專利名稱：酶促轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬農(nóng)副產(chǎn)品加工領(lǐng)域，特別涉及一種酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法。
背景技術(shù)：
隨著生活水平的提高，人們?cè)絹碓阶⒅厥称返臓I(yíng)養(yǎng)性和功能性的互補(bǔ)。桑葉自古就是一種藥食兩用的天然食品，安全性高?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，桑葉提取物含有黃酮、多糖和生物堿等有效成分，在治療糖尿病、高血壓、高血脂等癥及抗衰老、抗病毒、抗炎等方面都具有良好的療效，其中桑葉黃酮的降血壓和桑葉生物堿的降血糖活性最為顯著。長(zhǎng)期飲用桑葉，具有清涼止渴，開胃生津，滋陰明目、降低膽固醇、增強(qiáng)免疫等功效。因此，近年來人們開始越來越多地關(guān)注桑葉新型飲品的設(shè)計(jì)與開發(fā)。傳統(tǒng)的桑葉飲料是以新鮮桑葉為原料，經(jīng)熱水提取獲得桑葉浸提汁，進(jìn)而添加食品添加劑配方，即制成飲品，如公開專利CN1813596報(bào)道了應(yīng)用上述工藝步驟的桑葉汁飲料及其制備方法。另一種常見制備方法是以新鮮桑葉為原料，經(jīng)過煸炒、揉捻及干燥等工序制成桑綠茶，進(jìn)而制備桑葉飲品，如公開專利CN1951205A報(bào)道了桑茶葉及其粉末飲料的制備方法。此外，就是以桑葉和其他原料復(fù)方制備飲品，如公開專利CN101803782A報(bào)道了桑葉和陳皮為主的復(fù)方桑葉飲料及其制備方法，CN1729874A報(bào)道了桑葉、桑葚和菊花為主的復(fù)方顆粒飲料及其制備方法，CN101234142A報(bào)道了以桑葉、桑枝及桑白皮的提取物為主的桑系列保健功能飲料，授權(quán)專利ZL98114494. 2報(bào)道了以桑葉、桑枝、桑根、桑葚、蜂蜜、薄荷、大棗、山楂以及蘋果制備的保健飲料，CN1899056A報(bào)道了桑葉有效成分與純牛奶配伍而成的桑葉奶及其制備方法。以上方法都是基于桑葉提取物或與其他原料配伍技術(shù)制備的桑葉飲品，均未見以桑葉有效成分酶法轉(zhuǎn)化產(chǎn)物為主要成分開發(fā)桑葉保健飲品的報(bào)道。藥理研究表明，天然糖苷類化合物在體內(nèi)的生物利用度和生理活性往往不如其次生苷或其苷元。授權(quán)專利ZL200910028166. 3報(bào)道了一株點(diǎn)青霉菌株及其在生物轉(zhuǎn)化桑葉黃酮苷中的應(yīng)用，在體外利用糖苷酶或產(chǎn)糖苷酶微生物將桑葉提取物中的糖苷型黃酮生物轉(zhuǎn)化成其次生苷或苷元產(chǎn)物，就可以增強(qiáng)桑葉提取物的生物活性。因此，經(jīng)過酶促轉(zhuǎn)化桑葉提取物，進(jìn)而合理配方制備新型桑葉飲料富含高活性黃酮成分，其生物利用度大大提高，在心腦血管疾病預(yù)防及輔助治療方面具有良好效果。此外，新型桑葉飲料中還含有生物堿(如 1-DNJ)和多糖類成分，特別適用于廣大亞健康人群，包括高血壓、糖尿病等患者的輔助治療藥物和日常保健飲品。

發(fā)明內(nèi)容
解決的技術(shù)問題發(fā)明一種以桑葉提取物的酶轉(zhuǎn)化液為主要原料，經(jīng)過糖苷酶生物轉(zhuǎn)化桑葉黃酮，進(jìn)而添加其它輔料，經(jīng)過混料、除雜、脫氣、灌裝、殺菌后的新型桑葉飲料。技術(shù)方案
酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，桑葉浸提液的提取及酶促轉(zhuǎn)化按質(zhì)量體積比將新鮮桑葉kg 純凈水L= 1:5^1:50混合后6(T10(TC浸提廣1 得到桑葉浸提液，將桑葉浸提液與糖苷酶混合進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度2(T70°C，反應(yīng)時(shí)間l(T72h，反應(yīng)結(jié)束，獲得桑葉浸提物的酶解液；桑葉飲料的基本組成與配方以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液10 kg 15 kg，蔗糖4 kg 7 kg，檸檬酸0. 10 kg 0. 50 kg，維生素C 0.125 kg，香精0.01 kg，蜂蜜0.5 kg 1.5 kg，其余為純凈水。純凈水和新鮮桑葉的質(zhì)量體積比kg/L范圍為1 30。純凈水浸提新鮮桑葉的溫度范圍為80°C。純凈水浸提新鮮桑葉的時(shí)間范圍為拙。糖苷酶是葡萄糖苷酶、鼠李糖苷酶或蝸牛酶。桑葉飲料的基本組成與配方以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液12 kg，蔗糖 5.5 kg，檸檬酸0. 18 kg，維生素C 0.125 kg，香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，其余為純凈水。食用香精為紅茶香精。具體操作包括以下步驟
1、浸提。取新鮮桑葉，按體積比加入純凈水后加熱浸提，得到的桑葉浸提液。2、酶轉(zhuǎn)化。用泵輸送桑葉浸提液經(jīng)過填充有固定化糖苷酶的柱狀反應(yīng)器，進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后獲得桑葉浸提物的酶解液。3、混料。將蔗糖和檸檬酸投入到桑葉浸提物的酶解液中，攪拌，使蔗糖和檸檬酸充分溶解。4、加入蜂蜜、食用香精和維生素C。5、殺菌。料液升溫至95 V 士 2 °C，殺菌3 6 min。6、灌裝。將殺菌過的料液連續(xù)地灌裝到銷售用的容器中。灌裝量為200 500 mL 比較合適。有益效果本發(fā)明功能性桑葉飲品制作工藝切實(shí)可行，具有較高的科技含量，符合現(xiàn)代人“營(yíng)養(yǎng)保健”的消費(fèi)觀念和“返璞歸真”的養(yǎng)生理念，易于被廣大消費(fèi)人群接受。經(jīng)過酶促轉(zhuǎn)化桑葉提取物，進(jìn)而合理配方制備新型桑葉飲料富含高活性黃酮成分，其生物利用度大大提高，在心腦血管疾病預(yù)防及輔助治療方面具有良好效果。此外，新型桑葉飲料中還含有生物堿(如1-DNJ)和多糖類成分，特別適用于廣大亞健康人群，包括高血壓、糖尿病等患者的輔助治療藥物和日常保健飲品。本發(fā)明的產(chǎn)品澄澈透明顏色鮮亮，茶香清新，回味醇厚悠長(zhǎng)，入口甘酸潤(rùn)爽，口感上佳。市場(chǎng)調(diào)查表明新型功能性桑葉飲料具有很大的市場(chǎng)開發(fā)潛力，將會(huì)帶來較高的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。本發(fā)明實(shí)施例中桑葉黃酮苷以蘆丁為代表，檢測(cè)蘆丁及其次生苷和苷元采用高效液相色譜法。(1)蘆丁和異槲皮苷的色譜條件Alltima C18 (250讓X 4. 6讓，5 μ m)，流動(dòng)相 0. 0 磷酸-乙腈(80:20，ν/ν)；檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm ；流速1. 0 mL/min ；進(jìn)樣量:20μ L。(2)槲皮素的色譜條件色譜柱Alltima C18 (4.6 mmX250謹(jǐn)，5μπι)，流動(dòng)相乙腈-0.5 mol/L pH4.0 醋酸緩沖液(27:73，V/V)；檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm;流速1.0 mL/min ；進(jìn)樣量:20μ L0其中，桑葉黃酮的降解率計(jì)算方法為
本發(fā)明實(shí)施例中固定化糖苷酶采用海藻酸鈉-殼聚糖包埋法配制1 Wt海藻酸鈉膠體溶液50 mL，加入0. 1 g糖苷酶粉，混合均勻后用注射器滴到由100 mL4°C預(yù)冷的0. 2 mol/L CaCl2溶液和IOOmL 0.1 % wt殼聚糖溶液(由pH 5. 0的乙酸鈉-乙酸緩沖液配制)組成的硬化液中，在4°C冰箱中固定化池，得到直徑3 mm的球狀固定化酶顆粒，經(jīng)乙酸鈉-乙酸緩沖液(PH5. 0)沖洗三次后置于4°C冰箱里保存?zhèn)溆谩?shí)施例1
本實(shí)施例的配方為以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液10 kg，蔗糖7 kg，檸檬酸 0. 10 kg，維生素C 0.125 kg，紅茶香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，其余為純凈水。本實(shí)施例的制備工藝為取新鮮桑葉，按體積比1 5 kg/L加入純凈水后100 °〇浸提1 h得到桑葉浸提液，用泵輸送桑葉浸提液經(jīng)過填充有固定化糖苷酶的柱狀反應(yīng)器，進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度20 °C，反應(yīng)時(shí)間72 h，反應(yīng)結(jié)束獲得桑葉浸提物的酶解液。依配方投入蔗糖和檸檬酸，攪拌、溶解，再加入蜂蜜、紅茶香精和維生素C，攪拌均勻。超濾膜除雜，隨即脫氣灌裝。然后升溫至95°C 士 2°C，殺菌3 6min。冷卻后得到新型桑葉飲料產(chǎn)
P
ΡΠ O本實(shí)施例產(chǎn)品桑葉黃酮苷降解率達(dá)17 %，香氣清新，入口甘酸潤(rùn)爽，略帶桑葉味。實(shí)施例2
本實(shí)施例的配方為以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液15 kg，蔗糖4 kg，檸檬酸 0. 50 kg，維生素C 0. 125 kg，紅茶香精0.01 kg，蜂蜜0.5 kg，其余為純凈水。本實(shí)施例的制備工藝為取新鮮桑葉，按體積比1:50 (kg/L)加入純凈水后60 °c浸提1 得到桑葉浸提液，用泵輸送桑葉浸提液經(jīng)過填充有固定化糖苷酶的柱狀反應(yīng)器，進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度70 °C，反應(yīng)時(shí)間10 h，反應(yīng)結(jié)束獲得桑葉浸提物的酶解液。依配方投入蔗糖和檸檬酸，攪拌、溶解，再加入蜂蜜、紅茶香精和維生素C，攪拌均勻。超濾膜除雜，隨即脫氣灌裝。然后升溫至95°c 士 2°C，殺菌3 6min。冷卻后得到新型桑葉飲料產(chǎn)品。本實(shí)施例產(chǎn)品中桑葉黃酮苷降解率達(dá)48%，營(yíng)養(yǎng)豐富，香氣清新，入口甘酸潤(rùn)爽。實(shí)施例3
本實(shí)施例的配方為以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液12 kg，蔗糖5.5 kg，檸檬酸0. 18 kg，紅茶香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，維生素C 0. 125 kg，其余為純凈水。
本實(shí)施例的制備工藝為取新鮮桑葉，按體積比1:30 (kg/L)加入純凈水后80 °C浸提6 h得到桑葉浸提液，用泵輸送桑葉浸提液經(jīng)過填充有固定化糖苷酶的柱狀反應(yīng)器， 進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度40 °C，反應(yīng)時(shí)間M h，反應(yīng)結(jié)束獲得桑葉浸提物的酶解液。 依配方投入蔗糖和檸檬酸，攪拌、溶解，再加入蜂蜜、紅茶香精和維生素C，攪拌均勻。超濾膜除雜，隨即脫氣灌裝。然后升溫至95°C 士 2°C，殺菌3 6min。冷卻后得到新型桑葉飲料本實(shí)施例產(chǎn)品中桑葉黃酮苷降解率達(dá)87 %，澄澈透明，顏色鮮亮，回味醇厚悠長(zhǎng)， 口感上佳。
權(quán)利要求
1.酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于(1)桑葉浸提液的提取及酶促轉(zhuǎn)化按質(zhì)量體積比將新鮮桑葉kg:純凈水L= 1:5^1:50混合后6(T10(TC浸提廣1 得到桑葉浸提液，將桑葉浸提液與糖苷酶混合進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度2(T70°C，反應(yīng)時(shí)間l(T72h，反應(yīng)結(jié)束，獲得桑葉浸提物的酶解液；(2)桑葉飲料的基本組成與配方以100kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液10 kg 15 kg,蔗糖4 kg 7 kg,檸檬酸0. 10 kg 0. 50 kg,維生素C 0. 125 kg,香精0. 01 kg,蜂蜜 0. 5 kg 1. 5 kg，其余為純凈水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于純凈水和新鮮桑葉的質(zhì)量體積比kg/L范圍為1:30。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于純凈水浸提新鮮桑葉的溫度范圍為80°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于純凈水浸提新鮮桑葉的時(shí)間范圍為他。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于所述糖苷酶是葡萄糖苷酶、鼠李糖苷酶或蝸牛酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于桑葉飲料的基本組成與配方以100 kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液12 kg，蔗糖5. 5 kg，檸檬酸 0. 18 kg，維生素C 0.125 kg，香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，其余為純凈水。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，其特征在于食用香精為紅茶香精。
全文摘要
酶法轉(zhuǎn)化桑葉黃酮制備桑葉飲料的方法，桑葉浸提液的提取及酶促轉(zhuǎn)化按質(zhì)量體積比將新鮮桑葉kg純凈水L＝1:5~1:50混合后60~100℃浸提1~12h得到桑葉浸提液，將桑葉浸提液與糖苷酶混合進(jìn)行酶促水解反應(yīng)，反應(yīng)溫度20~70℃，反應(yīng)時(shí)間10~72h，反應(yīng)結(jié)束，獲得桑葉浸提物的酶解液；桑葉飲料的基本組成與配方以100kg產(chǎn)品計(jì)，桑葉浸提物的酶解液10kg～15kg，蔗糖4kg～7kg，檸檬酸0.10kg～0.50kg，維生素C0.125kg，香精0.01kg，蜂蜜0.5kg～1.5kg，其余為純凈水。本發(fā)明桑葉飲料中桑葉黃酮苷降解率高，香氣清新，澄澈透明，顏色鮮亮，入口甘酸潤(rùn)爽，回味醇厚悠長(zhǎng)，口感上佳。
文檔編號(hào)A23L2/38GK102273705SQ201110167768
公開日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月21日
發(fā)明者衛(wèi)哲, 吳福安, 孫國(guó)霞, 王俊, 王蒙 申請(qǐng)人:江蘇科技大學(xué)