方式:無分流進(jìn)樣
[0056]柱溫程序:色譜柱初始溫度為70°C，停留2分鐘后，以15°C/min的升溫速率上升至 300 °C，保持10分鐘；
[0057]質(zhì)譜條件：
[0058] 電離方式：電子轟擊離子；
[0059] 電離能量:70eV;
[0060] 離子源溫度：250 Γ;
[0061] 離子源壓力：2.5X10-3Pa;
[0062] 四級(jí)桿溫度：150°C;
[0063] 氣相色譜-質(zhì)譜連接線溫度:280°C;
[0064] 監(jiān)測(cè)方式:選擇離子監(jiān)測(cè)模式；
[0065] 溶劑延遲時(shí)間：4min。
[0066] 優(yōu)選地，所述步驟(lb)中內(nèi)標(biāo)指示物為d27-TnBP，所述步驟(3b)中磷系阻燃劑標(biāo)準(zhǔn) 溶液中含有TEP、TnPP、T i PP、TnBP、TCEP、TCPP-1、TCPP-2、ΤΒ0ΕΡ、TDCPP、TPhP、EHDPP、TEHP和 TCP的標(biāo)準(zhǔn)品中的至少一種。
[0067] 本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供了一種血清中溴系阻燃劑和磷系阻燃劑含量 的檢測(cè)方法，通過本發(fā)明所述檢測(cè)方法，能夠很好地檢測(cè)血清中溴系阻燃劑和磷系阻燃劑， 為新型污染物的人體暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供了有效的方法手段。
【附圖說明】
[0068]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中低溴代PBDEs進(jìn)樣色譜圖；
[0069] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1中高溴代PBDEs，BTBPE和DBDPE進(jìn)樣色譜圖；
[0070] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例1中磷系阻燃劑進(jìn)樣色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0071] 為更好的說明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)，下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明 作進(jìn)一步說明。
[0072] 實(shí)施例1
[0073] 本實(shí)驗(yàn)建立了索氏抽提-固相萃取-硅膠氧化鋁柱凈化-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的方 法測(cè)定血清樣品中18種PBDEs單體，BTBPE，DBDPE和13種PFRs單體（中英文全稱及CAS編號(hào)見 表1)，為新型污染物的人體暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供了有效的方法手段。
[0074] 表1本研究中的溴系與磷系阻燃劑中英文全稱
[0075]
[0076] 1實(shí)驗(yàn)材料
[0077] 耗材：
[0078] (1)玻璃器皿:所有玻璃器皿使用前后依次經(jīng)肥皂水浸泡，清水沖洗，烘干，重鉻酸 鉀/硫酸洗液洗滌，自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，烘干后置馬弗爐450 °C焙燒4h。用作樣品 分析前再依次用丙酮、二氯甲烷、正己烷淋洗；
[0079] (2)濾紙:抽提包樣使用的濾紙經(jīng)二氯甲烷抽提72h后晾干備用。
[0080] (3)脫脂棉：層析柱中使用的脫脂棉在使用前用二氯甲烷抽提72h，期間換一次抽 提液，密封保存待用。使用前再經(jīng)丙酮、二氯甲烷及正己烷依次淋洗；
[0081 ] (4)固相萃取柱：填料為佛羅里硅土（500mg)的固相萃取柱（ENVI-Florisil， 500mg，3mL，Supleco&3);
[0082] (5)氧化鋁：100~200目。經(jīng)二氯甲烷抽提72h，期間換一次抽提液。通風(fēng)柜晾干后 250°C活化12小時(shí)，干燥器內(nèi)冷卻到室溫，用3% (W/W)蒸餾水去活化后放置干燥器中平衡過 夜，浸泡于正己烷中備用；
[0083] (6)中性硅膠：80~100目。經(jīng)二氯甲烷抽提72h，期間換一次抽提液。通風(fēng)櫥晾干 后，烘箱中180°C活化12h，冷卻至室溫加3%(W/W)蒸餾水去活化，放置干燥器中平衡后（至 少12h)使用。不用時(shí)于正己烷中浸泡保存；
[0084] (7)娃藻土 /無水硫酸鈉:分析純，使用馬弗爐450°C焙燒4h去水，保存于干燥器中。
[0085]試劑：
[0086]丙酮、正己烷、乙酸乙酯和異辛烷均為色譜純（HPLC);所有本研究使用的水都為 1111^超純水;濃硫酸為分析純(八1〇;
[0087] 標(biāo)準(zhǔn)品：
[0088] 同位素標(biāo)記的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（13C-BDE 209, dl5-TPhP，d27-TnBP)購(gòu)于Cambridge Isotope Laboratories公司，其他標(biāo)樣（BDEs 28,47,66，77,85,99，100，118，128，138，153， 154，183，181，196，197，202，203，205，206，207，208，209，4-F-BDE 67，3-F-BDE 153,ΒΤΒΡΕ， DBDPE，TEP，ΤηΡΡ，T iPP，ΤηΒΡ，TCEP，TCPP-1，TCPP-2，TBOEP，TDCPP，TPhP，EHDPP，TEHP，TCP) 均購(gòu)于 AccuStandard(USA)公司。
[_9] 2儀器
[0090] 溴系阻燃劑(PBDEs、BTBPE和DBDPE)含量分析采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent 6890GC/5975MS)，在電子捕獲負(fù)化學(xué)電離(ECNI)的選擇離子監(jiān)測(cè)模式(Sn〇下完成。載氣為 高純氮?dú)猓磻?yīng)氣為甲烷。離子源壓力為2.5 X 1 (T3Pa，離子源溫度為250°C，四級(jí)桿溫度：150 °C，界面(質(zhì)譜連接線)溫度280°C。采用無分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為UiL，進(jìn)樣口溫度290°C。
[0091] 磷系阻燃劑含量分析采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Shimadzu QP2010GC-MS)，在電 子轟擊離子源(EI)的選擇離子監(jiān)測(cè)模式(sn〇下完成。載氣為氦氣。離子源壓力為2.5ΧΠΓ 3Pa，離子源溫度為200°C，四級(jí)桿溫度：150°C，界面(質(zhì)譜連接線)溫度290°C。采用無分流進(jìn) 樣，進(jìn)樣量為lyL，進(jìn)樣口溫度300 °C。
[0092] 3實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果
[0093] 3.1索氏抽提
[0094] 將2mL血清與硅藻土混合，于丙酮/正己烷混合溶劑（1:1，V/V)中索氏抽提48h，抽 提前加入內(nèi)標(biāo)指示物，當(dāng)檢測(cè)低溴代TODEs，選用BDE118、BDE128、4-F-BDE67和3-F-BDE153 的混合物(BDE 118，BDE128,4-F-BDE 67,3-F-BDE153各10ng)作為內(nèi)標(biāo)指示物；當(dāng)檢測(cè)高溴 代PK)Es、BTBPE和DBDPE，選用4-F-BDE67和3-F-BDE153的混合物（4-F-BDE 67,3-F-BDE 153 各l〇ng)作為內(nèi)標(biāo)指示物；當(dāng)檢測(cè)磷系阻燃劑，選用d27-TnBP(10ng)作為內(nèi)標(biāo)指示物。將抽提 液濃縮并轉(zhuǎn)換溶劑為2mL正己烷。
[0095] 3.2固相萃取
[0096] 先以8mL乙酸乙酯和6mL正己烷依次活化弗羅里硅土固相萃取柱，加樣后用10mL正 己烷洗脫出第一組分，8mL乙酸乙酯洗脫出第二組分。第一組分濃縮至2mL并使用濃硫酸進(jìn) 一步凈化，洗脫液氮吹定容于50yL異辛烷，其中含有PBDEs，BTBPE和DBDPE，采用GC-MS-ECNI 源分析；
[0097] 3.3復(fù)合氧化鋁-硅膠柱凈化
[0098]復(fù)合氧化錯(cuò)-硅膠柱的規(guī)格為40cmX 1.0cm i .d，活塞為Teflon材質(zhì)。柱子使用前 用酸洗，大量自來水沖洗和蒸餾水淋洗。烘干后用丙酮、二氯甲烷和正己烷依次淋洗。在柱 子底部塞好脫脂棉，采用濕法裝柱自下而上分別加入8cm的氧化鋁，8cm的中性硅膠和2cm的 無水硫酸鈉。裝柱過程中不斷敲打柱子，防止柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。
[0099] 將3.2步驟中第二組分濃縮至2mL，上樣至復(fù)合氧化鋁-硅膠柱后用40mL乙酸乙酯 洗脫，洗脫液濃縮并氮吹定容于50yL異辛烷，其中含有PFRs，采用GC-MS-EI源分析；
[0100] 3.4GC-MS檢測(cè)條件的優(yōu)化
[0101] 首先使用各標(biāo)準(zhǔn)品單標(biāo)，在全掃描模式下進(jìn)樣，確定豐度最高的碎片離子為定性 及定量離子。然后在選擇離子監(jiān)測(cè)模式下采用以下升溫程序進(jìn)樣:初始溫度為110°c以10 °C/min升溫至310°C，在此基礎(chǔ)上優(yōu)化升溫區(qū)間及升溫速率，以獲得最好的目標(biāo)化合物峰形 及分離度。最終確定儀器參數(shù)如下：
[0102] 溴系阻燃劑（PBDEs，BTBPE，DBDPE):低溴代PBDEs(BDEs 28，47，66，77，85，99，100， 118，128，138，153，154，183，181，4-F-BDE 67，3-F-BDE 153)的檢測(cè)采用DB-XLB色譜柱（30m X 0.25_ X 0.25μηι，Agi 1 ent)分離，柱流速為1. OmL/min，溶劑延遲時(shí)間：15min。。色譜柱初 始溫度為110°C，停留1分鐘后，按8°C/min的升溫速率升到180°C，保持1分鐘，再以2°C/min 的升溫速率升到240 °C，保持5分鐘，再以2 °C/min的升溫速率升到280 °C，保持15分鐘，再以 10°C/min的升溫速率升到最終溫度310°C，保持10分鐘。相關(guān)色譜圖見圖1。
[0103] 高溴代PBDEs(BDEsl96，197,202,203,205,206,207,208,209,4-F-BDE67,3-F-BDE 153)，BTBPE和DBDPE使用DB-5HT色譜柱（15m X 0 · 25mm X 0 · 1 Ομπι，Agi 1 ent)進(jìn)行分離，柱 流速為1.50mL/min，溶劑延遲時(shí)間：5min。。色譜柱初始溫度為110 °C，停留5分鐘后，按20 °C / min的升溫速率升到200°C，保持4.5分鐘，再以10°C/min升到310°C，保持15分鐘。掃描離子 荷質(zhì)比（m/z): PBDEs(除BDE209外）和DBDPE為79和81; BDE 209為486 · 7和488 · 7; 13C-BDE209 為494.7和496.7。其中前一掃描離子