一種熊蜂飼料的制備方法
【專利說明】一種熊蜂飼料的制備方法發(fā)明領(lǐng)域
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種熊蜂飼料，具體地說，涉及熊蜂(Bombus terresris)飼料的制備方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]熊蜂屬蜜蜂總科昆蟲，熊蜂屬，是一類多食性的社會(huì)性昆蟲，具有采集力強(qiáng)、耐光照、趨光性差，對(duì)低溫適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，在惡劣條件下仍然能夠授粉，因熊蜂沒有蜜蜂那樣靈敏的信息交流系統(tǒng)，能專心在室溫內(nèi)的作物上采集授粉，從而成為溫室中比蜜蜂更理想的授粉昆蟲。萬軍等研究了不同授粉處理方式對(duì)番茄產(chǎn)量和品質(zhì)的影響，表明熊蜂授粉處理平均單果重與激素處理、自然授粉比分別增加了26.84%和29.27%。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活水平的提高，對(duì)反季蔬菜和瓜果的需求日益增多，推動(dòng)了大棚種植面積的逐年擴(kuò)大，由于種植季節(jié)的差異以及棚膜和墻體等，室內(nèi)種植作物很難接受自然授粉，傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)常采用人工、機(jī)械振動(dòng)和激素等授粉，勞動(dòng)強(qiáng)度大，成本和畸形果高，影響了果實(shí)的產(chǎn)量和質(zhì)量，而利用熊蜂為室內(nèi)作物授粉已經(jīng)發(fā)展成一項(xiàng)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)必備的配套措施。西方一些農(nóng)業(yè)發(fā)達(dá)國家從上世紀(jì)初就開始研究熊蜂人工繁殖技術(shù)，并于80年代就實(shí)現(xiàn)了熊蜂的工廠化生產(chǎn)，提供室內(nèi)農(nóng)業(yè)授粉應(yīng)用。我國有許多大型的規(guī)?；瘻厥遥绕涫嵌?，溫室內(nèi)缺乏自然授粉昆蟲，所以利用熊蜂授粉可以顯著提高蔬菜作物的產(chǎn)量和質(zhì)量，并節(jié)省勞動(dòng)力和藥物的使用。由于我國熊蜂培育技術(shù)起步晚，目前尚沒有成熟有效的熊蜂培育技術(shù)，世界上只有少數(shù)國家，如英國，荷蘭等掌握了熊蜂的人工繁育技術(shù)，因此從國外進(jìn)口優(yōu)質(zhì)熊蜂成為一些蔬果種植企業(yè)的迫切需求，然而，由于國內(nèi)外環(huán)境和培養(yǎng)作物以及花粉原料的差異，進(jìn)境熊蜂在飼料配方上若喂養(yǎng)不好，容易喂養(yǎng)飼料成本高，抗病能力弱，飼料利用率低，工蜂生命周期短，蜂王產(chǎn)卵少，熊蜂采集花粉動(dòng)力缺失等缺點(diǎn)，間接拉高了熊蜂授粉的成本，降低了熊蜂授粉效率，影響了授粉作物的產(chǎn)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種熊蜂飼料的制備方法，采用本方法所得飼料生產(chǎn)熊蜂，實(shí)現(xiàn)了以下目的:
1、成本低。
[0004]2、工蜂存活期長。
[0005]3、蜂王產(chǎn)卵穩(wěn)定，繁殖力強(qiáng)。
[0006]4、熊蜂活躍度高。
[0007]5、出巢時(shí)間長。
[0008]6、授粉率高。
[0009]7、減少了人工授粉成本，提高了作物的產(chǎn)量。
[0010]為解決以上問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: a、菌種選取:酵母菌和乳酸片球菌，4°C斜面冰箱保存；
b、酵母菌培養(yǎng)基:土豆去皮切塊，每200g加入500 mL水，煮沸30 min，雙層紗布過濾至燒杯中，加入20 g蔗糖和5g玉米花粉，加水至I L，每10mL溶液分裝入250mL三角瓶，121°C高壓滅菌20 min；
C、乳酸片球菌培養(yǎng)基:取大豆蛋白胨5.0g、牛肉膏粉5.0g、酵母浸膏5.0g、葡萄糖20g和乳糖20g，加水至I L，每10mL溶液分裝入250mL三角瓶，121°C高壓滅菌20 min。
[0011 ] 2、如權(quán)利要求1所述的一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟:
d、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:取葡萄糖35g、果糖35g、蔗糖10g、豆粉100g、黃芪粉5g、大棗粉10g、山藥粉5g、蜂蜜20g和水200mL，攪拌均勾，裝入500mL燒杯，121 °C高壓滅菌30 min。
[0012]3、如權(quán)利要求1所述的一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟:
e、發(fā)酵培養(yǎng)基:取荷花粉150g、茶花粉150g，在0.8ppm臭氧/立方米下殺菌30min，與降溫到60°C的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻，用無菌水控制混合物水分含量在30%，保溫30min后，冷卻到室溫置冰箱4°C保存。
[0013]4、如權(quán)利要求1所述的一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟:
f、種子培養(yǎng)1:取冰箱4°C保藏的酵母菌種在超凈臺(tái)接種到酵母菌培養(yǎng)基，28°C，轉(zhuǎn)速160轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)3天;獲得酵母菌菌種；
種子培養(yǎng)2:取冰箱4°C保藏的乳酸菌在超凈臺(tái)接種到一瓶乳酸片球菌培養(yǎng)基，37°C，轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)2天，獲得乳酸片球菌菌種。
[0014]5、如權(quán)利要求1所述的一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟:
g、將步驟f培養(yǎng)好的酵母菌菌種取20mL接種到發(fā)酵培養(yǎng)基，無菌攪拌均勻，溫度28°C真菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)2天。
[0015]6、如權(quán)利要求1所述的一種熊蜂飼料的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟:
h、將步驟g培養(yǎng)后的發(fā)酵培養(yǎng)基升溫到50°C保溫3小時(shí)，降低溫度到35°C;
再添加步驟f所得乳酸片球菌菌種20mL，攪拌均勻后35°C培養(yǎng)I天后將瓶口密封，繼續(xù)35 °C培養(yǎng)2天；
1、將步驟h所得物升溫到55°C保持3小時(shí)；
j、將步驟i所得物降溫到室溫后，無菌操作分制成柱狀飼料，4°C冰箱保存。
[0016]乳酸菌的發(fā)酵，可以顯著抑制單核細(xì)胞增多性李斯特菌(見專利2015102547559)，熊蜂主要以糖水和花粉為食，若溫室種植中植物花粉較少時(shí)，需要給其添加飼料輔料。熊蜂工蜂的生命周期一般4-12周，長短取決于花粉的數(shù)量和質(zhì)量。
[0017]本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，具有以下優(yōu)點(diǎn):
1、成本低，降低1/3。
[0018]2、工蜂存活期長，生命周期4-6周占21%，7-9周占24%，10-12周占55%。
[0019]3、熊蜂的活性、抗病力強(qiáng)，熊蜂抗病能力提高，熊蜂活躍度高;每小時(shí)平均5.4次出入蜂巢，比自主采集草莓花粉的高8%，比自主采集花粉并在蜂巢直接輔助喂食花粉的高20%。
[0020]4、工藝操作簡(jiǎn)便，適于商品化生產(chǎn)。
[0021 ] 5、出巢時(shí)間長，平均每天4.8小時(shí)/蜂，比第二組直接輔助喂食花粉的提高26.3%。
[0022]6、熊蜂繁殖力比只采集草莓花粉的提高60%，比自主采集花粉并在蜂巢直接輔助喂食花粉的提尚14.3%。
[0023]7、本發(fā)明所得熊蜂授粉處理平均單果重與激素處理、自然授粉比分別增加了29.69%和33.98%。
[0024]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
【具體實(shí)施方式】
[0025]實(shí)施例1，一種熊蜂飼料的制備方法，包括以下步驟:
a、菌種:酵母菌(食用安琪酵母)，4°C斜面冰箱保存；乳酸片球菌(菌種保藏號(hào)CGMCCN0.10574),4°C斜面冰箱保存。
[0026]b、酵母菌培養(yǎng)基(種子培養(yǎng)基):土豆去皮切塊，每200 g加入500 mL水，煮沸30min。雙層紗布過濾至燒杯中，加入20 g鹿糖，5g玉米花粉，加水至I L，每10mL溶液分裝入250mL三角瓶，121°C高壓滅菌20 min。
[0027]c、乳酸片球菌培養(yǎng)基(種子培養(yǎng)基):取大豆蛋白胨5.0g、牛肉膏粉5.0g、酵母浸膏
5.(^、葡萄糖2(^、乳糖2(^，加水至1 L，每10mL溶液分裝入250mL三角瓶，121°C高壓滅菌20min。
[0028]d、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:取葡萄糖35g、果糖35g、蔗糖10g、豆粉100g、黃芪粉5g、大棗粉10g、山藥粉5g、蜂蜜20g、水200mL，攪拌均勾，裝入3000mL三角瓶，121 °C高壓滅菌30 min。
[0029]e、發(fā)酵培養(yǎng)基:取荷花粉150g、茶花粉150g，在0.8ppm臭氧/立方米下殺菌30min，與降溫到60 °C的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻，用無菌水控制混合物水分含量在30%，保溫30min后，冷卻到室溫置冰箱4°C保存。
[0030]f、將配制的酵母菌培養(yǎng)基和乳酸片球菌種子培養(yǎng)基，分別10mL/瓶分裝，121°C高