專利名稱：：一種治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及種用于治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，確切地說，是一種用于治療骨關(guān)節(jié)炎的中藥組合物，以及該中藥組合物的制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法。屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：骨關(guān)節(jié)炎又稱"骨關(guān)節(jié)病"、"骨關(guān)節(jié)退行性改變"、"骨質(zhì)增生"等，俗稱"骨刺"。本病是臨床常見病、多發(fā)病，主要發(fā)生在50歲以上的老年人，隨著年齡的增長(zhǎng)，本病的發(fā)病率越高，有人統(tǒng)計(jì)55歲以上年齡組發(fā)生率高達(dá)80%，但有癥狀和活動(dòng)障礙者只占1/8。女性多見，女:男約為2:1。本病的病因與年齡、肥胖、職業(yè)及遺傳等因素有關(guān)。其病理特點(diǎn)為關(guān)節(jié)軟骨損傷、關(guān)節(jié)邊緣和軟骨下骨反應(yīng)性增生，主要表現(xiàn)為緩慢發(fā)展的關(guān)節(jié)疼痛、僵硬、腫大伴活動(dòng)受限，骨關(guān)節(jié)炎多發(fā)生于負(fù)重的關(guān)節(jié)如頸椎、腰椎和膝關(guān)節(jié)等。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一是提供一種用于治療或改善骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物；目的之二是提供該藥物組合物的制備方法；目的之三是提供其質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明的目的之一是通過如下技術(shù)手段實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明提供一種藥物組合物，該藥物組合物的有效成分是由如下原料藥制成的牛膝150210重量份桂枝70110重量份杜仲100140重量份肉蓯蓉100140重量份雪蓮2535重量份防風(fēng)70110重量份龜甲100140重量份赤芍70110重量份甘草4575重量份。其原料藥的比例可以優(yōu)選為杜仲120重量份鹿鶯60重量份赤芍90重量份鹿茸4575重量份當(dāng)歸70110重量份知母4575重量份石斛70110重量份木瓜70110重量份牛膝180重量份雪蓮30重量份石斛90重量份知母60重量份也可以優(yōu)選為牛膝162重量份桂枝90重量份防風(fēng)90重量份當(dāng)歸90重量份甘草60重量份(肉蓯蓉120重量份龜甲120重量份木瓜90重量份桂枝84重量份杜仲108重量份肉蓯蓉108重量份雪蓮30重量份防風(fēng)84重量份鹿茸60重量份龜甲108重量份石斛84重量份當(dāng)歸84重量份赤芍84重量份木瓜84重量份知母60重量份甘草60重量份。依據(jù)骨關(guān)節(jié)炎的臨床表現(xiàn)，骨關(guān)節(jié)炎應(yīng)屬中醫(yī)學(xué)"痹證"、"骨痹"、"腰痛"等病的范疇，因而上述組方體現(xiàn)了補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)壯筋骨以治本，祛風(fēng)散寒、除濕通絡(luò)以治其標(biāo)的原則。方中以牛膝、杜仲為君藥。牛膝入腎經(jīng)，為補(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝之要藥，又能祛瘀通利關(guān)節(jié)。杜仲入肝腎經(jīng)，能補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋健骨，專治肝腎不足引起的腰膝疼痛痿軟無力癥，牛膝、杜仲相伍，補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨，以治其本。杜枝、雪蓮、肉蓯蓉、鹿茸為木方之臣藥。其中桂枝辛濕祛風(fēng)散寒，通絡(luò)止痛。雪蓮花生于雪線以上，其性溫?zé)幔侵委熀躁P(guān)節(jié)冷痛之良藥。肉蓯蓉甘酸咸溫，既能補(bǔ)腎溫陽，又能益髓生津，治腎虛骨弱、腰膝冷痛。鹿茸壯元陽、生精髓、強(qiáng)筋骨。龜甲、當(dāng)歸、赤芍、防風(fēng)、木瓜、石斛、知母為佐。其中，龜甲咸甘而平、益腎健骨，治腰膝酸軟，筋骨不健。痹證日久、氣血不利，多兼血瘀，需活血通絡(luò)以削除血瘀，故用當(dāng)歸，甘苦平溫，補(bǔ)血和血，養(yǎng)血柔筋、活血止痛。赤芍苦微寒，活血止痛。防風(fēng)辛甘微溫，祛風(fēng)勝溫，與桂枝等合用以散風(fēng)寒濕邪。石斛甘微寒，能生津益胃顧護(hù)中焦，亦能補(bǔ)腎養(yǎng)陰除痹。木瓜酸溫，化濕活絡(luò)，舒盤緩急以緩關(guān)節(jié)疼痛，屈伸不利。知母苦寒滋腎清熱以制約本方溫?zé)嶂?。甘草廿平，調(diào)和諸藥，為本方之使藥。本方諸藥合用共奏補(bǔ)益肝腎，強(qiáng)壯筋骨，祛風(fēng)散寒，除濕通絡(luò)之效。所述原料藥中牛膝，為莧科植物牛膝AchyranthesbidentataBL.的干燥根；桂枝，為樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥嫩枝；杜仲，為杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥樹皮；肉蓯蓉，為列當(dāng)科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖;雪蓮，為菊科植物綿頭雪蓮花Saussuraealanip印sIIancHfazz的干燥帶花全草，主要產(chǎn)地新疆；本品應(yīng)符合北京市中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)2000年版雪蓮花項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定；防風(fēng)，為傘形科植物防風(fēng)Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.的干燥根;鹿駕，為鹿禾斗動(dòng)物梅花鹿CervusnipponTe誦inck或馬鹿CervuselaphusLinnaeus的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角；龜甲，為龜科動(dòng)物烏龜Chinemysreevesii(Gray)的背甲及腹甲；石斛，為蘭科植物環(huán)草石斛DendrobiumloddigesiiRolfe.、馬鞭石斛Dendrobi咖fimbriatumHook.var.oculatumHook.、黃草石角斗DendrobiumchrysanthumWall.、鐵皮石角斗DendrobiutncandidumWall,exLindl.或金纟叉石角斗DendrobiumnobileLi_ndl.的新國(guó)鮮或干燥莖；當(dāng)歸，為傘形科植物當(dāng)歸Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根；赤芍，為毛茛科植物芍藥PaeonialactifloraPall.或川赤芍PaeoniaveitchiiLynch的干燥根；木瓜，為薔薇科植物貼梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果實(shí)；知母，為百合科植物知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.的干燥根莖；甘草，為豆禾斗植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根及根莖。上述藥物組合物配以相應(yīng)輔料，被制成多種劑型應(yīng)用于臨床，如顆粒劑、膠囊劑、片劑等。本發(fā)明的另一目的即提供本發(fā)明藥物組合物的制備方法，該方法的步驟為A、取上述原料藥，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；B、將石斛、雪蓮加濃度為50%80%乙醇提取13次，每次12小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至清膏，備用；C、將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油，水液另存，收集揮發(fā)油，備用；D、將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮13次，每次12小時(shí)，濾過，合并煎液，加入C中提油后的水液，濃縮，加乙醇調(diào)至含醇量60%75%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與B中備用清膏合并，繼續(xù)濃縮成稠膏，干燥，粉碎，與步驟A中鹿茸細(xì)粉及C中所得揮發(fā)油混合后，加入常規(guī)制劑輔料，按照常規(guī)制劑工藝，制成臨床所需劑型。在上述步驟C中所得揮發(fā)油，既可以按照步驟D的方法直接入藥使用，也可以先按以下任一方法處理后再按步驟D的方法使用A、將揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精和水，按l:79:7090的比例混合，于5565'C下攪拌13小時(shí)，冷藏，濾過，低溫干燥，制成揮發(fā)油的倍他環(huán)糊精包合物；B、將揮發(fā)油溶于足量的無水乙醇中，制得揮發(fā)油的乙醇溶液。經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)明人提供了將該藥物組合物制成多種劑型的方法，其中膠囊劑的制備方法為-A、取上述原料藥，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；B、將石斛、雪蓮加70%乙醇提取3次，每次加5倍量，提取2小時(shí)，濾過，合并濾液，9回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.02-1.05(60'C測(cè))的清膏，備用；C、將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油8小時(shí)，水液另存；將所得揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精、水按1:8:80比例混合，在6(TC條件下攪拌2小時(shí)，冷藏，濾過，低溫T燥，得揮發(fā)油包合物，備用；D、將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮3次，每次加水8倍量，煎煮l小時(shí)，濾過，合并煎液，加入步驟C中提油后的水液，濃縮至相對(duì)密度l.10-1.12(6(TC測(cè))，加乙醇調(diào)至含醇量70%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與步驟B屮備用清膏合并，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.25(6(TC測(cè))的稠膏，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，和步驟A中鹿茸細(xì)粉及C中揮發(fā)油包合物混合后，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)制劑工藝，制成膠囊劑。最后，發(fā)明人還提取了該藥物組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中除中國(guó)藥典規(guī)定的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目外，還包含該藥物組合物的含量測(cè)定方法和定性鑒別方法。具體地說，含量測(cè)定方法以正丁醇提取物含量為指標(biāo)，步驟為稱取該藥物組合物25g,精密稱定，置100iiil錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸l(wèi)h,放冷后取下錐形瓶，密閉，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于干燥恒重蒸發(fā)皿屮，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得；該藥物組合物中含正丁醇提取物應(yīng)不少于8.0%。定性鑒別方法則包括如下檢測(cè)項(xiàng)目a、取所述藥物組合物35g，加70%90%乙醇3050ml,回流2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%90%乙醇121111使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加70%90%乙醇溶解制成每lml含46mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各510u1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為810:13:0.40.6的甲醇水醋酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取所述藥物組合物35g，加水3050ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取23次，每次2030ml，合并提取液，蒸千，殘?jiān)右掖?530ml使之溶解，加鹽酸24ml，加熱回流12小時(shí)后水液濃縮至1015ml，加水至1525ml，加苯3050ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?3ml溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每lml含46mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各38"1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為90100:46的氯仿乙醇混合液為展開劑展開，取出晾10干；將濃硫酸以水稀釋至原體積的10/7倍，按0.40.6:46的體積比與含8%香草醛的無水乙醇溶液混合，噴于展開板上，在IO(TC加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c、取所述藥物組合物35g，加乙醇3050ml，回流提取12小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?2ml使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lml含13mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各35ti丄，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為3842:46:812:0.10.3的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d、取所述藥物組合物35g，用2040ml水溶解，再用乙酸乙酯提取23次，每次2030ml，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5%乙醇13ml溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材13g同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各35w1，分別占于同一硅膠G薄層板上，以體積比為810:1的正己完乙酸乙酯混合液為展丌劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)；e、取所述藥物組合物35g，加水3050ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取23次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?530ml使之溶解，加鹽酸24ml，加熱回流12小時(shí)后水液濃縮至1015ml，加水至1525ml，加苯3050ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖絣3ral溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含35mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各3l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為810:1的氯仿丙酮混合液為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。如對(duì)本發(fā)明藥物組合物的膠囊劑進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，除應(yīng)滿足中國(guó)藥典規(guī)定的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目外，還應(yīng)滿足以下檢測(cè)要求正丁醇提取物的含量測(cè)定精密稱取膠囊劑內(nèi)容物3g，置100ml錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh,連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸l(wèi)h，放冷后取下錐形瓶，密閉，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于干燥恒重蒸發(fā)肌中，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得；膠囊劑內(nèi)容物中含正丁醇提取物不少于8.0%;定性鑒別a、取膠囊內(nèi)容物5g，加80^乙醇40ml，回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%乙醇lml使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加80%乙醇溶解制成每lml含5呢的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5u1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為9:2:0.5的甲醇:水醋酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取膠囊內(nèi)容物5g，加水40ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸2ml，加熱回流1小時(shí)后水液濃縮至10ml，加水至20ml，加苯40ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ral溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為95:5的氯仿乙醇混合液為展開劑展開，取出晾干；將濃硫酸以水稀釋至原體積的10/7倍，按0.5:5的體積比與含8%香草醛的無水乙醇溶液混合，噴于展開板上，在IO(TC加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c、取膠囊內(nèi)容物2.5g，加乙醇40ml，回流提取l小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖紒Aml使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為40:5:10:0.2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d、取膠囊內(nèi)容物5g，用30ml水溶解，再用乙酸乙酯提取3次，每次2030ml，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5%乙醇lml溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材lg同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別占于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己完乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)；e、取膠囊內(nèi)容物5g，加水40ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸2ml，加熱回流1小時(shí)后水液濃縮至10ml，加水至20ml，加苯40ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ml溶解，作為供試品溶液；取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各5n1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的氯仿丙酮混合液為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置h，顯相同顏色的斑點(diǎn)。本發(fā)明藥物組合物具有補(bǔ)益肝腎，強(qiáng)壯筋骨，祛風(fēng)散寒，除濕通絡(luò)的功效，用于痹癥肝腎虧虛，風(fēng)寒濕痹阻證，癥見關(guān)節(jié)冷痛，喜暖畏寒，屈伸不利，勞累后加重，腰膝酸軟，舌淡苔白，脈沉弦細(xì)及骨關(guān)節(jié)炎見上述證候者。為證明該藥物組合物的效果，發(fā)明人進(jìn)行了如下動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)材料受試藥物本發(fā)明骨康膠囊，按實(shí)施例l方法制得，含4.0g生藥/g膏。劑量設(shè)計(jì)人臨床用量20.Og生藥/天，按60公斤體重計(jì)算為0.333g生藥/kg，按動(dòng)物與人公斤等效劑量折算，小鼠用3.6g生藥/kg、大鼠用1.8g牛藥/kg為中劑量，相當(dāng)于臨床等效劑量，高劑量為中劑量的2倍，低劑量為中劑量的1/2倍。實(shí)驗(yàn)用量小鼠為0.2ml/10g、大鼠為lml/100g。陽性對(duì)照藥通絡(luò)開痹片，中外合資邢臺(tái)通絡(luò)藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20021015，臨床用量0.015g/kg體重，小鼠用量0.32g/kg，大鼠用量O.16g/kg為臨床2倍量。動(dòng)物CD-1(ICR)小鼠18-22g，雌雄各半；Wistar種大鼠，雄性，體重140-160g，均由北京維通利平實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)為SCXK(京)2002-0003。試劑Freund's完全佐劑，Sigraa公司產(chǎn)品，批號(hào)P1503;巴豆油，日本和光株式會(huì)社產(chǎn)品，批號(hào)DCCL7737。儀器Sartorius電子天平，型號(hào)BP110S，德國(guó)生產(chǎn)。GJ-8402型熱板測(cè)痛儀，浙汀.產(chǎn)。試驗(yàn)方法和結(jié)果l.骨康膠囊的抗炎作用1.1骨康膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性(佐劑)關(guān)節(jié)炎的影響選取140-160g雄性大鼠，按體重隨機(jī)分為5組，對(duì)照組，骨康膠囊高、中、低(3.6、1.8、0.9g/kg體重)三個(gè)劑量組，通絡(luò)開痹片組(0.16g/kg)，每組10只。試驗(yàn)前，先用fi制軟尺測(cè)量每鼠左、右后踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)(cm),作為基礎(chǔ)值。大鼠提前兩天給藥，lml/100g體重，共26天。給藥第3天，于右后足墊皮內(nèi)注射Fre皿d's完全佐劑0.lml/只致炎，分別于致炎后2、18小時(shí)、第4天測(cè)量大鼠右后踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)；于致炎后第8天開始每4天測(cè)量各組大鼠左、右后踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)，并觀查大鼠耳、尾部是否出現(xiàn)異常及關(guān)節(jié)變形等現(xiàn)象，測(cè)量時(shí)間均在給藥后2小時(shí)。分別比較各時(shí)間點(diǎn)給藥組與對(duì)照組之間13的差異性，按下列公式計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)腫脹值和抑制率。腫脹值=致炎后踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)一致炎前踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)對(duì)照組平均腫脹值—給藥組平均腫脹值抑制率(％)=-^-X100%對(duì)照組平均腫脹值實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)照組在致炎后2小時(shí)開始腫脹，致炎后IO天左右踝關(guān)節(jié)腫脹達(dá)高峰，20天以后逐漸消退，對(duì)側(cè)踝關(guān)節(jié)于致炎后第8天開始腫脹，前肢繼發(fā)腫脹，骨康膠囊給藥三天，在致炎后2小時(shí)開始起效，并在給藥期間不同劑量組均出現(xiàn)不同程度的抑制作用，且可抑制對(duì)側(cè)繼發(fā)的腫脹，高、中劑量組作用明顯。上述癥狀均較對(duì)照組明顯減輕。1.2對(duì)巴豆油致小鼠耳腫脹的抑制作用小鼠按體重隨機(jī)分組，灌胃給藥，對(duì)照組給予相同體積的蒸餾水。連續(xù)3天，每天一次，末次給藥后1小時(shí)，以2%巴豆油0.05ml涂于左耳前后兩面，右耳作對(duì)照，致炎后4小時(shí)將小鼠處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8隱的不銹鋼沖子在同一部位分別沖下耳片，用電子天平稱重。以左右耳片的重量差為腫脹值，以t檢驗(yàn)，進(jìn)行組間差異性比較。表1骨康膠囊對(duì)小鼠耳水腫的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>與對(duì)照組相比*P<0.05，林P〈0.01表1結(jié)果表明，骨康膠囊所試劑量對(duì)巴豆油致小鼠耳腫脹均有明顯的抑制作用。1.3對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成的影響]大鼠乙醚淺麻醉，在無菌條件下作腹部切口，將20mg的滅菌棉球植入兩側(cè)腹股溝皮下。術(shù)后隨機(jī)分為五組，對(duì)照組，骨康膠囊高、中、低(3.6、1.8、0.9g/kg體重)三個(gè)劑量組，通絡(luò)開痹片組(O.16g/kg)，每組10只。手術(shù)當(dāng)天開始給藥，每天一次，lml/100g體重，連續(xù)7天，第7天藥后1小時(shí)將大鼠斷頭處死，剝離并取出棉球肉芽組織。于60'C烘箱內(nèi)干燥12小時(shí)后稱重，減去棉球重量，即為肉芽腫凈重，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，比較各組間肉芽腫有無顯著性差異。表2骨康膠囊對(duì)大鼠棉球肉芽腫增生的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>與對(duì)照組相比*P<0.05，紗P〈0.01由表2結(jié)果可見，骨康膠囊三個(gè)劑量組對(duì)大鼠肉芽組織增生均有顯著的抑制作用。2骨康膠囊鎮(zhèn)痛作用2.1采用小鼠扭體法方法取18-22g小鼠，按體重隨機(jī)分組，灌胃給藥，藥后1/J時(shí)小鼠腹腔注射0.7%醋酸0.2ml/只，5分鐘后觀察15分鐘內(nèi)典型的扭體發(fā)生次數(shù)(伸展后肢、腹部收縮和扭曲身體)，以扭體數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，并計(jì)算給藥組扭體次數(shù)的減少率。對(duì)照組平均扭體次數(shù)一給藥組平均扭體次數(shù)抑制率(％)二-X100%對(duì)照組平均扭體次數(shù)表3骨康膠囊對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注與對(duì)照組相比*P〈0.05，林P〈0.01表3結(jié)果表明，骨康膠囊三個(gè)劑量組均能明顯降低小鼠因醋酸刺激引起扭體的發(fā)生頻率，說明對(duì)化學(xué)性刺激引起的疼痛有明顯的抑制作用。2.2小鼠熱板法，取19-20g雌性小鼠，用熱板測(cè)痛儀測(cè)定小鼠自放入熱板至出現(xiàn)舔足所需時(shí)間(秒)作為該鼠的痛閾值，凡小鼠舔足時(shí)間小于5秒或大于30秒或跳躍者均棄之不用，將合格小鼠隨機(jī)分為5組，給藥，測(cè)定藥后30、60、90、120分鐘的痛閾值。以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。表4骨康膠囊的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>與對(duì)照組相比*P<0.05,林P〈0.01試驗(yàn)結(jié)果采用小鼠熱板法測(cè)定結(jié)果顯示，骨康膠囊三個(gè)劑量組均有不同程度的鎮(zhèn)痛作用，高、中劑量組作用可持續(xù)2小時(shí)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明膠囊劑具有抗炎和鎮(zhèn)痛作用，提不本發(fā)明藥物組合物具有治療或改善骨關(guān)節(jié)炎的作用。且以卜'實(shí)施例所制得的藥物組合物均具有上述治療效果。肉蓯蓉10.8kg龜甲10.8kg木瓜8.4kg具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:膠囊劑的制備原料藥牛膝16.2kg桂枝8.4kg杜仲10.8kg雪蓮3.Okg防風(fēng)8.4kg鹿茸6.Okg石斛8.4kg當(dāng)歸8.4kg赤芍8.4kg知母6.Okg甘草6.Okg制備工藝以上十四味，鹿茸碎成細(xì)粉。石斛、雪蓮加70%乙醇提取3次，每次加5倍量提取2小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.02-1.05(60°C)的清膏。防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油8小時(shí)，揮發(fā)油用倍他環(huán)糊精包合(油-倍他環(huán)糊精-水=1:8:80，6(TC攪拌2小時(shí))，冷藏，濾過，低溫干燥備用。藥渣和牛膝等其余8味加水煎煮3次，每次加水8倍量，煎煮1小時(shí)，濾過，合并煎液，加入上述提油后的水溶液，濃縮至相對(duì)密度1.10-1.12(60°C)，加乙醇調(diào)至含醇量70%，靜置過夜，上清液回收乙醇，余液與上述清膏合并，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.25(60°C)的稠膏，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，和鹿茸細(xì)粉和包合物干粉混合后，加入適量糊精，混勻，用適當(dāng)濃度乙醇制粒，干燥，裝成膠囊即得。實(shí)施例2:膠囊劑的制備原料藥牛膝18.0kg雪蓮3.0kg石斛9.0kg知母6.0kg制備工藝同實(shí)施例l,桂枝9.0kg防風(fēng)9.0kg當(dāng)歸9.0kg甘草6.0kg杜仲12.0kg鹿葺6.0kg赤芍9.0kg肉蓯蓉12.0kg龜甲12.0kg木瓜9.0kg肉灰蓉10.0kg龜甲10.0kg木瓜7.0kg實(shí)施例3:顆粒劑的制備原料藥牛膝15.0kg桂枝7.0kg杜仲10.0kg雪蓮2.5kg防風(fēng)7.0kg鹿茸4.5kg石斛7.0kg當(dāng)歸7.0kg赤芍7.0kg知母4.5kg甘草4.5kg制備工藝以上十四味，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；將石斛、雪蓮加10倍量50%乙醇提取1次1小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.02-1.05(60°C)的清膏，備用；將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油，水液另存，收集揮發(fā)油，備用；將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水10倍量煎煮1次1小時(shí)，濾過，合并濾液，加入提油后的水液，濃縮，加乙醇調(diào)至含醇量60%，靜置過夜，過濾，上清液回收乙醇，余液與上述備用清膏合并，繼續(xù)濃縮成相對(duì)密度為1.20-1.25(60'C)的稠膏，干燥，粉碎，與鹿茸細(xì)粉及揮發(fā)油混合后，加入適量淀粉和糊精，制成顆粒劑，包裝即得。實(shí)施例4:片劑的制備原料藥牛膝21.0kg雪蓮3.5kg石斛ll.Okg知母7.5kg桂枝11.0kg防風(fēng)ll.Okg當(dāng)歸11.0kg甘草7.5kg杜仲14.Okg鹿葺7.5kg赤芍ll.Okg肉歡蓉14.Okg龜甲14.0kg木瓜11.0kg制備工藝以上十四味，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；將石斛、雪蓮加80%乙醇提取3次，每次加6倍量，提取2小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.00-1.03(60'C)的清膏，備用；將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油，水液另存；收集揮發(fā)油，將揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精和水按1:7:90的比例混合，于6(TC下攪拌1小時(shí)，冷藏，濾過，低溫干燥，制成倍他環(huán)糊精包合物；將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮3次，每次加水6倍量，煎煮2小時(shí)，濾過，合并煎液，加入上述提油后的水液，濃縮，加乙醇調(diào)至含醇量75%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與上述備用清膏合并，繼續(xù)濃縮成相對(duì)密度171.18-1.22(60°C)的稠膏，干燥，粉碎，與鹿萆細(xì)粉及倍他環(huán)糊精包合物混合后，加入適量淀粉和羧甲基纖維素，混均，壓制成片。肉蓯蓉10.0kg龜甲10.0kg木瓜7.0kg實(shí)施例5:顆粒劑的制備原料藥牛膝15.0kg桂枝11.0kg杜仲14.0kg雪蓮3.5kg防風(fēng)7.Okg鹿茸4.5kg石斛11.0kg當(dāng)歸7.0kg赤芍11.0kg知母7.5kg甘草7.5kg制備工藝以上十四味，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；將石斛、雪蓮加60%乙醇提取2次，每次加8倍量，提取1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.05-1.06(60°C)的清膏，備用；將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油，水液另存；收集揮發(fā)油，加足量無水乙醇溶解，制成揮發(fā)油的乙醇溶液，備用；將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮2次，每次加8倍量，煎煮1.5小時(shí)，濾過，合并煎液，加入上述提油后的水液，濃縮至相對(duì)密度1.12-1.15(6(TC)，加乙醇調(diào)至含醇量65%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與上述備用清膏合并，繼續(xù)濃縮成相對(duì)密度為1.20-1.25(60°C)的稠膏，干燥，粉碎，加入鹿茸細(xì)粉、淀粉、糊精，噴入揮發(fā)油的乙醇溶液，制粒，低溫干燥，即得顆粒劑。實(shí)施例6:丸劑的制備原料藥牛膝19.0kg雪蓮3.5kg石斛8.Okg知母6.Okg桂枝8.5kg防風(fēng)8.Okg當(dāng)歸8.Okg甘草6.Okg杜仲13.Okg鹿茸5.Okg赤芍8.Okg肉灰蓉13.0kg龜甲11.Okg木瓜10.Okg制備工藝以上十四味，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；將石斛、雪蓮加75%乙醇提取3次，每次加5倍量，提取1小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.02-1.05(60。C)的清膏，備用；將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油6小時(shí)，水液另存；將所得揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精、水按1:9:70比例混合，在60。C條件下攪拌2小時(shí)，冷藏，濾過，低溫干燥，得揮發(fā)油包合物，備用；將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮2次，每次加水IO倍量，煎煮2小時(shí)，濾過，合并煎液，加入上述提油后的水液，濃縮至相對(duì)密度1.10-1.12(60°C)，加乙醇調(diào)至含醇量70%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與上述備用清膏合并，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.25(60°C)的稠膏，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，與鹿茸細(xì)粉及揮發(fā)油包合物混合后，制軟材，壓制成丸劑。實(shí)施例7:對(duì)實(shí)施例1的膠囊劑進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為棕褐色顆粒，氣微，味微苦，微甜。鑒別1)取本品內(nèi)容物5g，加80X乙醇40ml，回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%乙醇lml使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加80%乙醇溶解制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲醇:水:醋酸(9:2:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。2)取本品內(nèi)容物5g，加水40ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次(30，20,20)，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ral使之溶解，加鹽酸2ml，加熱回流1小時(shí)后水液濃縮至10ml，加水至20ml，加苯40ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ml溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)+同一硅膠G薄層板上，以氯仿乙醇(95:5)為展開劑展開，取出晾千，噴以8%的香草醛無水乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合液(O.5:5)，在IO(TC加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。3)取本品內(nèi)容物2.5g，加乙醇40ml，回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糽tnl使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)為展開劑，展開，取出，晾千，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。4)取本品內(nèi)容物5g，用30ml水溶解，再用乙酸乙酯提取3次(30ml，20ml，20ml)，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5X乙醇lml溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材lg同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別占于同一硅膠G薄層板上，以正己完乙酸乙酯(9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光燈下(365nm)檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。5)取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別2項(xiàng)下供試品溶液和上述對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿丙酮(9:1)為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105'C加熱19至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。正丁醇浸出物精密稱取本品內(nèi)容物3g，置100ml錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸l(wèi)h，放冷后取下錐形瓶，密宗，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于干燥恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得。本品含正丁醇提取物不少于8.0%。實(shí)施例8:對(duì)實(shí)施例3顆粒劑進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)鑒別1)取本品顆粒5g，加70X乙醇30ml，回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%乙醇lml.使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加70X乙醇溶解制成每lml含4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5n1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為8:3:0.4的甲醇:水醋酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；2)取本品顆粒5g，加水50ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸4ml，加熱回流2小時(shí)后水液濃縮至15ml，加水至25ml，加苯50ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ml溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每lml含6mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各8y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為90:4的氯仿乙醇混合液為展開劑展開，取出晾干；將濃硫酸以水稀釋至原體積的10/7倍，按0.4:4的體積比與含8%香草醛的無水乙醇溶液混合，噴于展開板上，在IO(TC加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；3)取本品顆粒3g，加乙醇30ml，回流提取2小時(shí)，濾過，濾液蒸千，殘?jiān)右掖?ml使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3pl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為38:6:8:0.3的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；4)取本品顆粒3g，用40ml水溶解，再用乙酸乙酯提取2次，每次30ml，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5%乙醇lml溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材3g同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3pl，分別占于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10:1的正己完乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)；5)取本品顆粒5g，加水30ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸4ml，加熱回流2小時(shí)后水液濃縮至15ml，加水至15ml，加苯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10:1的氯仿丙酮混合液為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。稱取本發(fā)明顆粒劑5g，精密稱定，置100ml錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸l(wèi)h，放冷后取下錐形瓶，密閉，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于干燥恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得；本品含正丁醇提取物不少于8.5%。2權(quán)利要求1、一種用于治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的有效成分是由如下原料藥制成的牛膝150～210重量份桂枝70～110重量份杜仲100～140重量份肉蓯蓉100～140重量份雪蓮25～35重量份防風(fēng)70～110重量份鹿茸45～75重量份龜甲100～140重量份石斛70～110重量份當(dāng)歸70～110重量份赤芍70～110重量份木瓜70～110重量份知母45～75重量份甘草45～75重量份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的有效成分是由如下原料藥制成的-杜仲120重量份鹿茸60重量份赤芍90重量份牛膝150210重量份肉灰蓉100140重量份鹿鶯4575重量份當(dāng)歸70110重量份知母4575重量份牛膝180重量份雪蓮30重量份石斛90重量份知母60重量份桂枝90重量份防風(fēng)90重量份當(dāng)歸90重量份甘草60重量份。肉蓯蓉120重量份龜甲120重量份木瓜90重量份3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的有效成分是由如下原料藥制成的杜仲108重量份肉蓯蓉108重量份鹿茸60重量份龜甲108重量份赤芍84重量份木瓜84重量份牛膝162重量份雪蓮30重量份石斛84重量份知母60重量份桂枝84重量份防風(fēng)84重量份當(dāng)歸84重量份甘草60重量份。4、如權(quán)利要求l、2或3所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為A、取原料藥，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；B、將石斛、雪蓮加50%80%乙醇提取13次，每次12小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至清膏，備用；C、將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油，水液另存，收集揮發(fā)油，備用；D、將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮13次，每次12小時(shí)，濾過，合并煎液，加入C中提油后的水液，濃縮，加乙醇調(diào)至含醇量60%75%，靜置分層，過濾，上清液回收乙醇，余液與B中備用清膏合并，繼續(xù)濃縮成稠膏，干燥，粉碎，與A中鹿茸細(xì)粉及C中所得揮發(fā)油混合后，加入常規(guī)制劑輔料，按照常規(guī)制劑工藝，制成臨床所需劑型。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于將提取的揮發(fā)油按如下任一方法處理后再與鹿茸細(xì)粉及其他藥物提取物合并A、將揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精和水，按1:79:7090的比例混合，于5565'C下攪拌l3小時(shí)，冷藏，濾過，低溫干燥，制成揮發(fā)油的倍他環(huán)糊精包合物；B、將揮發(fā)油溶于足量的無水乙醇中，制得揮發(fā)油的乙醇溶液。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于該藥物組合物膠囊劑的制備方法為A、取原料藥，將鹿茸碎成細(xì)粉，備用；B、將石斛、雪蓮加70%乙醇提取3次，每次加5倍量，提取2小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至60。C時(shí)相對(duì)密度1.02-1.05的清膏，備用；C、將防風(fēng)、桂枝、當(dāng)歸加水提取揮發(fā)油8小時(shí)，水液另存；將所得揮發(fā)油與倍他環(huán)糊精、水按1:8:80比例混合，在60'C條件下攪拌2小時(shí)，冷藏，濾過，低溫千燥，得揮發(fā)油包合物，備用；D、將提油后的藥渣與牛膝等其余8味藥合并，加水煎煮3次，每次加水8倍量，煎煮l小時(shí)，濾過，合并煎液，加入上述提油后的水液，濃縮至6CTC時(shí)相對(duì)密度1.10-1.12,加乙醇調(diào)至含醇量70%，靜置分層，過濾，上清液冋收乙醇，余液與B中備用清膏合并，繼續(xù)濃縮至60'C時(shí)相對(duì)密度為1.20-1.25的稠膏，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，和A中鹿茸細(xì)粉及C中揮發(fā)油包合物混合后，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)制劑工藝，制成膠囊劑。7、如權(quán)利要求l、2或3所述藥物組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法中含有如下正丁醇提取物的含量測(cè)定方法稱取所述藥物組合物25g，精密稱定，置100ml錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸l(wèi)h，放冷后取下錐形瓶，密閉，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于十燥恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得；該藥物組合物中含正丁醇提取物應(yīng)不少于8.0%。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法中還含有如下定性鑒別項(xiàng)目a、取所述藥物組合物35g，加70%90%乙醇3050ml，回流2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0X90X乙醇l2ml使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加70%90%乙醇溶解制成每lml含46mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各510ii1,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為810:13:0.40.6的甲醇水醋酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取所述藥物組合物35g，加水3050mi使之溶解，用水飽和的正丁醇提取23次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?530ml使之溶解，加鹽酸24ml，加熱回流12小時(shí)后水液濃縮至1015ml，加水至1525ml，加苯3050ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?3ml溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每含46mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各38i！1,分別點(diǎn)丁同一硅膠G薄層板上，以體積比為90100:46的氯仿乙醇混合液為展開劑展丌，取出晾干；將濃硫酸以水稀釋至原體積的10/7倍，按0.40.6:46的體積比與含8%香草醛的無水乙醇溶液混合，噴于展開板上，在100'C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c、取所述藥物組合物35g，加乙醇3050ml，回流提取12小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?2ml使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lral含13mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各35u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為3842:46:812:0.10.3的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d、取所述藥物組合物35g，用2040ml水溶解，再用乙酸乙酯提取23次，每次2030ml，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5%乙醇13ral溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材13g同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各35y1，分別占十同一硅膠G薄層板上，以體積比為8i0:i的正己完乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)；e、取所述藥物組合物35g，加水3050ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取23次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?530ml使之溶解，加鹽酸24ml，加熱回流12小時(shí)后水液濃縮至1015ml，加水至1525ml，加苯3050ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖絣3ml溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含35mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各35n1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為810:1的氯仿丙酮混合液為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。9、根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的藥物組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于膠囊劑的質(zhì)量檢測(cè)方法中含有如下項(xiàng)目正丁醇提取物的含量測(cè)定精密稱取膠囊劑內(nèi)容物3g，置100ml錐形瓶中，精密加入正丁醇100ml，閉塞，稱定重量，靜置lh，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸]h，放冷后取下錐形瓶，密閉，稱定重量，用正丁醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取50ml濾液，置于干燥恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105'C干燥3h，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得；膠囊劑內(nèi)容物中含正丁醇提取物不少于8.0%;定性鑒別a、取膠囊內(nèi)容物5g，加80X乙醇40ml，回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%乙醇lml使之溶解，作為供試品溶液；另取甜菜堿對(duì)照品，加80%乙醇溶解制成每lml含5tng的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為9:2:0.5的甲醇水醋酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取膠囊內(nèi)容物5g，加水40ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸2ml，加熱回流1小時(shí)后水液濃縮至lOml，加水至20ml，加苯40inl振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ml溶解，作為供試品溶液；另取菝葜皂苷元對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為95:5的氯仿乙醇混合液為展開劑展開，取出晾千；將濃硫酸以水稀釋至原體積的10/7倍，按0.5:5的體積比與含8%香草醛的無水乙醇溶液混合，噴于展開板上，在IO(TC加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c、取膠囊內(nèi)容物2.5g，加乙醇40ml，回流提取l小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使之溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇溶液，制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為40:5:10:0.2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d、取膠囊內(nèi)容物5g，用30ml水溶解，再用乙酸乙酯提取3次，每次2030ml，合并提取液置水浴上蒸干，殘?jiān)?5%乙醇lml溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材lg同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4iU，分別占于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己完乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾千，在365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)；e、取膠囊內(nèi)容物5g，加水40ml使之溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次2030ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使之溶解，加鹽酸2ml，加熱回流1小時(shí)后水液濃縮至lOrnl，加水至20ml，加苯40ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)颖?ml溶解，作為供試品溶液；取齊墩果酸對(duì)照品加苯制成每lml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的氯仿丙酮混合液為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。10、如權(quán)利要求l、2或3所述藥物組合物在制備用于治療或改善骨關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種藥物組合物，尤其是一種治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法，屬于中藥領(lǐng)域。該藥物組合物的有效成分是由牛膝、桂枝、杜仲、肉蓯蓉、雪蓮、防風(fēng)、鹿茸、龜甲120、石斛、當(dāng)歸、赤芍、木瓜、知母、甘草等原料藥制得，并根據(jù)臨床需要被制成片劑、膠囊劑、顆粒劑及丸劑等劑型。該藥物組合物對(duì)于治療和改善骨關(guān)節(jié)炎具有明顯的效果。文檔編號(hào)A61K36/8984GK101485835SQ20091007771公開日2009年7月22日申請(qǐng)日期2009年2月12日優(yōu)先權(quán)日2009年2月12日發(fā)明者山常申請(qǐng)人:北京市石景山區(qū)老醫(yī)藥衛(wèi)生工作者協(xié)會(huì)模式口中醫(yī)醫(yī)院