專利名稱:作為酪氨酸激酶抑制劑的哌啶基-喹唑啉衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及某些新的喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯,它們具有抗腫瘤活性并因此用于治療人體或動物體的方法。本發(fā)明也涉及制備所述喹唑啉衍生物、含此類衍生物的藥用組合物的方法及它們在治療方法中的用途,例如在制備用于預(yù)防或治療如人的溫血動物實體瘤疾病的藥物中的用途。
許多由細胞增殖的異常調(diào)節(jié)導(dǎo)致的疾病例如銀屑病和癌癥目前的治療方案為使用抑制DNA合成及細胞增殖的化合物。迄今為止,用于此類治療的化合物通常對細胞有毒性,但是它們對迅速分裂的細胞例如腫瘤細胞增強的作用可是有益的。這些細胞毒抗腫瘤藥的替代方法目前正在研究,例如選擇性細胞信號途徑抑制劑。此類抑制劑可能具有增強的對腫瘤細胞的選擇性作用,并也可能減少具有不必要副作用療法的可能性。
真核細胞不斷地對許多能在生物體細胞間溝通的、不同的細胞外信號做出響應(yīng)。這些信號在細胞內(nèi)調(diào)節(jié)各種物理反應(yīng),包括增殖、分化、細胞凋亡和運動性。細胞外信號表現(xiàn)為不同的可溶性因子形式,包括生長因子以及旁分泌及內(nèi)分泌因子。通過結(jié)合于特定的跨膜受體,這些配體使細胞外信號與細胞內(nèi)信號途徑成為一體,因此能越過質(zhì)膜轉(zhuǎn)導(dǎo)信號并使各細胞對其細胞外信號作出反應(yīng)。許多這些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程采用涉及促進這些不同細胞反應(yīng)的、可逆的蛋白質(zhì)磷酸化方法。目標(biāo)蛋白質(zhì)的磷酸化狀況通過特殊的激酶和磷酸酶調(diào)節(jié),這些酶負責(zé)調(diào)節(jié)約三分之一的由哺乳動物基因組編碼的所有蛋白質(zhì)。因為磷酸化是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中如此重要的調(diào)節(jié)機制,所以這些細胞內(nèi)途徑的失常導(dǎo)致非正常細胞生長和分化并如此促進細胞轉(zhuǎn)化是不令人驚訝的(在Cohen等,Curr Opin Chem Biol,1999,3,459-465中綜述)。
已廣泛顯示許多此類酪氨酸激酶變異成構(gòu)成活性形式和/或當(dāng)過度表達時導(dǎo)致各種人細胞的轉(zhuǎn)化。激酶的這些變異、過度表達的形式在較大比例的人腫瘤中存在(在Kolibaba等,Biochimica etBiophysica Acta,1997,133,F(xiàn)217-F248中綜述)。因為酪氨酸激酶在各種組織的增殖和分化中扮演重要的角色,大量的注意力集中于這些酶在發(fā)展新的抗癌療法中的用途。這類酶可分成兩組-受體及非受體酪氨酸激酶,例如分別為EGF受體和SRC類受體。從包括人基因組計劃在內(nèi)的大量研究結(jié)果中,人基因組中約90種酪氨酸激酶已被確定,其中58種為受體類型而32種為非受體類型。這些可劃分成20種受體酪氨酸激酶和10種非受體酪氨酸激酶亞型(Robinson等,Oncogene,2000,19,5548-5557)。
受體酪氨酸激酶對傳送引發(fā)細胞復(fù)制的促有絲分裂信號特別重要。這些跨越細胞質(zhì)膜的大糖蛋白具有其特定配體的細胞外結(jié)合區(qū)域(例如EGF受體的表皮生長因子(EGF))。配體的結(jié)合導(dǎo)致受體的激酶酶活性的激活,該酶通過受體的細胞內(nèi)部分編碼。該活性使目標(biāo)蛋白質(zhì)中的關(guān)鍵酪氨酸氨基酸磷酸化,導(dǎo)致跨越細胞質(zhì)膜的增殖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。
已知受體酪氨酸激酶的erbB家族,包括EGFR、erbB2、erbB3及erbB4經(jīng)常涉及驅(qū)動腫瘤細胞的增殖和存活(在Olayioye等,EMBOJ.,2000,19,3159中綜述)??梢詫崿F(xiàn)該增殖和存活的一種機制是通過蛋白質(zhì)水平受體的過度表達完成,通常為基因放大的結(jié)果。這已在許多常見的人癌癥中被觀察到(在Klapper等,Adv.Cancer Res.,2000,77,25中綜述),例如乳腺癌(Sainsbury等,Brit.J.Cancer,1988,58,458;Guerin等,Oncogene Res.,1988,3,21;Slamon等,Science,1989,244,707;Klijn等,Breast Cancer Res.Treat.,1994,29,73及在Salomon等,Crit.Rev.Oncol.Hematol.,1995,19,183中綜述),非小細胞肺癌(NSCLCs)包括腺癌(Cerny等,Brit.J.Cancer,1986,54,265;Reubi等,Int.J.Cancer,1990,45,269;Rusch等,Cancer Research,1993,53,2379;Brabender等,Clin.Cancer Res.,2001,7,1850)以及其他肺癌(Hendler等,Cancer Cells,1989,7,347;Ohsaki等,Oncol.Rep.,2000,7,603),膀胱癌(Neal等,Lancet,1985,366;Chow等,Clin.Cancer Res.,2001,7,1957,Zhau等,Mol Carcinog.,3,254),食管癌(Mukaida等,Cancer,1991,68,142),胃腸癌例如結(jié)腸、直腸或胃癌(Bolen等,Oncogene Res.,1987,1,149;Kapitanovic等,Gastroenterology,2000,112,1103;Ross等,Cancer Invest.,2001,19,554),前列腺癌(Visakorpi等,Histochem.J.,1992,24,481;Kumar等,2000,32,73;Scher等,J.Natl.Cancer Inst.,2000,92,1866),白血病(Konaka等,Cell,1984,37,1035,Martin-Subero等,Cancer Genet Cytogenet.,2001,127,174),卵巢癌(Hellstrom等,Cancer Res.,2001,61,2420),頭頸癌(Shiga等,Head Neck,2000,22,599)或胰腺癌(Ovotny等,Neoplasma,2001,48,188)。因為測試了更多的人腫瘤組織erbB家族受體酪氨酸激酶表達,期望將來其廣泛流行和重要性將進一步提高。
作為錯誤調(diào)節(jié)一種或多種這些受體的結(jié)果,普遍認為許多腫瘤在臨床上變得更有侵襲力,因此與患者的更差的預(yù)后相關(guān)(Brabender等,Clin.Cancer Res.,2001,7,1850;Ross等,CancerInvestigation,2001,19,554,Yu等,Bioessays,2000,22.7,673)。除了這些臨床發(fā)現(xiàn)外,很多臨床前資料表明erbB家族受體酪氨酸激酶涉及細胞轉(zhuǎn)化。這包括觀察到許多腫瘤細胞系過度表達一種或多種erbB受體,并且觀察到當(dāng)轉(zhuǎn)染到非腫瘤細胞中時,EGFR或erbB2具有轉(zhuǎn)化這些細胞的能力。當(dāng)過度表達erbB2的轉(zhuǎn)基因小鼠在乳腺中自發(fā)產(chǎn)生腫瘤時,該腫瘤發(fā)生潛力進一步被證實。除此之外,許多臨床前研究已顯示出抗增殖作用可通過用小分子抑制劑、顯性陰性或抑制性抗體剔除一種或多種erbB活性來誘導(dǎo)(在Mendelsohn等,Oncogene,2000,19,6550中綜述)。因此認為這些受體酪氨酸激酶抑制劑作為哺乳動物癌細胞增殖的選擇性抑制劑應(yīng)是有價值的(Yaish等Science,1988,242,933,Kolibaba等,Biochimica et Biophysica Acta,1997,133,F(xiàn)217-F248;Al-Obeidi等,2000,Oncogene,19,5690-5701;Mendelsohn等,2000,Oncogene,19,6550-6565)。
最近,小分子EGFR酪氨酸激酶抑制劑Iressa(也稱為gefitinib及ZD1834)已被批準(zhǔn)用于治療晚期非小細胞肺癌。此外,使用抗EGFR及erbB2抑制性抗體的發(fā)現(xiàn)(分別為c-225和曲妥單抗)證實臨床上治療經(jīng)選擇的實體腫瘤是有益的(在Mendelsohn等,2000,Oncogene,19,6550-6565中綜述)。
已監(jiān)測到ErbB受體酪氨酸激酶成員的擴大和/或活性,因此暗示其在許多非惡性增殖性疾病中起作用,例如銀屑病(Ben-Bassat,Curr.Pharm.Des.,2000,6,933;Elder等,Science,1989,243,811),良性前列腺增生(BPH)(Kumar等,Int.Urol.Nephrol.,2000,32,73),動脈粥樣硬化及再狹窄(Bokemeyer等,Kidney Int.,2000,58,549)。因此期望ErbB型受體酪氨酸激酶抑制劑將用于這些疾病及其他非惡性細胞過度增殖性疾病的治療。
歐洲專利申請EP 566 226公開了某些為受體酪氨酸激酶抑制劑的4-苯胺基喹唑啉。
國際專利申請WO 96/33977、WO 96/33978、WO 96/33979、WO96/33980、WO96/33981、WO97/30034、WO 97/38994公開了某些具有4-位苯胺基取代基及6-位和/或7-位取代基的喹唑啉衍生物,其具有受體酪氨酸激酶抑制活性。
歐洲專利申請EP 837 063公開了具有在喹唑啉環(huán)6-或7-位含芳基或雜芳基部分的芳基取代4-氨基喹唑啉衍生物。這些化合物據(jù)稱可用于治療過度增殖性疾病。
國際專利申請WO 97/30035及WO 98/13354中公開了某些7-位取代的4-苯胺基喹唑啉化合物為血管內(nèi)皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑。
WO 00/55141公開了6,7-取代的4-苯胺基喹唑啉化合物,其特征在于6-位和/或7-位的取代基帶有酯連接部分(RO-CO)。
WO 00/56720公開了用于治療癌癥或變態(tài)反應(yīng)的6,7-二烷氧基-4-苯胺基喹唑啉化合物。
WO 02/41882公開了由取代吡咯烷基-烷氧基或哌啶基-烷氧基在6-位和/或7-位取代的4-苯胺基喹唑啉化合物。
共同待審的PCT申請?zhí)朠CT/GB03/01306(在本申請的優(yōu)先權(quán)日之后以WO 03/082831公布)公開了由雜環(huán)氧基或雜環(huán)基烷氧基在6-位取代的4-(2,3-二鹵代苯胺基)喹唑啉化合物,它們是erbB、尤其是EGFR酪氨酸激酶抑制劑。PCT申請?zhí)朠CT/GB03/01306的實施例16公開了化合物6-(1-乙?;哙?4-基氧基)-4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉 實施例28公開了化合物4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥基乙?;?哌啶-3-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉 我們現(xiàn)在意外地發(fā)現(xiàn)某些由取代哌啶-4-基在6-位取代的4-(3-氯-2-氟苯胺基)喹唑啉化合物具有有效的體內(nèi)抗腫瘤活性及具有許多其他有益的性質(zhì),包括提高細胞和體內(nèi)效力和/或有利的DMPK性質(zhì),例如高生物利用度和/或高游離血漿水平和/或有利的半衰期和/或有利的分布體積和/或良好的物理性質(zhì),如溶解性。因此,期望本發(fā)明的化合物在hERG測試中無活性或僅有微弱活性。
沒有期望本發(fā)明中公開的化合物僅通過作用于單一生物學(xué)過程而具有藥理活性,認為化合物通過抑制涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟的一種或多種erbB家族受體酪氨酸激酶而提供抗腫瘤作用。尤其是,認為本發(fā)明化合物通過抑制EGFR酪氨酸激酶而提供抗腫瘤作用。
通常本發(fā)明化合物例如通過抑制EGFR和/或erbB2和/或erbB4受體酪氨酸激酶,具有有效的抑制erbB受體酪氨酸激酶家族活性,而對其他激酶具有較低的有效抑制活性。此外,本發(fā)明化合物基本上對EGFR酪氨酸激酶比對erbB2酪氨酸激酶具有更強的效力。因此,可以足以抑制EGFR酪氨酸激酶而不明顯地作用于erbB2(或其他)酪氨酸激酶的劑量給予本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物提供的選擇性抑制可為由EGFR酪氨酸激酶介導(dǎo)的病癥提供治療,同時,例如減少可與抑制其他酪氨酸激酶相關(guān)的不期望副作用。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面,提供了式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯 其中R1選自氫和甲氧基;及R2為氫。
應(yīng)理解某些式I化合物可以溶劑化物形式以及非溶劑化物形式存在,例如水合物形式。應(yīng)理解本發(fā)明包括所有具有抗增殖活性的此類溶劑化物形式。
也應(yīng)理解某些式I化合物可存在多晶現(xiàn)象,本發(fā)明包括所有具有抗增殖活性的此類形式。
式I化合物合適的藥學(xué)上可接受的鹽有例如式I化合物的酸加成鹽,例如無機酸或有機酸的酸加成鹽。合適的無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸或硫酸。合適的有機酸包括例如三氟乙酸、檸檬酸、馬來酸、酒石酸、富馬酸、甲磺酸或4-甲苯磺酸。在本發(fā)明的一個實施方案中,特定的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽有例如與有機酸例如馬來酸、酒石酸或甲磺酸形成的鹽。我們發(fā)現(xiàn),例如與式I喹唑啉衍生物的游離堿形式比較,這些鹽具有有利的性質(zhì),例如提高溶解速率和/或藥效學(xué)性質(zhì)例如提高生物利用度。
通常式I喹唑啉衍生物的藥學(xué)上可接受的鹽優(yōu)選為結(jié)晶,因為其中這使喹唑啉衍生物能以高純度制備。當(dāng)本文中說明式I喹唑啉衍生物為結(jié)晶時,由X-射線粉末衍射數(shù)據(jù)確定的結(jié)晶度適宜大于約60%,更適宜大于約70%,優(yōu)選大于約80%,且更優(yōu)選大于約90%,還更優(yōu)選大于約95%。最優(yōu)選由X-射線粉末衍射數(shù)據(jù)確定的結(jié)晶度大于約98%。用X-射線粉末衍射確定結(jié)晶度對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是眾所周知的。
本文中使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的酯”指在體內(nèi)水解產(chǎn)生母體化合物或其藥學(xué)上可接受鹽的式I喹唑啉衍生物的酯。式I喹唑啉體內(nèi)可水解的酯可用于改變或改善母體化合物的物理和/或藥代動力學(xué)特征,例如溶解性??捎糜谛纬伤帉W(xué)上可接受酯前藥的合適酯基是眾所周知的,例如在例如以下文獻中所討論Pro-drugs as Novel Delivery Systems,T.Higuchi and V.Stella,Vol.14,the ACS Symposium Series,Edward B.Roche出版;
Bioreversible Carriers in Drug Design,American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press,1987;Design of Prodrugs,H.Bundgaard編輯(Elsevier,1985)和Methodsin Enzymology,Vol.42,p.309-396,K.Widder等編輯(Academic Press,1985);A Textbook of Drug Design and Development,Krogsgaard-Larsenand H.Bundgaard編著,第5章″Design and Application of Prodrugs(前藥的設(shè)計和應(yīng)用)″,H.Bundgaard編著,p.113-191(1991);H.Bundgaard,Advanced Drug Delivery Reviews,8,1-38(1992);H.Bundgaard等,Journal of Pharmaceutical Sciences,77,285(1988);及N.Kakeya等,Chem Pharm Bull,32,692(1984)。
特定的式I喹唑啉衍生物藥學(xué)上可接受的酯或其藥學(xué)上可接受的鹽為羥基所形成的酯,由式I中OR2代表,當(dāng)溫血動物例如人服用時,該酯在人或動物體內(nèi)水解產(chǎn)生式I的母體喹唑啉。此類式I喹唑啉衍生物藥學(xué)上可接受的酯或其藥學(xué)上可接受鹽的實例包括無機酯例如磷酸酯、α-酰氧基烷基醚及相關(guān)化合物,及衍生自藥學(xué)上可接受的脂族羧酸的酯,尤其是鏈烷酸、鏈烯酸、環(huán)烷酸和鏈烷二酸,其中各烷基或烯基部分最好不多于6個碳原子。服藥后,該藥學(xué)上可接受的酯在體內(nèi)進行水解,裂解生成式I喹唑啉衍生物中的母羥基。α-酰氧基烷基醚的實例包括乙酰氧基甲氧基及2,2-二甲基丙酰氧基甲氧基。形成式I羥基的藥學(xué)上可接受酯的基團選擇包括(1-6C)烷?;⒈郊柞;?、苯乙?;叭〈谋郊柞;捅揭阴;?、(1-6C)烷氧基羰基(生成烷基碳酸酯)、二-(1-4C)烷基氨基甲?;癗-(二-(1-4C)烷基氨基乙基)-N-(1-4C)烷基氨基甲?;?生成氨基甲酸酯),二-(1-4C)烷基氨基乙?;棒然阴;1郊柞;系娜〈鶎嵗燃谆虬被谆?1-4C)烷基氨基甲基及二-((1-4C)烷基)氨基甲基及通過亞甲基連接基團從環(huán)氮原子連接到苯甲?;h(huán)3-或4-位的嗎啉代或哌嗪-1-基。
特定的藥學(xué)上可接受的酯為與式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽中羥基形成的磷酸酯。更特別是,藥學(xué)上可接受的酯包括式I喹唑啉衍生物,其中由式I中OR2代表的羥基形成式(PD1)磷?;?npd為1)或亞磷?;?phosphiryl)(npd為0)酯或其藥學(xué)上可接受的鹽 另一個特定的藥學(xué)上可接受的酯為其中由式I中OR2代表的羥基形成磷?;善渲衝pd為1的式(PD1)基團的式I喹唑啉衍生物。
制備此類酯的有用中間體包括含式(PD1)基團的化合物,其中(PD1)中兩-OH基團之一或兩者獨立由(1-4C)烷基(此類化合物本身也是目的化合物)、苯基或苯基-(1-4C)烷基(例如任選被1個或2個獨立選自(1-4C)烷基、硝基、鹵素及(1-4C)烷氧基的基團取代的苯基)保護。
含例如(PD1)基團的式I喹唑啉衍生物的藥學(xué)上可接受的酯,可通過式I喹唑啉衍生物與適當(dāng)保護的磷?;噭?例如,含氯或二烷基氨基離去基團)反應(yīng)、接著進行氧化反應(yīng)(如果有必要)和脫保護反應(yīng)制備。合適的磷?;噭┦潜娝苤?,包括例如保護的氨基亞磷酸酯化合物例如N,N-二-[(1-6C)烷基1-氨基亞磷酸酯,例如N,N-二乙基氨基亞磷酸二叔丁酯。
應(yīng)理解式I喹唑啉衍生物中的酯基團可形成該酯基團的藥學(xué)上可接受的鹽,且此類鹽形成本發(fā)明的一部分。當(dāng)需要藥學(xué)上可接受酯的藥學(xué)上可接受的鹽時,可通過對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言是眾所周知的常規(guī)技術(shù)實現(xiàn)。因此,例如含式(PD1)基團的化合物可離子化(部分或全部)與適當(dāng)數(shù)量的反荷離子形成鹽。作為實例,如果式I喹唑啉衍生物的藥學(xué)上可接受的酯前藥含(PD1)基團,則存在兩個HO-P-官能團,各官能團可與合適的反荷離子形成適當(dāng)?shù)柠}。式(PD1)基團的合適鹽為堿鹽例如堿金屬鹽例如鈉鹽、堿土金屬鹽例如鈣或鎂鹽,或有機胺鹽例如三乙胺或三-(2-羥乙基)胺。因此例如(PD1)基團可形成單-或二-鈉鹽)。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物為式I喹唑啉衍生物,該衍生物為4-(3-氯-2-氟苯氨基)-6-[1-(羥基乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉或其藥學(xué)上可接受的鹽(優(yōu)選藥學(xué)上可接受的酸加成鹽)或其藥學(xué)上可接受的酯。
在本發(fā)明的一個實施方案中,提供了如上文所定義的式(I)喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在本說明書中,一般術(shù)語“烷基”包括直鏈和支鏈烷基例如丙基、異丙基和叔丁基,和(3-7C)環(huán)烷基例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。然而提及個別烷基例如“丙基”僅具體指直鏈形式,提及個別支鏈烷基例如“異丙基”僅具體指支鏈形式。類似的慣例應(yīng)用于其他一般術(shù)語中,例如(1-6C)烷氧基包括甲氧基、乙氧基、環(huán)丙氧基及環(huán)戊氧基,(1-6C)烷基氨基包括甲氨基、乙氨基、環(huán)丁氨基及環(huán)己氨基,和二-[(1-6C)烷基]氨基包括二甲氨基、二乙氨基、N-環(huán)丁基-N-甲基氨基和N-環(huán)己基-N-乙基氨基。
本說明書上下文中所定義各基團的合適值包括-鹵素氟、氯、溴和碘;(1-6C)烷基甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基、戊基和己基;(1-6C)烷氧基甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基及丁氧基;(1-6C)烷氨基甲氨基、乙氨基、丙氨基、異丙氨基及丁氨基;二-[(1-6C)烷基]氨基二甲氨基、二乙氨基、N-乙基-N-甲基氨基及二異丙基氨基;
(1-6C)烷氧基羰基甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基及叔丁氧基羰基;N-(1-6C)烷基氨基甲?;鵑-甲基氨基甲酰基、N-乙基氨基甲?;?、N-丙基氨基甲酰基及N-異丙基氨基甲?;?;N,N-二-[(1-6C)烷基]氨基甲?;鵑,N-二甲基氨基甲?;?、N-乙基-N-甲基氨基甲酰基及N,N-二乙基氨基甲酰基;(2-6C)烷?;阴;?、丙?;爱惗□;?;和(2-6C)烷酰氧基乙酰氧基及丙酰氧基。
式I喹唑啉衍生物的合成本發(fā)明的再一方面提供了制備式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其藥學(xué)上可接受的酯的方法??烧J識到在某些下列方法中,某些取代基可能需要保護以防止它們不需要的反應(yīng)。熟練的技術(shù)人員將認識到何時需要這種保護及如何放置這類保護基團并隨后除去。
保護基團的實例可參見該主題的許多普通教科書之一,例如Theodora Green著的“Protective groups in Organic Synthesis(有機合成中的保護基團)”(出版者John Wiley & Sons)。保護基團可通過如文獻中所描述的任何常規(guī)方法除去,或通過熟練的技術(shù)人員所認識到的除去所討論保護基因的適當(dāng)方法除去,選擇此類方法以使除去保護基團時最小程度地干擾分子中的其他基團。
因此,如果反應(yīng)物包括例如氨基或羥基的基團,可能需要在某些本文提及的反應(yīng)中保護該基團。
氨基或烷氨基合適的保護基團為,例如?;缤轷;缫阴;檠趸驶缂籽趸驶?、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基,芳基甲氧基羰基例如芐氧基羰基,或芳酰基例如苯甲?;I鲜霰Wo基團的脫保護條件隨所選擇的保護基團而必要地改變。因此,例如,?;缤轷;蛲檠趸驶蚍减;赏ㄟ^例如用合適的堿例如堿金屬氫氧化物例如氫氧化鋰或氫氧化鈉水解除去?;蛘啧;缡宥⊙趸驶赏ㄟ^例如用合適的酸如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸處理除去,芳基甲氧基羰基例如芐氧基羰基可通過例如用催化劑如鈀/碳氫化除去,或通過用Lewis酸例如三(三氟乙酸)化硼處理除去。伯氨基合適的供選擇的保護基團有例如鄰苯二甲?;?,它可通過用烷基胺例如二甲氨基丙胺或用肼處理除去。
羥基合適的保護基團有,例如,?;缤轷;缫阴;?,芳酰基例如苯甲?;?,或芳基甲基例如芐基。上述保護基團的脫保護條件隨所選擇的保護基團而必要地改變。因此,例如,酰基例如烷?;蚍减;赏ㄟ^例如用合適的堿例如堿金屬氫氧化物例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氨水水解除去。或者芳基甲基例如芐基可通過例如用如鈀/碳的催化劑氫化除去。
保護基團可在合成中的任何方便的階段、用化學(xué)領(lǐng)域眾所周知的常規(guī)技術(shù)除去。
式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯,可通過已知可應(yīng)用于制備化學(xué)相關(guān)化合物的任何方法制備,例如用WO 03/082831中描述的類似方法。當(dāng)用于制備式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯時,此類方法作為本發(fā)明的又一特征提供,并由下列代表性的改進方法說明。必需的起始原料可通過有機化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)方法獲得(參見,例如Advanced OrganicChemistry(Wiley-Interscience),Jerry March)。此類起始原料的制備在隨同的非限定性實施例中描述?;蛘撸匦璧钠鹗荚贤ㄟ^那些舉例說明的在有機化學(xué)技術(shù)人員普通技能范圍內(nèi)的類似方法獲得。
在下列制備式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯的方法中,除非另外說明,否則變量如上所定義。
適當(dāng)在合適堿的存在下,將式II化合物或其鹽 其中R1如上文所定義,如果必要保護式II化合物中的任何官能團,與式III羧酸或其活性衍生物偶合 其中R2如上文所定義,如果必要保護式III化合物中的任何官能團;其后,如果必要(以任何順序)(i)由常規(guī)技術(shù)除去任何保護基團;(ii)形成藥學(xué)上可接受的鹽;及(iii)形成藥學(xué)上可接受的酯。
上述反應(yīng)的具體條件如下。
偶合反應(yīng)在合適的偶合劑存在下方便地進行,偶合劑有例如碳二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺,或合適的肽偶合劑例如六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基尿(HATU)。偶合反應(yīng)在催化劑例如二甲氨基吡啶或4-吡咯烷-1-基吡啶的存在下方便地進行。
偶合反應(yīng)在合適堿的存在下方便地進行。合適的堿有例如,有機胺堿例如吡啶、2,6-二甲基吡啶、三甲基吡啶、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二-異丙基乙胺、N-甲基嗎啉或二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯,或例如堿金屬或堿土金屬碳酸鹽,例如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、碳酸鈣,或例如堿金屬氫化物,例如氫化鈉。
該反應(yīng)方便地在合適的惰性溶劑或稀釋劑的存在下進行,例如酯例如乙酸乙酯,氯化溶劑例如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳,醚例如四氫呋喃或1,4-二氧六環(huán),芳族溶劑例如甲苯,或偶極非質(zhì)子溶劑例如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮、二甲基亞砜或乙腈。該反應(yīng)方便地在例如0-120℃溫度范圍內(nèi),特別是在或接近室溫的溫度下進行。
式II化合物可以游離堿形式或以合適的鹽形式,例如酸加成鹽如鹽酸鹽使用。
術(shù)語式III羧酸的“活性衍生物”指將與式II化合物反應(yīng)生成相應(yīng)酰胺的羧酸衍生物。合適的式III羧酸的活性衍生物有,例如酰鹵,例如由酸與無機酸氯化物如亞硫酰氯反應(yīng)形成的酰氯;混合酸酐,例如由酸與氯甲酸酯如氯甲酸異丁酯反應(yīng)形成的酸酐;活性酯,例如由酸與酚如五氟苯酚、酯如三氟乙酸五氟苯基酯或醇如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇或N-羥基苯并三唑反應(yīng)形成的酯;或?;B氮化物,例如由酸與疊氮化物如二苯磷酰基疊氮化物反應(yīng)形成的疊氮化物;酰基氰,例如由酸與氰化物如二乙基磷酰基氰化物反應(yīng)形成的氰化物。特別的式III酸的活性衍生物為式IIIa的酰鹵 其中R2如上文所定義;X為鹵素,例如氯;如果必要,保護式III化合物中的任何官能團。
例如上述的羧酸活性衍生物與胺(例如式II化合物)的反應(yīng)在本領(lǐng)域中是眾所周知的。例如式II化合物可與式IIIa的酰鹵在堿如以上所描述的那些堿存在下,例如有機堿如吡啶或4-二甲氨基吡啶,及在合適的溶劑中,例如偶極非質(zhì)子溶劑例如乙腈中反應(yīng)。該反應(yīng)可方便地在如上所描述的溫度下,例如在或接近室溫下進行。
當(dāng)需要式I喹唑啉衍生物的藥學(xué)上可接受的鹽例如酸加成鹽時,可通過例如所述喹唑啉衍生物與合適的酸用常規(guī)方法反應(yīng)獲得。制備藥學(xué)上可接受的鹽的方法在本領(lǐng)域是眾所周知的,并在本申請的實施例中說明。例如,式I喹唑啉衍生物與酸反應(yīng)后,所需酸加成鹽可通過使含式I喹唑啉衍生物的溶液過飽和而從溶液中析出??墒褂帽娝苤募夹g(shù)達到過飽和,例如通過冷卻溶液、通過蒸發(fā)除去溶劑或通過加入合適的反溶劑使鹽沉淀。
為了在其制備過程中方便分離式I喹唑啉衍生物,化合物可以不是藥學(xué)上可接受鹽的鹽形式制備。然后所得鹽通過常規(guī)技術(shù)進行修飾生成化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。此類鹽修飾技術(shù)是眾所周知的,并包括例如離子交換技術(shù)或在藥學(xué)上可接受的如上所描述的反荷離子存在下從溶液中再沉淀出該化合物,例如通過在合適的酸如HCl的存在下再沉淀得到式I喹唑啉衍生物的鹽酸酸加成鹽。
起始原料的制備式II化合物可通過常規(guī)方法獲得。例如反應(yīng)流程1中舉例說明
反應(yīng)流程1 其中R1如上文所定義;Lg為可置換基團,例如鹵素如氯;及Pg為合適的胺保護基團,例如叔丁氧基羰基(BOC)。
步驟(1)使用Mitsunobu偶合反應(yīng)偶合。合適的Mitsunobu條件包括,例如在合適的叔膦及二-烷基偶氮二羧酸酯的存在下,在有機溶劑如THF或合適的二氯甲烷中,在0℃-60℃溫度范圍內(nèi),但適當(dāng)?shù)卦诨蚪咏覝氐臏囟认路磻?yīng)。合適的叔膦包括例如三-正丁基膦或特別是三-苯基膦。合適的二-烷基偶氮二羧酸酯包括例如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)或合適的偶氮二羧酸二-叔丁基酯。Mitsunobu反應(yīng)在Tet.Letts.,31,699,(1990);The Mitsunobu Reaction(Mitsunobu反應(yīng)),D.L.Hughes,Organic Reactions,1992,Vol.42,335-656及Progress in theMitsunobu Reaction(Mitsunobu反應(yīng)進展),D.L.Hughes,OrganicPreparations and Procedures International,1996,Vol.28,127-164中有詳細說明。
步驟(2)該反應(yīng)方便地在合適的惰性溶劑或稀釋劑存在下進行,例如醇或酯例如甲醇、乙醇、異丙醇或乙酸乙酯,氯化溶劑例如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳,醚例如四氫呋喃或1,4-二氧六環(huán),芳族溶劑例如甲苯,或偶極非質(zhì)子溶劑例如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮、乙腈或二甲基亞砜。該反應(yīng)方便地在例如10-250℃溫度范圍內(nèi),方便地在40-120℃范圍內(nèi)或當(dāng)使用溶劑或稀釋劑時在回流溫度下進行。方便地,該反應(yīng)在質(zhì)子溶劑例如異丙醇的存在下進行,方便地在酸例如氯化氫氣體的乙醚或二氧六環(huán)溶液或鹽酸例如4M鹽酸的二氧六環(huán)溶液存在下,在上述條件下進行。
或者,式IVa化合物可在合適的堿存在下與苯胺反應(yīng)。用于該反應(yīng)的合適堿為如上文定義的與式II和III化合物反應(yīng)相關(guān)的堿。該反應(yīng)方便地在惰性溶劑或稀釋劑中,在升高的溫度下進行。合適的溶劑和反應(yīng)條件與上述反應(yīng)流程1的步驟2中所描述的那些類似,其中式IVa化合物與苯胺在酸的存在下反應(yīng)。
在再一個改進方法中,式IVa化合物可直接與苯胺在無另外酸或堿的情況下反應(yīng)。在該反應(yīng)中,偶合反應(yīng)產(chǎn)生的酸作為進一步反應(yīng)的催化劑。
式II化合物也可根據(jù)反應(yīng)流程2制備
反應(yīng)流程2 其中R1如上文所定義;Lg為合適的可置換基團,例如鹵素如氯;Lg1為合適的可置換基團;Pg為合適的胺保護基團,例如叔丁氧基羰基(BOC);及Pg1為合適的羥基保護基團,例如?;缫阴;?br>
步驟1當(dāng)Lg為鹵素例如氯時,式V化合物與合適的鹵化劑例如亞硫酰氯或鹵化磷衍生物如磷酰氯或五氯化磷反應(yīng)。鹵化反應(yīng)方便地在合適堿的存在下進行。合適的堿為如上文所定義的與式II和III化合物的反應(yīng)相關(guān)的堿,例如有機胺堿如二異丙胺。該反應(yīng)適合在合適的惰性溶劑例如芳族溶劑如甲苯中進行。該反應(yīng)適合在升高的溫度,例如在30-120℃,優(yōu)選在60-90℃溫度下進行。
步驟2類似于用于反應(yīng)流程1中步驟2的條件。式Vb化合物可方便地直接由式V化合物制備,而不分離出式Va化合物。在該改進方法中,直接向反應(yīng)混合物中加入苯胺,接著向式V化合物引入可置換基團Lg。
步驟3使用常規(guī)技術(shù)除去羥基保護基團。例如,當(dāng)Pg1為?;鶗r,通過用合適的堿例如堿金屬氫氧化物,例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氨水解除去。
步驟4由Lg1代表的合適可置換基團包括例如鹵素、烷磺酰氧基或芳基磺酰氧基。特別是Lg1基團選自氯、溴、甲磺酰氧基、4-硝基苯磺酰氧基及甲苯-4-磺酰氧基,更特別是Lg1選自甲磺酰氧基、4-硝基苯磺酰氧基及甲苯-4-磺酰氧基。
該反應(yīng)最好在堿的存在下進行。合適的堿為如本文所定義的與式II和III化合物的反應(yīng)相關(guān)的堿,例如,堿金屬或堿土金屬碳酸鹽例如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫或碳酸鈣,或堿金屬氫氧化物例如氫氧化鈉。該反應(yīng)適合在惰性溶劑或稀釋劑的存在下進行,例如烷醇或酯例如甲醇、乙醇、2-丙醇或乙酸乙酯,鹵化溶劑例如二氯甲烷、三氯甲烷或四氯化碳,醚例如四氫呋喃或1,4-二氧六環(huán),芳烴溶劑例如甲苯,或(合適的)偶極非質(zhì)子溶劑例如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮或二甲基亞砜。該反應(yīng)方便地在例如10-150℃(或該溶劑的沸點)范圍內(nèi),適合在70-110℃范圍內(nèi)的溫度下進行。
步驟5使用常規(guī)方法除去胺保護基團Pg。例如當(dāng)Pg為BOC基團時,通過用合適的酸例如鹽酸處理式Vc化合物除去。
用于反應(yīng)流程1和2的起始原料是已知的,或可用制備類似化合物的已知方法制備。制備起始原料和中間體的合適方法的實例在下列實施例中說明。
在上下文的方法部分中,表達“惰性溶劑”指不與起始原料、試劑、中間體或產(chǎn)物以對所需產(chǎn)物的產(chǎn)率起不利影響的方式反應(yīng)的溶劑。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將認識到,為了以另外的及在某些情況下更方便的方式獲得本發(fā)明化合物,上文中提及的各方法步驟可以不同的順序進行,和/或各反應(yīng)可在總反應(yīng)路線的不同階段進行(即化學(xué)轉(zhuǎn)化可用與上文中特定反應(yīng)相關(guān)的不同中間體進行)。
生物學(xué)試驗下列試驗可用于測定本發(fā)明化合物作為erbB酪氨酸激酶抑制劑、作為體外KB細胞(人鼻-咽(pharangeal)癌細胞)增殖抑制劑及作為裸小鼠體內(nèi)異種移植LoVo腫瘤細胞(結(jié)腸直腸腺癌)的生長抑制劑的作用。
a)蛋白質(zhì)酪氨酸激酶磷酸化試驗該試驗通過erbB酪氨酸激酶測定受試化合物抑制含酪氨酸多肽底物磷酸化的能力。
將EGFR、erbB2和erbB2的重組細胞內(nèi)片段(登記號分別為X00588、X03363和L07868)在桿狀病毒/Sf21系統(tǒng)中克隆并表達。通過用冰冷卻的溶解緩沖液(20mM N-2-羥乙基哌嗪(piperizine)-N′-2-乙磺酸(HEPES)pH7.5,150mM NaCl,10%甘油,1%Triton X-100,1.5mMMgCl2,1mM乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)N′,N′,N′,N′-四乙酸(EGTA)及蛋白酶抑制劑處理這些細胞、然后離心清除來制備溶胞產(chǎn)物。
這些重組蛋白質(zhì)的構(gòu)成性激酶活性通過其使合成肽(由谷氨酸、丙氨酸和酪氨酸以6∶3∶1的比例形成的無規(guī)共聚物組成)磷酸化的能力確定。具體地說,用合成肽(0.2μg肽溶于100μl磷酸緩沖鹽溶液(PBS)中并于4℃溫育過夜)涂覆MaxisorbTM96-孔免疫板。板用PBS-T(磷酸緩沖鹽溶液與0.5%吐溫20)然后用50mM HEPES pH 7.4于室溫洗滌,除去過量的未結(jié)合合成肽。在pH7.4的100mM HEPES、各酶Km濃度的三磷酸腺苷(ATP)、10mM MnCl2、0.1mM Na3VO4、0.2mM DL-二硫蘇糖醇(DTT)、0.1%Triton X-100及受試化合物的DMSO溶液(最終濃度2.5%)中,22℃溫育肽涂覆板20分鐘,測定EGFR、erbB2或erbB4酪氨酸激酶活性。通過移去該試驗的液體成分、接著用PBS-T洗滌該板終止反應(yīng)。
周免疫學(xué)方法監(jiān)測該反應(yīng)的固定磷酸化肽產(chǎn)物。首先,于室溫將板與小鼠(4G10,Upstate Biotechnology)體內(nèi)產(chǎn)生的抗磷酸酪氨酸初級抗體一起溫育90分鐘。充分洗滌后,于室溫用辣根過氧化物酶(HRP)綴合的羊抗小鼠二級抗體(NXA931,Amersham)處理板60分鐘。進一步洗滌后,用22′-連氮基-二-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸鹽(6)]二銨鹽結(jié)晶(ABTSTM,Roche)作為底物、比色法測定該板各孔的HRP活性。
通過用Molecular Devices ThermoMax微量板讀出器、在405nm處測定吸光率,定量顯色反應(yīng)及酶活性。特定化合物對激酶的抑制以IC50值表示。它通過計算化合物在該試驗中抑制50%磷酸化所需的濃度確定。磷酸化的范圍從陽性(介質(zhì)加ATP)和陰性(介質(zhì)減ATP)對照值計算
b)EGFR驅(qū)動的KB細胞增殖試驗該試驗測定受試化合物對KB細胞(從American Type CultureCollection(ATCC)獲得的人鼻-咽癌細胞)增殖的抑制能力。
KB細胞在含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺及非必需氨基酸的Dulbecco氏改進的Eagle氏培養(yǎng)基(DMEM)中,于37℃、在7.5%CO2氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。用胰蛋白酶/乙二胺四乙酸(EDTA)從儲瓶中收獲細胞。用血細胞計數(shù)器測定細胞密度并用錐蟲藍溶液計算細胞生存力,然后在96孔板中以每孔1.25×103細胞的密度,在含2.5%碳脫色血清、1mM谷氨酰胺及非必需氨基酸的DMEM中,于37℃、在7.5%CO2中接種并將其溫育4小時。
粘附于板后,細胞用或不用EGF(最終濃度為1ng/ml)處理,并在溫育4天之前,用或不用一定濃度范圍的化合物二甲基亞砜(DMSO)溶液(0.1%最終濃度)處理。溫育后,通過2小時加入50μl 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化(MTT)(儲液5mg/ml)確定細胞數(shù)量。然后將MTT溶液吸除,將板輕輕敲打干燥,并加入100μl DMSO使細胞溶解。
通過用Molecular Devices ThermoMax微量板讀出器、在540nm處測定溶解細胞的吸光率。用IC50值表示增殖的抑制。它通過計算化合物抑制50%增殖所需的濃度確定。增殖的范圍從陽性(介質(zhì)加EGF)和陰性(介質(zhì)減EGF)對照值計算c)克隆24磷酸-erbB2細胞試驗該免疫熒光終點試驗測定受試化合物對MCF7(乳腺癌)起源細胞系的erbB2磷酸化作用的抑制能力,該細胞系通過用全長erbB2基因、用標(biāo)準(zhǔn)方法使MCF7細胞傳染、產(chǎn)生過度表達全長野生型erbB2蛋白(下文的‘克隆24’細胞)的細胞系而產(chǎn)生。
克隆24細胞在生長培養(yǎng)基(無酚紅Dulbecco氏改良Eagle氏培養(yǎng)基(DMEM),含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺和1.2mg/ml G418)中、在7.5%CO2空氣培養(yǎng)箱、于37℃培養(yǎng)。細胞通過用PBS(磷酸緩沖鹽溶液,pH7.4,Gibco No.10010-015)洗滌一次,從T75儲瓶中收獲,及用2ml胰蛋白酶(1.25mg/ml)/乙二胺四乙酸(EDTA)(0.8mg/ml)溶液收獲。再將細胞懸浮于生長培養(yǎng)基中。用血細胞計數(shù)器測定細胞密度并在用生長培養(yǎng)基進一步稀釋之前用錐蟲藍溶液計算細胞生存能力,并以每孔(100μl)1×104細胞的密度接種于底部透明的96孔板(Packard,No.6005182)中。
3天后,將生長培養(yǎng)基從孔中除去并用100μl試驗培養(yǎng)基(無酚紅DMEM,2mM谷氨酰胺、1.2mg/ml G418)和或無erbB抑制劑化合物代替。將板返回培養(yǎng)箱保持4小時,然后向各孔中加入20μl 20%甲醛/PBS溶液,并將該板置于室溫30分鐘。用多通道移液管將該定影液除去,向各孔中加入100μl PBS并用多通道移液管除去,然后向各孔中加入50μl PBS。將板密封并于4℃儲存最長達2周。
于室溫進行免疫染色??子?00μl PBS/吐溫20(由將1袋PBS/吐溫干粉(Sigma,No.P3563)加入到1L重蒸餾H2O制備)、用洗板器洗滌一次,然后加入200μl阻斷溶液(5%Marvel脫脂奶粉(Nestle)/PBS/Tween 20)并溫育10分鐘。用洗板器除去阻斷溶液并加入200μl 0.5%Triton X-100/PBS使細胞滲透。10分鐘后,用200μl PBS/吐溫20洗滌該板,再一次加入200μl阻斷溶液并溫育15分鐘。用洗板器除去阻斷溶液后,向各孔中加入在阻斷溶液中以1∶250稀釋的30μl兔多克隆抗-磷酸ErbB2 IgG抗體(抗原決定基磷酸-Tyr 1248,SantaCruz,No.SC-12352-R)并溫育2小時。然后用洗板器從孔中除去該初級抗體溶液,接著用洗板器、200μl PBS/吐溫20洗滌兩次。然后向各孔中加入在阻斷溶液中以1∶750稀釋的30μl Alexa-Fluor 488山羊抗-兔IgG二級抗體(分子探針,No.A-11008)。從現(xiàn)在開始,無論任何可能情況下,板均避免暴光,在該階段用黑色帶密封。將板溫育45分鐘,然后從孔中除去該二級抗體溶液,接著用洗板器、200μlPBS/吐溫20洗滌兩次。向各板中加入100μl PBS,溫育10分鐘,然后用洗板器除去。進一步向各板中加入100μl PBS,然后不延長溫育,用洗板器除去。向各孔中加入50μl PBS并再將板用黑色帶密封,在分析前于4℃儲存最長達2天。
各孔中的熒光信號用Acumen Explorer Instrument(AcumenBioscience Ltd.)測定,可用板讀出器快速定量由激光-掃描產(chǎn)生的圖象特征。該儀器被設(shè)置用于測定在預(yù)先設(shè)置的閾值之上的熒光物體數(shù)目并提供erbB2蛋白磷酸化狀況的測定。將各化合物獲得的熒光劑量反應(yīng)數(shù)據(jù)輸入(exported)合適的軟件包(例如Origin)進行曲線擬合分析。erbB2磷酸化的抑制以IC50值表示。這由計算產(chǎn)生50%erbB2磷酸化信號的抑制所需的化合物濃度確定。
d)體內(nèi)異種移植物試驗該試驗測定受試化合物對雌性Swiss無胸腺小鼠(Alderley Park,nu/nu基因型)的LoVo腫瘤(從ATCC獲得的結(jié)腸直腸腺癌)生長的抑制能力。
雌性Swiss無胸腺(nu/nu基因型)小鼠在Alderley Park的負壓隔離器(PFI Systems Ltd.)中繁殖并飼養(yǎng)。將小鼠置于12小時光照/黑暗循環(huán)的屏蔽設(shè)施中并提供自由進食無菌食物和飲水。所有程序均用至少8周齡小鼠進行。通過每只動物皮下注射100μl無血清培養(yǎng)基中的1×107新鮮培養(yǎng)細胞,在供體小鼠后脅建立LoVo腫瘤細胞(從ATCC獲得的結(jié)腸直腸腺癌)異種移植物。在移植后第5天,在用化合物或介質(zhì)對照以0.1ml/10g體重每天給藥一次處理之前,將小鼠隨機分組,7只一組。用雙側(cè)游標(biāo)卡尺每周測量兩次來評價腫瘤體積,使用公式(長度×寬度)×√(長度×寬度)×(π/6),其中長度為穿過腫瘤的最大直徑,寬度為相應(yīng)的垂線。通過比較對照組和治療組腫瘤體積的平均變化計算從研究開始時的生長抑制,并用Students t檢驗評價兩組間的統(tǒng)計學(xué)意義。
e)hERG-編碼的鉀通道抑制試驗該試驗測定受試化合物對尾電流流經(jīng)人快速延遲性整流性鉀通道基因(ether-a-go-go-related-gene(hERG))-編碼的鉀通道的抑制能力。
使表達hERG-編碼通道的人中腎(HEK)細胞生長于Eagle極限必需培養(yǎng)基(EMEM;Sigma-Aldrich目錄編號M2279)中,補充10%胎牛血清(Labtech International;產(chǎn)品編號4-101-500),10%M1無血清補充(Egg Technologies;產(chǎn)品編號70916)及0.4mg/ml遺傳霉素(Geneticin)G418(Sigma-Aldrich;目錄編號G7034)。各試驗前一天或兩天,用Accutase(TCS Biologicals)、以標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)方法從組織培養(yǎng)瓶中分離細胞。然后將它們置于放在12孔板的孔上的玻璃蓋玻片上,并用2ml生長培養(yǎng)基覆蓋。
對各已記錄的細胞而言,將含細胞的玻璃蓋玻片于室溫(~20℃)置于含浴液(bath solution)(見下)的Perspex室的底部。將該室固定于反轉(zhuǎn)的相襯(phase-contrast)顯微鏡臺上。將蓋玻片置于該室之后,立即將浴液從增加重力的儲器中以~2ml/min的速率灌注進該室2分鐘。之后,停止灌注。
將帶P-97微量移液管拔出器(Sutter Instrument Co.)的、由硼硅酸鹽玻璃管制備的膜片移液管(GC120F,Harvard Apparatus)充滿移液管溶液(見下文)。將移液管與膜片鉗放大器頂臺(Axopatch 200B,AxonInstruments)通過銀/氯化銀絲連接。該頂臺基與地電極連接。它由植入含0.85%氯化鈉的3%瓊脂的銀/氯化銀絲組成。
細胞以膜片鉗術(shù)的全細胞結(jié)構(gòu)記錄。在-80mV的支持電壓(由放大器設(shè)置)及合適調(diào)節(jié)串聯(lián)電阻和電容控制器下完成“插入(break-in)”后,用電生理學(xué)軟件(Clampex,Axon Instruments)設(shè)置支持電壓(-80mV)及傳送電壓方案。該方案每15秒應(yīng)用一次并由1秒間距至+40mV接著由1秒間距至-50mV組成。電流對各強加電壓方案的響應(yīng)由放大器以1kHz低通過濾。然后獲得過濾的信號,在線用類似于數(shù)字轉(zhuǎn)化器的設(shè)備將來自放大器中的該模擬信號數(shù)字化。然后在運行Clampex軟件(Axon Instruments)的計算機上捕獲該數(shù)字化信號。在支持電壓和間距至+40mV期間,電流以1kHz采樣。然后對剩余電壓方案設(shè)置采樣速率至5kHz。
浴液和移液管溶液的組成、pH和克分滲透壓濃度列表如下。
用Clampex軟件(Axon Instruments)在線記錄在+40mV至-50mV間距之后的hERG-編碼的鉀通道尾電流振幅。尾電流振幅穩(wěn)定之后,將含受試物質(zhì)介質(zhì)的浴液應(yīng)用于細胞。條件是介質(zhì)的應(yīng)用對尾電流振幅無明顯影響,那么就建立該化合物的累積濃度效應(yīng)曲線。
在介質(zhì)存在下,一定比例的受試化合物特定濃度存在下,受試化合物的各濃度作用由尾電流振幅的表達定量。
通過使用標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)擬合軟件包,將構(gòu)成濃度-效應(yīng)曲線的抑制百分比值擬合到四參數(shù)Hill方程,確定受試化合物的效力(IC50)。如果在最高試驗濃度所見的抑制水平未超過50%,那么就未產(chǎn)生效力值因此引用該濃度下的抑制百分比值。
雖然式I化合物的藥理性質(zhì)如預(yù)期的隨結(jié)構(gòu)變化而變化,一般而言,式I化合物所具有的活性可在上述試驗(a)、(b)、(c)和(d)中的一個或多個中以下列濃度或劑量證明-試驗(a)-IC50,例如在0.001-0.1μM范圍內(nèi);試驗(b)-IC50,例如在0.001-0.1μM范圍內(nèi);試驗(c)-IC50,例如在0.1-10μM范圍內(nèi);試驗(d)-活性例如在1-200mg/kg/日范圍內(nèi);在試驗(d)中,在本發(fā)明受試化合物有效劑量下,未觀察到生理學(xué)上不可接受的毒性。因此當(dāng)以下文中所定義的劑量范圍給予上文所定義的式I化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽時,預(yù)期無不良毒理作用。
作為實例,使用上述抑制EGFR酪氨酸激酶蛋白質(zhì)磷酸化的試驗(a)及抑制erbB2酪氨酸激酶蛋白質(zhì)磷酸化的試驗(a),本文實施例1中描述化合物的IC50結(jié)果列于下表A表A
根據(jù)本發(fā)明的再一方面,提供了一種藥用組合物,該組合物包含如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯及藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明組合物可為合適的口服使用形式(例如片劑、錠劑、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性混懸劑、乳劑、可分散散劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑),局部使用形式(例如軟膏、乳膏、凝膠劑或水性或油性溶液劑或混懸劑),吸入給藥形式(例如微分散劑或液體氣霧劑),吹入給藥形式(例如微分散劑)或腸胃外給藥形式(例如靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)給藥的無菌水性或油性溶液劑或肌內(nèi)給藥或直腸給藥的栓劑)。
本發(fā)明組合物可通過使用本領(lǐng)域眾所周知的常規(guī)藥周賦形劑以常規(guī)方法獲得。因此,用于口服使用的組合物可含例如一種或多種著色劑、甜味劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。
與一種或多種賦形劑組合產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將必要地隨所治療的宿主和具體的給藥途徑而變化。例如,將用于人口服給藥的制劑一般含例如與合適且方便量的賦形劑混合的0.5mg-0.5g活性劑(更合適地0.5-100mg,例如1-30mg),賦形劑的量可在組合物總重量的約5%至約98%范圍內(nèi)變化。
用于治療或預(yù)防目的的式I喹唑啉衍生物劑量的大小自然地將根據(jù)病癥的性質(zhì)和嚴重性、動物或患者的年齡和性別及給藥途徑、根據(jù)醫(yī)學(xué)上眾所周知的原則而變化。
在使用式I喹唑啉衍生物用于治療或預(yù)防目的時,一般以接受的日劑量范圍在例如0.1mg/kg-75mg/kg體重給藥,如果必要以分劑量給藥。一般而言,當(dāng)采用腸胃外給藥途徑時,將給予較低劑量。因此,例如靜脈內(nèi)給藥的劑量范圍例如一般將采用0.1mg/kg-30mg/kg體重。類似地,吸入給藥的劑量范圍例如將采用0.05mg/kg-25mg/kg體重。然而優(yōu)選口服給藥,特別是以片劑形式。典型地,單位劑型將含約0.5mg-0.5g本發(fā)明化合物。
我們發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物具有抗增殖性質(zhì)例如抗癌性質(zhì),該性質(zhì)據(jù)認為由其erbB家族受體酪氨酸激酶抑制活性產(chǎn)生,尤其是抑制EGF受體(erbB1)酪氨酸激酶。此外,相比抗其他酪氨酸激酶例如erbB2,某些本發(fā)明的化合物具有顯著更強的抗EGF受體酪氨酸激酶效力。此類化合物具有足夠的抗EGF受體酪氨酸激酶效力,以致于它們可以足夠抑制EGF受體酪氨酸激酶的量使用,同時顯示很小或明顯較低的抗其他酪氨酸激酶例如erbB2的活性。此類化合物可能用于選擇性抑制EGF受體酪氨酸激酶并可能用于有效治療,例如EGF驅(qū)動的腫瘤。
因此,期望本發(fā)明化合物用于治療由erbB受體酪氨酸激酶(尤其是EGF受體酪氨酸激酶)單獨或部分介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥,即此類化合物可用于在有此治療需要的溫血動物中產(chǎn)生erbB受體酪氨酸激酶抑制作用。因此本發(fā)明化合物提供以抑制erbB家族中一種或多種受體酪氨酸激酶為特征、治療惡性細胞的方法。特別是本發(fā)明化合物可用于產(chǎn)生由抑制erbB受體酪氨酸激酶單獨或部分介導(dǎo)的抗增殖和/或前-細胞凋亡和/或抗侵襲作用。特別是,本發(fā)明化合物預(yù)期可用于預(yù)防或治療對抑制一種或多種erbB受體酪氨酸激酶敏感的那些腫瘤,例如涉及驅(qū)動這些腫瘤細胞增殖和生存信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟的EGF和/或erbB2和/或erbB4受體酪氨酸激酶(尤其是EGF受體酪氨酸激酶)。因此本發(fā)明化合物預(yù)期可通過提供抗增殖作用用于治療銀屑病、良性前列腺增生(BPH)、動脈粥樣硬化及再狹窄和/或癌癥,特別是治療erbB受體酪氨酸激酶敏感癌癥。此類良性或惡性腫瘤可影響任何組織并包括非實體瘤例如白血病、多發(fā)性骨髓瘤或淋巴瘤,也包括實體瘤例如膽管、骨、膀胱、腦/CNS、乳腺、結(jié)腸直腸、子宮內(nèi)膜、胃、頭和頸、肝、肺、神經(jīng)細胞、食管、卵巢、胰腺、前列腺、腎、皮膚、睪丸、甲狀腺、子宮及外陰癌。
根據(jù)本發(fā)明的這一方面,提供了用作藥物的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面,提供了式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增殖作用的用途。
因此根據(jù)本發(fā)明的這一方面,提供了如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增殖作用的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了在有此治療需要的溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增殖作用的方法,該方法包括給予所述動物有效量的如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面,提供了如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備藥物中的用途,該藥物用于預(yù)防或治療對抑制涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟的erbB受體酪氨酸激酶例如EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)敏感的那些腫瘤。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了在有此治療需要的溫血動物例如人中預(yù)防或治療對抑制一種或多種涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖和/或存活信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟的erbB家族受體酪氨酸激酶例如EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)敏感的那些腫瘤的方法,該方法包括給予所述動物有效量的如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了用于預(yù)防或治療對erbB受體酪氨酸激酶例如EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)抑制敏感的那些腫瘤的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯,這類酪氨酸激酶涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟。
根據(jù)本發(fā)明再一方面,提供了如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備藥物中的用途,該藥物用于提供EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)酪氨酸激酶抑制作用。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了在有需要的溫血動物例如人中提供EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)酪氨酸激酶抑制作用的方法,該方法包括給予所述動物有效量的如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了用于提供EGFR和/或erbB2和/或erbB4(尤其是EGFR)酪氨酸激酶抑制作用的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明的進一步特征,提供了如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備用于提供選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制作用的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了在有需要的溫血動物例如人中提供選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制作用的方法,該方法包括給予所述動物有效量的如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了用于提供選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制作用的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
“選擇性EGFR激酶抑制作用”表示式I喹唑啉衍生物對EGF受體酪氨酸激酶比對其他激酶更有效。特別是某些本發(fā)明的化合物對EGF受體激酶比對其他酪氨酸激酶例如其他erbB受體酪氨酸激酶特別是erbB2更有效。例如本發(fā)明的選擇性EGFR激酶抑制劑對EGF受體酪氨酸激酶比對erbB2酪氨酸激酶更有效至少5倍,優(yōu)選至少10倍,該效力由在合適試驗中的相對IC50值確定(例如通過比較上述特定受試化合物KB細胞試驗的IC50值與克隆24磷酸-erbB2細胞試驗的IC50值)。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面,提供了如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備藥物中的用途,該藥物用于治療癌癥(例如癌癥選自白血病、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤,膽管、骨、膀胱、腦/CNS、乳腺、結(jié)腸直腸、子宮內(nèi)膜、胃、頭和頸、肝、肺、神經(jīng)細胞、食管、卵巢、胰腺、前列腺、腎、皮膚、睪丸、甲狀腺、子宮及外陰癌)。
根據(jù)本發(fā)明這一方面的進一步特征,提供了治療有此治療需要的溫血動物例如人的癌癥(例如癌癥選自白血病、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤,膽管、骨、膀胱、腦/CNS、乳腺、結(jié)腸直腸、子宮內(nèi)膜、胃、頭和頸、肝、肺、神經(jīng)細胞、食管、卵巢、胰腺、前列腺、腎、皮膚、睪丸、甲狀腺、子宮及外陰癌)的方法,該方法包括給予所述動物有效量的如上文所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面,提供了用于治療癌癥(例如癌癥選自白血病、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤,膽管、骨、膀胱、腦/CNS、乳腺、結(jié)腸直腸、子宮內(nèi)膜、胃、頭和頸、肝、肺、神經(jīng)細胞、食管、卵巢、胰腺、前列腺、腎、皮膚、睪丸、甲狀腺、子宮及外陰癌)的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
如上所述,治療或預(yù)防特定疾病所需劑量的大小必然會變化,其中取決于所治療的宿主、給藥途徑及治療疾病的嚴重性。
上文中所定義的抗增殖治療可作為唯一的治療應(yīng)用或可除本發(fā)明喹唑啉衍生物外還包括常規(guī)手術(shù)或放射療法或化學(xué)療法。該化學(xué)療法可包括一種或多種下列類別的抗腫瘤藥物(i)如用于腫瘤學(xué)的抗增殖/抗腫瘤藥及其組合,例如烷化劑(例如順鉑、卡鉑、環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安和亞硝基脲);抗代謝物(例如抗葉酸劑例如氟嘧啶,如5-氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、甲氨蝶呤、阿糖胞苷和羥基脲;抗腫瘤抗生素(例如安慈拉環(huán)素類如阿霉素、爭光霉素、多柔比星、正定霉素、表柔比星、伊達比星、絲裂霉素-C、更生霉素及光神霉素);抗有絲分裂劑(例如長春花生物堿如長春新堿、長春堿、長春地辛和長春瑞濱及紫杉醇(taxoids)如泰素和泰索帝);及拓撲異構(gòu)酶抑制劑(例如表鬼臼毒素類如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康和喜樹堿);(ii)細胞生長抑制劑例如抗雌激素劑(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene),雌激素受體下調(diào)劑(例如氟維司群),抗雄激素劑(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和醋酸環(huán)丙孕酮),LHRH拮抗劑或LHRH激動劑(如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林),孕激素(例如醋酸甲地孕酮),芳化酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、vorazole和依西美坦)及5α-還原酶抑制劑例如非那雄胺;(iii)抑制癌細胞侵入的藥物(例如金屬蛋白酶抑制劑如馬立馬司他和尿激酶纖溶酶原活化劑受體功能抑制劑);(iv)生長因子功能抑制劑,例如此類抑制劑包括生長因子抗體、生長因子受體抗體(例如抗-erbb2抗體曲妥單抗[HerceptinTM]和抗-erbb1抗體西妥昔單抗[C225])、法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑,例如其他表皮生長因子家族抑制劑(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制劑如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(gefitinib,AZD1839),N-(3-乙炔基苯基)-6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(erlotinib,OSI-774)及6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI1033)),例如血小板-來源的生長因子家族抑制劑及例如肝細胞生長因子家族抑制劑;(v)例如那些抑制血管內(nèi)皮細胞生長因子作用的抗血管形成劑(例如抗血管內(nèi)皮細胞生長因子抗體貝伐單抗[AvastinTM],例如那些在國際專利申請WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856和WO98/13354中公開的化合物)及通過其他機制起作用的化合物(例如利諾胺、整合蛋白αvβ3功能抑制劑和血管生長抑素);(vi)血管破壞劑例如考布他汀A4及在國際專利申請WO99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO 02/08213中公開的化合物;(vii)反義療法,例如直接作用于如上所列靶的那些療法,例如抗-ras反義藥物ISIS 2503;(viii)基因治療方法,包括例如取代異?;蚶绠惓53或異常BRCA1或BRCA2方法,GDEPT(基因?qū)蛎盖八幹委?方法例如使用胞嘧啶脫氨酶、胸苷激酶或細菌硝基還原酶的那些方法,及增加患者對化學(xué)療法或放射療法例如多重耐藥基因療法耐受性的方法;及(ix)免疫療法,包括例如增加患者腫瘤細胞免疫原性的離體和體內(nèi)方法,例如用細胞因子例如白介素2、白介素4或粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子轉(zhuǎn)染,降低T-細胞無變應(yīng)性的方法,使用轉(zhuǎn)染免疫細胞例如細胞因子轉(zhuǎn)染的樹枝狀細胞的方法,使用細胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細胞系的方法及使用抗基因型抗體的方法。
該聯(lián)合治療可通過同時、序貫或分別給予治療的各組分實現(xiàn)。此類組合產(chǎn)品在上文中所描述的劑量范圍內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明化合物及在其被批準(zhǔn)的劑量范圍內(nèi)應(yīng)用其他活性藥物。
根據(jù)本發(fā)明的這一方面,提供了包含如上文中所定義的式I喹唑啉衍生物及如上文中所定義的另外抗腫瘤劑的藥品,用于聯(lián)合治療癌癥。
雖然式I喹唑啉衍生物的主要價值是作為治療藥物用于溫血動物(包括人),但需要抑制erbB受體酪氨酸蛋白激酶的作用時,它們也有用。因此,以藥理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)它們可用于新生物測試方法的開發(fā)及用于新藥理學(xué)試劑的研究。
現(xiàn)在,本發(fā)明將通過下列非限定性實施例舉例說明,其中除非另外說明,否則(i)溫度以攝氏度(℃)表示;操作在室溫或環(huán)境溫度下進行,即溫度在18-25℃范圍內(nèi);(ii)有機溶液用無水硫酸鎂干燥;溶劑的蒸發(fā)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、減壓(600-4000帕斯卡;4.5-30mmHg)、浴溫最高達60℃下進行;(iii)層析指硅膠閃式層析;薄層層析(TLC)在硅膠板上進行;(iv)一般而言,反應(yīng)過程用TLC和/或分析型LC-MS跟蹤,反應(yīng)時間僅示例性給出;(v)終產(chǎn)物具有滿意的質(zhì)子核磁共振(NMR)圖譜和/或質(zhì)譜數(shù)據(jù);(vi)收率僅示例性給出,并且未必是通過勤奮工藝開發(fā)獲得的那些收率;如果需要更多的原料可重復(fù)制備;(vii)當(dāng)給出時,主要診斷質(zhì)子的NMR數(shù)據(jù)為δ值形式,以相對于內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(TMS)的百萬分數(shù)(ppm)表示,除非另外說明,否則于300MHz、用全氘代二甲基亞砜(DMSO-d6)為溶劑測定;使用下列縮寫s,單峰;d,雙重峰;t,三重峰;q,四重峰;m,多重峰;b,寬峰;(viii)化學(xué)符號具有其通常的含義;使用SI單位和符號;(ix)溶劑比例以體積體積(v/v)術(shù)語給出;及(x)質(zhì)譜(MS)以70電子伏特的電子能量、用使用直接暴露探針的化學(xué)電離(CI)方式運行,電離通過電噴霧實現(xiàn);以m/z值表示;一般而言,僅報告表示母體分子質(zhì)量的離子;除非另外說明,否則所引用的分子離子為(MH)+;(xi)當(dāng)合成被描述為類似于前面實施例所描述的方法時,所用的量為與用于前述實施例的量等同的毫摩爾比率;(xii)熔點未校正,用Mettler SP62自動熔點儀或Buchi 535熔點儀測定;及(xiii)使用下列縮寫DMAN,N-二甲基乙酰胺HATU 六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基尿IMS工業(yè)甲基化酒精IPA異丙醇MeOH 甲醇;及NMPN-甲基吡咯烷-2-酮注以下實施例NMR SpectrumNMR圖譜;Mass Spectrum質(zhì)譜。
實施例14-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉 將HATU(28.9g)加入到攪拌下的4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)喹唑啉二鹽酸鹽(30g)、乙醇酸(5.40g)及二-異丙基乙胺(44.70ml)的二氯甲烷(900ml)溶液中。1.5小時后,反應(yīng)混合物用氫氧化鈉溶液(2M)、水和飽和鹽水洗滌。然后所得產(chǎn)物經(jīng)閃式硅膠層析純化,用3%MeOH/二氯甲烷洗脫。合并含所需產(chǎn)物的組分并真空濃縮,乙腈重結(jié)晶得到白色固體標(biāo)題產(chǎn)物(29.6g);NMR Spectrum(DMSO d6)1.65-1.81(m,2H),1.99-2.10(m,2H),3.26-3.34(m,1H),3.37-3.47(m,1H),3.60-3.68(m,1H),3.81-3.89(m,1H),3.95(s,3H),4.14(d,2H),4.50(t,1H),4.78(m,1H),7.25(s,1H),7.30(t,1H),7.46-7.55(m,2H),7.88(s,1H),8.40(s,1H),9.55(s;1H);Mass Spectrum(M+H)+460.94.
起始原料4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)喹唑啉二鹽酸鹽按以下方法制備將6-乙酰氧基-4-氯-7-甲氧基喹唑啉(WO 01/66099中的實施例25-5;10.0g,39.6mmole)分批加入到攪拌下的在冰/水浴中冷卻至10℃的7N氨甲醇溶液(220ml)中。攪拌一小時后,將沉淀過濾,用乙醚洗滌并在高真空下徹底干燥,得到4-氯-6-羥基-7-甲氧基喹唑啉(5.65g,67.8%);NMR Spectrum(DMSO d6)3.96(s,3H);7.25(s,1H);7.31(s,1H);8.68(s,1H);Mass Spectrum(M+H)+211于5℃、在氮氣氛下,將偶氮二甲酸二叔丁酯(9.22g)的二氯甲烷(20ml)溶液緩慢加入到攪拌下的4-氯-6-羥基-7-甲氧基喹唑啉(5.63g)、4-羥基-1-叔丁氧基羰基哌啶(8.06g)和三苯基膦(10.5g)的二氯甲烷(100ml)懸浮液中。使反應(yīng)混合物升溫至室溫,保持16小時。然后真空蒸發(fā)該反應(yīng)混合物并用硅膠吸附,產(chǎn)物用異己烷/乙酸乙酯/三乙胺(75/24/1然后70/29/1)洗脫。合并含所需產(chǎn)物的組分并真空蒸發(fā),得到白色固體4-[(4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(10.3g);1H NMR Spectrum(DMSO d6)1.40(s,9H),1.56-1.69(m,2H),1.93-2.04(m,2H),3.20-3.31(m,2H),3.60-3.70(m,2H),4.00(s,3H),4.89(m,1H),7.45(s,1H),7.50(s,1H),8.86(s,1H);Mass Spectrum(M+H)+394.
將4.0M HCl/二氧六環(huán)(4.0ml)加入到4-[(4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.62g)、3-氯-2-氟苯胺(1.08g)的異丙醇(50ml)懸浮液中。攪拌該反應(yīng)混合物并于100℃加熱2小時。將黃色沉淀趁熱過濾,并用異丙醇接著用乙醚洗滌,真空干燥,得到6-(哌啶-4-基氧基)-4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉二鹽酸鹽(2.38g);1H NMR Spectrum;(DMSO d6)1.84-1.99(m,2H),2.22-2.33(m,2H),3.12-3.33(m,4H),4.00(s,3H),5.08(m,1H),7.34(t,1H),7.40(s,1H),7.50(t,1H),7.62(t,1H),8.80(s,1H),8.84-8.94(m,2H),8.99-9.11(m,1H);Mass Spectrum(M+H)+403.
實施例24-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙酰基)哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉L-酒石酸鹽二水合物于80℃將L-酒石酸(0.85g)的水(5ml)溶液加入到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉(2.5g)的IMS(25ml)溶液中。于80℃攪拌5分鐘后,在1小時之內(nèi)將該溶液冷卻至室溫。在約45℃時,析出固體結(jié)晶。在冷卻至0-5℃前,該混合物室溫攪拌30分鐘。將固體過濾并用IMS(2×7.5ml)洗滌。固體于50℃真空干燥至恒重,得到標(biāo)題產(chǎn)物(3.13g;產(chǎn)率89.3%)。
NMR Spectrum(DMSO d6)1.63-1.81(m,2H);1.98-2.11(m,2H);3.28-3.45(m,2H);3.59-3.67(m,1H);3.83-3.90(m,1H);3.95(s,3H);4.14(m,2H);4.32(s,2H);4.55(bs,1H),4.77(m,1H);7.24(s,1H);7.29(t,1H);7.47-7.56(m,2H);7.89(s,1H);8.39(s,1H)9.62(bs,1H);熔點開始128.8℃,峰137.4℃實施例34-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙酰基)哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉馬來酸鹽于80℃將馬來酸(0.66g)的IMS(10ml)溶液加入到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉(2.5g)的IMS(25ml)溶液中。加入水(3ml)。于80℃攪拌5分鐘后,在1小時之內(nèi)將該溶液冷卻至室溫。在大約50℃,析出固體結(jié)晶。在冷卻至0-5℃前,該混合物室溫攪拌30分鐘。將固體過濾并用IMS(2×7.5ml)洗滌。固體于50℃真空干燥至恒重。該固體在10%IPA水溶液中、于82-85℃加熱1小時,然后在1小時之內(nèi)冷卻至室溫。將固體過濾并用IPA(2×5ml)洗滌。固體于50℃真空干燥至恒重,得到標(biāo)題產(chǎn)物(1.63g;產(chǎn)率52.3%)。
NMR Spectrum(DMSO d6)1.63-1.82(m,2H);2.00-2.10(m,2H);3.28-3.45(m,2H);3.59-3.67(m,1H);3.83-3.90(m,1H);3.98(s,3H);4.14(s,2H);4.79(m,1H);6.19(s,2H);7.25(s,1H);7.33(t,1H);7.52-7.59(m,2H);7.95(s,1H);8.54(s,1H)10.14(bs,1H);熔點開始165.4℃,峰169.7℃
實施例44-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉甲磺酸鹽實施例4.1于40℃將甲磺酸(1.02g)的水(7ml)溶液加入到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉(4.6g)的IPA(25ml)溶液中。于80℃加熱該混合物,其間所有固體均溶解。將該溶液過濾到干凈的容器中,并保持溶液溫度在50℃以上。用15%IPA水溶液(18ml)在線洗滌后,于40℃加熱合并的濾液和洗滌液。在攪拌過程中,析出固體結(jié)晶。在30分鐘內(nèi)將混合物冷卻至室溫,在此溫度下攪拌1小時。將固體過濾,用IPA(2×7ml)洗滌并于50℃真空干燥至恒重,得到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉甲磺酸鹽(4.66g;產(chǎn)率83%);NMR Spectrum(DMSO d6)1.63-1.81(m,2H);2.00-2.14(m,2H);2.34(s,3H);3.30-3.48(m,2H);3.57-3.69(m,1H);3.80-3.90(m,1H);4.03(s,3H);4.14(s,2H);4.87(m,1H);7.36(s,1H);7.40(t,1H);7.59(t,1H);7.68(t,1H);8.11(s,1H);8.85(s,1H)11.24(bs,1H);熔點開始228.9℃,峰232℃實施例4.2通過35-40℃加熱將4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉(25g)溶于NMP(125ml)中。將所得溶液過濾到干凈的容器中,并保持溫度在35-40℃。用NMP(25ml)在線洗滌后,加入甲磺酸(5.48g),接著加入IMS(150ml)。將該混合物在2小時之內(nèi)冷卻至室溫,其間析出甲磺酸鹽結(jié)晶。將反應(yīng)混合物再冷卻至0-5℃。將固體過濾,用IMS(2×50ml)洗滌并于55℃真空干燥至恒重,得到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉甲磺酸鹽(26.48g;產(chǎn)率87.6%);
NMR Spectrum(DMSOd6)1.62-1.81(m,2H);2.00-2.15(m,2H);2.36(s,3H);3.29-3.48(m,2H);3.57-3.68(m,1H);3.80-3.90(m,1H);4.03(s,3H);4.14(s,2H);4.89(m,1H);7.38(s,1H);7.40(t,1H);7.60(t,1H);7.68(t,1H);8.12(s,1H);8.86(s,1H)11.24(bs,1H);熔點開始230.5℃,峰232℃實施例54-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉于20℃-25℃、在氮氣下,攪拌4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)-喹唑啉二鹽酸鹽乙醇化物(91.8g)、4-(二甲氨基)吡啶(73.3g)及乙腈(330ml)。維持溫度在小于30℃下,加入乙酰氧基乙酰氯(28ml),接著用乙腈(37ml)在線洗滌。反應(yīng)混合物室溫攪拌60分鐘,然后加入水(250ml)和47%w/w氫氧化鈉溶液(77.2ml),接著用水(25ml)在線洗滌,保持溫度在小于30℃下。該反應(yīng)混合物室溫攪拌120分鐘,然后分離下面的水層。向有機層中加入水(735ml)并室溫攪拌混合物直到固體析出。將固體過濾,用50%乙腈水溶液(2×90ml)洗滌,然后在真空干燥箱中,在50℃-55℃之間干燥,得到標(biāo)題產(chǎn)物(65.8g;產(chǎn)率83.9%);熔點195.5-196.5℃;NMR Spectrum(DMSO d6).64-1.83(m,2H);1.98-2.14(m,2H);3.28-3.48(m,2H);3.57-3.67(m,1H);3.81-3.92(m,1H);4.00(s 3H);4.14(s,2H);4.81(m,1H);7.27(s1H);7.36(t1H);7.54-7.64(m 2H);8.00(s 1H);8.66(s 1H);Mass Spectrum(M+H)+460.9.
起始原料4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)-喹唑啉二鹽酸鹽乙醇化物按以下方法制備。
步驟14-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-羥基-7-甲氧基喹唑啉的制備于70℃、在氮氣下,攪拌6-乙酰氧基-7-甲氧基-4(1H)-喹唑啉(150g;按WO 96/15118中實施例39的描述制備)、N,N-二異丙基乙胺(123ml)和甲苯(1275ml)。于70℃,用15分鐘向漿狀物中加入磷酰氯(150ml)。該混合物于70℃反應(yīng)2小時以完全氯化。加入磷酰氯30分鐘后,形成黑棕色溶液。向反應(yīng)混合物中加入甲苯(680ml),接著于70℃、用10分鐘加入3-氯-2-氟苯胺(78ml)。加完后,析出固體沉淀形成米黃色漿狀物。將漿狀物于70℃保持1小時,然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物過濾并用甲苯(2×300ml)、IMS水溶液(2×450ml)和IMS(2×450ml)洗滌。固體在過濾器中抽干過夜,得到6-乙酰氧基-4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉HCl鹽;NMR Spectrum(DMSO d6)2.39(s,3H);4.02(s,3H);7.36(t,1H);7.58(s,1H);7.64(t,1H);8.79(s,1H)8.91(s,1H);11.93(bs 1H);Mass SpectrumM+H362.
室溫攪拌6-乙酰氧基-4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉.HCl鹽(約253g)、甲醇(1900ml)和水(632.5ml)。滴加氫氧化鈉溶液(47%w/w;108ml),該反應(yīng)混合物加熱至60℃形成黑色溶液。該溶液于60℃保持1小時,然后濾到干凈的容器中。將混合物冷卻至室溫,然后加入醋酸(72.8ml)。將沉淀出的固體過濾,用50%甲醇水溶液(500ml)和甲醇(500ml)洗滌,然后于45℃真空干燥箱干燥,得到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-羥基-7-甲氧基喹唑啉;(204.8g;產(chǎn)率75.7%);熔點265-268℃;NMR Spectrum(DMSO d6)4.01(s,3H);7.24(s,2H);7.32(t,1H);7.51-7.56(m,2H);7.78(s,1H);8.58(s,1H);Mass Spectrum(M+H)+320.
步驟24-[4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氨基喹唑啉-6-基氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯的制備于100℃-105℃、在氮氣下,攪拌4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-羥基-7-甲氧基喹唑啉(116.7g)、4-甲基磺酰氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(153.1g)、碳酸鉀(75.7g)及NMP(700ml)24小時。將該混合物冷卻至75℃-80℃,然后加入水(1080ml),同時維持溫度在70℃以上。該混合物于70℃-75℃攪拌90分鐘,然后冷卻至20℃-25℃。將所得固體過濾,用水(2×175ml)洗滌,然后在真空干燥箱中、在50℃-55℃之間干燥,得到4-[4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯;(174.4g;產(chǎn)率95%);熔點192-193.5℃;NMR Spectrum:(DMSO d6)1.40-1.42(d,9H);1.62-1.72(m,2H);1.99-2.08(m,2H);3.24-3.33(m,2H);3.65-7.73(m,2H);4.00(s,3H);4.76(m 1H);7.28(s;1H);7.37(t,3H);7,56(t,1H);7.63(t,1H);8.01(s,1H);8.72(s 1H);Mass Spectrum(M+H)+503.
步驟34-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氫基-6-(哌啶-4-基氫基)-喹唑啉二鹽酸鹽乙醇化物的制備于70℃-75℃攪拌4-[4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(107.9g)、乙醇(1208ml)、濃鹽酸(67ml)及乙醇在線洗滌液(100ml)2小時。用1小時將該混合物冷卻至60℃,然后加入4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)-喹唑啉二鹽酸鹽晶種1,然后在3小時之內(nèi)冷卻至0℃-5℃。將所得固體過濾,用乙醇洗滌(2×100ml),然后在真空干燥箱中、在50℃-55℃之間干燥,得到4-(3-氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-基氧基)-喹唑啉二鹽酸鹽乙醇化物;(94.3g;產(chǎn)率81.4%);熔點212-214℃;NMR Spectrum(DMSO d6)1.89-2.00(m,2H);2.26-2.35(m,2H);3.16-3.35(m,4H);4.02(s,3H);5.09(s,1H);7.36(t,1H);7.42(s,1H);7.52(t,1H);7.64(t,1H);8.83(s 1H);8.88-8.97(m,2H);9.09(bs,1H);Mass Spectrum(M+H)+403.
注1所用晶種用上述相同的合成方法獲得,但未加晶種并緩慢冷卻。
實施例6磷酸二氫2-[4-{4-[3-氯-2-氟苯胺基]-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基}哌啶-1-基]-2-氧代乙基酯的制備 將4M鹽酸/1,4-二氧六環(huán)(1.95ml)加入到攪拌下的磷酸2-[4-(4-[3-氯-2-氟苯胺基]-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基酯二叔丁基酯(0.951g)的1,4-二氧六環(huán)(16ml)溶液中。攪拌該混合物過夜,然后加入乙醚(50ml)。過濾收集所得沉淀并干燥,得到白色固體標(biāo)題產(chǎn)物(0.77g);NMR Spectrum(DMSO d6)1.60-1.76(m,2H),2.11(m,2H),3.38(m,2H),3.69(m,1H),3.91(m,1H),4.02(s,3H),4.53(m,2H),5.02(m,1H),7.37(m,2H),7.55(m,1H),7.65(m,1H),8.53(s,1H),8.81(s,1H),11.86(br s,1H);Mass Spectrum(M+H)+541.
用作起始原料的磷酸2-[4-(4-[3-氯-2-氟苯胺基]-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基酯二叔丁基酯按以下方法制備。
將四唑(0.46g)及N,N-二乙基氨基亞磷酸二叔丁基酯(2.16g)加入到攪拌下的4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉(1.00g)的DMA(17ml)溶液中。室溫攪拌該混合物1小時,然后冷卻至0℃。滴加30%過氧化氫水溶液(1.23ml),使所得混合物升溫至室溫,并再攪拌2小時。然后將混合物冷卻至0℃,并加入偏亞硫酸氫鈉水溶液(10%,5ml)。二十分鐘后加入飽和碳酸氫鈉水溶液,直到溶液呈堿性。然后用乙酸乙酯(3×50ml)萃取反應(yīng)混合物并經(jīng)閃式硅膠柱層析純化,得到白色固體磷酸2-[4-(4-[3-氯-2-氟苯胺基]-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基酯二叔丁基酯(0.951g);質(zhì)譜(M+H)+653。
實施例7藥用組合物下面例舉了本文所定義的本發(fā)明有代表性的藥物劑型(活性成分稱為“化合物X”),用于人的治療或預(yù)防用途(a)片劑I mg/片化合物X 100乳糖Ph.Eur182.75交聯(lián)羧甲基纖維素鈉12.0玉米淀粉漿(5%w/v漿) 2.25硬脂酸鎂 3.0(b)注射劑I(50mg/ml)化合物X 5.0%w/v1M氫氧化鈉溶液15.0%v/v0.1M鹽酸(調(diào)節(jié)pH至7.6)聚乙二醇400 4.5%w/v加注射用水至 100%上述制劑可通過藥學(xué)領(lǐng)域中眾所周知的常規(guī)方法制備。例如片劑可通過將各組分混合并將混合物壓制成片制備。
權(quán)利要求
1.一種式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯 其中R1選自氫和甲氧基;且R2為氫。
2.權(quán)利要求1的喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯,所述衍生物為4-(3-氯-2-氟苯胺基)-6-[1-(羥乙?;?哌啶-4-基氧基]-7-甲氧基喹唑啉。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
4.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的喹唑啉衍生物,所述衍生物為藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式。
5.權(quán)利要求4的喹唑啉衍生物,其中所述藥學(xué)上可接受的酸加成鹽為由選自馬來酸、酒石酸和甲磺酸的有機酸形成的酸加成鹽。
6.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽,所述衍生物為藥學(xué)上可接受的磷酸酯。
7.權(quán)利要求1的喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽,所述衍生物為磷酸二氫2-[4-{4-[3-氯-2-氟苯胺基]-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基}哌啶-1-基]-2-氧代乙基酯。
8.一種藥用組合物,所述組合物包含權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯以及組合應(yīng)用的藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
9.用作藥物的權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
10.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備用于在溫血動物如人中產(chǎn)生抗增殖作用的藥物中的用途。
11.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯在制備藥物中的用途,該藥物用于預(yù)防或治療對erbB受體酪氨酸激酶抑制敏感的那些腫瘤,該酪氨酸激酶涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟。
12.一種在有此治療需要的溫血動物中產(chǎn)生抗增殖作用的方法,所述方法包括給予所述動物有效量的上述定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
13.一種預(yù)防或治療有此治療需要的溫血動物腫瘤的方法,這種腫瘤對一種或多種erbB家族受體酪氨酸激酶的抑制敏感,該酪氨酸激酶涉及導(dǎo)致腫瘤細胞增殖和/或存活的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟,所述方法包括給予所述動物有效量的權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
14.一種提供有需要的溫血動物選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制作用的方法,所述方法包括給予所述動物有效量的權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
15.一種治療有此治療需要的溫血動物癌癥的方法,所述方法包括給予所述動物有效量的權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯。
16.一種制備權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的式I喹唑啉衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的酯的方法,所述方法包括將式II化合物或其鹽 其中R1如權(quán)利要求1所定義,且如果必要保護式II化合物中的任何官能團;與式III羧酸或其活性衍生物偶合 其中R2如權(quán)利要求1所定義,且如果必要保護式III化合物中的任何官能團;然后,如果必要以任何順序(i) 用常規(guī)技術(shù)除去任何保護基團;(ii) 形成藥學(xué)上可接受的鹽;及(iii)形成藥學(xué)上可接受的酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)喹唑啉衍生物,其中R
文檔編號A61K31/517GK1856487SQ200480027248
公開日2006年11月1日 申請日期2004年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月29日
發(fā)明者R·H·布拉德伯里, L·F·A·亨內(nèi)奎恩, J·G·凱特爾, J·麥卡布, A·特納 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司