專利名稱：：多肽的經(jīng)粘膜遞送組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物技術(shù)和藥物化學(xué)領(lǐng)域。特別地，本發(fā)明涉及生物活性多肽的經(jīng)口腔粘膜遞送。
背景技術(shù)：
：藥學(xué)活性多肽已知可用于醫(yī)用領(lǐng)域中的各種治療中。生物技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)使得可以大規(guī)模地生產(chǎn)天然多肽和重組多肽，用于制造制藥工業(yè)產(chǎn)品。然而，已知一些多肽由于它們對在消化道內(nèi)分解的敏感性，對于口服胃腸道給藥途徑而言是差的候選物。因此，多肽治療典型地經(jīng)過非腸道途徑例如輸注或注射途徑來進(jìn)行。已經(jīng)開發(fā)了使用具有增強(qiáng)經(jīng)粘膜吸收的組合物的劑型來進(jìn)行包括多肽在內(nèi)的藥物的經(jīng)粘膜給藥。例如，Igari等人的美國專利5,725,852和5,482,706描述了多肽與胞苷二磷酸膽堿一起進(jìn)行粘膜給藥。用于經(jīng)粘膜遞送多肽的另一個(gè)方法例如描述在Acharya等人的美國專利6，210,699中，其使用未增塑的聚乙烯基吡咯烷酮作為粘膜粘附劑。多肽的經(jīng)陰道吸收由Fujii等人在美國專利5,238,917中描述，其中吸收促進(jìn)劑包括聚氧乙烯烷基苯基醚和膽酸。公知的是，經(jīng)口腔粘膜吸收與諸如以下的一些優(yōu)點(diǎn)有關(guān)自我給藥能力，血漿濃度和療效的更快起效，和避免活性成分的首過代謝效應(yīng)。已經(jīng)開發(fā)了多種劑型用于一些活性成分跨粘膜進(jìn)行經(jīng)口腔粘膜(例如舌下、經(jīng)頰、牙齦、腭和食道的粘膜組織)遞送。這些劑型已被設(shè)計(jì)用于活性成分的快速崩解和高濃度以實(shí)現(xiàn)在口腔內(nèi)的吸收。還研究了多肽的經(jīng)口腔粘膜給藥。例如，多肽的經(jīng)頰給藥由Heiber等人在美國專利5,863，555和5,766,620中描述，其中高血糖素樣促胰島素多肽與滲透增強(qiáng)劑諸如膽汁鹽一起迸行經(jīng)頰給藥。經(jīng)過特別地配制用于某些阿片劑諸如芬太尼的經(jīng)口腔粘膜吸收的一種口服劑量形式己在商標(biāo)名稱FENTORA⑧下采用ORAVESCENT技術(shù)被開發(fā)(得自CIMALABS，Inc.,EdenPrairie,Minnesota)。該技術(shù)描述于例如美國專利6,200,604和6,974,590中，以及美國專利申請公報(bào)2005/0169989(2004年12月30日提交的序列號No.1/026,132);2005/0142197(2004年12月30日提交的序列號No.1/026,327);2005/0142198(2004年12月30日提交的序列號No.1/027,353);和2005/0163838(2004年12月30日提交的序列號No.11/026，759)中。這一具體技術(shù)釆用賦形劑制劑，其包含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)和泡騰對以促進(jìn)活性成分枸櫞酸芬太尼的經(jīng)粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)。然而，目前正在進(jìn)行其它的可從ORAVESCENT⑧的口腔泡騰劑型給藥中受益的藥學(xué)活性化合物的識別。在藥物領(lǐng)域中，仍然需要一種劑型，該劑型接替并改善包括多肽在內(nèi)的大分子跨口腔粘膜組織的遞送。還需要這樣的制劑，該制劑可有效地實(shí)現(xiàn)包括多肽在內(nèi)的更大分子結(jié)構(gòu)的經(jīng)粘膜遞送。發(fā)明概述本發(fā)明提供了增強(qiáng)多肽跨口腔粘膜組織的經(jīng)粘膜吸收并提供多肽的有效治療相對快速起效的組合物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可以制備增強(qiáng)多肽經(jīng)粘膜吸收的組合物，為接受者提供治療血漿濃度。還己發(fā)現(xiàn)泡騰經(jīng)粘膜劑型與膽汁鹽諸如?；悄懰?鈉)鹽的組合當(dāng)根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行配制時(shí)可顯著增強(qiáng)多肽吸收。泡騰組合物與膽汁鹽的組合對多肽跨口腔粘膜的8轉(zhuǎn)運(yùn)具有協(xié)同效應(yīng)，從而獲得了大于其各自的吸收增強(qiáng)效應(yīng)的總和的生物利用度。本發(fā)明提供了用于經(jīng)口腔粘膜吸收的組合物，其包含生物活性多肽；膽鹽；和包括泡騰對的泡騰賦形劑組分。該組合物還可例如任選地包含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)作為泡騰賦形劑組分的一部分或作為經(jīng)口腔粘膜組合物的一部分。在一些實(shí)施方案中，該組合物包括固體經(jīng)口劑型如片劑。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)生物活性多肽的經(jīng)粘膜吸收的方法，包括對接受者給予組合物，該組合物包含生物活性多肽；膽鹽；和包括泡騰對的泡騰賦形劑組分；該組合物還可任選地包含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。本發(fā)明還提供了對接受者給予生物活性多肽的方法，包括a)提供組合物，該組合物包含生物活性多肽；膽鹽；包括泡騰對的泡騰賦形劑組分；和pH調(diào)節(jié)物質(zhì)；b)將該組合物置于接受者的口腔內(nèi)與粘膜組織接觸；和c)允許該組合物原地停留與粘膜組織接觸歷時(shí)組合物足以溶出并遞送治療有效量的生物活性多肽跨粘膜的時(shí)段。本發(fā)明提供了在接受者中治療糖尿病的方法，包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。該組合物包含治療有效量的胰島素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。本發(fā)明還提供了在接受者中治療癌的方法，包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。該組合物包含治療有效量的IFN-y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。本發(fā)明還提供了在接受者中治療病毒感染或細(xì)菌感染的方法，包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。該組合物包含治療有效量的IFN-y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。本發(fā)明還提供了在接受者中治療糖尿病或肥胖癥或控制血糖的方法，包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。該組合物包含治療有效量的胰淀素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。本發(fā)明還提供了在接受者中治療精神病學(xué)疾病或病癥的方法，包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。該組合物包含治療有效量的胰淀素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。進(jìn)一步通過以下本發(fā)明-哪個(gè)附圖都不被認(rèn)為一定限制了本發(fā)明。圖l-15是柱狀圖，顯示使用體外上皮細(xì)胞培養(yǎng)組織的多種多肽與不同賦形劑組合物的組合的比較滲透性。圖1是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的胰淀素、胰淀素與膽鹽的組合、胰淀素與泡騰組合物的組合、以及胰淀素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的胰淀素。圖2是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的大馬哈魚降轉(zhuǎn)素、大馬哈魚降鈣素與膽鹽的組合、大馬哈魚降鈣素與泡騰組合物的組合、以及大馬哈魚降鈣素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的大馬哈魚降鈣素。圖3是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的GLP-1、GLP-1與膽鹽的組合、GLP-1與泡騰組合物的組合、以及GLP-1與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的GLP-1。圖4是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的胰島素、胰島素與膽鹽的組合、胰島素與泡騰組合物的組合、以及胰島素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的胰島素。圖5是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的高血糖素、高血糖素與膽鹽的組合、高血糖素與泡騰組合物的組合、以及高血糖素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的高血糖素。圖6是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的PTH、PTH與膽鹽的組合、PTH與泡騰組合物的組合、以及PTH與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的PTH。圖7是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的縮宮素、縮宮素與膽鹽的組合、縮宮素與泡騰組合物的組合、以及縮宮素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的縮宮素。圖8是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的Arg-加壓素(去氨加壓素)、去氨加壓素與膽鹽的組合、去氨加壓素與泡騰組合物的組合、以及去氨加壓素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的去氨加壓素。圖9是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的PYY、PYY與膽鹽的組合、PYY與泡騰組合物的組合、以及PYY與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過熒光檢測測量熒光標(biāo)記的PYY。圖10是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的大馬哈魚降鈣素、大馬哈魚降鈣素與膽鹽的組合、大馬哈魚降鈣素與泡騰組合物的組合、以及大馬哈魚降鈣素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過ELISA試劑盒和技術(shù)測量大馬哈魚降鈣素。圖11是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的去氨加壓素(Arg-加壓素)、去氨加壓素與膽鹽的組合、去氨加壓素與泡騰組合物的組合、以及去氨加壓素與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過LC/MS/MS測量去氮加壓素。11量干擾素a-2b。圖13是顯示在不同條件下的胰島素(In-FITC)對單獨(dú)給予相同濃度的胰島素的滲透性的體外增強(qiáng)比(ER)的柱狀圖。所述條件是根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的胰島素與膽鹽組合、胰島素與泡騰組合物組合以及胰島素與膽鹽和泡騰組合物二者組合。供試的各種膽鹽包括?；悄懰?鈉)鹽(TC)，羥乙酸鹽(GC)，甘氨脫氧膽酸鹽(GDC),?；敲撗跄懰猁}(TDC)，膽酸鹽(C)，?；蛆Z去氧膽酸鹽(TCDC)和牛磺熊去氧膽酸鹽(TUDC)。通過熒光檢測測量In-FITC。圖14是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的IGF-1、IGF-1與膽鹽的組合、IGF-1與泡騰組合物的組合、以及IGF-1與膽鹽(在不同濃度下)和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過ELISA試劑盒和技術(shù)測量IGF-1。圖15是顯示根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，單獨(dú)的HRPO-b、HRPO-b與膽鹽的組合、HRPO-b與泡騰組合物的組合、以及HRPO-b與膽鹽和泡騰組合物二者的組合的體外滲透性的柱狀圖。通過由HRPO-b引起的特異性底物轉(zhuǎn)化所導(dǎo)致的光密度增加來測量HRPO-b。發(fā)明詳述本文使用的術(shù)語"經(jīng)口腔粘膜"在藥物遞送和吸收的背景下是指藥物經(jīng)由與口腔有關(guān)的一種或多種粘膜組織例如舌下、頰、牙齦、腭、食道區(qū)域的口粘膜組織的蠕動前的攝取階段。更具體地說，該術(shù)語意在是指活性成分的主要遞送途徑通過口腔粘膜組織發(fā)生。廣義的術(shù)語"經(jīng)粘膜"是指通過粘膜組織(包括口腔、直腸或陰道的粘膜組織)所實(shí)現(xiàn)的遞送和吸收。本文使用的術(shù)語"約"是指給定值±10%的值的范圍及其功能等價(jià)物，除非另有具體說明不是這樣。例如，術(shù)語"約50毫克"包括50±10°/。，或?yàn)?5亳克到55毫克。本文使用的術(shù)語"生物活性多肽"是指多肽、肽和蛋白質(zhì)，并且是指具有任何長度的氨基酸的聚合物形式，其可包括被編碼的和未編碼的氨基酸，經(jīng)過化學(xué)或生物化學(xué)修飾或衍生化的氨基酸，和具有改性肽主鏈的多肽。該術(shù)語包括融合蛋白，包括但不限于具有異源氨基酸序列的融合蛋白，具有異源和同源前導(dǎo)序列、有或沒有N-末端甲硫氨酸殘基的融合蛋白；進(jìn)行免疫標(biāo)記的蛋白質(zhì)；等等?？捎糜诒景l(fā)明的生物活性多肽包括但不限于細(xì)胞因子、生長因子、造血因子、激素、酶、抗體、抗原、過敏原等。生物活性多肽共有與基礎(chǔ)多肽有關(guān)的生物活性。生物活性多肽可具有任何長度，例如，約5到約20個(gè)氨基酸；約10到約60個(gè)氨基酸；約25到約75個(gè)氨基酸；約50到約150個(gè)氨基酸；約75到約250個(gè)氨基酸；約100到約400個(gè)氨基酸約200到約600個(gè)氨基酸，和更大長度。本文使用的術(shù)語"治療有效量"是指被要求對于所給給藥途徑而言產(chǎn)生所給活性成分預(yù)計(jì)要實(shí)現(xiàn)的生理效應(yīng)和與所給活性成分有關(guān)的生理效應(yīng)而被確定的量(根據(jù)確立的藥代動力學(xué)方法和技術(shù)進(jìn)行測量)。本文使用的術(shù)語"經(jīng)口劑型"當(dāng)以一般含義被使用時(shí)包括經(jīng)口可崩解的/可分解的片劑，膠囊，錠劑，凝膠劑，霜?jiǎng)?，薄膜劑，噴霧劑，等等。本發(fā)明的經(jīng)口劑型意在包括作為固體經(jīng)口劑型的本發(fā)明的藥物組合物，其包含生物活性多肽以及促進(jìn)和增強(qiáng)活性成分經(jīng)口腔粘膜吸收的賦形劑制劑。本文使用的術(shù)語"基本上"，除非另有說明，否則是指滿足所述測量中的所述標(biāo)準(zhǔn)使得本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解要實(shí)現(xiàn)的益處或所需的條件或性質(zhì)被滿足的特定的性質(zhì)、特征或變量。13通常，本發(fā)明的藥物組合物包含與膽鹽組合的泡騰組合物，并包括生物活性多肽作為活性成分。本發(fā)明的組合物還可包含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，在劑型中所用的成分的組合，即活性成分和賦形劑，一起起作用以增強(qiáng)活性成分的經(jīng)粘膜吸收，例如，根據(jù)本發(fā)明的Cm^劑量的比，和/或所實(shí)現(xiàn)的劑量降低。在一些實(shí)施方案中，泡騰組合物和作為泡騰賦形劑組分的一部分的pH調(diào)節(jié)物質(zhì)連同膽鹽諸如?；悄懰徕c的使用，為多肽的遞送和/或攝取提供了顯著優(yōu)點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，泡騰組合物和pH調(diào)節(jié)物質(zhì)被一起使用以增加多肽的遞送和/或攝取。本發(fā)明的組合物可以以下形式被制備和/或給予粉末形式或固體經(jīng)口劑型如片劑。還可能遞送液體形式的本發(fā)明的組合物。不管組合物是何種形式，該組合物可以被給予和/或遞送到特定的口腔位置，其中所述組合物當(dāng)接觸到唾液時(shí)在所述口腔粘膜位置處溶出。在一些實(shí)施方案中，該組合物在約1分鐘到約30分鐘的時(shí)段內(nèi)溶出?；钚猿煞衷谥辽倨渲斜唤o予有該組合物的區(qū)域內(nèi)被轉(zhuǎn)運(yùn)跨越或橫跨口腔粘膜。在一些實(shí)施方案中，該組合物包含泡騰賦形劑制劑、膽鹽和藥學(xué)活性多肽，并且可被給予和/或遞送到舌下、頰、牙齦、腭和/或食道位置的口粘膜組織。在一些實(shí)施方案中，生物活性多肽被轉(zhuǎn)運(yùn)跨越粘膜組織并被吸收以實(shí)現(xiàn)其生物效應(yīng)?？墒褂门c各種多肽有關(guān)的多種直接的和間接的生物活性用于大范圍的治療或療法；這些療法包括但不限于，抗生素治療，造血治療，抗過敏治療，激素治療，多肽增補(bǔ)治療，診斷性檢測，抗抑郁和精神病治療，抗癌治療，抗心律失常治療，血管擴(kuò)張治療，血管收縮治療，抗高血壓治療，糖尿病的預(yù)防和控制，抗凝血治療，食欲抑制活性，血糖控制(bloodglucosecontrol),血糖控制(glycemiccontrol),飽脹感，抗感染治療，骨質(zhì)疏松治療，疫苗等等。這些治療或療法當(dāng)適當(dāng)?shù)亩嚯某晒Φ剞D(zhuǎn)運(yùn)跨越粘膜并進(jìn)入接受者的血流內(nèi)時(shí)可被實(shí)現(xiàn)。適當(dāng)?shù)纳锘钚远嚯陌ǖ幌抻谝鹊硭?、大馬哈魚由來的降鈣素(S-CT),胰高血糖素樣肽l(GLP-l)，高血糖素，甲狀旁腺激素(PTH1)，縮宮素，去氨加壓素(8D-Arg加壓素)，胰島素，蛋白質(zhì)YY(PYY),細(xì)胞因子和淋巴因子諸如IFNa、IFN(3、IF外等等。關(guān)于各種多肽的列舉可見于Igari等人的美國專利5,725,852，該文獻(xiàn)全文被并入本文作為參考?？捎糜诒景l(fā)明的生物活性多肽包括可轉(zhuǎn)運(yùn)跨越或透過口腔粘膜組織并進(jìn)入血流以遞送其相關(guān)效果的那些多肽。在一些實(shí)施方案中，多肽具有約500道爾頓到約200,000道爾頓(200kDa)或更大的分子量。在一些實(shí)施方案中，多肽具有約1000道爾頓到約20,000道爾頓的分子量。在一些實(shí)施方案中，多肽具有約3000道爾頓到約30,000道爾頓的分子量；在其它實(shí)施方案中，多肽具有約5000道爾頓到60,000道爾頓的分子量。在一些實(shí)施方案中，本申請還提供了用于經(jīng)粘膜遞送較大的非肽基化合物和分子以及多肽-藥物綴合物的方法和組合物。本發(fā)明的組合物包括至少一種膽鹽。組合物的這一部分在以下簡稱組合物的"膽鹽組分"。本文使用的"膽鹽"是指由其相應(yīng)的膽汁酸形成的陽離子鹽形式，例如膽汁酸?；悄懰崾桥；悄懰?鈉)鹽作為膽鹽?？捎糜诒景l(fā)明的膽鹽包括但不限于選自以下的膽鹽牛磺膽酸鈉(TC)，甘膽酸鈉(GC)，甘氨脫氧膽酸鈉(GDC)，?；敲撗跄懰徕c(TDC)，膽酸鈉(C),?；蛆Z去氧膽酸鈉(TCDC)和牛磺熊去氧膽酸鈉(TUDC)及其組合。在一些實(shí)施方案中，使用膽鹽?；悄懰岬拟c鹽即牛磺膽酸鈉。盡管用于說明本發(fā)明的目的鈉就是所述的陽離子，但是還可能使用其它的陽離子來形成膽鹽。膽鹽的使用量可根據(jù)被選擇的具體膽鹽的不同而異。在一些實(shí)施方案中，膽鹽的量相對低，并且處于為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的益處所需的最低有效濃度到對應(yīng)于最大可接受的毒性的量的范圍內(nèi)。最小的和最大的膽鹽量參數(shù)可根據(jù)不同膽鹽的不同而異。對于?；悄懰徕c，其可用于本發(fā)明的量可為約0.05°/。vv/v到約10%w/v，或?yàn)榧s0.5%w/v到約2.0%w/v。在一些實(shí)施方案中，使用約1.00/ow/v的?；悄懰徕c。根據(jù)本發(fā)明制備的藥物組合物包含泡騰組合物作為滲透增強(qiáng)劑。本發(fā)明組合物的這一部分在本文還被稱作"泡騰賦形劑組分"。在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分包括泡騰對。泡騰對可以是被水或唾液活化的酸和堿；因此，當(dāng)暴露于水或唾液下時(shí)，例如，當(dāng)在口內(nèi)溶出時(shí)，泡騰對的活化導(dǎo)致產(chǎn)生二氧化碳。在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分除了泡騰對之外還包括pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。在本發(fā)明中可使用各種的泡騰組合物或泡騰賦形，U組分。例如，可使用在美國專利5,178,878和美國專利5,503,846中所述的泡騰組合物和泡騰賦形劑組分，所述文獻(xiàn)全文被并入本文作為參考。在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分包括作為被水或唾液活化的材料的泡騰對，其通常以吸收很少的水分或無吸收水分的無水狀態(tài)被保持，或?yàn)榉€(wěn)定的水合形式。在一些實(shí)施方案中，泡騰對包括至少一種食品級酸和至少一種食品級的反應(yīng)性堿(其可為碳酸鹽或碳酸氫鹽)。用于泡騰賦形劑組合物中的適當(dāng)?shù)乃岚ㄊ称芳壍乃?、酸酐和酸鹽。食品級的酸包括但不限于擰檬酸、酒石酸、蘋果酸、富馬酸、己二酸、抗壞血酸和琥珀酸，及其酸酐或鹽。使用的鹽可為食品級的鈉、鉀和鈣的鹽，例如磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉，以及酸式擰檬酸鹽和酸式硫酸二鈉?？筛鶕?jù)本發(fā)明使用的堿包括但不限于碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等等。碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鎂等等還可作為泡騰對的一部分被使用，但是還可作為泡騰組合物內(nèi)的pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分的量是有效量并且根據(jù)除為實(shí)現(xiàn)片劑在口內(nèi)崩解所必需的那些性質(zhì)以外的性質(zhì)來確定。在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分被用作用于增強(qiáng)經(jīng)過口腔內(nèi)的頰、舌下或牙齦途徑被給藥的活性成分跨越粘膜的傳遞。因此，在一些實(shí)施方案中，泡騰賦形劑組分的量基于總制劑重量為約5到約85%，約15到60%，約30到45%，和約35到40%。在一些實(shí)施方案中，酸和堿的相對比例根據(jù)特定成分的不同而異，例如，根據(jù)酸是否是單、二或三質(zhì)子形式，相對摩爾重量等的不同而異。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是除了泡騰對的組分之一以外的并且與所述泡騰對的組分之一是不同的成分。對離子化狀態(tài)的改變敏感的多肽可以通過為其在口腔內(nèi)溶出和傳遞跨越口腔內(nèi)組織實(shí)施適當(dāng)條件而被給予。在一些實(shí)施方案中，如果對于具體藥物而言的理想條件是堿性，則加入充分過量的適當(dāng)?shù)膹?qiáng)酸作為泡騰賦形劑組分的一部分或者可能不需要pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)例如無水碳酸鈉被選擇，其單獨(dú)并與泡騰對無關(guān)地起作用?？墒褂酶鞣NpH調(diào)節(jié)物質(zhì)以提供活性成分的進(jìn)一步的滲透增強(qiáng)。在一些實(shí)施方案中，適當(dāng)?shù)膒H調(diào)節(jié)物質(zhì)的選擇根據(jù)要給予的藥物、特別根據(jù)藥物發(fā)生離子化或非離子化的pH以及離子化形式或非離子化形式是否促進(jìn)跨粘膜傳遞的不同而異。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是任何這樣的物質(zhì)，該物質(zhì)能夠調(diào)節(jié)用于促進(jìn)跨粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)的局部化pH在一般為約3到約10、或約4到約9的范圍內(nèi)。pH是在口腔粘膜被置于接受者口內(nèi)時(shí)與口腔粘膜接觸面表面處小環(huán)境內(nèi)的"局部化pH"。在一些實(shí)施方案中，局部化pH可以通過最初表征片劑在使用體外pH測量法時(shí)所顯示的動力學(xué)pH改變來測定。該方法包括在適當(dāng)大小的試管或其它類似的容器中使用0.5-10毫升的磷酸鹽緩沖鹽水。通過將9.0克氯化鈉、0.6克磷酸鈉一水合物和0.78克磷酸氫二鈉(無水)溶解在約1000毫升去離子水中并通過在攪拌下加入1N氫氧化鈉調(diào)節(jié)室溫下的pH為7.0±0.05來準(zhǔn)備一升體積的經(jīng)緩沖的鹽水溶液。調(diào)節(jié)將需要約0.5毫升。所用介質(zhì)的量根據(jù)片劑大小和劑量的不同而異。例如，1毫升的體積可用于重200毫克的片劑。當(dāng)接觸到介質(zhì)時(shí)，使用微型復(fù)合pH電極監(jiān)控溶液的pH曲線(作為時(shí)間的函數(shù))。在一些實(shí)施方案中，可被用作本發(fā)明的pH調(diào)節(jié)物質(zhì)的材料包括碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽和磷酸二氫鹽。適當(dāng)?shù)奶妓猁}包括但不限于碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸鈣。適當(dāng)?shù)牧姿猁}包括但不限于磷酸鈣或磷酸鈉。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是碳酸鈉。在一些實(shí)施方案中,pH調(diào)節(jié)物質(zhì)當(dāng)以適當(dāng)?shù)牧勘惶峁r(shí)，與不含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)的相同制劑相比，提供了局部化pH的改變，該局部化pH改變至少約0.5個(gè)pH單位，l.O個(gè)pH單位，或約2.0個(gè)pH單位。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)的量隨著所用pH調(diào)節(jié)物質(zhì)的類型、來自泡騰對的過量酸或堿的量、任何其余成分的性質(zhì)以及活性成分的不同而異。在一些實(shí)施方案中，pH調(diào)節(jié)物質(zhì)的量基于總制劑重量為約0.5到約25%，約2到約20%，約5到約15%，和約7到約12%。當(dāng)組合物為片劑固體劑型時(shí)，在一些實(shí)施方案中，所述組合物還包括填充劑、崩解劑和潤滑劑中的一種或多種?？墒褂萌魏晤愋偷奶畛鋭┗蛉魏瘟康奶畛鋭灰脛┬涂蓪?shí)現(xiàn)本文所述的結(jié)果即可。在一些實(shí)施方案中，填充劑是糖和糖醇，并且這些可包括非直接壓縮型填充劑和直接壓縮型填充劑。在一些實(shí)施方案中，非直接壓縮型填充劑當(dāng)經(jīng)歷配制時(shí)，其具有使得其不可實(shí)際用于無加強(qiáng)或調(diào)節(jié)的高速制片方法的流動和/或壓縮特征。例如，制劑的流動性可能不足夠好，因此可能需要加入助流劑諸如二氧化硅。型填充劑不要求類似的考慮并且一般地具有使得其可用于直接壓縮用途的壓縮性和流動性特征。在一些實(shí)施方案中，非直接壓縮型填充劑可被賦予直接壓縮型填充劑的性質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，非直接壓縮型填充劑當(dāng)與直接壓縮型填充劑相比時(shí)傾向于具有相對較小的粒度。在一些實(shí)施方案中，填充劑諸如噴霧干燥型甘露醇具有相對較小的粒子，但是根據(jù)它們?nèi)绾谓?jīng)歷進(jìn)一步加工而一般地是可直接壓縮的。在一些實(shí)施方案中，填充劑是較大的非直接壓縮型填充劑。用于本發(fā)明的適當(dāng)?shù)奶畛鋭┌ǖ幌抻诟事洞?、乳糖、山梨醇、葡萄糖、蔗糖、木糖醇和葡萄糖。在一些?shí)施方案中，填充劑是噴霧干燥型甘露醇。填充劑的使用量基于制劑的重量可為約10到約80%，約2;到約80%，或約35到約60%。在組合物中還可使用崩解劑。在一些實(shí)施方案中，崩解劑可允許劑量減少和/或增加C自一劑量的比。在一些實(shí)施方案中，崩解劑包括還具有崩解劑性質(zhì)的粘合劑。適當(dāng)?shù)谋澜鈩┌ǖ幌抻谖⒕Юw維素、交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮(PVP-XL)、淀粉羥乙酸鈉、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、交聯(lián)羥基丙基纖維素等等。在一些實(shí)施方案中，崩解劑的選擇可根據(jù)在所給出的系統(tǒng)內(nèi)在使用所述崩解劑時(shí)是否可以獲得所需結(jié)果而定。在一些實(shí)施方案中，崩解劑是淀粉羥乙酸鹽。在一些實(shí)施方案中，崩解劑是淀粉羥乙酸鈉。淀粉羥乙酸鈉的實(shí)例是EXPLOTABTM(標(biāo)準(zhǔn)級，得自RoquetteofLestrem，F(xiàn)rance)。在一些實(shí)施方案中，崩解劑的量根據(jù)諸如劑型大小、其它成分的性質(zhì)和量等因素的不同而異。在一些實(shí)施方案中，崩解劑的量基于最終制劑的重量為約0.25重量％到約20重量％，約0.5重量％到約15重量％，約0.5重量％到約10重量％,或約1重量％到約8重量％。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明還包括制片用或脫模用的潤滑劑。適當(dāng)?shù)臐櫥瑒┌ǖ幌抻谟仓徭V、硬脂酸、硬脂酸鈣或其組合。在一些實(shí)施方案中，潤滑劑是硬脂酸鎂。在一些實(shí)施方案中，潤滑劑的量低于制劑重量的1重量％。在一些實(shí)施方案中，潤滑劑的量低于約0.5重量％。在一些實(shí)施方案中，潤滑劑的量可大于約1.0重量％、大于1.5重量％，和為約1.5重量％到約3重量％。在一些實(shí)施方案中，硬脂酸鎂是潤滑劑并且其用量為約2重量％。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包括其它的以一般已知的量存在的常規(guī)賦形劑，只要它們不顯著降低由本發(fā)明所提供的優(yōu)異性質(zhì)即可。這些另外的賦形劑可包括但不限于粘合劑、甜味劑、著色劑、芳香劑、助流劑、潤滑劑、崩解劑、防腐劑等等。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物可被制備為固體經(jīng)口腔粘膜劑型例如片劑。根據(jù)本發(fā)明制備的泡騰片劑可相對硬質(zhì)或軟質(zhì)。例如，包含本發(fā)明組合物的片劑可以根據(jù)在美國專利5,178,878中所述方法制備，所述文獻(xiàn)全文被并入本文作為參考。當(dāng)根據(jù)這一技術(shù)被制備時(shí)，該劑型可具有小于約15牛頓的硬度?；钚猿煞挚捎帽Ｗo(hù)性包衣進(jìn)行包衣或可沒有包衣。當(dāng)制備軟質(zhì)易碎的片劑時(shí)，它們可被包裝在泡罩包裝諸如在美國專利6，155，423中所述的包裝中。在一些實(shí)施方案中，可根據(jù)美國專利6，024，981中所述方法制備具有大于約15牛頓的硬度的硬質(zhì)劑型。另外，粉末狀態(tài)的程度例如粒度的重現(xiàn)性和/或稠度可影響結(jié)果?？傮w的劑型尺寸和大小、活性成分的劑量可不同?？傮w的劑型的形狀或構(gòu)造諸如片劑可不同。劑型構(gòu)造可根據(jù)其在給藥期間的預(yù)定區(qū)域例如頰、牙齦或舌下的不同而異。在一些實(shí)施方案中，由本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的原地崩解或溶出時(shí)間(停留時(shí)間)是足夠遞送治療有效量的藥學(xué)活性多肽跨粘膜的時(shí)段。該時(shí)段可小于約30分鐘，乃至小于約20分鐘。20在一些實(shí)施方案中，停留時(shí)間可為約5分鐘到10分鐘，根據(jù)患者應(yīng)答和組合物成分的不同而異。片劑劑型可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員容易獲知的常規(guī)的制片設(shè)備和技術(shù)來制備。在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明制得的片劑經(jīng)過干法混合和直接壓片。在一些實(shí)施方案中，片劑可從顆粒制備?？墒褂酶煞ㄔ炝＜夹g(shù)。例如，可使用粒狀甘露醇作為填充劑。作為制備過程的一部分，在一些實(shí)施方案中，可能希望在進(jìn)行最后的混合和壓縮之前進(jìn)行組合物的一部分的造?；蝾A(yù)混合。被選擇的材料經(jīng)過預(yù)先選擇以提供預(yù)定的劑量和含量均勻性。因此，在一些實(shí)施方案中，可選擇適當(dāng)?shù)牧康呐蒡v對、pH調(diào)節(jié)物質(zhì)和崩解劑，并以預(yù)定的量被提供，并被配制成所需劑型。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)使用潤滑劑諸如硬脂酸鎂時(shí)，它們在混合時(shí)段接近結(jié)束時(shí)被加入，例如，在最終的混合停止之前的幾分鐘被加入。在一些方面，本發(fā)明還包括對接受者給予生物活性多肽的方法，包括a)提供藥學(xué)活性多肽、泡騰組合物和膽鹽的經(jīng)口腔粘膜組合物；b)將經(jīng)口腔粘膜組合物置于接受者口腔內(nèi)的粘膜組織位置處；和C)允許組合物原地溶出歷時(shí)足夠允許劑型溶出并遞送治療有效量的多肽跨粘膜的時(shí)段。術(shù)語"提供"意在包括從包裝或容器中取出組合物或其劑型，和/或進(jìn)行劑型的其它分配。正如以上的討論，根據(jù)本發(fā)明被制得的劑型可存在于被接受者獲得的泡罩包裝中。本文使用的術(shù)語"接受者"意在包括哺乳動物，包括人在內(nèi)。接受者或其它個(gè)體可將組合物置于頰和上牙齦或下牙齦之間，或置于舌下。在一些實(shí)施方案中，組合物可被提供有所述組合物不應(yīng)該被吸吮、咀嚼或吞咽的說明書。治療方法可采用本公開的經(jīng)口腔粘膜組合物實(shí)施許多治療方法，所述治療方法包括用于以下的方法糖尿病控制，血糖控制，肥胖癥的治療(例如，通過誘導(dǎo)飽脹感或其它方法)，癌的治療，感染的治療，和精神病學(xué)病癥的治療。因此，在一些方面，本發(fā)明提供了在接受者中治療糖尿病的方法。該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。在一些實(shí)施方案中，該組合物包含治療有效量的胰島素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。在一些方面，本發(fā)明提供了在接受者中治療癌的方法。該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。在一些實(shí)施方案中，該組合物包含治療有效量的IFN-Y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。在一些方面，本發(fā)明提供了在接受者中治療病毒感染或細(xì)菌感染的方法。該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物。在一些實(shí)施方案中，該組合物包含治療有效量的IFN-Y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。在一些方面，本發(fā)明提供了在接受者中治療糖尿病、肥胖癥或精神病學(xué)疾病或病癥或控制血糖水平的方法。該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物，該經(jīng)口腔粘膜組合物包含治療有效量的胰淀素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。在一些實(shí)施方案中，精神病學(xué)疾病或病癥是情緒障礙、焦慮癥或精神分裂癥。進(jìn)一步通過以下實(shí)施例說明本發(fā)明，哪個(gè)實(shí)施例都不被認(rèn)為一定限制了本發(fā)明。.實(shí)施例實(shí)施例l體外滲透性試驗(yàn)如下進(jìn)行體外滲透性試驗(yàn)。從一端用0.6平方厘米的不含細(xì)胞的丙烯酸類和聚碳酸酯膜嵌片密封的丙烯酸類嵌片開始，將經(jīng)培養(yǎng)的人頰癌細(xì)胞(SqCC/Yl細(xì)胞)在培養(yǎng)基中在膜表面上生長歷時(shí)24小時(shí)。從嵌片頂部除去培養(yǎng)基("空氣吸揚(yáng)"法)，其中細(xì)胞繼續(xù)接受來自嵌片下方的培養(yǎng)基的營養(yǎng)物。在這些條件下，細(xì)胞生長歷時(shí)7到10天，從而使細(xì)胞在聚碳酸酯膜上生長達(dá)到多層匯合，從而使細(xì)胞密度增加達(dá)到與頰粘膜組織類似的多層組織樣屏障物。用不含碳酸氫鈉的Krebs-RJnger緩沖溶液(KRB)沖洗嵌片并通過測量跨上皮電阻(TEER)檢査均勻性來進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)必需的平均電阻是350ohms或更大時(shí)，選擇用于滲透性試驗(yàn)的嵌片，從而確保一致的滲透性屏障物厚度和分布。將嵌片分組(例如n=3),具有在試驗(yàn)活性藥物成分(即多肽)的具體制劑時(shí)所用的密切類似的平均TEER值(組的值)。例如，對于所給出的膽鹽，樣品組如下所示1)單獨(dú)的多肽；2)多肽與膽鹽的組合；3)多肽與泡騰賦形劑組合物(賦形劑配方l)粉末的組合；4)多肽與膽鹽(不同濃度)和泡騰賦形劑組合物(賦形劑配方l)粉末的組合。將嵌片置于具有限定體積的KRB的細(xì)胞培養(yǎng)孔中并在37'C在振動臺上以100rpm的設(shè)置培養(yǎng)。因此，將細(xì)胞暴露于單獨(dú)的或與所述的各種賦形劑制劑組合的所給出的活性成分(多肽)下。在1小時(shí)內(nèi)每10分鐘從底外側(cè)流體中取得樣品，并用等體積的KRB替換被除去的流體。在1小時(shí)結(jié)束時(shí)，重新獲得嵌片內(nèi)的剩余流體并保存起來，嵌片用KRB沖洗，并且再次測量TEER值。記錄了在開始步驟TEER和最終步驟TEER之間的TEER差。然后，使用MTS毒性試驗(yàn)來評價(jià)嵌片的治療的細(xì)胞毒性，并且還記錄了樣品中的治療效果。MTS毒性試驗(yàn)測量了活細(xì)胞將MTS四唑化合物轉(zhuǎn)化為甲臢的能力，甲臢在4卯nm處吸收紫外光。吸光度的量與活細(xì)胞數(shù)成正比。使用各種技術(shù)分析了得自底外側(cè)孔的樣品的活性成分(多肽)。計(jì)算了孔中活性成分的量并作取樣損失方面的校正。從這些數(shù)據(jù)，計(jì)算了滲透細(xì)胞障礙物的活性成分的量并且計(jì)算了表觀滲透系數(shù)(P叩P):Papp=S/(A*C)其中S-滲透曲線在線性區(qū)域內(nèi)的斜率(mg/sec);A-被細(xì)胞覆蓋的嵌片的面積(cm2》C-供體活性藥物成分的濃度(mg/ml)。增強(qiáng)比(ER)等于使用吸收增強(qiáng)劑的Papp除以未使用吸收增強(qiáng)劑的Papp的比。因此，使用這一技術(shù)用于以下所提供的每一種滲透性增強(qiáng)組合物。實(shí)施例1A賦形劑制劑的制備賦形劑配方inEFi)第一賦形劑組分包括制備干粉形式的泡騰組合物。在一些實(shí)施方案中，使用的泡騰組合物是如下表中所示的賦形劑制劑粉末表1泡騰賦形劑組分200毫克安慰劑片劑成分量(mg)重量％甘露醇EZ9849%碳酸氫鈉4221%擰檬酸3015%碳酸鈉20跳淀粉羥乙酸鈉63%硬脂酸鎂42%總計(jì)200mg100%24賦形劑配方2(EF2)基于賦形劑配方1制備了可供選擇的泡騰組合物，不同之處在于僅使用了泡騰對和pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。該制劑被制備成與賦形劑配方1具有相同重量即200毫克表2泡騰賦形劑組分92毫克安慰劑粉末<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>實(shí)施例IB活性成分和膽鹽組分第二活性組分包括被制備在溶液形式中的膽鹽牛磺膽酸鈉與生物活性多肽的組合。例如，干燥形式的?；悄懰徕c和多肽成分可被重構(gòu)在經(jīng)緩沖的鹽水溶液中。一種經(jīng)緩沖的鹽水溶液的組成例如如下所示KrebsRinger緩沖液(D-葡萄糖1.8g/L，氯化鎂(無水)0.0468g/L,氯化鉀0.34g/L，氯化鈉7.0g/L,磷酸氫二鈉(無水)O.lg/L，磷酸一鈉(無水)0.18g/L;pH調(diào)節(jié)到7.4;未使用碳酸氫鈉。因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包括依次沉積的上述組分的組合，即粉末形式的泡騰賦形劑組分、和在溶液中的包含膽鹽和生物活性多肽的活性組分。雙組分組合物可依次沉積(在粉末組合物之后是液體組合物)到粘膜組織上。實(shí)施例1C包含多肽的固體經(jīng)口腔粘膜劑型的制備在一些實(shí)施方案中，作為對實(shí)施例1A和1B中所述組合物的替代，本發(fā)明的組合物可被制成固體經(jīng)口腔粘膜劑型如壓縮片劑。該片劑劑型可通過將粉末形式的泡騰組合物或泡騰賦形劑組合物、膽鹽和生物活性多肽混合、然后在壓片機(jī)上壓縮粉末混合物以形成所得的固體片劑被制得。在一些實(shí)施方案中，片劑形式的固體劑型可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員容易獲知的常規(guī)技術(shù)和設(shè)備來制備。使用熒光標(biāo)記的多肽的體外試驗(yàn)當(dāng)使用體外滲透性試驗(yàn)時(shí)，使用的多肽通常是被綴合到熒光部分上的那些多肽。特別地，使用的熒光部分選自FAM(5(6)羧基熒光素)和FITC(異硫氰酸熒光素)。熒光綴合型多肽允許對任何所給出的包括相同部分的多肽采用單一敏感試驗(yàn)技術(shù)，而與多肽的分子量無關(guān)。這又使得能夠采用單一試驗(yàn)來評價(jià)較大種類和范圍的多肽，而無需為每種特定的多肽開發(fā)特定的試驗(yàn)。經(jīng)過和未經(jīng)過增強(qiáng)的熒光標(biāo)記的多肽的滲透性通過體外滲透性試驗(yàn)來測量。測量了每種多肽樣品透過細(xì)胞/組織進(jìn)入底外側(cè)流體中的多肽的量并計(jì)算了表觀滲透系數(shù)(Papp)。膽鹽(?；悄懰猁})和泡騰粉末的組合的Papp與使用單獨(dú)多肽獲得的Papp、使用多肽與泡騰組合物(不含膽鹽)的組合獲得的Papp、使用多肽與膽鹽(?；悄懰徕c)(不含泡騰組合物)的組合獲得的Papp，以確定當(dāng)組合使用時(shí)在兩種增強(qiáng)劑組分之間是否具有協(xié)同作用。當(dāng)在試驗(yàn)中使用單獨(dú)的?；悄懰猁}時(shí)，?；悄懰猁}粉末被直接沉積到細(xì)胞表面上以避免對細(xì)胞造成毒性效應(yīng)。實(shí)施例2胰淀素的比較性體外滲透性評價(jià)了多肽胰淀素的體外滲透性。胰淀素與血糖控制和糖尿病治療有關(guān)。FAM-標(biāo)記的胰淀素是具有4259.86道爾頓分子量的37個(gè)氨基酸的肽。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的胰淀素-FAM的滲透性表3比較性的胰淀素-FAM制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>Am-胰淀素；EFl-賦形劑配方1;TC-牛磺膽酸鈉。KRB=KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖1中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的胰淀素與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的吸收。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽胰淀素-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透。當(dāng)一起使用時(shí)，牛磺膽酸鹽和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例3比較性的s-CT體外滲透性評價(jià)了與鈣代謝和骨質(zhì)疏松癥的治療有關(guān)的多肽大馬哈魚由來的降鈣素(s-CT)的體外滲透性。已經(jīng)報(bào)道了其是飽脹感激素。FAM-標(biāo)記的s-CT是具有3441.1道爾頓分子量的25個(gè)氨基酸的肽片段(8-32)。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的s-CT-FAM的滲透性表4比較性的s-CT-FAM制劑成分(在KRB中)只有s-CTs-CT+EF1s-CT+TCs-CT+EF+TCs-CT-FAM廳pM/m00pM/ml100pM/m訓(xùn)pM/mlEF1-40mg/m-40mg/ml?；悄懰徕c--10mg/ml10mg/mls-CT-大馬哈魚由來的降鈣素；EF1-賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB=KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖2中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的s-CT-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽s-CT-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘27膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，牛磺膽酸鹽和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例4比較性的GLP-1-FAM的體外滲透性評價(jià)了胰高血糖素樣肽1(亦稱GLP-1)的體外滲透性。GLP-1與2型糖尿病的治療以及飽脹感控制和體重減輕有關(guān)。GLP-1-FAM是具有4071.71的分子量的30個(gè)氨基酸的肽。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的GLP-1-FAM的滲透性表5比3咬性的GLP-1-FAM制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>GLP1=GLP-1;EFl-賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB-KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖3中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的GLP小FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方1)與多肽GLP-1-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1°/。膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例5比較性的胰島素-FITC的體外滲透性評價(jià)了胰島素的體外滲透性。胰島素是具有5808道爾頓的分子量的51個(gè)氨基酸的多肽并與糖尿病的治療有關(guān)。用于試驗(yàn)的胰島素被綴合到熒光部分FITC(異硫氰酸熒光素)上。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的胰島素-FAM的滲透性表6比較性的胰島素-FITC制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>In-胰島素；EFl-賦形劑配方1;TO?；悄懰徕c。KRB-KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖4中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的胰島素-FITC與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽胰島素一起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例6比較性的高血糖素-FITC的體外滲透性評價(jià)了與急性低血糖病的治療有關(guān)的高血糖素的體外滲透性。高血糖素-FAM是具有1709.63道爾頓分子量的11個(gè)氨基酸的肽。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的滲透性表7比較性的高血糖素-FAM帝ll齊l<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>Gluc-高血糖素；EFl-賦形劑配方1;TX^?；悄懰徕c。KRB-KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖5中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的高血糖素-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽高血糖素-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果大于膽鹽和泡騰組分單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例7比較性的PTH體外滲透性評價(jià)了甲狀旁腺激素(PTH)的體外滲透性。PTH是與骨質(zhì)疏松癥的治療有關(guān)的38個(gè)氨基酸的肽。PTH-FAM具有5174.2道爾頓的分子量。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的PTH-FAM的滲透性表8比較性的PTH-FAM制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>PTH-甲狀旁腺激素；EFl-賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB-KrebsRinger緩沖溶液.結(jié)果示于圖6中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的PTH-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽PTH-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例8比較性的縮宮素-FITC的體外滲透性評價(jià)了與子宮收縮有關(guān)的激素縮宮素的體外滲透性。縮宮素-FAM是具有約1365.18道爾頓的分子量的9個(gè)氨基酸的肽。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的縮宮素-FAM的滲透性:表9比較性的縮宮素-FAM制劑.<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>Oxy-縮宮素；EFl-賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB=KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖7中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的縮宮素-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的形劑配方l)與多肽縮宮素-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，牛磺膽酸鹽和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例9比較性的去氨加壓素-FAM的體外滲透性評價(jià)了8D-Arg加壓素(AVP)(亦稱去氨加壓素)的體外滲透性。去氨加壓素與血管收縮和利尿療法有關(guān)。去氨加壓素-FAM是具有1442.25的分子量的9個(gè)氨基酸的肽。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑去氨加壓素-FAM的滲透性<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>AVP=8-Arg》/7i素,EF卜賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB=KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖8中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的去氨加壓素-FAM或AVP-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的滲透性。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽去氨加壓素-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例IO比較性的PYY-FAM的體外滲透性評價(jià)PYY或蛋白質(zhì)YY的體外滲透性。PYY是與肥胖癥治療有關(guān)的34個(gè)氨基酸的肽。PYY-FAM的分子量為4407.71。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了以下制劑的PYY-FAM的滲透性<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>PYY-肽YY;EFl-賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。KRB=KrebsRinger緩沖溶液。結(jié)果示于圖9中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的PYY-FAM與在給定濃度下的單獨(dú)的膽鹽一起似乎不可觀地增加在體外模型中多肽跨粘膜組織的吸收。同樣地，單獨(dú)的泡騰賦形劑組分(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方l)與多肽PYY-FAM—起似乎不可觀地增加跨粘膜組織吸收。然而，泡騰組分與1%膽鹽的組合確實(shí)似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于膽鹽和泡騰組分各自單獨(dú)的滲透效果的總和。還采用了不使用熒光標(biāo)記的多肽的其它方法以證實(shí)本發(fā)明的協(xié)同滲透增強(qiáng)效應(yīng)。實(shí)施例ll通過ELISA進(jìn)行s-CT分析通過超敏ELISA試劑盒DSL-10-3600(得自DiagnosticSystemsLaboratories,Inc.,Webster,Texas)測量大馬哈魚降f丐素或s-CT。使用這一技術(shù)，s-CT被塑料結(jié)合型抗體所捕獲并采用當(dāng)與酶特異性底物進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)提供光密度的酶連接型特異性抗體顯色。因此，測量了隨時(shí)間穿過經(jīng)培養(yǎng)的頰細(xì)胞的s-CT的量并用于計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)。結(jié)果示于圖10中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的s-CT與單獨(dú)的膽鹽(?；悄懰徕c)的組合，或多肽與單獨(dú)的泡騰組合物(實(shí)施例1A中所述的泡騰賦形劑配方2并被稱作EF2)的組合，似乎不在體外模型中顯示多肽s-CT跨粘膜組織的滲透的增加。然而，多肽s-CT、泡騰制劑和1%或2%膽鹽的組合確實(shí)似乎表現(xiàn)出多肽跨粘膜組織的滲透/轉(zhuǎn)運(yùn)的增強(qiáng)。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于多肽與單獨(dú)的所述膽鹽所獲得的單獨(dú)的滲透效果和多肽與單獨(dú)的所述泡騰制劑所獲得的單獨(dú)的滲透效果的總和。實(shí)施例12通過HPLC-MS-MS進(jìn)行去氨加壓素分析開發(fā)了液相色譜(LC)-質(zhì)譜(MS)技術(shù)來測量隨時(shí)間穿過經(jīng)培養(yǎng)的頰細(xì)胞的去氨加壓素的量。然后使用該數(shù)據(jù)計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)。使用編纂比較性試驗(yàn)信息，制備了圖ll。作為活性多肽的去氨加壓素(8-Arg加壓素并在圖中以DP表示)與在給定濃度下的膽鹽(?；悄懰徕c)的組合，或者與單獨(dú)的泡騰制劑(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方2并且還稱作EF2)的組合似乎不可觀地增加多肽在體外模型中跨粘膜組織的滲透。然而，多肽(DP)、泡騰制劑和1%或2%膽鹽的組合確實(shí)似乎表現(xiàn)出多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透性有明顯增強(qiáng)。因此，用于肽量化的LC/MS/MS技術(shù)一般地支持和確證了如上文所述的采用熒光標(biāo)記的多肽技術(shù)所獲得到結(jié)果。實(shí)施例13通過ELISA進(jìn)行IFNa-2b分析本發(fā)明試驗(yàn)了作為生物活性多肽的重組人干擾素a-2b(IFNcx)(分子量為19,271道爾頓并具有166個(gè)氨基酸，并具有比放射性為260X106IU/mg蛋白質(zhì))(!NTRONTMA，得自ScheringCorp.,Kenilworth,NewJersey)。IFNa是參予與病毒感染有關(guān)的免疫功能的細(xì)胞因子。使用ELISA技術(shù)(ELISA試劑盒41110-2，得自PBLInterferonSource,Inc.,Piscataway,NewJersey)測量活性多肽。在該分析中，測量了隨時(shí)間穿過經(jīng)培養(yǎng)的頰細(xì)胞的IFNa的量并用于計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)。結(jié)果如圖12所示。從圖中可見，作為生物活性多肽的IFNoc與單獨(dú)的膽鹽的組合以及與單獨(dú)的泡騰組合物(實(shí)施例1A中所述的賦形劑配方1并還被稱作EF1)的組合確實(shí)似乎不可觀地增加IFNa在體外模型中跨粘膜組織的滲透。然而，IFNa、1%或2%膽鹽和泡騰組合物的組合確實(shí)似乎產(chǎn)生多肽跨粘膜組織有明顯增強(qiáng)。牛磺膽酸鹽和泡騰制劑以及IFNa的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于由單獨(dú)的膽鹽和單獨(dú)的泡騰組合物所獲得的單獨(dú)滲透效果的總和。這些得自ELISA技術(shù)的結(jié)果一般地支持和確證了通過上述的熒光標(biāo)記的多肽滲透試驗(yàn)所獲得的結(jié)果。增強(qiáng)的頰多肽滲透的體內(nèi)試驗(yàn)麻醉的狗模型規(guī)程使用麻醉的狗模型來評價(jià)根據(jù)本發(fā)明制備的多肽組合物的經(jīng)粘膜滲透。篩選成熟的雜種大型品種(15-35千克)狗用于具有合格的醫(yī)學(xué)狀況。對于試驗(yàn)，將狗麻醉，將其右側(cè)或左側(cè)放置并經(jīng)頭靜脈插管。在水平位置將特氟隆環(huán)附著于頰粘膜以形成儲庫。在有或者沒有增強(qiáng)劑組分的條件下將生物活性多肽沉積在環(huán)周圍的頰粘膜上。根據(jù)實(shí)驗(yàn)而定，活性多肽以溶液、干粉或固體劑型(片劑)的形式被沉積。在2小時(shí)內(nèi)每10分鐘采集血樣，根據(jù)規(guī)程而定，另外采集樣本達(dá)到4小時(shí)。包含活性多肽的組合物在第60分鐘從儲庫中被除去，儲庫被清洗兩次。在2小時(shí)，使狗從麻醉中恢復(fù)并且從其頰粘膜上除去環(huán)。在從麻醉中恢復(fù)后，隨后從清醒的狗中采集血樣。使血樣凝結(jié)，并通過離心分離血漿，將血漿在-20'C或-8(TC冷凍，這根據(jù)規(guī)程的不同而異，直到進(jìn)行活性多肽含量分析之前為止。實(shí)施例14A.去氨加壓素經(jīng)口腔粘膜滲透通過各種給藥形式溶液、粉末和壓縮片劑評價(jià)了去氨加壓素(去氨-Cysl-D-Arg加壓素或D-Arg加壓素)的向血流內(nèi)的頰滲透。使用單獨(dú)的泡騰組合物EFl(實(shí)施例1A)，使用膽鹽(?；悄懰徕c)，使用膽鹽和泡騰組合物的組合試驗(yàn)了去氨加壓素。另外，使用泡騰賦形劑成分(EF1和實(shí)施例1A)、以及基礎(chǔ)泡騰制劑EF2(實(shí)施例1A)試驗(yàn)了去氨加壓素。去氨加壓素片劑的制備如下制備用于實(shí)驗(yàn)的包含去氨加壓素的片劑將200毫克的實(shí)施例1A的泡騰制劑(EFl)與20亳克的?；悄懰徕c混合。將該混合物直接加入到凍干去氨加壓素的小瓶中。將帶有粉末的小瓶混合30分鐘，然后使用裝備有5/16"圓直徑、斜緣D-尺寸機(jī)床的PiccoIa8站壓片機(jī)壓縮成片劑。將得自單獨(dú)小瓶的粉末沉積在各沖模中并在約3kN壓力下進(jìn)行手工壓縮。已經(jīng)制備了幾個(gè)供試片劑，其僅包含泡騰組合物和膽鹽，以確定在制備包含活性多肽的片劑之前的最佳壓縮條件。最終獲得的片劑在-2(TC下在干燥條件下被保持直到用于研究之前為止。因此根據(jù)上述規(guī)程在狗中對所制備的片劑進(jìn)行了試驗(yàn)。當(dāng)在該研究中使用片劑時(shí)，將片劑直接置于狗頰粘膜上并用水在1分鐘內(nèi)進(jìn)行水合。按序取得血樣并提取血漿。使用血漿樣品的LC/MS/MS分析來測量去氨加壓素。下表包含被評價(jià)的制劑信息以及得自體內(nèi)試驗(yàn)的生物利用度結(jié)果。表12a比較性的體內(nèi)制劑和結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>DP-去氨加壓素；TC-?；悄懰徕c；EFl-賦形劑配方1;EF2-賦形劑配方2。從上面數(shù)據(jù)可見，作為生物活性多肽的去氨加壓素與在給定濃度下膽鹽的組合，或者與泡騰制劑的組合，似乎不可觀地增加多肽在體內(nèi)模型中跨粘膜組織的滲透。然而，膽鹽與泡騰制劑的組合似乎增強(qiáng)多肽跨粘膜組織的轉(zhuǎn)運(yùn)/滲透。?；悄懰猁}和泡騰組合物以及多肽的組合似乎產(chǎn)生滲透結(jié)果，而當(dāng)與去氨加壓素一起使用單獨(dú)的膽鹽或單獨(dú)的泡騰組合物時(shí)，未觀察到結(jié)果。另外，盡管不希望束縛于任何理論，當(dāng)泡騰制劑與?；悄懰峤M合使用時(shí)在增強(qiáng)去氨加壓素滲透方面也似乎可能是有效的，并且因此可表明，較寬的泡騰組合物(賦形劑配方l)的核心泡騰配方部分(賦形劑配方2)，二者都在實(shí)施例1A中被描述，當(dāng)與?；悄懰猁}配對使用時(shí)是協(xié)同作用的有效部分。B.大馬哈魚降鈣素經(jīng)口腔粘膜滲透使用包含s-Ct和0%、2.5%、5.0%和10%的膽鹽(?；悄懰徕c)的泡騰壓縮片劑，試驗(yàn)了大馬哈魚降纟丐(s-Ct)進(jìn)入麻醉的狗的血流中的頰滲透。使用與上面關(guān)于去氨加壓素所述類似的技術(shù)和設(shè)備制備了片劑。下表包含被評價(jià)的制劑信息和片劑。表12b.<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>使用關(guān)于在狗中試驗(yàn)去氨加壓素的規(guī)程在麻醉的狗中試驗(yàn)了片劑。如下表所闡明的，在麻醉的狗中，當(dāng)NaTC被加入到泡騰制劑中時(shí)，通過AUC的較大增加(使用梯形法則計(jì)算)證明了s-Ct的經(jīng)粘膜滲透性有改善。盡管在狗之間存在吸收差異，但是對于每個(gè)單獨(dú)的狗而言，數(shù)據(jù)具有一致性。通過向泡騰制劑中加入2.5°/?；蚋叩腘aTC可獲得滲透性的較大改善。表12C.不同量的NaTC的AUC(pgmin/mL)對泡騰片劑(所有片劑包含sCt和EFl)中sCt的滲透性的體內(nèi)影響狗<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>實(shí)施例15A.比較性的體內(nèi)胰島素(溶液)滲透研究在以溶液形式被施加到狗頰粘膜的組合物中試驗(yàn)了人重組胰島素進(jìn)入血流的頰滲透。試驗(yàn)了單獨(dú)的胰島素與泡騰制劑EFl(實(shí)施例1A)，與膽鹽的組合，以及與膽鹽和泡騰制劑EF1和EF2的組合。用于該研究的規(guī)程牽涉"葡萄糖鉗夾"類型規(guī)程，從而隨著時(shí)間輸注以保持血糖水平相對穩(wěn)定所必需的量的5%的葡萄糖。記錄了使用的葡萄糖的總量作為被吸收的功能性生物活性胰島素的量的間接測量值。另外，使用ELISA試劑盒(KAQ1251,得自Biosource，Camarillo，California)測試血漿樣品的胰島素水平來直接測量被吸收的胰島素。測量了隨時(shí)間穿過頰組織的胰島素的量。使用賦形劑配方l(EFl)以及泡騰制劑賦形劑配方2(EF2)測量了胰島素。供試制劑和結(jié)果概括在下表中。表13比較性的體內(nèi)胰島素制劑和結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>111=胰島素；EF1-賦形劑配方1;EF2-泡騰組合物賦形劑配方2;TO?；悄懰徕c。B.比較性的體內(nèi)胰島素(片劑)滲透研究根據(jù)以下配方將粉末形式的胰島素配制成片劑:表14比較性的胰島素片劑(200毫克)制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>In-胰島素；EF1-賦形劑配方1;TC-牛磺膽酸鈉。使用與上面關(guān)于去氨加壓素所述類似的技術(shù)和設(shè)備制備了片劑，并且使用如上所述的麻醉的狗模型規(guī)程在狗中試驗(yàn)了片劑。對于體內(nèi)狗研究，將片劑直接置于頰粘膜上并與水在1分鐘內(nèi)進(jìn)行水合。收集血漿樣品并使用ELISA試劑盒進(jìn)行分析，分析了數(shù)據(jù)并獲得了平均結(jié)果。結(jié)果概括在下表中-表15胰島素片劑(200毫克)的體內(nèi)滲透性數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>In-胰島素；EF卜賦形劑配方1;TC-?；悄懰徕c。實(shí)施例16比較性的膽鹽數(shù)據(jù)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)以確定可在本發(fā)明中行得通的最有效的膽鹽。最初在細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)(體外)中測量膽鹽候選物的毒性水平。制備并試驗(yàn)了被溶解在Krebs-Ringer緩沖溶液中并進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋的膽鹽的溶液。對樣品進(jìn)行MTS毒性試驗(yàn)(可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地獲知)。使用獲得的Tox50值，測定了膽鹽與規(guī)定量的賦形劑配方1粉末的組合的增強(qiáng)能力。以2X、IX、KX和^:XTox50量制備了樣品并評價(jià)了其單獨(dú)的以及與約5到6)ig的上述泡騰賦形劑制劑(賦形劑配方l)的滲透性增強(qiáng)能力。因此，比較了與泡騰賦形劑組分的增強(qiáng)能力和協(xié)同能力。篩選經(jīng)過如此試驗(yàn)的膽鹽的廣泛集合，用于在本發(fā)明的背景下與泡騰賦形劑制劑組合時(shí)的預(yù)期增強(qiáng)性質(zhì)。因此，基于預(yù)期評價(jià)結(jié)果選擇了以下的膽鹽?；悄懰徕c(TC),甘膽酸鈉(GC)，甘氨脫氧膽酸鈉(GDC)，?；敲撗跄懰徕c(TDC)，膽酸鈉(C)，牛磺鵝去氧膽酸鈉(TCDC)和?；切苋パ跄懰徕c(TUDC)，及其組合。增強(qiáng)比(ER)是使用增強(qiáng)劑治療的表觀滲透系數(shù)除以使用單獨(dú)的活性成分的表觀滲透系數(shù)的比。對于每種供試的膽鹽實(shí)施了這一技術(shù)和計(jì)算。結(jié)果示于圖13中。從圖中數(shù)據(jù)可知，對于每種供試的七種膽鹽，根據(jù)本發(fā)明的組合物的活性多肽(胰島素)與膽鹽和泡騰賦形劑組分二者的組合，似乎產(chǎn)生由ER所顯示的實(shí)質(zhì)上更高的滲透性效果，這與分別使用滲透增強(qiáng)劑(即，單獨(dú)的膽鹽或單獨(dú)的泡騰賦形劑)相比。從圖13中可知，使用多肽與單獨(dú)的膽鹽的組合的制劑，使用多肽與單獨(dú)的泡騰賦形劑組分的組合的制劑，似乎都不能實(shí)現(xiàn)滲透性水平到多肽(胰島素)與膽鹽和泡騰賦形劑組分二者的最終組合所實(shí)現(xiàn)的程度。這一結(jié)果似乎是一致性的，與制劑中使用的膽鹽無關(guān)。實(shí)施例17通過ELISA進(jìn)行IGF-1分析評價(jià)了胰島素樣生長因子-l(IGF-l)的體外滲透性。IGF-1由具有3個(gè)內(nèi)部二硫鍵的70個(gè)氨基酸組成。其具有約7600道爾頓的分子量。IGF-1是具有多種作用的復(fù)合生長因子。使用上面描述的細(xì)胞培養(yǎng)模型，測量了IGF-1的滲透性。通過ELISA試劑盒(DG-100,R&DSystems,MinneapolisMN)測量了IGF-1。使用這一技術(shù)，IGF-CT被塑料結(jié)合型抗體所捕獲并采用當(dāng)與酶特異性底物進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)提供光密度的酶連接型特異性抗體顯色。因此，測量了隨時(shí)間穿過經(jīng)培養(yǎng)的頰細(xì)胞的IGF-1的量并用于計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)。結(jié)果示于圖14中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的IGF-1與單獨(dú)的膽鹽(?；悄懰徕c)的組合，或多肽與單獨(dú)的泡騰組合物(實(shí)施例1A中所述的泡騰賦形劑配方2并被稱作EF2)的組合，似乎不在體外模型中顯示多肽IGF-1跨粘膜組織的滲透的增加。然而，多肽IGF-1、EF2和1%膽鹽的組合確實(shí)似乎表現(xiàn)出多肽跨粘膜組織的滲透/轉(zhuǎn)運(yùn)的增強(qiáng)。當(dāng)一起使用時(shí)，牛磺膽酸鹽和泡騰賦形劑組分制劑以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于多肽與單獨(dú)的所述膽鹽組合所獲得的單獨(dú)的滲透效果和多肽與單獨(dú)的所述泡騰制劑組合所獲得的單獨(dú)的滲透效果的總和。這些使用ELISA技術(shù)的結(jié)果一般地支持和確證了通過上述的熒光標(biāo)記的多肽滲透試驗(yàn)所獲得的結(jié)果。實(shí)施例18通過酶活性進(jìn)行辣根過氧化酶分析獲得了用生物素(SigmaChemicals,St.LouisMO)標(biāo)記的辣根過氧化酶(HRPO-b)。HRPO-b是具有約34,000道爾頓的分子量的308個(gè)氨基酸。其是在生物鑒定諸如ELISA中使用的常見的酶。其使用涂有鏈霉親和素的磁珠使其與樣品的其它組分純化分開。通過在450nM的O.D下分析過氧化物酶底物(R&DSystems,MinneapolisMN)的轉(zhuǎn)化測量經(jīng)過洗滌的磁珠上的HRPO-b的酶活性。因此，測量了隨時(shí)間穿過經(jīng)培養(yǎng)的頰細(xì)胞的HRPO-b的量并用于計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)。結(jié)果示于圖15中。從圖中數(shù)據(jù)可看出，作為活性多肽的HRPO-b自身，與單獨(dú)的膽鹽(?；悄懰徕c)的組合，或該多肽與單獨(dú)的泡騰組合物(實(shí)施例1A中所述的泡騰賦形劑配方2并被稱作EF2)的組合，似乎不在體外模型中顯示多肽HRPO-b跨粘膜組織的滲透的增加。然而，多肽IGF-b、EF2和1%膽鹽的組合確實(shí)似乎表現(xiàn)出多肽跨粘膜組織的滲透/轉(zhuǎn)運(yùn)的增強(qiáng)。當(dāng)一起使用時(shí)，?；悄懰猁}和泡騰賦形劑組分制劑以及多肽的組合產(chǎn)生的滲透結(jié)果似乎大于多肽與單獨(dú)的所述膽鹽組合所獲得的單獨(dú)的滲透效果和多肽與單獨(dú)的所述泡騰制劑組合所獲得的單獨(dú)的滲透效果的總和。這些使用原初酶活性一般地支持和確證了通過上述的熒光標(biāo)記的多肽滲透試驗(yàn)所獲得的結(jié)果。上文所述的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)似乎支持了在本發(fā)明組合物的泡騰組分成分、膽鹽和生物活性多肽成分之間的協(xié)同的相互作用。盡管不束縛于任何理論，據(jù)信泡騰賦形劑制劑與膽鹽成分以促進(jìn)多肽跨粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)(作為藥物遞送途徑)的方式相互作用。另一個(gè)可能的解釋可以是，泡騰組分和膽鹽的單獨(dú)效果的組合對粘膜組織產(chǎn)生了更大的總的凈細(xì)胞滲透性。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明可用于將各種多肽經(jīng)由經(jīng)口腔粘膜遞送途徑遞送到接受者。另外，本發(fā)明可用于醫(yī)藥、藥物或營養(yǎng)領(lǐng)域中。已經(jīng)在上文中參考多種和特定的實(shí)施方案和技術(shù)描述了本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可理解的是，可對這些實(shí)施方案和技術(shù)進(jìn)行合理的變化和改變，而不顯著脫離由權(quán)利要求書所定義的本發(fā)明的精神或范圍。權(quán)利要求1.經(jīng)口腔粘膜組合物，其包含a)治療有效量的生物活性多肽；b)泡騰賦形劑組分；和c)膽鹽。2.權(quán)利要求1的組合物，其中多肽具有約500道爾頓到約200千道爾頓的分子量。3.權(quán)利要求2的組合物，其中多肽具有約1000道爾頓到約20,000道爾頓的分子量。4.權(quán)利要求1的組合物，其中所述泡騰賦形劑組分包括食品級的酸和堿。5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述泡騰賦形劑組分包括檸檬酸和碳酸氫鈉。6.權(quán)利要求l的組合物，其中所述膽鹽選自牛磺膽酸鈉、甘膽酸鈉、甘氨脫氧膽酸鈉、?；敲撗跄懰徕c、膽酸鈉、?；蛆Z去氧膽酸鈉和?；切苋パ跄懰徕c，及其組合。7.權(quán)利要求6的組合物，其中所述膽鹽是牛磺膽酸鈉。8.權(quán)利要求1的組合物，其中所述泡騰賦形劑組分還包括pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。9.權(quán)利要求8的組合物，其中pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是碳酸鹽。10.權(quán)利要求9的組合物，其中pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是碳酸鈉。11.經(jīng)口腔粘膜組合物，其包含a)治療有效量的生物活性多肽；b)泡騰賦形劑組分；C)膽鹽；和d)崩解劑。12.權(quán)利要求ll的組合物，其中所述崩解劑是淀粉羥乙酸鹽。13.權(quán)利要求12的組合物，其中所述淀粉羥乙酸鹽是淀粉羥乙酸鈉。14.權(quán)利要求1或11的組合物，其中所述生物活性多肽選自胰淀素、細(xì)鱗大馬哈魚由來的降鈣素(s-CT)、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、高血糖素、甲狀旁腺激素(PTH)、縮宮素和去氨加壓素(D-Arg加壓素)。15.權(quán)利要求1或11的組合物，其中所述生物活性多肽選自胰島素、蛋白質(zhì)YY(PYY)、IFN-ot、IFN-(3和IFN-y。16.增強(qiáng)生物活性多肽的經(jīng)粘膜吸收的方法，包括對接受者給予劑型形式的所述生物活性多肽，所述劑型包含藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的生物活性多肽；膽鹽；和泡騰賦形劑組分。17.權(quán)利要求16的方法，其中所述多肽具有約500道爾頓到約200千道爾頓的分子量。18.權(quán)利要求17的方法，其中所述多肽具有約1000道爾頓到約·20,000道爾頓的分子量。19.權(quán)利要求16的方法，其中所述生物活性肽選自胰淀素、大馬哈魚由來的降鈣素(s-CT)、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、高血糖素、甲狀旁腺激素(PTH)、縮宮素和去氨加壓素(D-Arg加壓素)。20.權(quán)利要求16的方法，其中所述生物活性多肽選自胰島素、蛋白質(zhì)YY(PYY)、IFN-a、IFN-卩和IFN.y。21.權(quán)利要求16的方法，其中所述膽鹽選自?；悄懰徕c、甘膽酸鈉、甘氨脫氧膽酸鈉、?；敲撗跄懰徕c、膽酸鈉、?；蛆Z去氧膽酸鈉和牛磺熊去氧膽酸鈉，及其組合。22.權(quán)利要求21的方法，其中膽鹽是?；悄懰徕c。23.權(quán)利要求16的方法，其中所述泡騰賦形劑組分包括酸和堿。24.權(quán)利要求23的方法，其中所述泡騰賦形劑組分包括檸檬酸和碳酸鈉。25.權(quán)利要求16的方法，其中所述泡騰賦形劑組分還包括pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。26.權(quán)利要求25的方法，其中所述pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是碳酸氫鹽。27.權(quán)利要求26的方法，其中所述pH調(diào)節(jié)物質(zhì)是碳酸氫鹽。28.權(quán)利要求16的方法，其中所述藥物組合物還包括崩解劑。29.權(quán)利要求28的方法，其中所述崩解劑是淀粉羥乙酸鹽。30.權(quán)利要求29的方法，其中所述崩解劑是淀粉羥乙酸鈉。31.對接受者給予生物活性多肽的方法，包括使藥物組合物接觸接受者口腔內(nèi)的粘膜組織，歷時(shí)該組合物足夠溶出并經(jīng)粘膜遞送生物活性多肽跨粘膜的時(shí)段，所述藥物組合物包含生物活性多肽；膽鹽；和泡騰賦形劑組分。32.權(quán)利要求31的方法，其中所述生物活性肽選自胰淀素、大馬哈魚由來的降鈣素(s-CT)、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、高血糖素、甲狀旁腺激素(PTH)、縮宮素和去氨加壓素(D-Arg加壓素)。33.權(quán)利要求31的方法，其中所述生物活性多肽選自胰島素、蛋白質(zhì)YY(PYY)、IFN-a、IFN-(3和IFN-y。34.用于經(jīng)粘膜吸收的固體經(jīng)口劑型，其包含a)生物活性多肽；b)泡騰賦形劑組分；和c)膽鹽。35.權(quán)利要求34的劑型，其中所述泡騰賦形劑組分還包括pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。36.權(quán)利要求34的劑型，其中所述多肽是去氨加壓素。37.權(quán)利要求34的劑型，其中所述多肽是胰島素。38.權(quán)利要求34的劑型，其中所述劑型是壓縮片劑。39.在有需要的接受者中治療糖尿病的方法，該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物，該經(jīng)口腔粘膜組合物包含治療有效量的胰島素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。40.在有需要的接受者中治療癌的方法，該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物，該經(jīng)口腔粘膜組合物包含治療有效量的IFN-y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。41.在有需要的接受者中治療病毒感染或細(xì)菌感染的方法，該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物，該經(jīng)口腔粘膜組合物包含治療有效量的IFN-y、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。42.在有需要的接受者中治療精神病學(xué)疾病或病癥的方法，該方法包括對接受者給予經(jīng)口腔粘膜組合物，該經(jīng)口腔粘膜組合物包含治療有效量的胰淀素、泡騰賦形劑組分；和膽鹽。43.權(quán)利要求42的方法，其中精神病學(xué)疾病或病癥是情緒障礙、焦慮癥或精神分裂癥。44.權(quán)利要求39-43中任一項(xiàng)的方法，其中組合物在接受者口腔處或附近被給予。全文摘要本文所述的本發(fā)明提供了增強(qiáng)生物活性多肽跨口腔粘膜組織的經(jīng)粘膜滲透并提供了該生物活性多肽的有效治療的相對快速起效的固體經(jīng)口腔粘膜劑型。根據(jù)本發(fā)明被制得的劑型可增強(qiáng)多肽經(jīng)粘膜吸收進(jìn)入接受者達(dá)到治療血漿濃度。本發(fā)明提供了用于的生物活性多肽經(jīng)口腔粘膜吸收的固體劑型，其中所述劑型包含藥物組合物，該藥物組合物包含治療活性多肽；膽鹽；和泡騰賦形劑組分，其可包含泡騰對并任選包含pH調(diào)節(jié)物質(zhì)。本發(fā)明包括給予生物活性多肽的方法以及增強(qiáng)生物活性多肽的經(jīng)粘膜吸收的方法。文檔編號A61K38/22GK101674843SQ200880014387公開日2010年3月17日申請日期2008年5月1日優(yōu)先權(quán)日2007年5月1日發(fā)明者加里·B·瑟曼,史蒂文·L·德菲申請人:賽福倫公司