專利名稱：：新粘蛋白型糖蛋白及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新型的粘蛋白型糖蛋白及其合成方法。本發(fā)明還涉及包含該新型粘蛋白型糖蛋白的組合物。另外，本發(fā)明涉及包含該新型粘蛋白型糖蛋白的一種分子量標(biāo)記物。
背景技術(shù)：
：在糖蛋白中，其中的糖鏈包含一個到十個單糖的高分子的糖蛋白物質(zhì)通過o-糖苷鍵以一定的間隔結(jié)合到具有簡單重復(fù)結(jié)構(gòu)的肽鏈上，這類糖蛋白物質(zhì)統(tǒng)稱為粘蛋白。在自然界中，多種粘蛋白存在于細(xì)胞中，或作為組分存在于植物和動物粘液中，且已知在生命系統(tǒng)中具有多種重要作用。而且，植物和動物中的粘蛋白，以及食物中存在于粘液組分中的粘蛋白，即使被作為食物吸收后，在生命活力中，或在消化和吸收過程中均具有重要的生物學(xué)效應(yīng)。迄今為止已在人中發(fā)現(xiàn)約十種粘蛋白。這些粘蛋白主要分布和存在于粘膜部分，如唾液和胃粘膜。由這些粘蛋白組成的粘液組織具有包括作為細(xì)胞外基質(zhì)的抗菌作用，可抑制病毒等感染之類的生物學(xué)效應(yīng)；以及一些生理作用，例如對細(xì)胞和組織的保濕，保護(hù)和潤滑作用(H.Nakata,DiversityofMucinandMucin-typeSugarChainandItsMeaning:UnderstandableGlycobiologyinPost-GenomicEra,WakaruJikken-IgakuSeries(UnderstandableExperimentalMedicine)(inJapanese),N.Taniguchied.，Chapter3，YodoshaCo.,Ltd.,2002;K.Hotta,K.Ishihara,SearchforAttractivenessofGastricMucus:ElucidationofMucinusingNewestApproach(inJapanese),MedicalViewCo.,Ltd.,1999)。粘蛋白的生理作用并不總是源于其特異的化學(xué)反應(yīng)。其生理作用也被認(rèn)為是源于其物質(zhì)特性，例如其形態(tài)學(xué)特性包括可塑性，粘性，保濕性等，以及與具有三維結(jié)構(gòu)的肽鏈結(jié)合的無定形糖鏈具有識別多種分子(如凝集素)的能力。因此，包含粘蛋白肽鏈的聚合體部分的物理特性和三維結(jié)構(gòu)，以及無定形糖鏈部分的分子識別能力對粘蛋白行使功能而言是必需的。另一方面，此類組成粘膜或細(xì)胞外基質(zhì)的部分或全部成分的化合物即使是從外界吸收的也可發(fā)揮作用。因此，人們認(rèn)為此類化合物具有很大的利用價值，其可通過人工合成，并以藥品，化妝品，食品等方式供應(yīng)市場(JP8-269091A(1996))。在糖鏈化合物中，軟骨素，硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸等細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，已先于其他化合物從多種原材料中被提取和純化，并以食品，藥品，化妝品等方式供應(yīng)市場。然而，粘蛋白只通過膳食方式攝入，例如某些食物(天南星科植物，秋葵和黑木耳)或動物(牛肉和豬肉)(見JP7-33623A(1995);JP8-256788A(1996);JP6畫199900A(1994);JP5-310799A(1993);和JP7-126292A(1995))，尚未作為化合物大規(guī)模和批量的供應(yīng)。包括粘蛋白在內(nèi)的糖蛋白具有分子識別能力，因此具有多種用途，例如可用于制藥。然而尚未發(fā)現(xiàn)一種合適的合成方法。其中一些編碼肽序列的基因已被確定。然而，由于肽鏈合成后引入糖鏈尚有困難，基因轉(zhuǎn)移或克隆的方法成效甚微(PolysaccharideSeparation/PurificationMethod,BiologicalandChemicalExperimentalMethods20(inJapanese),editedbyK.Matsuda,JapaneseScientificSocietiesPress,1987)。對多數(shù)糖蛋白，其合成方法無一例外的通過下列途徑，使用五.co/z'等先合成肽鏈，然后向其中引入糖鏈(見WO96/13516)。此方法的不利因素是不適合大規(guī)模生產(chǎn)。糖蛋白包括，含有粘蛋白型糖鏈的糖蛋白或含有天冬酰胺型糖鏈的糖蛋白。對某些天冬酰胺型糖鏈，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)能夠調(diào)節(jié)其糖鏈結(jié)合的分子伴侶，其中某些糖鏈的結(jié)合位點(diǎn)也已被證實(shí)。然而，目前還很難確定合成時？1入糖鏈的位點(diǎn)。即使糖鏈可依次引入到合成的肽鏈中，據(jù)推測，肽鏈的高級結(jié)構(gòu)會因?yàn)樘堑慕Y(jié)合而產(chǎn)生很大的改變。因此，不能保證肽鏈可再折疊形成天然的高級結(jié)構(gòu)。同時，限于粘蛋白型糖蛋白，其肽鏈通過折疊形成高級結(jié)構(gòu)，然后進(jìn)行糖鏈修飾。因此，糖鏈可結(jié)合到肽鏈，并保持其三維結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)功能。由此，糖鏈被引入，且其肽鏈的整體高級結(jié)構(gòu)基本不變(M.Fukuda,Mucin-typeSugarChain,pp.35-56,Y.Kohata，S.Hakomori,andK.Nagaied.，"DiverseWorldofSugarChain"(inJapanese),KodanshaScientific,Ltd.,1993)。由此看來，粘蛋白型糖蛋白在用于藥物研發(fā)時具有優(yōu)勢。然而，已知的粘蛋白型糖蛋白結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸序列中未發(fā)現(xiàn)具有任何規(guī)則，因此很難在所需位點(diǎn)引入糖鏈。而且，雖然粘蛋白型糖蛋白有相對簡單的一級結(jié)構(gòu)，通過有機(jī)化學(xué)途徑合成整體的粘蛋白型糖蛋白仍有很大困難?；谏鲜鲈?，雖然粘蛋白型糖蛋白具有多種優(yōu)勢特征，批量生產(chǎn)粘蛋白型糖蛋白的工業(yè)途徑目前尚未形成。凝膠過濾法，也稱為大小排除色譜法(SizeExclusionChromatography,SEC),已廣泛用作方便和準(zhǔn)確的測定高分子化合物分子量的方法。該方法不僅可使用開放柱進(jìn)行分析，還可用作高效液相色譜法，而且可以根據(jù)分子量進(jìn)行分離，特別是自動分離(A.Fallon,R.F.G.Booth,L.D.Bell,translatedbyT.Osawa,High-PerformanceLiquidChromatography,BiochemicalExperimentalMethod9(inJapanese),Chapter5,TokyoKagakuDojinCo.,Ltd.1989)。然而，在技術(shù)上很難僅通過這些檢測方法確定未知物的分子量絕對值。對此具體而言有兩項(xiàng)必要條件，其一，使用柱載體，這樣可保證根據(jù)理論校正曲線，凝膠過濾具有很好的重現(xiàn)性；其二，使用準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)記物。因此，應(yīng)非常謹(jǐn)慎的選擇待測物和柱載體的組合，以及待測物和分子量標(biāo)記物的組合。近年來，一種使用飛行時間質(zhì)譜儀的測定方法(MALDI-TOFMS)已廣泛用于絕對分子量的測定。該方法能獲得絕對測定數(shù)值，從而準(zhǔn)確的確定高分子化合物的分子量。然而，該方法所需的儀器設(shè)備比液相色鐠要昂貴許多。實(shí)際上不太可能將該儀器設(shè)備推廣到所有的化學(xué)合成實(shí)驗(yàn)室，工廠，醫(yī)療機(jī)構(gòu)等。分析檢測可在一個具備上述昂貴儀器或可進(jìn)行外包的地方集中進(jìn)行。然而，實(shí)驗(yàn)室需要快速反饋和快速檢測，因此仍頻繁使用SEC進(jìn)行分析。在這種情況下，優(yōu)選使用一種能MALDI-TOFMS和SEC兩種方法共同測定的物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行絕對分子量的測定。使用SEC方法時，與待測物和分子量標(biāo)記物聯(lián)合使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)盡可能的與待測物具有相似的物理特性。SEC的原理為，根據(jù)溶質(zhì)大小(分子量)，利用聚合體填料網(wǎng)的分子篩效應(yīng)進(jìn)行分離。因此，分離取決于物理性質(zhì)，例如大小或形狀，而不取決于能引起溶質(zhì)和固定相相互作用的化學(xué)性質(zhì)。特別是，應(yīng)選擇具有與溶劑(流動相)中的聚合體相似的流體動力學(xué)半徑和形狀的物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)。SEC的使用者通常根據(jù)商品目錄選擇和使用聚合體分子量標(biāo)記物，其具有相似的構(gòu)型。然而，對已有的標(biāo)記物，其分子量分布很窄，或分子量控制在一定范圍內(nèi)，最便捷的方法就是使用控制合成的方法已知的合成的聚合體。市售的可作為分子量標(biāo)記物的物質(zhì)，其數(shù)量非常有限。特別是，現(xiàn)在市場上只有線性結(jié)構(gòu)的聚合體，例如聚苯乙烯，聚曱基丙烯酸曱酯(PMMA),聚乙烯，聚乙二醇，聚乙烯氧化物，聚丙烯酸，和普魯蘭(例如，JP專利號3012917(JP10-60005A(1998)))。在這種情況下，不可能包含所有的高分子化合物。一些生理活性受到關(guān)注的糖蛋白(例如，酶，粘蛋白，和激素)中也沒有合適的標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)記物。糖蛋白廣泛存在于自然界，且比非糖蛋白數(shù)量大。其中有些糖蛋白具有多條糖鏈結(jié)合在肽鏈上，呈刷狀形式，也有每分子中只結(jié)合一條糖鏈的糖蛋白，即使這些糖蛋白也具有很大的糖鏈部分覆蓋分子的表面。當(dāng)這樣的糖蛋白用SEC根據(jù)分子大小和形狀進(jìn)行分離分析時，使用具有線性結(jié)構(gòu)的傳統(tǒng)的分子量標(biāo)記物顯然是不合適的。一種多聚糖，例如，普魯蘭，由于其含糖而用作分子量標(biāo)記物。然而，迄今為止，尚不能保證這樣的分子量標(biāo)記物能提供準(zhǔn)確的分子量。在現(xiàn)今這種情況下，測定的分子量，也許是錯誤的，其只能顯示與所用標(biāo)記物的相對關(guān)系。特別是，只用SEC估測的分子量基本上不準(zhǔn)確，需要另一種方法進(jìn)行證實(shí)。電泳法，例如SDS-PAGE,也是分離蛋白的方法，可在實(shí)^r室中方便的使用。與SEC中類似，此類分析方法中也需要應(yīng)用合適的分子量標(biāo)記物。分子量標(biāo)記物也用于除SEC和電泳法之外的多種常用的生物化學(xué)分析中。水母主要見于夏季，有時所見數(shù)量巨大，因此極大的降低了核電廠或熱電廠的進(jìn)水/排水系統(tǒng)的效率和經(jīng)濟(jì)效益，以及緊鄰海洋，海港，有捕魚網(wǎng)(如固定在岸上的捕魚網(wǎng))的漁場等的工廠的工業(yè)用水的進(jìn)/排水系統(tǒng)的效率和經(jīng)濟(jì)效益。特別是像海月水母(^w"/z'a)等游動能力很差的水母必須有效根除，尤其在其數(shù)量很大的情況下。如Echizen-kuraget)c母(7VeAwoj!7//emawo附wra()之類的大型7K母在凄大量4艮大時，因其重量大，需要用重型機(jī)器通過大型操作將其從水底連根拔起。如此操作的結(jié)果是，大量水母一次從水底拔起。然而，根據(jù)現(xiàn)今日本法律，水母拔起后即視為廢物而禁止將其再次棄置入海洋中。因此，這些水母會在岸上蓄積。已有人提出利用這些累積的水母作為食物或肥料的方法(例如JP2004-99513A;JP2003-321497A;JP2001-178492A;JP2002-370991A;WO95/17428;JP2002-143824A;JP6-217737A(1994);和V.Schmidt,A.Bally，K.Beck,M.Haller，W.K.Schlage，C.Weber"Theextracellularmatrix(mesoglea)ofhydrozoanjellyfishanditsabilitytosupportcelladhesionandspreading.Hydrobiologia216-217，pp.3-10(1997))。然而由于缺少其他有效途徑使用水母，出于環(huán)境保護(hù)原因而對其進(jìn)行處理對相關(guān)公司或政府造成極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。為收回處理的成本，需要從水母中分離哪怕只是很小量的昂貴物質(zhì)。然而迄今尚未發(fā)現(xiàn)有效的方法。所見到的大量海月水母是通過空中觀察而估計的，在某些區(qū)域可達(dá)到每個海灣有幾十萬噸(T.Yasudaed.,"MarineUFOJellyfish"(inJapanese),pp.41-77VIIEmergenceandDistribution,KouseishaKouseikakuCo.,Ltd.,2003)。水母作為海洋資源而大量存在于地球上，對于蓄積的廢物水母以及活的水母的利用均應(yīng)納入考慮范疇
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種可通過大規(guī)模生產(chǎn)用于醫(yī)療，食品等領(lǐng)域、且可作為人粘蛋白的替代物使用的粘蛋白型糖蛋白，以及所述糖蛋白的生產(chǎn)方法和應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的是提供一種可用于糖蛋白分子量測定的分子量標(biāo)記物。為實(shí)現(xiàn)這些目標(biāo)而進(jìn)行努力研究的結(jié)果是，本發(fā)明人現(xiàn)已成功的從水母中分離和純化出新型的粘蛋白型糖蛋白，并在分析了該粘蛋白型糖蛋白的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)后發(fā)現(xiàn)該粘蛋白型糖蛋白可作為人粘蛋白的替代物。而且，本發(fā)明人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，從水母中分離和純化出的粘蛋白型糖蛋白，因其具有廣泛的分子量分布，從而可在糖蛋白的分子量測定中用作分子量標(biāo)記物?；谏鲜霭l(fā)現(xiàn)，本發(fā)明得以完成。具體而言，本發(fā)明涉及下列(l)到(9):(1)具有重復(fù)結(jié)構(gòu)的粘蛋白型糖蛋白，其包含三個或以上的重復(fù)單位，該重復(fù)單位具有如式(I)所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)，所述結(jié)構(gòu)中一個或以上的氨基酸殘基結(jié)合到由一個或以上的單糖組成的糖鏈上。上述的粘蛋白型糖蛋白，為在自然界存在的蛋白質(zhì)的情況下，推測其糖蛋白約含3至2000個重復(fù)單位，優(yōu)選3至700個重復(fù)單位。此外，約50%的主要成分具有含40至180個重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)。在此所述的重復(fù)結(jié)構(gòu)可直接結(jié)合或通過接頭結(jié)合。對于粘蛋白型糖蛋白，優(yōu)選地，與糖鏈相結(jié)合的氨基酸殘基為蘇氨酸(Thr)。例如，98%或以上與糖鏈結(jié)合的氨基酸殘基為蘇氨酸(Thr)。在粘蛋白型糖蛋白中，糖鏈包括但并不限于選自N-乙酰半乳糖胺，半乳糖，N-乙酰葡糖胺，唾液酸，阿拉伯糖，和巖藻糖的單糖。優(yōu)選地，糖鏈包含N-乙酰半乳糖胺。更優(yōu)選地，糖鏈包含N-乙酰半乳糖胺和半乳糖。在粘蛋白型糖蛋白中可從重復(fù)結(jié)構(gòu)的N端去除一個或幾個氨基酉吏，例長口Val。優(yōu)選地從水母中提取粘蛋白型糖蛋白，例如海月水母G4wre"aEchizen-kurageK母(A^w20/7Z/emawomwn^),或叻"非金黃7j^母(2)粘蛋白型糖蛋白的生產(chǎn)方法含下列步驟切取水母的堅;更部分；用鹽溶液提取水母的切斷部分(或片段)；用離心和透析法從提取物中分離粗粘蛋白；純化粘蛋白型糖蛋白。(3)粘蛋白型糖蛋白的生產(chǎn)方法含下列步驟切取水母的堅硬部分；用鹽溶液提取水母的切斷部分(或片段)；用離心和透析法從提取液中分離粗粘蛋白；純化粘蛋白型糖蛋白，其中，所有步驟在0至25。C進(jìn)行。粘蛋白型糖蛋白的生產(chǎn)方法優(yōu)選所有步驟在接近水點(diǎn)溫度的低溫下進(jìn)行(0至25。C,優(yōu)選4。C),不進(jìn)行加熱。(4)包含上述的粘蛋白型糖蛋白中的任何一種的組合物。所述組合物可用于細(xì)胞和組織保護(hù)，濕度保持或皮膚表面吸收，健康促進(jìn)，藥物施用，疾病治療或預(yù)防，抗生素的使用等。而且更優(yōu)選地，所述組合物以水溶液，膜，或樹脂狀形式存在。(5)修飾粘蛋白型糖蛋白的方法，其特征在于通過糖基轉(zhuǎn)移酶ii的作用修飾上述粘蛋白型糖蛋白的糖鏈。(6)含重復(fù)結(jié)構(gòu)的蛋白，該重復(fù)結(jié)構(gòu)包含1至2000個重復(fù)單位，每個單位含有下列式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)。(7)生產(chǎn)糖蛋白的方法，蛋白質(zhì)中的至少一個氨基酸殘基結(jié)合到含有一個或多個單糖的糖鏈上。(8)—種分子量標(biāo)記物，其包含粘蛋白型糖蛋白，通過絕對分子量測定方法測得其分子量分布和分子分布的中值，該粘蛋白型糖蛋白具有包含3至2000個重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)，每個單位含有下列式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I),所述結(jié)構(gòu)中一個或以上的氨基酸殘基結(jié)合到由一個或以上的單糖組成的糖鏈上。分子量標(biāo)記物可含有10至14,000kDa的分子量。而且，優(yōu)選所述分子量標(biāo)記物為凍干形式。(9)生成分子量標(biāo)記物的方法，包括下列步驟將粘蛋白型糖蛋白用大小排阻色譜法進(jìn)行分餾，粘蛋白型糖蛋白具有包含3至2000個重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)，每個單位含有式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I),結(jié)構(gòu)中一個或以上的氨基酸殘基結(jié)合到由一個或以上的單糖組成的糖鏈上；收集并純化餾分；測定純化后的餾分的絕對分子量。制備分子量標(biāo)記物的方法還可包括凍干經(jīng)純化的餾分的步驟。有益效果本發(fā)明提供了一種新型粘蛋白型糖蛋白。粘蛋白型糖蛋白可用作人粘蛋白的替代物，并可應(yīng)用于制藥，農(nóng)業(yè)，和食品領(lǐng)域。而且，粘蛋白型糖蛋白易從水母中大量制備，成為出色的經(jīng)濟(jì)和環(huán)境保護(hù)技術(shù)。本發(fā)明還提供含粘蛋白型糖蛋白的分子量標(biāo)記物。分子量標(biāo)記物具有從天然聚合體中獲得的分枝的聚合物鏈。使用該分子量標(biāo)記物可進(jìn)行糖蛋白等分枝聚合體的分子量的準(zhǔn)確測定。附圖簡述圖1說明了處理水母分離粘蛋白型糖蛋白的步驟摘要；圖2說明了分離粘蛋白型糖蛋白的特殊步驟；圖3顯示了將從海月水母(」w"http://am/n'M;實(shí)線)和咖啡金黃水母(C/io^(2orame/aw"Ww;虛線)中分離的粗粘蛋白進(jìn)行離子交換液相色譜的結(jié)果。星號顯示粘蛋白型糖蛋白的色譜峰。圖4顯示了使用自動氨基酸分析儀對海月水母和咖啡金黃水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的氨基酸組成進(jìn)行分析的結(jié)果。圖5-1顯示了使用脈沖液相方法對海月水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的氨基酸序列進(jìn)行分析的結(jié)果。白型糖蛋白的氨基酸序^進(jìn)行分析的結(jié)果。、、'圖6-1顯示了海月水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的單糖分析結(jié)果。圖6-2顯示了咖啡金黃水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的單糖分析結(jié)果。圖7顯示了海月水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的凝膠過濾(大小排阻)HPLC分析結(jié)果。圖8顯示了從多種水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白的大小排阻色譜法的分析結(jié)果。圖9顯示了對海月水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白進(jìn)行大小排阻色譜法所得的組分，對這些組分再進(jìn)行分餾。圖10-1顯示了使用MALDI-TOFMS方法對各個組分進(jìn)行分子量測定的結(jié)果。圖10-2顯示了使用MALDI-TOFMS方法對各個組分進(jìn)行分子量測定的結(jié)果。圖10-3顯示了使用MALDI-TOFMS方法對各個組分進(jìn)行分子量測定的結(jié)果。圖11是從海月水母中純化出的粘蛋白型糖蛋白和普魯蘭的分子量曲線圖。本發(fā)明的最佳實(shí)施方案以下將對本發(fā)明進(jìn)行細(xì)節(jié)性闡述。本發(fā)明申請要求2005年8月12曰申請的日本專利申請?zhí)?005-234108的優(yōu)先權(quán)，包括其說明書和/或附圖中所描述的內(nèi)容。本發(fā)明提供了一種新型的粘蛋白型糖蛋白。粘蛋白型糖蛋白是指一種糖蛋白，其具有包含特定氨基酸序列為單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)，并具有粘蛋白型糖鏈(也稱作O-連接糖鏈)。在粘蛋白型糖蛋白中，N-乙酰半乳糖胺通常以O(shè)-糖苷鍵結(jié)合到蛋白質(zhì)中絲氨酸或蘇氨酸殘基的羥基上，或單糖結(jié)合到N-乙酰半乳糖胺上形成糖鏈。根據(jù)本發(fā)明，對粘蛋白型糖蛋白(本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)描述如下。該粘蛋白型糖蛋白具有包含三個或以上重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)，該重復(fù)單位具有如式I(SEQIDNO:1)所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro①。粘蛋白型糖蛋白是一種高分子化合物，具有不確定的分子量為特征。即使從相同種類的原料并在相同的實(shí)驗(yàn)中獲得的粘蛋白型糖蛋白，在不同的單個分子中，其重復(fù)單位的數(shù)目也不同。作為凝膠過濾分析的結(jié)果，本發(fā)明人分離出的粘蛋白型糖蛋白的分子量為10至1400kDa,該凝膠過濾分析的結(jié)果用氨基酸序列分析所得的數(shù)值平均進(jìn)行校正。因此，綜合考慮后述的糖鏈的結(jié)構(gòu)，推定自然界可能存在一種分子量為實(shí)驗(yàn)所得的多聚體(具有約3至700個重復(fù)單位)的約3倍的聚合體。即使是這樣的粘蛋白型糖蛋白也不太可能在物理特性或功能上與小的糖蛋白有很大差別。因此，所估計的重復(fù)單位的數(shù)目約為3~2000,優(yōu)選3~700。在此情況下，分子量約為4.5kDa的粘蛋白型糖蛋白的重復(fù)單位數(shù)目估計約為3，而分子量約為750kDa的粘蛋白型糖蛋白的重復(fù)單位數(shù)目估計約為40，假定所有蘇氨酸(Thr)殘基結(jié)合到糖鏈上，且糖鏈部分大多數(shù)是典型的GalNAc-Gal序列。本說明書中，除非有特殊說明，重復(fù)單位的數(shù)目均基于同樣的假設(shè)從分子量計算得出。實(shí)驗(yàn)(實(shí)施例6)中作為使用MALDI-TOF所得絕對分子量的校正結(jié)果,從水母中獲得的粘蛋白型糖蛋白的凝膠過濾色譜圖顯示，總量的50%具有60kDa至270kDa，即40至180個重復(fù)單位。類似地，色譜圖顯示，分子量為90kDa至210kDa,即60至150個重復(fù)單位，的組分占總量的30%。重復(fù)單位可直接結(jié)合或通過接頭結(jié)合。例如，接頭可以是，但并不限于，半胱氨酸形成的s-s鍵。另外，例3和4中所示的分析結(jié)果說明分離出的粘蛋白型糖蛋白包含與上述重復(fù)結(jié)構(gòu)中的氨基酸不同的氨基酸。然而，以摩爾比來說，數(shù)量為5%或更低。這些附加的氨基酸可能來自于雜質(zhì)，或主要存在于末端，或在重復(fù)結(jié)構(gòu)的接合處，作為具有附加功能的部分，例如，可促進(jìn)膜結(jié)合的體內(nèi)固定功能。因此，本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白除重復(fù)結(jié)構(gòu)外，可含有不影響其作為粘蛋白的功能(例如，粘性，抗菌性質(zhì)，和濕潤性質(zhì))的其他的氨基酸。此外，重復(fù)結(jié)構(gòu)中的重復(fù)單位可有氨基酸轉(zhuǎn)換(shift)。尤其是如例4所示，從咖啡金黃水母中獲得的一種粘蛋白型糖蛋白具有VEXXAAPV的重復(fù)單位，它是式I中所示的重復(fù)單位轉(zhuǎn)換一個氨基酸而得到的。因此，本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白還包括下述的蛋白，即缺失重復(fù)結(jié)構(gòu)N端的一個或幾個氨基酸，結(jié)果使重復(fù)單位發(fā)生轉(zhuǎn)換的蛋白質(zhì)。優(yōu)選地，這種蛋白是重復(fù)結(jié)構(gòu)N端的Val缺失的粘蛋白型糖蛋白。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白中，重復(fù)結(jié)構(gòu)中的一個或以上的氨基酸殘基結(jié)合到由一個或以上的單糖組成的糖鏈上。結(jié)合到糖鏈上的氨基酸殘基并沒有特殊限制。優(yōu)選是蘇氨酸殘基(Thr)結(jié)合到糖鏈上。例如，在該粘蛋白型糖蛋白中，98~100%的結(jié)合到糖鏈上的氨基酸殘基可以是蘇氨酸(Thr)。而且，如上所述粘蛋白型糖蛋白是一種高分子化合物，具有不確定的分子量。因此，結(jié)合到糖鏈上的氨基酸殘基的數(shù)量在不同分子中是不同的。然而，希望重復(fù)單位中全部兩個蘇氨酸殘基均結(jié)合到糖鏈上。因此，該粘蛋白型糖蛋白中結(jié)合糖鏈的數(shù)目因重復(fù)單位數(shù)目不同而不同。對構(gòu)成糖鏈的單糖沒有特殊限制，只要是在常見的粘蛋白型糖蛋白中存在的單糖即可。舉如包括N-乙酰半乳糖胺，半乳糖，N-乙酰葡糖胺，唾液酸，阿拉伯糖，和巖藻糖。優(yōu)選地，糖鏈包含N-乙酰半乳糖胺和/或半乳糖。具體而言，優(yōu)選重復(fù)單位中的蘇氨酸殘基(Thr)結(jié)合到N-乙酰半乳糖胺和半乳糖上形成Thr-GalNAc-Gal的結(jié)構(gòu)，或其結(jié)合到N-乙酰半乳糖胺上形成Thr-GalNAc的結(jié)構(gòu)。例如，如下式中所示的粘蛋白型糖蛋白。糖鏈包含以線性或分枝狀形式連接的1至10個，優(yōu)選1至8個，最優(yōu)選1至5個單糖。由于粘蛋白型糖蛋白具有分子量不確定的特性，□GalNAcOC3al該粘蛋白型糖蛋白中糖鏈的數(shù)目、類型、結(jié)構(gòu)、大小等在不同的粘蛋白型糖蛋白中有所不同。在一個粘蛋白型糖蛋白所含的糖鏈也互不相同。如實(shí)施例2至6所述，從海月水母和咖啡金黃水母中提取的粘蛋白型糖蛋白進(jìn)行比較，其具有完全相同的肽鏈重復(fù)部分，只是其糖鏈部分的構(gòu)成糖的類型和組成比例有所不同。而且，這些粘蛋白型糖蛋白似乎以相同的目的存在于海月水母和咖啡金黃水母共存的自然界中。由此認(rèn)為，兩種水母中的粘蛋白型糖蛋白在功能上差別不大。因此，糖鏈結(jié)構(gòu)不會改變粘蛋白型糖蛋白的主要性質(zhì)，可能是在特異性的精細(xì)調(diào)控中起作用。因此，糖鏈部分不同，但具有重復(fù)肽鏈結(jié)構(gòu)的一類粘蛋白型糖蛋白包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白的糖鏈可通過體內(nèi)的糖差、轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)化。因此，該粘蛋白型糖蛋白的糖鏈并不限于上述情況，下述的粘蛋白型糖蛋白同樣包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)，所述的粘蛋白型糖蛋白具有經(jīng)修飾的糖鏈、具有包含三個或以上如式I所示的氨基酸序列的重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)，其中上述結(jié)構(gòu)中一個或以上的氨基酸殘基結(jié)合到由一個或以上的單糖的糖鏈上。這是因?yàn)轭A(yù)期上述的粘蛋白型糖蛋白具有相關(guān)的功能和特性。含有經(jīng)糖基轉(zhuǎn)移酶修飾的糖鏈的粘蛋白型糖蛋白，因糖鏈的修飾而賦予的更高的分子識別能力，可能具有新的用途。因此，本發(fā)明提供了一種通過糖基轉(zhuǎn)移酶作用修飾粘蛋白型糖蛋白中糖鏈的方法?？墒褂玫奶腔D(zhuǎn)移酶的例子包括糖基轉(zhuǎn)移酶，半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，N-乙酰半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶，唾液酸轉(zhuǎn)移酶，和巖藻糖轉(zhuǎn)移酶。通過糖基轉(zhuǎn)移酶修飾糖鏈的方法是公知的，實(shí)現(xiàn)上述目的的任何方法均可使用。本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白是一種化合物，其具有粘蛋白型糖蛋白中稱做1型核心的Thr-GalNAc-Gal連接，和/或具有簡單結(jié)構(gòu)Thr-GalNAc連接。本發(fā)明粘蛋白型糖蛋白可作為能夠通過已知的酶將其糖鏈部分轉(zhuǎn)化為所需結(jié)構(gòu)的原材料使用。例如，唾液酸可通過商業(yè)所售a2—3NeuAc轉(zhuǎn)移酶的作用結(jié)合到半乳糖上，如同正常淋巴細(xì)胞中發(fā)生的反應(yīng)。17另外，可通過去掉全部或部分糖鏈，限制粘蛋白型糖蛋白的作用，提高其特殊的功效，或使其具有新的作用。還可以去除部分附加的糖來提高物質(zhì)的同質(zhì)性。本發(fā)明提供的糖鏈修飾也包括從糖鏈釋放特殊的糖?？墒褂玫奶轻尫琶赴ㄆ咸烟擒彰?，半乳糖苷酶，N-乙酰氨基半乳糖苦酶，唾液酸酶，和巖藻糖苷酶等。將本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白中的糖鏈轉(zhuǎn)化成所需的糖鏈可準(zhǔn)確調(diào)控糖鏈的分子識別能力，從而可將該粘蛋白型糖蛋白原有的識別能力轉(zhuǎn)化成具有所需特異性和親和性的分子識別能力。例如，已開發(fā)出翻附在細(xì)胞和病毒，或由此產(chǎn)生的毒素上的物質(zhì)，并沖殳入應(yīng)用。這些物質(zhì)是將可識別作為糖結(jié)合蛋白之一的糖結(jié)合性蛋白質(zhì)，即凝集素，的不同糖鏈引入到聚苯乙烯等不同的聚合體中形成的(K.Kobayashi，ArtificialComplexSugarChainPolymer,pp.181-195,K.KobayashiandS.Shodaed.,"TheRecentTrendsofGlycochemistry"(inJapanese),Part2,Chapter2.1,CMCPublishingCo.,Ltd.,2005)。該粘蛋白型糖蛋白還可以具有與這些多聚體物質(zhì)相似的功能。例如，已知0-157產(chǎn)生的Shiga毒素可與三糖Galocl-4Gaipi-4Glc(3或二糖Gakxl-4Galpl牢固結(jié)合。因此，該粘蛋白型糖蛋白可通過與這些糖適量結(jié)合而對Shiga毒素具有抗性效果。已知大量糖鏈具有此種效果。因此，具有識別能力的糖鏈沒有限制。而且，糖鏈所識別的對象也不受限制，可以是細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外、細(xì)胞表面、細(xì)胞膜內(nèi)、病毒內(nèi)外以及病毒表面存在的糖蛋白(如凝集素)，毒素，試劑等。本發(fā)明還涉及一種具有下述重復(fù)結(jié)構(gòu)的蛋白，所述的重復(fù)結(jié)構(gòu)包含具有1至2000個式I所示的氨基酸序列的重復(fù)單位。該蛋白可通過糖基轉(zhuǎn)移酶，按上述相同的方式結(jié)合到糖鏈上。本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白是從水母中提取的。水母是指刺胞動物門(CmW『&)的生物。典型的例子包括海月水母(Xw""aawr"a)(t7/war油e科),咖啡金黃水母(C7j，aorame/awa欲r)(尸e/ag7々Wae科)Jegwomj!coentocews(Owan-kurage水母)(y4e^omWae科)，巨型水母7Vemoj!7//emawo附t/na^(Echizen-kurage母)(5Vo附o/o//i/^2e矛牛),C7m^yMearastom'(Andon-kurage水母)(Ca—<ie/^ze科),海蜇(escw/ew/a)(Bizen-kurage7K母)(iA/zastow/(iae考牛),和C7^o戸a/mws《t^n'g齒s(Habu-kurage水母)(C7h>o&—科)。用于制備本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白的水母優(yōu)選是那些已經(jīng)證明對人和動物安全的種類。例如，這樣的水母包括但不限于，已用于食品中的海月水母，海蜇，和巨型水母A^mop//ewawo附wra/。水母可以多種形式使用。例如，生的，冷凍的，干的和鹽腌制過的水母均可使用。而且，用于提取粘蛋白型糖蛋白的水母，對其所用部位沒有特殊限制。例如，表皮，口腔臂，胃，體液等，或冷藏或室溫保存所產(chǎn)生的液體組分均可使用。利用冷凍水母生成粘蛋白型糖蛋白的方法的例子，如圖1中所示。首先，將冷凍水母解凍并用水清洗。例如，當(dāng)使用生的或干的水母時，應(yīng)用相同方法清洗水母。如需要，利用離心來分離固體物質(zhì)和液體物質(zhì)。隨后，用剪刀將水母(固體部分)剪成約0.5mm至2cm的方形塊，優(yōu)選是1cm的方塊。這種剪斷或《皮碎的方法應(yīng)適合所用標(biāo)本的形態(tài)，以及后面過程中所用離心機(jī)的性能等。若需要更小的片段，可使用合適的剪斷-破碎方法，如自動攪拌器。當(dāng)樣品的表皮開始降解，或柔軟的液體部分不新鮮時，優(yōu)選用丙酮處理進(jìn)行脫脂和脫水。丙酮處理后，脫水的樣品應(yīng)用水再次膨脹后使用。當(dāng)^f吏用體液或冷藏或室溫保存所產(chǎn)生的液體組分時，可省略上述步驟直接進(jìn)入下一步。接下來將固體樣品加入到鹽溶液中，進(jìn)行振搖提取。所用鹽溶液包括，但不限于，NaCl,KC1,MgCl2,CaCl2,草酸銨，LiBr,EDTA,或中性緩沖溶液(例如，磷酸鹽或檸檬酸鹽緩沖液)，優(yōu)選0.23.5%NaCl優(yōu)選是0.2。/。NaCl。在此情況下，若水母樣品含有大量鹽分，所加鹽的量也應(yīng)進(jìn)行調(diào)整，使最終鹽濃度在該范圍內(nèi)。提取溫度約為2至25°C，優(yōu)選4。C。提取后，將溶液在1000至10000g，優(yōu)選最大速度10000g,離心5至20分鐘，并保持恒溫。將乙醇加入到提取液中進(jìn)行沉淀。將溶液在0至4。C靜置過夜，然后將溶液在1000至10000g,優(yōu)選10000g,離心5至20分鐘，并保持恒溫。將所得沉淀物溶解于少量水中，然后將溶液在1000至10000g，優(yōu)選10000g，離心5至20分鐘，并保持恒溫。然后移出上清液，并經(jīng)透析處理進(jìn)行純化。所得產(chǎn)物即是粘蛋白型糖蛋白粗提物，隨即將其凍千。在粘蛋白型糖蛋白的純化過程中，蛋白分離和純化中常用的生化方法，如有機(jī)溶劑分餾法，超濾法，多種電泳法，多種透析法，凝膠色譜法，疏水色譜法，反相色譜法，離子交換色譜法，和親和色譜法等，可單獨(dú)或選擇性的聯(lián)合使用。例如，主峰附近的組分可通過離子交換液相色譜法獲得，如例2所示純化所需的粘蛋白型糖蛋白。優(yōu)選該粘蛋白型糖蛋白的生成不包括加熱步驟。例如，該粘蛋白型糖蛋白的生成在25。C以下進(jìn)行，優(yōu)選0至25。C，最優(yōu)選在4。C。該粘蛋白型糖蛋白的生成方法是從水母中提取糖蛋白的一種有效的方法，且其優(yōu)勢在于能利用經(jīng)濟(jì)的生產(chǎn)方法將大量粘蛋白型糖蛋白引入市場，例如，可使用從水母水產(chǎn)業(yè)或海港或捕漁業(yè)中得到的水母廢物為原料。通過將本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白和已知的粘蛋白糖蛋白進(jìn)行對比，很明顯的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白與同樣含8個殘基重復(fù)結(jié)構(gòu)的人粘蛋白型糖蛋白MUC5AC相似，(H.Nakata，DiversityofMucinandMucin-typeSugarChainandItsMeaning:UnderstandableGlycobiologyinPost隱GenomicEra,WakaruJikken-IgakuSeries(UnderstandableExperimentalMedicine)(inJapanese),N.Taniguchied.，Chapter3,YodoshaCo.，Ltd.,2002;K.Hotta，K.Ishihara,SearchforAttractivenessofGastricMucus:ElucidationofMucinusingNewestApproach(inJapanese),MedicalViewCo.，Ltd.,1999)。該人粘蛋白型糖蛋白主要存在于呼吸道和胃粘膜中。蛋白中重復(fù)單位的氨基酸序列如式II(SEQIDNO:2)所示，同時顯示的還有本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白的重復(fù)單位的氨基酸序列(式I):本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白Val-Val-GIu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)(He)人MUC5AC:Thr-Thr-Ser-Thr-Thr-Ser-Ala-Pro(II)12345678對比這兩段氨基酸序列，在8個氨基酸殘基中，第4,5,7,8位的氨基酸是相同的。在本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白中，只有第4和5位的蘇氨酸殘基可作為糖鏈結(jié)合位點(diǎn)，而在MUC5AC中，第1,2，3,4，5,6位的氨基酸(Ser或Thr)均可作為糖鏈結(jié)合位點(diǎn)。然而，人MUC5AC，從整體上卻含有小量比例的糖。這提示了本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白可以與MUC5AC混合或單獨(dú)使用作為MUC5AC的替代化合物，因?yàn)楸景l(fā)明的粘蛋白型糖蛋白與MUC5AC顯示相似的特性，盡管其氨基酸序列和糖鏈結(jié)構(gòu)有所不同。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白也可作為其他粘蛋白型糖蛋白的替代物。例如，MUC5AC通常稱為"凝膠形成粘蛋白"。其主要功能之一是維持粘膜或粘液的膠狀形式。例如，維持胃粘膜的膠狀形式和防止胃液損傷胃壁的功能在胃內(nèi)層的表面具有很重要的作用。本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白還可在水溶液中形成膠狀的類似物，因此可用作上述用途的替代物。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白，因其含8個氨基酸殘基的短重復(fù)結(jié)構(gòu)而具有如下所述的獨(dú)特的生理特性，作為一種有用化合物很容易顯示其功能。其重復(fù)單位中8個殘基的一維長度約為4nm，而構(gòu)成單位的大小約為lnm。因此，該粘蛋白型糖蛋白具有的優(yōu)勢在于，其形成了相對于細(xì)胞，病毒和細(xì)菌的非常均一的基質(zhì)環(huán)境，約為100nm至ljum。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白可作為一種組合物。例如，其可混合或稀釋或混懸于合適的載體中形成組合物。適合的載體可包括通常使用的鹽溶液(如生理鹽水)，乳糖，葡萄糖，蔗糖，山梨醇，甘露醇，木糖醇，赤蘚糖醇，麥芽糖醇，淀粉，阿拉伯樹膠，藻酸鹽，明膠，磷酸鈣，硅酸鈣，纖維素，曱基纖維素，微晶纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，水，甲基羥基苯甲酸鹽，丙基羥基苯曱酸鹽，滑石粉，硬脂酸鎂，和礦物油。此外，所述組合物還可包含賦形劑，表面活性劑，分散劑，緩沖液，防腐劑，增溶劑，鎮(zhèn)定劑，穩(wěn)定劑，彈性劑等。當(dāng)本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白溶于高濃度的鹽溶液(如生理鹽水)中所形成的組合物用作人粘液替代物時，其可具有以下效果和用途(1)補(bǔ)給粘膜本身，例如，增強(qiáng)粘膜的多種(組織保護(hù)，濕度保持，潤滑等)功能；(2)治療中，作為粘液替代物補(bǔ)給由損傷(胃內(nèi)層的潰瘍)等引起的粘液物質(zhì)的不足；(3)作為藥物釋放載體有效地將藥物運(yùn)送到與粘液物質(zhì)接觸的組織；(4)作為有抗菌作用的人工基質(zhì)，其能捕獲與粘液物質(zhì)接觸的組織中的病毒，細(xì)菌和其他感染物。如上所述，本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白在制藥領(lǐng)域是一種有效的藥物組合物。而且，所述的粘蛋白型糖蛋白還可與蛋白(如膠原蛋白)或碳水化合物(如透明質(zhì)酸)混合，制備人工細(xì)胞外基質(zhì)的組成物質(zhì)。所述的人工細(xì)胞外基質(zhì)可用于形成在研發(fā)和再生藥物中有用的細(xì)胞外基質(zhì)。由于該粘蛋白型糖蛋白的來源是水母，該粘蛋白型糖蛋白可用作人和動物的食物。因此，該粘蛋白型糖蛋白可用于食物或食品添加劑中，作為食物增稠劑，抗菌包原料，或健康食品?？赏ㄟ^混合，浸漬，涂抹，或噴霧的方法將其加入到食品和食品添加劑中。另外，已知粘蛋白是一種滋潤或抗衰老成分。因此，該粘蛋白型糖蛋白還可用于化妝品中。加入了該粘蛋白型糖蛋白的化妝品包括乳液，奶液，面霜和粉底。如實(shí)施例l所示，該粘蛋白型糖蛋白已確定具有和當(dāng)今化妝品中典型的吸濕滋潤成分透明質(zhì)酸等同的滋潤和吸濕能力。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白可用作合成類似粘蛋白型糖蛋白的起始材料。在使用酶的合成過程或通常的有機(jī)合成反應(yīng)中，重復(fù)單位本身(重復(fù)一次的肽鏈)可用作標(biāo)記來預(yù)測引入糖鏈的產(chǎn)量或通過使用分光計如NMR來確定糖鏈的引進(jìn)。本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白具有非常好的粘性。因此，含本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白的水溶液可澆鑄成膜或樹脂形式，這可通過干燥該水溶液鋪展成一個薄層或用戊二醛或多羧基酸將糖鏈部分凝膠化來實(shí)現(xiàn)。所得膜或樹脂形式的組合物具有非常好的生物親合能力和生物降解能力，可用于手術(shù)后縫合膜，人造骨的表面保護(hù)物質(zhì)，潤滑劑等。如上所述，包含本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白的組合物可用于細(xì)胞組織保護(hù)，皮膚表面保濕，健康促進(jìn)，藥品施用，疾病治療和預(yù)防，抗菌素的應(yīng)用等。此外，本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白具有以下特性l)可分離具有大范圍分子量分布的粘蛋白型糖蛋白；2)可作為化合物以固態(tài)形式穩(wěn)定貯存；3)根據(jù)液相色譜法使用合適的色譜柱通過分餾法可將具有相同的分子量分布和分子分布中值的樣品以可再現(xiàn)的方式純化；4)可通過MALDI-TOFMS測定具有單一分子量的分餾樣品的絕對分子量。具有不同的分子量分布和分子分布中值的組分可作為分子量標(biāo)記物。用作分子量標(biāo)記物的粘蛋白型糖蛋白優(yōu)選從多種水母或水母的多個部位提取。例如如實(shí)施例7中所示，從Echizen-kurage水母(A^wo/z7emawowwra0表皮中獲得的粘蛋白型糖蛋白具有非常寬的分子量分布。因此，粘蛋白型糖蛋白可從A^mo;z7emawomwra/的表皮中分離出，從而制備分子量范圍很大的分子量標(biāo)記物。包含本發(fā)明的粘蛋白型糖蛋白的分子量標(biāo)記物可按如下方法制備如上所述分離粘蛋白型糖蛋白，然后在適當(dāng)條件下用合適的色譜柱(見實(shí)施例7)進(jìn)行大小排阻色譜法(SEC)盡可能準(zhǔn)確地分離每個洗脫時間的餾分。有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員根據(jù)待制備的標(biāo)記物的所需分子量范圍適當(dāng)?shù)貨Q定包括所用色鐠柱，洗脫液的成分和流速，和柱溫的洗脫條件。收集、純化各餾分。可通過適當(dāng)組合各種已知的純化方法進(jìn)行純化。例如，優(yōu)選用透析法進(jìn)行脫鹽處理。純化后可將具有單一分子量的粘蛋白型糖蛋白部分凍干并作為固體使用。該固體樣品優(yōu)選在4。C左右冷藏。然后，對各粘蛋白型糖蛋白部分用MALDI-TOFMS等方法測定其絕對分子量(見實(shí)施例8)。該分子量標(biāo)記物包括很寬范圍的分子量，如實(shí)施例6和7所示。尤其是，本發(fā)明可制備分子量約為10至14,000kDa的分子量標(biāo)記物。所制備的粘蛋白型糖蛋白部分的分子量可通過調(diào)整大小排阻色譜法分餾步驟中的洗脫時間來確定。例如，餾分可如實(shí)施例8所示分餾而制備分子量標(biāo)記物，其分子量分布約為8至15kDa(中值llkDa)，15至25kDa(中值19kDa)，28至38kDa(中值32kDa)，45至55kDa(中值49kDa)，70至100kDa(中值86kDa),和80至150kDa(中值:110kDa)以及其他不同的中值。在測定結(jié)果的基礎(chǔ)上，用分子量標(biāo)記物的絕對分子量和洗脫時間繪制校正曲線。在此程序中，分子量標(biāo)記物的分子量優(yōu)選在特定范圍內(nèi)，該范圍能建立下列關(guān)于分子量和洗脫時間(洗脫體積)的理論關(guān)系log(分子量)-A-Bx洗脫時間(洗脫體積)[其中A和B為正凄幻。然后，未知樣品可用該校正曲線(分子量和洗脫時間的關(guān)系)進(jìn)行測定。如實(shí)施例3所示，該分子量標(biāo)記物在絕對值上與傳統(tǒng)使用的普魯蘭有約3倍的不同。通常情況下，MALDI-TOFMS的結(jié)果更可靠。因此，至少在已測定出糖蛋白的分子量分布的情況下，才可以說使用上述的分子量標(biāo)記物進(jìn)行測定更為準(zhǔn)確。而且，此結(jié)果與結(jié)合了氨基酸序列分析中的Edman降解效率后所確定的數(shù)值具有很好的一致性。下面通過實(shí)例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。然而，本發(fā)明的技術(shù)范圍不限于這些實(shí)例。實(shí)施例1根據(jù)本發(fā)明，可根據(jù)下列方法從海月水母和咖啡金黃水母中提取作為新型粘蛋白型糖蛋白前體的粗粘蛋白，如圖2所示1)解凍并用水清洗冷凍的整個水母，離心分離固體物質(zhì)和液體部分；2)剩下的固體部分用剪刀切成約5mm至1cm的方塊。3)切割后的片段用丙酮處理進(jìn)行脫脂和脫水，然后浸水再次膨脹；4)將固體樣品加入0.2%NaCl水溶液中并在4。C振搖提取；5)將步驟4所得的溶液在4。C以10000g的速度離心15分鐘；6)向步驟5所得的提取液中加入3倍體積的乙醇，使沉淀成膠體狀；7)將步驟6所得的溶液置于冰箱中靜置過夜，然后在4。C以10000g離心15分鐘;8)從步驟7所得的沉淀物溶于少量水中，將此溶液在4。C以10000g離心15分鐘;9)移出從步驟8所得的上清液，并將其透析純化，凍干制成粗粘蛋白；10)對從步驟8所得的沉淀物，以適當(dāng)次數(shù)重復(fù)操作步驟7和8,從而獲得粗粘蛋白。實(shí)施例2對從實(shí)施例1中獲得的兩種水母中提取的粗粘蛋白進(jìn)行離子交換液相色譜分析，純化圖3中所示的標(biāo)有星號的色譜峰得到高純度的粘蛋白型糖蛋白。所用色譜法的條件如下所示TSKgelDEAE-ToyoPearl650M25mmi.d.x150mmA:lOmMNaPi,pH7B:0.5MNaCl/10mMNaPi，pH7流速2ml/min,監(jiān)測器UV(215nm)梯度0-60min(%B:0-100)樣品海月水母5ml(2mg/ml粗粘蛋白/10mMNaPi溶液)咖啡金黃水母1.3ml實(shí)施例3將實(shí)施例2中純化的化合物用自動氨基酸分析儀進(jìn)行氨基酸分析。每一個如上所述經(jīng)離子交換色譜法純化并透析的樣品(每個約為12pg)移入水解試管中，并用離心蒸發(fā)器蒸發(fā)至干。將干燥的樣品置于含有持續(xù)沸騰的鹽酸(5.7N)的外層套管中，并減壓密封。用氣相法在110。C水解20小時。打開外層套管，用同樣方法干燥水解管。干燥的水解產(chǎn)物溶于100lil的0.02N鹽酸中。用高速氨基酸分析儀L-8500A(HitachiLtd.生產(chǎn))對水解產(chǎn)物進(jìn)行氨基酸分析。根據(jù)廠商(HitachiLtd.)提供的具體的氨基酸分析方法，用離子交換色譜柱，以5種緩沖溶液對水解產(chǎn)物中的氨基酸進(jìn)行分離。分離的氨基酸以柱后法與水合茚三酮反應(yīng)，并用兩個波長的可見光進(jìn)行檢測?；趯?nmol的標(biāo)準(zhǔn)氨基酸混合物，葡萄糖胺和半乳糖胺進(jìn)行分析所得的數(shù)值，可用570nm色譜圖對氨基糖和正常的氨基酸進(jìn)行定量，用440nm色譜圖對脯氨酸進(jìn)行定量。圖4顯示了氨基酸組成分析的結(jié)果。如圖4中所示的氨基酸濃度比，在海月水母和咖啡金黃水母中，粘蛋白型糖蛋白的肽部分的組成為蘇氨酸(Thr):谷氨酸(Glu):脯氨酸(Pro):丙氨酸(Ala):纈氨酸(Val)+異亮氨酸(lie):N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)的比例為2:1:1:2:2:2,誤差均在10%內(nèi)。而且，絲氨酸或其他氨基酸的濃度比例只有約0.05%。因此，其可能來源于雜質(zhì)或末端結(jié)構(gòu)，與粘蛋白型糖蛋白的重復(fù)結(jié)構(gòu)無關(guān)。實(shí)施例4在本實(shí)例中，將使用AppliedBiosystemsProcise494HT用脈沖液相法分析實(shí)例2中純化的蛋白(每個為1.8|ig),并標(biāo)示每個循環(huán)中PTH氨基酸的量。圖5顯示了從兩種水母中提取的粘蛋白型糖蛋白的氨基末端的氨基酸序列分析結(jié)果(圖5-1顯示海月水母的結(jié)果；圖5-2顯示咖啡金黃水母的結(jié)果)。圖5-1中，有實(shí)心方塊的交替長短虛線表示纈氨酸(Val);虛線表示谷氨酸(Glu);有空心方塊的線表示丙氨酸(Ala);有空心圓圈的鏈狀雙虛線表示脯氨酸(Pro);有實(shí)心圓圏的線表示異亮氨酸(Ile)。用自動蛋白氨基酸序列分析儀分析了三十個殘基。結(jié)果為，發(fā)現(xiàn)3.75個從N端開始，包含Val-Val(Ile)-Glu-X-X-Ala-Ala-Pro(X代表未知氨基酸)的重復(fù)結(jié)構(gòu)的循環(huán)。這說明，粘蛋白型糖蛋白包含VVEXXAAP(有些情況下是VIEXXAAP)的重復(fù)序列。而且，從實(shí)例3的結(jié)果推測，X可能是蘇氨酸。這種含八個殘基重復(fù)氨基酸序列的粘蛋白是一種無法從蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫中搜索到的蛋白，迄今為止尚未發(fā)現(xiàn)。因此這是一種新型蛋白。此外，假設(shè)早期產(chǎn)量約為30pmol,Edman降解的早期產(chǎn)量為50%,則所得的粘蛋白型糖蛋白相當(dāng)于60pmol。因此，重復(fù)單位的數(shù)目(肽鏈部分的分子量約為768,若包括后面所述的糖鏈，則分子量約為1500)約為40。由該數(shù)值確定的60kDa的分子量可視為均值分子量。N末端的VEXXAAPV(有些情況下是IEXXAAPV)重復(fù)單位是從咖啡金黃水母中獲得的(圖5-2)。除了缺失第一個殘基，其與從海月水母中獲得的重復(fù)單位是相同的。這些重復(fù)單位本質(zhì)上沒有區(qū)別。實(shí)施例5如上所述用離子交換色譜法純化并透析的每個樣品(約6pg)移入反應(yīng)管中，用離心蒸發(fā)機(jī)蒸發(fā)至干。加入酶，然后用4M的三氟醋酸在100。C水解3小時，其中所含的唾液酸轉(zhuǎn)化成游離的還原糖。N-乙?；?，熒光標(biāo)記(ABEE)樣品，隨后用HonenPakC18色譜柱(75mmx4.6mmi.d.),以混合溶劑0.2M硼酸鉀緩沖溶液(pH8.9)/乙腈(93:7)進(jìn)行分離。在熒光305nm波長進(jìn)行檢測。以同法處理的ll種單糖標(biāo)準(zhǔn)混合物的色譜圖為基礎(chǔ)，對單糖組分比進(jìn)行定量。圖6-1顯示了海月水母的結(jié)果；圖5-2顯示了咖啡金黃水母的結(jié)果。圖6-1所示的，根據(jù)海月水母中粘蛋白型糖蛋白的單糖組分分析而估測出的單糖結(jié)果顯示如下(交替的長短虛線)(虛線)半乳糖0.6nmo10.9nmolN-乙酰半乳糖胺0.8nmol1.2nmo1由這些分析結(jié)果認(rèn)為，肽重復(fù)單位中的兩個蘇氨酸分別結(jié)合N-乙酰半乳糖胺，其全部或部分與半乳糖結(jié)合。假設(shè)其中未結(jié)合其他糖，糖鏈部分的分子量為730。因此，所估測的單位糖蛋白的分子量約為1500(含糖量約為50%)。另一方面，圖6-2中所示的咖啡金黃水母中粘蛋白型糖蛋白的單糖組分分析沒有標(biāo)準(zhǔn)品，且涉及無法識別的未知糖。因此，所有糖中單糖的比例是未知的。從該分析中估測的已知單糖的濃度如下所示(虛線)半乳糖0.7nmo1N-乙酰半乳糖胺0.8nmo1實(shí)施例6取0.05ml(1mg/ml純化的新型粘蛋白/0.1MNaPi溶液)的海月水母粘蛋白型糖蛋白樣品，在ShodexSB-806HQ上進(jìn)行凝膠過濾(大小排阻)HPLC分析，洗脫液0.1MNaPi,pH7;流速0.5ml/min;檢測器UV(215nm)&RI。普魯蘭用作分子量標(biāo)記物。分析結(jié)果顯示在圖7中。結(jié)果說明，峰分子量約為450kDa(圖7A)。而且，從色譜圖中計算出的數(shù)均和重均分子量分別約為180kDa和約500kDa。(圖7B)。在凝膠過濾中使用普魯蘭為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，分子量分布顯示為10至1400kDa。凝膠過濾法確定的數(shù)均分子量約為180kDa,這是氨基酸序列分析估測出的60kDa分子量的3倍。用兩種最可靠的測定方法進(jìn)行多聚體糖鏈化合物的分子量測定。然而，這兩種方法所得的絕對值會也會產(chǎn)生數(shù)倍的誤差。這樣的誤差視為現(xiàn)今技術(shù)通常發(fā)生的錯誤范圍內(nèi)，在多聚體糖鏈化合物的分子量測定中是不可避免的。考慮到相對測定中所用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(普魯蘭)的適合性問題，基于氨基酸序列分析所得的重復(fù)單位數(shù)目的、數(shù)均分子量的絕對值似乎比凝膠過濾法的結(jié)果更準(zhǔn)確。在此情況下，氨基酸序列分析能確定準(zhǔn)確分子量的絕對值，但不能確定分子量分布，而凝膠過濾法只能測定分子量分布，而這只是相對值。這可通過包括實(shí)施例7和9的下列步驟來確證。凝膠過濾法測定的分子量分布可用實(shí)施例9中所示的使用MALDI-TOF的方法將其換算成絕對值。在本說明書中，該方法作為確定分子量的參考測定方法使用。MALDI-TOF測定的分子量數(shù)值與氨基酸序列分析估測出的分子量一致。這兩種方法測定的數(shù)均分子量的比率((以普魯蘭為標(biāo)準(zhǔn)測定的分子量)/(MALDI-TOF方法測定的分子量)=約為3)對全部分子量有效。用該數(shù)值校正后，峰分子量約為150kDa;重均分子量為170kDa;色譜法所得的峰分子量的上限為470kDa。相應(yīng)的氨基酸序列的重復(fù)數(shù)目對應(yīng)峰值是100,對應(yīng)重均分子量是110,對應(yīng)分子量上限是700。此外，色譜圖顯示，總量的50%在60至270kDa范圍內(nèi)(校正后)，峰分子量為150kDa，總量的30。/。在90至210kDa范圍內(nèi)(校正后)。即說明總量的50%具有40至180個重復(fù)單位，總量的30%具有60至150個重復(fù)單位。實(shí)施例7在本實(shí)例中，將從多種水母中提取的粘蛋白型糖蛋白進(jìn)行大小排阻色譜分析(SEC)。使用與實(shí)例1中相同的方法從水母中提取粘蛋白型糖蛋白。色譜條件如下所示色譜柱TSKgelG5000PWXL洗脫液0.1M醋酸銨水溶液流速0.5ml/min樣品濃度0.3至0.9mg/ml結(jié)果如圖8所示。圖8中的結(jié)果說明了從水母中提取的粘蛋白型糖蛋白具有廣泛的分子量分布。特別是，從Echizen-kurage水母(A^woj^7emawomwa!〕的傘表面(表皮)提取的粘蛋白型糖蛋白比其他糖蛋白具有較低的分子量和更廣泛的分子量分布。實(shí)施例8實(shí)例7中，從海月水母中提取的粘蛋白型糖蛋白通過SEC分餾成圖9所示的各個餾分，并進(jìn)行MALDI-TOF質(zhì)譜分析。使用BmkerDaltonics生產(chǎn)的Reflex設(shè)備，用反吲哚-3-丙烯酸為基質(zhì)，以線性方式進(jìn)行MALDI-TOFMS操作。結(jié)果如圖10所示。在圖表中，標(biāo)題部分描述的M+兩位數(shù)代表圖9中的組分號。因在每個組分中得到一個清晰的峰，可以此來確定分子量。特別是，圖10中，根據(jù)目測計算，分子量分布(及其中值)為M28部分約為8至15kDa(中值11kDa);M26部分約為15至25kDa(中值19kDa);M24部分約為28至38kDa(中值32kDa);M22部分約為45至55kDa(中值49kDa);M20部分約為70至100kDa(中值:86kDa);M19部分約為80至150kDa(中值:110kDa)。實(shí)施例9實(shí)例7中，從海月水母中提取的粘蛋白型糖蛋白通過SEC分餾成圖9所示的各個餾分。實(shí)例8中通過MALDI-TOFMS測定的分子量繪制成曲線圖。普魯蘭的測定結(jié)果也繪制成曲線圖作為對照。結(jié)果如圖ll所示。在圖ll中，粘蛋白型糖蛋白的結(jié)果(實(shí)心方塊)下方顯示的數(shù)字表示圖9中的組分號。該結(jié)果說明了，從水母中提取的粘蛋白型糖蛋白和普魯蘭均有很好的線性關(guān)系，而其絕對值約有3倍的差異。因此，這提示了該粘蛋白型糖蛋白可通過上述分餾法用作分子量標(biāo)記物，尤其是在高分子化合物如糖蛋白的分子量測定中。實(shí)施例10測定本發(fā)明中的粘蛋白型糖蛋白的吸濕性和滋潤性。吸濕性按如下方法測定從海月水母中純化的粘蛋白型糖蛋白在含硅膠的干燥器中干燥至恒定重量，取20mg置于稱量瓶中，并放置在干燥器中，該干燥器的相對濕度(RH)用飽和硫酸銨水溶液調(diào)節(jié)至79%(25。C)。經(jīng)時測定樣品的增重，增重的量顯示為吸水的量。結(jié)果如下面表l所示。另一方面，滋潤性按如下相似方法測定從海月水母中純化的粘蛋白型糖蛋白在含硅膠的干燥器中干燥至恒定重量，取20mg置于稱量瓶中，加入10。/o的水后，放置在干燥器中，該干燥器的相對濕度(RH)用飽和氬氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)至49%。24小時后測定樣品的失重，計算保留的水分的量。結(jié)果如下面表l所示。這兩種測定值以透明質(zhì)酸為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確定為相對數(shù)值，透明質(zhì)酸32具有很高的吸濕性和滋潤性，在化妝品中用作滋潤成分。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>*結(jié)果顯示為與透明質(zhì)酸的相對數(shù)值，名義分子量300kDa設(shè)為1.0.吸濕性的結(jié)果說明了，本發(fā)明中純化的粘蛋白型糖蛋白的吸濕性約為透明質(zhì)酸的三倍，具有非常好的短期吸濕性。滋潤性的結(jié)果說明了，本發(fā)明中純化的粘蛋白型糖蛋白的滋潤性在相對濕度(RH)為49%或更低的低濕度條件下，約為透明質(zhì)酸的60%，而透明質(zhì)酸具有非常高的滋潤性。本說明書中引用的所有文獻(xiàn)、專利和專利申請在此全部歸入?yún)⒖嘉墨I(xiàn)。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明提供了一種新型粘蛋白型糖蛋白。例如，粘蛋白型糖蛋白可用于化學(xué)結(jié)構(gòu)已準(zhǔn)確鑒定的人粘蛋白的替代物，也可應(yīng)用于制藥、農(nóng)業(yè)和食品領(lǐng)域。此外，粘蛋白型糖蛋白易從水母中大量制備，因此從經(jīng)濟(jì)和環(huán)保角度來看具有很大意義。另外，本發(fā)明提供了含粘蛋白型糖蛋白的分子量標(biāo)記物。分子量標(biāo)記物有從天然多聚體中獲得的分枝狀多聚體鏈。該分子量標(biāo)記物的使用可對分枝狀多聚體，如糖蛋白，的分子量進(jìn)行準(zhǔn)確測定。權(quán)利要求1.一種具有重復(fù)結(jié)構(gòu)的粘蛋白型糖蛋白，其中所述重復(fù)結(jié)構(gòu)包含3至2000個重復(fù)單位，每個重復(fù)單位具有如式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)，式中，Xaa代表Val或Ile，上述結(jié)構(gòu)中的一個或以上的氨基酸殘基與由一個或以上單糖組成的糖鏈結(jié)合。2.權(quán)利要求1所述的粘蛋白型糖蛋白，其中粘蛋白型糖蛋白具有包含3至700個重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)。3.權(quán)利要求1或2所述的粘蛋白型糖蛋白，其中粘蛋白型糖蛋白具有包含40至180個重復(fù)單位的重復(fù)結(jié)構(gòu)。4.權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白，其中重復(fù)單位直接結(jié)合或通過接頭結(jié)合。5.權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白，其中與糖鏈結(jié)合的氨基酸是蘇氨酸(Thr)。6.權(quán)利要求5所述的粘蛋白型糖蛋白，其中98%或以上與糖鏈結(jié)合的氨基酸是蘇氨酸(Thr)。7.權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白，其中糖鏈包含選自N-乙酰半乳糖胺，半乳糖，N-乙酰葡糖胺，唾液酸，阿拉伯糖以及巖藻糖的單糖。8.權(quán)利要求7所述的粘蛋白型糖蛋白，其中糖鏈包含N-乙酰半乳糖胺。9.權(quán)利要求7或8所述的粘蛋白型糖蛋白，其中糖鏈包含N-乙酰半乳糖胺和半乳糖。10.權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白，其中重復(fù)結(jié)構(gòu)N端的一個或幾個氨基酸缺失。11.權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白，其中該粘蛋白型糖蛋白是從水母提取的。12.按照具有下列步驟的生產(chǎn)方法生成的粘蛋白型糖蛋白剪斷水母的固體部分；用鹽溶液提取水母的切斷部分；用離心和透析法從提取物中分離粗粘蛋白；純化粘蛋白型糖蛋白。13.—種制備粘蛋白型糖蛋白的方法，包含下列步驟剪斷水母的固體部分；用鹽溶液提取水母的切斷部分；用離心和透析法從提取物中分離粗粘蛋白；純化粘蛋白型糖蛋白，其中，所有的步驟在0-25。C下進(jìn)行。14.一種組合物，其包含權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的粘蛋白型糖蛋白。15.權(quán)利要求14所述的組合物，其用于細(xì)胞和組織保護(hù)，皮膚表面的水分保持和吸收，健康促進(jìn)，藥品施用，疾病的治療和預(yù)防，或抗菌素的使用。16.權(quán)利要求14或15所述的組合物，其為水溶液，膜或樹脂的形式。17.—種修飾粘蛋白型糖蛋白的方法，其包括用糖基轉(zhuǎn)移酶的作用于權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述粘蛋白型糖蛋白的糖鏈，對其進(jìn)行修飾。18.—種具有重復(fù)結(jié)構(gòu)的蛋白，每個重復(fù)結(jié)構(gòu)含1至2000個重復(fù)單位，每個重復(fù)單位具有如式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)式中，Xaa代表Val或Ile。19.一種制備糖蛋白的方法，其特征為，在權(quán)利要求18所述的蛋白中至少一個氨基酸殘基與由一個或以上單糖組成的糖鏈結(jié)合。20.—種含粘蛋白型糖蛋白的分子量標(biāo)記物，含有通過絕對分子量測定方法測定的分子量分布和分子分布中值，該粘蛋白型糖蛋白具有重復(fù)結(jié)構(gòu)，每個重復(fù)結(jié)構(gòu)包含3至2000個重復(fù)單位，每個重復(fù)單位具有如式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro①，式中Xaa代表Val或Ile，上述結(jié)構(gòu)中的一個或以上的氨基酸殘基與由一個或以上單糖組成的的糖鏈結(jié)合。21.權(quán)利要求20所述的分子量標(biāo)記物，其中該分子量標(biāo)記物的分子量為10至14,000kDa。22.權(quán)利要求20或21所述的分子量標(biāo)記物，其中該分子量標(biāo)記物為冷凍干燥物。23.—種制備分子量標(biāo)記物的方法，該方法包括下列步驟將粘蛋白型糖蛋白用大小排阻色譜法進(jìn)行分餾，所述粘蛋白型糖蛋白具有重復(fù)結(jié)構(gòu)，每個重復(fù)結(jié)構(gòu)包含3至2000個重復(fù)單位，每個重復(fù)單位具有如式I所示的氨基酸序列Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro(I)式中Xaa代表Val或Ile，上述結(jié)構(gòu)中的一個或以上氨基酸殘基與由一個或以上單糖組成的糖鏈結(jié)合；收集和純化所得的餾分；測定純化后餾分的絕對分子量。24.權(quán)利要求23所述的方法，其進(jìn)一步包括凍干純化后的餾分的步驟。全文摘要本發(fā)明涉及一種新型粘蛋白型糖蛋白及其制備方法。特別是，本發(fā)明提供了一種具有重復(fù)結(jié)構(gòu)粘蛋白型糖蛋白，每個重復(fù)結(jié)構(gòu)包含3至2000個重復(fù)單位，每個重復(fù)單位的氨基酸序列如式I所示Val-Xaa-Glu-Thr-Thr-Ala-Ala-Pro[其中Xaa代表Val或Ile]，上述結(jié)構(gòu)中的一個或以上氨基酸殘基與由一個或以上單糖組成的糖鏈相結(jié)合。本發(fā)明還涉及一種包含所述新型粘蛋白型糖蛋白組合物。此外，本發(fā)明涉及一種包含該新型粘蛋白型糖蛋白的分子量標(biāo)記物。文檔編號A61K38/00GK101309932SQ20068003821公開日2008年11月19日申請日期2006年8月11日優(yōu)先權(quán)日2005年8月12日發(fā)明者丑田公規(guī),古川英光,堂前直,宮脅敦史,益田晶子申請人:獨(dú)立行政法人理化學(xué)研究所