專利名稱：用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物發(fā)酵領域，尤其是一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術：
干擾素是一類在同種細胞上具有抗病毒活性的糖蛋白，通過抑制病毒DNA和RNA的復制達到預防和治療效果，是脊椎動物抵抗病毒、細菌、寄生蟲感染及腫瘤侵襲的重要組分。同時干擾素還具有神經、免疫、內分泌調節(jié)等多種生物學功能。1957年自Isaacs和 Lindenmann發(fā)現(xiàn)干擾素以來，干擾素已經顯示出了極強的抗病毒、免疫調節(jié)活性和廣闊的應用前景。因而，干擾素的研究越來越受到人們的廣泛關注。與傳統(tǒng)的寵物保健治療藥物相比，干擾素在治療效果及使用時機方面顯示出了極大的優(yōu)越性。目前，干擾素等蛋白類藥物的エ業(yè)生產中使用最多的工程菌為大腸桿菌，采用高密度培養(yǎng)技術來提高菌體的發(fā)酵密度，從而最終提高產物的比生產率。高密度發(fā)酵目的的實現(xiàn)，除了重組菌本身的表達性質之外，還必須有重組菌生長和產物表達的最適培養(yǎng)基組成等條件。目前生產重組雞α干擾素的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中大多有葡萄糖為碳源，在培養(yǎng)前期過程中就極易產生こ酸，造成重組菌生長和表達的抑制效應。因此，選擇合適的發(fā)酵培養(yǎng)基不僅可以減少培養(yǎng)體積，強化下游分離提取，而且可以縮短生產周期、減少設備投資從而降低生產成本，能極大地提高在市場上得競爭カ。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題在于提供一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明所要解決的另一技術問題在于提供上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法。為解決上述技術問題，本發(fā)明的技術方案是一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、Η3Β04、FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中每IL H2O中含有葡萄糖5 10g、蛋白胨5 10g、酵母粉5 10g、KH2P04 2 4g、K2HP04 I 4g,Na2HPO4 · 12H20 2 7g、(NH4)2SO4O. 6 I. 2g、NH4Cl O. I O. 3g、MnS04 · 5H20 O. 001 O. OlgXoCl2 ·6Η20 O. 004 O. Olg^Na2MoO4 ·2Η20 O. 001 O. 005g、ZnCl2 O. 001 O. Olg、CuSO4 ·5Η20 O. 001 O. 01g、H3B04 0 . 00 2 0. 012g、FeS04 ·7Η20 O. 01 O. 02g,CaCl2 ·2Η200. 01 O. 04g、MgSO4 · 7H20 0· I 0. 6g、消泡劑 O. I O. 3g。優(yōu)選的，上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其中每IL H2O中含有葡萄糖 7 10g、蛋白胨 5 7g、酵母粉 5 7g,KH2PO4 2 3g,K2HPO4 I 3g、Na2HPO4 ·12H20
2 4g、(NH4)2SO4 O. 6 I. 0g、NH4Cl O. I O. 2g、MnS04 ·5Η200· 001 O. 006g、CoCl2 ·6Η20O. 004 O. Olg、Na2MoO4 · 2H20 0. OOl 0. 004g、ZnCl2 O. OOl O. 005g、CuSO4 · 5H200· OOl O. 007g、H3BO4 O. 002 O. 006g、FeSO4 · 7H20 0· Ol 0. 02g、CaCl2 · 2H20 0. Ol 0. 02g、MgSO4 · 7H20 0. 3 0. 6g、消泡劑 0· I 0. 2g。優(yōu)選的，上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其中每IL H2O中含有葡萄糖 log、蛋白胨 6g、酵母粉 6g、KH2P04 2g、K2HPO4 lg、 Na2HPO4* Iffi2O 2g、(NH4)2SO4 0. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 · 5H20 0. OOlg、CoCl2 · 6H200. 004g、Na2MoO4 · 2H20 0. OOlg^ZnCl2 0. 001、CuSO4 · 5H20 0. OOlg、H3BO4 0. 002g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 01、MgSO4 · 7H200. 4g、消泡劑 0. lg。優(yōu)選的，上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其中每IL H2O中含有葡萄糖 8g、蛋白胨 5g、酵母粉 5g、KH2P04 3g、K2HPO4 2g、Na2HPO4 · 12H203g、(NH4)2SO4 0. 8g、NH4Cl 0. 2g、MnSO4 · 5H20 0. 005g、CoCl2 · 6H20 0. Olg、Na2MoO4 · 2H20 0. 003g、ZnCl2 0. 005、CuSO4 · 5H20 0. 005g,H3BO4 0. 004g、FeS04 · 7H200. 01g、CaCl2 · 2H20 0. OUMgSO4 · 7H20 0. 6g、消泡劑0. 2g。優(yōu)選的，上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其中每IL H2O中含有葡萄糖 5g、蛋白胨 5g、酵母粉 10g、KH2P04 2g、K2HPO4 lg、Na2HPO4* Iffi2O 7g、(NH4)2SO4 0. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 · 5H20 0. OOlg、CoCl2 · 6H200. Olg、Na2MoO4 · 2H20 0. OOlg、ZnCl2 0. OOlg、CuSO4 · 5H20 0. OOlg、H3BO4 0. 012g、FeSO4 · 7H20 0. 02g、CaCl2 · 2H20 0. Olg、MgSO4 · 7H200. lg、消泡劑 0. 3g。上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至6. 8 7. 4 ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。優(yōu)選的，上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，所述步驟
(4)中發(fā)酵罐容積為50し本發(fā)明的有益效果是上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，在重組大腸桿菌發(fā)酵過程中避免或減少了こ酸的生成，減輕了傳統(tǒng)エ藝發(fā)酵過程中對菌體生長及蛋白表達的抑制作用，實現(xiàn)了重組大腸桿菌的高密度生長，提高了重組雞α干擾素蛋白的產率，從而有效降低了生產成本；其制備方法簡單，適合規(guī)模化工業(yè)生產的需要。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明所述技術方案作進ー步的說明。下述實施例中采用的發(fā)酵罐是鎮(zhèn)江科潤海生物工程設備有限公司生產的50L發(fā)酵罐；所采用的試劑均為普通化學試劑公司購買，所用消泡劑購自江蘇斯德瑞克化工有限公司，YJG-I ；目的蛋白測定采用SDS-PAGE法，采用BIO-RAD公司的蛋白電泳儀。實施例I一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5H20、H3BO4' FeSO4 · 7H20、CaCl2 · 2H20、MgSO4 · 7H20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 8g、蛋白胨 5g、酵母粉 5g、KH2P04 3g、K2HP042g、Na2HPO4 · Iffi2O 3g、(NH4)2SO4 0. 8g、NH4Cl 0. 2g、MnSO4 · 5H20 0. 005g、CoCl2 · 6H20 0. Olg、Na2MoO4 · 2H20 0. 003g、ZnCl2 0. 005、CuSO4 · 5H20 0. 005g、H3BO4 0. 004g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 01、MgSO4 · 7H200.如、消泡劑0.況、!120 IL0上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；
(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. O ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。實施例2一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、H3BO4' FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 10g、蛋白胨 6g、酵母粉 6g、KH2PO4 2g,K2HPO4Ig,Na2HPO4 · Iffi2O 2g、(NH4)2SO4 O. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 ·5Η20 0. OOlg、CoCl2 · 6H20 0. 004g、Na2MoO4 · 2H20 0. OOlg^ZnCl2 0.001、CuSO4 · 5H20 0. OOlg、H3BO4 0. 002g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 01、MgSO4 · 7H20
0.48、消泡劑0· lg、H20 IL0上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. I ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。實施例3一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、H3BO4' FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 10g、蛋白胨 5g、酵母粉 5g、KH2PO4 3g、K2HP043g、Na2HPO4 · Iffi2O 4g、(NH4)2SO4 O. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 ·5Η20 0. 006g、CoCl2 · 6H20 0. 01g、Na2Mo04 · 2H20 0. OOlg^ZnCl2 0. OOlg、CuSO4 · 5H20 0. 007g、H3BO4 0. 006g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 02g、MgSO4 · 7H20
0.如、消泡劑0· lg、H20 IL0上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至6. 9 ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。實施例4一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2XuSO4 ·5Η20,H3BO4,FeSO4 WH2OXaCl2 ·2Η20,MgSO4 ·7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 7g、蛋白胨 7g、酵母粉 7g、KH2PO4 2g、K2HPO4Ig'Na2HPO4 · 12H20 2g、(NH4)2SO4 I. 0g、NH4Cl0. 2g、MnSO4 · 5H20 0. OOlg、CoCl2 · 6H20 0. 004g、Na2MoO4 · 2H20 0. 004g、ZnCl2 0. 005g、CuSO4 *5H200. OOlg^H3BO4 0. 002g、FeS04 ·7Η20 0. 02g,CaCl2 ·2Η20 0. 01g、MgS04 *7H200. 3g、消泡劑 0.2g、H20 IL0上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. 2 ;(4)在發(fā)酵罐內，121 °C，20分鐘條件下滅菌，即得。
實施例5一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、Η3Β04、FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 10g、蛋白胨 10g、酵母粉 5g、KH2P04 4g,K2HPO4 4g、Na2HPO4 · 12H20 2g、(NH4)2SO4 I. 2g、NH4Cl 0. 3g、MnSO4 · 5H20 0. Olg、CoCl2 · 6H20 0. 004g、Na2MoO4 · 2H20 0. 005g、ZnCl2 0. Olg、CuSO4 · 5H20 0. Olg、H3BO4 0. 002g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 04g、MgSO4 · 7H200.如、消泡劑0· lg、H20 IL0上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. 4 ;(4)在發(fā)酵罐內，121 °C，20分鐘條件下滅菌，即得。實施例6一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4'K2HPO4'Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4'NH4C1、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6H20、Na2MoO4 · 2Η20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、H3BO4' FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和 H2O 組成，其中葡萄糖 5g、蛋白胨 5g、酵母粉 10g、KH2P042g、K2HP04lg、Na2HPO4 · Iffi2O 7g、(NH4)2SO4 O. 6g、NH4Cl 0. lg、MnS04 ·5Η20 0. OOlg、CoCl2 · 6H20 0. 01g、Na2Mo04 · 2H20 0. OOlg^ZnCl2 0. OOlg、CuSO4 · 5H20 0. OOlg、H3BO4 0. 012g、FeSO4 · 7H20 0. 02g、CaCl2 · 2H20 0. Olg、MgSO4 · 7H20
0.lg、消泡劑 0.3g、H20 ILo上述用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至6. 8 ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。將實施例1-6之一所述各組分用量按照相同比例増加或減少，所得各組分的用量配比關系均屬于本發(fā)明的保護范圍。對照試驗例
現(xiàn)有技術中用于重組雞干擾素α的發(fā)酵培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4, K2HPO4, Na2HPO4 · 12H20、NaCl、消泡劑和H2O組成，其中葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母粉 10g、KH2PO4 3g、K2HPO4 2g、Na2HPO4 · 12H203g、NaCl 5g、消泡劑 0. 2g、H2O 1し具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. O ;(4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得?，F(xiàn)有技術中用于重組雞干擾素α的補料培養(yǎng)基，主要由葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、MgSO4 · 7Η20 和 H2O 組成，其中葡萄糖 600g，酵母粉 50g，蛋白胨 25g，MgSO4 · 7H20 10g、H2OILo具體制備步驟如下(I)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分；(2)在蒸餾水溶液中溶解；(3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至7. O ;(4)裝入補料瓶中在115°C，20分鐘條件下滅菌，即得。試驗方法在上述發(fā)酵罐中按10%接入重組大腸桿菌種子后進行培養(yǎng)，在溶解氧第一次反彈時補加補料培養(yǎng)基，控制溶氧不低于20%，待菌體進入對數(shù)生長期開始添加IPTG誘導，至發(fā)酵結束，獲得含重組雞α干擾素的菌體并檢測菌體的目的蛋白(重組雞α干擾素)表達量。其中實施例1-6與對照試驗例采用相同的補料培養(yǎng)基，實施例1-6與對照試驗例采用各自所述發(fā)酵培養(yǎng)基進行試驗，結果見表I。表I
權利要求
1.一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在干主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4' K2HPO4' Na2HPO4 · 12H20、(NH4)2SO4' NH4Cl、MnSO4 · 5H20、CoCl2 · 6Η20、Na2MoO4 · 2H20、ZnCl2, CuSO4 · 5Η20、H3BO4' FeSO4 · 7Η20、CaCl2 · 2Η20、MgSO4 · 7Η20、消泡劑和H2O組成，其中每IL H2O中含有葡萄糖5 10g、蛋白胨5 10g、酵母粉5 10g、KH2P042 4g、K2HPO4 I 4g、Na2HPO4 · 12H20 2 7g、(NH4)2SO4 O. 6 I. 2g、NH4Cl O. I O. 3g、MnSO4 · 5Η200· 001 O. Olg、CoCl2 · 6H20 0. 004 0. Olg、Na2MoO4 · 2Η20 O. 001 O. 005g、ZnCl2 0. 001 0. Olg、CuSO4 · 5Η20 O. 001 O. Olg、H3BO4 0. 002 0. 012g、FeSO4 · 7Η20O. 01 O. 02g、CaCl2 · 2H20 0. 01 0. 04g、MgSO4 · 7H20 0. I 0. 6g、消泡劑 0· I 0. 3g。
2.根據(jù)權利要求I所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在干其中每IL H2O中含有葡萄糖7 10g、蛋白胨5 7g、酵母粉5 7g、KH2PO4 2 3g、K2HPO4I 3g、Na2HPO4 · 12H20 2 4g、(NH4)2SO4 O. 6 I. 0g、NH4Cl O. I 0. 2g、MnSO4 · 5H20O. 001 0. 006g、CoCl2 · 6H20 0. 004 0. Olg、Na2MoO4 · 2Η20 O. 001 O. 004g、ZnCl20. 001 0. 005g、CuS04 ·5Η20 O. 001 O. 007g,H3BO4 0. 002 0. 006g、FeS04 ·7Η20 O. 01 O. 02g、CaCl2 · 2H20 0. 01 0. 02g、MgSO4 · 7H20 0. 3 0. 6g、消泡劑 0· I 0. 2g。
3.根據(jù)權利要求I或2所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于其中每IL H2O中含有葡萄糖10g、蛋白胨6g、酵母粉6g、KH2P042g、K2HPO4 lg、Na2HPO4 · 12H20 2g、(NH4)2SO4 0. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 · 5H200. 001g、CoCl2 · 6H20 0. 004g、Na2MoO4 · 2H20 0. OOlg^ZnCl2 0. 001、CuSO4 · 5H200. OOlg^H3BO4 0. 002g、FeS04 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 01、MgSO4 · 7H20 0. 4g、消泡劑 0. lg。
4.根據(jù)權利要求I或2所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于其中每IL H2O中含有葡萄糖Sg、蛋白胨5g、酵母粉5g、KH2P043g、K2HPO4 2g、Na2HPO4 · 12H20 3g、(NH4)2SO4 0. 8g、NH4Cl 0. 2g、MnSO4 · 5H200. 005g、CoCl2 · 6H20 0. Olg、Na2MoO4 · 2H20 0. 003g、ZnCl2 0. 005、CuSO4 · 5H200. 005g、H3BO4 0. 004g、FeSO4 · 7H20 0. Olg、CaCl2 · 2H20 0. 01、MgSO4 · 7H20 0. 6g、消泡劑 0. 2g。
5.根據(jù)權利要求I所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在干其中每 IL H2O 中含有葡萄糖 5g、蛋白胨 5g、酵母粉 10g、KH2P042g、K2HPO4 lg、Na2HPO4 · 12H207g、(NH4)2SO4 0. 6g、NH4Cl 0. lg、MnSO4 · 5H200. 001g、CoCl2 · 6H20 0. Olg、Na2MoO4 · 2H200. 001g、ZnCl2 0. 001g、CuSO4 · 5H200. 001g、H3BO4 0. 012g、FeSO4 · 7H20 0. 02g、CaCl2 · 2H200. Olg、MgSO4 · 7H200. lg、消泡劑 0. 3g。
6.權利要求1-5之一所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于具體制備步驟如下 (1)按上述各組分的配比精確稱取規(guī)定重量的組分； (2)在蒸餾水溶液中溶解； (3)用50%氨水溶液調節(jié)pH值至6.8 7. 4 ; (4)在發(fā)酵罐內，121°C，20分鐘條件下滅菌，即得。
7.根據(jù)權利要求6所述的用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中發(fā)酵罐容積為50し
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于重組雞干擾素α的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其制備方法，所述發(fā)酵培養(yǎng)基主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、KH2PO4、K2HPO4、Na2HPO4·12H2O、(NH4)2SO4、NH4Cl、MnSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Na2MoO4·2H2O、ZnCl2、CuSO4·5H2O、H3BO4、FeSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、消泡劑和H2O組成，通過蒸餾水溶解并用氨水調節(jié)pH值，最后在發(fā)酵罐內滅菌制得；所述發(fā)酵培養(yǎng)基減輕了傳統(tǒng)工藝發(fā)酵過程中對菌體生長及蛋白表達的抑制作用，實現(xiàn)了重組大腸桿菌的高密度生長，提高了重組雞α干擾素蛋白的產率。
文檔編號C12R1/19GK102660613SQ20121012950
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月27日 優(yōu)先權日2012年4月27日
發(fā)明者高應瑞 申請人:天津生機集團股份有限公司