專利名稱：抗菌劑木替靈的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有例如抗微生物活性如抗菌活性的化合物；更具體地講，本發(fā)明涉及木替靈類化合物(mutilins)。
一方面，本發(fā)明提供了式I化合物 其中R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成吡咯烷基或哌啶基，R1是下式所示的基團(tuán) R3和R′3是氫、氘或鹵素，R4是氫或烷基，例如(C1-4)烷基，R5是氫或烷基，例如(C1-4)烷基，R6、R7和R8是氫或氘，R9是氨基、烷基、芳基、雜環(huán)基或巰基；并且，如果X是氧，R9還可以是氫；R10是氫或烷基，例如(C1-4)烷基，R’10是烷基，例如(C1-4)烷基，X是硫、氧、NR10或N+(R’10)2，例如在合適的陰離子存在下；Y是硫或氧，且m是0、1或2；
條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，經(jīng)由Y連接在該哌啶環(huán)上的式I的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型，例如，條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，則R9的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型；例如，條件是如果在式I化合物中m是0，則式I的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
式N+(R’10)2基團(tuán)中的陰離子包括適宜的陰離子，例如常用作銨基中的抗衡離子的陰離子。
在式I化合物中R3、R′3、R4、R5、R6、R7和R8優(yōu)選為氫；R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成吡咯烷或哌啶(具有如上所述的條件)，例如未取代的吡咯烷或哌啶(除了被式-C(＝X)R9的基團(tuán)取代以外)，或取代的吡咯烷或哌啶(除了被式-C(＝X)R9的基團(tuán)取代以外還進(jìn)一步被取代，例如被一個(gè)或多個(gè)有機(jī)化學(xué)、例如截短側(cè)耳素(pleuromutilin)化學(xué)中的常用基團(tuán)取代)。吡咯烷或哌啶優(yōu)選是未取代的(除了被式-C(＝X)R9的基團(tuán)取代以外)。在式I化合物中，吡咯烷和哌啶包含基團(tuán)-N(R1)，并且與基團(tuán)-(CH2)m-Y結(jié)合?；鶊F(tuán)-N(R1)與基團(tuán)-(CH2)m-Y可以是連位的，或者在吡咯烷或哌啶環(huán)的另一個(gè)位置上，例如在1，2；1，3；1，4；1，5位上，并且對(duì)于哌啶，還可以在1，6位上；對(duì)于哌啶環(huán)，優(yōu)選在1，3或1，4位上，對(duì)于吡咯烷環(huán)，優(yōu)選在1，2或1，3位上；R9優(yōu)選為烷基，例如(C1-8)烷基，如(C1-4)烷基，例如未取代或取代的烷基，例如被截短側(cè)耳素化學(xué)中的常規(guī)基團(tuán)取代，例如被一個(gè)或多個(gè)氨基、雜環(huán)基，例如包括含有1或2個(gè)氮原子的5或6元環(huán)、咪唑基取代。如果R9是被氨基和例如雜環(huán)基取代的烷基時(shí)，R9優(yōu)選是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分，例如其中X是氧的基團(tuán)-C(＝X)-可視為所述氨基酸的羰基部分；
X優(yōu)選為氧；Y優(yōu)選為硫，且m優(yōu)選為0或1。
除非在本文中另有說(shuō)明，否則雜環(huán)基包括具有1-4個(gè)選自S、O和N的雜原子例如N的5或6元環(huán)；該環(huán)任選地與另外的環(huán)(系)稠合，例如與苯環(huán)稠合；或者與雜環(huán)稠合。雜環(huán)基包括未取代或取代的雜環(huán)基，例如被有機(jī)化學(xué)例如截短側(cè)耳素化學(xué)中的常用基團(tuán)取代。烷基包括(C1-8)烷基，例如(C1-4)烷基。芳基包括苯基。氨基包括游離的胺基團(tuán)、烷基胺和二烷基胺。
另一方面，本發(fā)明提供了式I化合物，其中R3、R′3、R4、R5、R6、R7和R8是氫；R1是下式所示的基團(tuán) R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶或吡咯烷；R9是烷基；X是氧；Y是硫；且m是0或1；條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S，且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，經(jīng)由Y連接在該哌啶環(huán)上的式I的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型；例如，條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S，且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，R9的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型；例如，條件是如果在式I化合物中m是0，則式I的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
另一方面，本發(fā)明提供了下式所示的化合物
其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3p、R′3p、R6p、R7p和R8p的定義同上文中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義，且R5p是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選為氫；其中如果經(jīng)由硫原子連接在哌啶環(huán)上的基團(tuán)是在該哌啶環(huán)的3-位上并且R5p是氫的話，則連接在硫原子上的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型；例如，條件是在連接在哌啶環(huán)氮原子上的基團(tuán)中，胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
另一方面，本發(fā)明提供了下式所示的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3q、R′3q、R6q、R7q和R8q的定義同上文中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；R5q是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選為氫；Rq是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分；例如包括下式所示的化合物
其中R′q的定義同上文中關(guān)于Rq的定義，例如，條件是在基團(tuán)Rq或R′q中，氨基酸殘基的胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
另一方面，本發(fā)明提供了式Ir的化合物 和式Is的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3r、R′3r、R6r、R7r和R8r，或者R3s、R′3s、R6s、R7s和R8s的定義分別同上文中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；R5r或R5s分別是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選為氫；R1r或R1s分別是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分；例如，在式Ir化合物中，經(jīng)由硫原子連接在哌啶環(huán)上的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型；例如，在基團(tuán)R1r或R1s中，氨基酸殘基的胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
另一方面，本發(fā)明提供了化合物，例如選自下列的化合物14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁酰基-哌啶-3(S)-基)硫基)乙?；鵠木替靈，例如包括14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?哌啶-3(S)-基)硫基)乙?；鵠木替靈；和14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁?；?哌啶-3(S)-基)硫基)乙酰基]木替靈；14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁酰基-哌啶-4-基)硫基)乙?；鵠木替靈，例如包括14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁酰基-哌啶-4-基)硫基)乙酰基]木替靈，和14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁酰基-哌啶-4-基)硫基)乙?；鵠木替靈；14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-哌啶-3-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈，例如包括14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈，和14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-哌啶-3(R)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈，例如14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈，和14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁酰基)-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈；14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-吡咯烷-2-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈，例如包括14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-吡咯烷-2(R)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈，和14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁酰基)-吡咯烷-2(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈，例如14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-吡咯烷-2(R)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈和14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁酰基)-吡咯烷-2(R)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈，
14-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈，例如包括14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)-硫基乙?；鵠-木替靈和14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)-硫基乙?；鵠-木替靈；和14-O-[(N-組氨?；?吡咯烷-3-基)硫基乙酰基]木替靈，例如包括4-O-[(N-(R)-組氨?；?吡咯烷-3-基)硫基乙酰基]木替靈，和4-O-[(N-(S)-組氨?；?吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈，例如游離形式或鹽形式的上述化合物，例如與鹽酸形成的鹽；例如鹽酸鹽。
14-O-[(N-組氨酰基-吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈是14-O-[(N-(3-(咪唑-4-基)-2-氨基-丙酰基-吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈。
本發(fā)明提供的化合物在下文中稱為“本發(fā)明化合物”。本發(fā)明化合物包括任何形式的化合物，例如游離形式、鹽形式、溶劑化物形式以及鹽和溶劑化物形式。式I化合物包括式Ip、Iq、Iq′、Ir和Is化合物。
另一方面，本發(fā)明提供了鹽形式、或者鹽形式并且是溶劑化物形式、或者溶劑化物形式的式I化合物。
式I化合物的鹽包括可藥用鹽，例如包括金屬鹽或酸加成鹽。金屬鹽包括例如堿金屬鹽或堿土金屬鹽；酸加成鹽包括式I化合物與酸形成的鹽，所述酸是例如氫富馬酸、富馬酸、萘-1，5-磺酸、鹽酸、氘氯酸；優(yōu)選鹽酸或氘氯酸。可將游離形式的式I化合物轉(zhuǎn)化成鹽形式的相應(yīng)化合物；反之亦然。可將游離形式或鹽形式并且呈溶劑化物形式的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化成非溶劑化物形式的游離形式或鹽形式的相應(yīng)化合物；反之亦然。
本發(fā)明化合物可以以異構(gòu)體及其混合物，例如旋光異構(gòu)體、順反構(gòu)型異構(gòu)體的形式存在。例如，本發(fā)明化合物可含有不對(duì)稱碳原子，并因此可以以非對(duì)映體及其混合物，例如差向異構(gòu)體的形式存在。例如，在式I化合物中，經(jīng)由基團(tuán)-(CH2)m-Y與吡咯烷或哌啶環(huán)連接的基團(tuán)可以呈(R)-構(gòu)型和(S)-構(gòu)型，包括其混合物。例如，如果R9是被胺取代的烷基，例如R9是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分，R9中的所述胺基團(tuán)可以呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，包括其混合物。
可根據(jù)需要分離異構(gòu)體、非對(duì)映體和差向異構(gòu)體混合物，例如按照常規(guī)方法分離，以獲得純的異構(gòu)體。純的異構(gòu)體還可以根據(jù)需要按照例如類似于常規(guī)方法的方法或本文所述方法制得。
本發(fā)明包括任何異構(gòu)體和異構(gòu)體混合物形式的本發(fā)明化合物，條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，經(jīng)由Y連接在該哌啶環(huán)上的式I的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型；例如，條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，則R9的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型；例如，條件是如果在式I化合物中m是0，則式I的一部分呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，例如，如果R9是被氨基取代的烷基，則該胺基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
式I化合物的木替靈環(huán)中的構(gòu)型優(yōu)選與天然截短側(cè)耳素中的構(gòu)型相同。
本發(fā)明化合物可依據(jù)例如類似于常規(guī)方法的方法或本文所述的方法獲得。
另一方面，本發(fā)明提供了制備如上所定義的式I化合物的方法，所述方法包括下述步驟a.將式II化合物 其中R3、R’3、R4和R5如上所定義，且R6、R7和R8是氫，與脲或硫脲反應(yīng)，然后還原得到式III化合物
其中Y如上所定義；R3、R’3、R4和R5如上所定義，且R6、R7和R8是氫，b.將如步驟a.中所定義的式III化合物分別與在氮原子上攜帶式-C(＝X)R9基團(tuán)的反應(yīng)性衍生物形式例如甲磺酸酯或甲苯磺酸酯形式的任選取代的吡咯烷、甲基或乙基吡咯烷、哌啶、甲基或乙基哌啶(＝甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶)反應(yīng)，其中X和R9如上所定義，得到式IV化合物， 該化合物是其中R、R1、R2、R3、R’3、R4、R5、Y和m如上所定義，且R6、R7和R8是氫的式I化合物；并且如果需要的話，c.向如步驟b中所定義的式IV化合物中引入氘，以獲得其中R、R1、R2、R3、R’3、R4、R5、Y和m如上所定義，且R6、R7和R8是氘的式I化合物。
基團(tuán)可以是未保護(hù)或保護(hù)的，并且如果需要的話，可以在任何步驟中脫保護(hù)，例如按照類似于常規(guī)方法的方法脫保護(hù)。
例如，在分別在氮原子上攜帶式-C(＝X)R9基團(tuán)(其中R9是被胺取代的烷基)的任選取代的吡咯烷、甲基或乙基吡咯烷、哌啶、甲基或乙基哌啶(＝甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶)中，所述的胺基團(tuán)可以是保護(hù)或未保護(hù)的。合適的保護(hù)基包括例如常規(guī)的保護(hù)基，例如叔丁氧基羰基(BOC)。
如果在如上所定義的步驟b.中，連接在甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上的甲磺酸或甲苯磺酸殘基呈(R)-構(gòu)型，則式IV化合物可以以這樣的形式獲得其中經(jīng)由硫原子連接在甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型；如果在如上所定義的步驟b.中，連接在甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上的甲磺酸或甲苯磺酸殘基呈(S)-構(gòu)型，則式IV化合物可以以這樣的形式獲得其中經(jīng)由硫原子連接在甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上的基團(tuán)呈(R)-構(gòu)型(瓦爾登反轉(zhuǎn))。
如果在如上所定義的步驟b.中，在用于與式III化合物反應(yīng)的甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上所連接的式-C(＝X)R9基團(tuán)中，R9是被胺取代的烷基、例如裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分，并且其中所述的胺呈(R)-構(gòu)型，則獲得其中所述的胺呈(R)-構(gòu)型的式IV化合物。如果在如上所定義的步驟b.中，在用于與式III化合物反應(yīng)的甲基-、乙基-吡咯烷或哌啶環(huán)上所連接的式-C(＝X)R9基團(tuán)中，R9是被胺取代的烷基、例如裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分，并且其中所述的胺呈(S)-構(gòu)型，則獲得其中所述的胺呈(S)-構(gòu)型的式IV化合物。
其中R3和R’3是氘或鹵素的式I化合物的制備可這樣進(jìn)行例如，用氘或鹵素例如F2、Cl2、Br2處理式V化合物 其中攜帶R3和R’3(R3和R’3都是氫)的碳原子一起形成雙鍵，以獲得其中R3和R’3是氘或鹵素的式V化合物；如需要，將式V化合物進(jìn)一步反應(yīng)，以獲得其中R3和R’3是氘或鹵素的式I化合物。
優(yōu)選地，式II化合物可通過(guò)將式V化合物與式VI化合物反應(yīng)而由式V化合物制得
其中Y、R4和R5如上所定義，且Hal是鹵素，優(yōu)選溴、氯。
向式I化合物中引入氘可這樣進(jìn)行在合適的溶劑(系統(tǒng))中，用氘氯酸(DCl)處理其中R6、R7和R8是氫的式I化合物例如鹽酸鹽形式的式I化合物；分離出其中R6、R7和R8是氘的式I化合物。如果式I化合物呈酸加成鹽例如鹽酸鹽的形式，用DCl處理所述的鹽還可能導(dǎo)致所述酸的氫被置換，例如生成氘氯酸鹽形式的式I化合物。
本文描述的任何化合物，例如式II、III、IV、V、VI化合物和任選取代的吡咯烷、甲基或乙基吡咯烷、哌啶、甲基或乙基哌啶分別是已知的，或者可依據(jù)例如類似于常規(guī)方法的方法或本文所述的方法制得。
本發(fā)明所提供的化合物、包括式I化合物(在下文中稱為“本發(fā)明的活性化合物”)表現(xiàn)出藥理活性，因此可用作藥物。
例如，本發(fā)明的活性化合物(例如實(shí)施例中的化合物)表現(xiàn)出抗微生物活性，例如抗下述細(xì)菌的抗菌活性革蘭氏陽(yáng)性菌，例如葡萄球菌(Staphylococci)，例如金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，鏈球菌(Streptococci)，例如釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)，腸球菌(Enterococci)，例如屎腸球菌(Enterococcus faeeium)，以及抗支原體、衣原體和專性厭氧菌，例如脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)的活性；本發(fā)明的活性化合物是在下述試驗(yàn)中在體外表現(xiàn)出這些活性的國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)，1997，Document M7-A4第17卷第2期″需氧生長(zhǎng)的細(xì)菌的稀釋抗菌敏感性試驗(yàn)方法-第4版，審定的標(biāo)準(zhǔn)″中所描述的瓊脂稀釋試驗(yàn)或微稀釋試驗(yàn)；和國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)，第13卷第26期，M11-A4，厭氧菌的抗菌敏感性試驗(yàn)方法；審定的標(biāo)準(zhǔn)；第4版(1997)中所描述的厭氧菌試驗(yàn)。
在瓊脂稀釋試驗(yàn)或微稀釋試驗(yàn)中，本發(fā)明活性化合物表現(xiàn)出的抗例如上述菌種的體外抗菌活性(MIC(μg/ml))為約≤0.01μg/ml至25μg/ml；并且具有抗支原體屬和衣原體的活性。MIC＝最小抑制濃度。
在依據(jù)動(dòng)物感染模型手冊(cè)(Oto Zak和Merle A.Sande編，AcademicPress，1999)確立的小鼠系統(tǒng)感染中，本發(fā)明的活性化合物表現(xiàn)出活性，例如抗葡萄球菌的活性，例如當(dāng)以例如5-150mg/kg體重的劑量胃腸外或口服給藥時(shí)表現(xiàn)出活性；例如，化合物14-O-[(N-(R)-組氨酰基-吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈或14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)-硫基乙酰基]-木替靈的ED50值為約11.0mg/kg體重；化合物14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)硫基乙?；鵠-木替靈的ED50值為7.0mg/kg體重。
ED50＝每次施用時(shí)保護(hù)50％的受治療動(dòng)物免于死亡的以mg/kg體重表示的有效劑量；是通過(guò)Probit分析計(jì)算的(n＝8只動(dòng)物/組)。
另一方面，本發(fā)明提供了用作藥物，優(yōu)選用作抗微生物的藥物，例如用作抗生素和抗厭氧菌藥物的本發(fā)明化合物。
另一方面，本發(fā)明提供了用于制備治療微生物引起的疾病，例如細(xì)菌如選自葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌的細(xì)菌引起的疾病，和例如支原體、衣原體和專性厭氧菌引起的疾病的藥物的本發(fā)明化合物。
令人驚奇的是，本發(fā)明的活性化合物還表現(xiàn)出抗下述菌株的活性對(duì)紅霉素(類)、四環(huán)素(類)有抗藥性的菌株，例如對(duì)青霉素或多種藥物有抗藥性的金黃色釀膿葡萄球菌(MRSA)的菌株。
另一方面，本發(fā)明提供了預(yù)防和治療微生物引起的疾病的方法，包括給需要所述治療的個(gè)體施用有效量的本發(fā)明化合物，例如藥物組合物形式的本發(fā)明化合物。
對(duì)于微生物引起的疾病的預(yù)防和治療，合適的劑量當(dāng)然取決于例如所用的本發(fā)明活性化合物、宿主、給藥方式以及所治療的病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。然而，一般情況下，為了在較大的哺乳動(dòng)物例如人中獲得令人滿意的結(jié)果，推薦的日劑量為約0.5-3g本發(fā)明的活性化合物，活性化合物可例如以分開的劑量每天給藥最高達(dá)4次。
本發(fā)明的活性化合物可通過(guò)任何常規(guī)途徑給藥，優(yōu)選口服給藥，例如以片劑、散劑、膠囊、混懸液的形式口服給藥；包括例如不可再吸收的口服制劑；或者胃腸外給藥，例如以可注射的溶液或混懸液的形式胃腸外給藥；或局部給藥，例如以鼻用噴霧劑、身體用溶液、霜?jiǎng)?、滴眼劑的形式局部給藥。
本發(fā)明的活性化合物可以以類似于紅霉素(類)、四環(huán)素(類)的方式給藥，例如以類似的劑量給藥來(lái)治療類似的適應(yīng)征。
本發(fā)明的活性化合物可以以下述形式給藥可藥用鹽的形式，例如酸加成鹽或金屬鹽的形式；或游離形式；可任選的為溶劑化物形式。鹽形式的本發(fā)明活性化合物表現(xiàn)出與游離形式的本發(fā)明活性化合物相同的活性。
另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其中包含游離或可藥用鹽形式和/或溶劑化物形式的本發(fā)明化合物；和至少一種藥用載體或稀釋劑。
這樣的組合物可依據(jù)例如類似于常規(guī)方法的方法制得。單位劑型可含有例如約100mg-約1g。
本發(fā)明的活性化合物還適于用作獸藥，例如用作獸藥活性化合物，例如用于預(yù)防和治療動(dòng)物例如家禽、豬和牛中的微生物疾病例如細(xì)菌性疾病；和例如用于稀釋人工授精用液體以及卵浸泡技術(shù)。
另一方面，本發(fā)明提供了用作獸藥的本發(fā)明化合物。
另一方面，本發(fā)明提供了用于制備用作獸藥，例如預(yù)防和治療動(dòng)物中的微生物疾病例如細(xì)菌性疾病的獸藥的獸藥組合物的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還提供了預(yù)防和治療微生物疾病例如細(xì)菌性疾病的獸醫(yī)方法，包括給需要所述治療的個(gè)體施用有效量的本發(fā)明化合物，例如獸藥組合物形式的本發(fā)明化合物。
對(duì)于本發(fā)明活性化合物作為獸藥的應(yīng)用，劑量當(dāng)然取決于動(dòng)物的大小和年齡以及所需的療效；例如，對(duì)于預(yù)防性治療，可在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)例如1-3周內(nèi)施用較低劑量。在飲用水中的優(yōu)選劑量為0.0125-0.05重量/體積，特別是0.0125-0.025；在飼料中，劑量為20-400g/公噸，優(yōu)選為20-200g/公噸。
優(yōu)選將本發(fā)明的活性化合物作為獸藥在飲用水中對(duì)母雞給藥，在飼料中對(duì)豬給藥，對(duì)牛以例如口服或胃腸外給藥用制劑的形式口服給藥或胃腸外給藥。
在舉例說(shuō)明本發(fā)明的下述實(shí)施例中，所提及的溫度是攝氏度，并且未校正。
使用了下列縮寫B(tài)OC叔丁氧基羰基TFA三氟乙酸DCC二環(huán)己基碳二亞胺在實(shí)施例中提及的木替靈環(huán)的編號(hào)方式在下式中給出
實(shí)施例實(shí)施例114-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?哌啶-3-基)硫基)乙?；鵠木替靈A)14-O-[(脲基硫基)乙?；鵠木替靈-甲苯磺酸酯將15.2g硫脲和106.4g截短側(cè)耳素-22-O-甲苯磺酸酯在250ml丙酮中的溶液加熱回流，減壓除去溶劑并加入100ml己烷。有沉淀生成，濾出沉淀并干燥。
得到14-O-[(脲基硫基)乙?；鵠木替靈-甲苯磺酸酯。
B)14-巰基-乙?；?木替靈將4.7g焦亞硫酸鈉(Na2S2O5)在25ml H2O中的溶液加到12.2g14-O-[(脲基硫基)乙酰基]木替靈-甲苯磺酸酯在20ml乙醇與35ml H2O的混合物中的溶液(溫?zé)嶂良s90℃)中。向所得反應(yīng)混合物中加入100ml CCl4并將該混合物加熱回流。分離所形成的兩相系統(tǒng)，將有機(jī)相干燥并蒸除溶劑。得到14-巰基-乙酰基-木替靈。
C)N-BOC-3(R)-羥基-哌啶將3.48g 3-(R)-羥基哌啶、8.72g二碳酸二叔丁酯和4.0g N-甲基-嗎啉在70ml二氧雜環(huán)己烷中的懸浮液于室溫?cái)嚢?。從所得混合物中蒸除溶劑，將蒸發(fā)殘余物溶于CH2Cl2并用1N HCl萃取。將有機(jī)相干燥并蒸除溶劑。得到5.08g N-BOC-3(R)-羥基-哌啶，其不用進(jìn)一步純化可直接用于隨后的反應(yīng)。
D)N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基-哌啶將5.08g N-BOC-3(R)-羥基-哌啶與8.7g甲磺酸酐在100ml吡啶中的溶液于室溫?cái)嚢?。在高度真空下蒸除吡啶，將所得蒸餾殘余物溶于CH2Cl2并用1N HCl萃取。將所得有機(jī)相干燥并蒸發(fā)至干。通過(guò)色譜法純化殘余物。
得到3.8g N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基-哌啶。
1HNMR(CDCl3)4.7(m，1H，CHOSO2CH3)，3.2-3.6(m，4H，CHN)，3.0(s，3H，CH3SO2)，1.4(m，9H，叔丁基)。
E)14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)-硫基乙?；鵠-木替靈將1.97g 22-巰基-乙?；?截短側(cè)耳素、1.39g N-BOC-3(R)-甲基-酰氧基-哌啶和0.12g鈉在50ml EtOH中的溶液加熱至90℃。將所得混合物的溶劑真空蒸發(fā)至干，通過(guò)色譜法純化殘余物。得到2.5g 14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)-硫基乙?；鵠-木替靈。
1HNMR(CDCl3)6.45，5.35，5.2(3xm，H19，H20，H21)，5.74(d，1H，5.2Hz，H14)，3.35(d，1H，H11，J＝5.2Hz)，AB-系統(tǒng)3.12，3.18(J＝14.7Hz，H22)，3.2，2.95，2.65，2.6(4xm，CH2NCH2)，2.85(m，1H，SCH)，1.18，1.45(2xs，(CH3)15，(CH3)18)，0.75，0.88(2xd，(CH3)16，(CH3)17，J＝5.4Hz)。
F)鹽酸鹽形式的14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁酰基)-哌啶-3(S)-基)硫基)乙?；鵠木替靈將280mg 14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)-硫基乙?；鵠-木替靈在20ml二氯甲烷和1ml TFA中的溶液于室溫?cái)嚢杓s30分鐘并將所得混合物的溶劑蒸發(fā)至干。將所得蒸發(fā)殘余物溶于40ml CH2Cl2并向其中加入55mg N-甲基嗎啉、110mg N-BOC-(R)-纈氨酸和105mg DCC。將所得混合物攪拌，過(guò)濾出所沉淀的二環(huán)己基脲。將溶劑從所得濾液中蒸發(fā)，通過(guò)色譜法純化殘余物。得到14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-(N-BOC-氨基)-丁?；?-哌啶-3(S)-基)硫基]乙?；鵠木替靈并將其用TFA處理。將所得混合物的溶劑蒸發(fā)至干，用HCl的乙醚溶液處理蒸發(fā)殘余物。得到鹽酸鹽形式的固體無(wú)定形14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)硫基]乙?；鵠木替靈。
1HMR(d6-DMSO，330K)6.45，5.35，5.2(3xm，H19，H20，H21)，5.74(d，1H，5.2Hz，H14)，5.45(d，1H，NH，J＝7.8Hz)，4.1(m，1H，NHCHCO)，3.35(d，1H，H11，J＝5.2Hz)，AB-系統(tǒng)3.12，3.18(J＝14.7Hz，H22)，3.2，2.95，2.65，2.6(4xm，CH2NCH2)，2.8(m，1H，SCH)，1.18，1.45(2xs，(CH3)15，(CH3)18)，0.75，0.88(2xd，(CH3)16，(CH3)17，J＝5.4Hz)，0.78，0.84(2xd，(CH3)2CH，J＝6.8Hz)。
實(shí)施例214-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?哌啶-4-基)硫基)乙酰基]木替靈按照實(shí)施例1中描述的方法，但是使用合適的原料(例如用4-羥基甲基-哌啶代替3-羥基甲基-哌啶)，得到鹽酸鹽形式的4-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁酰基-哌啶-4-基)硫基)乙?；鵠木替靈。
1HMR(d6-DMSO)8.1(b，3H，NH3+)，6.2-6.4(m，1H，H19)，5.55(d，1H，H14)，5.1-5.2(m，2H，H2O)，4.25(m，1H，NCHCO)，4.1，4.25(m，1H，NCH)，3.8-3.95(m，1H，NCH)，3.4(d，1H，H11)，3.0-3.2(m，2H，NCH)，2.8-2.95(m，1H，SCH)，2.4(m，1H，H4)，3.25-3.4(m，2H，SCH2CO)，1.08，1.39 (2xs，(CH3)15，(CH3)18)，0.93，0.98(2xd，6H，(CH3)2CH)，0.65，0.85(2xd，6H，(CH3)16，(CH3)17)。
實(shí)施例314-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-哌啶-3-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈A)N-BOC-3(R)-羥基甲基-哌啶將3.48g 3-(R)-羥基甲基-哌啶、8.72g二碳酸二叔丁酯和4.0g N-甲基-嗎啉在70ml二氧雜環(huán)己烷中的懸浮液于室溫?cái)嚢杓s18小時(shí)。將溶劑從所得混合物中蒸發(fā)，將蒸發(fā)殘余物溶于CH2Cl2并用1N HCl萃取。將有機(jī)相干燥并蒸除溶劑。得到5.08g N-BOC-3(R)-羥基甲基-哌啶，可不用進(jìn)一步純化將其直接用于隨后的反應(yīng)。
R)N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基甲基-哌啶將5.08g N-BOC-3(R)-羥基甲基-哌啶和8.7g甲磺酸酐在100ml吡啶中的溶液于室溫?cái)嚢杓s22小時(shí)。從所得混合物中蒸除吡啶(高真空)，將所得蒸發(fā)殘余物溶于CH2Cl2。用1N HCl萃取所得有機(jī)相，干燥并蒸除溶劑。通過(guò)色譜法純化蒸發(fā)殘余物。得到3.8g N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基甲基-哌啶。
C)14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)甲硫基乙?；鵠未替靈將1.97g 22-巰基-截短側(cè)耳素、1.39g N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基甲基-哌啶和0.12g鈉在50ml EtOH中的溶液加熱至約90℃。從所得混合物中蒸除溶劑，通過(guò)色譜法純化所得蒸發(fā)殘余物。得到2.5g 14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈。
D)鹽酸鹽形式的14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈將280mg 14-O-[(N-BOC-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈在20ml二氯甲烷和1ml TFA中的溶液于室溫?cái)嚢杓s30分鐘并將所得混合物的溶劑蒸發(fā)。將所得蒸發(fā)殘余物溶于40ml CH2Cl2并向其中加入55mg N-甲基嗎啉、110mg N-BOC-(S)-纈氨酸和105mg DCC，將所得混合物攪拌。從所得混合物中過(guò)濾出固體(沉淀的二環(huán)己基脲)并通過(guò)色譜法純化所得濾液。得到14-O-[(N-BOC-(3-甲基-2(S)-氨基-丁酰基)-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈，將其用TFA和HCl乙醚溶液處理。得到鹽酸鹽形式的14-O-[(N-(3-甲基-2(S)-氨基-丁?；?-哌啶-3(S)-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈。
1HNMR(d6-DMSO)6.1-6.2(m，1H，H19)，5.58(d，1H，H14)，5.5-5.12(m，2H，H2O)，4.2(m，2H，NCHCO，NCH)，3.75(m，1H，NCH)，3.42(d，1H，H11)，3.28-3.35(m，2H，SCH2CO)，3.1(m，2H，SCH2)，1.08，1.36(2xs，6H，(CH3)15，(CH3)18)，0.95，0.98(2xd，6H，(CH3)2CH)，0.65，0.83(2xd，6H，(CH3)16，(CH3)17。
實(shí)施例414-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-吡咯烷-2-基)-甲硫基乙?；鵠-木替靈按照實(shí)施例3中描述的方法，但是使用合適的原料(例如用2-(S)-羥基甲基-吡咯烷代替3-(R)-羥基甲基-哌啶，用N-BOC-(R)-纈氨酸代替N-BOC-(S)-纈氨酸)；得到鹽酸鹽形式的14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-吡咯烷-2(R)-基)-甲硫基乙酰基]-木替靈。
1HNMR(d6-DMSO)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，8.1(b，3H，NH3)，6.1-6.2(m，1H，H19)，5.52(d，1H，H14)，5.5-5.12(m，2H，H2O)，4.15(m，1H，NCHCO)，3.9(m，1H，NCH)，3.6(m，1H，NCH)，3.42(d，1H，H11)，3.28-3.35(m，2H，SCH2CO)，2.68，2.85(2xdd，2H，CHCH2S)，1.08，1.36(2xs，6H，(CH3)15，(CH3)18)，0.95，0.98(2xd，6H，(CH3)2CH)，0.65，0.83(2xd，6H，(CH3)16，(CH3)17)。
實(shí)施例514-O-[(N-(3-甲基-2-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)硫基乙酰基]木替靈按照實(shí)施例1中描述的方法，但是用合適的原料，例如用N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基-吡咯烷代替N-BOC-3(R)-甲基磺酰氧基-哌啶，得到鹽酸鹽形式的14-O-[(N-(3-甲基-2(R)-氨基-丁?；?-吡咯烷-3-基)-硫基乙?；鵠-木替靈。
1HNMR(d6-DMSO，330K)6.45，5.35，5.2(3xm，H19，H20，H21)，5.64(d，1H，5.2Hz，H14)，6.3(b，1H，NH)，3.95(m，1H，NHCHCO)，3.35(d，1H，H11，J＝5.2Hz)，AB-系統(tǒng)3.0，3.1(J＝14.7Hz，H22)，3.2，2.95，2.65，2.6(4xm，CH2NCH2)，2.8(m，1H，SCH)，1.18，1.45(2xs，(CH3)15，(CH3)18)，0.75，0.88(2xd，(CH3)16，(CH3)17，J＝5.4Hz)，0.86，0.84(2xd，(CH3)2CH，J＝6.8Hz)。
實(shí)施例614-O-[(N-組氨?；?吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈按照實(shí)施例1中描述的方法，但是使用合適的原料，例如用N，N′-BOC-(R)-組氨酸代替N-BOC-(R)-纈氨酸，得到鹽酸鹽形式的4-O-[(N-(R)-組氨?；?吡咯烷-3-基)硫基乙?；鵠木替靈。
1HNMR(d6-DMSO，330K)7.45，6.73(2xs，組氨酸)，6.25，5.1，5.2(3xm，H19，H20，H21)，5.59(d，1H，5.2Hz，H14)，5.45(d，1H，NH，J＝7.8Hz)，4.5(d，1H，NHCHCO，J＝4.5Hz)，3.6，3.4(2xm，2H，NCH2CH2)，3.35(d，1H，H11，J＝5.2Hz)，3.4(m，2H，HisCH2)，ABX-系統(tǒng)3.12，3.68，J＝14.1Hz，6.5Hz，NCH2CHS)，3.2，2.95，2.65，2.6(4xm，CH2NCH2)，2.7(m，1H，SCH)，1.18，1.45(2xs，(CH3)15，(CH3)18)，0.75，0.88(2xd，(CH3)16，(CH3)17，J＝5.4Hz)。
權(quán)利要求
1.式I化合物 其中R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成吡咯烷基或哌啶基，R1是下式所示的基團(tuán) R3和R′3是氫、氘或鹵素，R4是氫或烷基，R5是氫或烷基，R6、R7和R8是氫或氘，R9是氨基、烷基、芳基、雜環(huán)基或巰基；并且，如果X是氧，R9還可以是氫；R10是氫或烷基，R’10是烷基，X是硫、氧、NR10或N+(R’10)2，Y是硫或氧，且m是0、1或2；條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，經(jīng)由Y連接在該哌啶環(huán)上的式I的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型。
2.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R3、R′3、R4、R5、R6、R7和R8是氫；R1是下式所示的基團(tuán) R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶或吡咯烷；R9是烷基；X是氧；Y是硫；且m是0或1；條件是當(dāng)R和R2與它們所連接的氮原子合在一起形成哌啶基，m是0，Y是S并且Y連接在所述哌啶環(huán)的3-位上時(shí)，經(jīng)由Y連接在該哌啶環(huán)上的式I的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型，優(yōu)選呈(S)-構(gòu)型。
3.下式所示的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3p、R′3p、R6p、R7p和R8p的定義同權(quán)利要求1中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；且R5p是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，其中如果經(jīng)由硫原子連接在哌啶環(huán)上的基團(tuán)是在該哌啶環(huán)的3-位上并且R5p是氫的話，則連接在硫原子上的基團(tuán)呈(S)-構(gòu)型或(R)-構(gòu)型。
4.下式所示的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3q、R′3q、R6q、R7q和R8q的定義同權(quán)利要求1中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；R5q是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選為氫；且Rq是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分。
5.下式所示的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3r、R′3r、R6r、R7r和R8r的定義同權(quán)利要求1中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；R5r是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基；且R1r是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分。
6.下式所示的化合物 其中與下標(biāo)的數(shù)字相對(duì)應(yīng)，R3s、R′3s、R6s、R7s和R8s的定義同權(quán)利要求1中關(guān)于R3、R′3、R6、R7和R8的定義；R5s是氫或一個(gè)或多個(gè)取代基，且R1s是裂解掉了羧基的氨基酸的剩余部分。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述的化合物呈鹽的形式，或呈鹽形式且是溶劑化物的形式，或呈溶劑化物的形式。
8.用作藥物的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物。
9.預(yù)防和治療微生物引起的疾病的方法，包括給需要所述治療的個(gè)體施用有效量的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物。
10.藥物組合物，其中含有游離形式或可藥用鹽形式的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物和至少一種藥用載體或稀釋劑。
11.用作獸藥的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物。
全文摘要
式(I)化合物，其中R和R
文檔編號(hào)A61K31/40GK1633415SQ01815576
公開日2005年6月29日 申請(qǐng)日期2001年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月13日
發(fā)明者G·阿舍爾, H·貝爾納, J·希爾德布蘭特 申請(qǐng)人:生物化學(xué)有限公司