專利名稱：銀杏內(nèi)酯b的水溶性氨基酸酯衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯的衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽， 以及含有這些化合物作為活性成分的藥物組合物，以及所述化合物及藥物組合物作為心腦 血管疾病治療藥物的用途。
背景技術(shù)：
銀杏內(nèi)酯B是迄今發(fā)現(xiàn)的最強的血小板活化因子拮抗劑之一，可在臨床上用于治 療血栓、急性胰腺炎和心血管疾病，對損傷神經(jīng)元也有保護作用，同時具有抗氧化，延緩衰 老的作用。但是，由于銀杏內(nèi)酯B水溶性差，限制了其臨床應(yīng)用。 銀杏內(nèi)酯B

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及由結(jié)構(gòu)式I所示的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯的衍生物及其非毒性藥學(xué)上 可接受的鹽，以及含有這些化合物作為活性成分的藥物組合物，以及所述化合物及藥物組 合物作為心腦血管疾病治療藥物的用途。因此，本發(fā)明的第一個方面提供了式I所代表的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯的衍生物 及其可藥用鹽 式I中，~、A2為H、甘氨酰、L-丙氨酰、L-亮氨酰、L_纈氨酰、L_異亮氨?；騆_苯 氨酰等氨基酸的殘基；ApA2相同或不同，但是~、弋不能同時為11。本發(fā)明的第二個方面涉及藥物組合物，其包括至少一種式I所代表的銀杏內(nèi)酯B 的氨基酸酯的衍生物及其可藥用鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。本發(fā)明的第三個方面涉及式I所示的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥 學(xué)上可接受的鹽，以及包含式I所示的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可 接受的鹽作為活性成分的藥物組合物作為心腦血管疾病治療藥物的用途。本發(fā)明中的術(shù)語“可藥用鹽”可以是藥用無機或有機鹽。本發(fā)明式I所代表的化 合物可以與無機酸形成藥用鹽，例如硫酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽；也可與有機酸形成 藥用鹽，例如乙酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對甲苯磺酸鹽、 甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽等。選擇和制備適當(dāng)?shù)柠}是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知技 術(shù)。本發(fā)明化合物或其可藥用鹽可以形成溶劑化物，例如水合物、醇合物等；選擇和制 備適當(dāng)?shù)娜軇┗锸潜绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知技術(shù)。本發(fā)明化合物或其可藥用鹽可以單獨或以藥物組合物的形式給藥。本發(fā)明藥物組 合物可根據(jù)給藥途徑配成各種適宜的劑型。使用一種或多種生理學(xué)上可接受的載體，包含 賦形劑和助劑，它們有利于將活性化合物加工成可以在藥學(xué)上使用的制劑。適當(dāng)?shù)闹苿┬?式取決于所選擇的給藥途徑，可以按照本領(lǐng)域熟知的常識進行制造。給藥途徑可以是口服、非腸道或局部給藥，優(yōu)選口服和注射形式給藥?？梢钥诜?藥物制劑包括膠囊劑和片劑等。病人吞咽有困難時，也可以采用舌下片或者其他非吞咽的 方式給藥。本發(fā)明化合物也可以配制用于腸胃外給藥或者透皮給藥或者經(jīng)粘膜給藥?；蛘?采用栓劑或者埋植劑的方式給藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，本發(fā)明化合物可以采用合適 的藥物釋放系統(tǒng)(DDS)以得到更有利的效果。另外需要指出，本發(fā)明化合物使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的 年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養(yǎng)狀況、化合物的活性強度、服用時間、代謝速率、病癥 的嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。
具體實施例方式
目標(biāo)化合物的合成路線如下 銀杏內(nèi)酯B在二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)及二甲基氨基吡啶(DMAP)作用下與不同 摩爾比的Boc保護的氨基酸反應(yīng)，得到Boc保護的氨基酸酯衍生物，經(jīng)硅膠柱層析分離純 化，分別得到10-0H縮合產(chǎn)物(II)、1_0H縮合產(chǎn)物(112)及1-0H, 10-0H-二縮合產(chǎn)物(113)； Ili、II2及II3分別在氯化氫作用下脫保護，得到目標(biāo)化合物。結(jié)構(gòu)式中R為氫、甲基、異丙 基、異丁基、2-甲基丙基或苯甲基等氨基酸側(cè)鏈。下面的實施例可以對本發(fā)明進行進一步的描述，然而，這些實施例不應(yīng)作為對本 發(fā)明的范圍的限制。實施例110-0-L-甘氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ila)及1-0-L-甘氨酰-銀杏內(nèi)酯 B鹽酸鹽(I2a)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、1.8g N-Boc-甘氨酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. lml 二甲氨基吡啶，2. lg 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得10-0- (N-Boc-L-甘氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIla) 2. 4g，1-0- (N-Boc-L-甘氨酰)-銀 杏內(nèi)酯B(IIla)0.8克。將2.4克10-0-(^80(-卜甘氨酰)-銀杏內(nèi)酯8(11」用10ml干燥的1，4 二氧 六環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°C，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧 六環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-甘 氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ila) 1. 3g。核磁共振氫譜5 (ppm, DMS0-d6) 1. 09 (d，3H)； 1.16(s，9H) ； 1. 92 (dd, 1H) ；2. 04 (m, 1H) ；2. 23 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H) ；3.86(s，2H) ；4. 02 (dd, 1H) ；4. 86 (d, l-H(l-OH)) ；4. 65 (d, 1H) ；5. 10 (d, 1H) ；5. 22 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H) ；6.50 (s， 1H(3-0H)) ；8. 25 (br s，2H)。將0.8克1-0-(^80(3-1^-甘氨酰)-銀杏內(nèi)酯8(111》用10ml干燥的1，4 二氧六環(huán) 溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六環(huán) 溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0-L-甘氨酰-銀 杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(I2a)0.4g。核磁共振氫譜 6 (ppm, DMS0-d6) 1. 10(d，3H) ；1. 15(s，9H)； 1. 92 (dd, 1H) ；2. 01 (m, 1H) ；2. 24 (m, 1H) ；2. 82 (q, 1H) ；3.83(s，2H) ；4. 01(dd，lH) ；4. 62 (d, 1H) ；5. 09 (d, 1H) ；5. 21 (dd, 1H) ；6. 12(s, 1H) ；6. 50 (s，1H (3—0H)) ；7. 39 (d，1H (10-0H))； 8. 21 (br s，2H)。實施例21-0，10-0_( 二-L-甘氨酰)_銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3a)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、5.4g N_BoC-甘氨酸用80ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. 3ml 二甲氨基吡啶，6. 2g 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得1-0，10-0-( 二 -N-Boc-L-甘氨酰)_銀杏內(nèi)酯B(II3a) 1. 9g。將1.9 克 1-0，10-0-( 二-N-Boc-L-甘氨酰)_ 銀杏內(nèi)酯 B(II3a)用 10ml 干燥的 1， 4 二氧六環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°C，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1， 4 二氧六環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0， 10-0-( 二-L-甘氨酰)-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3a)0.6g。核磁共振氫譜6 (ppm, DMS0_d6) 1.07(d，3H) ；1. 13(s，9H) ； 1. 90 (dd, 1H) ； 1. 99 (m, 1H) ；2. 23 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H) ；3. 82(s, 2H) ；3. 87(s，2H) ；4. 02 (dd, 1H) ；4. 65 (d, 1H) ；5. 10 (d，1H) ；5. 20 (dd, 1H) ；6. 14 (s，1H)； 6. 51(s,lH(3-0H)) ；8. 17 (br s,2H) ；8. 25 (br s，2H)。實施例310-0-L-丙氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ilb)及1_0_L-丙氨酰-銀杏內(nèi)酯 B鹽酸鹽(I2b)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、1.9g N_BoC-丙氨酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. lml 二甲氨基吡啶，2. lg 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得10-0- (N-Boc-L-丙氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (I Ilb) 2. 5g，1-0- (N-Boc-L-丙氨酰)-銀 杏內(nèi)酯B(IIlb)0. 7克。將2.5克10-0-(N-Boc-L-丙氨酰)_銀杏內(nèi)酯B(IIlb)用10ml干燥的1，4 二氧六 環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六 環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-丙氨 酰-銀杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(Ilb)1.4g。核磁共振氫譜 6 (ppm,DMS0-d6) :1.09(d，3H) ；1. 16(s,
69H) ；1.62(d，3H) ；1.93(dd，lH) ； 1. 98 (m, 1H) ；2. 23 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H) ；4. 02(dd，lH)； 4. 35 (q, 1H) ；4. 61 (d, I-H(I-OH)) ；4. 65 (d, 1H) ；5. 10 (d, 1H) ；5. 22 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H)； 6. 51(s，lH(3-0H)) ；8. 26 (br s，2H)。將0.7克1-0-(^80(3-1^-丙氨酰)-銀杏內(nèi)酯8(11113)用IOml干燥的1，4 二氧六環(huán) 溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六環(huán) 溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0-L-丙氨酰-銀 杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(I2b)0.4g。核磁共振氫譜 δ (ppm, DMS0_d6) :1· 10(d，3H) ；1. 15(s，9H)； 1.64(d，3H) ； 1. 92 (dd, 1H) ；2. 01(m, 1H) ；2. 24 (m, 1H) ；2. 82 (q, 1H) ；4. 01(dd，lH) ；4.32 (q， 1H) ；4. 62(d，lH) ；5. 09 (d, 1H) ；5. 21 (dd, 1H) ；6. 12 (s, 1H) ；6. 50 (s，1H(3_0H)) ；7. 54 (d, IH(IO-OH)) ；8. 20 (br s，2H)。實施例41-0，10-0-( 二-L-丙氨酰)_銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3b)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、5.7g N-Boc-丙氨酸用80ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. 3ml 二甲氨基吡啶，6. 2g 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得1-0，10-0-( 二 -N-Boc-L-丙氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (II3b) 1. 8g。將1.8 克 1-0，10-0-( 二-N-Boc-L-丙氨酰)_ 銀杏內(nèi)酯 B (II3b)用 IOml 干燥的 1， 4 二氧六環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°C，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1， 4 二氧六環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0， 10-0-( 二-L-丙氨酰)-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3b)O. 7g。核磁共振氫譜δ (ppm, DMS0_d6) 1.07(d，3H) ； 1.13 (s，9H) ； 1.62(d，3H) ； 1.66(d，3H) ； 1. 90 (dd, 1H) ； 1. 99 (m, 1H) ；2. 21 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H) ；4. 02(dd，lH) ；4. 33-4. 37 (m，2H) ；4. 65(d，lH) ；5. 10 (d, 1H) ；5. 20 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H) ；6. 51(s，lH(3-0H)) ；8. 15 (br s，2H) ；8. 25 (br s，2H)。實施例510-0-L-纈氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ij及1_0_L-纈氨酰-銀杏內(nèi)酯 B鹽酸鹽(12。)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、2.2g N-Boc-纈氨酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. Iml 二甲氨基吡啶，2. Ig 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得10-0- (N-Boc-L-纈氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIlc) 2. 6g，1-0- (N-Boc-L-纈氨酰)-銀 杏內(nèi)酯B(IIlc)O. 6克。將2. 6克10-0-(Ν-Boc-L-纈氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIle)用IOml干燥的1，4 二氧六 環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六 環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-纈氨 酰-銀杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(Ilc) 1.4g。核磁共振氫譜 δ (ppm,DMS0-d6) :0.98(d，6H) ； 1.09 (d， 3H) ；1.16 (s，9H) ；1. 89 (dd, 1H) ；2. 02(m，lH) ；2. 23(m，lH) ；2. 29 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H)； 4. 02 (dd, 1H) ；4. 20 (d, 1H) ；4. 61 (d，I-H(I-OH)) ；4. 65 (d, 1H) ；5. 10 (d, 1H) ；5. 22 (dd, 1H)； 6. 14 (s, 1H) ；6. 51(s，lH(3-0H)) ；8. 17 (br s，2H)。將0. 6克1-0-(Ν-Boc-L-纈氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIle)用IOml干燥的1，4 二氧六 環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六 環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0-L-纈氨酰-銀杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(I2c)O. 3g。核磁共振氫譜 δ (ppm,DMS0-d6) :L02(d，6H) ；1. 10(d, 3H) ；1.15 (s，9H) ；1. 92 (dd, 1H) ；2. 01(m，lH) ；2. 24(m，lH) ；2. 36 (m, 1H) ；2. 82 (q, 1H)； 4. 01 (dd, 1H) ；4. 25 (d, 1H) ；4. 62 (d, 1H) ；5. 09 (d, 1H) ；5. 21 (dd, 1H) ；6. 12(s，lH) ；6.50 (s， 1H(3-0H)) ；7. 46 (d，IH(IO-OH)) ；8. 26 (br s，2H)。實施例61-0，10-0-( 二 -L-纈氨酰)_銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(13。)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、6.6g N-Boc-纈氨酸用80ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. 3ml 二甲氨基吡啶，6. 2g 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得1-0，10-0-( 二 -N-Boc-L-纈氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (II3c) 1. 7g。將1.7 克 1-0，10-0-( 二-N-Boc-L-纈氨酰)-銀杏內(nèi)酯 B (II3c)用 IOml 干燥的 1， 4 二氧六環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°C，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1， 4 二氧六環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得1-0， 10-0-( 二-L-纈氨酰)-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3c)O. 8g。核磁共振氫譜δ (ppm, DMS0_d6) 0. 95-1. 03(m，12H)。1. 07 (d, 3H) ；1.13(s，9H) ； 1. 85 (dd, 1H) ； 1. 97 (m, 1H) ；2. 23 (m, 1H)； 2. 31-2. 34(m，2H) ；2. 83 (q, 1H) ；4. 02(dd，lH) ；4. 20—4. 24 (m，2H) ；4. 65(d，lH) ；5. 10 (d, 1H) ；5. 20 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H) ；6. 49 (s，1H(3_0H)) ；8. 16 (br s，2H) ；8. 23 (br s，2H)。實施例710-0-L-亮氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ild)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、2.3g N-Boc-亮氨酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. Iml 二甲氨基吡啶，2. Ig 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得10-0-(Ν-Boc-L-亮氨酰)_銀杏內(nèi)酯B(IIld) 2. lg。將2. 1克10-0-(Ν-Boc-L-亮氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIld)用IOml干燥的1，4 二氧六 環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六 環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-亮氨 酰-銀杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(Ild)L Igo 核磁共振氫譜 δ (ppm,DMS0-d6) :0.94(d，6H) ；1. 13(d, 3H) ；1. 17(s,9H) ； 1. 40 (m, 1H) ；1. 87 (dd, 1H) ； 1. 98-2. 01 (m，3H) ；2. 23 (m, 1H) ；2. 29 (m, 1H) ；2. 83 (q, 1H) ；4. 02 (dd, 1H) ；4. 20 (d, 1H) ；4. 28—4. 29 (m，2H) ；4. 67 (d, 1H) ；4.76 (d， I-H(I-OH)) ；5. 12 (d, 1H) ；5. 26 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H) ；6. 56 (s，1H(3_0H)) ；8. 17 (br s，2H)。實施例810-0-L-異亮氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ile)的制備將4. 3g銀杏內(nèi)酯B、2. 3g N-Boc-異亮氨酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. Iml 二甲氨基吡啶，2. Ig 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得10-0-(Ν-Boc-L-異亮氨酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIla) 2. 0g。將2.0克10-0-(^80(3-1^-異亮氨酰)-銀杏內(nèi)酯8(1116)用IOml干燥的1，4 二氧 六環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧 六環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-異 亮氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ile)LOgo核磁共振氫譜δ (ppm, DMS0_d6) :0.93(t，3H)； 0.98(d，3H) ；1. 14(d，3H) ；1. 17(s,9H) ； 1. 24(m,2H) ；1. 92 (dd, 1H) ；2. 03 (m, 1H) ；2. 16 (m, 1H) ；2. 21 (m, 1H) ；2. 84 (q, 1H) ；4. 05 (dd, 1H) ；4. 21(d，lH) ；4. 62 (d，I-H(I-OH)) ；4.66 (d，1H) ；5. 12 (d, 1H) ；5. 22 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H) ；6. 49 (s，1H(3_0H)) ；8. 25 (br s，2H)。實施例910-0-L-苯丙酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ilf)的制備將4.3g銀杏內(nèi)酯B、2.7g N-Boc-苯丙酸用50ml 二甲基甲酰胺溶解，然后加入 0. Iml 二甲氨基吡啶，2. Ig 二環(huán)己基碳二亞胺，室溫攪拌反應(yīng)過夜，過濾，將濾液減壓蒸干。 將殘留物用硅膠柱層析分離，用乙酸乙酯石油醚(1 4)混合溶劑洗脫，收集所需組分， 減壓蒸干，得10-0- (N-Boc-L-苯丙酰)_銀杏內(nèi)酯B (IIla) 2. 3g。將2.3克10-0-(N-Boc-L-苯丙酰)_銀杏內(nèi)酯B(IIlf)用IOml干燥的1，4 二氧六 環(huán)溶解，氮氣保護下用冰鹽浴冷卻至0°c，攪拌下緩慢滴加8ml含15%氯化氫的1，4 二氧六 環(huán)溶液，在0°C攪拌反應(yīng)1小時，再于室溫反應(yīng)3小時。過濾，用乙醚洗滌，得10-0-L-苯丙 酰-銀杏內(nèi)酯 B 鹽酸鹽(Ilf) 1.2g。核磁共振氫譜 δ (ppm,DMS0-d6) :Lll(d，3H) ；1. 14(s, 9H) ；1. 86 (dd, 1H) ；2. 07 (m, 1H) ；2. 20 (m, 1H) ；2. 81 (q, 1H) ；3. 15(d，2H) ；4. 03 (dd, 1H)； 4. 22 (t, 1H) ；4. 58 (d，I-H(I-OH)) ；4. 64 (d, 1H) ；5. 12 (d, 1H) ；5. 26 (dd, 1H) ；6. 14 (s, 1H)； 6. 59 (s, 1H(3-0H)) ； 7. 30-7. 11 (m，5H) ；8. 30 (br s，2H)。實施例10水溶解度試驗將目標(biāo)化合物定量加于0. 5ml 50mM Tris-HCl (pH 7. 4)緩沖液中，室溫攪拌1小 時，考察其溶解性。試驗結(jié)果見表1 :表1、目標(biāo)化合物的水溶解度 實施例11目標(biāo)化合物對小鼠急性缺氧缺血的影響參考文獻(陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).人民衛(wèi)生出版社，783 784)，取檢疫合 格小鼠，隨機分組，每組10只，早$各半。將待測化合物配成羧甲基纖維素鈉的懸浮液，灌 胃給藥，每12小時1次，連續(xù)3天。末次給藥30min后，分別將各組動物逐只斷頭，立即按 秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止的時間作為喘息時間，計算小鼠斷頭后喘息時間和呼 吸次數(shù)。結(jié)果見表2:表2目標(biāo)化合物對小鼠急性缺氧缺血的影響( 土 S ) *折算為銀杏內(nèi)酯B的量實施例12目標(biāo)化合物對大鼠局灶性腦缺血再灌注的影響取檢疫合格大鼠，隨機分組，每組10只，早$各半。將待測化合物配成羧甲基纖維 素鈉的懸浮液，灌胃給藥，每12小時1次，連續(xù)3天。末次給藥30min后，末次給藥30min， 參照文獻(1、羅祖明，董佑忠，彭國光.腦血管疾病治療學(xué).第一版，北京人民衛(wèi)生出版 社，1999，126-127 ;2、張均田.現(xiàn)代藥理實驗方法.第一版，北京人民衛(wèi)生出版社，1999， 1241-1242)。采用線栓法造成大鼠大腦中動脈阻斷模型。大鼠ip水合氯醛350mg/kg麻 醉，頸部正中切口，分離右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈和頸外動脈，在距頸動脈分叉5mm處雙線 結(jié)扎頸外動脈，并結(jié)扎頸總動脈近心端。在靠近動脈分叉的頸總動脈壁上剪一小口，插入
10直徑約為0. 2mm的漁線(經(jīng)硅酮處理)，經(jīng)頸內(nèi)動脈進入大腦中動脈起始部，插入線長約為 17. 5士0. 5mm,同時有明顯阻力感，以阻斷大腦中動脈的血流，結(jié)扎頸內(nèi)動脈及漁線。Ih后， 拔出漁線。假手術(shù)對照組除不插入漁線外，其他手術(shù)步驟同手術(shù)組。術(shù)后24h，按Bederson的方法對動物的行為缺陷進行分級評分，標(biāo)準(zhǔn)如下0級 未觀察到大鼠神經(jīng)癥狀；1級提尾懸空時，動物的手術(shù)對側(cè)前肢表現(xiàn)為腕肘屈曲，肩內(nèi)旋， 肘外展，緊貼胸壁；2級將動物置于光滑平面上，推手術(shù)側(cè)向?qū)?cè)移動時，阻力降低；3級 動物自由行走時向手術(shù)對側(cè)環(huán)轉(zhuǎn)或轉(zhuǎn)圈；4級軟癱，肢體無自發(fā)活動。動物評分后，腹主動 脈取血，取大腦稱重。將大腦平均分為5片，取第二腦片組織常規(guī)脫水，石蠟包埋制片，HE染 色，光學(xué)顯微鏡下觀察腦病理組織學(xué)變化；其余四片置入2%氯化三苯基四氮唑磷酸緩沖 液中，37°C恒溫水浴中孵育20min，取未紅染部分為缺血區(qū)，將其用小刀剔出，稱重。計算腦 系數(shù)和腦梗塞指數(shù)(腦梗塞指數(shù)=腦梗塞重量/腦重量X 100% )。結(jié)果見表3:表3目標(biāo)化合物對大鼠局灶性腦缺血再灌注的影響( 土 S ) *折算為銀杏內(nèi)酯B的量
權(quán)利要求
式I所示的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽式I中，A1、A2為H、甘氨酰、L-丙氨酰、L-亮氨酰、L-纈氨酰、L-異亮氨酰或L-苯氨酰等氨基酸的殘基；A1、A2相同或不同，但是A1、A2不能同時為H。F2009101366052C0000011.tif
2.權(quán)利要求1的式I所代表的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯衍生物或其可藥用鹽，選自 10-0-L-甘氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ila)；I-O-L-甘氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I2a)；1-0，10-0- ( 二 -L-甘氨酰)_銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3a)；10-0-L-丙氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ilb)；1-0-L-丙氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I2b)；1-0，10-0- ( 二 -L-丙氨酰)_銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3b)；10-0-L-纈氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(IJ ；1-0-L-纈氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(12。)；1-0，10-0-( 二 -L-纈氨酰)-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(I3c)；10-0-L-亮氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ild)；10-0-L-異亮氨酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(IJ和10-0-L-苯丙酰-銀杏內(nèi)酯B鹽酸鹽(Ilf)。
3.藥物組合物，其包括至少一種式I所代表的丙泊酚的氨基酸酯衍生物或其可藥用鹽 以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
4.權(quán)利要求1所述的式I所代表的丙泊酚的氨基酸酯衍生物或其可藥用鹽，以及含有 式I所代表的丙泊酚的氨基酸酯衍生物或其可藥用鹽作為活性成分的藥物組合物作為心 腦血管治療藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I所示的銀杏內(nèi)酯B的氨基酸酯的衍生物及其可藥用鹽，以及含有這些化合物作為活性成分的藥物組合物，以及所述化合物及藥物組合物作為心腦血管疾病治療藥物的用途。式I中，A1、A2為H、甘氨酰、L-丙氨酰、L-亮氨酰、L-纈氨酰、L-異亮氨酰或L-苯氨酰等氨基酸的殘基；A1、A2相同或不同，但是A1、A2不能同時為H。
文檔編號A61K31/365GK101880286SQ20091013660
公開日2010年11月10日 申請日期2009年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月8日
發(fā)明者徐 明, 楊振強 申請人:北京美倍他藥物研究有限公司