專利名稱：五肽類似物,其制備及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗腫瘤活性的五肽衍生物，其制備方法，含它們 的藥物組合物及它們在治療癌癥中的用途。
背景技術(shù)：
多肽類化合物具有結(jié)構(gòu)新穎，活性顯著，作用專一的特點(diǎn)，其生
物活性主要集中于抗胂瘤和抗真菌方面。Dolastatin 15是源自西印 度洋軟體動物海兔Z o7a力e77a awn'c"/ar/a的一個線性天然多肽，經(jīng) 美國國家癌癥研究所(NCI)篩選發(fā)現(xiàn)具有很強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長的活性， 對多種惡性胂瘤細(xì)胞有抑制作用。作用機(jī)制的初步探討發(fā)現(xiàn)，其可作 用于微管蛋白，抑制有絲分裂，阻斷細(xì)胞周期。因此有必要尋找新的 具有抗腫瘤活性的多肽化合物。 發(fā)明目的
本發(fā)明的目的是尋找新的具有抗腫瘤活性的多肽化合物或其先導(dǎo) 化合物。
發(fā)明筒述
本發(fā)明人經(jīng)研究現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)式(I)的五肽類似物
X-Y-Z-L-M-N ( I)
或其立體異構(gòu)體具有良好的抗腫瘤活性，因此式(I)五肽類似物或其 立體異構(gòu)體可作為藥物用于治療癌癥。
本發(fā)明涉及式(I)五肽衍生物或其立體異構(gòu)體，
X-Y-Z-L-M-N ( I)
其中
X為L-或D-a-型-N-端單烷基或雙烷基取代的親脂性氨基酸，四 氫異喹啉-3-羧酸，3, 4-二氫異喹啉-3-羧酸，烷基為C「Cs的直鏈或 支鏈或C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸選自Gly、 Ala、 Val、 Leu、Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
Y為L-或D-a-型親脂性天然或非天然氨基酸，如Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
Z為L-或D-cc-型N-端單烷基取代的親脂性氨基酸，烷基為d-C5 的直鏈或支鏈或C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸為Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
L和M為下列L-或D-a-型氨基酸中的任意兩個或部分自身組合 N原子在四~七元環(huán)上的氨基酸，3， 4-二氫異喹啉-3-羧酸，四氫異 喹啉-3-羧酸，反式或順式-4-取代-脯氨酸，取代基為幾基、卣素、硝 基、氨基、C廣Cs直鏈或支鏈烷基、C3-C7環(huán)烷基、d-Cs烷氧基、氨基、 C「Cs酰胺基、二(C「Cs直鏈或支鏈烷基)胺基、C3-C7環(huán)烷胺基、含氧、 辟u、氮原子的(:3-(:7環(huán)烷胺基；
N為脂肪胺或芳香胺衍生物，取代或未取代的肼或籽。
本發(fā)明涉及含至少一個式(I)五肽衍生物或其立體異構(gòu)體，及藥 用栽體或賦形劑的藥物組合物。
X-Y-Z-L-M-N ( I)
其中
X為L-或D-a-型-N-端單烷基或雙烷基取代的親脂性氨基酸，四 氫異喹啉-3-羧酸，3， 4-二氫異喹啉-3-羧酸，烷基為d-Cs的直鏈或 支鏈或C3-C7元環(huán)狀烷基；親脂性氨基酸為Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
Y為L-或D-a-型親脂性天然或非天然氨基酸，Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
Z為L-或D-ct-型N-端單烷基取代的親脂性氨基酸，烷基為C「Cs 的直鏈或支鏈、C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸為Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；
L和M為下列L-或D-ct-型氨基酸中的任意兩個或部分自身組合 N原子在四 七元環(huán)上的氨基酸，3， 4-二氫異喹啉-3-羧酸，四氫異 喹啉-3-羧酸，反式或順式-4-取代-脯氨酸，取代基為羥基、卣素、硝基、氨基、C「Cs直鏈或支鏈烷基、C3-G環(huán)烷基、d-Cs烷氧基、氨基、
C廠Cs跣胺基、二(c廠u直鏈或支鏈烷基)胺基、c3-c 環(huán)烷胺基、含氧、
硫、氮原子的C3-C7環(huán)烷胺基；
N為脂肪胺或芳香胺衍生物，取代或未取代的肼或J!f。 本發(fā)明還涉及制備式I五肽衍生物或其立體異構(gòu)體的方法，其包
括
1) 將化合物Boc-L-OH與M-OP在DMF, DCM， TEA, DIC-HOBt中 反應(yīng)，其中L， M如權(quán)利要求2中定義，P為d-s烷基，生成Boc-L-M-OP;
2) 將l)中所得產(chǎn)物在鹽酸/二氧六環(huán)中脫去氨基保護(hù)基，生成 L-M-0P;
3) 將2 )中產(chǎn)物L(fēng)-M-0P與Boc-Z-0H在DMF, DCM， TEA, DIC-隨t 中反應(yīng)，生成Boc-Z-L-M-0P，所得產(chǎn)物如2)中所述進(jìn)行反應(yīng)，生成 脫去氨基保護(hù)基的Z -L-M-OP;
4) 將3 )中產(chǎn)物Z-L-M-0P與Boc-Y-0H在DMF， DCM, TEA， DIC-HOBt 中反應(yīng)，生成Boc-Y-Z-L-M-0P;
5) 將4)中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-0P在氫氧化鈉/甲醇溶液中皂化， 然后用檸檬酸酸化，生成Boc-Y-Z-L-M-OH;
6) 將5 )中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-OH與N-NHR在DCM， DIC-HOBt中 反應(yīng)，生成Boc-Y-Z-L-M- N;
7) 將6 )中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-N如2 )中所述進(jìn)行反應(yīng)，生成脫 去氨基保護(hù)基的Y-Z-L-M-N;
8) 將7)中產(chǎn)物與X-0H在DCM, TEA, DEPC中反應(yīng)，生成式I X十Z-L-M-N。
本發(fā)明還涉及式(I)五肽類似物或其立體異構(gòu)體在制備用于治療 癌癥的藥物中的用途。涉及的腫瘤細(xì)胞如成纖維細(xì)胞MRC5CV1、膀胱 癌細(xì)胞T24、鼠白血病細(xì)胞L1210、鼠白血病細(xì)胞P388、人肺癌細(xì)胞 A549、人結(jié)腸癌細(xì)胞HT29、人結(jié)腸癌細(xì)胞L0V0、猴腎成纖維細(xì)胞CV1、 人乳腺癌細(xì)胞MCF7、人惡性膠質(zhì)瘤/星形細(xì)胞瘤細(xì)胞U373、人卵巢癌 細(xì)胞HEY、表皮樣瘤細(xì)胞系KB、黑素瘤細(xì)胞B16、 MDA-MB-435乳腺癌細(xì)胞、HeLa S3子宮頸癌細(xì)胞、人紅白血病細(xì)胞K562、人卵巢癌細(xì)胞 0VCA2780、人胃印戒癌細(xì)胞Kato-III等 發(fā)明詳述
在本發(fā)明中使用的縮寫具有下面的含義
Ala —丙氨酸，
Gly —甘氨酸，
lie -異亮氨酸，
Leu -亮氨酸，
Val —纈氨酸，
MeVal -甲基纈氨酸，
Phe —苯丙氨酸，
Pro -脯氨酸，
BA —苯甲胺，
BEA —苯乙胺，
DEA — 二乙胺，
DCHA — 二環(huán)己胺，
Mpl -嗎啡啉，
Prd -旅咬，
TEA —三乙胺，
Thp -四氫吡咯，
DCM — 二氯甲烷，
DMF - 二甲基甲酰胺，
DIC — 二異丙基碳二亞胺，
HOBt - 1-羥基苯并三唑，
Boc -叔丁氧羰基，
DEPC —氰基磷酸二乙酯，
THF -四氫呋喃。
術(shù)語t;卜5烷基"指含l-5個碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基， 乙基，丙基，異丙基，丁基，仲丁基，異丁基，叔丁基。本發(fā)明所用術(shù)語義(I)五肽類似物立體異構(gòu)體"是指其相應(yīng)
的D-或L-立體構(gòu)型。
根據(jù)本發(fā)明，式(I)五肽類似物或其立體異構(gòu)體可按本領(lǐng)域已 知方法、文獻(xiàn)方法或下面所示的反應(yīng)路線1制備
反應(yīng)路線1
Boc-Z^OH + M-OP -!——Boc-Z-M-OP——"-^Z-M-OP
Boc-MeVal-OH
Boc-MeVal-Z-M-OP
MeVal-Z-M"OP
Boc-Y-OH
N-NH，
X-OH
Boc-Y-MeVal-Z-M-OP-115——》^Boc-Y-MeVal-Z-M OH
Boe-Y-MeVal-Z-M-N
X-Y-MeVal-Z-M-N
Y-MeVal-Z-M-N
i. DMF^MJAAJ3IC-HOBt ii. 4N HCl/l,4"Dioxane iii. 1N NaOH/MeOH
iv. DCMJ3IC-HOBt v. DCMJAA^DEPC
在反應(yīng)路線1中，化合物Boc-L-0H ( L如上定義)與M-0P ( M如 上定義，P為CH烷基，其可選自甲基，乙基，異丙基，丁基，仲丁基， 異丁基，叔丁基，優(yōu)選甲基和乙基)在DCM, DMF, TEA, DIC-HOBt中 反應(yīng)，生成Boc-L-M-OP (其中L, M， P如上定義)。將Boc-L-M-0P 經(jīng)4摩爾鹽酸/二氧六環(huán)脫保護(hù)基，生成Z-M-0P。將L-M-0P與Boc-Z-OH 在DCM, DMF, TEA, DIC-H0Bt中反應(yīng)，生成Boc-Z-L-M-OP。將 Boc-Z-L-M-OP經(jīng)4摩爾鹽酸/二氧六環(huán)脫保護(hù)基，生成Z-L-M-0P。將 Z-L-M-OP與Boc-Y-OH在DCM， DMF， TEA, DIC-H0Bt中反應(yīng)，生成 Boc-Y-Z-L-M-OP。將Boc-Y-Z-L-M-OP經(jīng)1摩爾氪氧化鈉/甲醇急化， 生成Boc-Y- Z-L-M-0H。將Boc-Y-Z-L-M-OH與N-NHR在DCM， DIC-HOBt 中反應(yīng)，生成Boc-Y-Z-L-M-N。將Boc-Y-Z-L-M-N經(jīng)4摩爾鹽酸/二氧 六環(huán)脫保護(hù)基，生成Y-Z-L-M-N。將Y-Z-L-M-N與X-OH在DCM， TEA, DEPC中反應(yīng)生成X-Y-Z-L-M-N。
9根據(jù)本發(fā)明，式(I)五肽類似物的立體異構(gòu)體包括D-和/或L-構(gòu)型。
根據(jù)本發(fā)明，式(I)五肽類似物及其立體異構(gòu)體在人癌癥細(xì)胞篩 選中顯示較好的抑制細(xì)胞生長的活性。
本發(fā)明涉及含有作為活性成分的有效劑量的至少一種式(I)五肽 類似物和/或其立體異構(gòu)體以及常規(guī)藥物賦形劑或輔劑的藥物組合物。 通常本發(fā)明藥物組合物含有0. 1~90%的式(I)五肽類似物和/或其立 體異構(gòu)體。藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制備。用于此目的時， 如果需要，可將式(I)五肽類似物和/或其立體異構(gòu)體與一種或多種 固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人用的適當(dāng)?shù)氖┯?形式或劑量形式。
本發(fā)明式(I)五肽類似物及其立體異構(gòu)體或含有它的藥物組合物 可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、 皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等。給藥劑型例如片劑、 膠嚢、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、 脂質(zhì)體、透皮劑、口含片、栓劑、凍干粉針劑等?？梢允瞧胀ㄖ苿?、 緩釋制劑、控釋制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。為了將單位給藥劑型制成 片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子，如稀 釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、硫酸 釣、氯化鈉、尿素、碳酸釣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤 劑與轱合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、 糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、 紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，如干燥淀 粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸釣、聚 氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維 素等；崩解抑制劑，如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等； 吸收促進(jìn)劑，如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，如滑石粉、二 氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可 以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域 公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄
糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、 高嶺土、滑石粉等；粘合劑如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、 米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基 磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。為了將給藥單元制成栓劑，可 以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如聚乙二 醇、卵磷脂、可可脂、高級醇、高級醇的酯、明膠、半合成甘油酯等。 為了將給藥單元制成膠嚢，將有效成分式I五肽衍生物或其立體異構(gòu) 體與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬膠嚢或軟膠 嚢中。也可將有效成分式I五肽衍生物或其立體異構(gòu)體制成微嚢劑， 混懸于水性介質(zhì)中制成混懸劑，亦可裝入硬膠嚢中或制成注射劑應(yīng)用。 為了將給藥單元制成注射用制劑，如溶液劑、乳劑、凍干粉針劑和混 懸劑，可以使用本領(lǐng)域常用的所有稀釋劑，如水、乙醇、聚乙二醇、1， 3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧基化的異硬脂醇、聚氧乙烯山 梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中 添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、 緩沖劑、pH調(diào)節(jié)劑等。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、 矯味劑、甜味劑或其它材料。
實(shí)施例
下面的實(shí)例及生物活性實(shí)驗(yàn)用來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但這并不意
味著對本發(fā)明的任何限制。
實(shí)施例化合物熔點(diǎn)由RY-1型熔點(diǎn)儀測定，溫度未經(jīng)校正；1HNMR 圖譜由Bruker ARX 400型或US Varian Unity Inova 600型核磁儀 測定；FAB質(zhì)譜由Zabspect高分辨磁質(zhì)譜儀測定；元素分析由Carlo Erba 1106型元素分析儀測定；紫外光譜由UV-260紫外可見分光光度計測定；紅外光譜由Magna IRTM 550紅外儀測定。實(shí)施例制備所用反 應(yīng)試劑均為商品化產(chǎn)品。
非天然氨基酸的制備
N， N-五亞甲基-L-纈氨酸鹽酸鹽(HC1.PMI-L-Val)的制備 L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽3. 35克(20mmol)，加入叔丁醇300毫升， 溶解，加入三乙胺8. 35毫升(60mmol),混濁，加入1， 5-二溴戊烷 3. 0亳升(22mmol)后，補(bǔ)加叔丁醇100亳升，油浴45"C， 36小時。 濃縮，加入二氯甲烷20亳升，濾除固體。濾液分別用飽和碳酸氫鈉、 飽和氯化鈉洗一次，二氯甲烷層用無水硫酸鈉干燥。濾除干燥劑，濃 縮，得棕黃色油狀物，加入10毫升鹽酸乙醇，溶解，濃縮，用無水乙 醇-無水乙醚重結(jié)晶，室溫放置，析出針狀結(jié)晶1.7克，in.p. 137~139 匸。加入4mol/L鹽酸溶液，回流4小時，濃縮得白色固體，得約1.4 克，m. p. 222- 225"C, MS: [M+H]+=186。
N， N-六亞甲基胺甲跣-L-亮氨酸(證-L-Leu)的制備 L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽7. 26克(40mmol)，加入二氯甲烷50毫升， 溶解，冷卻至-10X:,攪拌加入吡咬8毫升(lOOmmol),滴加氯甲酸 苯酯6. 50克(41.5mmol) /20亳升二氯甲烷，攪拌1小時后，傾入冰 水中，分出有機(jī)相，水相用二氯甲烷提取兩次(15亳升x2)，合并 有機(jī)相，以飽和氯化鈉洗兩次(20亳升x2)，無水硫酸鈉干燥后， 減壓蒸干，得無色油狀物，加入六亞甲基亞胺32毫升(280mmo1)、 三乙胺80毫升(575mmol)和氯仿20亳升，50- 55t:撹拌反應(yīng)2小時， 減壓濃縮，加入乙酸乙酯40亳升和水40毫升，乙酸乙酯層分別用1 摩爾鹽酸(20毫升x2 )、飽和碳酸氫鈉溶液30毫升和飽和氯化鈉溶 液洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮，得無色油狀物，加入甲醇80亳升和2 摩爾氳氧化鈉溶液50亳升，室溫攪拌90分鐘，以2摩爾鹽酸調(diào)pH 至8.0，減壓濃縮至40亳升，乙醚萃取(20亳升x2),水相在冷卻 條件下用濃鹽酸酸化至pH2 3,析出白色顆粒狀晶體，濾集千燥，用 乙酸乙酯-環(huán)己烷重結(jié)晶，得7.4克(72%), m.p. 92~94.5*C, MS:[M+H]+=242。
N-叔丁氧羰基-N-甲基-L-纈氨酸(Boc-N-Me-L- Val)的制備 Boc-L-Val 4. 35克(20mmol)，加入無水THF/DMF ( 10: 1)的混 合溶液55亳升，溶解，加入碘甲烷10亳升(160,ol)，氬化鈉固體 2.88克(50%， 60mmol)，油浴80t:， 24小時。濃縮，加入乙醚和水， 振搖分液，水相再用乙醚提取三次(40亳升x3)，乙醚層用無水疏 酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得黃色分界不明顯的油狀混合 物。加入THF40亳升，溶解，冰浴攪拌下，滴加lNNaOH 40亳升， 水浴30分鐘后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮除THF，加入乙醚萃取兩次 (25毫升x2)，水相加入乙酸乙酯5毫升，于水浴攪拌下用檸檬酸 調(diào)pH 2,用乙酸乙酯萃取四次(50毫升x4)，合并乙酸乙酯層，無 水>^酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得黃色油狀物4.2克(90%)， MS: [M+H]+=232。
N-乙?；?N-甲基-L-纈氨酸(N-Ac-N-Me-L-Val)的制備 L-Val 11. 7克(0. l邁ol)，溶于2N NaOH 110毫升(0. 22mol) 溶液中，水浴攪拌下，滴加醋酐11.34毫升，溫度控制在0 5t:,反 應(yīng)40分鐘。加入濃鹽酸，調(diào)pH~2,析出白色固體12.7克(80%， 80mino1)。取出該固體3. 2克(20nuno1),加入無水THF/DMF ( 10: 1) 的混合溶液55毫升，溶解，加入碘甲烷10亳升(160nnno1),氳化鈉 固體2.88克(50%， 60mmo1)，油浴80匸，24小時。濃縮，加入乙醚 和水，振搖分液，水相再用乙醚提取三次(40亳升x3),乙醚層用 無水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得黃色分界不明顯的油 狀混合物。加入THF 40毫升，溶解，冰浴攪拌下，滴加IN Na0H 40 毫升，水浴30分鐘后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮除THF，加入乙醚萃 取兩次(25毫升x2),水相加入乙酸乙酯5毫升，于冰浴撹拌下用 檸檬酸調(diào)pH-2，用乙酸乙酯萃取四次(50亳升x4)，合并乙酸乙酯 層，無水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得白色針狀結(jié)晶2. 77 克(80%), in.p. 112-114"C, MS: [M+H]+=160。 N-甲基-L-脯氨酸(N-Me-L-Pro)的制備
13L-Prol. 0克(8. 68mmol)，溶于40毫升水，加入甲醛水溶液(37 ~ 40%)0. 7毫升(8. 68mmo1 )，鈀炭0. 25克，通氬氣450亳升(20mmo1 )。 吸氫完全后，將反應(yīng)液加熱至微沸，趁熱過濾，濃縮濾液，無水乙醇-丙嗣重結(jié)晶，4X:冰箱過夜，得白色針狀結(jié)晶1. 11克(99%), m. p. 109 ~ 112*C， MS: [M+H]+=130。
N, N-二甲基-L-纈氨酸(N， N-Me2-L-Val)的制備方法和途徑 同N-甲基-L-脯氨酸。產(chǎn)品為白色針狀結(jié)晶，m.p. 152~154X^, MS: [M+H]+=146。
N-叔丁氧羰基-四氬異喹啉-3 (R)-羧酸((R) -Boc-Tic)的制
備
L-Phe5. O克(33mmol),加入甲醛水溶液(37- 40%) 11. 5亳升 和濃鹽酸38毫升，油浴90X:， 3小時后，再加入濃鹽酸10毫升和甲 醛水溶液(37-40%) 5亳升，油浴95X:, 3小時。室溫放置過夜，析 出固體。固體在水浴中用氨水/水(2: 3)溶解，濃鹽酸調(diào)pH-9.0, 有白色固體析出，濾集固體5.72克(98.0%)。取該固體3.90克 (22mmo1)，水浴攪拌下加入二氧六環(huán)90亳升，水45亳升，1N NaOH 45亳升，溶解，加入叔丁氧酸酐5. 28克(24. 2mmo1),水浴1. 5小 時后，室溫反應(yīng)2.5小時。濃縮除二氧六環(huán)，乙醚提取兩次(30毫升 x2)，水相冰浴攪拌下用稀硫酸氫鉀溶液調(diào)pH~ 3，水相用乙酸乙酯 萃取三次(40毫升x3),合并有機(jī)相，飽和氯化鈉洗一次，無水硫 酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得油狀物。加入石油酸冰浴研 磨，得到白色固體5. 3克(87. 0%), m.p. 76~80"C, MS: [M+H]+=278。
N-叔丁氧羰基-順式-4- (N-四亞甲基胺基)-N-千基-L-脯氨酰胺 (c!.^"Boc-Thp-L-Pro-BA)的制備
反式-4-羥基-L-脯氨酸5. 24克(40nimo1)，冰浴攪拌下加入二氧 六環(huán)80亳升，水40亳升，lNNaOH40亳升，溶解，加入叔丁氧酸酐 9. 5克(44mmo1)，水浴1小時后，室溫反應(yīng)6小時。濃縮至30亳升， 加入乙酸乙酯10毫升，冰浴攪拌下用檸檬酸調(diào)pH~2，水相用乙酸乙 酯萃取四次(40毫升x4),合并有機(jī)相，飽和氯化鈉洗一次，無水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮，得白色結(jié)晶。取出該結(jié)晶1. 15 克(5mmo1 )， 二氯甲烷溶解，水浴攪拌下，加入HOBt 0. 74亳克(5. 5nuno1) 的DMF溶液3. 72毫升，DIC0.87毫升(5，5咖o1)，冰浴30分鐘后， 加入節(jié)胺O. 55亳升(5. O咖ol)。冰浴l小時后，室溫反應(yīng)10小時。 濃縮，加入乙酸乙酯10亳升，水洗一次，分別用10%檸檬酸、飽和碳 酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥3小時 濾除干燥劑，濃縮濾液，得白色固體1.54克(97%) ,m.p. 97~101 "C。取該白色固體O. 64克(2.0mmo1) , 二氯甲烷溶解，冰鹽浴冷卻， 加入甲磺酰氯O. 39亳升(4. Ommol)，三乙胺0. 56亳升(4. 4mmo1 )， 水鹽浴30分鐘。反應(yīng)液(二氯甲烷)用飽和氯化鈉洗后，無水硫酸鈉 干燥3小時，濃縮，得白色固體O. 70克(88% ) , m.p. 151 ~ 156X:。 取該白色固體O. 1克(0.25mmo1),加入THF35毫升，溶解，加入四 氬吡咯82. 7微升(l.Ommol)，氳化鈉50亳克，室溫反應(yīng)8小時。反 應(yīng)液(二氯甲烷)用飽和碳酸氫鈉、飽和氯化鈉各洗兩次，有機(jī)相用 無水硫酸鈉干燥2小時。濾除干燥劑，濃縮，得黃色油狀物。
N-叔丁氧羰基-順式-4- (N-二乙基胺基)-N-千基-L-脯氨酰胺 (cirBoc-Dea-L-Pro-BA ):方法和途徑同N-叔丁氧羰基-順式-4-(N -四亞甲基胺基)-N-千基-L-脯氨酰胺。產(chǎn)品為油狀物。
N-叔丁氧羰基-順式-4- ( l-嗎啉基)-N-千基-L-脯氨酰胺 ("5"Boc-Mpl-L-Pro-BA):方法和途徑同N-叔丁氧羰基-順式-4-(N -四亞甲基胺基)-N-千基-L-脯氨酰胺。產(chǎn)品為油狀物。
N-叔丁氧羰基-順式-4- (N -五亞甲基胺基)-N-千基-L-脯氨酰 胺(cj'^Boc-Prd-L-Pro-BA):方法和途徑同N-叔丁氧羰基-順式-4-(N-四亞甲基胺基)-N-千基-L-脯氨酰胺。產(chǎn)品為油狀物。
實(shí)施例1 : Me2Val-Val-MeVa1-Tic-Pro-NHCH2C6H5 (QPP-024) 的制備
將L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽3. 32克(20mmo1),溶于20亳升二氯甲 烷中，冰浴攪拌下加入三乙胺2. 78毫升(20mmo1) , 10分鐘后，加入Boc- ( R)-四氬異喹啉-3-羧酸5. 54克(20mmol )，溶解。加入,t 2. 84克(21mmol)的DMF溶液6ml，冰浴10分鐘后，加入DIC 3. 3 毫升(21邁mo1)。繼續(xù)保持冰浴2小時后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮， 加入乙酸乙酯50亳升，水洗一次后，分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氬 鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥3小時。濾 除干燥劑，濃縮濾液，得黃色油狀物7.3克。經(jīng)硅膠柱層析(乙酸乙 酯-石油醚，1: l,Rf=0. 62),得到白色結(jié)晶5. 34克(68. 8%, 13. 8,ol )。 取該結(jié)晶3. 25克(lOmmol),加入4N HCl/二氧六環(huán)約20毫升，溶 解，室溫攪拌1小時。濃縮，得黃色油狀液體。二氯甲烷溶解，水浴 攪拌下，加入三乙胺1. 39亳升(lOnnnol) ， 10分鐘后，加入Boc-N-甲基-L-纈氨酸2. 30克(lOmmol )，溶解。加入HOBt 1. 49克(llmmol) 的DMF溶液3亳升，冰浴10分鐘，加入DIC 1. 73亳升(lOmmol)。 冰浴2小時后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮，加入乙酸乙醋40毫升，水 洗后，分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙 酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥3小時。濾除干燥劑，濃縮濾液，得黃色 油狀物。加入石油醚20毫升，冰浴條件下研磨，得類白色固體2.51 克(50%, 5mmo1)。加入4N HCl/二氧六環(huán)約20毫升，溶解后，室溫 攪拌1小時。濃縮，得黃色粘稠狀液體。
所得三肽1.60克(3.2mmo1) ， 二氯甲烷5毫升溶解，冰浴攪拌 下加入三乙胺0. 45毫升(3. 2mmo1) , 10分鐘后，加入Boc-L-纈氨酸 0.70克(3. 2mmo1)，溶解。H0Bt 0.45克(3. 36mmo1)用少量DMF 溶解后，加入反應(yīng)液中。冰浴10分鐘后，加入DIC 0.53毫升 (3.36mmo1)。水浴2小時后，室溫反應(yīng)7小時。濃縮，加入乙酸乙 酯10亳升，水洗一次后，分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氫鈉和飽和氯 化鈉各洗三次，乙酸乙醋層用無水硫酸鈉干燥。濾除干燥劑，濃縮濾 液，得黃色油狀物1.5克(86.2%, 2. 75mmo1)。加入甲醇溶解，水浴 攪拌下逐滴加入2NNa0H2.8毫升(5.6mmo1)，水浴反應(yīng)30分鐘后， 保持反應(yīng)液pH9 10,室溫反應(yīng)3小時。濃縮，加入乙酸和飽和碳酸 氫鈉，振搖分液，水相再用乙醚提取一次，于冰浴攪拌下加入檸檬酸調(diào)pH ~4,用乙酸乙酯萃取三次(25毫升x3)，合并乙酸乙酯層， 飽和氯化鈉洗后，無水硫酸鈉干燥。濾除干燥劑，濃縮，得黃色油狀 物1. 08克(2. 05mmo1)。
所得四肽黃色油狀物0. 216g (0.41mmo1) , 二氯甲烷10毫升溶 解，冰浴攪拌下，加入HOBt 60毫克(0.451mmo1)的DMF溶液0.3 亳升，DIC 71微升，冰浴30分鐘后，加入笨乙胺51.7微升。冰浴l 小時后，室溫反應(yīng)ll小時。濃縮，加入乙酸乙酯10亳升，水洗后， 分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙酸乙酯 層用無水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮濾液，得黃色油狀物 0. 22克(0. 35mmo1)。加入4N HCl/二氧六環(huán)約5毫升，溶解，室溫 攪拌1小時。濃縮，得黃色油狀液體O. 22克(0. 35nnno1)。
上述四肽酰胺0. 11克(0. 175mmo1) ， 二氯甲烷5亳升溶解，冰 鹽浴攪拌下加入三乙胺60. 9微升(0.44mmo1) ， 10分鐘后，加入N， N-二甲基纈氨酸25. 4毫克(0. 175mmo1 )， DEPC 40. 0微升(0. 26mmo1 )。 水鹽浴l小時后，室溫反應(yīng)24小時。濃縮，加入二氯甲烷10亳升， 水洗，分別用飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗兩次，二氯甲烷層用無 水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮濾液，得淡黃色油狀液體。 MS: [M+H]+=703，純度85%。
實(shí)施例2: Me2Val-Val-MeVal-Pro-ThpPro-NHCH2C6H5( QPP-018 ) 的制備
將L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽2. 48克(15mmo1)，溶于20亳升二氯甲 烷中，水浴攪拌下加入Boc-甲基纈氨酸二環(huán)己胺鹽6. 18克(15mmo1)， 溶解。10分鐘后，加入HOBt 2. 23克(17. 5mmo1)的DMF溶液3ml， 冰浴10分鐘后，加入DIC 2. 60亳升(17. 5mmo1)。繼續(xù)保持冰浴2 小時后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮，加入乙酸乙酯50亳升，水洗一次 后，分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙酸 乙酯層用無水硫酸鈉干燥3小時。濾除干燥劑，濃縮濾液，得淡黃色 油狀物。經(jīng)硅膠柱層析(乙酸乙醋-石油醚，1: 1, Rf=0.50)，得到白色固體2. 46克(48%， 7. 2mmo1)。加入4N HCl/二氧六環(huán)約15亳 升，溶解，室溫攪拌1小時。濃縮，得白色固體。二氯甲烷溶解，冰 浴攪拌下，加入三乙胺O. 98亳升(7. Ommol), 10分鐘后，加入Boc-L-纈氨酸1. 52克(7. Ommol)，溶解。加入H0Bt 1. 04克(7. 7,ol) 的DMF溶液3亳升，冰浴10分鐘，加入DIC 1. 22亳升(7. 7mmo1)。 冰浴2小時后，室溫反應(yīng)12小時。濃縮，加入乙酸乙酯20亳升，水 洗后，分別用10%檸檬酸、飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉各洗三次，乙 酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥3小時。濾除干燥劑，濃縮濾液，得淡黃 色油狀物3. 06克(6. 94mmo1)。加入4N HCl/二氧六環(huán)約20亳升， 溶解后，室溫攪拌1小時。濃縮，得黃色油狀液體。加入甲醇溶解， 水浴攪拌下逐滴加入2N Na0H 6. 94毫升(13. 88mmo1)，冰浴反應(yīng)30 分鐘后，保持反應(yīng)液pH9 10,室溫反應(yīng)5小時。加入檸檬酸調(diào)pH ~ 7，濃縮，加入乙酸乙酯5毫升，水相于冰浴攪拌下加入檸檬酸調(diào)pH ~ 4,用乙酸乙酯萃取三次(25毫升x3)，合并乙酸乙酯層，飽和氯化 鈉洗后，無水硫酸鈉干燥。濾除干燥劑，濃縮，得淡黃色油狀物2.30 克(5.39mmo1)。
所得三肽O. 11克(0. 25mmo1) ， 二氯甲烷5毫升溶解，水浴攪拌 下加入三乙胺69. 6微升(0. 25mmo1) ， 10分鐘后，加入80。-順式-4-(N， N-四亞甲基胺基)-L-脯氨酸-千酰胺93. 7毫克(0. 25mmo1), 溶解。H0Bt 37. 1微克(0. 275mmo1)用少量DMF溶解后，加入反應(yīng)液 中。水浴10分鐘后，加入DIC 43. 3微升(0. 275mmo1)。水浴2小時 后，室溫反應(yīng)7小時。濃縮，加入二氯甲烷10亳升，水洗一次后，分 別用飽和碳酸氬鈉和飽和氯化鈉各洗三次，二氯甲烷層用無水硫酸鈉 干燥。濾除干燥劑，濃縮濾液，得黃色油狀物。加入4N HCl/二氧六 環(huán)約20毫升，溶解后，室溫攪拌l小時。濃縮，得淡黃色油狀液體。
所得四肽酰胺淡黃色油狀物40亳克(0. 059mmo1) , 二氯甲烷10 亳升溶解，水鹽浴攪拌下，加入三乙胺41.0微升(0. 35mmo1) , 10 分鐘后，加入N, N-二甲基纈氨酸8. 6亳克(0. 295mmo1) ， DEPC 27 微升(0. 177nuno1)。冰鹽浴l小時后，室溫反應(yīng)24小時。濃縮，加入二氯甲烷5毫升，水洗，分別用飽和碳酸氬鈉和飽和氯化鈉各洗三 次，二氯甲烷層用無水硫酸鈉干燥4小時。濾除干燥劑，濃縮濾液， 得淡黃色油狀液體。MS: [M+H]+=710，純度80%。
依據(jù)與實(shí)施例1或?qū)嵤├?相同或相似的方法制備得到了以下化 合物
PMI-Val- Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-OOl)分子量680純度85% PMI-Val-Ala-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-002)分子量652純度90% PMI-Val-Leu-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-003)分子量694純度85% PMI-Val-Ile-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph (QPP-004) 分子量694純度85% HIM-Leu-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH2CH2Ph ( QPP-005)分子量766純度80% HIM_Leu-Ala-MeVal-Pro-Pro-匿H2CH2Ph ( QPP-006)分子量738純度80% HIM-Leu-Leu-MeVal-Pro-Pro-NHCH2CH2Ph ( QPP-007)分子量780純度90% HIM^Leu—Ile—MeVal—Pro—Pro-NHCH2CH2Ph ( QPP-008) 分子量780純度95%
752純度90% 724純度90% 766純度90%
HIM-Leu-Va卜MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-009 )分子量 畫-Leu-Ala_MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph (QPP-010)分子量 HIM-Leu-Leu-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph (QTP-011)分子量 HIM-Leu-lie-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QTP-012 ) 分子量766純度90% Ac-N-MeVal-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-013)分子量668純度95% Boc-MeVa卜Va卜MeVal-Pro-Pro-羅H2Ph ( QPP-014)分子量726純度95% HCl.MeVal-Val-MeVal-Pro-Pro-N腦2Ph ( QPP-015)分子量762.5純度95% Me2Val-Val-MeVa1-Pro-Tic-匿H2Ph ( QPP-016 ) 分子量702純度80% Me2Val-Va卜MeVa卜Pro-DeaPro-NHCH2Ph ( QPP-017)分子量711純度85% Me2Val-Va卜MeVa1-Pro-ThpPro-NHCH2Ph ( QPP-018)分子量709純度85%C Me2Val-Va卜MeVal-Pro-MplPro-NHCH2Ph ( QPP-019)分子量725純度80% Me2Val-Va卜MeVa卜Pro-PrdPro-NHCH2Ph ( QPP-020)分子量707純度82% N-MePro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH2Ph ( QPP-021)分子量624純度95% N-MePro-Va卜MeVal-Pro-DeaPro-N腦2Ph ( QPP-022) 分子量695純度80% N-MePro-Va卜MeVa1-Pro-ThpPro-NHCH2Ph ( QPP-023 ) 分子量693純度80% Me2Val-Va1—MeVa卜Tic—Pro-匿H2C6H5 ( QPP-024)分子量702純度.-95%
19其余各化合物可依據(jù)上述方法和途徑制備而成。
實(shí)施例3: MTT顯色法檢測體外抗癌活性。 腫瘤細(xì)胞懸液的制備
取傳代培養(yǎng)72小時的K562、 0VCA2780、 Kato-III細(xì)胞抹，用0. 4% 臺盼蘭與細(xì)胞懸液l: 1 (50^1加50^1)混勻，立即按白細(xì)胞計數(shù)法 計數(shù)活細(xì)胞數(shù)，每亳升的活細(xì)胞數(shù)=計數(shù)值x5000。然后用10%小牛血 清RPMI1640液將細(xì)胞濃度調(diào)整到3. 125><105個/毫升，備用。
加樣培養(yǎng)
在無菌條件下，向96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加入以調(diào)整好的3. 125 乂105個/毫升K啦細(xì)胞懸液80^1和已設(shè)定好的本發(fā)明化合物濃度 20nl,每個化合物濃度設(shè)3~6個復(fù)孔，然后置37X:, 5%C02，飽和濕 度孵溫箱中培養(yǎng)48小時，加0. 25%MTT液20jil/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4小時， 然后加入1096SDS100nl/孔，置孵溫箱培養(yǎng)過夜。
0D值測定
將上述含有培養(yǎng)物加入SDS在孵溫箱中培養(yǎng)過夜的96孔板置多孔 掃描分光光度計Multiskan MCC/340 MKII中，選用單波長570nm測 定0D值，計算OD值的百分率及化合物IC50。
0D值(％):給化合組0D/溶劑對照組OD xioo% ICs。值是以化合物濃度對OD百分率的對數(shù)值做線性回歸后得出的。化合物號_OD值(x扭)__
K562 OVCA2780 Kato—III
QPP--0010.8063 :!O.0609*0.5713^0.0040*0.9523 :JO.0327*
QPP--0021..3020=80.00350.6473:10,.05911.0975^0.,0542
QPP--0031..0557:80.08790.3513 JO,,07350.9887勸.,0139
QPP--0041..3570氛07310.6927".,03981.1170^.0165
QPP--0050..937004060.4080.00890.8840勸.0056
QPP--0060..967004790.3886 :JO.00550.9007 JO.0193
QPP--0070.,8667 JO.01880.4223 iO.01960.8440^0.0271
QPP--0080.,8967勸.02110.4303 a.00970.8583艱0323
QPP--0090.,9517巧.02910.6267勸.01100.9720^0.0426
QPP--0100.9483 iO.01530.569302750.9853禮0133
QPP--Oil0.,7923 JO.07920.624707131.0207勸.0753
QPP--0120.,8380^0.02880.6267:10.02041.0793 iO.0392
QPP--0130.7953^0.0110*0.6572力.1308*=0.9670 A0118*
QPP--0140.7613 JO.01510.5230巧.00820.9377巧.0457
QPP--0150.6933 =0.02150.5853 100400.8610 :!O.0101
QPP--0161.,0653^0.01800.6413^0.00931.0007巧.0250
QPP--0170.7290 a.03600.4953 :tO.01990.83500240
QPP--0180.6743W.0290*0.6423^0.0475*0.73270121*
QPP--0191..3343巧.02810.6980勸.05441.1840 A0225
QPP--0201..253307650.6560:10.01051.2130 iO.0216
QPP--0250.6713^.03220.480301270.6340旬.0248
*: p <0. 05，顯示抑制胂瘤細(xì)胞生長的活性。
權(quán)利要求
1.式(I)五肽類似物或其立體異構(gòu)體X-Y-Z-L-M-N(I)其中X為L-或D-α-型-N-端單烷基或雙烷基取代的親脂性氨基酸，四氫異喹啉-3-羧酸，3，4-二氫異喹啉-3-羧酸，烷基為C1-C5的直鏈或支鏈或C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸選自Gly、Ala、Val、Leu、Nle、Ile、Pro、Tle、MeVal等；Y為L-或D-α-型親脂性天然或非天然氨基酸，如Gly、Ala、Val、Leu、Nle、Ile、Pro、Tle、MeVal等；Z為L-或D-α-型N-端單烷基取代的親脂性氨基酸，烷基為C1-C5的直鏈或支鏈或C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸為Gly、Ala、Val、Leu、Nle、Ile、Pro、Tle、MeVal等；L和M為下列L-或D-α-型氨基酸中的任意兩個或部分自身組合N原子在四～七元環(huán)上的氨基酸，3，4-二氫異喹啉-3-羧酸，四氫異喹啉-3-羧酸，反式或順式-4-取代-脯氨酸，取代基為羥基、鹵素、硝基、氨基、C1-C6直鏈或支鏈烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C5烷氧基、氨基、C1-C5酰胺基、二(C1-C6直鏈或支鏈烷基)胺基、C3-C7環(huán)烷胺基、含氧、硫、氮原子的C3-C7環(huán)烷胺基；N為脂肪胺或芳香胺衍生物，取代或未取代的肼或肟。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其中X為L-或D-a-型-N-端單烷基或雙烷基取代的親脂性氨基酸，四 氫異喹啉-3-羧酸，3, 4-二氫異喹啉-3-羧酸，烷基為C廣Cs的直鏈或 支鏈，或?yàn)镃3-C7元環(huán)狀烷基；親脂性氨基酸為Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；Y為L-或D-a-型親脂性天然或非天然氨基酸，且選自Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；Z為L-或D-a-型N-端單烷基取代的親脂性氨基酸，烷基為C廣Cs 的直鏈或支鏈、C3-C7元環(huán)狀烷基，親脂性氨基酸為Gly、 Ala、 Val、 Leu、 Nle、 Ile、 Pro、 Tle、 MeVal等；L和M為下列L-或D-ct-型氨基酸中的任意兩個或部分自身組合 N原子在四~七元環(huán)上的氨基酸，3， 4-二氬異喹啉-3-羧酸，四氳異 喹啉-3-羧酸，反式或順式-4-取代-脯氨酸，取代基為羥基、卣素、硝 基、氨基、d-Cs直鏈或支鏈烷基、C廠C7環(huán)烷基、d-Cs烷氧基、氨基、 d-Cs酰胺基、二 ( C廣C6直鏈或支鏈烷基)胺基、C3-C7環(huán)烷胺基、含氧、 硫、氮原子的Cg-C7環(huán)烷胺基；N為脂肪胺或芳香胺衍生物，取代或未取代肼或?qū)ⅰ?br> 3.式(I)五肽類似物或其立體異構(gòu)體衍生物的制備方法，其包括1) 將化合物Boc-L-0H與M-0P在DMF， DCM， TEA, DIC-麗t中 反應(yīng)，其中L， M如權(quán)利要求2中定義，P為CH烷基，生成Boc-L-M-0P;2) 將1)中所得產(chǎn)物在鹽酸/二氧六環(huán)中脫去氨基保護(hù)基，生成 L-M-0P;3) 將2 )中產(chǎn)物L(fēng)-M-0P與Boc-Z-0H在DMF， DCM, TEA, DIC-H0Bt 中反應(yīng)，生成Boc-Z-L-M-0P,所得產(chǎn)物如2)中所述進(jìn)行反應(yīng)，生成 脫去氨基保護(hù)基的Z -L-M-0P;4) 將3 )中產(chǎn)物Z-L-M-0P與Boc-Y-0H在DMF， DCM, TEA, DIC-H0Bt 中反應(yīng)，生成Boc-Y-Z-L-M-0P。5) 將4)中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-0P在氫氧化鈉/甲醇溶液中皂化， 然后用檸檬酸酸化，生成Boc-Y-Z-L-M-0H;6) 將5)中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-0H與N-N服在DCM, DIC-H0Bt中 反應(yīng)，生成Boc-Y-Z-L-M- N;7) 將6 )中產(chǎn)物Boc-Y-Z-L-M-N如2 )中所述進(jìn)行反應(yīng)，生成脫 去氨基保護(hù)基的Y-Z-L-M-N;8) 將7)中產(chǎn)物與X-0H在DCM, TEA, DEPC中反應(yīng)，生成式IX-Y-Z-L-M-N;
4. 一種藥物組合物，其包括至少一種式(I)五肽類似物或其立 體異構(gòu)體及藥用載體或賦形劑。
5. 式(I)五肽類似物在制備用于治療癌癥藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抗腫瘤活性的五肽衍生物，其制備方法，含它們的藥物組合物及它們在治療癌癥中的用途。
文檔編號C07K7/00GK101525374SQ20091000549
公開日2009年9月9日 申請日期2002年7月10日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月10日
發(fā)明者劉克良, 孟慶國, 梁遠(yuǎn)軍, 趙修南, 郄建坤 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所