征在于，步驟f中，滅菌工 序為采用115°C滅菌30分鐘。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種聚明膠肽注射液的處方及其制備方法，包括a.將明膠用注射用水溶解，調(diào)節(jié)明膠溶液的pH值為4.5～6.0，升溫至116~131℃，保持溫度2~3小時，停止加熱，冷卻至25~40℃。b.調(diào)節(jié)降解液的pH值至8.0~9.0，加入環(huán)己烷二異氰酸酯丙酮溶液，攪拌交聯(lián)1.5~2.5小時。c.減壓蒸餾將丙酮蒸出。d.向蒸餾后剩下的溶液中加注射用水、加入氯化鉀、氯化鈉和氯化鈣，調(diào)pH值至6.5~7.5。d.吸附與過濾；e.滅菌、燈檢、包裝。該方法降解條件可控性好，水解所得的多肽重均分子量為5000-18500，滿足交聯(lián)反應(yīng)最佳條件要求；交聯(lián)度高，交聯(lián)產(chǎn)物多肽為球狀分子。制備的聚明膠肽注射液符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)臨床使用結(jié)果表明，該產(chǎn)品安全，有效。
文檔編號A61K9/08GK101934067SQ20101027141
公開日2011年1月5日 申請日期2010年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月3日
發(fā)明者魏學(xué)惠 申請人:武漢東方紅醫(yī)藥科技有限公司