通過使用人免疫球蛋白的恒定區(qū)替代其恒定區(qū)而進(jìn)行修飾。由 于使用人恒定區(qū)替代，嵌合抗體可在保留其識別抗原的特異性的同時，相比原小鼠抗體對 人具有降低的抗原性（antigenicity)。
[0112] 術(shù)語"分離的"意指一種化合物，其可以是例如抗體或抗原結(jié)合部分，所述抗體或 抗原結(jié)合部分基本上不含其它具有不同的抗原特異性的抗體或抗原結(jié)合部分。此外，分離 的抗體或抗原結(jié)合部分可基本上不含有其它細(xì)胞物質(zhì)和/或化學(xué)品。
[0113] 術(shù)語"多肽"以及"蛋白"在本文中可以互換使用，指氨基酸殘基的聚合物。這些 術(shù)語適用于其中一個或多個氨基酸殘基是對應(yīng)的天然存在的氨基酸的人工化學(xué)模擬物的 氨基酸聚合物，也適用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。除非另 外說明，特定的多肽系列也隱含地涵蓋其保守修飾的變體。
[0114] 術(shù)語"細(xì)胞因子"是由一個細(xì)胞群釋放的蛋白的總稱，其作為細(xì)胞間介質(zhì)作用于另 一細(xì)胞。這樣的細(xì)胞因子的例子是淋巴因子、單核因子和傳統(tǒng)的多肽激素。細(xì)胞因子中包括 生長激素，如人生長激素、N-甲硫氨酰人生長激素和牛生長激素；甲狀旁腺素；甲狀腺素； 胰島素；胰島素原；松弛素；松弛素原（prorelaxin);糖蛋白激素如促濾泡激素（FSH)、促 甲狀腺激素（TSH)和促黃體激素（LH);肝臟生長因子；成纖維細(xì)胞生長因子；催乳素；胎盤 催乳素；腫瘤壞死因子 _a和_0 ;苗勒管抑制物質(zhì)（mullerian-inhibiting substance); 小鼠促性腺激素相關(guān)肽；抑制素；激活素；血管內(nèi)皮生長因子A-F(如VEGF-A);整聯(lián)蛋 白（如a 4-整聯(lián)蛋白）；血栓形成素（TP0);神經(jīng)生長因子如NGF-0 ;血小板生長因子； 轉(zhuǎn)化生長因子（TGFs)如TGF-a和TGF-0 ;胰島素樣生長因子-I和-II;紅細(xì)胞生成 素（EP0);骨誘導(dǎo)因子；干擾素如干擾素-a、-f3和-Y ;集落刺激因子（CSFs)如巨噬細(xì) 胞-CSF(M-CSF);粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞-CSF(GM-CSF);和粒細(xì)胞-CSF(G-CSF);白介素（ILs) 如 IL-I、IL-I a、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-11、IL-12、IL17-家 族成員（如IL-17C);腫瘤壞死因子如TNF-a或TNF-0 ;和包括LIF、kit配體（KL)、MIF、 D-DT在內(nèi)的其它多肽因子。如本文所述，術(shù)語細(xì)胞因子包括來自天然來源或來自重組細(xì)胞 培養(yǎng)物的蛋白，以及天然序列細(xì)胞因子的生物學(xué)上活性的等同物。
[0115] 術(shù)語"受體"為一個通用術(shù)語，表示由于與特異性配體或結(jié)合配偶體的相互作用而 具有影響生物學(xué)活性（在例如細(xì)胞中）的能力的蛋白質(zhì)。細(xì)胞膜結(jié)合受體以胞外配體結(jié)合 結(jié)構(gòu)域、一個或多個跨膜或穿膜結(jié)構(gòu)域和通常參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的胞內(nèi)效應(yīng)結(jié)構(gòu)域為特征。配 體結(jié)合到細(xì)胞膜受體造成胞外結(jié)構(gòu)域的變化，該變化跨細(xì)胞膜通訊，直接或間接地與一種 或多種胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用，改變細(xì)胞特性如酶活性、細(xì)胞形狀或基因表達(dá)譜。受體也可 不連在細(xì)胞表面上，可以是胞質(zhì)受體、核內(nèi)受體或者完全從細(xì)胞中釋放出來。一般來說，受 體可以是膜結(jié)合的、胞質(zhì)的、細(xì)胞核的；單體的（monomeric)(例如：甲狀腺刺激激素受體、 0 -腎上腺素受體）或多體的（multimeric)(例如fDGF受體、生長激素受體、IL-3受體、 GM-CSF受體、G-CSF I受體、紅細(xì)胞生成素受體和IL-6受體）。受體的更多具體實例包括， 但不限于進(jìn)一步的分化簇（例如⑶20、⑶19、CD38、⑶52、⑶33)、免疫球蛋白（例如IgE(Fc 區(qū)））、表皮生長因子受體（例如EGFR)或受體酪氨酸激酶（RTK)(例如Her2/ C-neu、Her3、 Her4)。
[0116] 術(shù)語"同種型"意指由重鏈恒定區(qū)基因提供的抗體類別（例如IgM、IgE、IgG(諸如 IgGl或IgG4))。同種型還包括這些類別中的一類的修飾版本，其中已作出修飾以改變Fc功 能，例如，以增強或降低效應(yīng)子功能或與Fc受體的結(jié)合。例如，IgGlf LALA為IgG同種型的 一個修飾版本，其具有顯著降低的效應(yīng)子功能。與未修飾的抗體相比，氨基酸的特定取代降 低了對Fc gamma RI受體的結(jié)合親和性。IgGlf LALA在美國序列號08/479, 752(SC0TGEN BIOPHARMACEUTICALS INC.)中描述，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。在本公開的某些實施 方式中，抗原結(jié)合部分為抗體，且為IgG、IgM、IgA、IGE或IgD型。在具體的實施方式中，抗 體為IgG型。在本公開的某些實施方式中，抗體為IgGl、IgG2、IgG3或IgG4亞型。在特定 的實施方式中，抗體為IgGl或IgG4亞型。在其它特定的實施方式中，抗體為IgGl或IgGlf LALA亞型。
[0117] 短語"特異性結(jié)合"至抗原是指一種結(jié)合反應(yīng)，其可在異質(zhì)群體的蛋白質(zhì)和其它生 物制劑中在抗原的存在下被測定。因此短語"識別抗原"和"特異于抗原"在本文中與"特異 性地結(jié)合抗原"可互換使用?？乖Y(jié)合部分（例如單克隆抗體）與抗原的特異性結(jié)合可通 過本領(lǐng)域公知的多種已建立的方法來測定，并包括ELISA、FACS、Western印跡、免疫印跡、 MSD、BIAcore和SET。在本公開中，當(dāng)抗原結(jié)合部分被證明能夠高于背景至少2倍、至少3 倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少20倍、 至少50倍、至少100倍、至少500倍、至少1000倍地結(jié)合至特定的抗原時，認(rèn)為該抗原結(jié)合 部分是特異于抗原的。此處，背景通過已知非特異于所選抗原的抗原結(jié)合部分而確定，或通 過比較與不相關(guān)的抗原的結(jié)合而確定。
[0118] "交叉競爭"是指在標(biāo)準(zhǔn)競爭性結(jié)合測定中，抗體或其它抗原結(jié)合部分干擾其它 抗體或抗原結(jié)合部分結(jié)合至特定抗原的能力?？墒褂脴?biāo)準(zhǔn)競爭結(jié)合測定來測定抗體或其 它抗原結(jié)合部分干擾另一抗體或抗原結(jié)合部分結(jié)合至特定抗原的能力或程度，且由此可確 定其是否為本發(fā)明下的交叉競爭。一種合適的測定法包括使用Biacore技術(shù)（例如使用 BIAcore 3000儀器（Biacore，Uppsala，Sweden)，其可采用表面等離子共振技術(shù)測定相互 作用的程度。另一種測定交叉競爭的測定法使用基于ELISA的方法。在國際專利申請?zhí)?W02003/48731中描述了基于交叉競爭的用于"表位框并"（epitope binning)抗體的高通 量方法。
[0119] 術(shù)語"表位"包括任何能夠與抗體特異性結(jié)合或與分子以其他方式相互作用的蛋 白決定子（determinant)。表位決定子通常由分子的化學(xué)活性表面基團(tuán)例如氨基酸或碳水 化合物類或糖側(cè)鏈組成，其可以具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，以及特定的電荷特征。表位可以 是"線性的"或"構(gòu)象的"。術(shù)語"線性表位"是指蛋白質(zhì)與相互作用分子（例如抗體）之間 的所有相互作用點沿蛋白質(zhì)的一級氨基酸序列（連續(xù)的）線性出現(xiàn)的表位。術(shù)語"構(gòu)象表 位"是指其中不連續(xù)的氨基酸在三維構(gòu)象中集合在一起的表位。在構(gòu)象表位中，相互作用點 跨過蛋白質(zhì)上彼此隔開的氨基酸殘基出現(xiàn)。
[0120] "結(jié)合相同的表位"意指抗體或其它抗原結(jié)合部分結(jié)合特定的抗原、并與例示 的抗體具有相同表位的能力。例示的抗體及其它抗體的表位可通過表位作圖（epitope mapping)技術(shù)測定。表位作圖技術(shù)在本領(lǐng)域是公知的。例如，構(gòu)象表位可通過測定氨基酸 的空間構(gòu)象，例如通過氫/氘交換、X射線晶體學(xué)和二維核磁共振而容易地識別。
[0121] 本文中使用的術(shù)語"親和性"是指在單一抗原位點上，抗原結(jié)合部分（例如單克隆 抗體）與抗原之間相互作用的強度。在每個抗原位點內(nèi)，抗體"臂"的可變區(qū)在許多位點通 過弱的非共價力與抗原相互作用；相互作用越多，親和性越強。
[0122] 如本文中使用的術(shù)語"KD"是指解離常數(shù)，其由Kd與Ka的比值（即Kd/Ka)所得， 并表示為摩爾濃度（M)?？赏ㄟ^本領(lǐng)域確立的方法來確定抗原結(jié)合部分（例如單克隆抗體） 的KD值。測定抗原結(jié)合部分（例如單克隆抗體）的KD的方法為SET (可溶平衡滴定）或使 用生物傳感器系統(tǒng)（例如Biacore?系統(tǒng)）的表面等離子體共振。在本公開中，抗原結(jié)合部 分通常具有的解離速率常數(shù)（KD) (Koff/Kon)為小于5X 10_2M、小于1(T2M、小于5X 10_3M、小 于 1(T3M、小于 5X 1(T4M、小于 1(T4M、小于 5X 1(T5M、小于 1(T5M、小于 5X 1(T6M、小于 1(T6M、小于 5X 1(T7M、小于 1(T7M、小于 5X 1(T8M、小于 1(T8M、小于 5X 1(T9M、小于 1(T9M、小于 5X KT、、小 于 K^M、小于 5 X 10_nM、小于 10_nM、小于 5 X 10_12M、小于 10_12M、小于 5 X 10_13M、小于 10_13M、 小于5X 1(T14M、小于1(T14M、小于5X 1(T15M或小于1(T15M或更小。
[0123] "病癥"是任何會受益于使用例如治療性抗體或其它抗原結(jié)合部分的醫(yī)學(xué)治療的 癥狀。病癥的非限制性實例包括自身免疫性疾病、炎癥、細(xì)胞增殖性疾?。籅細(xì)胞淋巴瘤、非 白血病和淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤；神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、星形膠質(zhì)細(xì)胞、下丘腦和其它腺體、巨噬細(xì) 胞、上皮、基質(zhì)和囊胚腔病癥；及炎性、免疫性或感染性疾病。術(shù)語"細(xì)胞增殖性疾病"和"增 殖性病癥"意指與一定程度的異常細(xì)胞增殖有關(guān)的病癥。在一個實施方式中，所述病癥是癌 癥。
[0124] 本文中使用的術(shù)語"自身免疫性疾病"通常指的是特征為具有自識別的成分的 疾病。自身免疫性疾病的實例包括，但不限于自身免疫性肝炎、多發(fā)硬化癥、系統(tǒng)性紅斑 狼瘡、特發(fā)性血小板減少性紫癜、重癥肌無力、I型糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀肩病、橋本 氏甲狀腺炎、格雷夫斯氏?。℅rave's disease)、強直性脊柱炎、Sjogrens病（Sjogrens Disease)、CREST綜合癥、硬皮病、IgA腎?。∟印rhopathy)、大皰性類天皰瘡、尋常型天皰瘡 (Pemphigous Vulgaris)、ANCA相關(guān)性血管炎、抗磷脂綜合癥及更多。大多數(shù)自身免疫性疾 病也是慢性炎性疾病。其被定義為與炎性細(xì)胞（白細(xì)胞）長期（>6個月）激活相關(guān)的疾病 過程。慢性炎癥導(dǎo)致患者器官或組織的損傷。許多疾病是慢性炎性病癥，但已知并不具有 自身免疫基礎(chǔ)。例如動脈粥樣硬化、充血性心力衰竭、克羅恩?。–rohn's disease)、潰瘍性 結(jié)腸炎、結(jié)節(jié)性多動脈炎、惠普耳氏病（Whipple's Disease)、原發(fā)性硬化性膽管炎和更多。
[0125] 術(shù)語"癌癥"指哺乳動物中的生理病癥，其通常的特征為不受調(diào)控的細(xì)胞生長/ 增殖。癌癥的實例包括，但不限于：癌（carcinoma)、淋巴瘤、胚細(xì)胞瘤和白血病。癌癥更 具體的實例包括，但不限于：結(jié)腸直腸癌、慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL)、包括非小細(xì)胞肺癌 (NSCLC)的肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌、結(jié)腸直腸癌、腸類癌、膀 胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌（肝細(xì)胞癌）、肝母細(xì)胞癌、食道癌、肺腺癌、間皮瘤、滑膜肉瘤、骨 肉瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、青少年鼻咽纖維血管瘤、脂肪肉瘤、甲狀腺癌、黑色素瘤、基底細(xì)胞 癌（BCC)、髓母細(xì)胞瘤和硬纖維瘤。尤其感興趣的使用本發(fā)明的方法治療的癌癥包括神經(jīng)膠 質(zhì)瘤、髓母細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、肝癌和胃癌。
[0126] 術(shù)語"治療性抗體"涉及任何意欲在人類中使用的抗體制劑。優(yōu)選地，這樣的治療 性抗體將為單克隆抗體。進(jìn)一步優(yōu)選的此種單克隆抗體將得自類人猿或者是人單克隆抗 體。優(yōu)選地，其將為人單克隆抗體。還優(yōu)選這種治療性單克隆抗體為人源化單克隆抗體。治 療性抗體廣泛用于各種病癥的治療，如腫瘤疾?。ㄈ缪簩W(xué)和實體惡性腫瘤，包括非霍奇 金淋巴瘤、乳腺癌和結(jié)腸直腸癌）、免疫性疾病、中樞神經(jīng)疾病、血管疾病或感染性疾病的治 療。在一個實施方式中，這樣的抗體是針對TNF-a、TNF-0、VEGF_A、a 4-整聯(lián)蛋白、⑶20、 IgE(Fc 區(qū)）、EGFR、GM-CSF、CD19、M CSF、CD38、MIF、DDT、IL-17C、IL-12、Her2/c-neu、CD52、 ⑶33的抗體。這樣的抗體為，例如阿達(dá)木單抗、M0R103、利妥昔單抗、曲妥珠單抗、阿侖單抗、 貝伐單抗、西妥昔單抗、吉妥珠單抗、英夫利昔單抗、蘭尼單抗、優(yōu)特克單抗、戈利木單抗、那 他珠單抗、奧法木單抗、奧馬珠單抗和帕尼單抗。
[0127] 在本申請中使用的術(shù)語"樣品"表示但不限于，來自活物或原為活物中的任意量的 物質(zhì)。此類活物包括，但不限于人、小鼠、猴、大鼠、兔和其它動物。此類物質(zhì)包括，但不限于 來自個體的唾液、尿、全血、血清或血漿。在臨床常規(guī)中最廣泛使用的樣品來源為全血、血漿 或血清。在優(yōu)選的實施方式中，樣品分離自患者。在更優(yōu)選的實施方式中，樣品分離自人。
[0128] 本文中使用的術(shù)語"患者"表示哺乳動物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的患者為人。
[0129] 本文中使用的術(shù)語"結(jié)合"意指可為共價（例如通過化學(xué)耦聯(lián)）或非共價（例如 離子相互作用、疏水相互作用、氫鍵等）的結(jié)合或連接。在優(yōu)選的實施方式中，所述的結(jié)合 或連接為非共價相互作用。在一個實例中，術(shù)語結(jié)合意指關(guān)聯(lián)抗原結(jié)合部分與其抗原的連 接。
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