牛樟芝化合物在制備治療腎臟疾病的藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分離自牛樟芝的化合物的醫(yī)療用途，特別是涉及一種牛樟芝化合 物在制備治療腎臟疾病的藥物的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 牛樟芝（Antrodia camphorata)，又稱樟芝、牛樟燕或紅樟芝等，屬于非裙菌目 (Aphyllophorales)、多孔菌科（Polyporaceae)的多年生蕈菌類，為臺(tái)灣特有種真菌，僅生 長于臺(tái)灣保育類樹種-牛樟樹（Cinnamoumkanehirai Hay)的中空腐朽心材內(nèi)壁上。由于 牛樟樹分布數(shù)量極為稀少，加上人為的盜伐，使得寄生于其中方能生長的野生牛樟芝數(shù)量 更形稀少，且由于其子實(shí)體生長相當(dāng)緩慢，生長期亦僅在六月至十月之間，因此價(jià)格非常昂 貴。在臺(tái)灣民俗醫(yī)學(xué)上，牛樟芝具有解毒、減輕腹瀉癥狀、消炎、治療肝臟相關(guān)疾病及抗癌 等功用。牛樟芝如同一般食藥用的蕈菇類，具有許多復(fù)雜的成分，已知的生理活性成分中， 包括：三廠類化合物（triterpenoids)、多醣體（polysaccharides,如β-D-葡聚醣）、腺 苷（adenosine)、維生素（如維生素 B、煙堿酸）、蛋白質(zhì)（含免疫球蛋白）、超氧歧化酵素 (superoxide dismutase，S0D)、微量元素（如：|丐、磷、鍺）、核酸、固醇類以及血壓穩(wěn)定物質(zhì) (如antodia acid)等，此些生理活性成分被認(rèn)為具有抗腫瘤、增加免疫能力、抗過敏、抗病 菌、抗高血壓、降血糖及降膽固醇等多種功效。同時(shí)在近年來，已開始陸續(xù)發(fā)現(xiàn)其中的特定 成分可能具有抗發(fā)炎的功效，特別是可用于治療腎臟疾病等。
[0003] -般常見的腎臟疾病，常是透過攻擊腎絲球而影響腎臟功能。腎絲球疾病包括多 種基因及環(huán)境因素所導(dǎo)致的許多病癥，但不外乎主要分成腎絲球硬化癥及腎絲球腎炎兩大 類。腎絲球硬化癥是指腎臟中的腎絲球硬化。一般是指腎臟的微血管、腎絲球、及用以從血 液過濾尿液的腎臟功能單元損傷。尿蛋白（尿液中量最多的蛋白質(zhì)）是腎絲球硬化癥的訊 號(hào)之一。腎臟損傷會(huì)影響腎臟過濾功能，且造成蛋白由血液滲漏至尿液中。然而，腎絲球硬 化癥僅為尿蛋白許多的成因之一。而腎臟切片可能為一判斷病人是否罹患腎絲球硬化癥或 其他腎臟疾病的必要判斷依據(jù)。腎絲球硬化癥，可特別意指局部性腎絲球硬化癥（FSGS)及 結(jié)節(jié)性腎絲球硬化癥。
[0004] 局部性腎絲球硬化癥（FSGS)是以局部腎絲球硬化及足細(xì)胞足突扁平化（foot process effacemen)的損傷特征來判斷。近20年的研究顯示，患有FSGS病患其末期腎臟 疾病發(fā)生率介于13至78%之間。雖然FSGS病源及發(fā)病原因尚未清楚，但主要應(yīng)該是起因 于腎絲球上皮細(xì)胞本身損害，而導(dǎo)致腎絲球中復(fù)雜的反應(yīng)產(chǎn)生，進(jìn)而造成腎絲球硬化。
[0005] 結(jié)節(jié)性腎絲球硬化癥或毛細(xì)血管間腎小球腎炎，亦可稱之為糖尿病腎臟病變（糖 尿病腎病）或基-威二氏癥（Kimmelstiel-Wilson syndrome),是一種進(jìn)行性腎并，其是起 因于腎絲球的毛細(xì)血管病變。此病的特征為腎病變及彌漫性腎絲球硬化；并起因于長時(shí)間 罹患糖尿病，且各國的主要治療方式為洗腎。
[0006] 截至目前為止，雖然類固醇及免疫制劑為主要用于治療罹患原發(fā)性FSGS的方法， 但此些療法對于腎損傷發(fā)展的治療上效果仍然有線，且因其會(huì)產(chǎn)生各種副作用，故治療方 法僅僅是基于經(jīng)驗(yàn)法則，而較少根據(jù)病理證據(jù)。
[0007] 腎絲球腎炎則意指腎臟膜組織的發(fā)炎反應(yīng)，其中膜組織是具有過濾功能，而可從 血液中分離廢棄物及多于流體。
[0008] 最常見的腎絲球腎炎為免疫球蛋白A型腎絲球腎炎（IgAN)，造成此腎炎加速發(fā)展 的病因仍無法預(yù)測，且臨床上仍無法預(yù)防及治療，故被視為可能會(huì)造成腎病的慢性腎衰竭 的主要因素之一。因此，在IgAN病患的腎臟中，即便其他免疫上、臨床上及病理上的因素階 會(huì)造成腎衰竭，但系統(tǒng)性T細(xì)胞活化及淋巴球/巨噬細(xì)胞/嗜中性白血球浸潤等不正常增 加，被視為造成IgAN轉(zhuǎn)換成慢性腎衰竭的主要過程之一。再者，氧化壓力亦為主要造成病 患中及動(dòng)物模型中IgAN增加及發(fā)展的因素；曾有報(bào)導(dǎo)指出，在多數(shù)的人類及實(shí)驗(yàn)性腎病中 (包括IgAN)，活性氧（R0S)會(huì)直接引發(fā)疾病。
[0009] 雖然醣質(zhì)皮質(zhì)固醇（glucocorticoid steroid)已廣泛應(yīng)用在治療IgAN病患，但其 對于IgAN的維持腎臟功能且減緩尿蛋白的效果仍不清楚，且因長時(shí)間使用所導(dǎo)致的潛在 無法控制的抑制免疫反應(yīng)的副作用，仍造成用藥上的問題。
[0010]目前諸多的實(shí)驗(yàn)已得知牛樟芝萃取物具有諸多醫(yī)療功效，且其所含成分亦陸續(xù)被 分析出，但牛樟芝萃取物中是否具有其他可有效治療腎臟疾病的化合物，仍是亟待解決之 一課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 據(jù)此，本發(fā)明是主要針對兩種萃取自牛樟芝的化合物，檢測其是否具有可治療腎 臟疾病以及抗腎臟發(fā)炎的效果。
[0012] 本發(fā)明的一目的是提供一種牛樟芝化合物在制備治療腎臟疾病的藥物的用途，該 化合物以式I表示：
[0014] 其中，該腎臟疾病為腎絲球硬化癥或腎絲球腎炎。
[0015] 較佳地，其中該腎絲球硬化癥為局部性腎絲球硬化癥（FSGS)或結(jié)節(jié)性腎絲球硬 化癥。
[0016] 較佳地，其中該腎絲球腎炎為免疫球蛋白A型腎絲球腎炎（IgAN)。
[0017] 在上述化合物中，LT1對于腎炎細(xì)胞皆具有抗氧化的效果，由此可知，未來可利用 上述牛樟芝化合物于制備治療腎臟疾病的藥物，可預(yù)期地對于目前已知的腎臟疾病，包括 腎絲球硬化癥及腎絲球腎炎，特別是局部性腎絲球硬化癥（FSGS)、結(jié)節(jié)性腎絲球硬化癥、免 疫球蛋白A型腎絲球腎炎（IgAN)等皆具有抗發(fā)炎的功效。
【附圖說明】
[0018] 圖1A和圖1B圖分別表示2種牛樟芝化合物的細(xì)胞存活率分析（MTT cell viability assay)的結(jié)果。
[0019] 圖2A和圖2B分別表示2種牛樟芝化合物對于抗氧化的測定結(jié)果。
[0020] 圖3A和圖3B分別表示2種牛樟芝化合物進(jìn)行抗發(fā)炎反應(yīng)（MCP-1)的分析結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 本發(fā)明主要針對兩種萃取自牛樟芝的化合物，檢測其是否具有可治療腎臟疾病以 及抗腎臟發(fā)炎的效果。Antrocamol LTl、Antrocamol LT2為發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的新化合物，以下將 提供上述的萃取及結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)。
[0022] 牛樟芝成分的萃取
[0023] 取牛樟芝（Antrodia camphorata)菌絲體、子實(shí)體或二者的混合物（1. 0kg)以10 倍量的酒精抽取2次后，合并濃縮可得粗抽物約230g (LT-E)，粗抽物以二氯甲烷/水（1:1) 進(jìn)行分配萃取法3次，分為二氯甲烷層約102. 6g (LT-E-D)及水層約127. 4g (LT-E-W)，取二 氯甲烷層6. 0g以硅膠柱層析法經(jīng)過正己烷/二氯甲烷（1:4)、二氯甲烷、甲醇/二氯甲烷 (5:95)的溶媒分離，分為 ANCA-E-D-1、ANCA-E-D-2、ANCA-E-D-3、ANCA-E-D-4 等四層。
[0024] 依據(jù)上述結(jié)果，將ANCA-E-D-2及ANCA-E-D-3進(jìn)一步進(jìn)行純化，將ANCA-E-D-3層 經(jīng)制備型逆相柱層析法（C-18逆相層析管柱）以80% Me0H/H20在18. 75分鐘附近可得一 新化合物Antrocamol LT1約150mg，而LT-E-D-2層經(jīng)制備型逆相柱層析法（C-18逆相層析 管柱）以80% Me0H/H20在25. 10分鐘附近可得另一新化合物Antrocamol LT2約170mg。
[0025] Antrocamol LT1為無色的液體產(chǎn)物，經(jīng)分析該化合物的分子式為C24H3S05，分子量 為406,完整中文英名稱為4-羥基-2, 3-二甲氧基-6-甲基-5-(9-羥基-3, 7, 11-三甲 基-2, 6, 10-十二碳三烯）_2_ 環(huán)己烯酮、4-hydroxy-5-[9_hydroxy-3, 7, ll-trimethyldode ca_2, 6, l0-trienyl]_2, 3-dimethoxy-6-methyl-cyclohex-2_enone〇
[0026] LT1 結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)"H-NMRGOOMHz, CDC13) : 1. 12 (3H, d, J = 7. 2Hz,), 1.61(3H ,s), 1. 64 (3H, s), L 66 (3H, s), 1. 68 (3H, s), 1. 72 (1H, m), L 98 - 2. 30 (8H), 2. 51 (1H, dq, J =11. 6, 7. 2Hz), 3. 62(3H, s), 4. 02(3H, s), 4. 33(1H, d, J = 2. 8Hz), 4. 35 (1H, dt, J = 9. 2, 4. 0Hz), 5. 09 (1H, d, J = 8. 4Hz), 5. 14 (1H, t, J = 7. 2Hz), 5. 15 (1H, t, J = 7. 2Hz) ；13C- NMR (100MHz, CDC13) : 12. 17 (q)，15. 95 (q)，16. 19 (q)，18. 13 (q)，25. 72 (q)，25. 93 (t)，26. 78 (t), 39. 41 (t), 39. 98 (d), 43. 29 (d), 47. 94 (t), 58. 81 (q), 60. 48 (q), 65. 35 (d), 67