專(zhuān)利名稱(chēng)：含有抗真菌多肽的抗頭屑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有抗真菌多肽的抗頭屑組合物，抗真菌多肽在治療或預(yù)防頭屑中的應(yīng)用，治療或預(yù)防頭屑的方法，和抗頭屑多肽在制備用于治療或預(yù)防頭屑的組合物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
頭屑是頭皮功能失調(diào)引起的，但它不認(rèn)為是皮膚病，因此，頭屑應(yīng)當(dāng)和可能在早期階段與它類(lèi)似的疾病區(qū)分開(kāi)來(lái)。盡管頭屑只是一種美容問(wèn)題，但是對(duì)于治療這種癥狀的領(lǐng)域仍然進(jìn)行了大量的研究。
廣泛認(rèn)可的是，頭屑主要由酵母菌瓶形酵母(Pityrosporum ovale)引起，因此，抑制瓶形酵母生長(zhǎng)的物質(zhì)可能在治療或預(yù)防頭屑中有用。
傳統(tǒng)上用于治療頭屑的活性物質(zhì)包括例如各種煤焦油制品、水楊酸、一硫化硒和雙(2-巰基吡啶氧化)鋅。
新近，WO 95/27471描述了一種含有酮康唑或elubiol的新抗頭屑洗發(fā)劑。
然而，現(xiàn)有物質(zhì)中一些有非常令人不快的氣味，而另一些則是只可在醫(yī)療指導(dǎo)和控制之下應(yīng)用到頭皮上的非常烈性的物質(zhì)。因此，有必要開(kāi)發(fā)容易生產(chǎn)(如通過(guò)微生物)，又不產(chǎn)生不愉快的氣味，并且沒(méi)有有害性質(zhì)的物質(zhì)。
本發(fā)明概要令人吃驚地發(fā)現(xiàn)，具有

圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽即使在低濃度下也能有效阻止瓶形酵母的生長(zhǎng)。
因此，在第一方面，本發(fā)明涉及適合應(yīng)用于人的頭發(fā)或頭皮的抗頭屑組合物，其包含有效量的具有圖1所顯示之氨基酸序列的抗真菌多肽或其變體，所述變體是I)可與如下抗體反應(yīng)的多肽，所述抗體可與具有圖1所示氨基酸序列的多肽的至少一個(gè)表位反應(yīng)，或II)其氨基酸序列與圖1所示多肽的氨基酸序列基本同源的多肽。
在第二方面，本發(fā)明涉及以上定義的抗真菌多肽在治療或預(yù)防頭屑中的應(yīng)用。
在第三方面，本發(fā)明涉及治療或預(yù)防頭屑的方法，所述方法包括用有效量的以上定義的抗真菌多肽接觸頭發(fā)。
最后，本發(fā)明還涉及以上定義的抗真菌多肽在制備用于治療或預(yù)防頭屑的組合物中的應(yīng)用。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明圖1顯示本發(fā)明抗真菌多肽的全長(zhǎng)氨基酸序列。
圖2是生長(zhǎng)了酵母瓶形酵母的微量滴定板的示意圖，參見(jiàn)實(shí)施例1。
本發(fā)明的詳述描述抗真菌多肽及其變體在本文中，按其傳統(tǒng)意義使用氨基酸的三字母密碼。除非明確指出，本文提到的氨基酸是L型氨基酸。
本文所用述語(yǔ)“抗真菌多肽”旨在包括所述多肽的線性和活性折疊結(jié)構(gòu)，而且，在適當(dāng)?shù)牡胤剑珊褪稣Z(yǔ)“抗真菌蛋白”互換使用。
與抗真菌多肽聯(lián)用的述語(yǔ)“變體”是指具有圖1所示氨基酸序列的多肽衍生出的多肽或天然存在的變體。典型地，該變體與天然抗真菌多肽有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，這一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基可以從所述多肽N末端或C末端的一端或兩端插入或缺失，也可以在所述多肽氨基酸序列內(nèi)部的一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)插入或缺失，或在所述多肽氨基酸序列內(nèi)部或一端或兩端被一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基替代。
而且，本發(fā)明的變體具有上述特性I)和II)的一項(xiàng)或兩項(xiàng)。
特性I)，即本發(fā)明變體與如下抗體的反應(yīng)性，其中所述抗體抗具有下文圖1所示氨基酸序列的多肽的至少一個(gè)表位或與之反應(yīng)。該特性可使用按下文材料和方法部分標(biāo)題“抗AFPP抗體的制備”中的描述制備的抗體制品來(lái)測(cè)定?？贵w反應(yīng)性可采用本領(lǐng)域已知的方法來(lái)測(cè)定，所述方法例如Western印跡或徑向免疫擴(kuò)散分析，例如Hudson等1989所描述的方法。
上文所述AFPP同源性用顯示第一個(gè)序列由第二個(gè)序列衍生的兩個(gè)蛋白質(zhì)序列之間的一致性程度來(lái)確定。該同源性可通過(guò)本領(lǐng)域已知的計(jì)算機(jī)程序來(lái)適當(dāng)確定，如GCG程序包中提供的GAP(Wisconsin程序包的程序手冊(cè)(Program Manual for the Wisconsin Package)，第8版，1994年8月，Genetics Computer Group，575 Science Drive，Madison，Wisconsin，USA 53711)(Needleman，S.B.和Wunsch，C.D.，(1970)，分子生物學(xué)雜志(Journal of Molecular Biology)，48，第443—453頁(yè))。使用空缺(Gap)和下列用于多肽序列比較的設(shè)定空缺建立罰分3.0，空缺延伸罰分0.1，本發(fā)明類(lèi)似DNA序列編碼的多肽的成熟部分顯示與圖1所示氨基酸序列的成熟部分有優(yōu)選至少約60％，如至少約70％、至少約80％、至少約90％、至少約95％，更優(yōu)選至少約97％，最優(yōu)選至少約99％的一致性程度。
優(yōu)選地，AFPP包含圖1的氨基酸序列；或其等位變體；或其具有AFPP活性的片段。
AFPP的片段是具有一個(gè)或多個(gè)選自該氨基酸序列氨基和/或羧基末端的氨基酸的多肽。等位變體是指一個(gè)基因位于相同染色體座位的兩個(gè)或多個(gè)可替代形式的任意一個(gè)。等位變異通過(guò)突變天然發(fā)生，可導(dǎo)致種群內(nèi)部的多態(tài)性。基因突變可以是沉默的(所編碼的蛋白質(zhì)沒(méi)有改變)，也可以編碼具有改變的氨基酸序列的多肽。多肽的等位變體是基因等位變體所編碼的多肽。
同源AFPP的氨基酸序列與圖1的氨基酸序列的不同可以是一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的插入或缺失和/或由不同的氨基酸殘基替代一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基。優(yōu)選地，氨基酸改變?cè)谛再|(zhì)上比較小，即是不顯著影響蛋白質(zhì)折疊和/或活性的保守氨基酸替代；小的缺失，典型是1至約30個(gè)氨基酸的缺失；小的氨基或羧基末端突出，如氨基末端的甲硫氨酸殘基；不超過(guò)約20—25個(gè)殘基的小的接頭肽；通過(guò)改變凈電荷或其它功能便于純化的小的突出，如聚組氨酸片段、抗原表位或結(jié)合域。
本文所用述語(yǔ)“有效量”是指具有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其變體的量，該量足以防治(從而除去或至少是限制)由于頭屑引起的起皮。
典型地，根據(jù)本發(fā)明所使用的多肽來(lái)自微生物。盡管可設(shè)想抗真菌多肽或其變體可通過(guò)其它微生物如細(xì)菌、原生動(dòng)物和藻類(lèi)產(chǎn)生，但該多肽通常來(lái)自真菌，特別是曲霉屬(Aspergillus)的真菌。
正如WO 94/01459所詳細(xì)說(shuō)明的，已在真菌種巨大曲霉(A.giganteus)的若干株系中發(fā)現(xiàn)具有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽，所述株系的一個(gè)例子是在真菌菌種保藏中心(Centraallbureauvoor Schimmelcultures，CBS)保藏的、保藏號(hào)為CBS 526.65的巨大曲霉株。
但是，適于根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用的抗真菌多肽或其變體可期待來(lái)自其它真菌種，特別是其它曲霉屬物種，如A.pallidus、棒曲霉(A.clavatus)、A.longivesica、A.rhizopodus和A.clavatonanicus，因?yàn)檫@些種和巨大曲霉之間存在近緣的關(guān)系。
如上所述，抗真菌多肽的變體可以是天然來(lái)源的變體，即從任何一種以上列舉的真菌種分離的多肽，也可以是基于抗真菌多肽的氨基酸序列知識(shí)構(gòu)建的、合成產(chǎn)生的變體。
如前文所述，抗真菌多肽的其它變體也可用于本發(fā)明的目的。因此，可以考慮，使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)，如NMR(如蛋白質(zhì)工程(ProteinEngineering)，編者Oxender，D.L.和Fox，C.F.，Alan R.Liss，Inc.New York(1987)所描述的)、X-射線衍射、計(jì)算機(jī)模擬等，根據(jù)對(duì)圖1所示抗真菌多肽的構(gòu)象結(jié)構(gòu)和活性位點(diǎn)的分析，可鑒定圖1所示多肽的有益的、也可用于治療或防止頭屑的變體。當(dāng)鑒定了抗真菌多肽氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)有趣的改變時(shí)，即可通過(guò)適當(dāng)修改編碼該抗真菌多肽的核苷酸序列來(lái)制備相應(yīng)的變體。
先前，Nakaya等(1990)公開(kāi)了巨大曲霉抗真菌多肽的氨基酸序列。Wnendt等(1990)描述了相應(yīng)的cDNA序列，而WO 91/19738描述了該cDNA序列在構(gòu)建能產(chǎn)生該多肽的轉(zhuǎn)基因植物中的應(yīng)用。本文給出的實(shí)施例中所用的抗真菌多肽(即具有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽)與WO 91/19738中公開(kāi)的抗真菌多肽有如下不同Asn-4已被Pro替代，Ala-24已被Gly替代，Lys-32已被Arg替代，Phe-42已被Leu替代，Tyr-50已被His替代。
因此，圖1所示多肽用于治療或預(yù)防頭屑的有趣變體的一個(gè)具體例子是包含圖1所示氨基酸序列，優(yōu)選由該序列組成的抗真菌多肽，其中第4位的Pro用Asn替代，第24位的Gly用Ala替代，第32位的Arg用Lys替代，第42位的Leu用Phe替代，和/或第50位的His用Tyr替代。
另一個(gè)有趣變體公開(kāi)于WO 94/01459。WO 94/01459所公開(kāi)的氨基酸序列與圖1所示氨基酸序列有如下不同Pro-4被Asp替代，Gly-24被Ala替代，Arg-32被Val替代，Leu-42被Phe替代，His-50被Tyr替代。
因此，圖1所示多肽用于治療或預(yù)防頭屑的有趣變體的另一個(gè)具體例子是包含圖1所示氨基酸序列，優(yōu)選由該序列組成的抗真菌多肽，其中第4位的Pro用Asp替代，第24位的Gly用Ala替代，第32位的Arg用Val替代，第42位的Leu用Phe替代，和/或第50位的His用Tyr替代。
然而，可以設(shè)想，除以上提到的那些外，其它變體也可能在頭屑的治療或預(yù)防中有用。因此，圖1所示抗真菌多肽第4、24、32、42和50位的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被其它天然存在的氨基酸殘基替代所產(chǎn)生的這些變體的根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用，也包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
圖1所示的抗真菌多肽及其變體可通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法制備。WO 94/01459中給出了圖1所示多肽的制備的詳細(xì)描述?？诡^屑組合物盡管為了簡(jiǎn)便，本文所述組合物通常被稱(chēng)為“洗發(fā)劑組合物”，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，所述抗真菌多肽也可摻入至適合應(yīng)用于頭皮或頭發(fā)的任何其它組合物中。因此，包含所述抗真菌多肽的這類(lèi)非洗發(fā)劑組合物也包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。這些其它組合物的例子是溶液、懸浮液、乳狀液、凝膠、泡沫、膏狀物等。因此，盡管洗發(fā)劑是應(yīng)用本發(fā)明抗真菌多肽的目前優(yōu)選組合物，但可以設(shè)想，也可通過(guò)其它手段來(lái)應(yīng)用該抗真菌多肽，例如配制成發(fā)用凝膠或摩絲、生發(fā)水、頭發(fā)噴霧劑、護(hù)發(fā)素、頭發(fā)整理劑等。
可使洗發(fā)劑組合物適合油性、干性或正常頭發(fā)，并且可以按本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方式，如“Woodruff氏成分和配方手冊(cè)(Woodruff’singredients&formulary handbook)”，1997，Miller Freeman中所描述的方式，制備洗發(fā)劑組合物。同樣，發(fā)用凝膠或摩絲、生發(fā)水、頭發(fā)噴霧劑、護(hù)發(fā)素等，也可使用用于制備適合應(yīng)用至頭發(fā)或頭皮上的這種組合物的本領(lǐng)域已知成分和方法來(lái)制備。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)清楚，根據(jù)本發(fā)明的抗頭屑組合物不應(yīng)采用可能會(huì)失活抗真菌多肽的成分或方法(如過(guò)高的溫度)。
活性成分，即含有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其變體，在洗發(fā)劑組合物以可有效治療或預(yù)防頭屑的量使用。
典型地，本發(fā)明的洗發(fā)劑組合物含有基于該洗發(fā)劑組合物總重量計(jì)算的約10-7至約10％重量的抗真菌多肽。優(yōu)選抗真菌多肽的量在約5×10-6到約5％的范圍內(nèi)，如在任一如下子范圍內(nèi)約5×10-6到約0.5％；約5×10-6到約0.1％；約5×10-6到約10-5％；約10-5到約10-4％；約10-4到約10-3％；約10-3到約0.01％；約0.01到約0.1％；約0.1％到約1.0％；和約1.0％到約5.0％。
根據(jù)本發(fā)明的洗發(fā)劑組合物可含有主要用作清潔劑的一種或多種表面活性劑。適當(dāng)表面活性劑的選擇對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是普通常識(shí)問(wèn)題。通常在洗發(fā)劑組合物中使用陰離子表面活性劑。該陰離子表面活性劑的例子是烷基硫酸、烷基苯磺酸、烷基砜、α-鏈烯基磺酸、聚氧乙烯烷基苯基磺酸和聚氧乙烯烷基苯基硫酸的堿金屬、銨或羥烷基胺鹽。也可使用表面活性劑的混合物。
可包括在根據(jù)本發(fā)明的洗發(fā)劑組合物中的適合表面活性劑的一個(gè)具體例子是月桂基醚硫酸鈉，其分子式是CH3(CH2)10CH2(OCH2CH2)nOSO3Na，其中n代表具有1-4平均值的數(shù)字。
可摻入至本發(fā)明洗發(fā)劑組合物中的適合表面活性劑的另一個(gè)具體例子是椰油基肌氨酸鈉。椰油基肌氨酸是肌氨酸(N-甲基甘氨酸)的椰子油脂肪酸酰胺，而椰子脂肪酸是肉豆蔻酸、月桂酸、棕櫚酸和硬脂酸的混合物。
可摻入至本發(fā)明洗發(fā)劑組合物中的適合表面活性劑的其它具體例子包括C14、C15和C16烯屬磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、椰油酰胺丙基氧化胺、月桂酰胺二乙醇胺(1auramido diethanolamine)(月桂酰胺DEA)、椰油酰胺基丙基甜菜堿、油酰胺MIPA磺基丁二酸二鈉、椰油酰胺MIPA磺基丁二酸二鈉、月桂基醚磺基丁二酸二鈉、椰油酰兩性羧基甘氨酸鹽(cocoaamphocarboxy-glycinate)和MEA磺基丁二酸二鈉。
可加至本發(fā)明組合物中的另一類(lèi)有趣表面活性劑是糖表面活性劑。糖表面活性劑形式的表面活性劑的例子包括(a)烷基和/或鏈烯基多葡糖苷和/或(b)脂肪酸N-烷基多羥基烷基酰胺。
烷基和/或鏈烯基多葡糖苷(a)可具有如下分子式(I)R1-O-[G]p(I)其中R1＝C4-22烷基和/或鏈烯基，G＝具有5或6個(gè)碳原子的糖殘基，p＝1－10。
脂肪酸N-烷基多羥基烷基酰胺(b)可具有如下分子式R2CO-N(R3)-[Z](II)其中R2CO＝C6-22脂族?；鶜埢?，R3＝H、具有1－4個(gè)碳原子的烷基或羥烷基，[Z]＝具有3－12個(gè)碳原子和3－10個(gè)OH基的線性或分支的多羥基烷基殘基。
它也包括a)分子式為R1-O-[G]p的烷基和鏈烯基多葡糖苷和b)C12-22二級(jí)2，3-烷基硫酸的堿和/或堿金屬鹽，其中R1＝C4-22烷基和/或鏈烯基；G＝具有5或6個(gè)碳原子的糖殘基，p＝1－10。(I)∶(II)的重量比優(yōu)選1∶99－99∶1。
還包括脂肪酸N-烷基多羥基烷基酰胺；和糖表面活性劑蔗糖酯、脫水山梨糖醇酯和/或聚山梨酸酯。
糖表面活性劑也可包含10－40％按重量計(jì)算的分子式為R1-O-[G]p的烷基和/或鏈烯基多葡糖苷、10－40％按重量計(jì)算的分子式為R2-O-(G)p的烷基和/或鏈烯基多葡糖苷和80－20％按重量計(jì)算的分子式為R3-(OCH2CH2)nO-SO3M的烷基醚硫酸鹽，其中R1＝C8-11烷基或鏈烯基；(G)＝葡萄糖基；p＝1－10，優(yōu)選1－3；R2＝C12-22烷基或鏈烯基；R3＝C6-22烷基或鏈烯基；M＝堿或堿土金屬，或銨或鏈烷醇銨離子，優(yōu)選Na或Mg；n＝1－20，優(yōu)選2－7。優(yōu)選地，R2和R3是獨(dú)立的C12-14烷基。
糖表面活性劑的另一個(gè)例子是聚甘油脂肪酸酯聚氧化烯醚R1R2R3N+-CH(Y)-CH2-O-CH2-C(CH3)2-C(OH)(H)-C(＝O)-NH-CH2-CH2-OHX-(I)，其中R1，R2＝C1-24烷基或C8-24鏈烯基；R3＝C1-18亞烷基；X-＝單價(jià)有機(jī)或無(wú)機(jī)陰離子；Y＝OH或H。
糖表面活性劑也可包括(A)1－5％按重量計(jì)算的脂肪醇聚乙二醇醚、1－5％按重量計(jì)算的Guerbet醇和1－5％按重量計(jì)算的多元醇部分酯，(B)1－5％按重量計(jì)算的陰離子聚合物，(C)15－30％按重量計(jì)算的脂肪醇聚乙二醇醚硫酸鹽，(D)15－30％按重量計(jì)算的烷基多葡糖苷；和分子式為RuCO-N(R2)-Z的脂肪酸-N-烷基多羥基烷基酰胺的硫酸化產(chǎn)物，其中，R1CO＝C6-22脂族?；籖2＝H、C1-4烷基或C1-4羥烷基；Z＝含有3－10個(gè)羥基的C3-12多羥基烷基。
糖表面活性劑也可選自分子式(I)的烷基多葡糖苷和分子式(II)的羧酸N-多羥基烷基酰胺R1-O(G)(I)
R2CO-NR3-Z (II)其中R1＝可任選的羥化C1-8烷基；G＝具有5－6個(gè)碳原子的糖殘基；p＝1－10；R2CO＝C1-8脂族?；?；R3＝H、C1-8烷基或C1-8羥烷基；Z＝含有3－10個(gè)OH基團(tuán)的C3-12多羥基烷基。
本發(fā)明的洗發(fā)劑組合物還可包含起泡劑如脂肪酸單或二鏈烷醇酰胺，如例如椰油酰胺MEA(cocamide MEA)(椰子酸單乙醇酰胺的混合物)、椰油酰胺DEA(cocamide DEA)(椰子酸二乙醇酰胺的混合物)、油酰胺DEA和油酰胺DEA。
本發(fā)明的洗發(fā)劑組合物也可包含一種或多種粘度增強(qiáng)劑以便賦予該洗發(fā)劑適當(dāng)?shù)摹俺矶取?。該粘度增?qiáng)劑的例子是Carbopol 1342和纖維素衍生物如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素等。為控制最終洗發(fā)劑組合物的粘度，也可加入少量(通常為0.2到5.0％重量)NaCl。
此外，本發(fā)明的組合物也可包括一種或多種保存劑如EDTA四鈉(乙二胺四乙酸四鈉)、quaternium-15(1-(3-氯烯丙基)-3，5，7-三氮雜-1-氮鎓-金剛烷氯化物)、Kathon CG殺蟲(chóng)劑(5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮的混合物)，對(duì)羥基苯甲酸酯、羥苯甲酸甲酯、芐醇等。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，本發(fā)明的組合物也可包含其它附助劑如香料、著色劑、不透明劑、調(diào)節(jié)劑如polyquaternium-7(它是丙烯酰胺和二甲基二烯丙基氯化銨的聚合季銨鹽)、珠光劑如乙二醇二硬脂酸酯和乙二醇單硬脂酸酯、抗氧化劑如丁化羥基甲苯(BHT)和丁基化羥基苯甲醚(BHA)、和/或pH調(diào)節(jié)劑如檸檬酸、磷酸、氫氧化鈉等。
此外，除抗真菌多肽外，本發(fā)明組合物還可包含一種或多種有治療活性的成分。這種有治療活性的成分的例子是羥甲辛吡酮(一種治脂溢性皮炎藥，其化學(xué)名是1-羥基-4-甲基-6-(2，4，4-三甲戊基)-2(1H)-吡啶酮)、酮康唑和elubiol。
一般地，本發(fā)明洗發(fā)劑組合物的成分按傳統(tǒng)量使用，例如i)10－65％的表面活性劑，
ii)1－10％的起泡劑，iii)0.1－2％的粘度增強(qiáng)劑，iv)足以延緩該洗發(fā)劑組合物降解從而提供足夠長(zhǎng)擱置壽命的保存劑和/或抗氧化劑，v)產(chǎn)生期望范圍pH(典型為4到10)的酸、堿或緩沖液，vi)加適量水至100％。
下面給出了含有上文定義的抗真菌多肽的各種洗發(fā)劑組合物的許多具體例子(在這些例子中上文定義的抗真菌多肽簡(jiǎn)稱(chēng)為AFPP)洗發(fā)劑組合物I(“用于正常頭發(fā)的通用型洗發(fā)劑)A. 水 50.00％月桂基醚硫酸鈉 40.00％椰油酰胺基丙基甜菜堿 5.00％月桂酰胺DEA1.50％AFPP 5×10-6-1.0％B. 檸檬酸 0.07％C. 氯化鈉 2.50％D. 香料，著色劑 適量100.00％洗發(fā)劑組合物II(“氨基酸洗發(fā)劑”)A.水 30.00％B.羥丙基瓜耳膠羥丙基三甲基氯化銨(Hydroxypropyl guar hydroxypropyltrimoniumchloride) 0.30％C.檸檬酸 0.05％D.EDTA四鈉 0.10％羥苯甲酸甲酯 0.15％
PCA鈉 1.00％月桂基醚硫酸鈉 30.00％TEA-椰油基谷氨酸鹽(TEA-cocoyl glutamate) 15.00％椰油酰胺基丙基甜菜堿9.50％PEG-150二硬脂酸酯 1.00％E. 月桂酰胺DEA 2.00％F. 甲基氯異噻唑啉酮和甲基異噻唑啉酮0.05％鹽酸賴氨酸 0.05％脯氨酸 0.05％AFPP5×10-6-1.0％香料0.20％氯化鈉 0.80％G. 水 適量100.00％洗發(fā)劑組合物III(“Full-Family Ultra中性洗發(fā)劑”)A. 水 50.00％著色劑(一種或多種) 適量PEG-80失水山梨糖醇月桂酸酯(和)椰油酰胺基丙基甜菜堿(和)sodium trideceth sulfate(和)月桂酰兩性乙酸鈉(和)PEG-150二硬脂酸酯(和)月桂基醚-13羧酸鈉(和)檸檬酸(和)Quaternium-15(和)EDTA四鈉(Miracare BC-10，Rhone-Poulenc)38.50％B. 丁二醇(和)水(和)春黃菊提取物(和)
Aloe barbadensis提取物(和)麥加香脂(Commiphora gileadensis)提取物(和)藥蜀葵(Althea officinalis)提取物(Actiplex，Active Organics)1.00％AFPP 5×10-6-1.0％Quaternium-15 0.20％香料 適量C. 檸檬酸 0.10％D. 氯化鈉 1.50％水 適量100.00％洗發(fā)劑組合物IV(“Marine Poultice洗發(fā)劑”)A. 水 30.00％B. 對(duì)羥基苯甲酸甲酯 0.05％對(duì)羥苯甲酸丙酯 0.15％C. 超微昆布 15.0％Lithothamne Lithothamne T-450 9.00％Marine silts(Int’l Sourcing) 5.00％D. 月桂基醚硫酸銨 32.50％PEG-7甘油椰油酸酯 1.50％E. 香料 適量AFPP 5×10-6-1.0％F. 水 適量100.00％洗發(fā)劑組合物V(“中性洗發(fā)劑”)A. 水 50.00％B. Polyquaternium-10 0.20％C. 月桂基醚硫酸鈉，28％活性 25.00％辛酰/辛酰葡糖苷 8.00％椰油酰胺基丙基甜菜堿，30％活性 9.00％AFPP 5×10-6-1.0％D. PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯1.50％E. 氯化鈉 0.30％F. 檸檬酸 適量保存劑 適量香料 適量水 適量100.00％洗發(fā)劑組合物VI(“營(yíng)養(yǎng)洗發(fā)劑”)A. 月桂基醚硫酸鈉 25.00％保存劑 適量PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯1.00％水 適量B. Polyquaternium-112.00％水解的膠原 2.00％椰油酰胺基丙基甜菜堿 8.00％油酰胺DEA1.30％可溶性膠原 3.00％水解的乳蛋白 2.00％AFPP 5×10-6－1.0％100.00％洗發(fā)劑組合物VII(“含有神經(jīng)酰胺的燕麥粉洗發(fā)劑”)A. 水 15.00％黃原酸膠，0.25％溶液 30.00％B.水(和)甘油(和)羥丙基甲基纖維素(和)葡萄糖醛酸(和)葡萄糖(和)聚丙烯酸甘油酯25.00％AFPP 5×10-6-1.0％C.膠體燕麥粉2.00％D.椰油酰胺DEA 3.00％月桂基醚硫酸鈉20.00％異十六烷醇(和)丁二醇(和)神經(jīng)酰胺3 0.50％E.甲基氯異噻唑啉酮(和)甲基異噻唑啉酮0.05％F.水適量100.00％洗發(fā)劑組合物VIII(“蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)型洗發(fā)劑”)A.水35.00％月桂基醚硫酸鈉50.00％DL-泛酰醇 2.00％椰油酰胺DEA 4.00％異硬脂酰乳酸鈉3.00％B.羥丙基三甲基銨水解的角蛋白2.00％AFPP 5×10-6－1.0％香料 0.20％DMDM內(nèi)酰脲0.20％C.水適量100.00洗發(fā)劑組合物IX(“珠光處理(Pearlescent Treatment)洗發(fā)劑”)癸基葡糖苷5.00％羥丙基月桂基二甲基銨水解的小麥蛋白質(zhì) 4.00％肉豆蔻基醚硫酸鈉 27.00％乙二醇二硬脂酸酯(和)月桂基醚-4(和)椰油酰胺基丙基甜菜堿(Euperian PK 300-AM) 3.00％丙二醇(和)水(和)短柄野芝麻(Lamium album)提取物(和)洋常春藤(Hedera helix)提取物(和)松果(松屬(Pinus))提取物(和)春黃菊(Anthemis nobilis)提取物(和)豆瓣菜(Nasturtium officinale)提取物(和)Amica montana提取物(和)牛蒡(Arctium lappa)提取物(和)迷迭香(Rosemarinus officinalis)提取物(Prodhyatif Hair Treatment，Pro’Hyg Labs) 5.00％AFPP 5×10-6-1.0％氯化鈉2.10％水和保存劑適量100.00％洗發(fā)劑組合物X(“用于干性頭皮和頭屑的洗發(fā)劑”)A.水 適量B.硅酸鋁鎂1.00％C.燕麥(Avena sativa)蛋白(Microat E，Tri-K)1.00％D.EDTA四鈉(Kelate 220，Tri-K) 0.20％對(duì)羥基苯甲酸甲酯(Trisept M，Tri-K) 0.30％E.羥丙基甲基纖維素
(Methocel J1 2MS，Dow Chem) 1.00％F. 椰油酰胺基丙基甜菜堿 5.00％甘油 2.00％月桂?；“彼徕c 20.00％月桂酰胺DEA 2.00％月桂基醚硫酸鈉 20.00％G. 磷酸，調(diào)節(jié)pH至6.0-6.5適量J. 泛酰醇(DL-泛酰醇，Tri-K) 0.50％咪唑烷基脲(Tristat IU，Tri-K)0.50％AFPP 5×10-6-1.0％100.00％洗發(fā)劑組合物XI成份 水平％成份的功能月桂基硫酸酯三乙醇胺 10.00起泡/清潔劑月桂?；蛩徕c 2.80 同上AFPP 5×10-6－1.0 抗真菌多肽羥丙基甲基纖維素 1.00 增稠劑水/保存劑/香料/等 加至100用NaOH/檸檬酸調(diào)節(jié)該組合物的pH。洗發(fā)劑組合物XII(調(diào)節(jié)型抗頭屑洗發(fā)劑)成份 水平％ 成份的功能月桂基硫酸酯三乙醇胺8.00起泡/清潔劑椰油單乙醇酰胺 4.00增泡劑/泡沫穩(wěn)定劑乙二醇單硬脂酸酯4.00不透明/珠光劑NaCl0.50增稠劑聚乙二醇0.50調(diào)節(jié)粘度AFPP5×10-6-1.0 抗真菌多肽水/香料/等 加至100用檸檬酸調(diào)節(jié)該組合物的pH值洗發(fā)劑組合物XIII(調(diào)節(jié)型抗頭屑洗發(fā)劑)成份 水平％ 成份的功能月桂基醚硫酸鈉 9.25起泡/清潔劑月桂?；“彼徕c 2.45同上椰油酰胺丙基氧化胺 0.60溫和性添加劑/泡沫穩(wěn)定劑PEG-7椰油酸甘油酯 2.00潤(rùn)膚劑/溫和性添加劑Crotein Q(季胺化膠原) 0.25調(diào)節(jié)成份AFPP 5×10-6-1.0 抗真菌多肽水/香料/等 加至100洗發(fā)劑組合物XIV成份 水平％ 成份的功能月桂基醚硫酸鈉 10.50 起泡/清潔劑椰子油二乙醇酰胺 2.50泡沫穩(wěn)定劑/洗發(fā)劑增稠劑AFPP 5×10-6-1.0 抗真菌多肽水/香料/等 加至100用檸檬酸/NaOH調(diào)節(jié)該組合物的pH至6.0-6.5。洗發(fā)劑組合物XV成份水平％ 成份的功能月桂基硫酸酯三乙醇胺14.00 起泡/清潔劑Briphos O3D*1.50 調(diào)節(jié)成份AFPP 5×10-6-1.0 抗真菌多肽Empicol WP40**10.00不透明/珠光劑水/香料/等 加至100*油基-3EO磷酸酯(Oleyl-3EO phosphate)**月桂基醚硫酸鈉、乙二醇單硬脂酸酯和乙二醇二硬脂酸酯的專(zhuān)有混合物，由Albright和Wilson提供。洗發(fā)劑組物XVI成份 水平％ 成份的功能月桂基醚硫酸鈉 7.00起泡/清潔劑月桂基硫酸酯三乙醇胺5.64同上Tegobetane L7*4.80泡沫穩(wěn)定劑PEG-2硬脂酸酯 3.00粘度調(diào)節(jié)劑AFPP5×10-6－1.0 抗真菌多肽水/香料/等 加至100*椰油酰胺基丙基甜菜堿洗發(fā)劑組合物XVII成份水平％ 成份的功能月桂基醚硫酸鈉 9.80 起泡/清潔劑椰油酰胺基丙基甜菜堿 4.80 泡沫穩(wěn)定劑/溫和性添加劑Antil 141 liquid 0.50 粘度調(diào)節(jié)劑AFPP 5×10-6-1.0 抗真菌多肽水/香料/等 加至100*Yh.Goldschmidt AG提供的丙二醇/PEG-55丙二醇油酸酯的專(zhuān)有混合物。
下面公開(kāi)了其它抗頭屑洗發(fā)劑組合物的例子，其中本發(fā)明的抗真菌多肽可包含在內(nèi)，并可選擇性地用該組合物中存在的抗頭屑物質(zhì)替換WO 99/13830公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)有效量的三唑，b)去污表面活性劑，和c)載體；WO 99/39683公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約7％—約30％重量的選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑和其混合物的去污表面活性劑，b)約0.1％-約10％重量的抗微生物劑，c)約0.5％—約10％重量的懸浮劑，d)約0.01％—約1.0％重量的具有約0.1—約3meg/mg電荷密度的陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物，e)選自龍腦、樟腦、桉樹(shù)腦、甲烷、糖基-單基-乙酸酯(glycosyl-monomenthyl-acetate)、薄荷醇、3-1-氧丙烷、辣薄荷、留蘭香、和它們的混合物的清涼劑(cool-feeling agent)，和f)約40％—約92％重量的水，其中，至少約50％重量的陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物是凝聚體形式，所述凝聚體含有去污表面活性劑和陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物；WO 97/39096公開(kāi)了含有選自某些1-羥基-6-取代吡啶-2-酮和2-硫酮化合物的抗微生物化合物和洗發(fā)劑表面活性劑的洗發(fā)劑組合物，其中，該頭發(fā)處理組合物的pH調(diào)節(jié)至至少7；WO 97/26854公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約7％—約30％重量的選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑、兩性離子表面活性劑、和它們的組合的去污表面活性劑，b)約0.1％—約10％重量的抗微生物劑，c)約0.5％—約10％重量的懸浮劑，d)約0.01％—約1.0％重量的具有約0.01meq/mg—約3meq/mg電荷密度的陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物，和e)約40％—約92％重量的水，其中，至少50％重量的陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物是凝聚體形式，所述凝聚體形含有去污表面活性劑和陽(yáng)離子瓜耳膠聚合物；WO 97/47275公開(kāi)了含有clotrimazol作為活性劑的抗頭屑劑，特別是漂洗產(chǎn)品如洗發(fā)劑、藥用洗發(fā)劑或頭發(fā)漂洗液(rinse)；WO 95/02389公開(kāi)了含有如下成份的抗頭屑洗發(fā)劑組合物a)約5％—約29.5％重量的選自烷基硫酸鹽和烷基乙氧基化物硫酸鹽、其酸、和它們的混合物的陰離子表面活性劑，b)約0.5％—約5％重量的N-?；被彡庪x子表面活性劑和它的鹽，c)約0.1％—約10％重量的顆粒狀抗頭屑劑，d)約0.5％—約10％重量的用于所述抗頭屑活性成分的結(jié)晶懸浮劑，e)約40％—約89％重量的水，其中在所述組合物中總的去污表面活性劑的濃度是約10％—約30％，成份b)成份a)的重量比是至少約1∶20，而且所述組合物基本沒(méi)有甜菜堿表面活性劑和鏈烷醇酰胺泡沫促進(jìn)劑；WO 95/17880公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約5％—約40％重量的含有如下物質(zhì)的表面活性劑系統(tǒng)(i)80％—約99％重量的該表面活性劑系統(tǒng)為陰離子表面活性劑，它們是從約1∶1到1∶0之間比例的烷基乙氧基化物硫酸鹽和烷基硫酸鹽，和(ii)約1％—20％重量的該表面活性劑系統(tǒng)為多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑，b)約0.05％—約25％重量的功能物質(zhì)，和c)約35％—約95％重量的水；和WO 92/14440公開(kāi)了含有表面活性劑、特定顆粒大小的片層吡啶硫鋅活性劑，懸浮劑、水和該活性劑的增效劑。
下面公開(kāi)了其中可包含本發(fā)明抗真菌多肽的其它洗發(fā)劑組合物的例子WO 98/00498公開(kāi)了一種含有表面活性劑系統(tǒng)的組合物，該表面活性劑系統(tǒng)包含雙陰離子或烷氧基化雙陰離子表面活性劑和一種或多種其它輔助表面活性劑，該雙陰離子或烷氧基化雙陰離子表面活性劑具有連接了兩個(gè)相隔至少3個(gè)原子的陰離子取代基、含有至少5個(gè)碳原子的結(jié)構(gòu)骨架，其中，一個(gè)陰離子取代基是硫酸鹽基團(tuán)或烷氧基連接的硫酸鹽基團(tuán)，另一個(gè)陰離子取代基選自硫酸鹽和選擇性地連接了烷氧基的磺酸鹽。
WO 97/14405公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該組合物含有約5％—約50％重量的去污表面活性劑、約0.05—約10％重量的硅氧烷頭發(fā)調(diào)節(jié)劑、約0.1％—約10％重量的懸浮劑、約0.025％—約1.5％重量的所選聚亞烷基二醇(優(yōu)選具有約1,500—約2,500乙氧基化度的聚乙二醇)和水，以及任選的可在洗發(fā)劑或調(diào)節(jié)型組合物中使用的一種或多種其它物質(zhì)；WO 97/25965公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，其中每100份重量的該洗發(fā)劑組合物含有約5—約50份含有如下成份的敏感表面活性劑混合物a)占該混合物約10—約60％重量的至少一種強(qiáng)陰離子表面活性劑，b)占約10—約40％重量的至少一種兩性表面活性劑和c)占該混合物約10—約60％重量的至少一種烷基糖類(lèi)非離子表面活性劑；WO 97/14406公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物除陰離子氨基酸衍生物表面活性劑外，還含有去污陰離子表面活性劑，選自陰離子氨基酸衍生物表面活性劑、兩性表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑和它們的混合物的穩(wěn)定表面活性劑，選自脂肪族醇、脂肪酸、脂肪族醇衍生物、脂肪酸衍生物和它們的混合物的脂肪族化合物，選自不揮發(fā)的分散硅氧烷調(diào)節(jié)劑和它們的混合物的頭發(fā)調(diào)節(jié)劑，和水；WO 98/04233公開(kāi)了含有烷氧基化聚亞烷基胺和一種或多種去污表面活性劑的洗發(fā)劑組合物，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，公開(kāi)了如下頭發(fā)調(diào)理洗發(fā)劑組合物，該頭發(fā)調(diào)理洗發(fā)劑組合物含有按重量計(jì)算的約0.01％—約10％的烷氧基化聚亞烷基胺、約0.01％—約20％的陽(yáng)離子表面活性劑調(diào)節(jié)劑、約5％—約50％的去污表面活性劑和約25％—約90％的水；WO 98/04238公開(kāi)了含有季(銨)化聚烷氧基化聚亞烷基胺和去污表面活性劑的洗發(fā)劑組合物，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，公開(kāi)了含有按重量計(jì)算的約0.01％—約10％的季(銨)化聚烷氧基化聚亞烷基胺、約0.01％—約20％的陽(yáng)離子表面活性劑調(diào)節(jié)劑、約5％的去污表面活性劑和約20％—約90％的水的調(diào)節(jié)型洗發(fā)劑組合物；WO 98/04239公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約0.1％—約10％重量的碳鏈長(zhǎng)度為10個(gè)或更少碳原子的短鏈烷基硫酸鹽表面活性劑，b)約0.1％—約10％重量的乙氧基化醇和c)約1％—約60％重量的選自除a)之短鏈烷基硫酸鹽以外的陰離子表面活性劑、除b)之乙氧基化醇以外的非離子表面活性劑、兩性和陽(yáng)離子表面活性劑以及它們的混合物的輔助表面活性劑，d)水；
WO 98/18433公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物含有約5％—約50％重量的選自陰離子表面活性劑、具有在該組合物的pH處為陰離子的連接基團(tuán)的兩性離子或兩性表面活性劑、和它們的組合物的表面活性劑，約0.025％—約3％重量的具有約0.2meq/mg—約7meq/mg的陽(yáng)離子電荷密度和約5，000—約1千萬(wàn)的分子量的有機(jī)陽(yáng)離子聚合物，約0.1％—約10％重量的水不溶性頭發(fā)定形聚合物，約0.1％—約10％重量的水不溶性揮發(fā)溶劑，和約0.05％—約5％重量的用作上述頭發(fā)定形聚合物的鋪展劑的所選陽(yáng)離子物質(zhì)，和約22％—約94.3％重量的水；WO 98/04241公開(kāi)了含有如下物質(zhì)的洗發(fā)劑組合物a)約1％—約60％比重的選自陰離子表面活性劑，非離子、兩性和陽(yáng)離子表面活性劑，和它們的混合物的表面活性劑，b)約0.001％—約10％重量的含有至少4個(gè)酸酯基團(tuán)的液體多元醇羧酸酯，其中多元醇部分選自含有約4—約12個(gè)羥基基團(tuán)的糖或糖醇，每一個(gè)羧酸部分具有約8—約22個(gè)碳基團(tuán)，而且該液體多元醇羧酸酯具有低于約30℃的完全熔點(diǎn)，c)約0.001％—約4％重量的具有通用分子式-H(OCH2CH2)nOH的非離子聚乙二醇聚合物，其中n是約1,000—約25,000范圍內(nèi)的乙氧基化平均值，和d)水；WO 98/18435公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物在含有顆粒大小范圍小于約0.15μm的顆粒狀不溶性分散非離子調(diào)節(jié)劑、晶體試劑(crystalline agent)和沉積聚合物的洗發(fā)劑中包含表面活性劑成分；WO 98/50007公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約5％—約50％重量的選自陰離子表面活性劑和兩性表面活性劑之組合、以及陰離子表面活性劑和兩性離子表面活性劑之組合的表面活性劑成份，b)約0.025％—約3％重量的具有約0.2meq/g—約2meq/g陽(yáng)離子電荷密度的選自陽(yáng)離子纖維素聚合物、陽(yáng)離子瓜耳木膠衍生物、和其混合物的陽(yáng)離子沉積聚合物，c)約0.5％—約10％重量的具有約2meq/g以上—約4.75meq/g以下的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)陽(yáng)離子頭發(fā)定形聚合物，和d)約27％—約94.5％重量的水。特別有效的是那些含有作為陽(yáng)離子頭發(fā)定形聚合物的Polyquaternium-16，作為陽(yáng)離子沉積聚合物的Polyquaternium-10，以及包含月桂基醚硫酸銨和椰油酰胺基丙基甜菜堿的表面活性劑基質(zhì)的頭發(fā)定形洗發(fā)劑組合物；WO 99/38475公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物含有約5％—約50％重量的選自陰離子表面活性劑、具有在該組合物的pH處為陰離子的連接基團(tuán)的兩性離子或兩性表面活性劑、和它們組合的表面活性劑，約0.025％—約3％重量的具有約0.2meq/mg—約7meq/mg陽(yáng)離子電荷密度和約5,000—約1千萬(wàn)分子量的有機(jī)陽(yáng)離子聚合物，約0.1％—約10％重量的水不溶性揮發(fā)溶劑，和約0.005％—約2.0％重量的晶體含羥基穩(wěn)定劑，和約26.5％—約94.9％重量的水；WO 99/38476公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物含有約5％—約50％重量的選自陰離子表面活性劑、兩性離子或兩性表面活性劑、和它們的組合的表面活性劑，約0.1％—約1.0％重量的有機(jī)或硅氧烷接枝頭發(fā)定形聚合物，和約40％—約94.9％重量的水，其中發(fā)感指數(shù)(Hair Feel Index，HFI)是至少約0.65，發(fā)型持久值(CurlRetention Value，CRV)是至少約70；WO 97/35546公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物含有陰離子去污表面活性成份，陰離子、陽(yáng)離子頭發(fā)調(diào)節(jié)聚合物，和約0.01％—約1.0％重量的具有約1—約300厘泊之粘度、并符合分子式(I)和(II)之任一項(xiàng)的水不溶性合成酯，以及具有約1—約399厘泊之粘度、選自烴油、除上述合成酯之外的脂肪族酯和其組合的有機(jī)水不溶性調(diào)節(jié)油，其中分子式(I)和(II)中的R1是具有7—9個(gè)碳原子的烷基、鏈烯基、羥烷基或羥鏈烯基，n是值為2—4的正整數(shù)，R2是具有8—10個(gè)碳原子的烷基、鏈烯基、羥烷基或羥鏈烯基，Y是具有約2—約20個(gè)碳原子的烷基、鏈烯基、羥基或羧基取代的烷基或鏈烯基。所述有機(jī)調(diào)節(jié)油優(yōu)選聚烯烴。n-Y(I)[R2-O-CO]n-Y(II)；WO 99/24004公開(kāi)了含有按重量計(jì)算的如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約0.05％—約50％的polyhydrophilic陰離子表面活性劑，b)約0.05％—約20％的選自陽(yáng)離子表面活性劑、陽(yáng)離子聚合物和其組合的陽(yáng)離子調(diào)節(jié)劑，c)約0.01％—約20％的硅氧烷化合物，和d)水載體；WO 98/50011公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)約5％—約50％重量的在該組合物的pH處具有一個(gè)陰離子部分的表面活性成分，b)約0.025％—約3％重量的陽(yáng)離子沉積聚合物，c)約0.1％—約10％重量的產(chǎn)生臭氣的頭發(fā)定形聚合物，d)約0.0075％—約2.5％重量的氣味掩蓋香基(odor masking base)，和e)約25％—約94.5％重量的水。該氣味掩蓋香基含有(按該香基的重量計(jì)算)約15％—約75％重量的具有約250℃以上沸點(diǎn)的芷香酮香料、約5％—約65％重量的具有約250℃以上沸點(diǎn)的麝香、和約20％—約80％重量的具有約250℃以下沸點(diǎn)的高揮發(fā)性香料。還公開(kāi)了進(jìn)一步含有產(chǎn)生嗅氣的液體載體以溶解或分散該組合物中產(chǎn)生嗅氣的聚合物的洗發(fā)劑組合物；WO 99/13828公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)有效量的熒光增白劑，b)陰離子去污表面活性劑，c)兩性去污表面活性劑，d)非離子去污表面活性劑，和e)載體，其中該組合物的pH不高于約7；WO 99/13829公開(kāi)了含有如下成份的洗發(fā)劑組合物a)有效量的熒光增白劑，b)去污表面活性劑，c)有效量的多價(jià)陽(yáng)離子，和d)載體；WO 93/18737公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物含有烷基乙氧基化物硫酸鹽表面活性劑、特定類(lèi)型的咪唑啉鎓鹽型兩性表面活性劑、優(yōu)選在預(yù)混合的組合物中溶解和重結(jié)晶的晶體懸浮劑、和相對(duì)少量的水。優(yōu)選的組合物含有烷基乙氧基化物硫酸鹽表面活性劑、咪唑啉型兩性表面活性劑、甜菜堿表面活性劑、重結(jié)晶的懸浮劑和水；和WO 97/35549公開(kāi)了如下洗發(fā)劑組合物，該洗發(fā)劑組合物在包含不溶性分散調(diào)節(jié)劑、低粘度有機(jī)調(diào)節(jié)油和所選可溶性纖維素陽(yáng)離子有機(jī)聚合物頭發(fā)調(diào)節(jié)劑的洗發(fā)劑中含有特定的表面活性劑組分，該特定表面活性劑組分包括具有約1—約8摩爾氧乙烯單元的乙氧基化烷基硫酸鹽表面活性劑和兩性表面活性劑。
實(shí)施例材料和方法按WO 94/01459所述進(jìn)行圖1所示抗真菌多肽(AFPP)的產(chǎn)生和隨后的純化。簡(jiǎn)而言之，該抗真菌多肽按如下所述制備巨大曲霉株系本實(shí)驗(yàn)使用保藏于真菌菌種保藏中心(CBS)、保藏號(hào)為CBS 526.65的巨大曲霉株系。產(chǎn)生AFPP的巨大曲霉株系的培養(yǎng)使用由39g馬鈴薯葡萄糖瓊脂(Difco產(chǎn))加蒸餾水至1000ml制備的瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行瓊脂斜面培養(yǎng)。用上述巨大曲霉株系接種該瓊脂斜面，并在26℃生長(zhǎng)一周。深層培養(yǎng)用5ml由上述所獲巨大曲霉瓊脂斜面培養(yǎng)物制備的含106孢子/ml的孢子懸液接種含100ml AMC培養(yǎng)基(15g肉膏，20g蛋白胨，20g玉米淀粉，5g NaCl，1ml Pluronic，1升水)的500ml錐形瓶。將該錐形瓶在30℃以220rpm的速度振蕩培養(yǎng)3天，之后可回收AFPP。AFPP的分離、純化和氨基酸序列測(cè)定將上述所獲發(fā)酵培養(yǎng)液離心，菌絲體懸浮在pH7的Tris緩沖鹽溶液中，然后進(jìn)行第2次離心。合并兩次離心的上清液，并將其無(wú)菌過(guò)濾。調(diào)節(jié)所獲上清液制品的pH至6.5—9之間，將該上清液制品應(yīng)用到在應(yīng)用前已用pH6.5的磷酸鹽緩沖液平衡過(guò)的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(SSepharose Fast Flow)上。通過(guò)使用高離子強(qiáng)度緩沖液如含有20mM磷酸鹽、1.5mM NaCl、pH6.5的緩沖液，實(shí)現(xiàn)從該樹(shù)脂洗脫活性部份。如果必要，在用離子強(qiáng)度低于或接近pH6.0的10mM磷酸鹽的緩沖液稀釋或?qū)υ摼彌_液透析后，可重復(fù)上述程序。如果必要，該第二步的洗脫以梯度洗脫進(jìn)行?；钚圆糠莸募兌韧ㄟ^(guò)HPLC評(píng)價(jià)。
在測(cè)試對(duì)瓶形酵母的抗真菌特性之前，將合并的活性部份用0.22μm濾器(Millipore)過(guò)濾除菌。
已純化的AFPP用Nakaya等1990所述方法進(jìn)行S-羧甲基化，并用反相HPLC脫鹽。按廠家說(shuō)明操作，將該S-羧甲基化的AFPP在Applied Biosystem 473A測(cè)序儀上進(jìn)行N-端氨基酸序列測(cè)定。消光系數(shù)AFPP的消光系數(shù)用下列公式從圖1所示氨基酸序列估計(jì) (Gill和von Hippel，1989)其中(No.Trp)、(No.Tyr)和(No.Cys)是所述氨基酸序列中Trp、Tyr和Cys殘基的數(shù)目。
根據(jù)該公式計(jì)算280nm處的消光系數(shù)為1.3。所有多肽測(cè)定均基于該計(jì)算的消光系數(shù)和OD280測(cè)量值?？笰FPP抗體的制備將按如上所述產(chǎn)生和純化的AFPP在磷酸鹽緩沖鹽(pH6.5-8)中稀釋至25—250μg/ml濃度。采用基本按照Hudson等1989所述標(biāo)準(zhǔn)程序的免疫方案，用弗氏完全佐劑中的純化多肽免疫兔。收集血清，使用上述所獲純化AFPP作為抗原，在單成分輻射免疫擴(kuò)散試驗(yàn)或Western印跡試驗(yàn)中測(cè)定該血清中抗AFPP的多特異性抗體。這些試驗(yàn)可按照標(biāo)準(zhǔn)程序如Hudson等1989所述的程序進(jìn)行。該抗體可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法純化，這些方法如使用固定至載體上的純化AFPP的標(biāo)準(zhǔn)免疫吸附技術(shù)，例如Hudson等1989所述的方法。本發(fā)明AFPP變體的抗體反應(yīng)性的測(cè)定AFPP變體與上述所獲抗體或含有抗體的血清的反應(yīng)性可在基本按Hudson等1989所述進(jìn)行的單成份輻射免疫擴(kuò)散或Western印跡中測(cè)定。
實(shí)施例1酵母瓶形酵母的抑制瓶形酵母在含美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心推薦的培養(yǎng)基的微量滴定板中于37℃生長(zhǎng)。該培養(yǎng)基每升含有30g沙氏葡糖培養(yǎng)基(Sabouraud’s glucose broth)、5g酵母提取物和2ml橄欖油。
通過(guò)將AFPP溶解于10mM磷酸鹽緩沖液(pH7.5)中制備含AFPP的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
如圖2所示，每個(gè)微量滴定板包括4個(gè)相同的豎道，每個(gè)豎道含有—一個(gè)僅含培養(yǎng)基(200ml)和50ml 10mM磷酸鹽(pH7.5)的孔(作為對(duì)照以測(cè)試該培養(yǎng)基的無(wú)菌性。包含磷酸鹽緩沖液是為了與接種瓶形酵母的孔相比實(shí)驗(yàn)條件相同)。
—一個(gè)除接種了瓶形酵母外與上述孔相同的孔。
—一個(gè)接種了瓶形酵母并含有0.005 OD280濃度(約5mg AFPP/升)的AFPP的孔。
—一個(gè)接種了瓶形酵母并含有0.027 OD280濃度的AFPP的孔。
—一個(gè)接種了瓶形酵母并含有0.068 OD280濃度的AFPP的孔。
—一個(gè)接種了瓶形酵母并含有0.136 OD280濃度的AFPP的孔。
跟蹤作為時(shí)間函數(shù)的瓶形酵母生長(zhǎng)。該酵母并不均一地生長(zhǎng)，而是以大的團(tuán)聚生長(zhǎng)。該事實(shí)和橄欖油的存在，使得不可能用分光光度法來(lái)測(cè)量生長(zhǎng)。因此，將細(xì)胞重新懸浮，取10μl鋪在含相同培養(yǎng)基的瓊脂上。微量滴定板和固體培養(yǎng)基平板上大致生長(zhǎng)的測(cè)定給出了相同的結(jié)果(見(jiàn)表1)。表1中顯示的結(jié)果是4個(gè)豎道的平均生長(zhǎng)。
該生長(zhǎng)取決于用于接種的菌落的大小。菌落越大，則在平板上的生長(zhǎng)越快。在本實(shí)施例中，培養(yǎng)基僅接種了一個(gè)小菌落。如下表1所示，這產(chǎn)生了一個(gè)延長(zhǎng)的生長(zhǎng)期。但是，如果培養(yǎng)基接種了一個(gè)更大的菌落，表1所示結(jié)果也相同，只是生長(zhǎng)期縮短了。表1
0在該孔中沒(méi)有觀察到生長(zhǎng)×在該孔的中心觀察到少許生長(zhǎng)××在該孔的中心觀察到一些生長(zhǎng)，并在邊緣觀察到較少的生長(zhǎng)×××在整個(gè)培養(yǎng)基表面觀察到強(qiáng)勁的生長(zhǎng)結(jié)論本發(fā)明清楚地說(shuō)明AFPP阻止酵母菌瓶形酵母的生長(zhǎng)。即使極低濃度的AFPP(例如約5mg/升)也抑制瓶形酵母的生長(zhǎng)這一事實(shí)使得AFPP適于在治療或預(yù)防頭屑中應(yīng)用。
說(shuō)明書(shū)中引用的參考文獻(xiàn)Gill和yon Hippel，Anal.Biochem.182，319-26，1989；Hudson，L.，和Hay，F(xiàn).，實(shí)用免疫學(xué)(Practical Immundogy)，第3版(1989)，Blackwell Scientific Publications；Lipman和Pearson，科學(xué)(Science)227，1435(1985)；Nakaya，K.等，Eur.J.Biochem.193，31—38，1990，“從巨大曲霉分離的抗真菌多肽的氨基酸序列和二硫橋”；Wnendt，S等，核酸研究(Nucleic Acids Research)，第18卷，第13期3987，1990，“編碼巨大曲霉的抗真菌蛋白的cDNA的克隆和核苷酸序列，以及該天然基因的初步特征分析”。
權(quán)利要求
1.適用于應(yīng)用至人頭發(fā)或頭皮上的抗頭屑組合物，其包含有效量的含有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其變體，所述變體是I)可與如下抗體反應(yīng)的多肽，所述抗體可與具有圖1所示氨基酸序列的多肽的至少一個(gè)表位反應(yīng)，或II)其氨基酸序列與圖1所示多肽的氨基酸序列基本同源的多肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中抗真菌多肽來(lái)自微生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中抗真菌多肽來(lái)自真菌，特別是曲霉屬的真菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中抗真菌多肽來(lái)自屬于巨大曲霉、A. pallidus、棒曲霉、A. longivesica、A. rhizopodus或A.clavatonanicus的真菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的組合物，其中抗真菌多肽來(lái)自屬于巨大曲霉的真菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中抗真菌多肽來(lái)自巨大曲霉的CBS 526.65株。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求之任一項(xiàng)的組合物，其中抗真菌多肽含有圖1所示氨基酸序列。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其中抗真菌多肽由圖1所示氨基酸序列組成。
9.根據(jù)權(quán)利要求1—6之任一項(xiàng)的組合物，其中圖1所示抗真菌多肽第4、24、32、42和50位上的一或多個(gè)氨基酸殘基已被另一種天然存在的氨基酸殘基替代。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中抗真菌多肽含有圖1所示氨基酸序列，其中第4位的Pro已被Asn或Asp替代，第24位的Gly已被Ala替代，第32位的Arg已被Lys或Val替代，第42位的Leu已被Phe替代，和/或第50位的His已被Tyr替代。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中抗真菌多肽由圖1所示氨基酸序列組成，其中第4位的Pro已被Asn或Asp替代，第24位的Gly已被Ala替代，第32位的Arg已被Lys或Val替代，第42位的Leu已被Phe替代，和/或第50位的His已被Tyr替代。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求之任一項(xiàng)的組合物，它采用洗發(fā)劑、溶液、懸浮液、乳狀液、凝膠、泡沫或膏狀物的形式。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的組合物，它采用洗發(fā)劑的形式。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求之任一項(xiàng)的組合物，其中所述活性成分以基于該組合物重量計(jì)約5×10-6％-約10％的量存在。
15.權(quán)利要求1—11之任一項(xiàng)所定義的抗真菌多肽在頭屑的治療或預(yù)防中的應(yīng)用。
16.治療或預(yù)防頭屑的方法，所述方法包括用有效量的 1—11之任一項(xiàng)所定義的抗真菌多肽或權(quán)利要求12—14之任一項(xiàng)所定義的組合物接觸頭發(fā)。
17.權(quán)利要求1-11之任一項(xiàng)所定義的抗真菌多肽在制備用于治療或預(yù)防頭屑的組合物中的應(yīng)用。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的應(yīng)用，其中所述組合物是權(quán)利要求12—14之任一項(xiàng)所定義的組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有抗真菌多肽的抗頭屑組合物,抗真菌多肽在治療或預(yù)防頭屑中的應(yīng)用,治療或預(yù)防頭屑的方法,和抗頭屑多肽在制備用于治療或預(yù)防頭屑的組合物中的應(yīng)用。發(fā)現(xiàn)具有圖1所示氨基酸序列的抗真菌多肽即使在低濃度下也可有效抑制酵母瓶形酵母的生長(zhǎng)。
文檔編號(hào)C07K14/37GK1329500SQ99813927
公開(kāi)日2002年1月2日 申請(qǐng)日期1999年11月26日 優(yōu)先權(quán)日1998年11月30日
發(fā)明者J·文德, N·H·索倫森 申請(qǐng)人:諾沃奇梅茲有限公司