專利名稱：增加動物免疫應(yīng)答的方法
增加動物免疫應(yīng)答的方法 與相關(guān)申請的交叉引用
本申請要求美國臨時申請序列號60/630972的優(yōu)先權(quán)，所述美國 臨時申請于2004年11月24日提交，在此將其公開內(nèi)容引入作為參 考。
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明總的來說涉及增加動物免疫應(yīng)答的方法，且特別是增加動 物自然殺傷細胞活性的方法。 相關(guān)領(lǐng)域描述
由于持續(xù)暴露于難以置信的細菌、病毒和寄生物多樣性中，大多 數(shù)哺乳動物已經(jīng)發(fā)展了防御這類攻擊的免疫系統(tǒng)。自然殺傷(NK)細 胞是先天免疫應(yīng)答的重要效應(yīng)物，基于功能將其描述為能夠不經(jīng)過早 先刺激而殺死肺瘤或病毒感染的細胞。研究已顯示隨著某些哺乳動物 衰老，其免疫應(yīng)答退化。對于許多人而言，其伴侶動物(companion animal)例如狗的健康非常重要，特別是當(dāng)該動物衰老時。需要增加 動物、特別是衰老動物NK細胞活性的方法。
發(fā)明概述
本發(fā)明提供通過將自然殺傷細胞活性增加量的硫辛酸喂飼給動 物而增加動物自然殺傷細胞活性的方法，一般在含有以干重計至少50 ppm量的硫辛酸的飲食中給動物喂飼硫辛酸。
在各個實施方案中，本發(fā)明是基于使用硫辛酸作為喂伺動物的飲 食的部分而改善衰老動物健康的新方法。該新方法涉及基于使用硫辛 酸作為喂飼動物的飲食的部分而增加動物、特別是狗的自然殺傷細胞 活性。
本發(fā)明適用性的其它領(lǐng)域在此后提供的詳細描述中顯而易見。應(yīng) 當(dāng)理解，盡管指出了本發(fā)明的說明性實施方案，詳細描述和特定實施 例無意限制本發(fā)明的范圍。
附圖簡述
本發(fā)明將通過詳細描述和附圖得到更充分的理解。


圖1圖示了與年幼和年老對照比較，硫辛酸對年老狗NK細胞活 性的影響。
該圖意在例示本發(fā)明的一般特征以描述在此的這類實施方案。該 圖也許不能精確體現(xiàn)任何給定實施方案的特征，而且并非必定意在將 特定實施方案定義或限制在本發(fā)明范圍內(nèi)。
發(fā)明詳述
定義
術(shù)語"動物"指易感或遭受免疫應(yīng)答削弱、且需要改善免疫應(yīng)答的 任何動物，或可以通過增加的免疫應(yīng)答而受益的動物。如果動物表現(xiàn) 出指示該動物可能發(fā)展為某狀況或疾病的癥狀，則該動物"易患"該 疾病或狀況。如果動物表現(xiàn)出指示該動物已經(jīng)發(fā)展為某狀況或疾病的 癥狀，則該動物"患有"該疾病或狀況。
術(shù)語"年老動物"指因為老年而易感或遭受免疫應(yīng)答削弱、且需要 提高或改進免疫應(yīng)答的任何動物，或可以通過改善免疫應(yīng)答而受益的 動物。
術(shù)語"單獨的包裝"指在一個或多個容器中或與一個或多個容器 物理聯(lián)合的試劑盒組分，并且將其視為制造、分配、銷售或使用單元。 容器包括但不限于袋、盒、瓶、收縮包裝、用訂書釘訂的或以其他方 式附著的組分、或其組合。單獨的包裝可以是物理聯(lián)合的單個食物組 合物的容器，從而將其視為制造、分配、銷售或使用單元。
術(shù)語"虛擬包裝"指通過一個或多個物理的或虛擬試劑盒組分的 說明書而關(guān)聯(lián)的試劑盒組分，所述說明書指導(dǎo)用戶如何獲得其它組 分，例如含有一種組分及說明書的袋子，所述說明書指導(dǎo)用戶去網(wǎng) 站、接觸記錄的訊息、觀看可視訊息、或與護理人員或指導(dǎo)者聯(lián)系以 獲得如何使用該試劑盒的指導(dǎo)。
發(fā)明
一方面，本發(fā)明提供增加動物自然殺傷細胞活性的方法。該方法 包括向動物喂飼自然殺傷細胞活性增加量的硫辛酸。 一般而言，將硫 辛酸以高于每天5mg、優(yōu)選每天約10至約1000 mg、最優(yōu)選每天約 50至約500 mg的量喂飼動物。另一方面，本發(fā)明提供增加動物自然 殺傷細胞活性的組合物。該組合物包含至少50 ppm、優(yōu)選至少150 ppm的量的硫辛酸。在各個實施方案中，該方法和組合物可用于增加
動物、特別是年老動物免疫功能和應(yīng)答。
伴侶動物的營養(yǎng)和健康是動物的護理、特別是寵物護理最重要的 方面之一。許多護理人員具有確定動物是否得到良好平衡并且健康飲 食的困難時期。盡管人們更加知道其自身個人營養(yǎng)，但關(guān)于動物必須
具備的高級飲食需求的知識很少。自然殺傷(NK)細胞是先天免疫應(yīng) 答的重要效應(yīng)物，基于功能將其描述為能夠不經(jīng)過早先刺激而殺死腫 瘤或病毒感染的細胞。研究已顯示隨著某些哺乳動物衰老，其免疫應(yīng) 答退化。由于免疫應(yīng)答退化，所以增加NK細胞活性可以改善衰老哺 乳動物的健康。
本發(fā)明提供喂祠動物(例如諸如狗的伴侶動物)含有硫辛酸的組 合物或飲食以增加或增強免疫應(yīng)答(特別是當(dāng)免疫應(yīng)答因老年而削弱 時)并改善動物全面健康的方法。給予動物的硫辛酸的量是無毒性的 量?？梢詫⒘蛐了嶙鳛樘砑游锘虬谖癸暯o動物的包括飲食的組合 物中提供給動物。這類添加物可以是丸劑或膠嚢、款待(treat)或餅 干的形式或任何其他可食用形式。"飲食"指動物規(guī)律消費的食物或 飲料。飲食可以包括動物消費的添加物。認為飲食具有維持動物生命 的基本足夠的營養(yǎng)物。伴侶動物飲食可以是為動物提供足夠營養(yǎng)的任 何合適的寵物食物配方。例如，用于本發(fā)明的一般的犬飲食可以含有 約8至50%脂肪、以重量計約16至50%蛋白質(zhì)以及約3至15%總飲 食纖維。在另一個實例中， 一般的貓飲食可以含有以重量計約8至 50%脂肪以及以重量計約30至60%蛋白質(zhì)。然而，不要求這些或其 他營養(yǎng)物的特定比率或百分率。營養(yǎng)物是幫助支持生命的任何食物成 分。對于動物健康重要的營養(yǎng)物為熟練技術(shù)人員所公知，例如蛋白 質(zhì)、碳水化合物、脂肪、纖維、維生素和礦物質(zhì)。水對于動物健康也 至關(guān)重要。
衰老的自由基學(xué)說提出，氧化應(yīng)激導(dǎo)致衰老和細胞內(nèi)抗毒素(例 如谷胱甘肽)的還原型與氧化型比率的降低。谷胱甘肽普遍存在于肝 中，且用于綴合異生素以通過膽管排除并最終通過糞便排除。同樣， 衰老動物中谷胱甘肽濃度和活性的降低可以導(dǎo)致異生素清除率受 損，所述異生素清除率受損引起癌癥、毒性和其他有害作用。另外， 已知免疫功能隨年齡增加而老化。先前研究已經(jīng)顯示，補充硫辛酸的 狗的淋巴細胞中GSH:GSSG比提高，然而，功能性結(jié)果尚未得到定
量(見Zicker， SC等人，Veterinary Therapeutics, 3(2):167-176， 2002.)。已經(jīng)嘗試通過引入P-胡蘿卜素與其它抗氧化劑的組合而改 善伴侶動物免疫應(yīng)答。(見Hayek于2001年10月30日授權(quán)的美國專 利號6，310，090及Hayek于2000年10月17日授權(quán)的美國專利號 6,133,323)。
R-a-^^辛酸(CAS編號1200-22-2,也稱為thioctic acid和1，2-二 石危戊環(huán)-3畫戊酸(l，2-dithiolane-3-pentanoic acid)) 天然存在于植物和 動物組織中，在其中其與賴氨酸殘基的s氨基共價結(jié)合。硫辛酸可以 通過商業(yè)途徑獲得，且由例如BASF和Cognis的/>司生產(chǎn)?？梢酝?過商業(yè)途徑以基本純的R-a硫辛酸或硫辛酸異構(gòu)體的外消旋混合物 獲得硫辛酸。在植物中，硫辛酸在菠菜和馬鈴薯中最為豐富，而在動 物組織中，硫辛酸在腎和心臟中最為豐富。R-a-硫辛酸首次發(fā)現(xiàn)于 1937年(見Snell等人，Journal Bact. 33; 207， 1937 ),且直至1951 年才得到分離和表征(見Reed等人，Science 114:94-4， 1951 )。可以 合成R-a-硫辛酸，且這類方法為本領(lǐng)域所公知(見Reed于1961年4 月18日授權(quán)的美國專利號2,890,716)。已將R-a-硫辛酸分類為抗氧 化劑，并以高劑量用于II型糖尿病治療。研究已顯示，肉堿和硫辛 酸的混合物可以增強代謝并減輕氧化應(yīng)激(見Ames等人于1999年6 月29日授權(quán)的美國專利號5,916,912及Cavayzo于2002年4月2日 授權(quán)的美國專利號6,365,622)。另外，已經(jīng)顯示除其它成分之外包 含硫辛酸的伴侶動物飲食似乎抑制衰老伴侶動物的心理能力的退化 (見美國專利申請?zhí)?0020076469、 20020052402、 20020076470、 2000115710和20020119182)。
NK細胞對耙細胞例如病毒感染的細胞和腫瘤細胞表現(xiàn)出不依賴 抗體的細胞介導(dǎo)的細胞毒性。在人、小鼠和大鼠中，已提示NK細胞 識別并結(jié)合耙細胞，然后釋放細胞毒性因子以破壞靶細胞。已在犬中 報道了 NK細胞的這類結(jié)合和細胞毒性形為(參見Nariai, Y.等人， J. Bte. Med. Sci. 61 (7): 835-838， 1999)，盡管所述機制不同于上述的 動物實例。已有研究顯示，線粒體氧化在硫辛酸代謝中起到重要作 用。盡管在人中的代謝與在小鼠和大鼠當(dāng)中所觀察到的大體相似，但 發(fā)現(xiàn)于犬中的與四正石危辛酸(tetranorlipoic acid )有關(guān)的氧化結(jié)構(gòu)的 形成似乎在人中無配對物。另外，大鼠和人血漿樣品中的硫辛酸線粒
體氧化中間物3-酮硫辛酸(3-ketolipoic acid )已有報導(dǎo)，但其并未發(fā) 現(xiàn)于犬血漿樣品中(見Schupke， H.等人，Drug Metabolism and Disposition, 29 (6) 855-862， 2001 )。犬中a-硫辛酸的代謝途徑與人相 比似乎不同。
本發(fā)明的各個實施方案包括增加動物、尤其是伴侶動物的NK細 胞活性的方法。在這類實施方案中，該方法包括給動物喂飼組合物， 例如包含以干物質(zhì)計至少每天50 ppm量的硫辛酸的飲食。在另一個 實施方案中，該方法包括給動物喂飼包含以干物質(zhì)計至少每天100 ppm量的硫辛酸的飲食。在另一個實施方案中，該方法包括給動物喂 飼包含以干物質(zhì)計每天約75 ppm至約150 ppm量的硫辛酸的飲食。 如此處所用的，硫辛酸是外消旋混合物，但是本發(fā)明其它實施方案可 以包含基本純的R-a硫辛酸或硫辛酸鹽(lipoate)衍生物、異構(gòu)體 混合物、鹽、酯、酰胺或其組合的硫辛酸(例如，見Bethge等人于 1997年4月15日授權(quán)的美國專利號No5，621，177)。
在本發(fā)明的各個實施方案中，包含以干物質(zhì)計至少50 ppm硫辛 酸的伴侶寵物組合物或飲食增加年老狗的免疫應(yīng)答。在本發(fā)明的某些 實施方案中，將硫辛酸加入伴侶動物的食物中。在這類實施方案中， 可以在伴侶動物食物加工過程中加入硫辛酸，所述伴侶動物食物然后 經(jīng)過包裝并供消費者食用。這類加工可以包括擠壓、罐裝、烘焙等， 或任何本領(lǐng)域已知的其它生產(chǎn)寵物食物的方法或加工。在這類加工 中，可以由天然來源例如動物或植物組分(例如腎或菠菜)提供硫辛 酸，或者可以由合成來源提供硫辛酸，或者由天然和合成來源的混合 物提供硫辛酸。在本發(fā)明的其它實施方案中，硫辛酸可以為膠嚢的形 式以喂祠伴侶動物。在本發(fā)明的另一個實施方案中，硫辛酸可以是能 夠加入動物食物中或直接喂飼動物的粉末或晶體形式。在本發(fā)明的各 個實施方案中，伴侶動物飲食包含硫辛酸和其它所需營養(yǎng)組分。在本 發(fā)明的各個實施方案中，伴侶動物是狗，而在本發(fā)明其它實施方案 中，伴侶動物是貓。研究已表明，硫辛酸在貓體內(nèi)的毒性可能是在狗 體內(nèi)的十倍。(見Hill, AS等人，J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. 88(3-4): 150-156,2004)。在伴侶動物是貓的本發(fā)明的各個實施方案中，飲食 包含以干重計少于30 ppm的石危辛酸。
另一方面，本發(fā)明提供硫辛酸在制備藥物中的用途。在另一方
面，本發(fā)明提供硫辛酸在制備藥物中的用途，所述藥物用于維持和/ 或改善動物健康，例如通過將自然殺傷細胞活性增加量的硫辛酸喂詞 給動物而增加動物自然殺傷細胞活性。通常，通過將化合物或組合物 與賦形劑、緩沖劑、粘合劑、增塑劑、著色劑、稀釋劑、壓縮劑、潤 滑劑、食用香料、增濕劑以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知可用于生產(chǎn)藥物并 配制適合施用給動物的藥物的其它成分混合而制備藥物。
另一方面，本發(fā)明提供適于給動物喂飼硫辛酸的試劑盒。該試劑 盒在單獨的包裝的單獨容器或在適當(dāng)?shù)奶摂M包裝的單獨容器中包含
硫辛酸和至少下列之一(1)適于動物消費的一種或多種成分；(2)如 何將硫辛酸與試劑盒其它組分組合以增加免疫應(yīng)答、特別是產(chǎn)生可用 于增加免疫應(yīng)答的組合物的說明書；以及(3)如何使用本發(fā)明的硫 辛酸和其他組分、特別是使動物受益的說明書。當(dāng)試劑盒包含虛擬包 裝時，將該試劑盒限定為虛擬環(huán)境中與一個或多個物理試劑盒組分組 合的說明書。試劑盒含有足以增加免疫應(yīng)答的量的硫辛酸和其它組 分。 一般而言，在動物消費前將硫辛酸與其它適當(dāng)?shù)脑噭┖薪M分混 合。在一個實施方案中，試劑盒包括含有石克辛酸的小包以及用于由動 物消費的食物的容器。試劑盒可能含有其它項目，例如混合硫辛酸和 成分的裝置或容納混合物的裝置，例如食物碗。在另一個實施方案 中，將硫辛酸與促進動物良好健康的其它營養(yǎng)添加物例如維生素和礦 物質(zhì)混合。
另 一方面，本發(fā)明提供關(guān)于下列之一或多個的交流信息或說明書 的工具(1)使用硫辛酸以增加免疫應(yīng)答；(2)將硫辛酸與本發(fā)明其 它組分混合；(3)將硫辛酸單獨或與本發(fā)明其它成分組合喂飼動物； 以及(4)使用本發(fā)明的試劑盒以增加免疫應(yīng)答，所述工具包括含有 信息或說明書的文件、數(shù)字存儲介質(zhì)、光學(xué)存儲介質(zhì)、音頻介紹、或 可視顯示。在某些實施方案中，交流工具包括含有信息或說明書的文 件、數(shù)字存儲介質(zhì)、光學(xué)存儲介質(zhì)、音頻介紹、或可視顯示。優(yōu)選地， 交流工具是含有這類信息或說明書的顯示網(wǎng)站或小冊子、產(chǎn)品標(biāo)簽、 包裝插頁、廣告或可視顯示。有用的信息包括下列一個或多個(1)組 合并喂伺硫辛酸和/或其它組分的方法和技術(shù)以及(2)如果動物或其 護理人員關(guān)于本發(fā)明及其使用有問題時供其使用的聯(lián)系信息。有用的 說明書包括混合的量以及施用量和頻率。交流工具可用于指示使用本
發(fā)明的益處以及交流向動物喂祠本發(fā)明的認可方法。
本發(fā)明不限于在此所述的具體方法、方案和試劑，因為這些是可 變的。另外，在此所用的術(shù)語僅僅為了描述具體的實施方案，且無意 限制本發(fā)明的范圍。除非文中另外明確指出，如此處以及附加權(quán)利要
求書中所用的，單數(shù)形式"一個(a)"、"一個(an)"和"該(the )" 包括復(fù)數(shù)內(nèi)容。將術(shù)語"包含"理解為包含的而非排他的。
除非另外定義，在此所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語以及任何首字母 縮拼詞具有與本發(fā)明領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常所理解的相同含義。盡管 在本發(fā)明的實踐中可以使用與在此所述的方法和材料類似或相當(dāng)?shù)?任何方法和材料，但優(yōu)選的方法、裝置和材料如此所述。
在此提到的所有專利、專利申請和出版物在此在法律允許的程度 引用作為參考，以便描述和公開其中報導(dǎo)的、可能用在本發(fā)明中的組 合物、化合物、方法和類似信息。然而，在此不應(yīng)當(dāng)理解為承認本發(fā) 明不會由于在先發(fā)明而早于這些公開內(nèi)容。
實施例
通過其優(yōu)選實施方案的下列實施例，本發(fā)明可以得到進一步說 明，盡管可以理解，除非另外具體指出，包含這些實施例僅出于說明 目的而無意限制本發(fā)明的范圍。
實施例1
本研究涉及三組狗組1-喂飼對照食物的年幼狗，組2-喂飼 對照食物的年老狗，以及組3-喂飼以干物質(zhì)計用150ppm石危辛酸強 化的干燥食物的年老狗。狗為小獵犬，組1由10只小獵犬組成，平 均年齡5.1歲，組2由10只小獵犬組成，平均年齡11.8歲，組3由 IO只小獵犬組成，平均年齡11.3歲。全部三個組的狗在干預(yù)前均以 對照食物喂伺兩周時間段。兩周時間段后，將組3轉(zhuǎn)移到以干物質(zhì)計 用150 ppm硫辛酸強化的干燥食物飲食。在喂飼對照的兩周時間段期 間，從所有狗采集樣品并對樣品完成化學(xué)和生物學(xué)分析以確立基線數(shù) 據(jù)。三組狗然后食用其各自的飲食共六周時間段，該時間段之后，從 研究中的所有狗采集樣品，并對樣品完成化學(xué)和生物學(xué)分析。將基線 數(shù)據(jù)與六周研究結(jié)束時采集的數(shù)據(jù)比較。圖l中的結(jié)果顯示，包含具 有以干物質(zhì)計150 ppm石危辛酸々欠食的組3的狗具有增加的NK細胞活 性。
說明書中公開了本發(fā)明的一般優(yōu)選實施方案，盡管采用了特定術(shù) 語，但僅以普通的且說明性的意義使用這些術(shù)語，而不是為了限定下 面權(quán)利要求書中所述的本發(fā)明的范圍。在上述教導(dǎo)下，顯然可能對本 發(fā)明進行許多修改和變化。因此應(yīng)當(dāng)理解，可以在附加權(quán)利要求書的 范圍內(nèi)而不是按照具體描述而實施本發(fā)明。
權(quán)利要求
1.增加動物自然殺傷細胞活性的方法，其包括給動物喂飼自然殺傷細胞活性增加量的硫辛酸。
2. 權(quán)利要求l的方法，其包括以每天高于50 mg的量喂伺硫辛酸。
3. 權(quán)利要求1的方法，其包括以每天約10至約1000 mg的量喂飼硫辛酸。
4. 權(quán)利要求l的方法，其中所述動物為伴侶動物。
5. 權(quán)利要求l的方法，其中所述伴侶動物為犬動物。
6. 權(quán)利要求l的方法，其中所述硫辛酸為膠嚢形式。
7. 權(quán)利要求l的方法，其中所述硫辛酸為粉末形式。
8. 權(quán)利要求l的方法，其中所述硫辛酸為結(jié)晶形式。
9. 權(quán)利要求l的方法，其中所述硫辛酸為動物每日飲食的部分。
10. 權(quán)利要求9的方法，其中所述每日飲食包含以千物質(zhì)計高于 50 ppm的量的硫辛酸。
11. 權(quán)利要求l的方法，其中將硫辛酸在適于動物消費的組合物 中喂飼給動物。
12. 權(quán)利要求l的方法，其中所述動物為年老動物。
13. 適于給動物喂飼硫辛酸的試劑盒，其在單獨的包裝的單獨容 器中、或者如果合適在虛擬包裝的單獨容器中包含至少一種硫辛酸和 至少下列之一(1)適于動物消費的一種或多種成分；(2)如何組合 硫辛酸和試劑盒其它組分以增加免疫應(yīng)答或自然殺傷細胞活性的說 明書；以及(3)如何使用疏辛酸和本發(fā)明的其它組分的說明書。
14. 關(guān)于下列之一或多個的交流信息或說明書的工具(1)使用 硫辛酸以增加免疫應(yīng)答或自然殺傷細胞活性；(2)將硫辛酸與本發(fā)明 其它組分混合；(3)將硫辛酸單獨或與本發(fā)明其它成分組合喂飼動 物；以及(4)使用本發(fā)明的試劑盒以增加免疫應(yīng)答或自然殺傷細胞 活性，所述工具包括含有信息或說明書的文件、數(shù)字存儲介質(zhì)、光學(xué) 存儲介質(zhì)、音頻介紹、或可視顯示。
15. 權(quán)利要求14的工具，其選自顯示網(wǎng)站、小冊子、產(chǎn)品標(biāo)簽、 包裝插頁、廣告或可視顯示。
16. 適于增加動物免疫應(yīng)答或自然殺傷細胞活性的組合物，其包含生命支持量的營養(yǎng)物；以及高于50ppm的硫辛酸。
17. 權(quán)利要求16的組合物，其中所述組合物為食物組合物。
18. 權(quán)利要求17的組合物，其中所述食物組合物適于伴侶動物。
19. 權(quán)利要求17的組合物，其中所述食物組合物適于犬。
20. 權(quán)利要求17的組合物，其中所述組合物是擠壓的或罐裝的。
21. 包含硫辛酸的組合物在藥物制備中的用途，所述藥物用于通 過增加動物自然殺傷細胞活性而增加免疫應(yīng)答。
22. 包含硫辛酸的組合物在制備用于增加動物自然殺傷細胞活性 的藥物中的用途。
23. 增加動物免疫應(yīng)答的方法，所述方法包括給動物喂飼免疫應(yīng) 答增加量的石危辛酸。
全文摘要
通過以每天約10mg至約1000mg的量給動物喂飼硫辛酸而增加動物自然殺傷細胞活性的方法。
文檔編號A23L1/30GK101106984SQ200580047173
公開日2008年1月16日 申請日期2005年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月24日
發(fā)明者I·佩陶-洛賓遜, S·C·齊克爾 申請人:希爾氏寵物營養(yǎng)品公司