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一種含葛仙米多糖的組合物及其制備方法和應(yīng)用與流程

文檔序號:11238758閱讀:434來源:國知局
本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域,涉及一種含葛仙米多糖的組合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)
:葛仙米是念珠藻屬(nostocvauch)中的擬球狀念珠藻(nostocsphaeoideskützing)的俗稱。又稱天仙米、天仙菜、珍珠菜、水木耳、田木耳,是我國傳統(tǒng)食用的一種珍貴野生食藥兩用淡水固氮藍(lán)藻。葛仙米在我國歷史悠久,不僅是一道營養(yǎng)豐富的傳統(tǒng)佳肴,而且具有較高的醫(yī)療和保健功效。據(jù)記載,葛仙米具有明目益氣、解熱清膈、久食延年、消除疲勞、收斂等功效。葛仙米富含活性多糖、蛋白質(zhì)、維生素b族和微量的礦物質(zhì)元素。在可食用的藻類中,葛仙米是營養(yǎng)物質(zhì)較均衡的一種。葛仙米多糖是葛仙米的主要成分之一,該多糖具有低濃度時流動性好,高濃度時黏度高,分子量分布寬等特點。近期的活性研究表明,葛仙米中多糖具有提高免疫、抗氧化、抑制腫瘤、等功效。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明提供一種以葛仙米多糖和桂花葉提取物為原料的組合物及其制備方法,所述組合物具有保護(hù)胃黏膜,調(diào)節(jié)腸道菌群和改善排便功能的效果,且長期食用無副作用。本發(fā)明提供的含葛仙米多糖的組合物包括以下重量份數(shù)的組分,葛仙米多糖80~100份,桂花葉提取物0~20份。優(yōu)選地,所述葛仙米多糖85~95份,桂花葉提取物5~15份。進(jìn)一步優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖95份,桂花葉提取物5份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖85份,桂花葉提取物15份。本發(fā)明中,可以采用商品化的葛仙米多糖和桂花葉提取物來制備所述含葛仙米多糖的組合物。本發(fā)明還提供了所述含葛仙米多糖的組合物的制備方法,所述方法包括:兩種原料的制備方法如下。葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品自然晾干或者使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分含量為8~15%,得到葛仙米干品。優(yōu)選地,使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分含量為8%、10%、15%。3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至100目以下,得到葛仙米細(xì)粉。優(yōu)選地,粉碎至80目以下;進(jìn)一步優(yōu)選地,粉碎至50目以下。4)葛仙米細(xì)粉按重量比加入300~600倍水浸泡4~20小時。優(yōu)選地,加500倍水浸泡12小時;或,300倍水浸泡4小時;或,450倍水浸泡16小時;或,500倍水浸泡12小時;或,600倍水浸泡20小時。5)浸泡完成后,加熱至90~100℃,保溫提取1~4h,得到提取液。優(yōu)選地,加熱至90℃,保溫提取1h;或,加熱至100℃,保溫提取2h或4h。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的30%~35%,得到濃縮液。優(yōu)選地,濃縮至原重量的30%、33%或35%。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到30%~70%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。優(yōu)選地,混合液酒精度為30%、40%、50%、70%;8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。桂花葉提取物制備:1)鮮桂花葉采收后,進(jìn)行微波殺青干燥,微波功率500w~600w,殺青時間180s~240s。優(yōu)選地,為微波功率500w,殺青時間240s;或,優(yōu)選地,為微波功率600w,殺青時間180s;或,優(yōu)選地,為微波功率550w,殺青時間210s。2)干燥的桂花葉按重量比加入10~20倍水提取2次,提取溫度50~60℃,每次提取4~5h。優(yōu)選地,為提取溫度55℃,每次提取4h;或,優(yōu)選地,為提取溫度50℃,每次提取5h;或,優(yōu)選地,為提取溫度60℃,每次提取4h。3)合并提取液,經(jīng)管式離心機(jī)離心去渣后,進(jìn)行低溫濃縮,濃縮溫度50~60℃,濃縮至提取液固形物含量35%~45%即可,得到濃縮液。優(yōu)選地,為濃縮溫度50℃,濃縮至提取液固形物含量40%;或,優(yōu)選地,為濃縮溫度55℃,濃縮至提取液固形物含量35%;或,優(yōu)選地,為濃縮溫度60℃,濃縮至提取液固形物含量45%。4)濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到桂花葉提取物。上述兩種原料按比例混合均勻,既得本發(fā)明所述含葛仙米多糖的組合物。優(yōu)選地,將本發(fā)明含葛仙米多糖的組合物使用粉末包裝機(jī)灌裝成條包,其中,所述含葛仙米多糖的組合物按葛仙米多糖80~100份,桂花葉提取物0~20份混合均勻;優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物按葛仙米多糖85~95份,桂花葉提取物5~15份混合均勻。進(jìn)一步優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖95份,桂花葉提取物5份;或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖85份,桂花葉提取物15份。本發(fā)明還提供了一種葛仙米多糖的制備方法,所述方法如上所述。本發(fā)明還提供了一種由上述方法制備得到的葛仙米多糖。本發(fā)明還提供了一種桂花葉提取物的制備方法,所述方法如上所述。本發(fā)明還提供了一種由上述方法制備得到的桂花葉提取物。本發(fā)明還提供了一種由上述方法制備得到的含葛仙米多糖的組合物,所述組合物包括以下重量份數(shù)的組分,葛仙米多糖80~100份,桂花葉提取物0~20份。優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖85~95份,桂花葉提取物5~15份。進(jìn)一步優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份?;颍龊鹣擅锥嗵堑慕M合物包括葛仙米多糖95份,桂花葉提取物5份。或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份?;?,所述葛仙米多糖85份,桂花葉提取物15份。本發(fā)明的含葛仙米多糖的組合物還可以添加葛仙米干粉,其中,葛仙米多糖和葛仙米干粉80~100份,桂花葉提取物0~20份。其中,所述葛仙米多糖、葛仙米干粉的質(zhì)量比為(30~90):(10~70);優(yōu)選地,所述葛仙米多糖、葛仙米干粉的質(zhì)量比為(50~80):(20~50);進(jìn)一步優(yōu)選地,所述葛仙米多糖、葛仙米干粉的質(zhì)量比為70:30。其中,上述葛仙米干粉的制備方法包括以下步驟:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品自然晾干或者使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分8~15%,得到葛仙米干品。優(yōu)選的,使用鼓風(fēng)干燥箱干燥。3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)至100目以下,既得葛仙米干粉。優(yōu)選的,粉碎至200目以下。本發(fā)明的含葛仙米多糖的組合物還可以添加用于矯味的果粉和甜菊糖苷等組分。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備保護(hù)胃黏膜、抑制胃潰瘍的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用。優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份,桂花葉提取物0份?;?,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份。或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖95份,桂花葉提取物5份。或,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖85份,桂花葉提取物15份。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備預(yù)防胃潰瘍的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備改善排便功能的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用;優(yōu)選地,用于改善有便秘癥狀對象的首便時間(首次排便時間)、糞便粒數(shù),優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份,桂花葉提取物0份?;颍龊鹣擅锥嗵堑慕M合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備調(diào)節(jié)腸道菌群的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用。優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物用于調(diào)節(jié)雙歧桿菌、乳桿菌等腸道菌群。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備提高腸道雙歧桿菌數(shù)量的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用;優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份。本發(fā)明還提供了上述含葛仙米多糖的組合物在制備提高腸道雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量的食品、藥品或保健品中的應(yīng)用;優(yōu)選地,所述含葛仙米多糖的組合物包括葛仙米多糖100份。本發(fā)明的有益效果在于,本發(fā)明提供的包括葛仙米多糖和桂花葉提取物的含葛仙米多糖的組合物具有保護(hù)胃黏膜、抑制胃潰瘍、預(yù)防胃潰瘍、改善排便功能、調(diào)節(jié)腸道菌群等功效。具體實施方式結(jié)合以下具體實施例,對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。實施本發(fā)明的過程、條件、實驗方法等,除以下專門提及的內(nèi)容之外,均為本領(lǐng)域的普遍知識和公知常識,本發(fā)明沒有特別限制內(nèi)容。實施例1葛仙米多糖100份,桂花葉提取物0份,既得產(chǎn)品含葛仙米多糖的組合物。葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分8%,得到葛仙米干品3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至50目以下,得到葛仙米細(xì)粉。4)葛仙米細(xì)粉加300倍水浸泡4小時。5)浸泡完成后,加熱至90℃,保溫提取1h,得到提取液。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的30%,得到濃縮液。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到30%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。實施例2葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份,混合均勻,既得產(chǎn)品含葛仙米多糖的組合物。上述兩種原料的制備方法如下:葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品自然晾干至水分15%,得到葛仙米干品3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至100目以下,得到葛仙米細(xì)粉。4)葛仙米細(xì)粉加600倍水浸泡20小時。5)浸泡完成后,加熱至100℃,保溫提取4h,得到提取液。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的35%,得到濃縮液。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到70%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。桂花葉提取物制備:1)鮮桂花葉采收后,進(jìn)行微波殺青干燥,微波功率500w,殺青時間240s;2)干燥的桂花葉按重量比加入12倍水提取2次,提取溫度55℃,每次提取4h;3)合并提取液,經(jīng)離心去渣后,進(jìn)行低溫濃縮,濃縮溫度50℃,濃縮至提取液固形物含量40%,得到濃縮液;4)濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到桂花葉提取物。實施例3葛仙米多糖95份,桂花葉提取物5份混合均勻,既得產(chǎn)品含葛仙米多糖的組合物。上述兩種原料的制備方法如下:葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分10%,得到葛仙米干品。3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至80目以下,得到葛仙米細(xì)粉。4)葛仙米細(xì)粉加450倍水浸泡16小時。5)浸泡完成后,加熱至100℃,保溫提取2h,得到提取液。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的33%,得到濃縮液。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到50%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。桂花葉提取物制備:1)鮮桂花葉采收后,進(jìn)行微波殺青干燥,微波功率600w,殺青時間180s;2)干燥的桂花葉按重量比加入10倍水提取2次,提取溫度50℃,每次提取5h;3)合并提取液,經(jīng)離心去渣后,進(jìn)行低溫濃縮,濃縮溫度55℃,濃縮至提取液固形物含量35%,得到濃縮液;4)濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到桂花葉提取物。實施例4葛仙米多糖85份,桂花葉提取物15份,混合均勻,既得產(chǎn)品含葛仙米多糖的組合物。上述兩種原料的制備方法如下:葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分10%,得到葛仙米干品。3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至80目以下,得到葛仙米細(xì)粉。4)葛仙米細(xì)粉加500倍水浸泡12小時。5)浸泡完成后,加熱至100℃,保溫提取2h,得到提取液。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的35%,得到濃縮液。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到40%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。桂花葉提取物制備:1)鮮桂花葉采收后,進(jìn)行微波殺青干燥,微波功率550w,殺青時間210s;2)干燥的桂花葉按重量比加入20倍水提取2次,提取溫度60℃,每次提取4h;3)合并提取液,經(jīng)離心去渣后,進(jìn)行低溫濃縮,濃縮溫度60℃,濃縮至提取液固形物含量45%,得到濃縮液;4)濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到桂花葉提取物。實施例5葛仙米多糖56份,葛仙米干粉24份,桂花葉提取物20份,混合均勻,既得產(chǎn)品含葛仙米多糖的組合物。上述三種原料的制備方法如下:葛仙米多糖的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品使用鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分10%,得到葛仙米干品。3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)粉碎至80目以下,得到葛仙米細(xì)粉。4)葛仙米細(xì)粉加500倍水浸泡12小時。5)浸泡完成后,加熱至100℃,保溫提取2h,得到提取液。6)提取液使用超濾膜設(shè)備濃縮至原重量的35%,得到濃縮液。7)濃縮液中加入食用乙醇混合,使混合液的酒精度達(dá)到40%,即出現(xiàn)葛仙米多糖沉淀。8)將混合液的溫度降至4℃,保溫靜置6小時。9)離心回收沉淀,經(jīng)冷凍干燥得到葛仙米多糖干品,粉碎后既為葛仙米多糖。葛仙米干粉的制備:1)收集直徑3~6mm的葛仙米鮮品。2)將葛仙米鮮品自然晾干至水分15%,得到葛仙米干品3)將葛仙米干品使用粉碎機(jī)至240目以下,既得葛仙米干粉。桂花葉提取物制備:1)鮮桂花葉采收后,進(jìn)行微波殺青干燥,微波功率550w,殺青時間210s;2)干燥的桂花葉按重量比加入20倍水提取2次,提取溫度60℃,每次提取4h;3)合并提取液,經(jīng)離心去渣后,進(jìn)行低溫濃縮,濃縮溫度60℃,濃縮至提取液固形物含量45%,得到濃縮液;4)濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到桂花葉提取物。實施例6重復(fù)實施例4,其不同之處在于,將實施例4得到的含葛仙米多糖的組合物包裝成條包。實施例7葛仙米多糖0份,桂花葉提取物100份,既得產(chǎn)品。桂花葉提取物的制備方法同實施例4。試驗例1對小鼠胃粘膜損傷的保護(hù)試驗1.受試樣品:實施例1、實施例2、實施例3、實施例4和實施例7得到的產(chǎn)品。2.藥液配置:受試樣品均用雙蒸水配置成20mg/ml的混懸液。3.試驗動物:icr小鼠,雄性,體重18-20g,上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供,動物合格證:scxk(滬)2012-0002。4.動物分組:實驗小鼠按照excel完全隨機(jī)分組法分為7組,每組5只動物。分組如下:空白對照組;雙蒸水給藥;模型組:雙蒸水給藥;試驗組1:實施例1產(chǎn)品給藥;試驗組2:實施例2產(chǎn)品給藥;試驗組3:實施例3產(chǎn)品給藥;試驗組4:實施例4產(chǎn)品給藥;試驗組5:實施例7產(chǎn)品給藥。5.試驗方法:小鼠按應(yīng)給予藥液經(jīng)口灌胃給藥,1次/日,0.2ml/10g體重,連續(xù)7天。末次給藥前(第7天)禁食、不禁水24h。給藥后30min,除空白對照組外,其他各組動物灌胃給予無水乙醇0.15ml/只。1h后頸椎脫臼處死動物,結(jié)扎幽門,經(jīng)腺胃部向胃體內(nèi)注入1%甲醛1ml,結(jié)扎賁門,取出胃,立即放入1%甲醛固定15min后,沿胃大彎剖開,生理鹽水沖洗干凈,觀察并測定小鼠胃黏膜的損傷,計算潰瘍指數(shù)和潰瘍抑制率。潰瘍抑制率計算公式:6.試驗結(jié)果表1.各試驗組對乙醇致小鼠胃潰瘍的保護(hù)作用(n=10,)組別使用樣品潰瘍面積(mm2)潰瘍抑制率(%)空白對照組雙蒸水0.25±0.27**96.71模型組雙蒸水7.66±1.790試驗組1實施例1產(chǎn)品3.78±2.41△51.04試驗組2實施例2產(chǎn)品2.84±1.58△#62.92試驗組3實施例3產(chǎn)品3.02±2.69△#60.57試驗組4實施例4產(chǎn)品2.89±1.63△#62.27試驗組5實施例7產(chǎn)品6.83±2.2410.84注:**表示與模型組相比,p<0.01;△表示與模型組相比,p<0.01;#表示與試驗組1相比,p<0.05??瞻讓φ战M的潰瘍面積顯著低于模型組的潰瘍面積,兩組具有極顯著差異性(p<0.01),說明乙醇致小鼠胃潰瘍的模型成立。試驗組1~試驗組4(實施例1~實施例4)對保護(hù)胃黏膜都有良好的效果,與模型組相比,均具有極顯著差異(p<0.01)。試驗組2、試驗組3、試驗組4與試驗組1相比,均具有顯著差異(p<0.05),說明葛仙米多糖與桂花葉提取物搭配使用具有協(xié)同保護(hù)胃黏膜的功效,其效果顯著優(yōu)于單獨使用葛仙米多糖的效果。實施例5也達(dá)到與實施例2~4相同的實驗效果。試驗組5(實施例7)對保護(hù)胃黏膜沒有顯著效果,與模型組相比,沒有顯著差異,說明單獨使用桂花葉提取物對保護(hù)胃黏膜的效果較差。試驗例2改善便秘小鼠排便功能的試驗1.受試樣品及處理方法:試驗組1:實施例2得到的樣品;試驗組2:實施例1得到的樣品;試驗組3:實施例7得到的樣品。受試樣品均加純水配置成80mg/ml濃度的混懸液。2.試驗動物與分組:spf級昆明種小鼠100只,雄性,體重18-22g,廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,動物合格證:scxk(桂)2009-0002。將動物分成兩組,每組50只,試驗i組進(jìn)行小腸運動實驗,試驗ii組進(jìn)行排便時間、糞便粒數(shù)和糞便重量的測定。每組試驗設(shè)3個試驗組,同時設(shè)一個空白對照組和一個便秘模型對照組。3.試驗方法:3.1小腸運動試驗選雄性小鼠50只,隨機(jī)分成5組,每組10只。三個試驗組分別給予不同受試樣品的混懸液,空白對照組和便秘模型對照組予以等體積的純水,灌胃體積為0.2ml/10g體重,1次/天,連續(xù)灌胃7天。末次給受試物的當(dāng)天晚上,各組動物禁食16小時后(飲水不限),便秘模型對照組和三個試驗組給予劑量為5mg/kg體重的復(fù)方地芬諾酯溶液(0.2ml/10g體重)(復(fù)方地芬諾酯用于造成小鼠腸梗阻),空白對照組給予純水。30分鐘后,三個試驗組給予含相應(yīng)受試物的墨汁,便秘模型對照組和空白對照組給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠)。給予墨汁25分鐘后頸椎脫臼處死動物,打開腹腔分離腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線進(jìn)行測量。腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推薦長度”,按下列公式計算墨汁推進(jìn)率(p),并進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換(x)后再統(tǒng)計分析。3.2排便時間、糞便粒數(shù)和糞便重量的測定選雄性小鼠50只,動物分組和給受試物方法同上3.1節(jié)。末次給受試物的當(dāng)天晚上,各組動物禁食16小時后(飲水不限),便秘模型對照組和三個試驗組灌胃給予10mg/kg體重劑量的復(fù)方地芬諾酯(0.2ml/10g體重),空白對照組給予等量的純水。30分鐘后,模型對照組和空白對照組小鼠給予墨汁灌胃,三個試驗組給予相應(yīng)受試物的墨汁,同時開始計時。每只動物均單獨飼養(yǎng),并供給飼料和飲水,觀察記錄每只動物首次排黑便所需時間、5小時排便粒數(shù)及總重量。4.試驗結(jié)果4.1樣品對小鼠體重的影響表2.各組小鼠的體重變化注:試驗i、ii組,各劑量組小鼠的初始、末期體重及增重與空白對照組比較,差異均無顯著性(p>0.05)。從表2可見,試驗前各組小鼠的體重均衡;給予樣品7天后,各試驗組小鼠的體重與空白對照組及便秘模型對照組比較,差異均無顯著性意義,表明受試樣品對小鼠的體重增長均無影響。4.2樣品對小鼠小腸推進(jìn)運動的影響表3.各組小鼠的小腸墨汁推進(jìn)率注:表中的p值為各組的墨汁推進(jìn)率轉(zhuǎn)換值x與便秘模型對照組比較差異的p值。便秘模型對照組小鼠的墨汁推進(jìn)率顯著低于空白對照組,兩組具有極顯著差異(p<0.01),說明便秘模型成立。各試驗組小鼠的墨汁推進(jìn)率均高于便秘模型對照組,經(jīng)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后統(tǒng)計分析,試驗組1(實施例2樣品)和試驗組2(實施例1樣品)與便秘模型對照組的差異具有顯著性(p<0.05),而且試驗組1的墨汁推進(jìn)率高于試驗組2的數(shù)據(jù)。表明實施例2樣品和實施例1樣品均具有促進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)運動的作用,葛仙米多糖和桂花葉提取物配合使用的效果顯著優(yōu)于單獨使用葛仙米多糖的效果。實施例5也達(dá)到與實施例2相同的實驗效果。試驗組3(實施例7樣品)與便秘模型對照組之間無顯著性差異。表明單獨使用桂花提取物對促進(jìn)小鼠小腸的推進(jìn)運動沒有顯著作用。4.3樣品對小鼠排便的影響表4.各組小鼠的排便時間、糞便粒數(shù)及重量注:1、表中p值為各組與便秘模型對照組比較差異的p值;2、糞便粒數(shù)和糞便重量為計數(shù)5小時內(nèi)小鼠的糞便。便秘模型對照組的小鼠首便時間大于空白對照組,兩者具有極顯著差異性(p<0.01),且便秘模型對照組糞便的粒數(shù)及糞便重量均小于空白對照組,差異均具有顯著性(分別p<0.01和p<0.05),說明便秘模型成立。首便時間,試驗組1(實施例2樣品)與便秘模型對照組的差異有顯著性(p<0.05),其他試驗組與便秘模型對照組無顯著性差異;糞便粒數(shù),試驗組1(實施例2樣品)和試驗組2(實施例1樣品)與便秘模型對照組的差異有顯著性(p<0.05),試驗組3與便秘模型對照組無顯著性差異;糞便重量,各試驗組與便秘模型對照組的差異無顯著性(p>0.05)。以上結(jié)果表明,實施例2樣品(葛仙米多糖90份,桂花葉提取物10份)能夠縮短小鼠的首便時間,并增加小鼠所排糞便的粒數(shù)。實施例1樣品(葛仙米多糖100份)能夠增加小鼠排便粒數(shù)。實施例5樣品也達(dá)到與實施例2樣品相同的實驗效果。試驗例3樣品調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群的試驗1.受試樣品及處理:試驗組1:實施例2得到的樣品;試驗組2:實施例1得到的樣品;試驗組3:實施例7得到的樣品。受試樣品均加純水配置成80mg/ml濃度的混懸液。2.試驗動物與分組:icr小鼠,雄性,體重18-20g,上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供,動物合格證:scxk(滬)2012-0002。設(shè)三個試驗組和一個空白對照組,每組10只動物。3.試驗方法選雄性小鼠40只,隨機(jī)分成4組,每組10只。三個試驗組分別給予不同受試樣品的混懸液,空白對照組予以等體積的純水,灌胃體積為0.2ml/10g體重,1次/天,連續(xù)灌胃14天。在給予受試樣品之前和最后一次給予受試樣品后24h之內(nèi),分別無菌采集小鼠糞便0.1g,加入無菌稀釋液,10倍系列稀釋,再選擇合適的稀釋度,分別接種在各培養(yǎng)基上,按要求進(jìn)行培養(yǎng)。對小鼠體重,雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。4.試驗結(jié)果4.1樣品對小鼠體重的影響表5.各組小鼠的體重變化注:各組小鼠的初始、末期體重及增重與空白對照組比較,差異均無顯著性(p>0.05)。從表5可見,試驗前各組小鼠的體重均衡;連續(xù)給予樣品14天后,各試驗組小鼠的體重與空白對照組比較,差異均無顯著性意義,表明受試樣品對小鼠的體重增長均無影響。4.2樣品對小鼠腸道菌群的影響表6.各組小鼠腸道菌群的變化(logcfu/g,n=10)注:p1為實驗前與空白對照組比較,p2為實驗后與空白對照組比較,p3為自身前后比較。由表6可知,無論是實驗前后實驗后與空白對照組比較,或是實驗前后自身比較,各試驗組腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量均無顯著性差異(p>0.05);試驗組1(實施例2樣品)的雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量在實驗前后自身比較明顯增加,差異有顯著性(p<0.05),并且實驗后與空白組比較明顯增加,差異有顯著性(p<0.05)。試驗組2(實施例1樣品)的雙歧桿菌數(shù)量在實驗前后自身比較明顯增加,差異有顯著性(p<0.05),并且實驗后與空白組比較明顯增加,差異有顯著性(p<0.05)。依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范-2003》中調(diào)節(jié)腸道菌群功能判定方法可知,實施例1樣品和實施例2樣品均具有調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群的功能。實施例5樣品也達(dá)到與實施例2樣品相同的實驗效果。該實驗表明:葛仙米多糖和桂花葉提取物的組合物(實施例2樣品)可以同時增加小鼠腸道中雙歧桿菌和乳桿菌的數(shù)量;而單獨使用葛仙米多糖(實施例1樣品)只增加了小鼠腸道中雙歧桿菌的數(shù)量;單獨使用桂花葉提取物對調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群沒有效果。本發(fā)明的保護(hù)內(nèi)容不局限于以上實施例。在不背離發(fā)明構(gòu)思的精神和范圍下,本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠想到的變化和優(yōu)點都被包括在本發(fā)明中,并且以所附的權(quán)利要求書為保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁12
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