專利名稱：一種含ace抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品加工領(lǐng)域，涉及一種功能性羊乳制品加工領(lǐng)域，具體涉及一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法。
背景技術(shù)：
高血壓病是近年來最常見的心血管病，是全球范圍的重大公共衛(wèi)生問題。據(jù)流行病學(xué)的研究，高血壓損傷靶器官，引起多種心腦血管疾病和腎臟疾病，最終導(dǎo)致患者致殘和致死，血壓的升高是腦卒中和冠心病發(fā)病的獨立危險因素，防治高血壓是預(yù)防心腦血管病的關(guān)鍵[I]，更是減輕家庭和國家沉重負擔(dān)的關(guān)鍵。根據(jù)2010年修訂的《中國高血壓防治指南》，我國人群高血壓患病率仍呈增長態(tài)勢，每5個成人中就有I人患高血壓；估計目前全國高血壓患者至少2億，現(xiàn)已成為世界上高血壓危害最嚴重的國家。高血壓病是指在靜息狀態(tài)下，動脈收縮壓或舒張壓增高O 140 / 90mmHg)。常伴有脂肪和糖代謝紊亂以及心、腦、腎和視網(wǎng)膜等器官功能性或器質(zhì)性改變，以器官重塑為特征的全身性疾病。休息5min以上,2次以上非同日測得的血壓彡140 / 90mmHg可以診斷為高血壓。按病因一般將高血壓分為兩大類:由一些已知原因引起的高血壓，稱為繼發(fā)性高血壓，僅占高血壓病例的5%;另一大類高血壓的發(fā)病原因不清楚,稱為原發(fā)性高血壓,這種高血壓占高血壓患者的95%以上，是危害人體健康的主要疾病。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme, ACE)抑制劑的研究始于1965年，F(xiàn)erreira等人在南美洲蝮蛇(Bothrops jararaca)毒液中發(fā)現(xiàn)了一種ACEIP (Angiotensin 1-Converting Enzyme Inhibitory Peptides),之后人們對于 ACE 抑制劑的機理、提取及合成進行了廣泛的研究，除了從天然物質(zhì)中分離提取外，更多的是食源性蛋白經(jīng)酶解或發(fā)酵制備而得，這些食物蛋白資源主要包括乳蛋白、大豆蛋白、卵蛋白、玉米醇溶蛋白、大麥醇溶 蛋白等等。目如，研究最多的就是來源于乳蛋白的ACE抑制妝。ACE抑制肽是ACE的競爭性抑制劑，一方面它對于人體的升血壓系統(tǒng)腎素一血管緊張素系統(tǒng)(Renin-Angiotensin System, RAS)起到抑制作用，另一方面又對于人體的降血壓系統(tǒng)激肽釋放酶一激肽系統(tǒng)(Kallikrein-Kinin System, KKS)起到促進作用，從而起到了降低血壓的作用。ACE抑制肽對于血壓正常的動物或人沒有降血壓作用，具有安全性高，無毒副作用的特點。有研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵法得到的一些酸奶也具有降血壓功能，并有學(xué)者從中分離得到了ACE抑制肽。羊奶是人類的主要乳源之一，全世界大約有一半左右的人口食用羊奶。羊奶與牛奶的主要組成相近，某些營養(yǎng)素比牛奶高出很多。含有牛奶不具備的一些特殊物質(zhì)，如:EGF表皮生長因子，免疫球蛋白。不含牛奶引起的過敏物質(zhì)α-Sl的酪蛋白。羊奶能夠增強機體免疫力，調(diào)節(jié)人體營養(yǎng)平衡，提高睡眠質(zhì)量，其偏堿性的良好緩沖特性對腎炎、結(jié)核及哮喘等疾病也具有促進康復(fù)的作用，是嬰幼兒、孕婦、老人和病人的上佳保健品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，制備得到風(fēng)味獨特、營養(yǎng)價值高、ACE抑制肽活性高的高鈣酸羊奶。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn):一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，包括以下步驟:I)按每IOOml接種3 7ml的比例，將經(jīng)活化的植物乳桿菌接種于羊奶或羊奶復(fù)原乳中，在32 40°C下厭氧發(fā)酵14 20h，得到發(fā)酵羊奶；其中，所述的羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加有檸檬酸鈣和乳清粉；其中，所述的羊奶或羊奶復(fù)原乳中檸檬酸鈣和乳清粉的添加量分別為每IOOml羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加0.1 0.5g和0.5 0.9g ；2)按質(zhì)量份數(shù)計，取80 90份發(fā)酵羊奶，5 10份蔗糖，0.03 0.1份穩(wěn)定劑和5 30份水，充分混合后冷卻至10°C以下，得到混合發(fā)酵羊奶；3)將混合發(fā)酵羊奶在2 5°C下密封靜置，后熟6 8h，得到含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶。所述植物乳桿菌的活化處理包括以下步驟:I)將植物 乳桿菌凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，混勻后在37°C下活化三次，得到第三代菌種；每次均按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種3 7ml的比例進行轉(zhuǎn)接，其中，前兩次活化24h，第三次活化18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種3 7ml的比例，將第三代菌種接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，混勻后在37°C下活化三次，得到經(jīng)活化的植物乳桿菌；其中，每次活化10 14h。所述的羊奶復(fù)原乳是按每IOOml水添加8 16g的羊奶粉充分混勻后得到的。所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所述的發(fā)酵羊奶中植物乳桿菌L69的活菌數(shù)大于108cfu/mL。所述的發(fā)酵羊奶中ACE抑制肽的抑制率達到70 90%。制備的含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶在制備預(yù)防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中應(yīng)用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果: 本發(fā)明采用具有保健功效的酸奶生產(chǎn)菌種-植物乳桿菌(LactobaciIIus
PIantarum)作為發(fā)酵菌種,植物乳桿菌所含蛋白酶的水解活力高,能夠水解乳蛋白產(chǎn)生多種對人體有益的生物活性肽，其中就包括具有降血壓功能的ACE抑制肽。本發(fā)明采用羊奶或羊奶復(fù)原乳作為發(fā)酵乳，羊奶中含有EGF表皮生長因子、免疫球蛋白，且羊奶脂肪球小，中、短鏈不飽和脂肪酸含量豐富，尤其是中鏈脂肪酸含量高，人體易吸收，可增強機體免疫力，調(diào)節(jié)人體營養(yǎng)平衡，提高睡眠質(zhì)量。同時，本發(fā)明制備的羊奶中添加了檸檬酸鈣和乳清粉，檸檬酸鈣對其他營養(yǎng)素攝取影響較小，且檸檬酸鈣比碳酸鈣中的鈣質(zhì)吸收率高，Ca2+對發(fā)酵奶過程產(chǎn)ACE抑制肽及ACE抑制肽抑制率有明顯的促進作用，乳清粉提高了發(fā)酵羊奶的凝固性及ACE抑制肽的活性。本發(fā)明采用以植物乳桿菌單菌株發(fā)酵的方式制備羊奶飲品，方法簡便易行，不僅除去了羊奶中的膻味，還保留了羊奶中豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，凝乳細膩，易于吸收，制得的產(chǎn)品中植物乳桿菌活菌數(shù)大于108cfu/mL，ACE抑制肽活性可達到75 90%，能夠調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的平衡，增強機體免疫力，降低膽固醇水平；堅持長期飲用，可以有效地預(yù)防高血壓的發(fā)病，同時也可用于高血壓患者的輔助治療，可應(yīng)用與制備預(yù)防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中。
具體實施例方式下面結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，所述是對本發(fā)明的解釋而不是限定。本發(fā)明實施例所使用的植物乳桿菌L69分離自內(nèi)蒙古酸奶樣品。實施例1I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次均按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種5ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種，其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種5ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種，接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次10h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將14g的羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，得到羊奶復(fù)原乳，再添加0.3g的檸檬酸鈣和0.7g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種5ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在37°C恒溫厭氧發(fā)酵18h，得到發(fā)酵羊奶；以質(zhì)量份數(shù)計，將0.05份的穩(wěn)定劑和8份蔗糖，用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至40°C，再加入到90份的發(fā)`酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在4°C冰箱后熟8h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中植物乳桿菌L69活菌數(shù)為4.16X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率，方法如下:用0.lmol/L硼酸鹽緩沖液(含有0.3mol/L的NaCl，pH值為8.3)，將HHL(Hip-His-Leu)配成5mmol/L的溶液,在IOmL試管中分別加入200 μ L的Hip-His-Leu溶液和80 μ L的發(fā)酵乳上清液，于37°C下保溫3min后，再加入20 μ L ACE溶液(溶解于蒸餾水中，活力為0.lU/mL),混勻后在37°C下保溫30min，再加入250 μ Llmol/L HC1，終止反應(yīng)，再加入1.7mL醋酸乙酯，經(jīng)15s振蕩混勻后，靜置5min，用移液管吸取1.0mL的醋酸乙酯層，真空冷凍干燥后，加入1.0mL蒸餾水，混勻后在228nm處測定吸光度。在上述條件下，抑制50%的ACE活性(IC50)為樣品的一個活性單位。測定過程有三次平行實驗，ACE抑制肽對ACE的抑制率用下面公式計算，然后再取平均值。ACE 抑制率=[(B-A) / (B-C) ] X 100%式中:A為含有發(fā)酵乳乳清(或溶于蒸餾水的多肽溶液)和ACE溶液的吸光度B為不含發(fā)酵乳乳清(或溶于蒸餾水的多肽溶液)樣品，但含有ACE溶液的吸光度
C為含脫脂乳乳清(或蒸餾水)，但不含ACE溶液的吸光度，即空白。經(jīng)測定，其中ACE抑制肽活性為88.52%。實施例2I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種5ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種5ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種取接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次12h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將14g的羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，得到羊奶復(fù)原乳，再添加0.1g檸檬酸鈣和0.5g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種5ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在37°C恒溫厭氧發(fā)酵18h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.03份的穩(wěn)定劑和5份蔗糖用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至40°C，再加入到90份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在4°C冰箱后熟8h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中植 物乳桿菌L69活菌數(shù)為3.13 X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為84.33%。實施例3I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種5ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種5ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種，接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次10h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將14g的羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，再添加0.5g檸檬酸鈣和0.5g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種7ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在37°C恒溫厭氧發(fā)酵18h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.1份的穩(wěn)定劑和6.5份蔗糖，用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至40°C，再加入到89份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在4°C冰箱后熟8h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中植物乳桿菌L69活菌數(shù)為2.58 X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為78.65%。實施例4I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種3ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種3ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種，接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次14h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將16g羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，再添加0.2g檸檬酸鈣、0.6g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種3ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在32°C恒溫厭氧發(fā)酵20h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.08份穩(wěn)定劑和7份蔗糖用15份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至43°C，再加入到84份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在5°C冰箱后熟7h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品 中植物乳桿菌L69活菌數(shù)為2.73 X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為79.24%。實施例5I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種7ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種7ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種，接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次10h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將IOg羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，再添加0.1g檸檬酸鈣和0.8g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種4ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在40°C恒溫厭氧發(fā)酵14h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.1份穩(wěn)定劑和10份蔗糖用19份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至37°C，再加入到80份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在2°C冰箱后熟8h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中植物乳桿菌L69活菌數(shù)為3.06 X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為81.37%。實施例6I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種5ml的比例轉(zhuǎn)接，得到第三代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種5ml的比例，將步驟I)得到的第三代菌種，接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次12h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；
3)將8g羊奶粉添加到IOOmL水中并混合均勻，再添加0.2g檸檬酸鈣和0.9g乳清粉，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種5ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在32°C恒溫厭氧發(fā)酵20h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.03份穩(wěn)定劑和5份蔗糖用5份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至40°C，再加入到80份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在4°C冰箱后熟6h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中保加利亞乳桿菌L6活菌數(shù)為2.92X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為77.36%。 實施例7I)將植物乳桿菌L69的凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種5ml的比例轉(zhuǎn)接，得到3代菌種；其中，前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h ；2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種5ml的比例，將步驟I)得到的3代菌種取接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養(yǎng)條件下活化三次，每次14h，得到活化好的植物乳桿菌L69 ；3)將0.3g檸檬酸鈣和0.5g乳清粉添加到IOOml鮮羊奶中混合均勻，過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40°C后，按每IOOml接種5ml的比例接入活化好的植物乳桿菌L69，在37°C恒溫厭氧發(fā)酵18h，得到發(fā)酵羊奶。以質(zhì)量份數(shù)計，將0.1份的穩(wěn)定劑和10份蔗糖用30份的水溶解，在65°C巴氏殺菌IOmin后冷卻至40°C，再加入到90份的發(fā)酵羊奶中，混合均勻后迅速冷卻至10°C以下，再在4°C冰箱后熟8h，制成產(chǎn)品；其中，所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。所得產(chǎn)品中植物乳桿菌L69活菌數(shù)為3.02 X 108cfu/mL，采用紫外分光光度法，檢測ACE抑制肽的抑制率為82.18%。綜上所述,本發(fā)明以植物乳桿菌(Lactobaci I Ius pIantarum)作為發(fā)酵菌種，植物乳桿菌是一種具有保健功效的新型酸奶生產(chǎn)菌種，是定植于人體腸道內(nèi)對機體有益的正常菌群，具有調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的平衡，增強機體的免疫力，降低膽固醇水平等保健作用，其蛋白酶水解活力高，能夠水解乳蛋白產(chǎn)生多種對人體有益的生物活性肽，其中就包括具有降血壓功能的ACE抑制肽。本發(fā)明在羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加檸檬酸鈣，檸檬酸鈣味道平和，氣味適中，吸收率高，可用于多種食品的強化，檸檬酸鈣用于食品營養(yǎng)強化優(yōu)于其它鈣鹽:1)、一般來說，鈣的有機酸鹽較之無機酸鹽生物利用率高；2)、檸檬酸鈣比碳酸鈣中的鈣質(zhì)吸收率高，Ca2+對發(fā)酵奶過程產(chǎn)ACE抑制肽及ACE抑制肽抑制率有明顯的促進作用，對腎、尿結(jié)石的影響較??；3)、檸檬酸鈣中鈣質(zhì)吸收與胃酸水平無關(guān)，不會引起胃酸分泌水平低的人發(fā)生胃腸道反應(yīng)；4)、鈣的吸收除過去假設(shè)的單離子吸收外，尚有一種以檸檬酸鈣復(fù)合物形式吸收的機制；5)、檸檬酸鈣與一般鈣源不同，對其他營養(yǎng)素攝取影響較小，它僅有限影響包括鐵質(zhì)在內(nèi)的其它礦物質(zhì)吸收；6)、檸檬酸鈣鹽可促進鋅的吸收。本發(fā)明在羊奶或羊奶復(fù)原乳中還添加有乳清粉，乳清粉能夠提高發(fā)酵羊奶的凝固性以及ACE抑制肽的活性。同時，為了保證羊奶發(fā)酵過程中產(chǎn)生的ACE抑制肽具有較高活性，在發(fā)酵結(jié)束后添加了蔗糖與穩(wěn)定劑。本發(fā)明制得的發(fā)酵羊奶中ACE抑制肽活性可達到75 90%，堅持長期飲用，可以有效地預(yù)防高血壓的發(fā)病，同·時也可用于高血壓患者的輔助治療。
權(quán)利要求
1.一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)按每IOOml接種3 7ml的比例，將經(jīng)活化的植物乳桿菌接種于羊奶或羊奶復(fù)原乳中，在32 40°C下厭氧發(fā)酵14 20h，得到發(fā)酵羊奶；其中，所述的羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加有檸檬酸鈣和乳清粉； 其中，所述的羊奶或羊奶復(fù)原乳中檸檬酸鈣和乳清粉的添加量分別為每IOOml羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加0.1 0.5g和0.5 0.9g ； 2)按質(zhì)量份數(shù)計，取80 90份發(fā)酵羊奶，5 10份蔗糖，0.03 0.1份穩(wěn)定劑和5 30份水，充分混合后冷卻至10°C以下，得到混合發(fā)酵羊奶； 3)將混合發(fā)酵羊奶在2 5°C下密封靜置，后熟6 8h，得到含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于:所述植物乳桿菌的活化處理包括以下步驟: 1)將植物乳桿菌凍干菌粉接種于MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中，混勻后在37°C下活化三次，得到第三代菌種；每次均按100ml MRS液體培養(yǎng)基中接種3 7ml的比例進行轉(zhuǎn)接，其中，前兩次活化24h，第三次活化18h ； 2)按每IOOml滅菌羊奶復(fù)原乳中接種3 7ml的比例，將第三代菌種接種于裝有滅菌羊奶復(fù)原乳的厭氧管中，混勻后在37°C下活化三次，得到經(jīng)活化的植物乳桿菌；其中，每次活化10 14h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于:所述的羊奶復(fù)原乳是按每IOOml水添加8 16g的羊奶粉充分混勻后得到的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于:所述的穩(wěn)定劑為黃原膠、果膠和海藻酸鈉按照質(zhì)量比為2:3:1組成的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于:所述的發(fā)酵羊奶中植物乳桿菌L69的活菌數(shù)大于108cfu/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，其特征在于:所述的發(fā)酵羊奶中ACE抑制肽的抑制率達到70 90%。
7.權(quán)利要求1所述制備的含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶在制備預(yù)防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含ACE抑制肽的植物乳桿菌發(fā)酵的高鈣酸羊奶的制備方法，屬于功能性羊乳制品加工領(lǐng)域。包括以下步驟1)將經(jīng)活化的植物乳桿菌接種于羊奶或羊奶復(fù)原乳中，厭氧發(fā)酵得到發(fā)酵羊奶；其中，所述的羊奶或羊奶復(fù)原乳中添加有檸檬酸鈣和乳清粉；2)取發(fā)酵羊奶，蔗糖及穩(wěn)定劑和水，充分混合后冷卻至10℃以下，得到混合發(fā)酵羊奶；3)將混合發(fā)酵羊奶密封靜置，后熟后得到含ACE抑制肽的高鈣酸羊奶。本發(fā)明采用以植物乳桿菌單菌株發(fā)酵的方式制備高鈣酸羊奶，簡便易行，制備的高鈣酵羊奶中植物乳桿菌活菌數(shù)大于108cfu/mL，ACE抑制肽活性可達到75～90%，可調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的平衡，增強機體免疫力。
文檔編號A23C9/123GK103229831SQ201310145079
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月24日
發(fā)明者陳合, 張秋紅, 舒國偉 申請人:陜西科技大學(xué)