一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方，其組分按質(zhì)量分?jǐn)?shù)配比為：玉米漿干粉2%、酵母粉2%、蛋白胨3%、硫酸鎂1%-1.5%、磷酸二氫鉀1%-1.5%、其余為軟水。該發(fā)酵生產(chǎn)處方使用的原材料全部為水溶性，便于滅菌，不易產(chǎn)生泡沫，發(fā)酵過(guò)程易控制，有利于抗菌肽的分離，抗菌肽含量高，成本低、發(fā)酵周期短。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方。

【背景技術(shù)】
[0002] 抗菌肽是生物體內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽，這類(lèi)活性多 肽多數(shù)具有堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點(diǎn)。與抗生素相比，對(duì)人和動(dòng)物正常細(xì)胞無(wú)傷 害，無(wú)副作用、無(wú)殘留，在醫(yī)藥抗菌領(lǐng)域、食品防腐保鮮領(lǐng)域以及飼料添加劑領(lǐng)域中有著廣 闊的應(yīng)用前景。
[0003] 但是，目前對(duì)于抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基在工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中存在很多問(wèn)題，如成本高， 抗菌肽與培養(yǎng)基組分不易分離、發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的氣泡使發(fā)酵過(guò)程不易控制、培養(yǎng)基中的 不溶性成分的存在消毒困難、發(fā)酵周期較長(zhǎng)等問(wèn)題，因此培養(yǎng)基的問(wèn)題成為長(zhǎng)期以來(lái)制約 抗菌肽大規(guī)模應(yīng)用的一個(gè)障礙，國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家學(xué)者對(duì)研究開(kāi)發(fā)新的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基日趨關(guān) 注。申請(qǐng)公布號(hào)為CN103333937A、公布日為2013年10月2日的專(zhuān)利公開(kāi)了一種利用枯 草芽抱桿菌制備抗菌肽的工藝方法。通過(guò)液體種子制備、發(fā)酵液制備、發(fā)酵液預(yù)處理、抗菌 肽提取與精制、抗菌肽干粉制備等工藝方法制備高純抗菌肽成品，發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基組成 為：豆柏粉l_2g，玉米粉0. 5-lg，麥芽糖0. 5g，可溶性淀粉0. 5-0. 7g，葡萄糖0. 7-lg， 硫酸按 〇· 3g，硝酸按 0· 2g，蛋白陳 0· 4-lg，牛肉膏 0· 5g，NaC10. 5g，ΚΗ2Ρ040· lg， MgS04*7H200. 04g。其中的豆柏粉為不溶性物質(zhì)，會(huì)引起培養(yǎng)基的渾濁，培養(yǎng)周期時(shí)間為 60-62小時(shí)，培養(yǎng)周期較長(zhǎng)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方，解決現(xiàn)有培養(yǎng)基在發(fā)酵過(guò)程 中易產(chǎn)生氣泡，成本高，不易滅菌、發(fā)酵周期長(zhǎng)的問(wèn)題。
[0005] 本發(fā)明公開(kāi)了一種抗菌肽發(fā)酵配方，其組分按重量份配比為：玉米漿干粉2%、酵 母粉2%、蛋白胨3%、硫酸鎂1%-1. 5%、磷酸二氫鉀1%-1. 5%、其余為軟水。工業(yè)上將菌種接 種到本發(fā)明配方的培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵的工藝條件為：發(fā)酵溫度34-35°C，通氣比1:1、罐壓 0. 01-0. 03MPa、攪拌轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分、PH6-6. 5、發(fā)酵周期16小時(shí)。
[0006] 該發(fā)酵生產(chǎn)處方使用的原材料全部為水溶性，成本低，便于滅菌，不易產(chǎn)生泡沫， 發(fā)酵過(guò)程易控制，有利于抗菌肽提取，發(fā)酵菌含量提高了約2/3,發(fā)酵周期降低了約1/2。

【具體實(shí)施方式】
[0007] 本發(fā)明的發(fā)酵周期是用高效液相色譜儀檢測(cè)法，每隔2個(gè)小時(shí)測(cè)試一次，直至抗 菌肽含量不再增長(zhǎng)為發(fā)酵的截止時(shí)間。
[0008] 實(shí)施例1 將一種枯草芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配方為：玉米漿干粉2%、酵母粉2%、蛋白 胨3%、硫酸鎂1%-1. 5%、磷酸二氫鉀1%-1. 5%、其余為軟水。工業(yè)上將菌種接種到本發(fā)明配 方的培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵的工藝條件為：發(fā)酵溫度34-35°C，通氣比1:1、罐壓0.01-0. 03MPa、 攪拌轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分、PH6-6. 5、發(fā)酵周期16小時(shí)，可得抗菌肽含量2490微克/毫升-2510 微克/暈升的發(fā)酵液。
[0009] 實(shí)施例2 將一種枯草芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配方為：玉米漿干粉2%、酵母粉2%、蛋白 胨3%、硫酸鎂0. 75%、磷酸二氫鉀1%、其余為軟水。發(fā)酵工藝條件為：溫度34°C，通氣比1:1、 罐壓0. 03MPa、攪拌速率150轉(zhuǎn)/分、PH6、發(fā)酵周期16. 4小時(shí)、可得抗菌肽含量2505微克/ 暈升的發(fā)酵液。
[0010] 實(shí)施例3 :將一種枯草芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配方為：玉米漿干粉2%、 酵母粉2%、蛋白胨3%、硫酸鎂1%、磷酸二氫鉀0. 75%、其余為軟水。發(fā)酵工藝條件為：溫度 35°C，通氣比1:1、罐壓0. OIMPa、攪拌轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分、PH6. 5、發(fā)酵周期16. 1小時(shí)、可得抗 菌肽含量2501微克/暈升的發(fā)酵液。
[0011] 實(shí)施例4 :將一種枯草芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配方為：玉米漿干粉2%、 酵母粉2%、蛋白胨3%、硫酸鎂1. 5%、磷酸二氫鉀1. 5%、其余為軟水。發(fā)酵工藝條件為：溫度 35°C，通氣比1:1、罐壓0. 03MPa、攪拌轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分、PH 6. 5、發(fā)酵周期15. 9小時(shí)、可得抗 菌肽含量2495微克/暈升的發(fā)酵液。
[0012] 實(shí)施例5 :具體實(shí)施步驟如實(shí)施例1，本實(shí)施例只涉及硫酸鎂、磷酸二氫鉀、溫度、 罐壓、PH、發(fā)酵周期、最后含量的變化，如表1所示： 表1

【權(quán)利要求】
1. 一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方，其特征在于其組分按質(zhì)量分?jǐn)?shù)配比如下：玉米漿干粉 2%、酵母粉2%、蛋白胨3%、硫酸鎂1%-1. 5%、磷酸二氫鉀1%-1. 5%、其余為軟水。
【文檔編號(hào)】C12R1/125GK104250660SQ201410481656
【公開(kāi)日】2014年12月31日 申請(qǐng)日期:2014年9月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月19日
【發(fā)明者】胡國(guó)春, 郭文江, 趙福生, 王慶芳, 郭玉萍 申請(qǐng)人:中農(nóng)穎泰林州生物科園有限公司