專利名稱：二羥基蒽醌類及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及二羥基蒽醌衍生物及其在治療疾病中的用途。
背景技術(shù)：
已知T淋巴細胞在很多炎性疾病和自身免疫病的發(fā)病機理中發(fā)揮著核 心作用?？乖蔬f細胞對T細胞的活化是啟動所述炎性過程的最初事件， 其隨后導(dǎo)致其它炎性細胞的活化并進而釋放促炎癥細胞因子、趨化劑和基 質(zhì)降解酶。還已知這些細胞類型對于通過分泌VEGF來啟動和維持血管生 成是必需的。血管生成驅(qū)動的疾病包括但不限于癌癥、年齡相關(guān)的黃斑變 性和糖尿病性視網(wǎng)膜病。
多發(fā)性硬化是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的慢性脫髓鞘炎性疾病。T細胞增殖導(dǎo)致 促炎性細胞因子(主要是IL-2和IFN-y)的釋放以及白細胞(包括巨噬細 胞)的聚集，所述白細胞配合所述炎癥反應(yīng)。
在慢性阻塞性肺病(COPD)中，增殖性CD8+ T細胞對中性粒細胞和巨 噬細胞的活化導(dǎo)致促炎性細胞因子和彈性蛋白降解酶(比如中性粒細胞彈 性蛋白酶(HNE)和金屬彈性蛋白酶(MMP-12))的釋放，這導(dǎo)致肺組織的慢 性和進行性降解并最終降低呼吸功能。
克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎是腸的慢性炎性疾病，其統(tǒng)稱為炎性腸病 (IBD)?？赡苓@兩種疾病實際上是具有不同病因而具有相似的持續(xù)刺激和共 同的組織損傷途徑的異質(zhì)群。T細胞對于此類疾病的選艮同樣也a^核心 作用的，其導(dǎo)致免疫細胞、間充質(zhì)細胞和上皮細胞的活化、循環(huán)中效應(yīng)細 胞的聚集以及最終導(dǎo)致胃腸道組織損傷。
在銀屑病中，郎格罕氏細胞將抗原呈遞給€04+ T細胞，導(dǎo)致刺激角
粘附分子。角質(zhì)形成細胞進而被刺激以產(chǎn)生其自身的細胞因子，所述細胞 因子可以以自分泌和/或旁分泌的方式作用而維持iil屑病過程。
對于在^f艮多其它炎性疾病中存在T細胞核心參與也有同樣有力的解 釋，所述炎性疾病包括系統(tǒng)性紅斑狼瘙(SLE)、狼癡腎炎、腎小球腎炎、IgA 腎病、牙周病、特應(yīng)性皮炎、硬皮病、移植物抗宿主病、禿癥(allopeicia )、干燥綜合征(Sjogren's syndrome)、多肌炎、天皰掩(pempligus)、葡萄 膜炎(uvdtitis)和阿狄森病。因此，非常需要T細胞增殖抑制劑，并且 其可用于治療以上詳細描述的炎性疾病和自身免疫病的范圍。
大黃酸(l，8-二羥基蒽醌-3-羧酸)是已充分研究的抗炎劑，其在一系列炎 性疾病中具有公認的用途。雖然還未證實該藥劑抑制T細胞增殖，但已知 其抑制人骨關(guān)節(jié)炎滑膜和軟骨細胞中促炎性細胞因子(IL-ip和TNFa)的產(chǎn) 生(Martel國Pelletier ef a/, Jo畫fl/ 。/i /ie謂a油w， 1998, 25 (4), 753-762), 并在狼瘡腎炎模型中抑制細胞因子基因表達(Lemay " fl/, Kidney International, 1996,50(1), 85-93)。與四環(huán)素類一樣，大黃酸及其前藥雙醋 瑞因已顯示出下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶原(pro-matrix metalloprotdnase， pro-MMP) (pro-MMP -1、 -3、 -9和-13)的產(chǎn)生而上調(diào)由兔關(guān)節(jié)軟骨細胞 產(chǎn)生金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP-l)(Tamura et al， OW w幼n他朋</ CViWi7^， 2001， 9 (3), 257-263)。
US4346103公開了大黃酸在關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化中的用途。其在糖尿 病性腎病中的用途公開于EP0990441中。在這些疾病中，特別涉及了 IL-1 P的過度產(chǎn)生。大黃酸的更多廣泛用途在某種程度上已經(jīng)被其相當差的物 理化學性質(zhì)所限制。充分研究的前藥雙醋瑞因仍未完全解決此問題，其在 臨床環(huán)境下的用途再次受到差的物理化學性質(zhì)的限制(P. Nicolas a/w. /^畫fl認"C, 1998， 35 (5)， 347-359)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及大黃酸簡單衍生物能在大黃酸自身及其它簡單衍生物不能 產(chǎn)生響應(yīng)的檢測中抑制細胞因子產(chǎn)生和T細胞增殖的觀察結(jié)果。由于這些 藥劑相對于其母體化合物有改善的物理性質(zhì)，因而它們可能在上述炎性疾 病和自身免疫病的廣泛范圍內(nèi)具有臨床用途。
根據(jù)本發(fā)明，新型化合物是式(1)化合物或其鹽，<formula>formula see original document page 6</formula>
其中X是H或-OCR" Y是H或-OCR2，前提是X和Y不都是H;和R是CH20R9、 CONRuR12、 CN、四唑或COOR17;其中
Ri和R2獨立地選自被R3取代的d-4烷基、和4至7元環(huán)狀基團，所 述環(huán)狀基團任選地被選自CF3、 OR4、 NR5R6、 S(0)q.2R7、任選地被113取 代的Cw烷基、以及g素的基團所取代，所述環(huán)狀基團還任選地包^i^自 O、 S(0)。-2和NR9的一個或更多個雜原子；
R3是CF3、 OR4、 NRsR6或S(O)02R7;或者
Rt、 Rs和R6獨立地是任選地被R3取代的C^烷基，或者NRsR6是包 含選自O(shè)、 NR9和S(0)o-2的一個或更多個另外雜原子的C4-6雜環(huán)烷基環(huán)；
R7是d-4烷基；
R9是H或Cw烷基；
Ru和Ru獨立地選自H、 OH、任選地被R^取代的Cw烷基、任選 地被Rw取代的(:3-6環(huán)烷基、以及任選地被Rw取代的<:4_6雜環(huán)烷基；或者 NRnRu是任選地被Rw取代的以及任選地包^^自O(shè)、 S(0)。-2和NR^的 一個或更多個雜原子的4至7元環(huán)狀基團；
Ru是任選地被R"取代的芳基、任選地被R"取代的雜芳基、任選地 被Rm取代的(:3_6環(huán)烷基、或任選地被Rw取代的Q-6雜環(huán)烷基；
R"是OR9、 C02R9或N(R9)2，其中各個R9如上所定義，或者N(R9)2 ^!任選地包含選自O(shè)、 S(0)Q-2和NR15的一個或更多個另外雜原子的4至7 元環(huán)狀基團；或者N(R9)2是5或6元環(huán)狀基團，如下式的內(nèi)酰胺、琥珀酰 亞胺或乙內(nèi)酰脲
Rm是R9或COR^; Rw是d-4烷基、芳基或雜芳基；和
Rn是任選地被Ru取代的d-4烷基、任選地被Ri4取代的(:3_6環(huán)烷基、
7或任選地被R14取代的C4.6雜環(huán)烷基。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，式(l)化合物用于制備用于治療與T細胞 增殖有關(guān)的病癥或由促炎性細胞因子(特別是IL-ip或IL-18)介導(dǎo)的 病癥的藥物。
因此，有效量的式(l)化合物可用于有此需要的患者中治療這些病癥 的方法中。
優(yōu)選實施方案的說明
應(yīng)當理解，本發(fā)明的化合物可包含一個或更多個不對稱的取代碳原 子。在式(l)化合物中存在一個或更多個這些不對稱中心會產(chǎn)生立體異構(gòu) 體，并且在每種情況下，本發(fā)明都應(yīng)理解為擴展至所有這些立體異構(gòu)體， 包括對映體和非對映體，以及混合物包括其外消旋混合物。
術(shù)語"d-4烷基，，指具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基結(jié)構(gòu)，包 括例如曱基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基等。
術(shù)語"C^雜環(huán)烷基"指具有3至6個碳原子和一個或更多個選自N、 O 和S的雜原子的飽和雜環(huán)結(jié)構(gòu)，并且包括例如氮雜環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基 (oxetidinyl)、吡咯烷基、四氳吹喃基、艱梵基、四氫吡喃基等。
術(shù)語"4至7元環(huán)狀基團"指具有4至7個環(huán)原子的飽和或不飽和碳 環(huán)或雜環(huán)結(jié)構(gòu)，其可包含一個或更多個雜原子(如上定義的)。
"芳基"和"雜芳基"應(yīng)作相似的解釋。每個可具有一個或兩個稠 合的環(huán),并可包含多達10個環(huán)原子。實例包括苯基、萘基、呋喃基、 p比咬基和蓉哈基(thiophenyl )。
術(shù)語"鹵素，，意為氟、氯、溴或碘。
可以以容易切除的酯形式將羧基保護，比如甲酯、乙酯、千酯或叔 丁酯。
本發(fā)明化合物可處于水合物或溶劑化物的形式。
式(l)化合物的鹽包括藥學可接受鹽，例如源自充機酸或有機酸的酸 加成鹽，比如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、對甲苯磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、高氯酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸 鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽和苯甲酸鹽。
也可與堿形成鹽。這樣的鹽包括源自無機堿或有機堿的鹽，例如堿 金屬鹽比如鎂鹽或鉀鹽，和有機胺鹽比如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺 的鹽。
可通過本領(lǐng)域已知的任何合適方法和/或以下所述的方法制備式(1)
化合物。應(yīng)當理解，在需要式(l)化合物的特定立體異構(gòu)體的情況下，可 以與合適的純手性起始原料一起使用本文所述的合成方法和/或可使用
常規(guī)分離技術(shù)(例如HPLC)從混合物中拆分異構(gòu)體。
還應(yīng)當理解，存在于以下描述的各化合物中并且期望保留的官能團 (比如氨基、羥基或羧基)在開始任何反應(yīng)之前可能需要處于保護形式。 在這些情況下，除去所述保護基可能是特定反應(yīng)中的最后步驟。這些官 能團的合適保護基對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見的。具體詳情 請參見"Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience， T W Greene, PGM Wuts 。
制備通式(l)化合物(其中X是-OCRh Y是-OCR2)的方法包括在堿 存在下轉(zhuǎn)化所述活化酯(比如將雙醋瑞因轉(zhuǎn)化為大黃酸)，然后與所需的 活化酸比如酰氯或酸酐反應(yīng)。所述羧酸可被還原以得到醇，所述羥基可 進一步被取代，或者可通過使所述羧酸或酰氯與合適的胺或醇或烷基卣 化物分別反應(yīng)而形成期望的酰胺和酯。雙醋瑞因和相應(yīng)的活化酸可商業(yè)到。
為制備式(l)化合物(其中X或Y是H)，所述方法將與上述方法相 似，但必需有在與所述活化酸反應(yīng)之前選擇性保護一個羥基的額外步驟， 并且其后將不得不進行去保護步驟以得到目標化合物。
可以基于所述組分的物理化學差異，通過已知方式，將所得到的終 產(chǎn)物或中間體的任意混合物分離成純的終產(chǎn)物或中間體，例如通過色鐠 法、蒸餾、分步結(jié)晶、或如果合適或者可能則在所述條件下形成鹽。
本發(fā)明的式(l)化合物顯示了對T細胞增殖的體外抑制活性。本發(fā)明 化合物還顯示了對促炎性細胞因子釋放的體外抑制作用?？赏ㄟ^使用合適的細胞分析(例如如以下所描述的)測定所述化合物的活性。
本發(fā)明還涉及如前所述治療患有由T細胞增殖引起的病癥或疾病的 患者(包括人和/或乳品、肉或皮毛工業(yè)或作為寵物飼養(yǎng)的的哺乳動物) 的方法，更特別地，涉及施用式(l)的T細胞增殖抑制劑作為活性成分 的治療方法。
因此，式(l)化合物還可用于治療骨關(guān)節(jié)炎和類風濕性關(guān)節(jié)炎、4艮屑 病、系統(tǒng)紅斑狼瘡(SLE)、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺病(COPD)和炎性 腸病(包括潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病)、癌癥、糖尿病性腎病以及與年 齡相關(guān)的黃斑變性。
如上所述，由于式(l)化合物是有活性的T細胞增殖抑制劑，因此其 可用于人用藥或獸藥。相應(yīng)地在另一方面，本發(fā)明涉及哺乳動物尤其是 人中由T細胞介導(dǎo)的疾病或病癥的處理方法(其意為治療或預(yù)防)，所 述方法包括給所述哺乳動物施用有效量的上述式(l)化合物或其藥學可 接受鹽；用于人用藥或獸藥的式(l)化合物，尤其是用于處理(其意為治 療或預(yù)防)由T細胞介導(dǎo)的疾病或病癥；以及式(l)化合物在制備用于 處理(其意為治療或預(yù)防)由T細胞介導(dǎo)的疾病或病癥的藥劑中的用途。
上述疾病或病癥包括炎性疾病和自身免疫病比如類風濕性關(guān)節(jié)炎、 骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化、牙周 炎、齦炎、移植物抗宿主反應(yīng)、銀屑病、硬皮病、殼癥、干燥綜合征、 多肌炎、天皰瘡(pempligus )、葡萄膜炎、阿狄森病、特應(yīng)性皮炎、哞 喘、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、腎病和慢性阻塞性肺病(COPD)、癌癥、糖 尿病性視網(wǎng)膜病以及與年齡相關(guān)的黃斑變性。
對于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化和由T細胞過度活性所導(dǎo)致 的其它疾病和適應(yīng)癥(比如上述強調(diào)的那些)而言，可以通過口服、局 部、胃腸外、通過吸入或鼻噴霧或直腸以含有無毒的藥物可接受載體、 佐劑和賦形劑的劑量單位制劑來施用式(l)化合物。本文中使用的術(shù)語胃 腸外包括皮下注射、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)(intrasternal)注射或輸 注技術(shù)。除了治療溫血動物比如小鼠、大鼠、馬、牛、綿羊、狗、貓等 以外，本發(fā)明化合物在人的治療中也是有效的。
包含所述活性成分的藥物組合物可處于適于口服施用的形式，例如 作為片劑、錠劑、糖錠、含水混懸液或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液劑、硬膠嚢或軟膠嚢、或糖漿或酏劑?？砂凑账幬锝M合物制備領(lǐng)域 已知的任何方法制備旨在用于口服施用的組合物，并且這些組合物可包 含選自甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑的一種或多種試劑，以便提供 藥學上更好且可口的制劑。片劑含有與無毒的適于制備片劑的藥學可接 受賦形劑相混合的活性成分。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，比如
碳酸鉤、碳酸鈉、乳糖、磷酸釣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，例如玉米 淀粉、或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠，以及潤滑劑，例 如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。所述片劑可以是未包衣的或者可通過已知 技術(shù)將其包衣以延緩崩解和在胃腸道內(nèi)的吸收并因此提供長時間的持 續(xù)作用。例如，可使用時間延遲材料比如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘 油酯。也可通過描述于US4256108、 US4166452和US4265874中的技術(shù) 將其包衣，以形成用于控制釋放的滲透性治療片。
用于口服施用的制劑也可作為硬明膠膠嚢而提供，其中所述活性成 分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鉤或高嶺土)混合，或作為軟 明膠膠嚢而提供，其中所述活性成分與水或油介質(zhì)(例如花生油、液體 石蠟或橄欖油)混合。
含水混懸液包含與適于制備含水混懸液的賦形劑相混合的活性物 質(zhì)。這些賦形劑是助懸劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基 甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯垸酮、黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或 潤濕劑比如天然磷脂，例如卵磷脂，或環(huán)氧烷烴與脂肪酸的縮合產(chǎn)物， 例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物，例如十 七亞乙氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol )，或環(huán)氧乙烷與源于 脂肪酸和己糖醇的偏酯(partial ester)的縮合產(chǎn)物，比如聚氧乙烯與源 于脂肪酸和失水己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯失水山梨醇單 油酸酯。所述含水混懸液還可包含一種或多種防腐劑，例如對羥基苯甲 酸乙酯或?qū)αu基苯曱酸正丙酯， 一種或多種著色劑，一種或多種調(diào)味劑， 以及一種或多種甜味劑，比如蔗糖或糖精。
可通過將所述活性成分懸于植物油中，所述植物油例如花生油、橄 欖油、芝麻油或椰子油，或懸于礦物油比如液體石蠟中而配制油混懸液。 所述油混懸液可包含增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？商砑犹鹞?劑(比如以上所提出的那些)和調(diào)味劑以提供適口的口服制劑。可通過 添加抗氧化劑比如抗壞血酸保存這些組合物。
ii適于通過添加水而制備含水混懸液的可分散粉末和顆粒提供了與分 散劑或潤濕劑、助懸劑和一種或多種防腐劑相混合的活性成分。舉例說 明了合適的分散劑或潤濕劑和助懸劑，例如也可存在甜味劑、調(diào)味劑和 著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物也可處于水包油乳液劑的形式。所述油相可以 是植物油，例如橄欖油或花生油，或礦物油，例如液體石蠟或這些油的 混合物。合適的乳化劑可以是天然膠，例如阿拉伯膠或黃蓍膠、天然磷 脂，例如大豆卵磷脂、和源于脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯，例如單 油酸失水山梨醇酯，以及所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙 烯失水山梨醇單油酸酯。所述乳液劑也可包含甜味劑和調(diào)味劑。
糖漿和酏劑可用甜朱劑配制，所述餘朱劑例如甘油、丙二醇、山梨醇 或蔗糖。這些制劑也可包^^緩和劑、防腐劑和調(diào)^^未劑和著色劑。所述藥物 組合物可處于無菌可注射水混懸液或油混懸液的形式?？砂凑找阎夹g(shù)使 用那些前面已提及的合適的*劑或潤濕劑和助懸劑配制此混懸液。所述 無菌可注射制劑也可以是在無毒的胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無
菌可注射溶液或混懸液，例如作為在1,3-丁二醇中的溶液?？?吏用的可接 受的載體和溶劑包括水、g氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，常規(guī)使用 無菌不揮發(fā)油作為溶劑或混懸介質(zhì)。為此目的，可使用包括合成的單甘油 酯或二甘油酯的任何溫和的不揮發(fā)油。此外，脂肪酸比如油酸用也可于可 注射制劑中。
式(l)化合物還可以以用于直腸施用藥物的栓劑形式施用?？赏ㄟ^將藥 物與合適的非刺激性賦形劑混合而制備這些組合物，所述賦形劑在常溫下 是固體而在直腸溫度下是液體并因此在直腸中熔化而釋放出所述藥物。這 樣的材料比如是可可脂和聚乙二醇。
對于局部使用而言，可使用含有式(l)化合物的乳骨、軟骨、凝膠劑、 溶液或混懸液。為此應(yīng)用目的，局部應(yīng)用包括漱口劑和含漱劑。
約0.05 mg到約140 mg每千克體重每天級別的劑量水平可用于治療以 上適應(yīng)病癥(約2.5 mg到約7 g每患者每天)。例如，通過施用每千克體 重每天約0.01到50 mg的所述化合物(約0.5 mg到約3.5 g每患者每天) 可有效治療炎癥。
可與載體物質(zhì)組合以產(chǎn)生單個劑型的活性成分的量可以才艮據(jù)治療宿主和特定施用方式而變化。例如，旨在用于人口月Mfe用的制劑可占所述總組 合物的約5%至約95%。劑量單位形式通常^^有約1 mg到約500 mg的活 性成分。
然而，應(yīng)當理解，對于任何特定患者的具體劑量水平將取決于多種因 素，其包括所用具體化合物的活性、年齡、體重、 一般健康狀況、性別、 飲食、施用時間、施用途徑、代謝速率、藥物聯(lián)用以及所治療特定疾病的 嚴重程度。
以下實施例舉例說明本發(fā)明。實施例l、 2和4的起始原料(4,5-二四氫 吡喃基酰氧基-9,10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸)按照WO2005/085170中 所描述的進行制備。
1， 8-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基"3-(嗎啉-4-羰基)-9， 10-二氧代-9, 10-二 氫蒽
在配有磁力攪拌器的100 ml燒瓶中，將4,5-二四氫吡喃基酰|1^-9，10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸(2.00 g， 3.9x10-3 mol)在DCM (50 mL)中于氮氣 下攪拌。加入EDCI (0.90 g, 4.7x103 mol)和HOBt (0.65 g, 4.7x103 mol)并 攪拌溶液15分鐘。將固體懸液溶于DCM溶劑中。然后加入嗎啉(0.54mL， 5.9xl03mol)并攪拌溶液30分鐘。
將反應(yīng)混合物稀釋于300 mL DCM中。以200 mL飽和NaHC03溶液、 和200 mL飽和NaCl溶液洗滌有機層。分離有機層并在減壓下蒸發(fā)至干。 然后將所得殘留物在水中研磨，過濾，并于高真空下干燥，得到期望的黃 色固體的產(chǎn)物(1.95g， 87 % )。
實施例11H NMR (500MHz, DMSO) S= 8.1 (d, 1H, Ar), 8.0 (s， 1H, Ar)' 7.9 (t, 1H, Ar), 7.7 (s, 1H， Ar)' 7.6 (d, 1H' Ar), 3.9 .(d, 4H, THP基),3.6 (寬峰4H， 嗎啉)，3.5(覺峰，2H,嗎啉)，3.4 (t， 4H， 丁HP基)，3.0 (m， 2H, 嗎啉)，2,5 (s, 2H, THP基),2.0 (d， 4H, THP基)，1.8 (q, 4H: THP 基). 實施例2
1,8-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基)-3-乙基氨甲?；?9， 10-二氧代-9， 10-二 氫蒽
在配有磁力攪拌器的100 ml燒瓶中，將4,5-二四氫吡喃基酰|1^-9,10-二氧代-9，10-二氫蒽-2-羧酸(2.00 g， 3.9xl0-3摩爾)在DCM (50 mL)中于氮氣 下攪拌。加入EDCI (0.90 g， 4.7x103 mol)和HOBt (0.65 g， 4.7x103 mol)并 攪拌溶液15分鐘。將固體懸液溶于DCM溶劑中。然后加入乙胺(3.00mL， 5.9xl(T3 mol)并攪拌溶液15分鐘。
然后將反應(yīng)混合物稀釋于300 mL DCM中。以200 mL飽和NaHC03 溶液、和200mL飽和NaCl溶液洗滌有機層。分離有機層并在減壓下蒸發(fā) 至干。然后將所得殘留物在水中研磨，過濾，并于高真空下干燥，得到期 望的黃色固體的產(chǎn)物(1.56g，75%)。
iHNMR (500MHz， DMSO)與結(jié)構(gòu)一致。
3=9.0 (s' 1H, N-H), 8.5 (t, 1H, Ar), 8.1 (d， 1H, Ar)' 8.0 (s, 1H, Ar)， 7.9 (t， 1H， Ar), 7.6 (d' 1 H' Ar), 3.9 (d, 4H, THP基)'3.4 (t， 4H, THP基)，2.9 (q, 2H, CH2), 2.5 (s, 2H， THP基),2.0 (d; 4H, THP基)，1,8 (q, 4H, THP基)， 1.2(t, 3H, CJH3).
實施例34， 5-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基)-9,10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸2-甲 氧基乙基酯
在氮氣下，向配有磁力攪拌器、Dean-Stark設(shè)備的250 mL燒瓶中加 入2-曱氧基乙醇(300 mL)和4，5-二羥基-9,10-二氧代蒽-2-羧酸(3.00 g, 10.6xl0-3mol)以及0.1 mL硫酸。將混合物回流24小時(外部油浴溫度 1450。然后使所述反應(yīng)混合物冷卻至室溫。
將所得固體過濾并以10mL冰冷乙醚洗滌。分離出黃色固體的4,5-二羥基-9,10-二氧代蒽-2-羧酸2-甲氧基乙基酯(2.9g， 81%)。
^NMR分析與所期望產(chǎn)物一致，(500MHz， DMSO )
5=8.1 (s, 1H, Ar)' 7.8 (t, 1H， Ar)， 7.7 (s' 1H, Ar)， 7.7 (d, 1H, Ar)' 7.4 (d， 1H, Ar)， 4.4 (t, 2H, COO,, 3.7 (t, 2H' C WCH3), 3.3 (S, 3H, CH2OCW3).'
在氮氣下，向配有磁力攪拌器、回流冷凝器、壓力均衡滴液漏斗的 250 mL燒瓶中加入4,5-二羥基-9,10-二氧代蒽-2-羧酸2-甲氧基乙基酯(2.70 g，7.88xl0-s摩爾)，然后加入吡啶(85 mL )。當所有起始原料都已溶解時， 滴加四氫吡喃-4-甲酰氯(4.53 g， 31.52xl0-s摩爾)并在室溫下攪拌溶液48小 時。TLC分析(80:20 (DCM:MeOH))表明沒有起始原料存在。
加入水(250 mL)并以乙酸乙酯(4x400 mL )萃取。合并有機層，以 水(2x300 mL)和飽和NaCl溶液(2x300 mL )洗滌。以無水MgS04干 燥有機層，過濾，并在減壓下蒸發(fā)至干。然后將所得固體在Et20中研磨， 過濾，并在減壓下干燥以得到黃色固體的4,5-雙(四氫吡喃-4-羰基氧 基)-9,10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸2-曱緣乙基酯(3.17g, 71%)。
iHNMR分析與結(jié)構(gòu)一致，(500MHz， DMSO)
158=8.8 (s, 1H' Ar), 8.2 (d' 1H, Ar)， 8,0 (s， 1H' Ar), 7.7 (t, 1H, Ar)' 7.3 (d, 1H， Ar)' 4.5 (t， 2H， COOCffe), 4.0 (t' 4H, THP基 )，3,7 (t， 2H, CW_gOCH3), 3.5 (m, 4H' THP基 )，3.4 (s, 3H, C' 2.9 (m， 2H' THP基 )'2.1 (m, 4H, THP基)'2.0 (m, 4H, THP基).
實施例4
4, 5-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基)-9,10-二氧代-9， 10-二氫蒽-2-羧酸乙酯
將4,5-二四氫吡喃基^氧基-9，10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸(5 g, 9.8mmo1)溶于DMF (200 ml)中并在室溫下加入氫化鈉(432mg, 10.8 mmol)。在室溫下將所得黃色沉淀攪拌30分鐘，然后加入碘乙烷(0.94 mL, 11.8 mmol)。將混合物在50"C攪拌48小時并傾倒于水(300 ml) 中。以乙酸乙酯(3x200 ml)萃取水相，將有機層干燥(MgS04)并蒸發(fā) 至干以得到棕色固體。將其用乙醚(40 ml)研磨以得到橙色固體(2.4 g, 45% )。
1H NMR (400 MHz, DMSO): 1.38 (3H, t J=7.2 Hz)， 1.76-1.89 (4H, m)' 2,00-
2.04 (4H' m)' 2.95-2,99 (2H, m), 3.45 (4H, t J-11.2 Hz)， 3.94-3.96 (4H， m),
4.42 (2H, q J=7,2 Hz), 7.65 (1H, dd J=8.4, 1.2 Hz), 7.96 (1H' t J-8.4 Hz), 8.08 (1H， d Hz), 8.15 (1H' dd J=8.4， 1,2 Hz), 8.54 (1H, d J-2 Hz). 13C NMR
(100 MHz, DMSO): 14.62' 28.75, 28.82， 62.58' 66.71, 125.38,125.70, 126,02，
128.91， 130,73, 131.35, 134.66， 135.22， 135.72, 136.06， 150.11， 150.39，
164.11,172.69, 17275, 180.71， 181.29; LC-MS: 537 (M + H+).
以下化合物通過類似方式得到。 實施例5
4a,9，9a,10-四氫-4，5-雙(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)-9,10-二氧 代蒽-2-腈
實施例6
4a,9,9a,10-四氫-4,5-雙(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)-9,10-二氧代蒽-2-(lH-四唑-5-基) LPS小鼠試驗
給7周齡的Balb C ByJ小鼠(24-28 g)通過口服(IO ml/kg)施用載體或測 試物。30分鐘后，以^M內(nèi)注射1 mg/kg LPS ^LiL這些動物。在LPS激 發(fā)后2小時，在輕度異氟烷麻醉下通過眼眶后穿刺(retro-orbital puncture) 將血樣采集到標準試管中。使樣品在室溫下凝結(jié)，然后在4°C下于6000g 離心3分鐘。將血清儲存于-20。C直到使用。通過ELISA技術(shù)一式兩份分 析血清TNFa和IL-10 7JC平。
30 mg/kg的實施例1化合物對LPS誘導(dǎo)的小鼠中TNFa分泌產(chǎn)生 了作用，而3、 10和30 mg/kg則降低了同樣LPS刺激下的IL-ip水平。 這證實了對天然^JL免疫系統(tǒng)的多細胞因子作用，其主要通itxtlL-ip的 作用。
10 mg/kg的實施例2化合物抑制LPS誘導(dǎo)的TNFa分泌。這證實了對 天然^JC免疫系統(tǒng)的TNFa作用。
30 mg/kg劑量的實施例3化合物對LPS誘導(dǎo)的TNFa分泌產(chǎn)生了作 用。這證實了對天然激發(fā)免疫系統(tǒng)的TNFa效應(yīng)分子。
角叉菜膠足爪試驗
將禁食(18小時)的雄性Wistar大鼠(105-130 g)稱重，通過將右后爪 浸沒于汞中到脛跗關(guān)節(jié)，讀取該爪在汞器官充滿度測量器 (plethysmometer)上的基礎(chǔ)性讀數(shù)。隨后，通過經(jīng)口強飼法(10 ml/kg) 施用載體、參比物和測試物。處理后30分鐘，將在0.9。/。鹽水中的0.1 ml 的2。/。角叉菜膠注射進所述右后爪的足跖下區(qū)域。在施用角叉菜膠后1、 2、 3、 4和5小時，再次^f吏用所述器官充滿度測量器測量所述右爪。
在足跖內(nèi)角叉菜膠誘導(dǎo)的足爪水腫炎癥模型中，實施例1和4的化合 物(0.3至30 mg/kg)產(chǎn)生了劑量依賴性效應(yīng)。這證實了在LPS小鼠試驗 中觀察到的細胞因子調(diào)節(jié)作用轉(zhuǎn)化為功能性的抗炎活性。
權(quán)利要求
1.式(1)化合物或其鹽其中X是H或-OCR1，Y是H或-OCR2，前提是X和Y不都是H；和R是CH2OR9、CONR11R12、CN、四唑或COOR17；其中R1和R2獨立地選自被R3取代的C1-4烷基、和4至7元環(huán)狀基團，所述環(huán)狀基團任選地被選自CF3、OR4、NR5R6、S(O)0-2R7、任選地被R3取代的C1-4烷基、以及鹵素的基團所取代，所述環(huán)狀基團還任選地包含選自O(shè)、S(O)0-2和NR9的一個或更多個雜原子；R3是CF3、OR4、NR5R6或S(O)0-2R7；或者R4、R5和R6獨立地是任選地被R3取代的C1-4烷基，或者NR5R6是包含選自O(shè)、NR9和S(O)0-2的一個或更多個另外雜原子的C4-6雜環(huán)烷基環(huán)；R7是C1-4烷基；R9是H或C1-4烷基；R11和R12獨立地選自H、OH、任選地被R13取代的C1-4烷基、任選地被R14取代的C3-6環(huán)烷基、以及任選地被R14取代的C4-6雜環(huán)烷基；或者NR11R12是任選地被R14取代的以及任選地包含選自O(shè)、S(O)0-2和NR15的一個或更多個雜原子的4至7元環(huán)狀基團；R13是任選地被R14取代的芳基、任選地被R14取代的雜芳基、任選地被R14取代的C3-6環(huán)烷基、或任選地被R14取代的C4-6雜環(huán)烷基；R14是OR9、CO2R9或N(R9)2，其中各個R9如上所定義，或者N(R9)2是任選地包含選自O(shè)、S(O)0-2和NR15的一個或更多個另外雜原子的4至7元環(huán)狀基團；或者N(R9)2是5或6元環(huán)狀基團，如下式的內(nèi)酰胺、琥珀酰亞胺或乙內(nèi)酰脲R15是R9或COR16；R16是C1-4烷基、芳基或雜芳基；和R17是任選地被R13取代的C1-4烷基、任選地被R14取代的C3-6環(huán)烷基、或任選地被R14取代的C4-6雜環(huán)烷基。
2. 權(quán)利要求l的化合物，其中X是-OCR" Y是-OCR2。
3. 權(quán)利要求l的化合物，其中X是-OCR" Y是H。
4. 權(quán)利要求l的化合物，其中X是H, Y是-OCR2。
5. 權(quán)利要求2的化合物，其中&和R2各自是4-四氫吡喃基。
6. 權(quán)利要求l的化合物，其為1，8-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基)-3-(嗎啉-4-羰基)-9,10-二氧代-9，10-二氫蒽，1，8-雙(四氫吡喃-4-羰基氧基)-3-乙基氨甲酰基-9，10-二氧代-9,10-二氫蒽，4，5-雙(四氫吡喃-4-g氧基)-9，10-二氧代-9，10-二氫蒽-2-羧酸2-甲氧 基乙基酯，4,5-雙(四氫吡喃-4-il^lL^)-9,10-二氧代-9,10-二氫蒽-2-羧酸乙酯， 4a,9，9a,10-四氫-4,5-雙(2-(四氫-2iJ-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)-9,10-二氧 代蒽-2-腈，或4a,9,9a,10-四氫-4,5-雙(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-2-氧代乙基)-9,10-二氧代蒽-2-(lH-四哇-5-基)。
7. 根據(jù)前述任一項權(quán)利要求的化合物，其用于治療。
8. —種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的化合物和藥學可接受的稀釋劑或載體。
9. 權(quán)利要求1至6中任一項的化合物在制備用于治療與T細胞增殖有 關(guān)的病癥或由促炎性細胞因子特別是IL-ip或IL-18介導(dǎo)的病癥的藥物中 的用途。
10. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是慢性退行性疾病比如類風濕 性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏;f^癥。
11. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是慢性脫髓鞘疾病比如多發(fā)性 硬化。
12. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是呼吸疾病比如哞喘或慢性阻 塞性肺病(COPD)。
13. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是炎性腸病(IBD)比如潰瘍性結(jié) 腸炎或克羅恩病。
14. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是皮膚病癥比如4艮屑病、硬皮 病或特應(yīng)性皮炎。
15. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是牙病比如牙周病或齦炎。
16. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是糖尿病性腎病、狼疾腎炎、 IgA腎病或腎小球腎炎。
17. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是系統(tǒng)性紅斑狼疾(SLE)。
18. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是移植物抗宿主病。
19. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥的特征在于血管生成。
20. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是癌癥。
21. 權(quán)利要求9的用途，其中所述病癥是糖尿病性視網(wǎng)膜病或年齡相 關(guān)的黃斑變性。
全文摘要
式(1)化合物或其鹽具有治療用途，其中X是H或-OCR₁，Y是H或-OCR₂，前提是X和Y不都是H；R是CH₂OR₉、CONR₁₁R₁₂、CN、四唑或COOR₁₇。
文檔編號A61P19/00GK101296916SQ200680033058
公開日2008年10月29日 申請日期2006年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月10日
發(fā)明者安德列亞·瓦爾姆斯利, 安德魯·道格拉斯·巴克斯特 申請人:索塞R&D有限公司