專利名稱：3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；擒罩委熞钟舭Y的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及小分子酚型糖苷類化合物3-乙氧羰基苯基-β-D-?；擒占捌淇伤幱名}、酯及其溶劑化物用于制備治療抑郁癥的用途。
背景技術(shù)：
抑郁癥(expression)是情感性精神障礙(mood disorders)的主要類型，是一種 以顯著而持久的心境低落為主要特征的綜合征，臨床表現(xiàn)為情緒低落、悲觀、睡眠障礙等， 嚴(yán)重者常有自傷沖動(dòng)或自殺念頭?，F(xiàn)在臨床治療抑郁癥的首選藥物為選擇性5-HT再攝取抑制劑(selective serotonin reuptakeinhibitors, SSRIs),如氣西汀(fluoxetine)> 中白羅西汀 (paroxetine)、舍曲林(sertraline)和西酞普蘭(citalopram)等，其特點(diǎn)是特異性阻斷 5-HT再攝取，而對(duì)腦內(nèi)其他神經(jīng)遞質(zhì)受體親和力很低，與一般經(jīng)典的抗抑郁藥相比毒副反 應(yīng)較小；但其起效時(shí)間仍較長(zhǎng)，且在臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在維持治療期間使用SSRIs的病人 9-57%抑郁癥狀復(fù)發(fā)。參考文獻(xiàn)見鄭敏玲，黃翔宇，周敏等.廣州市抗抑郁藥的用藥趨勢(shì)及 發(fā)展[J].中國(guó)新藥雜志.2003，12 (3) =224-226.隨著抗抑郁西藥副作用的顯現(xiàn)及近年來人們“回歸自然”理念的形成，研究者們愈 來愈重視從天然植物中尋找、研制和開發(fā)治療抑郁癥的理想藥物。目前國(guó)外研究較多的是 金絲桃素-貫葉連翹提取物；國(guó)內(nèi)研究者也證明許多復(fù)方、單方、植物有效成分對(duì)抑郁有治 療作用。參考文獻(xiàn)見袁長(zhǎng)春，袁花.抗焦慮與抗抑郁的天然藥物研究進(jìn)展[J].中國(guó)民族民 間醫(yī)藥，藥物研究篇.2009，22-25。但總的說來，目前臨床應(yīng)用的藥物在藥效、副反應(yīng)控制、 成癮性控制方面仍未能達(dá)到滿意效果，需要進(jìn)行進(jìn)一步的研發(fā)和改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提出一種3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；擒罩委熞钟舭Y的用途，所涉及 的化合物3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；擒帐且孕》肿臃有蕴擒仗炻樗睾投垢諡槟?體衍生而得的結(jié)構(gòu)類似物。所說的3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；擒瞻ㄆ淇伤幱名}、酯或溶劑化物，它們 在制備用于治療抑郁的藥物中的用途；其中，糖基部分為羥基全乙?；娜我膺拎腔蛘?呋喃糖，代表化合物為3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；咎擒?，自編號(hào)為ΧΗ016，化學(xué)結(jié)構(gòu)式
如下
<formula>formula see original document page 3</formula>
該化合物為米色粒狀結(jié)晶，無特殊氣味。水、乙醇、二甲亞砜中完全溶解，甲醇中部 分溶解；乙醚中不溶。豆腐果苷(helicid，對(duì)甲醛基苯-Ο-β-D-阿洛吡喃糖苷)化學(xué)結(jié)構(gòu)與天麻苷 (gastrodin，對(duì)羥甲基苯-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷)相似，其結(jié)構(gòu)式見下圖。該二種化合物
有類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，都為β “型吡喃糖苷，區(qū)別在于糖基和官能團(tuán)的不同。
<formula>formula see original document page 4</formula>關(guān)于天麻素和豆腐果苷抗抑郁作用的研究結(jié)果顯示，該二化合物在小鼠抗抑郁模 型中體現(xiàn)了溫和恒定的抗抑郁作用；安全有效，連續(xù)服用未發(fā)現(xiàn)中毒或其它副反應(yīng)。其缺點(diǎn) 是起效緩慢、作用強(qiáng)度較弱、給藥量較大、生物利用度較低等。參考文獻(xiàn)見楊蓉，肖涵，戴曉 暢.豆腐果苷抗抑郁作用研究[J].中藥藥理與臨床，2007 23(6) =22-23.、段玲燕，肖涵， 袁燕等.豆腐果苷抗抑郁作用的初步研究[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥.2008，10 (3) :107-108.、謝 笑天，李海燕，王強(qiáng)，鄭萍.天麻化學(xué)成分研究概況[J].云南師范大學(xué)學(xué)報(bào).2004，23 (3) 22-25.和段玲燕.以豆腐果苷為代表的小分子酚性單糖苷化合物抗抑郁活性篩選研究 [D],云南大學(xué).2008。本發(fā)明以天麻素和豆腐果苷為參照，對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，并對(duì)該類類似物的 神經(jīng)藥理活性進(jìn)行篩選，得到了具有更好抗抑郁活性的結(jié)構(gòu)類似物ΧΗ016。本發(fā)明提供了經(jīng)過結(jié)構(gòu)優(yōu)化的小分子酚性糖苷化合物3-乙氧羰基苯基-D-乙 ?；擒沼糜谥苽渲委熞钟舭Y疾病的藥物的用途。本發(fā)明所述化合物用于治療抑郁癥，代表化合物3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；?木糖苷(ΧΗ016)在兩個(gè)抑郁行為模型上，KM種屬小鼠單次灌胃給藥45mg/Kg均體現(xiàn)出切實(shí) 的抗抑郁效果；其抗抑郁效果高于等量豆腐果苷。對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的測(cè)定也表明，該有效劑 量點(diǎn)沒有體現(xiàn)出干擾受試動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)的效果。綜上所述，XH016能成為有效的抗抑郁前藥。目前，沒有查到該化合物應(yīng)用于抗抑郁治療研究的報(bào)告。


圖1是本發(fā)明中小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)?zāi)荏w現(xiàn)抗抑郁活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線。圖2是本發(fā)明中小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)?zāi)荏w現(xiàn)抗抑郁活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線。圖3是本發(fā)明中小鼠開野實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線。
具體實(shí)施例方式具體藥理實(shí)驗(yàn)如下一.受試藥物名稱3-乙氧羰基苯基- β -D-乙酰化木糖苷(ΧΗ016)。
受試化合物，由本研究自行合成提供，于受試前以混懸劑研磨混懸。二 .模型及對(duì)照藥物鹽酸丙米嗪(Imiprominehydrochloride, IMI)，Sigma 公司產(chǎn)品，貨號(hào)(Lot) 105K1319 ；天麻素(Gastrodine，GAS)，昆明制藥廠，批號(hào)200610036 ；豆腐果苷(Helicid，HEL)，云南玉溪萬方天然藥物有限公司產(chǎn)品，批號(hào)040701 ；混懸劑0. 02%羧甲基纖維素鈉水溶液(CMC-Na)；空白溶劑為混懸劑。陽性對(duì)照藥物丙咪嗪濃度均為7. 5mg/Kg，糖苷類藥物濃度均 為45mg/Kg。給藥體積均為20mL/Kg BW。三.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物KM(昆明種)小鼠，普通級(jí)，孓體重18 22g，由昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(昆明 醫(yī)學(xué)院，趙家堆，昆明)提供，許可證號(hào)SCXK (滇)2008-2011。小鼠分籠飼養(yǎng)，每籠10只，除實(shí)驗(yàn)造模特殊要求外均自由飲水、進(jìn)食，飼養(yǎng)室溫 20 士 2°C，相對(duì)濕度60 士 10 %，保持12h/12h晝夜節(jié)律。每次實(shí)驗(yàn)小鼠均在適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境七天后用于實(shí)驗(yàn)，禁食不禁水18h后隨機(jī)分為 空白對(duì)照組、陽性對(duì)照組和待測(cè)組，每組至少10只動(dòng)物。四.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS 13. 0統(tǒng)計(jì)軟件包作為統(tǒng)計(jì)工具，觀測(cè)結(jié)果采用x 2檢驗(yàn)(Chi-Square) 比較其組間差異；其余全部數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(One-wayANOVA)，其中方差齊性者采 用Durmett法，方差不齊者采用Darmett's T3法檢驗(yàn)組間差異的顯著性。數(shù)據(jù)結(jié)果以平均 值士標(biāo)準(zhǔn)差( 士 s)表示，以P < 0. 05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，記為“*” ;Ρ < 0. 01為有極顯著 意義，記為“**”。五·藥物評(píng)價(jià)模型采用兩個(gè)行為模型一小鼠懸尾模型(tail suspension test in mice，TST)和小 鼠強(qiáng)迫游泳模型(forced swimming test in mice, FST)對(duì)化合物XHO16的抗抑郁效果進(jìn) 行驗(yàn)證。采用曠野模型進(jìn)行了 XH016對(duì)動(dòng)物體中樞神經(jīng)不良反應(yīng)的測(cè)試。實(shí)驗(yàn)在早晨8點(diǎn) 半至中午2點(diǎn)之間進(jìn)行，每只動(dòng)物只用一次。具體操作方法見下。A 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)(Tail suspension test in mice, TST)參考資料見 Steru L, Chermat R, Thierry B, Simon P. The tail suspension test :A new methodfor screening antidepressant activity in mice[J]. Psychopharmacology, 1985,85 :367_370o每組小鼠至少10只。受試藥單次給藥，小鼠按體重隨機(jī)分組后，禁食16h，于開始 記錄前l(fā)h，各組分別灌胃相應(yīng)濃度的混懸溶劑或受試藥混懸液，溶劑為0. 02% CMC-Na ；陽 性對(duì)照藥IMI均于開始觀察前30min單次腹腔注射給藥，溶劑為20°C蒸餾水。實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用醫(yī)用膠布將小鼠尾在距尾尖約2cm處粘在自制懸尾箱的水平橫桿上，使動(dòng)物成倒掛狀態(tài)，其頭部離桌面約5cm，背向觀測(cè)者以降低外界影響。實(shí)驗(yàn)觀察6min， 記錄并比較各組小鼠在后5min內(nèi)的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。當(dāng)小鼠處于四肢無力，自然下垂，停止 活動(dòng)2秒以上視為行為絕望狀態(tài)計(jì)量。同時(shí)觀測(cè)小鼠行為是否有異常表現(xiàn)(例如身體不正 常蜷縮、痙攣、嘶叫等)。
B 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(forced swimming test in mice, FST)參考資料見 Porsolt R, Le pichon Μ, Jalfre Μ. Depression :a new method animal modelsensitive to antidepressant treatments[J] · Nature, 1977, 266 :730 禾口 龔夢(mèng)娟，王立為，劉新民.大小鼠游泳實(shí)驗(yàn)方法的研究概況[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志.2005， 15(5) 311-314.實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠置于高30cm，直徑18cm，水深I(lǐng)Ocm的玻璃水缸中，水溫26士 1°C，觀 察小鼠6min，記錄后4min內(nèi)的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。實(shí)驗(yàn)中，各組小鼠以黑色卡紙隔開互相視線以避免干擾，實(shí)驗(yàn)完畢后以熱油汀烘 干小鼠后回籠。每組小鼠至少10只。受試藥單次給藥，小鼠按體重隨機(jī)分組后，禁食16h，于開始 記錄前l(fā)h，各組分別灌胃相應(yīng)濃度的受試藥或混懸溶劑，溶劑為0. 02% CMC-Na ；陽性對(duì)照 藥IMI均于開始觀察前30min單次腹腔注射給藥，溶劑為20°C蒸餾水。
C 開野實(shí)驗(yàn)(open field test, OFT)參考 i K Barnett S. A. The rat :A study in behavior [M]. Chicago, IL Aldine,1966. > PorsoltRD. Behacious despair[M]. Enna SJ, Malick JB, Richelson E.Antidepressants Neurochemical, behavioural and clinical perspectives. New York. Raven Press. 1981 121]禾口 Prut L, Belzung C. Theopen field as a paradigm to measure the effects of drugs onanxiety-like behaviors -.a review [J]. Eur JPharmacol，2003，46(3) :3_33.自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)屬于行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，是通過觀察固定時(shí)間內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在不受外界干擾 情況下的活動(dòng)情況，從而檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為正常與否的有效方法。本實(shí)驗(yàn)使用的小鼠自主活動(dòng)測(cè)量箱為長(zhǎng)40cm，寬40cm，高25cm的無上蓋正方塑膠 箱，下底面劃分為面積相等的25格。將單只小鼠放入自主活動(dòng)測(cè)量箱，適應(yīng)Imin后，記錄5min內(nèi)小鼠由底面中心開 始在方格中的穿越格數(shù)(locomotions，L0C0)，作為自主活動(dòng)性的指標(biāo)；每只小鼠實(shí)驗(yàn)完畢 后，都迅速清除排泄物，并用分析純醋酸的1%。水溶液擦拭開野框底面，以免嗅跡對(duì)下一只 小鼠的行為產(chǎn)生干擾。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)與空白對(duì)照組小鼠相比，IMI(陽性藥物)組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間顯著縮短(P <0. 05)，說明模型成功。對(duì)于KM種小鼠，給藥組(XH016)小鼠較空白對(duì)照組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間顯著縮短(P <0.05)。這說明，在TST模型檢測(cè)中，XH016在KM種小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)中能體現(xiàn)抗抑郁活性。 KM種小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果見附圖1。2.小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)與空白對(duì)照組小鼠相比，IMI(陽性藥物)組小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間顯著縮短(P <0.01)，說明模型成功。給藥組(XH016)小鼠較空白對(duì)照組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間顯著縮短(P < 0. 05)。這說 明，在FST模型檢測(cè)中，XH016在不同種屬小鼠中均能體現(xiàn)抗抑郁活性。KM種小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果見附圖2。3.小鼠自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)_開野實(shí)驗(yàn)對(duì)XH016進(jìn)行了 KM種種小鼠的開野實(shí)驗(yàn)研究，以確定該化合物是否具有中樞興奮 或者中樞抑制作用。KM種小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果見附圖3。由圖3可以看出，單次灌胃給予XH016對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)沒有體現(xiàn)出影響。七、結(jié)論1. 3-乙氧羰基苯基-β -D-乙?；咎擒?ΧΗ016)在KM種小鼠單次灌胃給藥情況 下，在懸尾和強(qiáng)迫游泳兩個(gè)行為學(xué)模型中內(nèi)均體現(xiàn)出較好的抗抑郁活性，抗抑郁效果優(yōu)于 母體藥物豆腐果苷；
2.對(duì)該化合物進(jìn)行開野實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，ΧΗ016沒有體現(xiàn)出中樞興奮或者中樞抑制 作用，不反應(yīng)較母體化合物豆腐果苷低。由此說明，該化合物可以制備成用于抗抑郁治療的各種劑型的藥物。
權(quán)利要求
一種3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；擒罩委熞钟舭Y的用途，所說的3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷包括其可藥用鹽、酯或溶劑化物，它們?cè)谥苽溆糜谥委熞钟舻乃幬镏械挠猛?；其中，糖基部分為羥基全乙?；娜我膺拎腔蛘哌秽?，代表化合物為3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；咎擒?，結(jié)構(gòu)式如下FSA00000127389600011.tif
全文摘要
一種3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；擒罩委熞钟舭Y的用途，所說的3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；擒瞻ㄆ淇伤幱名}、酯或溶劑化物，它們?cè)谥苽溆糜谥委熞钟舻乃幬镏械挠猛?；其中，糖基部分為羥基全乙?；娜我膺拎腔蛘哌秽牵砘衔餅?-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；咎擒眨浣Y(jié)構(gòu)式如下，本發(fā)明所述化合物用于治療抑郁癥，代表化合物3-乙氧羰基苯基-β-D-乙?；咎擒?XH016)在兩個(gè)抑郁行為模型上，KM種屬小鼠單次灌胃給藥45mg/Kg均體現(xiàn)出切實(shí)的抗抑郁效果；其抗抑郁效果高于等量豆腐果苷。對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的測(cè)定也表明，該有效劑量點(diǎn)沒有體現(xiàn)出干擾受試動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)的效果。
文檔編號(hào)A61K31/7034GK101829127SQ20101017542
公開日2010年9月15日 申請(qǐng)日期2010年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日
發(fā)明者戴曉暢, 李萍, 楊蓉, 肖涵 申請(qǐng)人:云南大學(xué)